Lapres Oligo & Tdt Revisi

8/18/2019 Lapres Oligo & Tdt Revisi

1/27

Laboratorium Mikrobiologi

Teknik

1

Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Teknik

LAPORAN RESMI

OLIGODINAMIK DAN THERMAL DEATH TIME

I. Tujuan

I.1 Oligodinamik

Tujuan percobaan oligodinamik yaitu mengetahui pengaruh logam terhadap

pertumbuhan mikroorganisme.

I.2 Thermal Death Time

Tujuan percobaan Thermal Death Time yaitu mengetahui waktu terpendek

yang di butuhkan untuk membunuh mikroorganisme pada suhu dan kondisi

tertentu serta mengetahui % kematian rata-rata per menit.

II. Data Pengamatan

II.1 Oligodinamik

Tael II.1 Hasil Pengamatan Percobaan Oligodinamik dengan Logam Zn

!eni"

Loga

m

#aktu

Pengamatan

!eni" $akte%i

Escherichia coli Azotobacter

chroococcum

Zn ! jam


2/27


Teknik

2


Diamete% logam " cm

&ona ea" akte%i " #

cmKeadaan logam' sedikit

berkarat

Keadaan oligodinamik "

Tidak ditumbuhi bakteri

Keadaan akte%i'

Tumbuh dengan baik$

tersebar rata$ berwarna

putih pekat

Diamete% logam ' cm

&ona ea" akte%i '$

cmKeadaan logam' tidak

berkarat

Keadaan oligodinamik'


Keadaan akte%i'

Tersebar rata$ tumbuh

dengan baik$ berwarna

putih kekuningan

Zn & jam

Diamete% logam ' cm

&ona ea" akte%i " #$

cm

Keadaan logam'

'erkarat



Keadaan akte%i'

Tumbuh dengan baik$

bakteri memenuhi petri

dish

Diamete% logam ' cm

&ona ea" akte%i "#$!

cm

Keadaan logam'

'erkarat



Keadaan akte%i'

Tumbuh dengan baik dan

merata pada petri dish


3/27


Teknik

3


Tael II.2 Hasil Pengamatan Percobaan Oligodinamik dengan Logam (u

!eni"

Logam

#aktu

Pengamatan

!eni" $akte%i

Escherichia Coli Azotobacter chroococcum

(u ! jam

Diamete% logam " !$) cm

&ona ea" akte%i '

$!cm

Keadaan logam' *edikit

berkarat



Keadaan akte%i'

+enyebar merata$

berwarna pekat

Diamete% logam ' !$) cm

&ona ea" akte%i ' !$,

cm

Keadaan logam' *edikit

berkarat



Keadaan akte%i'

+enyebar merata$ berwarna

putih pekat

(u & jam


4/27


Teknik

4



&ona ea" akte%i ' $&

cmKeadaan logam'

*emakin berkarat



Keadaan akte%i'

+enyebar merata pada

petri dish


&ona ea" akte%i ' cm

Keadaan logam' semakin berkarat


Keadaan akte%i'


pekat

Tael II.( Hasil Pengamatan Percobaan Oligodinamik dengan Logam l

enis

Logam

/aktu

Penga

matan

enis 'akteri

Escherichia Coli Azotobacter chroococcum


5/27


Teknik

5


l ! jam

Diamete% logam " !$& cm

&ona ea" akte%i " 0

cm

Keadaan logam" tidak

berkarat


ditumbuhi bakteri

Keadaan akte%i'

+enyebar merata$

berwarna putih pekat

Diamete% logam " !$1 cm

&ona ea" akte%i " 0 cm

Keadaan logam" tidak

berkarat


ditumbuhi bakteri

Keadaan akte%i'


putih pekat

l & jam

Diamete% logam ' !$& cm

&ona ea" akte%i " 0

cm

Keadaan logam' tidak

Diamete% logam ' !$1 cm

&ona ea" akte%i ' 0 cm

Keadaan logam' tidak

berkarat


6/27


Teknik

6


berkarat


ditumbuhi bakteriKeadaan akte%i'

+enyebar merata pada

petri dish


ditumbuhi bakteri

Keadaan akte%i'+enyebar merata pada petri

dish

II.2 Thermal Death Time

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! !, !) !2 !) !2 2, !)$2

Tael II. , Hasil Percobaan Thermal Death Time pada Pemanasan 0 menit

Tael II. - Hasil Percobaan Thermal Death Time pada Pemanasan menit

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! ! !0 2 , !2 0 !0

Tael II. Hasil Percobaan Thermal Death Time pada Pemanasan !0 menit

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! & & # ! &$

Tael II. / Hasil Percobaan Thermal Death Time pada Pemanasan ! menit

Run Kotak Total !umla)

Sel *


7/27


Teknik

7


Kotak

A $ + D E

! ! 0 & & !! $

Tael II. 0 Hasil Percobaan Thermal Death Time pada Pemanasan 0 menit

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! # 0 & # ! $&

Tael II. Hasil Perhitungan % 3ematian *el 4ata-rata

#aktu

menit3

!umla) "el

akte%i

Log jumla) "el

akte%i3

4 Kematian Rata5%ata

* menit

0 &.&0.000 1$1&2 -

.00.000 1$#,2 2$)1&0& %!0 !.00.000 1$0! $2 %

! 0.000 $)&0 #$!)&10# %

0 100.000 $))2 -0$&& %

Total ,.!0.000

4ata-4ata &$#!01 %

III. Pema)a"an

III.1 Oligodinamik

Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh logam berat terhadap

pertumbuhan mikroorganisme. Logam yang digunakan adalah Zn$ (u$ dan l

serta bakteri yang digunakan adalah Escherichia coli dan Azotobacter

chroococcum.


8/27


Teknik

8


Logam sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan mikrobia. Hal ini karena

logam mempunyai daya oligodinamik yaitu daya bunuh logam pada kadar yang

sangat rendah. 5aya ini timbul karena logam dapat mempresipitasikan en6im-en6im dalam sel. Logam berat yang umum digunakan untuk percobaan ini adalah

Hg$ g$ s$ Zn$ dan (u.

7Tortora$ 0!08

Percobaan ini dimulai dengan mengisi 1 tabung reaksi dengan media

7 Nutrien Broth Agar) cair masing-masing !9# dari ukuran tabung rekasi. +edia

:' 7 Nutrient Broth Agar 8 merupakan suatu ekstrak cair jaringan daging sapi$

dikonsentrasikan menjadi pasta. 3andungan dalam :' ini adalah substansi

jaringan hewan yang dapat larut dalam air$ meliputi karbohidrat$ senyawa nitrogen

organik$ ;itamin yang larut dalam air$ dan garam-garaman.


9/27


Teknik

9


autoclave adalah sterilisasi yang e=ekti= karena uap air panas dengan tekanan

tinggi menyebabkan penetrasi uap air ke dalam sel-sel mikroba menjadi optimal

sehingga mematikan mikroba. Pada percobaan ini$ sterilisasi dilakukan pada suhu!!o( selama ! menit dengan tekanan ! psig. *uhu serta waktu sterilisasi ini

didasarkan pada kondisi e=ekti= autoclave untuk mematikan semua kontaminan.

7+adigan$ 0!8

*elagi mensterilkan petri dish serta tabung reaksi$ logam (u$ Zn$ dan l

dibersihkan dengan H:O# !0%. lasan penggunaan H:O# !0% adalah untuk

menghilangkan pengotor dan membersihkan logam dari kerak$ minyak$ endapan$

kotoran yang menempel dan 6at lainnya yang dapat mempengaruhi daya

oligodinamik3adar !0% dipilih karena H:O# merupakan larutan asam kuat

sehingga dengan kadar !0% sudah cukup untuk membersihkan logam dan tidak

sampai melepuhkannya. 4eaksi yang terjadi saat logam > logam tersebut dicuci

dengan H:O# adalah sebagai berikut "

l ? 1H:O# @ l#? ? 1:O#

- ? #H

Zn ? H:O# @ Zn? ? :O#

- ? H

(u ? H:O# @ (u? ? :O#

- ? H

7*ubagio$ 0!#8

*elain itu H:O# yang digunakan adalah !0% yang berkonsentrasi rendah$

tidak menggunakan H:O# pekat karena akan menghasilkan gas :O yang

merupakan gas beracun dan berbahaya untuk kesehatan karena karsingenik.

4eaksi yang terjadi antara logam (u dengan H:O# pekat sebagai berikut"

(u7s8 ? & H:O# 7aA8 → (u7:O#8 7aA8 ? HO7l8 ? :O 7g8

7www.ccchemistry.us8

*elanjutnya$ logam-logam tersebut dicuci dengan aquadest agar kondisinya

netral$ pH merupakan salah satu =aktor dalam pertumbuhan mikroba$ jika logam

tidak dibersihkan dengan aquadest maka akan logam dalam keadaan asam

sehingga mengganggu pertumbuhan mikroba nantinya. Logam dikeringkan diatas

nyala api agar sisa mikroba mati$ lalu didinginkan sesaat. +asing-masing logam

yang sudah dingin selanjutnya diletakkan ditengah petri dish yang sudah steril.


10/27


Teknik

10


*etelah proses sterilisasi selesai$ 1 tabung reaksi diinokulasikan bakteri

secara aseptik sebanyak ! lup penuh. Teknik aseptik adalah teknik perpindahan

mikroorganisme dari satu culture ke culture lain$ teknik ini dikatakan berhasil jikatidak ada kontaminasi atau dalam keadaan steril. Oleh karena itu$ teknik ini

dilakukan di laminar flo atau di incase.

7'enson$00!8

# tabung reaksi diinokulasikan dengan bakteri Escherichia coli dan #

tabung reaksi lainnya dengan bakteri Azotobacter chroococcum. *edangkan petri

dish blanko digunakan sebagai pembanding tingkat sterilitas media agar yang

digunakan.


11/27


Teknik

11


inkubator posisi dari petri dish terbalik. Hal ini bertujuan agar tidak ada uap air

dari reaksi metabolisme mikroorganisme dan sisa-sisa uap air pada petri dish yang

menetes ke media agar di petri dish sehingga dapat membuat proses pembiakanterkontaminasi. 4eaksi metabolisme tersebut adalah"

(1H!O1 ? 1O ? 1HO 1(O ? !HO

*etelah ! jam diinkubasi$ pada logam Zn dengan diameter cm memiliki

6ona bebas bakteri pada biakan Escherichia coli sebesar # cm. Zona bebas bakteri

ini berwarna kekuningan$ serta keadaan bakteri yang tumbuh dengan baik tersebar

merata ke semua bagian petri dish dan berwarna putih pekat. Logam Zn nya pun

menjadi sedikit berkarat yang terjadi karena kurang bersih saat mencuci logam Zn

dengan aquadest sehingga dalam keadaan asam. Tidak jauh beda dari Escherichia

coli" untuk bakteri Azotobacter chroococcum$ 6ona bebas bakterinya lebih sempit

yaitu $ cm dengan keadaan 6ona bebas bakteri bersih$ bakteri tumbuh dengan

baik$ tersebar merata serta berwarna putih kekuningan$ dan logam tidak berkarat

seperti pada bakteri Escherichia coli. *elanjutnya$ pengamatan pada & jam$

didapatkan bahwa pada logam Zn$ bakteri mulai tumbuh disekitar 6ona bebas

bakteri namun juga melebar. *ehingga$ diameter 6ona bebas bakterinya menjadi

#$ cm untuk Escherichia coli dan #$! cm untuk Azotobacter chroococcum.

Logamnya pun makin terlihat berkarat.

7a8 7b8


12/27


Teknik

12


7c8 7d8

Gama% III. 2 Hasil pengamatan oligodinamik logam Zn setelah ! am pada 7a8

bakteri Escherichia coli 7b8 Azotobacter chroococcum. Pengamatan oligodinamik

logam Zn setelah & jam pada 7c8 bakteri Escherichia coli 7d8 Azotobacter

chroococcum.


13/27


Teknik

13


7c8 7d8

Gama% III. ( Hasil pengamatan oligodinamik logam (u setelah ! am pada

7a8 bakteri Escherichia coli 7b8 Azotobacter chroococcum. Pengamatan

oligodinamik logam (u setelah & jam pada 7c8 bakteri Escherichia coli 7d8

Azotobacter chroococcum.


14/27


Teknik

14


terbentuk 6ona bebas bakteri pada ;ariabel ini. Penyimpangan ini kurang lebih

disebabkan karena adanya resistensi mikroba terhadap logam berat$ seperti yang

telah dijelaskan pada literatur. Pada umumnya$ ion logam mengikat 5:$ 4:$en6im$ dan protein seluler$ sehingga menyebabkan kerusakan sel dan kematian.

dalah bakteri gram-positi= maupun gram-negati=$ dipengaruhi oleh e=ek

oligodinamik logam berat. :amun$ ada beberapa jenis bakteri yang mengandung

=aktor genetik resistensi terhadap logam berat. Penentu resistensi ini sering

ditemukan pada plasmid dan transposons.

74ajani$ 00,8

III.2 Thermal Death Time

Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui waktu terpendek yang

dibutuhkan untuk membunuh mikroorganisme pada suhu dan kondisi tertentu

serta mengetahui % kematian rata-rata9menit. 'akteri yang digunakan pada

percobaan ini adalah Escherichia coli.

*uhu adalah salah satu =aktor yang mempengaruhi terhadap pertumbuhan

bakteri. 5engan suhu$ mikroba seperti bakteri dapat terhambat pertumbuhannya

ataupun mati. *uhu minimal dimana semua mikroorganisme dalam suspensi cair

mati pada waktu !0 menit disebut Thermal Death !oint 7T5P8. Lalu$ terdapat

istilah Thermal Death Time yaitu waktu minimal untuk bakteri dalam media cair

pada suhu tertentu. Cstilah lain dalam percobaan ini ialah Decimal #eduction Time

754T8 atau disebut juga D $alue yaitu waktu dalam menit yang dibutuhkan untuk

membunuh ,0% populasi bakteri pada suhu tertentu.

7Tortora$ 0!08

Langkah pertama yang harus dilakukan adalah menyiapkan & buah tabung

reaksi dan ! buah Erlenme%er untuk tempat suspensi larutan isotonik dengan

Escherichia coli. *etiap peralatan yang digunakan disterilkan dengan alkohol

)0% agar percobaan dilakukan secara aseptik. *terilisasi alat sebelum percobaan


15/27


Teknik

15


ini dilakukan karena alat-alat operasi yang dipergunakan harus dipertahankan

sterilitasnya sampai pelaksanaan operasi selesai dan segera dibersihkan setelah

selesai digunakan agar tidak terjadi kontaminasi yang mengganggu pengamatan pada percobaan nantinya. Penggunaan alkohol )0% pada percobaan ini karena

e=ekti= memecah protein yang ada dalam mikroorganisme$ tidak merusak

material$ dapat dibiodegradasi$ hanya sedikit turun akti;asinya bila berinteraksi

dengan protein.

7dji$ 00)8

Larutan isotonik adalah larutan di mana keseluruhan konsentrasi dari 6at

terlarut sama dengan yang ditemukan di dalam sel 7iso berarti sama8. Larutan ini

digunakan sebagai media inokulasi agar mikroba tidak mengalami lis%s" yaitu

peristiwa pecahnya sel mikroorganisme akibat konsentrasi cairan di luar sel lebih

kecil daripada konsentrasi di dalam sel 7larutan hipotonik8 sehingga air bergerak

masuk ke dalam sel. *ebaliknya$ bila konsentrasi cairan di luar sel lebih besar

daripada konsentrasi di dalam sel 7larutan hipertonik8 sehingga air dalam sel

bergerak keluar sel.

7Tortora$ 0!08

Langkah selanjutnya adalah memasukkan 0 ml larutan isotonik ,%

campuran aAuadest dan :a(l ke dalam erlenme%er. 3emudian menginokulasikan

Escherichia coli kedalamnya secara aseptik dengan metode celup sebanyak lup

dan diaduk hingga homogen pada incase.

Empat tabung reaksi yang telah diberi label $ '$ ($ 5$ dan E diisi dengan

!0 ml larutan :a(l atau disebut larutan isotonik ,% dengan bakteri Escherichia

coli. !0 ml sisa larutan tetapberada di erlenme%er. Tabung '$ ($ 5 dan E

dipanaskan di ater bath pada suhu 1o( selama menit untuk tabung '$ !0

menit untuk tabung ($ ! menit untuk tabung 5$ dan 0 menit untuk tabung E.

Tabung tidak dipanaskan untuk pembanding jumlah keadaan awal Escherichia

coli sebelum ada e=ek panas. /aktu pemanasan yang berbeda-beda bertujuan agar

dapat mengetahui perbedaan jumlah bakteri yang mati ber dasarkan =ungsi waktu.

Pemilihan suhu 1 o( berdasarkan literatur bakteri E.coli akan rusak atau mati

pada suhu 10 o( - )! o( . Oleh karena rentang suhu kematian E.coli maka


16/27


Teknik

16


dipilihlah suhu 1 o(. 3emudian dilakukan pengamatan pada suspensi

Escherichia coli dari masing-masing tabung setelah dipanaskan pada waktu yang

telah ditentukan. Pengamatan dilakukan menggunakan counting chamber. +etodecounting chamber merupakan perhitungan jumlah mikroorganisme menggunakan

bantuan mikroskop dan hemasitometer.

7


17/27

!

" #

$


Teknik

17


permukaan kaca. lat ini didesain dengan ketelitian tinggi sehingga ketebalan dan

luas area pada ruang kotak diketahui. 3isi penuh hemasitometer terdiri dari

sembilan persegi besar dimana masing-masing persegi memiliki luas ! mm

.dimana garis-garis pada kotak bagian tengah$ terdapat kotak besar berukuran

1

25mm

2 dan ! kotak besar terdiri dari kotak kecil yang berukuran

1

400mm

2

pada kotak $ '$ ($ 5$ dan E.

7'astidas$ 0!8

7a8 7b8

Gama% III.- 3isi pada hemasitometer. 7a8 Petak-petak hemasitometer 7b8 *atu

sektor hemasitometer

(ara perhitungan sel mikroorganisme pada metode counting chamber ini$

masing-masing sel yang berada dalam kelima kotak $ '$ ($ 5$ dan E dihitung$

termasuk sel yang berada tepat maupun menyentuh atas dan sebelah kanan ketiga

garis dalam kotak$ sedangkan sel yang berada tepat maupun menyentuh bagian

bawah dan sebelah kiri ketiga garis kotak tidak dihitung diantara tiga garis tetapi

sel yang ada. Penjelasan sel mana yang dihitung seperti gambar CCC.1

7'astidas$ 0!8


18/27


Teknik

18


Gama% III. (ara perhitungan sel pada hemasitometer. *el dengan bulatan

penuh tidak dihitung$ sel dengan bulatan tidak penuh dihitung.

Langkah perhitungan sel dengan metode ini diawali dengan carameneteskan suspensi dari tabung ke atas hemasitometer dan kemudian menutup

hemasitometer dengan menggunakan dec& glass. Bungsi dec& glass sebagai

tempat menaruh 6at yang diuji.Pengamatan pada persobaan ini menggunakan

mikroskop cahaya binokuler yang disebut compound light microscope. 'erbeda

dengan mikroskop kon;ensional yang menggunakan cahaya matahari$ mikroskop

ini menggunakan cahaya lampu dengan sumber listrik. +ikroskop ini memiliki

dua lensa okuler atau lensa yang berhadapan dengan objek yang diamati.

5alam melakukan pengamatan$ dilakukan penghitungan jumlah sel terhadap

buah kotak : seperti Gambar CCC.1 yang diberi nama $ '$ ($ 5$ dan E dengan

pembagian & buah kotak pada masing-masing sudut dan satu buah kotak pada

bagian tengah. Penghitungan sel dilakukan sebanyak satu kali$ kemudian hasilnya

dirata-rata. Pengulangan perhitungan ditujukan untuk menambah keakuratan hasil

percobaan. *etelah selesai$ prosedur diulangi kembali untuk larutan dengan

menggunakan suspensi tabung '$ ($ 5 dan E.

+elalui hasil pengamatan$ untuk suspensi erlenmeyer tanpa pemanasan

didapatkan rata-rata jumlah sel9kotak sebesar !)$2 sehingga jumlah sel bakteri

sebesar &.&0.000 sel 9 ml sampel. Pada pemanasan menit didapatkan rata-rata

jumlah sel9kotak sebesar !0$ sehingga jumlah sel bakteri sebesar .00.000 sel 9

ml sampel. . Pada pemanasan !0 menit didapatkan rata-rata jumlah sel9kotak

sebesar &$$ sehingga jumlah sel bakteri sebesar !.00.000 sel 9 ml sampel. Pada

pemanasan ! menit didapatkan rata-rata jumlah sel9kotak sebesar $$ sehingga

jumlah sel bakteri sebesar 0.000 sel 9 ml sampel. Pada pemanasan 0 menit

didapatkan rata-rata jumlah sel9kotak sebesar $&$ sehingga jumlah sel bakteri

sebesar 100.000 sel 9 ml sampel. +elalui hasil pengamatan$ dapat diperoleh

gra=ik hubungan antara waktu dengan log sigma sel dengan jumlah sel sebagai

berikut"


19/27


Teknik

19


0 5 10 15 20 25

5%2

5%4

5%6

5%8

6

6%2

6%4

6%6

6%8

&'() * + 0%05( , 6%6R- * 0%92

t menit3

Log SelƩ

Gama%

Gama% III./ Gra=ik Hubungan antara /aktu dengan Log *elPada gra=ik di atas$ terlihat bahwa gra=ik memiliki gradien negati= yang

berarti bahwa jumlah sel mikroorganisme yang mati berbanding lurus dengan

lama waktu pemanasan. 5engan demikian semakin lama waktu pemanasan suatu

suspense Escherichia coli maka jumlah sel di dalamnya juga semakin sedikit.

5ari tabel pengamatan$ juga didapatkan bahwa % rata-rata kematian dengan cara

selisih antara log sel awal dengan log sel akhir dibagi dengan log sel awal

dikali !00 %. Pada menit pertama 2$)1&0& %lalu !0 menit menjadi $2%$ !


20/27


Teknik

20


menit #$!)&10# % dan 0 menit -0$&& %%. *ehingga didapatkan % rata-raa

kematian &$#!01 %. 5ari hasil percobaan$ rata-rata memiliki nilai yang

semakin menurun$ namun sangat berbeda untuk data ;ariabel 0 menit. Hal inidikarenakan$ suspensi bakteri yang diambil saat pengamatan pada bagian atas

yang mengandung banyak bakteri.

Periode terpendek untuk mematikan bakteri Escherichia coli adalah dengan

menginput nilai y I log 0$00000!$ maka y I -1. Perlu diketahui bahwa suatu 6at

atau benda dikatakan steril bila jumlah mikrobanya 0$00000!. *ehingga didapat

nilai J atau periode terpendek bakteri akan mati dengan persamaan yang didapat

dari slope . I -0$0&2J ? 1$,11 adalah 1$&, menit.

7:guyen$ 0018

I6. !a7aan Pe%tan8aan

I6. 1 Oligodinamik

!. *ebutkan logam-logam lain yang mempunyai daya oligodinamikK

!a7a '

Logam berat seperti Hg$ g$ (u$ u$ dan Pb pada kadar rendah dapat bersi=at

meracun 7toksis8. Logam berat mempunyai daya oligodinamik$ yaitu daya bunuh

logam berat pada kadar rendah. *elain logam berat$ ada ion-ion lain yang dapat

mempengaruhi kegiatan =isiologi mikroba$ yaitu ion sul=at$ tartrat$ klorida$ nitrat$

dan ben6oat. Con-ion tersebut dapat mengurangi pertumbuhan mikroba tertentu.

7+ilasari$ 0!08

. Perbedaan apakah yang tampak pada pertumbuhan Escherichia coli dan Azotobacter chroococcum

!a7a '

Perbedaan pertumbuhan antara Escherichia coli dan Azotobacter chroococcum

adalah diameter 6ona bebas bakteri pada Escherichia coli lebih besar daripada

6ona bebas bakteri Azotobacter chroococcum. Zona bebas bakteri ini disebabkan

oleh 5aya Oligodinamik. 3oloni bakteri menyebar merata di seluruh media di

luar 6ona bebas bakteri.


21/27


Teknik

21


7Tortora$ 0!08

#. +engapa logam sebelum digunakan harus dicuci dulu dengan H:O#!a7a'

Logam dicuci dengan H:O# untuk menghilangkan pengotor yang berada dalam

logam tersebut dengan membentuk ion-ion sehingga nantinya tidak mengganggu

daya oligodinamik pada logam tersebut.

7*ubagio$ 0!#8

&. pakah pengaruhnya bila logam tersebut digunakan untuk bahan konstruksi

alat =ermentasi$ jelaskanK

!a7a"

Logam memiliki daya oligodinamik. pabila logam digunakan untuk bahan

konstruksi alat =ermentasi$ maka akan mengganggu pertumbuhan bakteri yang

menjadi agen =ermentasi$ sehingga =ermentasi dapat terhambat pertumbuhannya

bahkan =ermentasi tidak dapat berjalan.

7+ilasari$ 0!08

I6. 2 Thermal Death Time

'. pakah yang dimaksud dengan Thermal Death Time" Thermal Death #ate dan

Thermal Death !oint

!a7a '

- Thermal Death Time adalah periode terpendek yang dibutuhkan untuk

mematikan suatu suspensi bakteri pada suhu tertentu di bawah keadaan

tertentu.

- Thermal Death #ate adalah angka kematian pada suatu temperatur.

- Thermal Death !oint adalah temperatur yang serendah-rendahnya yang dapat

membunuh bakteri yang berada di dalam standart medium selama !0 menit.

7Tortora$ 0!08


22/27


Teknik

22


. Hal-hal apakah yang perlu diperhatikan dalam menentukan Thermal Death

Time dan Thermal Death #ate

!a7a '- Thermal Death Time " Temperatur dan waktu

- Thermal Death #ate " 5aya tahan masing-masing bakteri berdasarkan jenis

bakteri 7psiko=il$ meso=il atau thermo=il8 dan usia sel

7Tortora$ 0!08

#. 5alam hal apakah 7bidang apakah8 percobaan ini diterapkan$ jelaskan

!a7a'

5alam hal sterilisasi peralatan laboratorium dan sterilisasi makanan maupun

minuman$ misalnyan pada pasteurilisasi susu$ pengeringan makanan$ pada saat

memasak makanan dll.

&. +etode apakah yang paling e=ekti= untuk sterilisasi liAuida yang mungkin

mengandung bakteri pembentuk spora

!a7a'

+etode yang paling e=ekti= adalah pasteurisasi. +etode ini biasa digunakan untuk

mensterilisasi susu$ beer$ dan wine. +etode pasteurisasi yang paling sering

digunakan adalah (igh temperature short time(T*T+ pasteurization$ yaitu

metode pasteurisasi yang dilakukan pada suhu )#M( dan hanya memakan waktu

! detik.

7Tortora$ 0!08

. 'agaimana cara saudara melakukan suatu eksperimen untuk menentukan

waktu T5T dari Escherichia coli. +ulailah dengan data-data yang telah

saudara dapatkan dalam percobaan.

!a7a'

5ari data yang diperoleh$ dibuat gra=ik antara waktu ;s log jumlah sel. :antinya

pada gra=ik tersebut didapatkan persamaan dari slope gra=ik. Persamaan tersebut

digunakan untuk mendapatkan T5T atau nilai J dengan syarat nilai y I log

0$00000!$ atau y I -1. Perlu diketahui bahwa menurut *terilization Assurance


23/27


Teknik

23


,evel 7*A,8 dan +icrobiological (ontamintion Le;el 7+(L8 suatu 6at atau benda

dikatakan steril bila jumlah mikrobanya 0$00000!.

7:guyen$ 00186. Ke"im9ulan

6.1 Oligodinamik

'erdasarkan hasil percobaan Oligodinamik yang dilakukan dapat

disimpulkan bahwa logam berat Zn$ l$ dan (u dapat menghambat pertumbuhan

bakteri Escherichia coli dan Azotobacter chroococcum dibuktikan dengan adanya

6ona bebas bakteri di media :'. 'akteri Escherichia coli memiliki daya

resistensi yang lebih besar dibandingkan Azotobacter chroococcum.

6.2 Thermal Death Time

'erdasarkan hasil percobaan yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa

Thermal Death Time bakteri Escherchia coli pada suhu 1 o( adalah 1$&,

menit dan memiliki persen kematian rata-rata &$#!01 %.

Da:ta% Pu"takadji$ 5hirgo dkk. 00). The *terilization Effectivit% of Alcohol -/"

0nfrared"Autoclave and 1zone To The 2roth of Bacillus *ubtillis. Nogyakarta


24/27


Teknik

24


*hipp$ 5.3.$ 4ehberger$ T.G.$ and Hand$ L./. !,,. Thermal Escherichia coli

1':-7(- in 2round Beef !atties. Oklahama " BP

*ubagio$ gus dkk. 0!#. !emurnian Carbon Nanotubes mengguna&an ,arutan (N1< dengan 4etode !encucian Biasa dan #eflu=. urnal Bisika Cndonesia.

Tortora$ Gerald dkk. 0!0. 4icrobioog% an 0ntroduction. *an Bransisco" Pearson.

>. Poland "


25/27


Teknik

25


APPENDIKS

Thermal Death Time

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! ! 0 & & !! $

umlah sel bakteri rata-rata I !)$2 sel 9 kotak

umlah sel bakteri I && sel 9 mm

I &&0 sel 9 mm

#

adi jumlah sel bakteri setelah pemanasan 0 menit I &.&0.000 sel 9 ml sampel

RunKotak Total

!umla)

Sel * Kotak

A $ + D E

! ! !0 2 , !2 0 !0

umlah sel bakteri rata-rata I !0 sel 9 kotak

umlah sel bakteri I 0 sel 9 mm I 00 sel 9 mm#

adi jumlah sel bakteri setelah pemanasan menit I .00.000 sel 9 ml sampel

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! & & # ! &$

umlah sel bakteri rata-rata I &$ sel 9 kotak

umlah sel bakteri I !0 sel 9 mm I !00 sel 9 mm#

adi jumlah sel bakteri setelah pemanasan !0 menit I !.00.000sel 9 ml sampel

Run Kotak Total !umla)

Sel *

Kotak


26/27


Teknik

26


A $ + D E

! ! 0 & & !! $

umlah sel bakteri rata-rata I $ sel 9 kotak

umlah sel bakteri I sel 9 mm I 0 sel 9 mm#

adi jumlah sel bakteri setelah pemanasan ! menit I 0.000 sel 9 ml sampel

RunKotak Total

!umla)

Sel *

Kotak

A $ + D E

! # 0 & # ! $&

umlah sel bakteri rata-rata I $& sel 9 kotak

umlah sel bakteri I 10 sel 9 mm I 100 sel 9 mm#

adi jumlah sel bakteri setelah pemanasan 0 menit I 100.000 sel 9 ml sampel

#aktu

menit3

!umla) "el

akte%i

Log jumla) "el

akte%i3

4 Kematian Rata5%ata

* menit

0 &.&0.000 1$1&2 -

.00.000 1$#,2 2$)1&0& %

!0 !.00.000 1$0! $2 %


27/27


27


! 0.000 $)&0 #$!)&10# %

0 100.000 $))2 -0$&& %

Total ,.!0.000

4ata-4ata &$#!01 %

% 3ematian 4ata-rata 9 menit Ia−b

b x menit x100

3eterangan"

a I log 7jumlah sel bakteri8 t awal

b I log 7jumlah sel bakteri8 t akhir

menit I waktu dalam menit pada percobaan

% 3ematian 4ata-rata 9 menit Ia−b

b x menit x100

I6,648−6,398

6,398 x5 x 100

; 2$)1&0& %

5ari gra=ik kur;a kematian$ kemudian dari slope yang diperoleh dapat dihitungThermal Death Time bakteri Escherichia coli adalah

N I -0$0&2 ? 1$,11

-1 I -0$0&2 ? 1$,11

I 1$&,

+aka didapatkan Thermal Death Time bakteri Escherichia coli adalah 1$&,

menit.

Lapres Oligo & Tdt Revisi

Documents