Lap.praktikum Fitofarmasi Curcumin 2B

8/9/2019 Lap.praktikum Fitofarmasi Curcumin 2B

1/37

LAPORAN PRAKTIKUM FITOFARMASI

ISOLASI SENYAWA AKTIF CURCUMIN PADA KUNYIT

(Curcuma domestika )

OLEH :

KELOMPOK II B

Ni Made Meirina Dwi arini (!"!#$!$!%&)

Ni K' an We riani (!"!#$!$!$%)

Made N'*iani a (!"!#$!$!"$)

N+' an An ,in T'-an (!"!#$!$!.!)

I /A0 A0 K121 a Wardani (!"!#$!$!.3)

Ana Fi ria (!"!#$!$!..)

I Wa+an Ardi4a Wirawan (!"!#$!$!.#)

Ni N+' an Sri Na,endra Dewi (!"!#$!$!.&)

5URUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PEN/ETAHUAN ALAM

UNI6ERSITAS UDAYANA

3!!&


2/37

BAB I

PENDAHULUAN

707 Ha8i a dan Per e,aanHa8i a

Tumbuh dan ditanam di Asia Selatan, Cina Selatan, Taiwan, Indonesia, dan

Filipina. Tumbuh dengan baik di tanah yang baik tata pengairannya, curah hujan

yang cukup banyak 2. mm sampai !. mm tiap tahun dan di tempat yang

sedikit kenaungan, tetapi untuk menghasilkan rimpang yang lebih besar dan baik

menghendaki tempat yang terbuka. Tanah ringan seperti tanah lempung berpasir,

baik untuk pertumbuhan rimpang "Anonim a, #$%%&.

Per e,aan

Terna dengan batang berwarna semu hijau atau keunguan, rimpang terbentuk

dengan sempurna, bercabang'cabang, berwarna jingga. Setiap tanaman berdaun (

sampai ) helai, panjang tangkai daun beserta pelepah daun sampai % cm, tanpa

lidah'lidah, berambut halus jarang'jarang, helaian daun berbentuk lanset lebar, ujung

daun lancip berekor, keseluruhannya berwarna hijau atau hanya bagian atas dekat

tulang utama berwarna agak keunguan, panjang 2) cm sampai )* cm, lebar #

sampai 2* cm. +erbungaan terminal, gagang berambut, bersisik, panjang gagang #

cm sampai ! cm- tenda bunga, panjang # cm sampai #$ cm, lebar * cm sampai #

cm- daun kelopak berambut, berbentuk lanset, panjang ! cm sampai ) cm, lebar 2

cm sampai (,* cm, daun kelopak yang paling bawah berwarna hijau, bentuk bundar

telur, makin keatas mkain menyempit serta memanjang, warna semu putih atau

keunguan, kelopak berbentuk tabung, panjang $ mm sampai #( mm, bergigi ( dan

tipis seperti selaput- tajuk bagian bawah berbentuk tabung, panjang lebih kurang 2

mm, berwarna krem, bagian dalam tabung berambut- tajuk bagian ujung berbelah'

belah, warna putih atau merah jambu, panjang # mm sampai #* mm, lebar ## mm

sampai #! mm- bibir berbentuk bundar telur, panjang # mm sampai 2 mm, lebar

#* mm sampai #) mm, warna jingga atau kuning keemasan dengan pinggir

berwarna coklat dan ditengahnya berwarna kemerahan "Anonim a, #$%%&.

2


3/37

I030 K,a2i9i4a2i

Kingdom +lantae

/i0isi " divisio & Spermatophyta

Anak di0isi " sub-divisio & Angiospermae1elas "class & onocotyledoneae

3angsa "ordo & 4ingiberales

Suku " family & 4ingiberaceae

arga " genus & Curcuma

5enis " spesies & Curcuma domestica 6al.

"6an Steenis, 2 *&I0%0 De er ina2i

#b ..........................."Angiospermae&

# a ........................." onocotyledonae&

#%b 7 ( b 7 )2a 7 )(b 7 # !a 7 # *a 7 # a 7 # %a88888.."4ingiberaceae&

"Thornner9s, #$)#&

#a 7 2b 7 b 7 %a888888. "Curcuma&

#a 7 2b 7 (a88888888.." Curcuma domestica 6al.&

"3eacker, #$ * &

I0 0 Kand1n an dan Ke 1naan

Kand1n an

1andungan utama didalam rimpang kunyit terdiri dari minyak atsiri,

curcuminoid, resin, oleoresin, desmetoksicurcumin, dan bidesmetoksicurcumin,

damar, gom, lemak, protein, kalsium, :os:or dan besi. 1andungan kimia minyak

atsiri kunyit terdiri dari artumeron, ; dan , terdiri dari curcumin I $!>,

curcumin II > dan curcumin III ,(> "Anonim d, 2 )&.

(


4/37

Struktur kimia curcumin

Ke 1naan

Curcumin merupakan salah satu produk senyawa metabolit sekunder dari

tanaman 4ingiberaceae, khususnya kunyit. ?ang telah diman:aatkan dalam industri

:armasi, makanan, par:um, dan lain'lain. Ada banyak data dan literatur yang

menunjukkan bahwa kunyit berpotensi besar dalam akti:itas :armakologi yaitu anti

im:lamatori, anti imunode:isiensi, anti 0irus "0irus :lu burung&, anti bakteri, anti

jamur, anti oksidan, anti karsinogenik dan anti in:eksi dan rematik. Selain sebagai

bahan baku obat dapat juga dipakai sebagai bumbu dapur dan @at pewarna alami.

impangnya sangat berman:aat sebagai antikoagulan, menurunkan tekanan darah,

obat cacing, obat asma, penambah darah, mengobati sakit perut, penyakit hati,

karminati:, stimulan, gatal'gatal, gigitan serangga, diare, dan rematik "Anonim d,

2 )&.

!


5/37

BAB II

MIKROSKOPIK

307 Pe erian Si -,i2ia

3au khas aromatik- rasa agak pahit, agak pedas, lama kelamaan menimbulkan

rasa tebal "Anonim a, #$%%&.

303 Mi4r'24'-i

Bpidermis Satu lapis sel, pipih berbentuk poligonal, dinding sel menggabus.

ambut penutup 3erbentuk kerucut, lurus atau agak bengkok, panjang 2* msampai )$ m, dinding tebal. Dipodermis terdiri dari beberapa lapis sel terentang

tangensial, dinding sel menggabus. +eriderm Terdiri dari lapis sampai $ lapis sel

berbentuk segi panjang, dinding menggabus. 1orteks dan silinder pusat

+arenkimatik, terdiri dari sel'sel besar, penuh berisi pati. 3utir pati Tunggal, bentuk

lonjong atau bulat telur dengan satu ujung mempunyai tonjolan atau berbentuk bulat

sampai hampir segitiga dengan satu sisi membulat- lamela kurang jelas- hilus kurang

jelasterdapat pada tonjolan di ujung butir- panjang # m sampai m, umumnya

2 m sampai ! m, lebar # m sampai 2) m, umumnya #! m sampai 2 m.

Sel sekresi 3anyak tersebar, bentuk bulat atau lonjong berisi minyak berwarna

kuning jingga yang sebagian mendamar dan berwarna coklat kekuningan- pada

penambahan besi "III& klorida E+ warna menjadi lebih tua. 3erkas pembuluh

1olateral, tersebar tidak beraturan pada korteks dan pada silinder pusat, berkas

pembuluh di bawah endodermis tersusun dalam lingkaran, kadang'kadang berkas

pembuluh dikelilingi sel parenkim yang tersusun menjari- pembuluh kayu umumny

terdiri dari pembuluh tangga dan pembuluh jala, lebar 2 m sampai ) m, tidak

berlignin. Bndodermis Terdiri dari satu lapis sel terentang tangensial, dinding radial

menebal, tidak terdapat pati.

Serbuk arna kuning sampai kuning jingga. Fragmen pengenal adalah butir

pati- gumpalan tidak beraturan @at berwarna kuning sampai kuning coklat, parenkim

dengan sel sekresi- :ragmen pembuluh tangga dan pembuluh jala- :ragmen rambut

penutup warna kuning- tidak terdapat serabut "Anonim a, #$%%&.

*


6/37

/a 8ar 7 . +enampang melintang rimpang kunyit. # G rambut penutup, 2 G

epidermis, ( G hipodermis, ! G periderm, * G parenkim korteks, G sel sekresi, % G

berkas pengangkut, ) G butir pati, $ G endodermis, # G parenkim silinder pusat.

/a 8ar 3 . Serbuk rimpang kunyit. # G periderm, 2 G butir pati "diperbesar&. ( G

rambut penutup, ! G parenkim berisi butir pati, * G pembuluh kayu dengan

penebalan tangga dan jala "diperbesar&, G parenkim dengan sel sekresi.

"Anonim a, #$%%&

30% Ma4r'24'-i

1epingan ingan, rapuh, warna kuning jingga, kuning jingga kemerahan

sampai kuning jingga kecoklatan - bentuk hampir bulat sampai bulat panjang,

kadang'kadang bercabang - lebar ,* cm sampai ( cm, panjang 2 cm sampai cm,

tebal # mm sampai * mm - umumnya melengkung tidak beraturan, kadang'kadang

terdapat pangkal upih daun dan pangkal akar, batas korteks dan silinder pusat

kadang'kadang jelas. 3ekas patahan Agak rata, berdebu, warna kuning jingga

sampai coklat kemerahan "Anonim a, #$%%&.


7/37

Hambar (. Serbuk kunyit secara makroskopik

%


8/37

BAB III

ISOLASI SENYAWA AKTIF

T1;1an 1 1 :

aksud dan tujuan pembuatan laporan ini secara umum adalah untuk

mengetahui cara mengisolasi serta memahami metode pengujian yang digunakan

pada senyawa akti: curcumin yang terkandung dalamCurcuma domestica 6al.

%07 Penen 1an Kadar Air Si -,i2ia

Tujuan menentukan kadar air simplisiaCurcuma domestika dengan destilasia@eotrop.

A,a dan Ba


9/37

Sejumlah toluene dimasukkan kedalam corong pisah, ditambahkan air

secukupnya, dikocok sampai terbentuk 2 :ase. Fase yang ditampung adalah :ase

bagian atas karena berat jenis toluene lebih kecil daripada berat jenis air. Dasil

yang diperoleh diukur dengan gelas ukur. 3ila belum mencapai # ml, makalangkah ini diulangi hingga diperoleh toluene jenuh air sebanyak # ml.

2. +enentuan 1adar Air

Sebanyak # gram serbuk curcumin ditimbang, dan dimasukkan kedalam labu

ukur, ditambahkan # ml toluene jenuh air. Alat yang digunakan dirangkai

dengan baik dan benar. 3agian dalam labu pendingin dicuci dengan toluene

jenuh air. 1emudian labu dipanaskan dengan suhu ** selama ( menit.

Setelah toluene mendidih, disuling dengan kecepatan 2 tetes per detik. Tabung

penerima dibiarkan sampai dingin. Setelah sisa dan toluene memisah sempurna,

0olume air dibaca dan dihitung kadar air dalam >

S4e a Per='8aan :

#. +embuatan Toluene jenuh air

Sejumlah toluene dimasukkan kedalam corong pisah, ditambahkan air secukupnya, dikocok sampai terbentuk 2 :ase.

/itampung :ase bagian atas

Dasil yang diperoleh diukur dengan gelas ukur.

3ila belum mencapai # ml, maka langkah ini diulangi hingga diperolehtoluene jenuh air sebanyak # ml.

2. +enentuan 1adar Air

Sebanyak # gram serbuk curcumin ditimbang, dimasukkan kedalam labu ukur

$


10/37

ditambahkan # ml toluene jenuh air.

Alat yang digunakan dirangkai dengan baik dan benar.

3agian dalam labu pendingin dicuci dengan toluene jenuh air.

Eabu dipanaskan dengan suhu ** selama ( menit.

Setelah toluene mendidih, disuling dengan kecepatan 2 tetes per detik.

Tabung penerima dibiarkan sampai dingin.

Setelah air dan toluene memisah sempurna, 0olume air dibaca dandihitung kadar air dalam >

%03 Pene a-an S121 Pen erin an Si -,i2ia

Tujuan enetapkan susut pengeringan simplisia

A,a dan Ba


11/37

keadaan sumbat ditutup. 3otol timbang kosong dimasukkan dalam desikator

hingga mencapai suhu kamar. Selanjutnya, 2 gram simplisia "serbuk kunyit&

ditimbang lalu dimasukkan ke dalam botol, goyangkan hingga rata. 3otol

timbang beserta isinya ditimbang dimasukkan ke dalam o0en # *JC selama (menit dengan posisi sumbat dibuka "sumbat juga dimasukkan ke dalam o0en&.

1emudian dimasukkan desikator hingga mencapai suhu kamar, lalu ditimbang.

3otol timbang dimasukkan kembali ke dalam o0en # *JC selama ( menit

dalam keadaan sumbat dibuka, lalu dimasukkan kembali ke dalam desikator

hingga mencapai suhu kamar. +ercobaan dapat dihentikan apabila berat telah

relati: konstan.

S4e a Per='8aan :

3otol timbang kosong ditara, diperoleh !(,$*# g.

3otol timbang kosong dimasukkan ke dalam o0en pada suhu # *C selama( menit sumbat ditutup

/imasukkan kedalam desikator hingga mencapai suhu kamar

Serbuk kunyit ditimbang sebanyak 2 gram lalu dimasukkan ke dalam botol timbangdan ditimbang beserta isinya diperoleh !*,$(% gram.

3otol timbang dimasukkan kedalam o0en selama ( menit pada suhu # *C dalam

keadaan sumbat terbuka

asukkan kedalam desikator hingga dingin ditimbang diperoleh !*,% gram

3otol timbang dimasukkan kedalam o0en selama ( menit pada suhu # *C dalam keadaansumbat terbuka

##


12/37

asukkan kedalam desikator hingga dingin ditimbang diperoleh !*, $( gram

3otol timbang dimasukkan kedalam o0en selama ( menit pada suhu # *C dalam keadaansumbat terbuka

asukkan kedalam desikator hingga dingin ditimbang diperoleh !*, $2 gram "beratrelati: konstan sehingga percobaan dapat dihentikan&

%0% E42 ra42i

Tujuan penyarian simplisia untuk memperoleh ekstrak

A,a dan Ba Air suling 1ertas aluminium :oil 1ertas perkamen

Pr'2ed1r -er='8aan :

70 Pr'2ed1r a2era2i

Sebanyak * gram serbuk simplisia Curcuma domestica 6al. /imasukkan ke

dalam gelas beaker, kemudian ditambahkan etanol % > sebanyak %,* kali

bobot serbuk simplisia. /iaduk hingga homogen, kemudian ditutup dengan

aluminium :oil. /ibiarkan termaserasi selama ! hari dalam gelas beaker

tertutup dengan pengadukan setiap hari. Setelah ! hari, maserat disaring dari

#2


13/37

/iaduk hingga homogen, ditutup dengan aluminium:oil

/imasukkan ke dalam gelas beaker, /itambahkan!2,!( ml etanol % >

aserasi selama ! hari, dengan pengadukan setiap hari

aserat disaring dari ampas, kemudian diendapkan (hari

aserat dimasukkan ke dalam cawan porselen yangtelah ditimbang

yang

* g serbuk simplisia

/iuapkan di atas penangas air

/iperoleh kental

ampasnya. aserat tersebut diendapkan lagi selama ( hari. aserat

dimasukkan ke dalam cawan porselen yang telah ditimbang, kemudian

diuapkan di atas penangas air hingga diperoleh ekstrak kental.

S4e a Per='8aan :

30 Pr'2ed1r 2'4,e a2i

Serbuk kunyit ditimbang sebanyak K * gram, dibungkus dengan kertas

saring berbentuk tabung.#* ml etanol % >"cairan penyari&diisikan pada

labu.kemudian alat sokletasi dipasang dengan baik Cairan penyari

dipanaskan diatas suhu %oC hingga mendidih Lap cairan penyari naik

keatas melalui pipa samping kemudian diembunkan kembali oleh

pendingin tegak lalu cairan "embun& turun ke tabung yang berisi

simplisia Aliran air penyari dibiarkan hingga tiga kali sirkulasi. Bkstrak

#(


14/37

cair yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselen.

Bkstrak diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental yaitu sebanyak

#,)( gram

S4e a e 'de 2'4,e a2i

Serbuk kunyit ditimbang sebanyak K * gram, dibungkus dengan kertas saring berbentuk tabung

#* ml etanol % > "cairan penyari& diisikan pada labu

Alat sokletasi dipasang dengan baik

Cairan penyari dipanaskan diatas suhu %oC hingga mendidih

Lap cairan penyari naik keatas melalui pipa samping kemudian diembunkan kembalioleh pendingin tegak lalu cairan "embun& turun ke tabung yang berisi simplisia

Aliran air penyari dibiarkan hingga tiga kali sirkulasi

Bkstrak cair yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselen

Bkstrak diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental yaitu sebanyak #,)( gram

%0% Kr' a ' ra9iTujuan

a. emisahkan campuran senyawa berdasarkan a:initas terhadap :ase

gerak dan :ase diam. b. elalui 1ET untuk mengidenti:ikasi senyawa curcumin berdasarkan

perbandingan nilai :

A,a dan Ba


15/37

1olom Helas beker Helas ukur Corong 3otol 0ial +ipet tetes Tisu 1ertas perkamen

3ahan Silika Hel 3en@en

Btanol $ > 1loro:orm Air suling Helas wool Bkstrak curcumin Aluminium :oil

Pr'2ed1r Ker;a :

+rosedur +ercobaan pembuatan kolom kromatogra:i

+ertama'tama dibuat eluen dengan campuran 1loro:orm 3en@ena

Btanol $ > dengan perbandingan !* !* # sebanyak yang diperlukan pada

gelas beaker. Selanjutnya, kolom dipasang "tegakkan kolom& pada tiang

penyangga. Setelah kolom dipasang, eluen dimasukkan secukupnya untuk

memasukkan glass wool ke dalam kolom sampai dasar kolom. Hlass wool

dipotong sesuai ukuran diameter kolom. 1emudian silica gel kering ditimbang,

yang diukur dari jumlah silica yang diperlukan pada kolom setinggi 2 cm.

3uat bubur silica gel, silica gel kering dicampur dengan sisa eluen pada beaker

glass. 3ubur silica gel dimasukkan ke dalam kolom dengan pipet tetes melalui

dinding kolom secara hati'hati agar tidak terdapat gelembung udara. 1olom

didiamkan sampai kerapatan silica gel yang kompak, perhatikan jangan sampai

kolom kering dengan cara menambahkan eluen. Setelah kerapatan silica gel

kompak, kolom siap digunakan.

S4e a Per='8aan -e 81a an 4',' 4r' a ' ra9i :

#*


16/37

3uat eluen campuran kloro:orm ben@ena etanol $ > dengan perbandingan !* !* # sebanyak yang diperlukan

+asang kolom dengan posisi tegak lalu dimasukkan eluen secukupnyauntuk memasukkan glasswool ke dalam kolom sampai dasar kolom

Timbang silika gel yang diukur dari jumlah silika gel padakolom sepanjang 2 cm sebanyak (2,!)( g.

3uat bubur silika gel dengan mencampur sisa eluen dengan silika gel

asukkan ke dalam kolom dengan menggunakan pipet tetes melaluidinding kolom

1olom siap digunakan

Pr'2ed1r Per='8aan Pen i2ian =1-,i4an 4e da,a 4',' :

Bkstrak kental curcumin dilarutkan dalam etanol % > hingga larut. Earutan

ekstrak dimasukkan ke dalam kolom dengan pipet tetes melalui dinding kolom

dengan cara memutar. Setelah semua 0olum larutan terserap, dinding kolom dibilas

dengan mengalirkan pelarut perlahan dengan memutar

S4e a -er='8aan -en i2ian =1-,i4an 4e da,a 4',' :

#

Bkstrak kental dilarutkan dalam etanol % >

Earutan ekstrak dimasukkan ke dalam kolommelalui dinding kolom


17/37

Pr'2ed1r Pen e 8an an 4r' a ' ra dan -ena -1n an e,1aBluen dialirkan dengan kecepatan penetesan #( tetes per menit. Fraksi

ditampung sebanyak * ml pada botol 0ial, sampai diperoleh # :raksi dalam botol

0ial. asing'masing :raksi diuapkan, hingga diperoleh ekstrak kental. Bkstrak kental

dimasukkan kembali ke dalam botol.

Ana,i2i2 Fra42i den an Kr' a ' r'9i La-i2 Ti-i2 (KLT)

Fraksi yang telah diuapkan selanjutnya ditotolkan pada ujung salah satu plat,

kira'kira # cm dari ujung plat dengan menggunakan pipet kapiler. Fraksi yang

digunakan adalah :raksi 0ial #,(,*, % dan $. /iusahakan totolan dibuat sekecil

mungkin. 1emudian plat dimasukkan ke dalam chamber yang telah dijenuhkan

"3en@ena 1loro:orm Alkohol $ > dengan perbandingan !* !* # &. +lat

dibiarkan terelusi oleh :ase gerak hingga mencapai batas akhir tanda pada 1ET

"+erhatikan totolan tidak boleh sampai terendam dalam :ase gerak&. Selanjutnya plat

dikeluarkan dan dikeringkan dengan hair dryer. +enampakan noda diamati dibawah

sinar L6 ( nm. +ositi: kurkumin ditunjukkan dengan hasil :luoresensi berwarna

kuning.

#%

/inding kolom dibilas dengan

Bluen dialirkan dengan kecepatan penetesan#( tetes per menit

Fraksi ditampung sebanyak * ml pada botol 0ial, sampai diperoleh # :raksi

Fraksi diuapkan hingga diperoleh ekstrakkental. Bkstrak dimasukkan dalam 0ial


18/37

S4e a Ana,i2i2 9ra42i 41r41 in den an KLT

Fraksi yang diuapkan ditotolkan pada ujung salah satu plat yang telah diuapkan" kira'kira # cm dari tepi bawah plat& menggunakan pipet kapiler. Fraksi yang

digunakan adalah #,(,*,%,$

Totolan dibuat sekecil mungkin dan dikeringkan

+lat dimasukkan ke dalam chamber yang sudah berisi larutan pengembang" 1loro:orm ben@ena alkohol $ > & dengan perbandingan !* !* # kira'kira #

cm dan sudah dijenuhkan

+lat dibiarkan kontak dengan :ase gerak " perhatikan totolan tidak boleh terendam pada :ase gerak&

Chamber ditutup dan dibiarkan mengelusi sampai kira'kira # cm dibawah tepi atas plat, lalu plat diangkat dari chamber dan dikeringkan

+enampakan noda dilakukan dengan melihat dibawah sinar L6 ( dan akan terlihat:luoresensi kuning yang menunjukkan ekstrak positi: kurkumin

%0 03 K',' /%

Alat

1olom H( Corong Buchner Timbangan

ortir Helas ukur Helas beker +ipet tetes 3otol 0ial

3ahan Bkstrak kental kunyit Silika gel 1ertas perkamen 1ertas saring

#)


19/37

Bther Btanol % > Aluminium :oil Tisu

Pr'2ed1r -er='8aan Kr' a ' ra9i K',' /%

Corong 3uchner disiapkan dan dilapisi dengan kertas saring pada bagian

dasar corong. 3agian bawah corong dihubungkan ke erlenmeyer 0akum dengan

penutup karet. 3agian atas corong ditutup dengan aluminium :oil dan akan dibuka

bila dilanjutkan dengan praktikum selanjutnya. 1emudian adsorben berupa silika gel

dimasukkan ke dalam kolom H( setinggi 2,* cm. Selanjutnya, ekstrak kurkumin dan

silica gel dicampur dalam mortir dengan perbandingan # #, lalu digerus hinggadiperoleh campuran padatan yang homogen. 1ertas saring dipotong sesuai dengan

ukuran diameter corong dan diletakkan pada permukaan silika gel yang ada dalam

corong H(. Campuran padatan ekstrak kurkumin dan silica gel ditempatkan di

bagian atas kertas saring pada kolom dan diratakan permukaannya dengan mengetuk

dinding kolom menggunakan jari. 1emudian pada permukaan atas kolom H(

dilapisi lagi dengan kertas saring yang dipotong sesuai ukuran kolom H(.

Selanjutnya dilakukan pengelusian menggunakan campuran eter dan etanol % >dalam perbandingan tertentu sesuai dengan tabel

Mo. Bkstrak 6olume Campuran

"mE&

6olume Bter

"mE&

6olume Btanol

% ># #* #*2 #* #! #( #* #( 2! #* #2 (* #* ## !

#* # *% #* $) #* ) %$ #* % )# #* $## #* * ##2 #* ! ###( #* ( #2#! #* 2 #(#* #* # #!

# #* #*

#$


20/37

Lntuk menampung eluat digunakan tabung reaksi yang disangga dengan gabus

dilapisi aluminium :oil dan ditampung ke dalam labu hisap. Bluen ditambahkan

secara perlahan ke dalam kolom 0akum H( sambil alat 0akum dihidupkan. 3iarkan

terelusi hingga eluennya habis terhisap sampai kolom kering. 1eluarkan tabungreaksi yang berisi eluat dari labu hisap. Bluat kemudian ditampung dalam botol 0ial

dan dibungkus dengan aluminium :oil dan dilabeli. Llangi percobaan di atas dengan

menggunakan campuran eluat sesuai perbandingan pada tabel. Setelah semua :raksi

terpisahkan, pelarutnya diuapkan dengan menggunakan penangas air sampai

diperoleh :raksi yang siap digunakan untuk analisis 1ET.

S4e a Per='8aan Kr' a ' ra9i K',' /% :Corong disiapkan dan dilapisi dengan kertas saring pada bagian dasar corong

3agian bawah corong dihubungkan ke erlenmeyer 0akum dengan penutup karet

3agian atas corong ditutup dengan aluminium :oil

Adsorben berupa silika gel dimasukkan ke dalam kolom H( setinggi 2,* cm

Bkstrak kurkumin dan silica gel dicampur dalam mortir dengan perbandingan # #,lalu digerus hingga diperoleh campuran padatan yang homogen

Eetakkan kertas saring pada permukaan silika gel yang ada dalam corong H(.

Campuran padatan ekstrak kurkumin dan silica gel ditempatkan di bagian ataskertas saring pada kolom dan diratakan permukaannya dengan mengetuk dinding

kolom menggunakan jari

+ermukaan atas kolom H( dilapisi lagi dengan kertas saringEakukan pengelusian menggunakan campuran eter dan etanol % > dalam

perbandingan tertentu sesuai dengan tabel

Lntuk menampung eluat digunakan tabung reaksi yang disangga dengan gabus

dilapisi aluminium :oil dan ditampung ke dalam labu hisap

2


21/37

3iarkan terelusi hingga eluennya habis terhisap sampai kolom kering

1eluarkan tabung reaksi yang berisi eluat dari labu hisap. Bluat kemudianditampung dalam botol 0ial dan dibungkus dengan aluminium :oil dan dilabeli

Llangi percobaan di atas dengan menggunakan campuran eluat sesuai perbandingan pada tabel

Setelah semua :raksi terpisahkan, pelarutnya diuapkan dengan menggunakan penangas air sampai diperoleh :raksi yang siap digunakan untuk analisis 1ET.

BAB I6HASIL DAN PEMBAHASAN

07 Ha2i,

/ari percobaan yang dilakukan diperoleh hasil sebagai berikut

a. 1adar air Curcuma domestica G %,*>

b. Susut pengeringanCurcuma domestica G ,2!* g

c. 3obot ekstrak kentalCurcuma domestica dari maserasi G 2,2$)g> rendemen yang diperoleh G # ,!!>

d. 3obot ekstrak kentalCurcuma domestica dari sokletasi G #,)( g

e. 1ET :raksi hasil dari kromatogra:i kolom basah Faktor retensi " :&

#. Fraksi I - -

2. Fraksi II , - , )- ,%$

(. Fraksi III ,*)- , )- ,%)!. Fraksi I6 ,*)- , )- ,%)

*. Fraksi 6 ,*$- , )- ,%) arna spot dilihat dengan sinar L6 ( nm

#. Fraksi I kuning2. Fraksi II kuning(. Fraksi III kuning!. Fraksi I6 kuning*. Fraksi 6 kuning

:. 1ET :raksi hasil dari kromatogra:i kolom H( Faktor retensi " :&

2#


22/37

#. Fraksi I ,!*- ,*#- ,*%- , (- ,%2- ,%$

2. Fraksi II ,!#- ,!%- ,*!- , #- , )- ,%)

(. Fraksi III ,(!- ,!!

!. Fraksi I6 ,!!*. Fraksi 6 ,!)

. Fraksi 6I ,*#

arna spot dilihat dengan sinar L6 ( nm #. Fraksi I kuning kebiruan, kuning, kuning kebiruan, orange,

hijau, orange2. Fraksi II kuning kebiruan, kuning, kuning kebiruan, orange,

biru, orange(. Fraksi III kuning kebiruan, kuning!. Fraksi I6 biru*. Fraksi 6 kuning kebiruan

. Fraksi 6I biru muda

03 Per*,%#

#*,%

=

gr ml

ml

0303 Pe 81a an Pe,ar1 1n 14 Ma2era2i

/iketahui bobot serbuk curcumin G * g- bj alkohol G ,) gNml

/itanya 0olume pelarut yang diperlukan G ! ,! ml

5awab

3obot pelarut yang diperlukan G * g O %,* G (%,* g

22


23/37

6olume pelarut etanol % > yang diperlukan G

G !2,!( ml

030% Penen 1an B'8' E42 ra4 Ken a, Ma2era2i dan > Rende en

/iketahui

bobot total G *#,!%) gram - bobot cawan G * ,$* gram

/itanya bobot ekstrak kental G 8

> endemen G ...

5awab

3obot ekstrak kental G bobot total 7 bobot cawanG *#,!%) gram ' * ,$* gram

G ,*22 g

> endemen G O # >

G # ,!! >

030% Pe 81a an E42 ra4 Den an Me 'de S'4,e a2i

3erat ekstrak G "3erat cawan porselin P ekstrak kental & ' 3erat

cawan porselin kosong

G *2,%) g '* ,$* g

G #,)( g

> rendemen G berat ekstrak kental O# >

berat serbuk curcumin

G >#*

)(,# x

g g

G ( , >

030 Pe 81a an E,1en -ada Kr' a ' ra9i K','

/iketahui perbandingan campuran pelarut kloro:orm ben@ene etanol $ >

G !* !* # - 0olume campurn pelarut G 22 ml.

/itanya 0olume masing 7 masing pelarut G8.ml

5awab

2(


24/37

6olume kloro:orm G ml ml $$22#

!*=

6olume ben@ena G ml ml $$22#

!*=

6olume etanol $ > G ml ml 2222#

#=

030$ Pe 81a an E,1en -ada KLT

/iketahui perbandingan campurn pelarut kloro:orm ben@ene etanol $ >

G !* !* # - 0olume campurn pelarut G * ml.

/itanya 0olume masing 7 masing pelarut G8.ml

5awab 6olume kloro:orm G ml ml *,22*

#

!*=

6olume ben@ena G ml ml *,22*#

!*=

6olume etanol $ > G ml ml **#

#=

030" Per


25/37

=0 Fra42i 6II

#. : spot # G *),$

2,*=

2. : spot 2G ),$

#,=

(. : spot (G %),$

,%=

d0 Fra42i I?

#. : spot # G *$,$

(,* =

2. : spot 2G ),$

#,=

(. : spot (G %),$

,%=

030. Per


26/37

2. : spot 2G !%,#

%,!=

(. : spot (G *!,#

!,*=

!. : spot ! G #,#

#,=

*. : spot *G ),#

),=

. : spot G %),#

),%=

iii0 Fra42i III

#. : spot # G ($,#

$,(=

2. : spot 2G !!,#

!,!=

i*0 Fra42i I6

#. : spot # G !!,#

!,!=

*0 Fra42i 6

#. : spot # G !),#

),!=

*i0 Fra42i 6I

#. : spot # G *#,#

#,*=

0% Pe 8a


27/37

sejumlah toluena dan air ke dalam corong pisah sambil dilakukan pengocokan

sampai terbentuk dua :ase. Fase yang ditampung adalah :ase bagian atas karena

berat jenis toluena lebih kecil daripada berat jenis air. enurut Farmakope Indonesia

Bdisi I6 "#$$*&, bahwa berat jenis toluena adalah ,) gramNml sedangkan berat jenis air adalah #, gramNml. 1emudian toluena jenuh air yang diperoleh diukur

dengan gelas ukur. Apabila belum mencapai 0olume yang dibutuhkan # ml, maka

langkah ini diulang sampai diperoleh toluena jenuh air sebanyak # ml. Serbuk

simplisia Curcuma domestica sebanyak # gram ditimbang dan dimasukkan ke dalam

labu, kemudian ditambahkan # ml toluena jenuh air. Sementara itu alat destilasi

a@eotrop dirangkai. 3agian dalam labu pendingin dicuci dengan toluena jenuh air.

3agian labu pendingin dicuci dengan toluena dengan tujuan agar toluena tidak mengandung senyawa lain. Eabu dipanaskan dpada suhu **o C selama ( menit.

/iketahui titik didih air adalah # oC sedangkan titik didih toluena adalah # $o'###oC. Sehingga pada saat suhu mencapai **o C air akan menguap lebih cepat

dibandingkan dengan toluena. Toluena mendidih, disuling dengan kecepatan kurang

lebih 2 tetes per detik. 1emudian tabung penerima dibiarkan sampai dingin. Setelah

air dan toluena memisah sempurna dibaca 0olume air dan dihitung kadar air dalam

persen.

3erdasarkan hasil praktikum diperoleh kadar air adalah lebih dari %,* ml.

3atas pengukuran maksimum 0olume air pada alat destilasi a@eotrop adalah %,* ml

sehingga tidak dilanjutkan kembali karena telah dapat dipastikan bahwa kadar air

Curcuma domestica lebih dari %,* ml. /ari hasil perhitungan diperoleh 0olume air

dalam # gram serbuk simplisiaCurcuma domestica adalah %,*>. 1arena batas

maksimum 0olume air yang diukur dengan menggunakan a@eotrop adalah %,* ml,

dimungkinkan bahwa kadar air pada simplisiaCurcuma domestica sebanyak # gram

adalah lebih dari %,* >. +ada literature disebutkan bahwa batas kadar air simplisia

Curcuma domestica sebesar # >. Mamun dari hasil percobaan yang telah dilakukan

belum dapat dipastikan apakah kadar air dalam simplisia lebih besar dari kadar air

yang ditetapkan pada literatur "Anonim b, #$$(&.

0%03 Pene a-an S121 Pen erin an Si -,i2 a

+ada praktikum isolasi :la0onoid curcumin dariCurcuma domestica ,

dilakukan uji susut pengeringan simplisia. +rosedur ini digunakan untuk menetapkan

2%


28/37

jumlah semua jenis bahan yang mudah menguap dan hilang pada kondisi tertentu

" Anonim c, #$$* &.

+rosedur ini diawali dengan penaraan botol timbang dangkal bersumbat kaca

dan dimasukkan ke o0en pada suhu # *C selama ( menit dalam keadaan tertutup.3otol timbang dan sejumlah bahan yang telah dimasukkan ke dalam o0en selama (

menit dengan sumbat terbuka, perlu dimasukkan ke dalam desikator dengan tujuan

agar suhunya mencapai suhu kamar sebelum ditimbang " Anonim c, #$$* &.

3otol timbang yang telah ditara memiliki berat !(,$*# g, setelah dimasukkan

sampel curcumin sebanyak 2 g diperoleh berat !*,$(% g. /ilakukan proses

pengeringan simplisia sebanyak tiga kali hal ini karena pada penimbangan yang

ketiga berat penimbangan yang diperoleh relati: konstan, pada proses pertamadiperoleh berat !*,% g, proses kedua diperoleh berat !*, $( g dan proses ketiga

diperoleh berat !*, $2 g. /ari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa simplisia

mengalami penyusutan sebanyak ,2!* g.

0%0% E42 ra42i Sen+awa A4 i9 -ada Curcuma domestica

0%0%07 Ma2era2i

aserasi merupakan salah satu cara ekstraksi yang paling sederhana. +roses

ini dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari selama

waktu tertentu. +ada praktikum ini, proses maserasi dilakukan dengan merendam

serbuk curcumin, dengan etanol % > 0N0 sebagai cairan penyarinya. +emilihan

etanol % > 0N0 sebagai cairan penyari karena karena curcumin larut dalam etanol

% >. Selain itu etanol % > memiliki beberapa keunggulan diantaranya cukup stabil

secara :isika dan kimia, bereaksi netral, tidak mudah menguap dan tidak mudah

terbakardan tidak mempengaruhi @at akti: dari curcumin.

+roses perendaman dilakukan selalam ! hari dengan pengadukan setiap

harinya. Tujuan dari dilakukannya pengadukan adalah untuk mengoptimalkan proses

ekstraksi. Selama proses perendaman, cairan penyari akan menembus dinding sel

dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung @at akti: curcumin. 4at akti: akan

larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan @at akti: di dalam sel

dengan di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak keluar. +roses ini berulang

sampai terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel.

2)


29/37

Setelah ! hari, maserat kasar disaring dengan kertas saring. +enyaringan ini

bertujuan untuk memisahkan serbuk curcumin dengan cairan penyari yang telah

melarutkan @at akti:. 1emudian maserat diendapkan kembali selama ( hari. Dasil

maserasi kemudian diuapkan hingga diperoleh esktrak kental.Dasil pengamatan menunjukkan bahwa rendemen ekstrak hasil maserasi curcumin

sebesar # ,!!>. +ersen rendemen yang dihasilkan ini relati: rendah. 1emungkinan

hal ini disebabkan karena larutan ekstrak telah mencapai titik jenuh mengingat

proses maserasi cukup lama. Adapun proses maserasi dilakukan selama !

hari.Semakin lama waktu ektraksi semakin tinggi rendemen yang dihasilkan samapi

batas jam karena kesempatan bersentuhan antara bahan dan pelarut semakin besar

dan lewat dari jam rendemen ekstrak menurun kemungkinan hal ini terjadi karenalarutan sudah mencapai titik jenuh "Suryandari, #$)#&. /emikian halnya dengan

kehalusan bahan, semakin halus bahan yang digunakan semakin tinggi rendemen

yang dihasilkan. Dal ini disebabkan karena permukaan bahan semakin luas sehingga

memperbesar terjadinya kontak antara partikel serbuk curcumin dengan pelarut.

0%0%03 S'4,e a2i

etode sokletasi dalam proses ekstraksi ini memiliki beberapa keuntungan

seperti, siklus pelarut berlangsung secara kontinyu sehingga pelarut yang digunakan

lebih sedikit dan menghasilkan ekstrak curcumin yang optimum karena pelarutnya

mengalir dan mengalami kejenuhan sehingga hasil penyariannya lebih

optimum"Stahl, #$)*&. Dal ini yang menyebabkan hasil ekstrak dari sokletasi lebih

banyak dibandingkan dengan maserasi. etode ini dapat digunakan pada jumlah

sampel dan waktu yang singkat. 4at yang akan diekstrak merupakan suatu @at tahan

panas sehingga metode ini dipandang sebagai metode yang tepat.

+ercobaan ini diawali dengan penyiapan serbukCurcuma domestica

sebanyak * gram. Sebelum dimasukkan ke dalam perangkat sokhlet, serbuk

dibungkus dengan kertas saring. /alam pembungkusan diusahakan agar tidak terjadi

kebocoran, sehingga tidak ada serbuk yang keluar dan mengganggu proses isolasi.

+elarut yang digunakan pada ekstraksi ini adalah etanol % > dimana pelarut

ini mempunyai dua kutub yang berbeda saling berdekatan CD( dan D. /engan

pelarut ini diharapkan semua senyawa terekstrak "Handjar, 2 %&.

Selama proses ekstraksi tersebut terjadi ( kali sirkulasi, dimana pada setiap

sirkulasi pelarut yang menguap akan turun kembali menyari sampel dan hal ini

2$


30/37

berlangsung secara kontinyu. +ada akhir proses sokhletasi diperoleh ekstrak cair.

Bkstrak cair yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselen.

Selanjutnya ekstrak diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental. Setelah ditimbang

berat yang diperoleh adalah #,)( gram. Sehingga diperoleh persen rendemen ( , >.

0%0 I2',a2i Sen+awa A4 i9

Isolasi senyawa akti: curcumin dilakukan dengan 2 metode yaitu

kromatogra:i kolom biasa cara basah dan kromatogra:i cair 0akum.

0%0 07 Kr' a ' ra9i K',' Ba2a dengan perbandingan !* !*

# . 3en@ene adalah pelarut yang tingkat kepolarannya terendah dalam campuran ini

sedangkan etanol bersi:at paling polar. Tujuan mengkombinasikan pelarut adalah

untuk mengisolasi senyawa'senyawa akti: yang terdapat dalam ekstrak kental

kunyit, baik yang bersi:at polar maupun non polar.

Adsorben yang digunakan adalah silica gel yang bersi:at polar, karena kolom

dibuat dengan cara basah maka silica gel dilarutkan terlebih dahulu dengan eluennya

hingga menjadi bubur adsorben. Selanjutnya, kolom diisi dengan eluen secukupnya

untuk memudahkan dalam memasukkan glass wool ke dasar kolom. Hlass wool

ber:ungsi untuk menopang absorben. 3ubur silica gel dimasukkan ke dalam kolom

secara hati'hati melalui dinding kolom sehingga adsorben jatuh perlahan. Dal ini

dilakukan untuk menghindari terjadinya gelembung udara, karena adanya

gelembung udara dapat merusak kolom yang akan mempengaruhi hasil pemisahan.

Semakin panjang kolom, maka e:isiensi pemisahan akan semakin besar. Ini berarti,

kemampuan untuk memisahkan komponen 7 komponen dalam suatu campuran akan

lebih baik. +ermukaan silika gel terdiri atas gugus Si' 'Si dan silanol "Si' D&.

Hugus silanol bersi:at sedikit asam dan polar karena mampu membentuk ikatan

hidrogen dengan solut'solut yang agak polar sampai sangat polar "Handjar dkk,

2 %&. 1olom didiamkan selama % hari untuk mendapatkan kolom yang kompak dan

dapat menghasilkan pemisahan yang baik. /ilakukan penambahan eluen yang cukup

agar kolom tidak kering.

(


31/37

Selanjutnya dilakukan pemisahan dengan menggunakan kolom yang telah

siap digunakan. Bkstrak kental dilarutkan dahulu dengan etanol % > untuk

mempermudah memasukkan ekstrak kental ke dalam kolom. Cuplikan dimasukkan

melalui pinggiran kolom memutar secara perlahan agar tidak merusak kolom.Setelah cuplikan mencapai permukaan kolom, dilakukan pengembangan

kromatogram dengan mengalirkan eluen melalui dinding kolom. Teknik pengelusian

yang digunakan yaitu cara isokratik dimana campuran pelarut yang digunakan untuk

keseluruhan pengerjaan kromatogra:i sama. Cuplikan akan terpartisi diantara :ase

diam dan :ase geraknya karena perbedaan migrasi antara komponen'komponen

akibat perbedaan distribusi pada dua :ase yang tidak saling bercampur. asing'

masing komponen dalam campuran mengalami adsorpsi dan desorpsi pada :asediam dan karenanya mengalami perlambatan dengan tingkat berbeda'beda sesuai

dengan daya ikat masing'masing terhadapNkolom.

+enampungan eluat dikerjakan secara manual karena :raksi yang diperoleh

merupakan larutan berwarna. Fraksi ditampung dalam sepuluh botol 0ial dengan

0olume masing'masing 0ial sebanyak * ml, dengan kecepatan penetesan eluat #(

tetes per menit.

0%0 03 Kr' a ' ra9i Cair 6a41

+erbandingan hasil tidak dapat dilakukan dengan kolom H( karena

menggunakan pelarut yang berbeda. Isolasi senyawa akti: dengan kromatogra:i

kolom cair 0akum, menggunakan pelarut eter'etanol % >. Bter bersi:at non polar

sedangkan etanol bersi:at polar. +ercobaan dimulai dengan mengelusi ekstrak kental

dengan menggunakan pelarut yang paling nonpolar sampai dengan pelarut yang

polar. Dal ini dilakukan karena jika dipakai pelarut polar terlebih dahulu, senyawa

nonpolar bisa ikut terekstrak sehingga ketika ekstraksi selanjutnya yang

menggunakan pelarut nonpolar hanya diperoleh senyawa nonpolar sisa. Lntuk

:raksi pertama digunakan pelarut eter'etanol % > dengan perbandingan #* yang

diharapkan mampu untuk mengelusi senyawa 7 senyawa nonpolar. +ada :raksi

kedua digunakan pelarut eter'etanol % > dengan perbandingan #! # dan pada :raksi

ketiga digunakan pelarut eter'etanol % > dengan perbandingan #( 2. /emikian

seterusnya sehingga pada :raksi terakhir digunakan pelarut eter'etanol % > dengan

perbandingan #* untuk melarutkan senyawa yang polar. /engan cara seperti ini

diharapakan semua senyawa baik yang polar maupun yang non polar dapat terelusi.

(#


32/37

1olom H( diisi dengan silica gel yang sebelumnya telah dilapisi kertas

saring pada dasar kolom H(. +elapisan dengan kertas saring bertujuan agar silika

gel yang ditambahkan tidak bocor ke dalam isap. +elapisan kertas saring di bagian

permukaan adsorben sebelum penambahan cuplikan bertujuan agar lapisan adsorbendan lapisan cuplikan tidak bercampur. +elapisan kertas saring di bagian permukaan

cuplikan kembali dilakukan untuk menghindari kerusakan setempat pada kolom

akibat penuangan pelarut yang berulang "Stahl, #$)*&. +ompa 0akum dihubungkan

ke bagian labu hisap untuk menghisap kolom hingga kering. +engelusian dilakukan

dengan menuangkan campuran pelarut yang non polar ":raksi I& ke permukaan

kolom, kemudian dilanjutkan dengan campuran pelarut yang kepolarannya semakin

meningkat yaitu dari :raksi II sampai :raksi QI. Senyawa'senyawa yang bersi:at non polar akan lebih mudah larut pada campuran pelarut yang non polar, sedangkan

senyawa'senyawa yang bersi:at polar akan lebih mudah larut pada campuran pelarut

yang polar "3eaker, #$ *&. +ada percobaan diperoleh # :raksi dengan tingkat

kepolaran yang berbeda. Fraksi':raksi tersebut kemudian akan dianalisis lebih lanjut

dengan penggunaan 1ET. +ada kromatogra:i lapis tipis, :raksi 7 :raksi hasil dari

metode kolom basah dan H( tidak dapat dibandingkan meskipun nantinya saat

proses elusi 1ET menggunakan pelarut yang sama.

1euntungan penggunaan metode 0akum cair dibanding kromatogra:i kolom

basah lebih praktis dan e:isien serta memiliki kelebihan elusi yang cepat dan bebas

dari gas 7 gas luar "udara luar& karena bantuan pompa 0akum. 3erbeda dengan

kolom H(, metode kolom basah cenderung kompleks, dan membutuhkan waktu

yang lama untuk melakukan proses elusi " Stahl, #$)*&.

0%0$ Iden i9i4a2i Sen+awa C1r=1 in

0%0$07 Kr' a ' ra9i La-i2 Ti-i2

asing'masing :raksi yang diperoleh dari kromatogra:i kolom biasa cara

basah diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental yang akan digunakan untuk 1ET.

+ada teknik kromatogra:i lapis tipis :ase diamnya berupa lapisan tipis adsorben yang

dilekatkan pada permukaan penyangga datar. Fase gerak yang digunakan adalah

campuran pelarut 3en@ena 1loro:orm Alkohol $ > dengan perbandingan !* !*

# . Selanjutnya, dilakukan penjenuhan chamber yang bertujuan agar tekanan dalam

chamber sama sehingga jalannya sampel tersebut lurus, untuk memperkecil

penguapan pelarut dan menghasilkan bercak yang lebih bundar dan lebih baik

(2


33/37

"3eaker, #$ *&. /ari # :raksi yang diperoleh, yang ditotolkan pada plat 1ET adalah

:raksi nomor #, (, *, %, $. Bkstrak ditotolkan pada ujung salah satu plat "kira'kira #

cm dari ujung plat& dengan menggunakan pipet mikro. Totolan dibuat sekecil

mungkin agar spot yang dihasilkan tidak besarNluas, tidak berekor atau tailing,karena hal ini akan menghasilkan pemisahan yang kurang sempurna "3eaker, #$)*&.

/an hasil totolan pada plat 1ET dikeringkan dengan diangin'anginkan sebelum

dikembangkan dengan eluen juga untuk menghindari diameter totolan yang besar.

+lat 1ET tidak boleh disentuh langsung dengan jari'jari tangan karena keringat

dapat menyebabkan kekacauan pada kromatogram "menggangu analisis&. Selajutnya,

plat 1ET diletakkan pada chamber kromatogra:i yang telah dijenuhan. 1emudian

sol0en akan melewati spot sampel dan membawa komponen'komponen sampelmelalui :ase diam. Haris terakhir yang dicapai oleh pelarut terdepan saat proses

pengembangan dihentikan disebut tepi depan pelarut. +roses pergerakan :ase gerak

yang menghasilkan pemisahan pemisahan disebut pengembangan. +ada praktikum

ini digunakan metode pengembangan ascending de0elopment. +lat 1ET ditata secara

0ertical sedemikian rupa sehingga ujung bagian bawahnya terendam dalam sol0en

pada dasar chamber dan jangan sampai merendam titik spot sampel. Sol0en naik

pada kertas plat karena adanya aksi kapiler.

1romatogra:i lapis tipis dilakukan untuk identi:ikasi adanya senyawa

curcumin pada masing'masing :raksi yang didapat dari kromatogra:i dengan metode

kolom basah dan kolom cair 0akum. /ari kromatogra:i kolom basah didapatkan #

:raksi sedangkan dari kromatogra:i cair 0akum didapatkan # :raksi.

Adapun pendeteksian noda hasil dari 1ET ini dilakukan secara :isika yaitu

dengan cara meradiasi plat 1ET dengan sinar L6 dengan panjang gelombang (

nm. /igunakannya metode ini karena senyawa curcumin merupakan senyawa yang

dapat ber:luoresensi pada plat 1ET. Dasil yang di dapat yaitu semua spot

ber:luoresensi kuning yang menunjukkan positi: adanya senyawa curcumin.

/ari * :raksi yang digunakan untuk 1ET terdapat # :raksi yang tidak

menghasilkan noda yaitu :raksi nomor #, karena curcumin bersi:at cukup polar

maka akan tertahan kuat ke dalam adsorben silika gel ini, akibatnya curcumin tidak

berada dalam :raksi awal. Dal ini dapat dilihat dari warna :raksi # yang paling muda

dibandingkan :raksi yang lain. +ada :raksi ( diperoleh ( spot dengan nilai :

masing'masing yaitu , , , ), ,%$. +ada :raksi * diperoleh ( spot dengan nilai :

((


34/37

masing'masing ,*), , ), ,%). +ada :raksi % diperoleh ( spot dengan nilai :

masing'masing ,*), , ), ,%). +ada :raksi $ juga diperoleh ( spot dengan nilai :

masing'masing ,*$, , ), ,%). /engan membandingkan harga : yang dihasilkan

dari masing'masing :raksi, dapat dilihat bahwa komponen yang terkandung padamasing'masing :raksi adalah sama. Darga : senyawa curcumin standar diperoleh

dari literatur sebesar ,!' ,!* "Stahl&. Darga : dari masing'masing spot yang

diperoleh dari percobaan tidak sesuai dengan harga : curcumin standar, hal ini

disebabkan karena :ase gerak yang digunakan berbeda, kondisi percobaan yang

berbeda, misalnya isolasi dengan pelarut yang berbeda sebelum dielusi. Darga :

spot yang diperoleh dari percobaan melebihi harga : senyawa standar curcumin.

Dal ini menunjukan adanya senyawa curcumol " ,*2' ,*(- ,*%' , - , 2' , -,%#' ,%!&, dl turmerone " ,) 7 ,)*&, dan ar'curcumone " ,)% 7 ,$ &, "Anonim

b,#$$(&.

+engerjaan kromatogra:i lapis tipis dari :raksi kolom H(, sama dengan 1ET

dari :raksi kolom basah. Adapun harga : dari masing'masing spot yaitu pada :raksi

# yang dihasilkan ,!* - *# - ,*%- , ( - ,%2- ,%$. Fraksi 2 diperoleh ,!#- ,!%-

,*!- , #- , )- ,%). Fraksi ( diperoleh ,($- ,!!. Fraksi ! diperoleh ,!!. Fraksi

* diperoleh ,!). Fraksi diperoleh ,*#. /ilihat dari harga : senyawa standar

curcumin, spot # pada :raksi #, spot # pada :raksi 2, spot 2 :raksi (, dan spot # :raksi

! masuk dalam rentang harga : senyawa standar curcumin. /ilihat dari hasil 1ET

:raksi yang dihasilkan pada metode kolom basah dan 0akum cair, diperoleh hasil

pemisahan yang lebih pada kromatogra:i 0akum cair. Fraksi yang diperoleh dari

metode 0akum cair mengandung senyawa curucumin yang dapat dilihat dari harga

: spotnya, sedangkan pada :raksi yang diperoleh dengan metode pemisahan kolom

basah tidak ada satupun spot yang menunjukkan harga : yang termasuk senyawa

standar curcumin. Dal ini disebabkan karena kromatogra:i 0akum cair menggunakan

eluen dengan tingkat kepolaran yang berbeda "perbandingan pelarut ber0ariasi&,

sehingga senyawa yang terekstrak lebih banyak. /isamping itu, prinsip kerja

kromatogra:i cair 0akum berbeda dengan kolom basah, dimana pada kromatogra:i

H( tardapat 0akum yang akan menyebabkan hasil pemisahan menjadi lebih baik

"Stahl, #$)*&.

(!


35/37

BAB 6KESIMPULAN

#. Susut pengeringan serbukCurcuma domestica yaitu sebesar ,2!* gram.

2. 1adar air Curcuma domestica sebesar %,*>.

(. Bkstraksi dengan metode sokhletasi menghasilkan ekstrak kental yang lebih

banyak daripada dengan metode maserasi karena proses sokhletasi

berlangsung secara kontinyu.

!. +emisahan dengan menggunakan kromatagra:i kolom H( menghasilkan

pemisahan yang lebih baik daripada kromatogra:i kolom biasa.

*. Darga : pada kromatogra:i kolom biasa dengan cara basah tidak masuk

pada rentang harga : senyawa standar curcumin " : ,! 7 ,!*&, tetapi

masuk pada rentang harga : senyawa curcumol, turmerone, ar'curcumone.

. Darga : dari :raksi kromatogra:i H( berada pada rentang harga : senyawa

standar curcumin, sehingga dapat dikatakan :raksi hasil pemisahan H(

mengandung senyawa curcumin.

(*


36/37

DAFTAR PUSTAKA

Anonim a. #$%%. Materia Medika Indonesia Jilid I . 5akarta /epartemen 1esehatanI.

Anonim b. #$$(. tandard of !sean Herbal Medicine "olume # . 5akarta AseanCountries

Anonim c. #$$*. $armakope Indonesia . Bdisi I6. 5akarta /epartemen 1esehatanI.

Anonim d. 2 ). Curcumin.A0ailable at http NNwww.:ao.orgNagNagnNjec:a'additi0esNspecsN onograph#NAdditi0e'#! .pd:

pened at Thursday, 2th Mo0ember 2 )

3eacker, C.A. and .C. 3akhui@en 0an den 3rink. #$ *. $lora of Java "olume II . Medherland Moordho:: Hroningen M.6.+.

/alimartha, Setiawan. 2 . !tlas %umbuhan dan &bat Indonesia . Indonesia Trubus Agrowidya.

Handjar, I.H. dan A. ohman. 2 %. Kimia $armasi !nalisis . +ustaka +elajar.?ogyakarta.

Sthal, Brgon. #$)*. !nalisis &bat ecara Kromatografi dan Mikroskopi . IT3.3andung.

Suryandari, S. #$)#. 'engambilan &leoresin Jahe dengan cara olvent (xtraction)33ID+. 3ogor.

6an Steenis, C.H.H.E. 2 *. $lora . Cetakan ke'# . 5akarta +T +radnya +aramitha.

(
http://www.fao.org/ag/agn/jecfa-additives/specs/Monograph1/Additive-140.pdfhttp://www.fao.org/ag/agn/jecfa-additives/specs/Monograph1/Additive-140.pdfhttp://www.fao.org/ag/agn/jecfa-additives/specs/Monograph1/Additive-140.pdfhttp://www.fao.org/ag/agn/jecfa-additives/specs/Monograph1/Additive-140.pdf


37/37

Lap.praktikum Fitofarmasi Curcumin 2B

Documents