Laporan Fitokima (Repaired)

8/18/2019 Laporan Fitokima (Repaired)

1/25

LABORATORIUM BIOLOGI FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI

LAPORAN FITOKIMIA

“DAUN PARE ( Momordica charantia L )”

OLEH :

KELOMPOK III

GITA PUSPITA SARINI

MUH RIZAL ARIFUDDIN SRI REZKYA. NURFADILAWATI. S NURAYU RAMDANI

HASTRILA BUNTANG NURDIAH NINGSIH

NIRMAYANI INDAH SARI NURUL HIKMAH

ASISTEN : ASRIL BURHAN S.Farm. A !

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI

"#$%

MAKASSAR


2/25

BAB I

PENDAHULUAN

I.$. LATAR BELAKANG

Pare dikenal dengan rasa pahitnya. Rasa pahit pare tidak mengurangi khasiat

yang dikandungnya sebagai obat berbagai jenis penyakit. Daun pare ( Momordica

charantia L.) dapat digunakan sebagai obat penurun panas atau antipiretik. Selain itu,

daun pare dapat digunakan untuk menyembuhkan mencret pada bayi, membersihkan

darah bagi wanita yang baru melahirkan, mengeluarkan cacing kremi, dan dapat

menyembuhkan batuk (Sudarsono, !! ).

Daun pare digunakan oleh sebagian masyarakat sebagai penurun panasdengan cara ditumbuk kemudian ditambahkan air dan disaring lalu diminum saat pagi

hari sebelum makan (Dalimartha, !!")

Daun pare mengandung #itamin $, #itamin %, #itamin &, saponin, 'la#onoid,

steroid triterpenoid, asam 'enolat, alkaloid, dan karotenoid ( ati, !!*). +la#onoid

menunjukkan lebih dari seratus macam bioakti#itas. %ioakti#itas yang ditunjukkan

antara lain e'ek antipiretik, analgetik, dan antiin'lamasi ( ijayakusuma, !!-).

+la#onoid dapat menghambat siklooksigenase sehingga kemungkinan besar

e'ek antipiretik disebabkan karena penghambatan siklooksigenase yang merupakan

langkah pertama pada jalur yang menuju eikosanoid seperti prostaglandin dan

tromboksan (Robinson, - -)

%erdasarkan penelitian sebelumnya, penarikan senyawa akti' yang terdapat

pada daun pare menggunakan metode ekstraksi maserasi (/lly, !-!). 0aserasi

merupakan proses ekstraksi dimana obat yang sudah halus di rendam dalam

menstrum sampai meresap dan melunakkan susunan sel sehingga 1at 2 1at yang

mudah larut akan melarut sehingga didapatkan ekstrak daun pare (3oward,- " )

II." TU&UAN PER'OBAAN

ujuan dari laporan ini yakni untuk mengetahui senyawa apa yang terdapat di

dalam daun pare ( Momordica charantia L.)


3/25

BAB II

TIN&AUAN PUSTAKA

II.$ URAIAN TANAMAN

$. 4lasi'ikasi

4ingdom 5 Plantae

Di#isi 5 Spermatophyta

Subdi#isi 5 $ngiospermae

4elas 5 Dicotyledonae

6rdo 5 &ucurbitales

+amilia 5 &ucurbitaceae

7enus 5 0omordica

Species 5 Momordica charantia L. ( ati, !!*)

%. 8ama DaerahSumatera5 prieu, peria, 'oria, pepare, kambeh. 9awa5 paria, pare, pare pahit,

pepareh. 8usa enggara5 paya, paria, truwuk, paita, paliak, pariak, pania, pepule.

Sulawesi5 poya, pudu, pentu, paria, belenggede, palia. 0aluku5 papariane,

pariane, papari, kakariano, taparipong, papariano, popare, dan pepare

(Dalimartha, !!").&. 8ama $sing

%uah pare di berbagai negara dikenal dengan nama5 4u gua, a'rican

cucumber, bitter cucumber, bitter gourd, bitter melon, balsam pear, maiden blush,

karela, kar#el, dan springkomkommer (Dalimartha, !!").

D. Deskripsi


4/25

Perawakan5 semak, tumbuhan annual:perennial, liana (menjalar atau

memanjat), berbau tidak enak. %atang5 berusuk ;, panjang :; m, yang muda

berambut cukup rapat. Daun5 tunggal, bertangkai, helaian< bentuk membulat,

dengan pangkal bentuk jantung, garis tengah *:= cm, tepi berbagi ;: lobus,

berbintik:bintik tembus cahaya, taju bergigi kasar hingga berlekuk menyirip,

memiliki sulur daun, tunggal. %unga5 tunggal, tangkai bunga ;:-; cm dekat

pangkalnya dengan daun pelindung bentuk jantung hingga bentuk ginjal.

4elopak5 ;, bentuk lonceng, dengan banyak rusuk atau tulang membujur, yang

berakhir pada :> sisik yang melengkung ke bawah. 0ahkota5 ;, berdekatan,

penampang bentuk roda< taju bentuk memanjang hingga bulat telur terbalik, bertulang, -,;: kali -:-,> cm. %uah5 tipe peppo (ketimun) memanjang,

berjerawat tidak beraturan, oranye, pecah sama sekali dengan > katup, ;:= cm

(liar) hingga >! cm (ditanam). %iji5 coklat kekuningan pucat memanjang

(Sudarsono, !! )./. Daerah distribusi, habitat, dan budidaya

anaman Momordica charantia L. banyak terdapat di daerah tropis, berupa

tumbuhan liar atau sengaja ditanam. Sering dijumpai pada halaman rumah,

kebun:kebun, dan pagar. umbuhan ini di 9awa dapat tumbuh pada tempat buangan, di tepi jalan, di alam membentuk penutupan karpet, ditanam sebagai

buah sayuran (Sudarsono, !! ).+. 4andungan kimia

%uah5 saponin, 'la#onoid, steroid triterpenoid, karbohidrat, momordisin,

alkaloid, #itamin $, #itamin %, #itamin &, dan karantin. Daun5 #itamin $, #itamin

%, #itamin &, saponin, 'la#onoid, steroid triterpenoid, asam 'enolat, alkaloid, dan

karotenoid. %iji5 asam lemak, asam butirat, asam palmitat, asam linoleat, dan

asam stearat ( ati, !!*).

7. 4egunaan %uahDiman'aatkan untuk peluruh dahak atau obat batuk, pembersih darah,

penambah na'su makan, penurun panas, penyegar badan, dan mengobati sakit


5/25

gula. %unga5 dapat memacu en1im pencernaan. Daun5 digunakan sebagai obat

cacing, obat luka, peluruh haid, pencahar, dan penurun panas. $kar5 menunjukkan

si'at antibiotik (Sudarsono, !! ).3. Si'at kimiawi dan e'ek 'armakologis

Si'at kimiawi pare adalah rasanya yang pahit dan si'atnya yang dingin. /'ek

'armakologis pare dapat mempengaruhi jantung, hati, dan paru. %erkhasiat

antiradang (Dalimartha, !!").

II. " METODE EKSTRAKSI

A. E !ra *

/kstraksi yaitu penarikan 1at pokok yang diinginkan dari bahan mentah obat

dengan menggunakan pelarut yang dipilih dimana 1at yang diinginkan akan larut.

Sedangkan ekstrak merupakan sediaan sari pekat tumbuh:tumbuhan yang diperoleh

dengan cara melepaskan 1at akti' dari masing:masing bahan obat, menggunakan

menstruum yang cocok, uapkan semua atau hampir semua dari pelarutnya dan sisa

endapan atau serbuk diatur untuk ditetapkan standarnya (3orward, - " ).

umbuhan segar yang telah dihaluskan atau material tumbuhan yang dikeringkan

diproses dengan suatu cairan pengekstraksi. 9enis ekstraksi mana dan bahan ekstraksimana yang digunakan, terutama tergantung dari kelarutan bahan kandungan serta dari

stabilitasnya. 9umlah dan jenis senyawa yang berpindah masuk ke dalam ekstraksi

bergantung dari jenis dan komposisi cairan pengekstraksi. ?ntuk memperoleh sediaan

obat yang cocok umumnya berlaku campuran etanol:air sebagai cairan pengekstraksi

(@oigt, - *).

$da > prinsip ekstraksi tumbuhan meliputi 'ase ekstraksi, maserasi, dan perkolasi

(@oigt, - *). 0etode ekstraksi dipilih berdasarkan beberapa 'aktor seperti si'at dari

bahan mentah obat dan daya penyesuaian dengan tiap macam metode ekstraksi dan

kepentingan dalam memperoleh ekstrak yang sempurna atau mendekati sempurna

dari obat. Si'at dari bahan mentah merupakan 'aktor utama yang harus

dipertimbangkan dalam memilih metode ekstraksi. Pada kenyataannya sering


6/25

digunakan kombinasi dari proses maserasi dan perkolasi dalam mengekstraksi bahan

mentah obat ($nsel, - " ).

0aserasi merupakan proses paling tepat dimana obat yang sudah halus

memungkinkan untuk direndam dalam menstruum sampai meresap dan melunakkan

susunan sel, sehingga 1at:1at yang mudah larut akan melarut. 0aserasi biasanya

dilakukan pada temperature -;! : !! & dalam waktu selama > hari sampai bahan:

bahan yang larut melarut ($nsel, - " ).

0aserasi digunakan untuk penyarian simplisia yang mengandung 1at akti' yang

mudah larut dalam cairan penyari, tidak mengandung 1at yang mudah mengembang

dalam cairan penyari, tidak mengandung ben1oin, stirak dan lain:lain. Penggolonganekstrak menurut si'at:si'atnya5

a. /kstrak encer (eAtractum tenue) Sediaan ini mempunyai konsistensi seperti

madu dan dapat dituang.

b. /kstrak kental (eAtractum spissum) Sediaan ini liat pada kondisi dingin dan

tidak dapat dituang, kandungan airnya sekitar >!B.

c. /kstrak kering (eAtractum siccum) Sediaan ini memiliki konsistensi kering

dan mudah digosokkan, kandungan airnya tidak lebih dari ;B.

d. /kstrak cair (eAtractum 'luidum) (@oigt, - *).

+la#onoid mudah larut dalam air. 6leh karena itu senyawa ini berada dalam

ekstrak air tumbuhan. +la#onoid diekstrak baik memakai metanol, etanol, dan aseton

(Robinson, - -). Csolasi senyawa 'la#onoid dari daun pare secara maserasi

menggunakan pelarut etanol =!B ( aluyantana, - ;).

Pelarut yang digunakan (etanol =!B) memiliki si'at kepolaran yang sama dengan

sebagian besar komponen yang terdapat pada Momordica charantia L seperti #itamin

$, #itamin %, #itamin &, saponin, 'la#onoid, steroid triterpenoid, asam 'enolat,

alkaloid, dan karotenoid /tanol =!B juga dapat melarutkan senyawa 'itokimia lebih

maksimal karena etanol =!B masih mengandung air yang cukup banyak (>!B) yang


7/25

membantu proses ekstraksi sehingga sebagian senyawa tersebut ada yang dapat

tertarik dalam etanol dan ada pula yang tertarik dalam air (0elodita, !--).

$sam amino, gula, beberapa senyawa 'itokimia seperti alkaloid, 'la#onoid, dan

glikosida 'la#onoid serta kloro'il terlarut dalam pelarut polar sehingga senyawa yang

terekstrak dengan pelarut etanol =!B ini cukup banyak dan menghasilkan rendemen

yang tinggi ($dhianata, 3. !- ).

B. P+,ar-! a/0 1*0-/a a/

%erdasarkan kepolaran pelarut, pelarut dibagi ke dalam tiga kategori yaitu5

a. Pelarut Protik Polar Protik menunjukkan atom hidrogen yang menyerang atom elektronegati'

yang dalam hal ini adalah oksigen. Dengan kata lain pelarut protik polar

adalah senyawa yang memiliki rumus umum R63. &ontoh dari pelarut protik

polar ini adalah air 3 6, metanol (&3 >63), dan asam asetat (&3 >&663).

b. Pelarut $protik Polar

$protik menunjukkan molekul yang tidak mengandung ikatan 6:3.

Pelarut dalam kategori ini, semuanya memiliki ikatan yang memiliki ikatan

dipol besar. %iasanya ikatannya merupakan ikatan ganda antara karbon

dengan oksigen atau nitorgen. &ontoh dari pelarut yang termasuk kategori ini

adalah aseton (&3 >) &E6F dan etil asetat (&3 >&6 &3 &3 >).

c. Pelarut 8on:polar

Pelarut nonpolar merupakan senyawa yang memilki konstanta

dielektrik yang rendah dan tidak larut dalam air. &ontoh pelarut dari kategori

ini adalah ben1ena (& G3 G), karbon tetraklorida (&&l *) dan dietil eter

(&3 >&3 6&3 &3 >) ( 0elodita. R, !--).

abel - si'at:si'at pelarut umum dari nonpolar ke polar5

Sol#ent Rumus 4imia itik 4onstanta 0assa


8/25

didih Dielektrik 9enis

Pelarut8on:Polar

3eksana &3 >:&3 :&3 :&3

:&3 :&3 >G H& .! !.G;; g ml

%en1ena &G3 G "!H& .> !."= g ml

oluena & G3 ; :&3 > ---H& .* !."G= g ml

Dietil eter &3 >&3 :6:&3 :

&3 >>;H& *.> !.=-> g ml

4loro'orm &3&l > G-H& *." -.* " g ml

/til $setat&3 >:&(E6):6:&3 :

&3 >==H& G.! !." * g ml

Pelarut Polar $priotic

-,*:Dioksana:&3 :&3 :6:&3 :

&3 :6:I-!-H& .> -.!>> g ml

etrahidro'uran

( 3+)

:&3 :&3 :6:&3 :

&3 :I

GGH& =.; !.""G g ml

Diklorometana

(D&0)&3 &l *!H& .- -.> G g ml

$setona &3 >:&(E6):&3 > ;GH& - !.="G g ml

$setonitril &3 >:&J8 " H& >= !.="G g ml

Dimetil'ormamid

a3:&(E6)8(&3 >) -;>H& >" !. ** g ml

Dimetilsul'oksida &3 >:S(E6):&3 > -" H& *= -.! g ml

Pelarut Polar Protic

$sam $setat &3 >:&(E6)63 --"H& G. -.!* g ml

n- butanol &3 >:&3 :&3 :&3 : --"H& -" !."-! g ml


9/25

63

Csopropanolol &3 >:&3(:63):&3 > " H& -" !.="; g ml

n- propanol &3 >:&3 :&3 :63 =H& ! !."!> g ml

/tanol &3 >:&3 :63 = H& >! !.=" g ml

0etanol &3 >:63 G;H& >> !.= - g ml

$sam +ormat 3:&(E6)63 -!!H& ;" -. - g ml

$ir 3 6 -!!H& "! -.!!! g ml

'. Fra */a *

+raksinasi adalah suatu proses pemisahan senyawa:senyawa berdasarkan tingkat

kepolaran. 9umlah dan senyawa yang dapat dipisahkan menjadi 'raksi berbeda:beda

tergantung pada jenis tumbuhan. Pada prakteknya dalam melakukan 'raksinasi

digunakan dua metode yaitu dengan menggunakan corong pisah dan kromatogra'i

kolom.

&orong pemisah atau corong pisah adalah peralatan laboratorium yang digunakan

dalam ekstraksi cair:cair untuk memisahkan komponen:komponen dalam suatucampuran antara dua 'ase pelarut dengan densitas yang berbeda yang tak tercampur.

?mumnya salah satu 'ase berupa larutan air dan yang lainnya berupa pelarut

organik lipo'ilik seperti eter, 0 %/, diklorometana, kloro'orm, ataupun etil asetat.

4ebanyakan pelarut organik berada di atas 'ase cair kecuali pelarut yang memiliki

atom dari unsur halogen.

&orong pemisah berbentuk kerucut yang ditutupi setengah bola. Ca mempunyai

penyumbat di atasnya dan kran di bawahnya. &orong pemisah yang digunakan dalam

laboratorium terbuat darikaca borosilikat dan kerannya terbuat dari kaca atupun

te'lon. ?kuran corong pemisah ber'ariasi muali dari ;! ml sampai > L. Dalam skala

industri, corong pemisah bisa berukuran sangat besar dan di pasang sentri'uge (.

Ma2am3ma2am r4 + 5ra */a * :


10/25

-) Proses +raksinasi 4ering ( Winterization )

+raksinasi kering adalah suatu proses 'raksinasi yang didasarkan pada

berat molekul dan komposisi dari suatu material. Proses ini lebih murah

dibandingkan dengan proses yang lain, namun hasil kemurnian 'raksinasinya

rendah.

) Proses +raksinasi %asah ( Wet Fractination )

+raksinasi basah adalah suatu proses 'raksinasi dengan menggunakan 1at

pembasah ( Wetting Agent ) atau disebut juga proses Hydrophilization atau

detergent proses. 3asil 'raksi dari proses ini sama dengan proses 'raksinasi

kering.>) Proses +raksinasi dengan menggunakan Sol#ent (pelarut) Solvent Fractionation

Cni adalah suatu proses 'raksinasi dengan menggunakan pelarut. Dimana

pelarut yang digunakan adalah aseton. Proses 'raksinasi ini lebih mahal

dibandingkan dengan proses 'raksinasi lainnya karena menggunakan bahan

pelarut.

*) Proses +raksinasi dengan Pengembunan ( Fractional Condentation )

Proses 'raksinasi ini merupakan suatu proses 'raksinasi yang didasarkan

pada titik didih dari suatu 1at bahan sehingga dihasilkan suatu produk dengan

kemurnian yang tinggi. +raksinasi pengembunan ini membutuhkan biaya yang

cukup tinggi namun proses produksi lebih cepat dan kemurniannya lebih tinggi

(0elodita. R, !--)

D. KROMATOGRAFI

4romatogra'i adalah metode 'isika untuk pemisahan dalam mana komponenkomponen yang akan dipisahkan didistribusikan antara dua 'ase, salah satunya

merupakan lapisan stasioner dengan permukaan yang luas, dan 'ase yang lain

berupa 1at alir ('luid) yang mengalir lambat (perkolasi) menembus atau sepanjang

lapisan stasioner itu. Dalam semua teknik kromatogra'i, 1at terlarut yang akan


11/25

dipisahkan bermigrasi sepanjang suatu kolom (atau seperti dalam kromatogra'i

kertas atau lapisan tipis, padanan 'isika dari suatu kolom) (Day dan ?nderwood,

- ).

Pada dasarnya kromatogra'i lapis tipis sama dengan kromatogra'i kertas,

terutama pada cara melakukannya, perbedaan nyata terlihat pada media

pemisahnya, yakni digunakannya lapisan tipis adsorben halus yang tersangga

pada papan kaca, aluminium atau plastik sebagai pengganti kertas. Lapisan tipis

adsorben ini pada proses pemisahan berlaku sebagai 'asa diam (Soebagio, !!;).

4romatogra'i lapis tipis (4L ) merupakan metode pemisahan 'itokimia

yang didasarkan atas penjerapan, partisi (pembagian) atau gabungannya (3armita,!!G). Lapisan tipis yang memisahkan terdiri atas bahan berbutir:butir ('ase

diam), ditempatkan pada penyangga berupa pelat gelas, logam, atau lapisan yang

cocok. &ampuran yang akan dipisah, berupa larutan, ditotolkan berupa bercak

atau pita (awal), kemudian pelat dimasukkan di dalam bejana tertutup rapat yang

berisi larutan pengembang yang cocok ('ase gerak). Pemisahan terjadi selama

perambatan kapiler (pengembang) dan selanjutnya senyawa yang tidak berwarna

harus ditampakkan.

Deteksi noda 4L terkadang lebih mudah dibandingkan kromatogra'i kertas

karena dapat digunakan teknik:teknik umum yang lebih banyak. 8oda yang tidak

berwarna atau tidak berpendar jika dikenai sinar ultra #iolet dapat ditampakkan

dengan cara mendedahkan papan pengembang pada uap iod. Pada tahap

identi'ikasi atau penampakan noda, jika noda sudah berwarna dapat langsung

diperiksa dan ditentukan harga R':nya. %esaran R' ini menyatakan derajat retensi

suatu komponen dalam 'asa diam. R' juga disebut 'aktor retardasi atau 'aktor

retensi. 3arga R' dihitung sebagai jarak yang ditempuh oleh komponen dibagi

dengan jarak yang ditempuh eluen ('asa gerak) (Soebagio, !!;).

abel . ?rutan kepolaran eluen, elusi senyawa dan kekuatan adsorben

dalam kromatogra'i


12/25

?rutan Polaritas/luen ?rutan /lusi Senyawa ?rutan $dsorben

n:heksanaPetroleum eter

4arbon tetraklorida

%en1ene

4loro'orm

Dietil eter

/til asetat

$seton

0etanol

$ir

3idrokarbon tak jenuh$lkena

3idrokarbon $romatik

/ter

$ldehida, keton, ester

$lkohol

$sam karboksilat

Selulosa7ula

Silica gel

+lorisil (0agnesium silikat)

$luminium oksida (alumina)

Sumber 5 9ohnson et al , - - dan 4hopkar, - !

BAB III

METODE KER&A

III.$ ALAT$lat yang digunakan dalam proses ekstraksi adalah wadah maserasi, neraca

analitik,batang pengaduk.

III." BAHAN

%ahan yang digunakan dalam proses ekstraksi adalah cairan penyari, Daun pare

( Momordica charantia L.)

III.6 METODE KER&A

CCC.>.- Pengambilan dan Pengolahan Sampel

a Pengambilan sampel

Daun Pare ( Momordica charantia L.) yang diambil pada jam K G pagi

di pasar tradisional Daya kota 0akassar, Sulawesi Selatan, kemudian


13/25

dicuci bersih lalu dipotong:potong dengan derajat halus * -" atau !,- 2

!,G cm kemudian dilakukan pengeringan langsung yakni di bawah paparan

sinar matahari pada jam 2 -! pagi atau jam > 2 * sore hari

b Pengolahan sampelDaun pare ( Momordica charantia L.) yang sudah dipotong 2 potong

dan dikeringkan dibawah sinar matahari kemudian di maserasi

menggunakan etanol =!B

CCC.>. Pembuatan /kstrak Daun pare ( Momordica charantia L.)

Serbuk daun pare sebanyak -!! g dimasukkan ke dalam wadah maserasi,

lalu ditambahkan etanol =! B sebanyak K !! untuk melembabkannya lalu

ditambah lagi - liter untuk merendamnya. Rendaman disimpan di tempat yang

tidak terkena sinar matahari langsung dan dibiarkan selama > hari sambil

sekali:kali diaduk, setelah > hari disaring kemudian ampasnya dimaserasi

kembali dengan pelarut alkohol =! B yang baru sebanyak "!! ml. 3al ini

dilakukan sebanyak > kali dengan jumlah pelarut yang sama.

/kstrak etanol yang diperoleh kemudian dikumpulkan lalu dipekatkan

dengan rota#apor hingga diperoleh ekstrak cair. /kstrak cair kemudian

diuapkan hingga kental diatas penangas air.

CCC.>.> Skrining +itokimia

a) Cdenti'ikasi $lkaloidSebanyak gram ekstrak daun pare dimasukkan dalam tabung reaksi

dan diencerkan dengan etanol =!B kemudian ditambahkan ; tetes 3&l

8 dan dipanaskan. Setelah itu ditambahkan 8a&l dan disaring lalu

ditambahkan ; tetes 3&l 8. dipipet - ml dimasukkan dalam tabung

reaksi, dimana masing:masing tabung reaksi ditambahkan pereaksi

Dragendor', pereaksi 0ayer dan pereaksi agner. ?ntuk pereaksi

Dragendor' endapan merah jingga menunjukkan positi' senyawa alkaloid,


14/25

Pada pereaksi 0ayer endapan putih menunjukkan positi' senyawa alkaloid

dan pada pereaksi agner endapan coklat menunjukkan hasil yang positi'. b) Cdenti'ikasi +la#onoid

Sebanyak gram ekstrak daun pare dimasukkan dalam tabung reaksi

dan diencerkan dengan etanol =!B kemudian ditambahkan pereaksi

Wilstater menambahkan serbuk 0agnesium sebanyak !,; mg lalu

ditambahkan 3&l pekat > tetes. /ndapan merah menunjukkan senyawa

'la#on, endapan merah tua menunjukkan senyawa 'la#onol 'la#onon dan

endapan hijau menunjukkan senyawa glikosida aglikon.c) Cdenti'ikasi Saponin

Sebanyak gram ekstrak daun pare dimasukkan dalam tabung reaksidan diencerkan dengan etanol =!B, kemudian ditambahkan -! ml air

hangat panas lalu dikocok selam >! menit. Dilihat busanya dan diukur

berapa cm busa yang terbentuk. Dibiarkan selama -! menit dan jika

busanya tidak hilang ditambahkan 3&l. $pabila masih terdapat busa

yang konstan maka menunjukkan hasil yang positi'.d) Cdenti'ikasi erpenoid:Steroid

Sebanyak gram ekstrak daun pare dimasukkan dalam tabung reaksi

dan diencerkan dengan etanol =!B, kemudian ditambahkan eter

sebanyak ; tetes hingga terbentuk lapisan antara larutan air dan etanol.

Lapisan bagian atas (larut etanol) dipisahkan dan diuapkan dalam plat

tetes lalu ditambahkan 3 S6 *. /ndapan warna hijau menunjukkan hasil

yang positi'.

CCC.>.* +raksinasi

/kstrak kering tersebut di'raksinasi menggunakan corong pisah. Sebelum

dimasukkan ke corong pisah ditambahkan etil asetat. Dibiarkan beberapa menit

hingga terpisah. 4emudian setelah terpisah dimasukkan ke #ial yang berbeda antara

ekstrak yang larut dalam etil asetat dan yang tidak larut. 4emudian yang tidak larut

ditambahkan etanol. Dibiarkan beberapa menit hingga terpisah kembali dan

dimasukkan kedalam #ial yang berbeda antara ekstrak yang larut dalam etanol dan

yang tidak larut dalam.


15/25

CCC.>.; 4romatogra'i Lapis ipis

3asil +raksinasi ekstrak daun pare yang diperoleh dianalisis dengan

menggunakan 4L dengan larutan pengembang (eluen) yaitu etil asetat < n:heksan

=5> yang telah di tentukan sebelumnya dari hasil analisis 4L dengan berbagai #ariasi

eluen untuk menentukan sistem eluen yang akan digunakan pada 4L . Setelah uji

hasil 4L dan sistem eluen diketahuim dilakukan pemisahan komponen:komponen di

dalam ekstrak dengan kromatogra'i lapis tipis. Sebagai 'ase diam digunakan silica gel

7 G!+ ;* dan eluen etil asetat < n:heksan =5> kemudian diamati noda yang 8ampak pada

sinar ?@ ;* dan >GG.

BAB I7

HASIL DAN PEMBAHASAN

I7.$. HASIL PENGAMATAN

Daun pare ( Momordica charantia ) yang diambil dari pasar tradisional Daya

kota 0akassar, Sulawesi Selatan pada jam K G pagi. Sampel daun pare yang telah

dibersihkan, kemudian dikeringan dengan cara diangin:anginkan, selanjutnya

dipotong kecil:kecil hingga menjadi serbuk kasar. %erat serbuk kasar daun pare yang

diperoleh adalah - ;,! gram.

Serbuk daun pare sebanyak - ;.! gram dimaserasi dengan menggunakan

etanol =! B kemudian dipekatkan dengan cara di rota#apor hingga diperoleh ekstrak

kental etanol =! B berwarna hijau tua sebanyak -!, gram. /kstrak kental etanol =!B

yang diperoleh kemudian diuji pendahuluan dengan menggunakan pereaksi

dragendro'', mayer, wagner yang positi' adanya senyawa alkaloid.Pada uji senyawa 'la#onoid positi' adanya senyawa 'la#onon dengan

terbentuknya endapan 3ijau. ?ji saponin ditandai dengan adanya busa ketika dikocok

selama >! menit dimana panjang busa yang terbentuk adalah -,- cm. ?ji terpenoid


16/25

tidak adanya senyawa terenoid: steroid ditandai dengan tidak terbentuknya larutan

berwarna biru atau ungu.

abel . 3asil Skrining +itokimia /kstrak /tanol Daun Pare ( Momordica

charantia .)

N4

.

U8* F*!4 *m*a P+r+a * P+r-9a a/

War/a

K+!+ra/0a/

$ $lkaloid Dragendorf

Mayer

Wagner

erbentuk endapan

merah bataerbentuk endapan

coklaterbentuk endapan

putih

Positi'

Positi'

Positi'

" +la#onoid Wilstater 3ijau menjadi hijau

kekuningan

Positi'

6 Saponin $ uades panas,

dikocok, 3&l 8

erbentuk busaPanjang busa 5 -,- cm

Positi'

; Steroid erpenoid /ter, lapisan

etanol diuapkan,

M 3 S6 *

erbentuk larutan

berwarna biru ungu

Positi'

/kstrak pekat etanol dilarutkan dalam pelarut etanol dan di'raksionasi

berturut menggunakan pelarut kloro'orm, etil asetat dan n:butanol. 3asil 'raksinanya

dapat dilihat pada tabel >

abel >. 3asil +raksinasi /kstrak &air:cair berdasarkan kepolaran

N4 P+,ar-! War/a$ 4loro'orm 3ijau kehitaman" /til $setat 3ijau 4ehitaman jernih6 n:%utanol 3ijau ua

3asil 'raksinasi kloro'orm, etil asetat dan n:butanol yang diperoleh diuji

kromatogra'i lapis tipis (4L ) dengan menggunakan eluen etil asetat:n:heksan dalam

#olume larutan -! ml dengan perbandingan =5> dan hasil kromatogra'inya dapat

dilihat pada gambar -


17/25

(Sinar ?@ >GG) (Sinar ?@ ;*)

8ilai R' dapat dihitung dengan menggunakan rumus

R' EJarak yangditempuh substansi

jarak yang ditempuhnoda

8ilai R' yang diperoleh pada 4L ekstrak daun pare dapat dilihat pada tabel

abel > 8ilai R' ekstrak daun pare

N

O

PELARUT NODA NILAI R5 KET

$ /kstrak Daun Pare

C 1.05.3

= 0.18

CC 1.25.3

= 0.22

CCC 1.65.3

= 0.30

C@ 2.15.3

= 0.39

@ 3.75.3

= 0.69

" /kstrak 4loro'orm

Daun Pare

C 1.65.3

= 0.30


18/25

CC 2.05.3

= 0.37

CCC 5.15.3

= 0.96

6/kstrak /tanol Daun

Pare

C 0.85.3

= 0.15

CC 1.25.3 E !.

CCC 1.75.3

= 0.32

C@ 2.25.3

= 0.41

@ 4.05.3

= 0.75

;/kstrak /til asetat

Daun Pare

C 2.05.3

= 0.37

CC 2.25.3

= 0.41

I7. ". PEMBAHASAN

Daun Pare yang sudah dikeringkan dan dihaluskan menjadi serbuk kasar

sebanyak -!! gram dimaserasi menggunakan etanol =! B selama > hari sambil

sesekali diaduk, yang bertujuan untuk mengekstrak kandungan senyawa kimia yang

terdapat dalam daun pare hingga hasil perendaman terakhir tidak berarti lagi bagi

kandungan kimianya.

Pada proses maserasi digunakan pelarut etanol =! B karena merupakan pelarut yang memiliki si'at kepolaran yang sama dengan sebagian besar komponen

yang terdapat pada daun pare ( Momordica charantia L). /tanol juga memiliki titik

didih = N& dimana titik yang tinggi untuk menghilangkan pelarut dapat juga merusak


19/25

senyawa yang terekstraksi, terlebih terhadap senyawa yang memiliki titik didih yang

rendah.

/#aporasi digunakan untuk memisahkan pelarut dengan ekstrak karena

dengan e#aporasi, pelarut dipisahkan dari ekstrak pada suhu yang jauh lebih rendah di

bawa titik didihnya sehingga senyawa yang mungkin terdapat dalam ekstrak dengan

titik didih yang rendah tidak akan mengalam kerusakan hingga diperoleh ekstrak

kental yang berwarna hijau kehitaman sebanyak -!, gram

/kstrak kental etanol kemudian diuji pendahuluan dengan menggunakan

pereaksi spesi'ik pada uji alkaloid, 'la#onoid, saponin dan terpenoid. 3al ini

dimaksukdkan untuk mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yangterdapat dalam ekstrak etanol tersebut.

Pada tabel tersebut menunjukkan hasil positi' terhadap semua pereaksi alkaloid.

?ji Wagner menyebabkan reaksi pembentukan senyawa kompleks yang

mengendap. 3asil positi' alkaloid pada uji Wagner ditandai dengan terbentuknya

endapan coklat muda sampai kuning. Diperkirakan endapan tersebut adalah kalium:

alkaloid. Pada uji Wagner , ion logam 4 M akan membentuk ikatan ko#alen koordinat

dengan nitrogen pada alkaloid membentuk kompleks kalium:alkaloid yang

mengendap. Pada uji alkaloid dengan pereaksi Mayer , diperkirakan nitrogen pada

alkaloid akan bereaksi dengan ion logam 4 M dari kalium tetraiodomerkurat (CC)

membentuk kompleks kalium:alkaloid yang mengendap (0arliana et al , !!;).

?ji 'la#onoid menunjukkan hasil positi' dengan adanya perubahan warna

kuning. +la#onoid termasuk dalam golongan senyawa 'enol yang memiliki banyak

gugus 263 dengan adanya perbedaan keelektronegati'an yang tinggi, sehingga

si'atnya polar. 7olongan senyawa ini mudah terekstrak dalam pelarut etanol yang

memiliki si'at polar karena adanya gugus hidroksil, sehingga dapat terbentuk ikatanhidrogen (Sriwahyuni, !-!). ?ji 'la#onoid menggunakan pereaksi Wilstater

dilakukan dengan menambah serbuk 0agnesium dan 3&l pekat pada sampel ekstrak

etanol daun kemangi. Penambahan 3&l pekat digunakan untuk menghidrolisis

'la#onoid menjadi aglikonnya, yaitu dengan menghidrolisis 6:glikosil. 7likosil akan


20/25

tergantikan oleh 3 M dari asam karena si'atnya yang elektro'ilik. Reduksi dengan 0g

dan 3&l pekat dapat menghasilkan senyawa kompleks yang berwarna merah atau

jingga pada 'la#onol, 'la#anon, 'la#anonol dan Aanton (Robinson, - ;).

?ji menunjukka hasil positi' yakni dengan adanya busa yang terbentuk. Panjang

busa yang terbentuk -.- cm

/kstrak etanol yang diperoleh kemudian di 'raksinasi ekstrak cair 2 cair

dengan menggunakan pelarut berturut 2turut yakni kloro'orm, etil asetat dan n:

butanol. Dimana ekstrak terlebih dahulu di 'raksinasi dengan menggunakan

kloro'orm sehingga senyawa yang memiliki tingkat kepolaran yang hampir mirip

akan ikut tertarik pada pelarut kloro'om sama halnya dengan penambahan etil assetdan n:butanol.

ujuan dari 'raksinasi cair 2 cair bertingkat ini adalah untuk memisahkan

kandungan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada Momordica charantia L

berdasarkan tingkat kepolarannya. +raksinasi dilakukan dari pelarut dengan tingkat

kepolaran rendah atau nonpolar bertujuan agar proses pengikatan senyawa bertahap

dan agar seluruh senyawa tidak ditarik oleh pelarut polar yang bersi'at menarik

seluruh senyawa (/dawati !- ). 4emampuan mengikat senyawa oleh tingkat

kepolaran tersebut menyebabkan 'raksinasi dengan pelarut polar dilakukan paling

akhir.

3asil 'raksinasi yang diperoleh kemudian diuji kromatogra'i lapis tipis (4L )

dengan menggunakan eluen etil asetat 5 n:heksan dengan perbandingan =5>. 3asil

4L dengan menggunaka eluen etil asetat 5 n:heksan (=5>) menunjukkan pemisahan

noda yang jelas dan komponen terpisah yang baik setelah disemprot dnegan

menggunakan asam sul'at -!B yang bertujuan untuk mendeteksi noda 4L .

4emampuan asam sul'at untuk mengoksidasi gugus kromo'or dari 1at akti' simplisia

sehingga noda menjadi tampak oleh mata. (0uharram, !-!)

Pada 4L terdiri atas 'ase diam dan 'ase gerak. Dimana 'ase diam yang

digunakan adalah silica gel karena silika mempunyai kekuatan pemisahan yang

sangat baik (8yiredy !! ). +ase gerak yang digunakan adalah eluen. +ase gerak


21/25

merupakan medium angkut yang terdiri atas satu atau beberapa pelarut. +ase gerak

bergerak dalam 'ase diam karena adanya gaya kapiler.

0enurut Stahl (- ";) eluen atau 'ase gerak yang digunakan dalam 4L

dikelompokkan ke dalam kelompok, yaitu untuk pemisahan senyawa hidro'il dan

lipo'il. /luen untuk pemisahan senyawa hidro'il meliputi air, metanol, asam asetat,

etanol, isopropanol, aseton, n:propanol, tert:butanol, 'enol, dan n:butanol sedangkan

untuk pemisahan senyawa lipo'il meliputi etil asetat, eter, kloro'orm, ben1ena,

toluena, sikloheksana, dan petroleum eter.

8oda yang diperoleh kemudian dihitung nilai R'nya, dimana noda ke:C@ pada

'raksinasi etanol daun pare dan noda ke CC pada 'raksinasi etil asetat daun paredidapatkan nilai R' yakni !.*-. %erdasarkan dari nilai R' tersebut diduga

mengandung senyawa terpenoid dimana 8ilai terpenoid adalah !,* (+atma

4umalasari, !-*). Dan pada noda ke:CCC pada 'raksi kloro'orm daun pare didapatkan

nilai R' !. G yang berdasarkan penelitian sebelumnya nilai R' untuk senyawa

'la#onoid adalh !. ; (South dkk, !->)

8ilai R' dalam kisaran - senyawa alkaloid yang paling umum yaitu !.!=:

!.G (3arbone.- "=) berdasarkan hal itu dan dilihat dari nilai R' yang didapat pada

setiap noda 4L ekstrak daun pare menunjukkan bahwa kandungan yang paling

banyak terdapat dalam daun pare adalah alkaloid.

8oda pada 4L dengan lempeng 7 G!+ ;* dapat dilihat dengan menggunakan

sinar ?@ ;* dan >GG. Penampakan noda pada ?@ >GG dan ?@ ;* disebabkan

karena sinar ?@ berinteraksi dengan gugus kromo'or yang terikat oleh auksokrom

yang terdapat pada noda tersebut. +luoresensi warna yang tampak pada lempeng

merupakan emisi cahaya yang dipancarkan oleh komponen tersebut ketika elektron

yang tereksitasi dari tingkat energi tinggi ke tingkat energi dasar. Sedangkan

penampakan noda setelah disemprot dengan reagen 3 S6 * -!B, karena kemampuan

3 S6 * sebagai reduktor yang mampu merusak gugus kromo'or yang terdapat dalam

noda sehingga panjang gelombangnya bergeser ke arah lebih panjang, hal inilah yang

menyebabkan sehingga noda menjadi tampak oleh mata (Still et al , - =")


22/25

BAB 7

PENUTUP

7.$ KESIMPULAN

Skrining 'itokimia yang dilakukan pada ekstrak etanol daun pare ( Momordica

charantia ) ditemukan memiliki kandungan senyawa 'la#onoid, saponin dan

terpenoid. Pada uji 4L nilai R' pada noda ekstrak kasar tidak berbeda jauh dengan

nilai R' pada noda 'raksinasi menggunaka etanol yakni !.=- dan !.==. Cni

menunjukkan bahwa tingkat kepolaran dari ekstrak daun pare tidak berbeda jauh

dengan tingkat kepolaran dari etanol.

7." SARAN

Sebaiknya dilanjutkan dengan penggunaan 4romtogra'i 4olom danspektro'otometri agar lebih memudahkan untuk mengidenti'ikasi kandungan yang

terdapat pada daun pare ( M.charantia )


23/25

DAFTAR PUSTAKA

$dhianata, 3. !- . U8* A !* &*,*1 % . 9akarta 5 Pustaka%unda, pp 5 - G:->;.

3oward &. - " . P+/0a/!ar B+/!- S+1*aa/ Farma * . 9akarta 5 Penerbit ?C Press, pp 5 G!;, G-G, G-=.

9ohnson, /.L dan Ste#enson R. - -. Dasar romatografi Cair . %andung5 Cnstitut eknik %andung.

4umalasari +atmawati, !-*. A !* S+m* 4,ar> 1a/N4/ 4,ar E !ra E!a/4, Da-/ B-/* ( Antidesma Bunius (L.) S r+/0)!+r a1a Escherichia Coli 1a/ Pseudomonas Aeruginosa S+/ *!*5 S+r!aB*4a-!40ra5*/ a. ?ni#ersitas 0uhammadiyah. Surakarta


24/25

0arliana, SD. Suryanti, @. dan Suyono. !!;. S r*/*/0 F*!4 *m*a 1a/ A/a,* *Kr4ma!40ra5* La * T* * K4m 4/+/ K*m*a B-a La9- S*am (S+2 *-m

+1-,+ &a2?. S=ar!@.) 1a,am E !ra E!a/4, . +0CP$ ?ni#ersitas Sebelas0aret (?8S) Surakarta. %io'armasi

0elodita, R. !--. I1+/!*5* a * P+/1a -,-a/ S+/ a=a F*!4 *m*a 1a/ U8*A !*


25/25

SKEMA KER&A

Daun Pare( Momordica charantia )

?ji Pendahuluan

• Sortasi %asah• Sortasi 4ering

Simplisia

• 0aserasi dengan etanol =!B• /#aporasi

/kstrak

+la#onid$lkaloid

/tanol 4loro'orm

/kstrak &air : cair

+raksinasi

4LSaponin erpenoi

Laporan Fitokima (Repaired)

Documents