Ijpst Reaksi Uji Karbohidrat

IJPST Reaksi Uji Karbohidrat Mei 2015

REAKSI UJI KARBOHIDRAT

Hotma G. Winokan, Asri Budi Yulianti, Rizka K. Guntina, Trifena Lokajaya,

Khanifah Hidayati

Fakultas Farmasi Universitas Padjajaran

2015

[email protected]

Abstrak

Karbohidrat yaitu senyawa organik yang terdiri dari unsur karbon, hydrogen, dan

oksigen.Karbohidrat terdiri atas monosakarida, disakarida, oligosakarida, dan

polisakarida. Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya karbohidrat

dalam suatu bahan serta mengetahui reaksi yang terjadi pada identifikasi

karbohidrat.Tahapan percobaan ini meliputi identifikasi dengan pereaksi Molisch,

identifikasi dengan pereaksi Benedict, identifikasi dengan pereaksi Barfoed, dan

identifikasi dengan pereaksi Seliwanoff. Hasil uji identifikasi dengan pereaksi

Molisch menunjukan hasil positif terhadap sukrosa dengan terbentuknya cincin

berwarna ungu. Hasil uji dengan pereaksi Benedict menunjukan hasil positif

terhadap sukrosa dengan adanya endapan berwarna merah di dasar tabung. Hasil uji

dengan pereaksi Barfoed menunjukan hasil positif terhadap sukrosa dengan adanya

endapan berwarna merah bata di dasar tabung.Hasil uji dengan pereaksi Seliwanoff

menunjukan hasil negatif terhadap sukrosa.

Kata kunci : Karbohidrat, identifikasi, Molisch, Benedict, Barfoed, Seliwanoff.

Abstract

Carbohydrates are organic compounds composed of carbon, hydrogen , and oxygen .

Carbohydrates consist of monosaccharides , disaccharides , oligosaccharides , and

polysaccharides . This experiment aims to identify the presence of carbohydrates in a

material and know the reaction that occurs in the identification of carbohydrates .

This experimental stages include identification with reagent molisch , identification

with Benedict's reagent , the reagent identification Barfoed , and identification with

Seliwanoff reagent . The test results showed molisch reagent identification with

positive results for sucrose with a purple ring formation . The test results with

Benedict's reagent showed positive results for sucrose in the presence of red

sediment in the bottom of the tube. The results of the test showed positive results

Barfoed reagent to sucrose in the presence of red brick sediment at the bottom of the

tube. Test results circuitry reagent Seliwanoff sucrose showed negative results.

Keyword : Carbohydrates, identify, Molisch, Benedict, Barfoed, Seliwanoff.


Pendahuluan

Karbohidrat dari segi struktur

organik dapat didefinisikan sebagai

polihidroksialdehida, polihidroksi-

keton, atau zat yang memberikan

senyawa itu jika dihidrolisis.

Berdasarkan strukturnya karbohidrat

digolongkan menjadi monosakarida,

oligosakarida, atau polisakarida.

Ketiga golongan karbohidrat ini

berkaitan satu dengan lainnya lewat

hidrolisis. Monosakarida (kadang

disebut gula sederhana) ialah

karbohidrat yang tidak dapat

dihidrolisis menjadi senyawa yang

lebih sederhana lagi. Polisakarida

mengandung banyak unit

monosakarida, ratusan bahkan

ribuan. Oligosakarida mengandung

sekurang-kurangnya dua dan biasanya

tidak lebih dari beberapa unit

monosakarida yang bertautan

(Harold,2003).

Pati atau amilum adalah suatu

polisakarida yang mengandung

amilosa dan amilopektin. Amilosa

merupakan polisakarida berantai lurus

bagian butir-butir pati yang terdiri atas

molekul-molekul glukosa yang terikat

satu sama lain melalui ikatan -1,4-

glikosidik, bagian dari pati yang

terlarut dalam air dan apabila

ditambah iodium akan berwarna biru.

Amilopektin merupakan polisakarida

bercabang bagian dari pati, terdiri atas

molekul-molekul glukosa yang terikat

satu sama lain melalui ikatan 1,4-

glikosidik dengan percabangan

melalui ikatan 1,6-glikosidik pada

setiap 20-25 unit molekul glukosa,

bagian yang tidak larut dalam air dan

dengan iodium memberikan warna

ungu hingga merah (Lehninger, 1997).

Agar bersifat kering, hidrofilik,

kompleks polisakarida koloid

diekstrak dari agarocytes ganggang

dari Rhodophyceae. Struktur diyakini

berbagai kompleks rantai polisakarida

memiliki bolak a- (13) dan b-

(14) keterkaitan. Ada tiga struktur

ekstrem: agarose yaitu netral;

pyruvated agarosa memiliki sedikit

sulfation; dan galactan sulfat. Agar

dapat dipisahkan menjadi fraksi gel

alami, agarosa, dan fraksi sulfat


nongelling , agaropectin (Rowe,

2009).

Glukosa merupakan

monosakarida yang terpenting yang

digunakan sebagai sumber energi dan

tenaga utama dalam tubuh. glukosa

merupakan prekursor untuk sintesis

semua karbohidrat lain dalam tubuh

seperti glikogen, ribosa, dan

dioxiribosa dalam asam nukleat,

galaktosa dalam laktosa susu, dalam

glikolipid, dan dalam glikoprotein dan

proteoglikan. Merupakan heksosa

monosakarida yang mengandung

enam atom karbon.Glukosa

merupakan aldehida (mengandung

gugus -CHO). (Murray, 2009).

Laktosa merupakan satu-

satunya karbohidrat dalam susu

mamalia, merupakan disakarida yang

terdiri dari gabungan monosakarida:

glukosa dan galaktosa (Sinuhaji,

2006).

Na-cmc atau Natrium

carboxymethylcellulose adalah garam

natrium dari polikarboksimetil eter

selulosa, mengandung tidak kurang

dari 6,5% dan tidak lebih dari 9,5%

natrium (Na) dihitung terhadap zat

yang telah dikeringkan. Na CMC

berbentuk granul, putih sampai krem,

bersifat higroskopik, mudah

terdispersi dalam air membentuk

larutan koloidal, tidak larut dalam

etanol, dalam eter dan dalam pelarut

organik (Nugraha, 2012).

Sukrosa merupakan senyawa

nonionik dan mempunyai sifat

pengemulsi (emusifying), pembusaan

(foaming), deterjensi (detergency),

dan pelarutan (solubizing) yang sangat

baik. Sukrosa, atau sering disebut

gula, merupakan disakarida dengan

rumus kimia C12H22O11 (-D-

fructofuranosyl--Dglucopyranoside)

yang mempunyai berat molekul 342,3.

Sukrosa merupakan salah satu

disakarida yang ditemukan dalam

bentuk bebas (tidak berikatan dengan

senyawa lain) di dalam tanaman.

Secara komersial, sukrosa umumnya

diperoleh dari tebu (Saccharum

officinarum) yang nerupakan tanaman

daerah tropis dan beet (beta vulgaris)

yang merupakan tanaman sub-tropis

(Purnamawati, 2006).


1.1 Reaksi Uji Molish

Uji Molisch didasari oleh

reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam

sulfat membentuk cincin furfural yang

berwarna ungu. Reaksi positif ditandai

dengan munculnya cincin ungu di

purmukaan antara lapisan asam dan

lapisan sampel.Sampel yang diuji

dicampur dengan reagent Molisch,

yaitu -naphthol yang terlarut dalam

etanol. Setelah pencampuran atau

homogenisasi, H2SO4 pekat perlahan-

lahan dituangkan melalui dinding

tabung reaksi agar tidak sampai

bercampur dengan larutan atau hanya

membentuk lapisan (Poedjiadi,2007).

Uji benedict merupakan uji

kimia untuk mengetahui kandungan

gula (karbohidrat) pereduksi.Gula

pereduksi meliputi semua jenis

monosakarida dan beberapa disakarida

seperti laktosa dan maltosa. Pada uji

Benedict, pereaksi ini akan bereaksi

dengan gugus aldehid, kecuali aldehid

dalam gugus aromatik, dan alpha

hidroksi keton. Oleh karena itu,

meskipun fruktosa bukanlah gula

pereduksi, namun karena memiliki

gugus alpha hidroksi keton, maka

fruktosa akan berubah menjadi

glukosa dan mannosa dalam suasana

basa dan memberikan hasil positif

dengan pereaksi benedict. Dengan

prinsip berdasarkan reduksi

Cu2+menjadi Cu+ yang mengendap

sebagai Cu2O berwarna merah

bata.Untuk menghindari pengendapan

CuCo3 pada larutan natrium karbonat

(reagen Benedict), maka ditambahkan

asam sitrat. Larutan tembaga alkalis

dapat direduksi oleh karbohidrat yang

mempunyai gugus aldehid atau

monoketon bebas. Warna biru pada

larutan menunjukkan reaksi negatif

(tidak adanya gula pereduksi),

sedangkanreaksi positif dengan

adanya warna hijau kebiruan, hijau,

kuning, dan endapanmerah

bata.Warna endapan ini bergantung

kepada konsentrasi karbohidrat yang

diperiksa (Winarno, 2008).


Reaksi Uji Molisch

1.2. Reaksi pada Uji Benedict

Barfoed digunakan untuk

membedakan monosakarida dan

disakarida dengan cara mengontrol

kondisi percobaan, seperti pH dan

waktu pemanasan. Senyawa

Cu2+ tidak membentuk Cu(OH)-

2 dalam suasana asam. Jadi Cu2O

terbentuk lebih cepat oleh

monosakarida dari pada oleh

disakarida (Sumardjo, 2008).

1.3 Reaksi pada Uji Selliwanoff

Uji Seliwanoff dipakai untuk

menunjukkan adanya ketoheksosa,

misalnya fruktosa.Pereaksi Seliwanoff

adalah resorsinol dalam asam klorida

encer. Pendidihan fruktosa dengan

pereaksi Seliwanoff menghasilkan

larutan berwarna merah. Dua tahap

terjadi pada proses pendidihan ini,

yaitu dehidrasi fruktosa oleh HCl yang

ada dalam pereaksi Seliwanoff

membentuk hidroksimetilfurfural dan

kondensasi hidroksimetilfurfural yang

terbentuk dengan resorsinol

membentuk senyawa berwarna merah

(Sumardjo,2008).


1.4 Reaksi pada Uji Barfoed

Metode

Uji Molish

Larutan karbohidrat sebanyak 2 mL

dimasukkan ke dalam tabung reaksi,

kemudian ditambahkan 3 tetes larutan

- naftol. Secara perlahan-lahan

ditambahkan larutan asam sulfat pekat

melalui dinding tabung reaksi sampai

terbentuk cincin coklat. Percobaan

diulangi dengan menggunakan 2 mL

aquades sebagai pengganti larutan

karbohidrat. Diamati perubahan yang

terjadi.

Uji Benedict

Dimasukkan 2 mL pereaksi Benedict

ke dalam tabung reaksi, ditambahkan

8 tetes larutan karbohidrat kemudian

dikocok. Selanjutnya semua tabung

dimasukkan ke dalam air mendidih di

atas penangas air selama 3 menit.

Masing-masing tabung dibiarkan

dingin dan dibandingkan hasil yang

teramati.

Uji Barfoed

Pereaksi Barfoed sebanyak 2 mL

dimasukkan ke dalam tabung reaksi

yang bersih dan kering, kemudian

ditambahkan 1 mL larutan karbohidrat

dan dikocok. Semua tabung reaksi


dimasukkan ke dalam air mendidih di

atas penangas air selama 1 menit atau

lebih hingga terlihat adanya reduksi.

Uji Selliwanoff

Sebanyak 2 mL pereaksi Selliwanoff

dimasukkan ke dalam tabung reaksi

Hasil

a.Sampel larutan sukrosa

1. Reaksi Molisch

yang bersih dan kering, kemudian

ditambahkan 3 tetes larutan

karbohidrat, dikocok. Semua tabung

reaksi dipanaskan di dalam air

mendidih sampai terlihat adanya

perubahan warna.

Perlakuan Hasil Gambar

1. Dimasukkan 1 ml

karbohidrat dan 3

tetes -naftol ke

dalam tabung

reaksi.

2. Ditambahkan

H2SO4.

3. Percobaan

diulangi dengan 2

ml air sebagai

blanko.

Penambahan H2SO4 12

M menghasilkan

terbentuknya cincin

ungu. Pada awal

penambahan H2SO4

cincin yang terbentuk

bewarna hijau

kemudian berubah

menjadi agak

kecoklatan dan

terakhir terbentuk

cincin berwarna ungu.

sukrosa : (+)

Blanko : (-)


2. Uji Benedict


1. Ditambahkan 8

tetes larutan

karbohidrat

(sukrosa) pada 2

ml benedict.

2. Dikocok hingga

homogen

3. Tabung reaksi

dimasukkan ke

penangas air

selama 3 menit

4. Larutan

didinginkan

kemudian

Sukrosa agak hijau,

setelah dipanaskan

dengan pemanasan

yang cukup lama

terbentuk endapan

merah. Setelah

pendinginan

terbentuk warna

biru.

sukrosa : (+)

Blanko : (-)


dibandingkan.

3. Uji Barfoed


1. 2 ml barfoed

ditambahkan 1

ml larutan

sukrosa.

2. Tabung reaksi

dimasukkan ke

penangas selama

1 menit

Terbentuk endapan

merah bata

sukrosa : (+)

Blanko : (-)


4. Uji Seliwanoff


1. 2 ml pereaksi

seliwanoff

ditambah 3 tetes

sukrosa

2. Tabung reaksi

dimasukkan ke

dalam penangas

air

Tidak ada perubahan,

tetap bewarna kuning

(warna seliwanoff).

sukrosa : (-)

Blanko : (-)

b. Sampel Larutan Laktosa

No Reagen Hasil Gambar

1 Glukosa ditambah -

naftol

Hasil positif

terbentuk warna

hijau dan ungu


Blanko Glukosa

ditambah -naftol

Hasil positif

terbentuk warna

hijau

2 Benedict Hasil positif

terbentuk warna

merah bata

Blanko Benedict Hasil negatif , warna

tidak berubah

3 Barfoed Hasil negatif, tidak

terjadi perubahan

warna


Blanko Barfoed Hasil negatif, tidak

terjadi perubahan

warna

4 Seliwanoff Hasil negatif, tidak

terjadi perubahan

warna


c. Sampel : Agarosa 0,5 %

sebanyak 50 ml

0,5 X 50 ml = 0,25 gram = 250

100 mg

1. Reaksi Molisch

No Perlakuan Hasil Gambar

1

1 ml larutan

karbohidrat + 3

tetes larutan

molisch

Terbentuk larutan

bening dengan

endapan putih

2

Penambahan asam

sulfat pekat

Terbentuk cincin

berwarna merah

keunguan

Positif (+)

mengandung karbohidrat

3

Blanko dengan 2 ml

air

Terbentuk cincin

berwarna hijau

Negatif (-)


2. Uji Benedict

No Perlakuan Hasil Keterangan

1

2 ml pereaksi benedict +

8 tetes larutan

karbohidrat

Larutan berwarna

biru muda

2

Memanaskan larutan

selama 3 menit

Tidak terjadi

perubahan

Negatif (-)

3

Mendinginkan larutan Tidak terjadi

perubahan


3. Uji Barfoed


1

2 ml larutan barfoed + 1

ml larutan karbohidrat

Larutan berwarna

biru tua

2

Pemanasan selama 1

menit

Tidak terjadi

perubahan larutan,

tetap berwarna biru

tua

Negatif (-)

3

Blanko dengan air Larutan berwarna

biru muda


4. Uji Seliwanoff


1 2 ml pereaksi seliwanoff

+ 3 tetes larutan

karbohidrat

Larutan kuning, tidak

homogen

2

Pemanasan selama 1

menit

Larutan larut

sempurna berwarna

kuning

Negatif (-)

3

Blanko dengan air

Larutan berwarna

kuning tidak

homogen


d. Sampel : NA-CMC

No. Perlakuan Hasil Gambar

1 Membuat larutan karbohidrat

-ditimbang 0,25 gr CMC lalu

dilarutkan dalam 50ml aquades

-dipanaskan di atas penangas

air

Larutan CMC larut


2. Uji Benedict

-ke dalam tabung reaksi

dimasukkan 2ml pereaksi

Benedict

-Ditambah 8 tetes larutan

karbohidrat

-Dipanaskan

Tidak terjadi perubahan

warna (larutan tetap

berwarna biru) : rekasi

negatif


3 Uji Barfoed

-Ke dalam tabung rekasi

dimasukkan 1ml larutan

karbohidrat

-Ditambahkan 2ml pereaksi

Barfoed

-Dipanaskan


warna ada endapan

(reaksi negative)

4 Uji Seliwanoff

-Dimasukkan 2 ml pereaksi

Seliwanoff ke dalam tabung

reaksi

-Ditambahkan 2 tetes larutan

karbohidrat

-Dikocok lalu dipanaskan


warna (tetap kuning)

: rekasi negatif


5 Uji Molisch

-Dimasukkan 1ml larutan

karbohidrat ke dalam tabung

reaksi

-Ditambahkan 1 tetes Molisch

dan 10 tetes H2SO4 pekat

Terbentuk cincin

berwarna ungu (rekaksi

positif)


e. Sampel : PGA 0,5 % dalam 20 ml aquades

0,5 % =

100%

0,5 % =

20 100%

= 0,1

No Perlakuan Hasil Gambar

1 Uji Molisch

- Terdapat endapan

putih

- 1 ml larutan PGA

ditambah 3 tetes

pereaksi Molisch

- Ditambahkan H2SO4 30

tetes

- Tidak terbentuk

cincin coklat

(hasil negatif)

- Blanko (Aquades

dengan

perlakuan sama)

- Terdapat serbuk

putih, tidak ada

peubahan


2 Uji Benedict

- Warna biru terang

- Sampel ditambahkan

pereaksi Benedict

- Dipanaskan

- Tidak terjadi

perubahan warna

(hasil negatif)

- Blanko (Aquades

dengan perlakuan

sama)

- Warna biru

terang, tidak

terjadi perubahan

warna


3 Uji Barfoed

- Warna biru terang


pereaksi Barfoed

- Dipanaskan

- Tidak terjadi

perubahan warna

(hasil negatif)

- (Aquades dengan

pelakuan yang sama)

- Warna biru

terang, tidak

terjadi perubahan

warna


4 Uji Selliwanof

- Warna kuning

terang


pereaksi Selliwanof

- Dipanaskan - Tidak terjadi

perubahan warna

(hasil negatif)

- Blanko (Aqudes dengan

perlakuan yang sama)

- Warna kuning

terang, tidak

terjadi perubahan

warna


f. Sampel : Amilum

1. Uji Molisch

Perlakuan Hasil

Masukkan 1ml karbohidrat

(amilum)ke dalam tabung dan

tambahkan 3

tetespereaksiMolisch

Didapat larutan dalam tabung berwarna

bening

Tambahkan larutan asam

sulfat pekat dgn hati-hati lewat

dinding tabung hingga terlihat

perubahan dalam tabung

Tabung terasa panas dan terdapat perubahan

warna menjadi ungu di bawah tabung

Masukkan 1ml air (blanko) ke

dalam tabung dan tambahkan

3 tetes pereaksi Molisch

Didapat larutan blanko danpereaksi molisch

dalam tabung reaksi

Tambahkan larutan asam

sulfat pekat dgn hati-hati lewat

dinding tabung hingga terlihat

perubahan dalam tabung

Tabung terasa hangat dan terdapat

perubahan warna hijau di dasar tabung


2. Uji Benedict

Perlakuan Hasil

Masukkan 2 mL larutan

Benedict dalam

tabungreaksi,tambahkan 8 tetes

larutan karbohidrat (amilum),

kocok.

Didapat larutan dalam tabung,

berwarnabiru

Tabung dimasukkan ke dalam

penangas air didih selama 3

menit, biarkan dingin.

Tidak terjadi perubahan warna (tetap

warna biru)


Benedict dalam tabung

reaksi,tambahkan 8 tetes air

(blanko), kocok.

Didapatlarutandalamtabung, berwarnabiru



menit, biarkandingin.

Tidak terjadi perubahan warna (tetap

warna biru)


3. Uji Barfoed

Perlakuan Hasil


Barfoed dalam tabung

reaksi,tambahkan 1 mL larutan

karbohidrat (amilum), kocok.

Didapat larutan dalam tabung, berwarna

biru



menit atau lebih hingga terlihat

adanya reduksi

Tidak terjadi perubahan warna (tetap biru)


Barfoed dalam tabung

reaksi,tambahkan 1 mL air

(blanko), kocok.


biru

Tabung dimasukkan ke dalam Tidak terjadi perubahan warna (tetap biru)



menit atau lebih hingga terlihat

adanya reduksi

4. Uji Seliwanoff

Perlakuan Hasil

Masukkan 2 mL pereaksi


reaksi, tambahkan 3 tetes

larutan karbohidrat (amilum),

kocok.

Didapat larutan dalam tabung berwarna

kuning jernih


penangas air didih hingga

terlihat perubahan warna

Tidak ada perubahan warna (tetap kuning

jernih)


Masukkan 2 mL pereaksi


reaksi, tambahkan 3 tetes air,

kocok


kuning jernih

Tabung dimasukkan kedalam

penangas air didih hingga

terlihat perubahan warna

Tidak ada perubahan warna(tetap kuning

jernih)

g. Sampel : Larutan GLUKOSA 0.5%

Reagensia Hasil dan keterangan Gambar

Uji

molisch

Terdapat endapan cincin

ungu.

Ket. Terdapat ikatan

glikosida, (+)

karbohidrat.

Sebelum perlakuan


Sesudah perlakuan

Uji

Benedict

Ada sedikit perubahan

warna laurtan menjadi

lebih tua, dan terdapat

endapan coklat

Ket. (+) karbohidrat.

Sebelum perlakuan

Sesudah Perlakuan


Uji

Barfoed

Terdapat cincin serta

endapan merad tua.

Ket.(+) karbohidrat

Sebelum Perlakuan

Sesudah Perlakuan

Uji

Seliwanof


warna.

Ket.(-) gula ketosa

Sebelum Perlakuan


Sesudah Perlakuan

Pembahasan

Karbohidrat merupakan

senyawasenyawa aldehida atau keton

yang mempunyai gugus hidroksil.

Senyawaseyawa ini menyusun

sebagian besar bahan organic di dunia

karena peran multipelnya pada semua

bentuk kehidupan. Karbohidrat

bertindak sebagai sumber energi,

bahan bakar, dan zat antara

metabolisme. Contoh : pati pada

tumbuhan dan glikogen pada hewan

adalah polisakarida yang dapat

dimobilisasi untuk menghasilkan

glukosa (bahan bakar utama untuk

pembentukan energi). Gula ribosa dan

deoksiribosa pembentuk sebagian

kerangka struktur RNA dan DNA.

Fleksibilitas cincin kedua gula ini

penting pada penyimpanan dan

ekspresi informasi genetika.

Karbohidrat atau sakarida

terdapat gugus hidroksil (-OH), gugus

aldehid atau gugus keton.Maka dapat

didefinisikan bahwa karbohidrat

sebagai senyawa polihidroksialdehida

atau polihidroksiketon, atau senyawa

yang dihidrolisis dari keduanya.

Pada praktikum kali ini

percobaan yang dilakukan adalah uji

karbohidrat menggunakan pereaksi

molisch,barfoed,benedict dan

seliwanoff. Sample yang digunakan


antara lain agarosa, Na-

cmc,PGA,lactosa,amilum,sukrosa, dan

glukosa. Sample tersebut dibagi pada

7 kelompok dan praktikan

mendapatkan sample sukrosa. Sukrosa

merupakan salah satu disakarida yang

berlimpah ruah.

Sukrosa ialah gula yang kita

kenal sehari-hari, baik yang berasal

dari tebu maupun dari bit.Selain pada

tebu dan bit, sukrosa terdapat pula

pada turnbuhan lain, rnisalnya dalarn

buah nanas dan dalam wortel. Dengan

hidrolisis sukrosa akan terpecah dan

menghasilkan glukosa dan fruktosa.

Molekul sukrosa tidak mempunyai

gugus aldehida atau keton bebas, atau

tidak mempunyai gugus OH

glikosidik.Sukrosa mempunyai sifat

memutar cahaya terpolarisasi ke kanan

(D-sukrosa). Sukrosa (gula pasir yang

umum) didapatkan secara komersil

dari tebu atau bit. Atom-atom anomer

unit glukosa dan unit fruktosa

berikatan pada disakarida ini,

konfigurasi ikatan glikosidik ini

adalah untuk glukosa dan untuk

fruktosa.Dengan sendirinya, sukrosa

tidak mempunyai gugus pereduksi

bebas (ujung aldehid atau keton),

berbeda dengan sebagian besar gula

lainnya. Hidrolisis sukrosa menjadi

glukosa dan fruktosa dikatalis oleh

sukrose( juga disebut invertase karena

hidrolisis mengubah aktivitas optik

dari putaran kekanan menjadi kekiri).

Hidrolisis akan memecah

ikatan glikosida, dan mengubah

sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa.

Meskipun begitu, proses hidrolisis

sukrosa berjalan amat lambat sehingga

bisa memakan waktu bertahun-tahun.

Proses ini bisa dipercepat berlipat-

lipat dengan adanya enzim sukrase.

Hidrolisis juga dapat dipercepat

dengan asam,misalnya dengan kalium

bitartrat atau jus lemon, keduanya

asam lemah. Demikian juga,

keasaman lambung mengubah sukrosa

menjadi glukosa dan fruktosa

selamaproses pencernaan dalam

tubuh.

Pati atau amilum adalah karbo

hidrat kompleks yang tidak larut

dalam air, berwujud bubuk putih,

tawar dan tidak berbau.Pati

merupakan bahan utama yang

dihasilkan oleh tumbuhan untuk


menyimpan kelebihan glukosa

(sebagai produk fotosintesis) dalam

jangka panjang.Hewan dan manusia

juga menjadikan pati sebagai sumber

energi yang penting.

Na-CMC adalah turunan dari

selulosa dan sering dipakai dalam

industri pangan, atau digunakan dalam

bahan makanan untuk mencegah

terjadinya retrogradasi. Pembuatan

CMC adalah dengan cara mereaksikan

NaOH dengan selulosa murni,

kemudian ditambahkan Na-kloro

asetat

Reaksi :

R-OH + NaOH R-ONa + H2O

R-ONa + ClCH2COONa O CH2COONa + NaCl

Na-CMC merupakan zat

dengan warna putih atau sedikit

kekuningan, tidak berbau dan tidak

berasa, berbentuk granula yang halus

atau bubuk yang bersifat higroskopis.

CMC ini mudah larut dalam air panas

maupun air dingin. Pada pemanasan

dapat terjadi pengurangan viskositas

yang bersifat dapat balik (reversible).

Viskositas larutan CMC dipengaruhi

oleh pH larutan, kisaran pH Na-CMC

adalah 5-11 sedangkan pH optimum

adalah 5, dan jika pH terlalu rendah

(


banyak digunakan terutama pada

industri pangan.

Glukosa (C6H12O6, memiliki

berat molekul 180.18) adalah heksosa

monosakarida yang mengandung

enam atom karbon. Glukosa

merupakan aldehida (mengandung

gugus -CHO). Lima karbon dan satu

oksigennya membentuk cincin yang

disebut "cincin piranosa", bentuk

paling stabil untuk aldosa berkabon

enam.Dalam cincin ini, tiap karbon

terikat pada gugus samping hidroksil

dan hidrogen kecuali atom kelimanya,

yang terikat pada atom karbon keenam

di luar cincin, membentuk suatu gugus

CH2OH.

Gel agarosa adalah suatu

polisakarida yang diekstraksi dari

berbagai jenis ganggang merah. Ia

tergolong kelompok pectin dan

merupakan suatu polimer yang

tersusun dari monomer galaktosa. Bila

dihidrolisis akan menyerang ikatan 1-

4 alfa glukosida pada pati dan

membentuk dekstrin atau glukosa

tergantung pada derajat pemecahan

rantai polisakaridanya. Reaksi ini

membutuhkan katalisator yang

digunakan sebagai mempercepat

reaksi tersebut.

Laktosa ialah suatu gula

disakarida yang berasal dari galaktosa

dan glukosa yang dijumpai dalam

susu. Laktosa membentuk sekitar 2

8% dari susu (berdasarkan berat),

meskipun jumlahnya berbeda-beda di

antara spesies dan individu, dan susu

dengan jumlah laktosa tereduksi juga

ada.Fosfogliseraldehid merupakan

substrat pembentuk gliserol yang

terbentuk saat proses glikolisis

(katabolisme pada sel).

Setiap percobaan pada setiap

sampel digunakan blanko berupa air

untuk memperlihatkan perbandingan

hasil positif atau negative yang

dihasilkan sampel.Pengujian terhadap

seluruh sampel dimulai dengan uji

Molisch.

PGA (pulvis gummi arabicum)

atau lebihs sering disebut gom arab

merupakan senyawa eksudat dari

tanaman Acasia sp. Dengan sifat

mudah larut dalam air, tidak larut

dalam alkohol, dan bersifat asam.


PGA termasuk suspending agent dan

emulsifying agent dalam pembuatan

sediaan farmasi berupa suspense dan

emulsi.

Berbeda dengan Na-CMC,

penggunaan PGA sebagai suspending

dan emulsifying agent membutuhkan

pengembangan menggunakan air

dingin karena PGA termasuk

golongan pensuspensi dari alam.

Struktur PGA merupakan struktur

dengan ikatan yang lemah yang

mudah rusak jika digunakan air

panas.Tidak dibutuhkan energy lebih

untuk memutus ikatan pada

pensuspensi golongan alam. Air panas

malah akan merusak struktur dari

senyawa tersebut.

Uji molisch adalah uji kimia

kualitatif untuk mengetahui adanya

karbohidrat. Uji Molisch dinamai

sesuai penemunya yaitu Hans

Molisch, seorang alhi botani dari

Australia. Uji ini didasari oleh reaksi

dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat

membentuk cincin furfural yang

berwarna ungu. Reaksi positif ditandai

dengan munculnya cincin ungu di

purmukaan antara lapisan asam dan

lapisan sampel.

Sampel yang diuji dicampur

dengan reagent Molisch, yaitu -

naphthol yang terlarut dalam

etanol.Setelah pencampuran atau

homogenisasi, H2SO4 pekat perlahan-

lahan dituangkan melalui dinding

tabung reaksi agar tidak sampai

bercampur dengan larutan atau hanya

membentuk lapisan.

Pada pengujian terhadap

sukrosa terdapat cincin berwarna

ungu.Ini disebabkan karena adanya

penambahan H2SO4 pekat (dapat

digantikan asam kuat lainnya)

berfungsi untuk menghidrolisis ikatan

pada sakarida untuk menghasilkan

furfural. Furfural ini kemudian

bereaksi dengan reagent Molisch, -

naphthol membentuk cincin yang

berwarna ungu dan dapat diambil

kesimpulan bahwa sample sukrosa

mengandung karbohidrat.

Pada sample yang lainnya

seperti agarosa, Na-cmc, PGA,

lactosa, amilum, dan glukosa juga

dilakukan pengujian yang sama, dan


untuk sample agarosa, Na-cmc,

lactosa, amilum, dan glukosa

memberikan reaksi yang positif

terhadap reaksi ini karena semua

sampel tersebut mengandung ikatan

glikosida yang dihidrolisis

menghasilkan furfural. Tetapi untuk

sample PGA tidak, hal ini

menunjukkan bahwa pereaksi Molisch

tidak dapat mendeteksi ikatan

glikosida karena PGA adalah senyawa

lemak yang menyusun gliserol.

Percobaan yang selanjutnya

adalah percobaan menggunakan

pereaksi barfoed. Pada percobaan uji

Barfoed, karbohidrat direduksi pada

suasana asam. Dalam asam,

polisakarida atau disakarida akan

terhidrolisis parsial menjadi sebagian

kecil monomernya. Hal inilah yang

menjadi dasar untuk membedakan

antara monosakarida, oligosakarida /

disakarida, dan polisakarida.

Monomer gula dalam hal ini bereaksi

dengan fosfomolibdat membentuk

senyawa berwarna biru. Dibanding

dengan monosakarida, polisakarida

yang terhidrolisis oleh asam

mempunyai kadar monosakarida yang

lebih kecil, sehingga intensitas warna

biru yang dihasilkan lebih kecil

dibandingkan dengan larutan

monosakarida. Disakarida juga akan

memberikan hasil positif pada larutan

memberikan warna biru dan bagian

bawah terdapat endapan kemerahan

bila didihkan cukup lama hingga

terjadi hidrolisis. Pada sample sukrosa

memberikan hasil yang positif yaitu

dengan terbentuknya endapan merah

di bagian dasar tabung.

Pada awalnya tidak terbentuk

endapan merah.Namun, dengan

pemanasan yang cukup lama, akhirnya

endapan merah dapat terbentuk.Ini

disebabkan karena sukrosa merupakan

disakarida, sehingga membutuhkan

waktu yang cukup lama untuk

menghidrolisisnya menjadi bentuk

monomernya dan memutus ikatan

yang ada pada sukrosa.


seperti agarosa, Na-

cmc,PGA,lactosa,amilum, dan glukosa

juga dilakukan pengujian yang sama,

dan untuk sample glukosa



terhadap reaksi ini karena glukosa

merupakan monosakarida yang mudah

untuk diputus ikatan glikosidanya

melalui pemanasan dan pengikatan

oleh reagen Barfoed. Tetapi untuk

sample agarosa, Na-cmc, PGA,

lactosa, dan amilum hasilnya negative

karena sampel-sampel tersebut

merupakan gula kompleks yang

ikatannya sulit untuk

menghidrolisisnya menjadi

monomernya.Seharusnya lactose

menghasilkan hasil yang positif

karena lactose dan sukrosa adalah

disakarida (terdiri dari 2 monomer),

namun pemanasan yang dilakukan

pada sampel laktosa kurang sehingga

tidak terbentuk endapan merah.

Berikutnya adalah percobaan

menggunakan pereaksi benedict.Uji

benedict adalah untuk membuktikan

adanya gula pereduksi.Gula pereduksi

adalah gula yang mengalami reaksi

hidrolisis dan bisa diurai menjadi

sedikitnya dua buah monosakarida.

Pada uji Benedict larutan tembaga

alkalis akan direduksi oleh gula yang

mempunyai gugus aldehid atau keton

bebas dengan membentuk kuproksida

yang berwarna. Gula pereduksi

beraksi dengan pereaksi menghasilkan

endapan merah bata (Cu2O).Pada gula

pereduksi terdapat gugus aldehid dan

OH laktol. OH laktol adalah OH yang

terikat pada atom C pertama yang

menentukan karbohidrat sebagai gula

pereduksi atau bukan. Sekalipun

aldosa atau ketosa berada dalam

bentuk sikliknya, namun bentuk ini

berada dalam kesetimbangannya

dengan sejumlah kecil aldehida atau

keton rantai terbuka, sehingga gugus

aldehida atau keton ini dapat

mereduksi berbagai macam

reduktorReaksi uji Benedict :

O O

|| ||

R C H + Cu2+ + OH R C OH + Cu2O

(merah bata)

Pada sample sukrosa

memberikan hasil yang positif, yaitu

ditunjukkan dengan adanya warna

merah bata pada bagian dasar tabung.

Ini disebabkan karena sukrosa

tersusun atas glukosa dan fruktosa.Ini

dapat terjadi karena glukosa sendiri

emiliki gugus aldehid (C-O). Endapan


merah bata terbentuk dalam waktu

yang cukup lama. Ini disebabkan

karena sukrosa merupakan disakarida

yang terdiri dari glukosa yang

merupakan aldehid (-CHO) dan

fruktosa yang merupakan keton (-

C=O). Pemanasan membutuhkan

waktu yang cukup lama karena selain

ada pemutusan ikatan kovalen dari

gugus keton, ada pemutusan ikatan

hydrogen dari aldehid untuk

menghasilkan hasil positif berupa

endapan merah bata.




dilakukan pengujian yang sama, dan

untuk sample laktosa dan glukosa


terhadap reaksi ini karena penyusun

dari laktosa adalah glukosa dan

galaktosa yang termasuk dalam gula

pereduksi, begitu pula laktosa

merupakan disakarida dari glukosa

yang merupakan gula pereduksi juga.

Tetapi untuk sample agarosa, Na-

cmc,PGA,dan amilum tidak karena

sampel tersebut tidak mengandung

gula pereduksi sehingga ion Cu2+ dari

reagen Benedict tidak mengikat

aldehid/keton dan tidak menghasilkan

endapan merah bata Cu2O .

Selanjutnya adalah percobaan

menggunakan pereaksi seliwanoff.Di

dalam uji Seliwanoff ada

pembentukan 4-hidroksimetilfurfural

yang terjadi pada reaksi antara

fruktosa, sukrosa, galaktosa, glukosa,

dan arabinosa yang mendasari uji

seliwanoff. Warna jingga yang muncul

disebabkan oleh senyawa kompleks

hidroksimetilfurfural yang mengalami

kondensasi akan membentuk senyawa

kompleks.

Uji ini membedakan aldosa

dan ketosa. Ketosa dibedakan dari

aldosa via gugus fungsi keton /

aldehida gula tersebut. Jika gula

tersebut mempunyai gugus keton ia

adalah ketosa. Sebaliknya jika ia

mengandung gugus aldehida,ia adalah

aldosa. Uji ini didasarkan pada fakta

bahwa ketika dipanaskan ,ketosa lebih

cepat terhidrasi daripada aldosa.

Pada percobaan yang

dilakukan terhadap sukrosa, larutan


tidak memberikan perubahan warna

menjadi endapan merah (hasil positif).

Hal ini disebabkan karena reagen yang

digunakan telah terhidrolisis karena

penyimpanannya yang kurang baik

sehingga tidak memberikan perubahan

warna pada sample sukrosa.

Seharusnya sukrosa memberikan hasil

positif berupa endapan berwarna

merah karena sukrosa merupakan

disakarida yang memiliki gugus keton

dari fruktosa.




dilakukan pengujian yang sama,semua

sample tidak memberikan reaksi yang

positif terhadap reaksi ini. Ini

disebabkan karena uji menggunakan

pereaksi seliwanoff hanya spesifik

pada gula yang memiliki gugus ketosa

yaitu pada sukrosa dan fruktosa.

KESIMPULAN

1. Terdapat karbohidrat yang

terkandung di dalam sampel

sukrosa

2. Uji Molisch mendeteksi ikatan

glikosida, uji Benedict

mendeteksi gula pereduksi

golongan aldehid, uji Barfoed

memisahkan monosakarida

dari disakarida melalui kondisi

lingkungan pH dan

pemanasan, uji Seliwanoff

mendeteksi ketoheksosa yaitu

fruktosa.


Daftar pustaka

Harold,H.2003.Kimia Organik

(Organic Chemistry). Jakarta :

Erlangga.

Lehninger, A.L. 1997. Dasar-dasar

Biokimia edisi 1. Jakarta:

Erlangga.

Murray,R.K. 2009. Biokimia Harper

Edisi 29.Jakarta : EGC.

Nugraha, Linus Seta Adi. 2012.

Pengaruh Kadar Na CMC

Sebagai Pengental Terhadap

Karakteristik Fisik Losion

Repelan Minyak Akar Wangi

(Vetiveria zizanioides (L.)

Nash). Semarang: Akademi

Farmasi Theresiana.

Poedjiadi, A. (2007). Dasar-dasar

Biokimia. Jakarta :Universitas

Indonesia Press.

Purnawati, Debbi. 2006. Kajian

Pengaruh Konsentrasi Sukrosa

dan Asam Sitrat terhadap

Mutu Sabun Transparan.

Bogor: Institut Pertanian

Bogor.

Rowe, Rraymond C., Paul J Sheskey.,

dan Marian E Quinn. 2009.

Handbook of Pharmaceutical

Excipients. USA:

Pharmaceutical Press.

Sinuhaji, Atan Baas. 2006. Intoleransi

Laktosa. Majalah Kedokteran

Nusantara Vol.39 No.4.

Sumardjo.2008. Pengantar Kimia :

Buku Panduan Mahasiswa

Kedokteran. Jakarta : EGC.

Winarno F.G. 2008.Kimia Pangan dan

Gizi .Bogor : M-BRIO

Ijpst Reaksi Uji Karbohidrat

Documents