Pemeriksaan Hematologi Tim Praktikum Hematologi Prodi DIII Analis Kesehatan Tangerang Poltekkes Depkes Bandung
Pemeriksaan Hematologi
Tim Praktikum Hematologi
Prodi DIII Analis Kesehatan Tangerang
Poltekkes Depkes Bandung
Tahap-tahap pemeriksaan Hematologi dan CBC
Betty Nurhayati, MSi
Jurusan Analis Kesehatan
Poltekkes Depkes Bandung
PENDAHULUAN
Patologi Klinik/Lab Medicine:Cabang ilmu patologi yang berkaitan dengan pemeriksaan spesimen pasien (darah, urine, cairan tubuh lain) Klinik: Rutin, kimia, hematologi, imunoserologi, mikrobiologi.Metode pemeriksaan: kualitatif, semikuantitatif, kuantitatifDilakukan secara: manual, semi otomatik, otomatikPENDAHULUAN
Tujuan tes laboratorium:
SkriningMenegakkan DiagnosisMenunjang D/:Menentukan berat penyakitMenentukan perjalanan penyakitMembantu Menentukan indikasi rawat/pulangMenentukan terapi/follow upPrognosisMembantu proses hukumPENDAHULUAN
Tahap tahap tes Laboratorium:Pra analitik/ pra instrumen: Analitik/ instrumen: Pasca analitik/instrumen:PENDAHULUAN
Tahap prainstrumen
1. Persiapan pasien
4. Penampungan bahan
3. Penyimpanan
5. Pengiriman
2. Pengambilan bahan
Tahap prainstrumen
Persiapan pasien:Makan/puasaHamil: hemodilusiObatTransfusiPENDAHULUAN
Tahap prainstrumen
Pengambilan bahanSiapkan alat perlengkapanIsi formulir lengkapPosisi penderitaBahan pemeriksaanBendunganCara pengambilanwaktuPENDAHULUAN
CARA PENGAMBILAN
CARA PENGAMBILAN
Tahap prainstrumen
3. Penyimpanan :
waktu,
tempat,
tutup Bahan Pemeriksaan
4. Penampungan bahan:
cara,
syarat darah,
antikoagulan
ANTICOAGULANTS
E.D.T.A (ETHYLINE DIAMINE TETRA ACETATE)Tdk mempengaruhi besar/bentuk eri, lekoMencegah trombo menggumpalPemakaian: kristal 1 mg: 1 ml darahlarutan 10%
2. HEPARIN
anti trombinPemakaian: 1 mg: 10 mL darah3. SODIUM CITRAT 3,8%
Pemeriksaan hemostasis: 1 Natrium sitrat :9 darahLED: 1 Natrium sitrat :4 darahtanpa
ANTICOAGULANT
Dengan
ANTICOAGULANT
SERUM
BLOOD CLOT
PLASMA
WBC
RBC
perbedaan:
FIBRINOGEN
HEMOLYSIS
SERUM
PLASMA
+
+
-
+
Tahap prainstrumen
5. Pengiriman:
segera,
formulir,
label
Istilah lain
Pemeriksaan hematologi rutinPemeriksaan darah lengkapComplete Blood Count (CBC)Sysmex (???)Cairan darah
(55%)
Sel darah
(45%)
air
(90%)
SUBSTANSI
(10%)
PROTEIN :- ALBUMIN
- GLOBULIN
- FIBRINOGEN
CARBOHYDRATE LIPID VITAMIN MINERAL ENZYMPemeriksaan hematologi rutin
Memberikan informasi penting tentang macam dan jumlah eritrosit, leukosit dan trombositBagian dari pemeriksaan fisik rutinMembantu :Evaluasi gejala (lemah, lelah, berat badan turun dll)Diagnosa keadaan/ penyakit (anemia, infeksi/leukemia)Monitor respons pengobatanParameter pemeriksaan
Hemoglobin
Hematocrit
Hitung jenis darah:
Hitung leukosit/ diff count
Hitung eri/indeks eri (MCV, MCH, MCHC)
Hitung trombo
Apus darah tepi
LED
Hemoglobin
Komponen utama eritrositTransportasi O2 and CO2.Memberi warna merah sel darahMenurun anemiaIndeks eri
3 indeks eri :
MCV (Mean Corpuscular Volume)
MCH (Mean Corpuscular Hemoglobin)
MCHC (Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration).
MCV
Ukuran eriHt X 1000
MCV = ----------------------------------- fLRBC (in million per L)
MCH
Berisi Hb eriHb (g/L)
MCH = ----------------------------- pgRBC (in million per L)
MCHC
Konsentrasi HbHb (g/dL)
MCHC = ----------------- g/dLHt
Hb
Ht
eri
MCV
menurun microcyterNormal normocytermeningkat macrocyterMCV
MCH/C
menurun hypochromNormal normochromMetode pemeriksaan hemoglobin
Cyanmethemoglobin method*Acid hematin methodTallqvist scaleSpecific gravity methodCyanmethemoglobin
Prinsip: Darah dicampur K3Fe(CN)6 and KCN HiCNReagen:
R/ NaHCO3 : 1.0 gr
KCN : 0.05 gr
K3Fe(CN)6 : 0.20 gr
AQUA : 1000 ml
MATERIAL :
SPECTROPHOTOMETER PIPETS & TUBES Reagen CYAN MET Hb STANDARDMETHOD :
Tabung:
5 ml DRABKIN + 0.02 ml
Campur biarkan 5 menit
PHOTOMETRIC (l : 520 nm)
ABSORBANCE OF SAMPLE
ABSORBANCE OF STANDARD
X
Hb STANDARD ( 15 g/dL)
1. TALLQVIST METHOD
MATERI : - BLOOD LANCET
- TALLQVIST BOOK
PRINSIP :
Membandingkan warna darah terhadap
skala warna
100% 15.8 gr %
Hb : %
2. METODE SAHLI
PRINSIP : Hb + HCl HEMATINE ACID (warna coklat)
Warna yang tebentuk dibandingkan dengan standar
METHOD:
Eror dalam hemoglobinometry
Error dalam penanganan sample
Errors dalam pemeriksaan
Errors dalam alat
Error operator
Arti Klinis
Normal tergantung faktor2: umur, kelamin, ketinggian, kehamilan Menurun anemiaMeningkat hemoconcentration:Kehilangan cairan Suplai oksigen menurun Polycythemia veraMeningkat/menurun: membutuhkan pemeriksaan lebih lanjut.Hematokrit
Ratio volume eritrosit terhadap volume darah % (conventional)(SI units) L/LPacked Cell Volume (PCV)Pengukuran :
Direct centrifus (micromethod & macromethod)Indirect automated instrument MCV X RBC countsumber error:
Centrifugation
Sample
other
Micromethod
CREATOSEAL
READING
DEVICE
TOP OF PLASMA
TOP OF RBC
THE BOTTOM OF RBC
READ : USING READING DEVICE
NORMAL : MEN : 40 - 54%
WOMEN : 37 - 47%
METHOD :
1
2
3
BLOOD EDTA
makrohematokrit
Arti Klinis
Sama dengan hemoglobinPEM HITUNG JENIS :
Manual :HemocytometerKalkulasi untuk indeks eriAutomatik (hematologic analyzer)Hitung leukosit
konsentrasi sel per unit volume darah(mm3).meningkat leucocytosisMenurun leucopeniaLEUKOCYTE
ERYTHROCYTE
1. THOMAS PIPET
2. COUNTING CHAMBER
3. DILUTING FLUID
4. HEMOLANCET
COTTON + 70% ETHANOL
TURK
..
- HAYEM
- FORMAL CITRATE
COUNTING CHAMBER = IMPROVED NEUBAUER
BURKER , ETC.
COLOUR BAND
&
NEWTONS RING
CHAMBER DEPTH = 0.1 mm
..
W
W
IMPROVED NEUBAUER
LEUKOCYTES COUNT :
4 CORNER SQUARES ( L ) = 1 X 1 X 0.1 mm3
ERYTHROCYTES COUNT :
1
5
1
5
X
X 0.1
mm3
5 SQUARES ( E )
1
20
1
20
1
10
X
X
mm3
80 SQUARES :
LEUKOCYTE COUNT
TURK
SOLUTION
..
COUNT BY MICROSCOPE
CONDENSOR : DOWN WARD
OBJECTIVE : 10 X
CALCULATION :
NORMAL :
Dewasa : 4.000 - 10.000 mm3
Bayi baru lahir : 10.000 - 12.000 mm3
1-6 bulan : 4.000 - 15.000 mm3
4-7 tahun : 4.000 - 11.000 mm3
8-12 tahun : 4.000 - 10.000 mm3
IMPROVED NEUBAUER
COUNTING CHAMBER
1
10
mm3 = N. CELLS
4
1 X 1 X
4
10
mm3 = N. CELLS
1 mm3 = N X X 20
4
10
= N X CELLS
200
4
LARGE CORNER SQUARES
Hitung eri
Konsentrasi sel per unit volume darah (mm3).menurun anemiameningkat polycythaemiaRED BLOOD CELLS COUNT (ERYTHROCYTE)
HAYEM
SOLUTION
6
COUNT BY MICROSCOPE
CONDENSOR : DOWN WARD
OBJECTIVE : 10 X /40X
IMPROVED NEUBAUER
COUNTING CHAMBER
COUNT IN THE RED CELLS IN
5 SQUARES
1
5
1
5
1
10
X
X
mm3
= N.CELLS
VOL = 5 X
1
5
1
5
1
10
X
X
=
mm3
1
50
1 mm3 = 50 X 200 X N. CELLS
(WHOLE BLOOD) = 10.000 X N. CELLS
NORMAL :
MEN 4.5 - 5.5 million/mm3
WOMEN 4.0 - 6.0 million/mm3
Hitung trombosit
Konsentrasi sel per unit volume darah (mm3).menurun thrombocytopeniameningkat thrombocytosis6. THROMBOCYT COUNT
MATERIALS :
- PIPET THOMA FOR ERYTHROCYTE
- 1 % AMM. OXALAT SOLUTION
- HAEMOCYTOMETER (IMPROVED NAUBAUER)
1 mm3 = N X 50 X 100
=N X 5000 CELLS
NORMAL= 150.000 - 400.000 / mm3
Apus Darah Tepi
Memberi informasi tentang ukuran, warna, bentuk, mofologi, and jumlah sel darah (erythrocyte, leukocyte and platelet)2 methods :Slide-to-slide / push smearAutomatic spinnerPewarnaan: RomanowskyMETHOD
SMEAR OF BLOOD
TAIL
(THIN)
HEAD
THICK
GIEMSA
FIXATI 96% METHANOL 2 - 3 warnai dengan GIEMSA (IN 1 : 10) 20 Cuci dengan air mengalirDiffcount
5 macam jenis sel leukositMasing2 jenis berperan dalam mempertahankan tubuhJumlah setiap jenis penting dalam memberikan informasi sistem imun.%DIFFERENTIAL CELLS (LEUKOCYTE) COUNT
NORMAL ABNORMAL
1. BASOPHILS 0 - 1 % BASOPHILIA -
2. EOSINOPHIL 1 - 3% EOSINOPHILIA ALLERGIC CONDITION
PARACITIC INVESTATION
SCARLET FEVER
LEUKEMIA
3. STAB CELL 2 - 6% SHIFT TO THE LEFT INFECTION
4. SEGMENT 50 - 70% NEUTROPHILIA APPENDICITIS ACUTE
BACTERIAL INFECTION
LEUKEMIA
5. LYMPHOCYTE 20 - 40% LYMPHOCYTOSIS VIRAL INFECTION
LEUKEMIA
6. MONOCYTE 2 - 8 % MONOCYTOSIS BRUCELLOSIS
TUBERCULOSIS
LEUKEMIA
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 COUNT NORM
BASOPHILS - - - - - - - - - - - 0 - 1
EOSINOPHILS I - - - - - - - - II 3 1 - 3
STAB. II II - - - - - - - - 4 2 - 6
SEGMENT IIII I IIII IIII II IIII I IIII II IIII IIII I IIII IIII I IIII 58 50 - 70
LYMPHOCITE I II II IIII III IIII IIII IIII IIII III 33 20 - 40
MONOCYTE - I I - - - - - - - 2 2 - 8
COUNT 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 100
3. NEUTROPHIL CELL
BASOPHIL CELL
. EOSINOPHIL CELL
A. STAB CELL
4. LYMPHOCYTE CELL
B. LARGE LYMPHOCYTE CELL
5. MONOCYTE CELL
SEGMENT NEUTROPHIL CELL
SMALL LYMPHOCYTE CELL
- NORMAL : SIZE UNIFORM
SHAPE ROUND
BICONCAVE
FROM ABOVE
FROM SIDE
F 6 - 9 m m (7 m m)
EVALUATION OF MORPHOLOGIC BLOOD CELLS
1. ABNORMALITIES OF SIZE :
ANISOCYTOSIS
A. MICROCYTIC
4 - 6 m m
B. MACROCYTIC
10 - 12 m m
C. SHCIZOCYT
(FRAGMENT)
D. MEGALOCYTIC
( 12- 25 m m)
2. ABNORMALITIES OF SHAPE
(POIKILOCYTOSIS)
A. TARGET CELLS
B. CRENATED CELLS
C. SPHEROCYT
D. ACANTHOCYT
E. BURR CELL
F. CRESCENT BODY
G. OVALOCYT /
ELLIPHTOCYT
H. SICKLE CELL
I. TEAR DROP APP.
J. LEPTOCYT
K. BIZZARE
ERYTHROCYTE
NORMOCHROM NORMOCYTIC
3. ABNORMALITY OF COLOUR :
A. HYPOCHROM
B. HYPERCHROM
C. POLYCHROMATION
D. STOMATOCYTE
4. INCLUSION BODY
A. BASOPHYLIC STIPLING
B. MALARIAL STIPLING
C. SIDEROSIT
D. CABOTS RING
E. HOWEL-JOLLY BODY
ABNORMAL MORPHOLOGIC OF LEUKOCYTE
ARTEFACT :
1. HYPERSEGMENTATION
( 5 OR MORE SEGMENT)
2. DEGENERATED NEUTROPHILS
WITH PIKNOTIC NUCLEUS
3. KARYOREXIS
4. TOXIC GRANULES
(INFECTION POISONING BURN)
5. VACUOLIZATION
6. DOHLES (INCL.) BODIES
INFECTION POSITION BURN
7. AUER RODS
8. BARR BODY
9. PELGER-HUET ANOMALY
( < 2 LOBES)
CRENATED ROULEAUX SMUDGE
CELL FORMATION CELL
BLOOD PARASITES
MALARIAL PARASITE
THIN BLOOD FILM
THICK BLOOD FILM
DRY
FIXATION WITH
96% ETHANOL
DRY
DROP WITH WATER : HAEMOLYSIS
STAIN BY GIEMZA FOR 30
RINSE WITH AQUADEST / BUFFER
DRY
MICROSCOPE EXAMINATION
LOOK FOR : PL ; VIVAX, MALARIAE, FALCIPARUM & OVALE
VIVAX
MALARIAE
FALCIPARUM
OVALE
TR
TR
TR
SCHIZONT
GAMET
LOOK FOR : PL ; VIVAX, MALARIAE, FALCIPARUM & OVALE
VIVAX
OVALE
TR
TR
TR
SCHIZONT
GAMET
Falciparum
Laju Endap Darah
Menghitung pengendapan eritrosit dalam dalam darah persatuan waktu (1 jam) Menghitung jarak antara puncak meniskus plasma darah thd pengendapan eritrosit.Tidak terlalu spesifik untuk diagnostik penyakitDigunakan untuk skrining inflamasiFaktor yang mempengaruhi
Ukuran dan bentuk eritrositTingkat plasma fibrinogen & globulin MekanikTeknikMetode pemeriksaan LED :
Manual :Westergren MethodWintrobe & Landsberg MethodAutomatic1.6 mL BLOOD
0.4 ml 3.8% SOD. CITRATE
Normal :
laki-laki0-15 mm/jam
wanita0-20 mm/jam
Hasil Hematologi Rutin
Nilai normal bervariasi dari laboratorium ke laboratoriumNilai normal hematologi rutin bervariasi, tergantung umur, sex, ketinggian, and jenis sampel of sample.Denise M. Harmening
Clinical Hematology and
Fundamentals of Hemostasis
Fourth edition
FA Davis Company
Any questions ???
Thank You