TITULAR: DR. IVÁN SALMERON OCHOA
AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO 205206
MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS
MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
DETECCIÓN RECUENTO
CARACTERIZACIÓN
SUBTIPIFICACIÓN
MICROORGANISMOS
MÉTODOS RÁPIDOS
FISICO-QUÍMICAS
• Películas de medios de cultivo deshidratados generales o selectivos.
• Medios cromogénicos y fluorogénicos
INMUNOLÓGICAS
• Aglutinación
• Citometría
• Radioinmunoensayo
• Enzimoinmunoensayo
• Inmunocromatografía
MÉTODOS RÁPIDOS
MOLECULARES
• Hibridación
• PCR
• Biochips
BIOQUÍMICAS • Galerías miniaturizadas y automatizadas
• Optimizan el espacio de incubación
• Manual• Posibilidad de lector
automático• Validaciones
internacionales
Recuento total:
• Enterobacterias• E.coli/Coliformes• Mohos y levaduras• Staphylococcus aureus• Listeria ambiental
PELÍCULAS DE MEDIOS DE CULTIVO DESHIDRATADOS GENERALES O SELECTIVOS.
FILM HIDRATABLE: PETRIFILM: 3M
• Orientación
• Selectivos
MEDIOS CROMOGÉNICOS Y FLUOROGÉNICOS
Colonias violetas, Mucosas.Fluorescencia amarillo-verdosa
CROMOGÉNICOS
FLUOROGÉNICOS
Para la realización de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.
VENTAJAS.• Eliminan la necesidad del subcultivo • Eliminan la elaboración de numerosas pruebas
bioquímicas economizando tiempo y dinero.
DESVENTAJAS:• La actividad enzimática de los microorganismos• Interpretación de los colores por parte del operador. Sin
embargo con respecto a esto último se han desarrollado equipos que facilitan la lectura de las placas.
MÉTODOS CROMOGÉNICOS
• Mide las características de dispersión de luz y fluorescencia que poseen las células conforme se las hace pasar a través de un rayo de luz.
• Al atravesar el rayo de luz, las células interaccionan con este causando dispersión de la luz, puede evaluar el tamaño de las células.
CITOMETRÍA
Para la realización de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.
Método para detectar número extremadamente bajo de microorganismos, con una cierta rapidez basado de la producción de copias de genes específicos de un microorganismo en cuestión.
PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA)
Cuando el antígenos se encuentra unido o formando parte de células, bacterias o partículas, la reacción Ag-Ac se puede detectar y cuantificar por el aglutinado celular o bacteriano formado.
AGLUTINACIÓN
En esta técnica el anticuerpo se une un isótopo radiactivo siendo posible la cuantificación del complejo Ag-Ac a través de la radiactividad emitida.
RADIOINMUNOENSAYO
Es un aparato capaz de realizar rápidas reacciones bioquímicas en escala reducida, con el propósito de identificar secuencias genéticas, agentes contaminantes, toxinas, bacterias.
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BIOCHIP
HIBRIDACIÓN
Esta técnica, también se conoce como ensayo de ELISA (Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay). La identificación de los complejos Ag-Ac, se hace mediante el empleo de enzimas, bien unidas al antígeno, o bien unidas al anticuerpo.
ENZIMOINMUNOENSAYO
• Desarrollo algunos medios de cultivo selectivos• Metabolismo de sustratos específicos• Detección por sistemas indicadores
Ventajas:• Reducción de volumen de reactivos y medio a
emplear en los ensayos• Rapidez en la obtención de resultados• Posibilidad de lectura e interpretación de
resultados de manera automatizada
GALERÍAS MINIATURIZADAS Y AUTOMATIZADAS
• Tarjetas desechables para identificación sencilla de colonias sospechosas-pruebas bioquímicas rápidas
OBIS
• Galerías para identificación de más de 800 especies de bacterias y levaduras:
SISTEMA API
• Tubos de plástico de compartimentos con agar de distintos sustratos
BBL ENTEROTUBE Y OXI/FERM TUBE
• Soportes plásticos con sustratos cromogénicos y/o fluorogénicos
BBL CRYSTAL, RAP ID SYSTEMS Y
MICRO ID
• Cambios de color en sustratos y/o producción de gas de cultivos inoculados
SISTEMA VITEK
GALERÍAS MINIATURIZADAS Y AUTOMATIZADAS
INMUNOCROMATOGRAFÍA
• http://www.madrimasd.org/blogs/alimentacion/2008/02/08/84070• http://multimedia.3m.com/mws/mediawebserver?
mwsId=66666UuZjcFSLXTtMxMy4xTtEVuQEcuZgVs6EVs6E666666--&fn=HSCC%20Interp%20Guide_sp.pdf
• http://gotasmicrobiologicas.blogspot.mx/2011/02/medios-cromogenicos.html
• http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-metodos%20de%20recuento.htm
• http://www.in-enologia-veritas.com/old/docs/Microbio.pdf• http://www.finagro.com.co/html/cache/HTML/SIS/FOODSAFETY/
LinaCarolinaCruz-DiagnosticoMicrobiologico.pdf
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO
GRACIAS