Identifikacija jezgrinih lokalizacijskih signalaAlan E. Smith i suradniciNacionalni institut za medicinska istraživanja, Mill Hill, London
JezgraRazlika između eukariotskih i prokariotskih
stanica: prisutnost jezgreSpremište genetičke informacije i stanični
kontrolni centarRegulacija ekspresije gena
JezgraJezgra
Jezgrina ovojnica i promet između jezgre i citoplazmeJezgrina ovojnica odvaja sadržaj jezgre od
citoplazme:djeluje kao barijera koja sprječava slobodan
prolaz molekula i održava jezgru u obliku drugačijega biokemijskog odjeljka stanice
Prolazak omogućen kroz komplekse jezgrinih pora:regulirana izmjena molekula između jezgre i
citoplazme; selektivan promet
Jezgrina ovojnica i promet između jezgre i citoplazme
Kompleks jezgrine poreKanali kroz koje male polarne molekule,
ioni i makromolekule (proteini i molekule RNA) mogu putovati između jezgre i citoplazme
Male molekule pasivno difundiraju kroz otvorene vodene kanale
Makromolekule se prenose selektivno uz utrošak energije
Kompleks jezgrine pore
Kompleks jezgrine pore
Selektivni transport proteina u jezgru i iz jezgreOdržavanje jezgre kao drugačijeg
biokemijskog odjeljka stanice zahtijeva mehanizam kojim se ostvaruju razlike između proteina jezgre i citoplazme
Proteini su usmjereni u jezgru uz pomoć specifičnoga sljeda aminokiselina nazvanog jezgrin lokalizacijski signal koji prepoznaju transportni receptori
Jezgrin lokalizacijski signalPrvi takav jezgrin lokalizacijski signal
kartirali su i opisali Alan Smith (i suradnici) 1984. godine Proučavanje T antigen majmunskog virusa 40
(SV40) koji pokreće replikaciju virusne DNA u inficiranim stanicama, a kodiran je virusom
Identificiran pronalaskom mutacije jednog jedinog lizina u proteinu
Jezgrin lokalizacijski signalSlijed aminokiselina T antigena SV40 virusa
Jezgrin lokalizacijski signalIstraživanja pokazala da mutacija lizina u
treonin ili asparagin sprječava normalnu akumulaciju T antigena u jezgrama stanica glodavaca i majmuna
Odredili su posljedice različitih delecija na unutarstaničnu lokalizaciju T antigenaMutirani protein s delecijom određenih
aminokiselina zadržava se u citoplazmi
Jezgrin lokalizacijski signalProvjera pokusom je li upravo taj slijed
aminokiselina sposoban usmjeriti proteine u jezgru Konstrukcija kimere u kojima je slijed
aminokiselina T antigena fuzioniran s proteinima koji su normalno citoplazmatski
Rezultat: taj kratak slijed aminokiselina T antigena SV40 virusa nužan i dostatan da usmjeri proteine na ulazak u jezgru
Utjecaj i važnostJezgrin lokalizacijski signal T antigena virusa
SV40 “prototip sličnih sljedova ostalih jezgrinih proteina” Identifikacija jezgrinih lokalizacijskih signala
ključni napredak u razumijevanju ulaska proteina u jezgru
Izvori:Cooper, G. M., Hausman, R. E. (2004).
Stanica, Molekularni pristup. Zagreb: Medicinska naklada
http://video.google.com/videoplay?docid=6374761646657730470