AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO 205206

TITULAR: DR. IVÁN SALMERON OCHOA

AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO 205206

MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS

MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

DETECCIÓN RECUENTO

CARACTERIZACIÓN

SUBTIPIFICACIÓN

MICROORGANISMOS

MÉTODOS RÁPIDOS

FISICO-QUÍMICAS

• Películas de medios de cultivo deshidratados generales o selectivos.

• Medios cromogénicos y fluorogénicos

INMUNOLÓGICAS

• Aglutinación

• Citometría

• Radioinmunoensayo

• Enzimoinmunoensayo

• Inmunocromatografía

MÉTODOS RÁPIDOS

MOLECULARES

• Hibridación

• PCR

• Biochips

BIOQUÍMICAS • Galerías miniaturizadas y automatizadas

• Optimizan el espacio de incubación

• Manual• Posibilidad de lector

automático• Validaciones

internacionales

Recuento total:

• Enterobacterias• E.coli/Coliformes• Mohos y levaduras• Staphylococcus aureus• Listeria ambiental

PELÍCULAS DE MEDIOS DE CULTIVO DESHIDRATADOS GENERALES O SELECTIVOS.

FILM HIDRATABLE: PETRIFILM: 3M

• Orientación

• Selectivos

MEDIOS CROMOGÉNICOS Y FLUOROGÉNICOS

Colonias violetas, Mucosas.Fluorescencia amarillo-verdosa

CROMOGÉNICOS

FLUOROGÉNICOS

Para la realización de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.

VENTAJAS.• Eliminan la necesidad del subcultivo • Eliminan la elaboración de numerosas pruebas

bioquímicas economizando tiempo y dinero.

DESVENTAJAS:• La actividad enzimática de los microorganismos• Interpretación de los colores por parte del operador. Sin

embargo con respecto a esto último se han desarrollado equipos que facilitan la lectura de las placas.

MÉTODOS CROMOGÉNICOS

• Mide las características de dispersión de luz y fluorescencia que poseen las células conforme se las hace pasar a través de un rayo de luz.

• Al atravesar el rayo de luz, las células interaccionan con este causando dispersión de la luz, puede evaluar el tamaño de las células.

CITOMETRÍA

Para la realización de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.

Método para detectar número extremadamente bajo de microorganismos, con una cierta rapidez basado de la producción de copias de genes específicos de un microorganismo en cuestión.

PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA)

Cuando el antígenos se encuentra unido o formando parte de células, bacterias o partículas, la reacción Ag-Ac se puede detectar y cuantificar por el aglutinado celular o bacteriano formado.

AGLUTINACIÓN

En esta técnica el anticuerpo se une un isótopo radiactivo siendo posible la cuantificación del complejo Ag-Ac a través de la radiactividad emitida.

RADIOINMUNOENSAYO

Es un aparato capaz de realizar rápidas reacciones bioquímicas en escala reducida, con el propósito de identificar secuencias genéticas, agentes contaminantes, toxinas, bacterias.

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BIOCHIP

HIBRIDACIÓN

Esta técnica, también se conoce como ensayo de ELISA (Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay). La identificación de los complejos Ag-Ac, se hace mediante el empleo de enzimas, bien unidas al antígeno, o bien unidas al anticuerpo.

ENZIMOINMUNOENSAYO

• Desarrollo algunos medios de cultivo selectivos• Metabolismo de sustratos específicos• Detección por sistemas indicadores

Ventajas:• Reducción de volumen de reactivos y medio a

emplear en los ensayos• Rapidez en la obtención de resultados• Posibilidad de lectura e interpretación de

resultados de manera automatizada

GALERÍAS MINIATURIZADAS Y AUTOMATIZADAS

• Tarjetas desechables para identificación sencilla de colonias sospechosas-pruebas bioquímicas rápidas

OBIS

• Galerías para identificación de más de 800 especies de bacterias y levaduras:

SISTEMA API

• Tubos de plástico de compartimentos con agar de distintos sustratos

BBL ENTEROTUBE Y OXI/FERM TUBE

• Soportes plásticos con sustratos cromogénicos y/o fluorogénicos

BBL CRYSTAL, RAP ID SYSTEMS Y

MICRO ID

• Cambios de color en sustratos y/o producción de gas de cultivos inoculados

SISTEMA VITEK

GALERÍAS MINIATURIZADAS Y AUTOMATIZADAS

INMUNOCROMATOGRAFÍA

• http://www.madrimasd.org/blogs/alimentacion/2008/02/08/84070• http://multimedia.3m.com/mws/mediawebserver?

mwsId=66666UuZjcFSLXTtMxMy4xTtEVuQEcuZgVs6EVs6E666666--&fn=HSCC%20Interp%20Guide_sp.pdf

• http://gotasmicrobiologicas.blogspot.mx/2011/02/medios-cromogenicos.html

• http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-metodos%20de%20recuento.htm

• http://www.in-enologia-veritas.com/old/docs/Microbio.pdf• http://www.finagro.com.co/html/cache/HTML/SIS/FOODSAFETY/

LinaCarolinaCruz-DiagnosticoMicrobiologico.pdf

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO

GRACIAS