inokulasi-mikrobiologi

8/18/2019 inokulasi-mikrobiologi

1/25


2/25

Laboratorium Mikrobiologi

Teknik

2

Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Teknik

' &iakan

Keterangan:

-%arna-&epekatan

-Model &oloni

PutihTidak Pekat

Beaded

PutihTidak Pekat

Filiform

Tabung Reaksi

!" #am$

Hasil Pengamatan

Me%ia N&A

(Saccharomyces

cerevisiae)

Me%ia PDA

( Aspergillus niger )

' &lanko


3/25


Teknik

3


' &iakan

Keterangan:

-%arna

-&epekatan

-Model &oloni

Putih

Pekat

Echinulate

Putih

Pekat

Rhizoid

II.1. Menggunakan Petridish

Ta$el II. Hasil Pengamatan Inokulasi Mikroorganisme Mengunakan

Petridish

Petridish !" #am$

Hasil Pengamatan

Me%ia N&A

(Saccharomyces

cerevisiae)

Me%ia PDA

( Aspergillus niger )

' &lanko


4/25


Teknik

4


' &iakan

(Tam!ak

A#as)

' &iakan

(Tam!ak

Sam!ing)

Keterangan:

- %arna

- 'iameter

- &epekatan

- (le)asi

- Margin

Putih

".* cm

Pekat

Raised

Smooth

Putih

+., cm

Pekat

ngro!ing into medium

"avy

Petridish !" #am$

Hasil Pengamatan

Me%ia N&A Me%ia PDA


5/25


Teknik

5


( Escherichia coli) ( Bacillus subtilis)

' &lanko

' &iakan

(Tam!ak

A#as)

' &iakan

(Tam!ak

Sam!ing)


6/25


Teknik

6


Keterangan:

- %arna

- 'iameter - &epekatan

- (le)asi

- Margin

Putih

+.! cmTidak terlalu pekat

Flath

Smooth

Putih

1.1 mTidak terlalu pekat

Flat

rregular

II. Penggunaan Mikrosko!

Ta$el II." Hasil Pengamatan Penggunaan Mikroskop

Mikrosko!*asil Pengama#an Per$esaran To#al +,,-

Escherichia coli Saccharomyces cerevisiae

Keterangan : erbentuk basil /

bergerak secara aktif

erbentuk bulat

III. Pem$aasan

III.1 Inokulasi Mikroorganisme

Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mempelajari teknik inokulasi biakan

mikroorganisme pada medium steril. Pada percobaan ini digunakan ! bakteri 0aitu

Escherichia coli dan Bacillus subtilis dan ! jamur 0aitu Aspergilus niger dan

Sacharomyces cerevisiae#

angkah pertama 0ang dilakukan adalah memasukkan media agar ke 2

tabung reaksi dan 2 petridish. Tabung reaksi dan petridish han0a diisi media 13"


7/25


Teknik

7


dari total )olumen0a. 4antin0a setiap ! tabung reaksi dan setiap ! petridish akan

diisi oleh media agar 45 $utrient Broth Agar $ dan lainn0a diisi oleh media

agar P'5 Potato %e&trose Agar $. 6isan0a tabung reaksi dan petridish dijadikan blanko berisi media. 45 $utrient Broth Agar $ merupakan suatu ekstrak cair

jaringan daging sapi 0ang empuk/ dikonsentrasikan menjadi pasta. &andungan

dalam 45 ini adalah substansi jaringan he7an 0ang dapat larut dalam air/

meliputi karbohidrat/ sen0a7a nitrogen organik/ )itamin 0ang larut dalam air/ dan

garam-garaman. 8mumn0a bakteri akan tumbuh pada media seperti 45 ini

karena bersumber dari makanan organik dengan kandungan karbon 0ang

digunakan dalam sumber energi/ nitrogen 0ang digunakan dalam unsur

pembangun protein/ sulfur/ fosfor/ beberapa unsur logam dalam jumlah kecil

ppm$/ dan )itamin untuk mengakti)asi en9im

Morello/ !++"$

6edangkan media P'5 Potato %e&trose Agar $ adalah media 0ang

mengandung sumber karbohidrat dalam jumlah cukup 0aitu terdiri dari !+

ekstrak kentang dan ! glukosa. iasan0a media ini dapat digunakan untuk

perkembangbiakan jamur/ karena jamur cocok pada nutrisi he7ani. Perbedaan

penggunaan media agar ini disesuaikan dengan mikroorganisme 0ang akan

digunakan karena masing-masing mikroorganisme memerlukan media agar

khusus untuk perkembangbiakann0a.

4eogen/ !+11$

8ntuk blanko/ tabung reaksi dan petridish dibuat sama. lanko ini digunakan

sebagai pembanding tingkat sterilitas media agar 0ang digunakan. 6elanjutn0a/

tabung reaksi ditutup oleh sumbatan kapas dan petridish dibungkus oleh kertas

coklat. 6umbatan kapas dibuat dari kapas lemak/ kapas lemak dipilih karena

sifatn0a 0ang lebih tahan untuk tidak tembus air dibanding kapas muka sehingga

nantin0a biakan 0ang berada di tabung reaksi tidak terkontaminasi. 8ntuk kertas

coklat dalam membungkus petridish' digunakan bagian 0ang licin untuk bagian

luarn0a. 6ama haln0a dengan kapas tadi/ bagian licin ini memungkinkan untuk air

agar tidak masuk kedalam petridish sehingga kontaminasi dapat diminimalisir.


8/25


Teknik

8


6emua tabung reaksi dan petridish lalu disterilisasi di dalam autoclave 0ang

merupakan jenis alat sterilisasi panas dan uap. 6terilisasi dengan autoclave adalah

sterilisasi 0ang efektif karena uap air panas dengan tekanan tinggi men0ebabkan penetrasi uap air ke dalam sel-sel mikroba menjadi optimal sehingga mematikan

mikroba. Pada percobaan ini/ sterilisasi dilakukan pada suhu 1!1o tekanan 12

psi$ selama 12-!+ menit menit. Mikroorganisme akan mati pada suhu 1++ o /

namun untuk lebih memastikan agar tidak ada mikroogranisme 0ang

mengkontaminasi maka sterilisasi dibuat pada suhu 1!1 o dengan tekanan 12 psi.

Madigan/ !+1!$.

6etelah melalui proses sterilisasi/ petridish dan tebung reaksi dikeluarkan dari

dalam autoclave. 4amun kapas penutup dan kertas pembungkus petridish tidak

boleh dibuka terlebih dahulu kecuali bila sudah siap untuk melakukan inokulasi

mikroorganisme. Posisi tabung reaksi pun harus dimiringkan untuk memperluas

permukaan inokulasi sehingga memudahkan proses inokulasi dan memperban0ak

bakteri dan jamur 0ang akan dihasilkan le7at pembiakan nantin0a. 6elanjutn0a/

media agar 0ang sudah memadat diinokulasikan oleh bakteri dan jamur.

Teknik inokulasi merupakan suatu pekerjaan memindahkan bakteri dari

medium 0ang lama ke medium 0ang baru dengan tingkat ketelitian 0ang sangat

tinggi. 5da beberapa teknik 3 metode dalam proses inokulasi 0aitu:

1. Metode gores/ metode dilakukan dengan menggoreskan permukaan media

tanpa merusak atau menghancurkan media itu sendiri. 8ntuk itu/ metode ini

memerlukan keterampilan-keterampilan 0ang diperoleh dengan latihan.

!. Metode tebar/ inokulasi itu disebarkan dalam medium batang 0ang sama untuk

dapat menjamin pen0ebaran bakteri 0ang merata dengan baik.

". Metode tuang/ metode ini bekerja dengan cara menuangkan inokulum dan

media pada ca7an petri secara bersamaan. &elemahan metode ini adalah

membutuhkan 7aktu dan bahan 0ang lama dan ban0ak/ akan tetapi tidak

memerlukan keterampilan tinggi. iakan campuran diencerkan dengan

menggunakan medium agar 0ang telah dicairkan dan didinginkan.

Pengenceran dilakukan dalam beberapa tahap hingga diperoleh koloni

tunggal.


9/25


Teknik

9


,. Metode tusuk/ metode dilakukan dengan cara menusukan ujung jarum ose

0ang didalamn0a terdapat inokolum/ kemudian dimasukkan ke dalam media.

Pelc9ar/ !++;$8ntuk percobaan ini metode inokulasi 0ang dilakukan adalah metode gores.

Teknik dalam inokulasi harus dilakukan secara aseptik.


10/25


Teknik

10


memaksimalkan luas permukaan pengamatan dan agar tidak terjadi penumpukan

biakan 0ang dihasilkan. Pada saat penggoresan untuk tabung reaksi/ kapas

sumbat tidak boleh diletakkan diba7ah untuk mencegah kontaminasi/ begitu juga petridish 0ang tidak boleh dibuka sepenuhn0a.

6etelah melakukan inokulasi ujung tabung reaksi dan petridish serta ka7at

ose n0a dipanaskan kembali. 6elanjutn0a/ setelah dilakukan inokulasi/ tabung

reaksi disumbat dengan kapas lemak dan petridish dibungkus lagi dengan kertas

min0ak cokelat/ lalu dimasukkan ke dalam inkubator selama !" jam. Tujuan dari

inkubasi 0aitu men0ediakan kondisi 0ang sesuai untuk pembiakan bakteri. Pada

petriridish terlebih dahulu dibungkus kertas coklat dan diberi perekat sebelum

dimasukkan ke dalam inkubator. &etika dimasukkan ke dalam inkubator posisi

dari petridish terbalik. Hal ini bertujuan agar tidak ada uap air dari reaksi

metabolisme mikroorganisme 0ang menetes ke media agar di petridish sehingga

dapat membuat proses pembiakan terkontaminasi. Reaksi metabolisme tersebut

adalah:

=H1!>= ? =>! ? =H!> =>! ? 1!H!>

&emudian dilakukan pengamatan setelah !" jam/ petridish dan tabung

reaksi 0ang berisi biakan dikeluarkan dari inkubator. Hasil biakan dari media

45 dengan bakteri Escherichia coli pada tabung reaksi menunjukkan 7arna

putih/ tidak pekat dan koloni 0ang terbentuk berupa beaded / sedangkan pada

petridish 7arna sama seperti tabung raksi 0aitu putih dengan diameter +.! cm/

tidak terlalu pekat/ ele)asi flat dan margin raised .

erdasarkan pengamatan menunjukkan bah7a Escherichia coli tidak

berkembang biak secara maksimal pada media 45 karena tidak terlalu

menunjukkan perbedaan 0ang mencolok antara sebelum inokulasi dan sesudah.

a$ b$ c$


11/25


Teknik

11


Gam$ar III.1 erdasarkan pengamatan hasil biakan media 45

dengan bakteri Escherichia coli a$ pada petridish' b$ pada tabung reaksi/

c$ berdasarkan literatur.

8ntuk hasil biakan dari media 45 dengan jamur Sacharomyces

cerevisiae menunjukkan bercak putih/ terdapat ban0ak koloni berbentuk

echinulate pada tabung reaksi. 6edangkan pada petridish juga memiliki kepekatan

0ang sama dengan hasil biakan bila dilihat dari samping menunjukkan raised .

a$ b$ c$

Gam$ar III. erdasarkan pengamatan hasil biakan media 45

dengan bakteri jamur Sacharomyces cerevisiae a$ pada petridish' b$ pada

tabung reaksi/ c$ berdasarkan literatur.

Maka perkembangbiakan jamur Sacharomyces cerevisiae terlihat lebih baik

dengan 45 dibandingkan dengan bakteri Escherichia coli# ila dibandingkan

dengan literatur/ seharusn0a media 45 merupakan media 0ang cocok untuk

membiakkan bakteri. 4amun pada percobaan menunjukkan sebalikn0a karena

saat inokulasi/ teknik penggoresann0a 0ang tidak maksimal.


12/25


Teknik

12


6elanjutn0a pengamatan hasil indukan jamur Aspergilus niger dengan

media P'5. Pada tabung reaksi/ terlihat jelas koloni 0ang berbentuk rhizoid

ber7arna putih sedangkan pada petridish terlihat garis putih 0ang rapi dan tumbuhdi dalam medium. Maka dapat terlihat bah7a Aspergilus niger dapat berkembang

dengan baik pada media P'5.

a$ b$ c$

Gam$ar III." erdasarkan pengamatan hasil biakan media P'5

dengan bakteri Aspergilus niger a$ pada petridish' b$ pada tabung reaksi/

c$ berdasarkan literatur.

8ntuk bakteri Bacillus subtilis pada media P'5/ pada petridish terlihat

goresan 0ang sedikit dan samar. 6edangkan pada tabung reaksi terlihat bercak

pada dinding tabung 0ang tidak terlalu ban0ak. #umlah hasil biakan 0ang sedikit

ini terjadi karena media 0ang terlalu panas sehingga biakan tidak dapat tumbuh

dengan maksimal.

a$

b$ c$


13/25


Teknik

13


Gam$ar III.+ erdasarkan pengamatan hasil biakan media 45

dengan bakteri jamur Bacillus subtilis a$ pada petridish' b$ pada tabung

reaksi/ c$ berdasarkan literatur.#ika dibandingkan antara media nutrienn0a sesuai dengan pengamatan

didapatkan bah7a pertumbuhan jamur dan bakteri berbeda dari 7arna dan

kolonin0a. #amur menghasilkan kualitas biakan 0ang lebih baik 0akni dari segi

ukuran dan kuantitas dibandingkan bakteri pada media 45 maupun P'5.

Terbukti dari kualitas biakan 0ang terbentuk. 4amun terdapat kemungkinan saat

menggoreskan biakan jamur pada media tidak terlalu mengenai media sehingga

hasil biakan 0ang tumbuh tidak ban0ak.

lanko 45 dan P'5 0ang terdapat pada tabung reaksi tidak mengalami

perubahan 7arna dan tetap jernih. $utrient Broth Agar ($BA) akan tetap jernih

ketika steril dan menandakan tidak adan0a pertumbuhan bakteri dalam media agar

45 tersebut. egitu pula dengan P'5. ila terdapat pertumbuhan bakteri atau

spora maka media agar akan ber7arna sedikit keruh dan ada bercak seperti hasil

biakan. >leh karena blanko media agar 0ang digunakan dalam percobaan ini tidak

memiliki pertumbuhan bakteri di dalamn0a/ maka percobaan ini dapat dikatakan

cukup steril. Mikroorganisme 0ang tumbuh dapat dipastikan tidak berasal dari

kontaminan pada media agar/ melainkan dari proses inokulasi.

III. Penggunaan Mikrosko!

Percobaan ini bertujuan untuk melatih menggunakan mikroskop dengan

jalan melihat morfologi bakteri dan jamur/ mengenal bentuk-bentuk bakteri dan

jamur serta melatih membuat preparat. Mikroorganisme 0ang digunakan pada

percobaan ini ialah Escherichia coli dan Sacharomyces cerevisiae#

angkah pertama 0ang dilakukan adalah mempersiapkan mikroskop dan

ditempatkan diatas meja. &emudian lensa ob*e+tif dan lensa okuler dibersihkan

dengan kertas pembersih lensa untuk menghilangkan kotoran-kotoran 0ang

menempel pada lensa ob*e+tif ataupun lensa okuler sehingga bakteri dan jamur

mudah untuk dikenali dan diamati/ serta men0alakan mikroskop dan membuka


14/25


Teknik

14


diafragma seluruhn0a sehingga sumber caha0a mikroskop akan terlihat terang dan

terfokus saat pengamatan dilakukan.

angkah selanjutn0a adalah membuat preparat dengan ob0ek bakteri dan jamur. 6ebelumn0a/ kaca preparat dibersihkan dengan alkohol ;+ lalu

meneteskan suspensi pada ob*ect glass. 5lkohol digunakan untuk mensterilkan

preparat/ agar nantin0a tidak mengganggu ob0ek 0ang akan dilihat. Tujuan

pemberian a@uades pada bakteri ini agar Escherichia coli 0ang diambil tidak

berkoloni sehingga dalam melakukan pengamatan nantin0a dengan mikroskop

lebih mudah. angkah 0ang sama dilakukan untuk membuat preparat jamur

Sacharomyces cerevisiae#

,b*ect glass 0ang telah terdapat Sacharomyces cerevisiae dan

Escherichia coli kemudian ditutup oleh dec+ glass. Preparat 0ang telah siap

tersebut kemudian diletakkan pada meja ob0ek mikroskop serta dijepit

menggunakan penjepit preparat. &emudian melakukan pengamatan dengan

perbesaran lensa objektif ,+A sehingga perbesaran total 0ang digunakan adalah

,++A karena perbesaran lensa okuler adalah 1+A.

Pelc9ar/ !++;$

'engan memilih perbesaran total ,++A perbesaran rendah$ diharapkan

Escherichia coli dan Sacharomyces cerevisiae dapat diamati dengan mudah/ jelas

dan cepat. #ika pada perbesaran ini bakteri3jamur masih belum terlihat dengan

jelas/ maka lensa objektif bisa diganti dengan perbesaran hingga 1++A

6elama mengamati bakteri dengan mikroskop/ knop perbesaran kasar dan

halus dapat diputar untuk mendapatkan penglihatan lebih jelas. ila pencaha0aan

kurang terang atau terlalu terang/ maka dapat diatur dengan pengaturan kekuatan

sumber caha0a. 6etelah didapatkan bentuk 0ang cukup jelas melalui mikroskop/

Escherichia coli 0ang teramati pada preparat digambar sketsan0a pada laporan

pengamatan dan diambil gambarn0a dengan kamera. 6eluruh prosedur tersebut

dilakukan juga untuk jamur Sacharomyces cerevisiae. 6etelah semua gambar

diperoleh/ ob*ect glass dan dec+ glass dicuci dengan a@uades dan disterilkan

dengan alcohol ;+ dan mikroskop dimatikan.


15/25


Teknik

15


akteri 0ang diamati dalam percobaan kali ini adalah Escherichia coli.

Escherichia coli adalah bakteri gram negatif berbentuk batang tidak berkapsul.

akteri ini umumn0a terdapat dalam alat pencernaan manusia dan he7an. 6el Escherichia coli mempun0ai ukuran panjang ! B = Cm dan lebar 1/1 B 1/2 Cm/

tersusun tunggal/ berpasangan dan berflagel. 'an bakteri ini tumbuh pada suhu

antara 1+-,2 ℃ .

Darid9/ !++;$

6etelah melakukan pengamatan melalui mikroskop/ diperoleh gambar

bentuk Escherichia coli pada gambar III.2.


16/25


Teknik

16


Gam$ar III.0 erdasarkan hasil pengamatan pada mikroskop jamur

Sacharomyces cerevisiae a$ pada percobaan ' b$ berdasarkan literatur.

S# -erevisiae merupakan khamir sejati tergolong eukariot 0ang secara morfologihan0a membentuk blastospora berbentuk bulat lonjong/ silindris/ o)al atau bulat

telur 0ang dipengaruhi oleh strainn0a. Penampilan makroskopik mempun0ai

koloni berbentuk bulat/ 7arna kuning.

5hmad/ !++2$

4amun pada hasil pengamatan tidak terlalu jelas/ karena terdapat ban0ak

bentuk bulat 0ang kemungkinan juga gelembung atau 9at pengotor. >leh

karenan0a diperlukan pengamatan 0ang baik dan teliti.

I. 2a3a$an Per#an4aan

1. agaimana cara mold berkembang biakE

.old dapat berkembang biak secara )egetatif aseksual$ dan generatif seksual$.

Perkembangbiakan )egetatif dapat dilakukan dengan fragmentasi miselium

thalus$ dan pembentukan spora aseksual. 5da , cara perkembang biakan dengan

fragmentasi thalus 0aitu/

a$ pembentukan tunas/ misaln0a pada khamir/

b$ blastospora/ 0aitu tunas 0ang tumbuh menjadi spora/ misaln0a pada -andida

sp./

c$ arthrospora/ 0aitu terjadin0a segmentasi pada ujung-ujung hifa/ kemudian sel-

sel membulat dan akhirn0a lepas menjadi spora/ misaln0a pada /eotrichum sp./

d$ chlamydospora/ 0aitu pembulatan dan penebalan dinding sel pada hifa

)egetatif/ misaln0a pada /eotrichum sp#

6pora aseksual terbentuk melalui ! cara. Pada jamur tingkat rendah/ spora

aseksual terbentuk sebagai hasil pembelahan inti berulang-ulang. Misaln0a spora

0ang terbentuk di dalam sporangium. 6pora ini disebut sporangiospora. Pada

jamur tingkat tinggi/ terbentuk spora 0ang disebut konidia. &onidi terbentuk pada

ujung konidiofor/ terbentuk dari ujung hifa atau dari konidi 0ang telah terbentuk

sebelumn0a.


17/25


Teknik

17


Perkembang biakan secara seksual/ dilakukan dengan pembentukan spora seksual

dan peleburan gamet. Peleburan gamet terjadi antara ! tipe kelamin 0ang berbeda.

Proses reproduksi secara seksual dibagi menjadi " tingkatan/ 0aitua$ plasmogami 0aitu meleburn0a ! plasma sel/

b$ kariogami 0aitu meleburn0a ! inti haploid 0ang menghasilkan satu inti diploid.

c$ meiosis 0aitu pembelahan reduksi 0ang menghasilkan inti haploid.

!. 6ebutkan penggunaan3 dan arti mold 0ang diperiksa di atasF

.old kapang$ merupakan jamur multiseluler 0ang berbentuk seperti benang-

benang. 'ilihat dari strukturn0a mold mempun0ai filament-filamen 0ang disebut

hifa. %alaupun mold tergolong mikroorganisme 0ang cukup merugikan karena

dapat mengganggu pernapasan. S#cerevisiae dapat dimanfaatkan sebagai

probiotik/ prebiotik dan imunostimulan dan kegunaan lainn0a di dalam

meningkatkan produksi ternak. Aspergillus niger penting pada produksi asam

sitrat 0ang ban0ak digunakan pada berbagai makanan dan minuman ataupun

sebagai penga7et dan peningkat citarasa.

enson/ !++1$

". 5pa 0ang disebut hyphaE

Hifa adalah sel-sel dari jamur multiseluler umumn0a bergabung untuk

membentuk tipis tabung. Hifa biasan0a dibagi menjadi berinti unit cross0!all

0ang memiliki lubang/ sehingga sitoplasma 0ang dapat mengalir antara unit sel.

Tortora/ !+1+$

,. agaimana yeast berkembang biakE dan apakah hal ini sesuai dengan preparat

0ang diamatiE

&eban0akan yeast melakukan reproduksi secara aseksual melalui pembentukan

tunas secara multilateral ataupun polar. Reproduksi secara seksual menghasilkan

askospora melalui konjugasi dua sel atau konjugasi dua askospora 0ang

menghasilkan sel anakan kecil. #umlah spora dalam askus ber)ariasi tergantung


18/25


Teknik

18


macam yeast n0a. ukup sesuai jika dilihat dari terbentukn0a bintik-bintik hitam

dan hifa n0a.

2. 5pakah 0ang mempengaruhi aktifitas yeast E

a. >ksigen

Mikroorganisme dapat diklasifikasikan dari kebutuhan oksigenn0a.

Mikroba aerob membutuhkan oksigen/ sedangkan anaerob tidak membutuhkan

oksigen untuk proses pertumbuhann0a. &hamir yeast) tumbuh dengan baik

apabila terdapat cukup oksigen/ tapi beberapa spesies dapat tumbuh pada

kondisi tanpa oksigen. &apang dapat tumbuh han0a jika terdapat oksigen/

sedangkan bakteri ada 0ang aerob dan sebagian juga anaerob.

b. &adar air

5hli mikrobiologi menjelaskan efek dari kadar air lingkungan pada

mikroba sebagai !ater activity a.7.$. "ater activity adalah rasio dari tekanan

uap air pada larutan dengan tekanan uap pada air murni pada temperatur dan

tekanan 0ang sama. arutan 0ang homogen mempun0ai rasio mendekati 1.

&eban0akan spesies bakteri/ yeast dan kapang membutuhkan nilai a.7. +.* B 1

untuk dapat hidup. Tetapi ada juga 0ang dapat hidup pada kondisi a.7 +.= B

+.;.

c. Temperatur

eberapa mikroba dapat hidup pada temperatur tinggi/ demikian

sebalikn0a. Ps0chrophillic dapat hidup pada temperatur !+ B "+ +. 6pesies

mesophillic dapat hidup antara "+ B ,+ +. sedangkan thermophillic dapat

hidup pada temperature ,2 B =2 +. bakteri dapat hidup pada range temperature


19/25


Teknik

19


antara + B *+ +. 1east dan kapang dapat dimatikan pada temperature =+ +

selama 12 menit.

d. pH

&easaman dari larutan gula menentukan mikroba 0ang dapat tumbuh pada

larutan gula. 1east dan kapang dapat tumbuh pada pH ! B G/ sedangkan bakteri

sensitif terhadap kondisi pH. eberapa bakteri dapat tumbuh pada pH , B G/

sedangkan beberapa han0a dapat tumbuh pada pH =.2 B ;.2.

Hogg/ !++2$

=. 6ebutkan semua pembagian bakteri beserta contoh-contohn0aE

5. erdasarkan bentukn0a/ bakteri dibagi menjadi tiga golongan besar/ 0aitu:

1. akteri &okus:kokus

a. Monokokus 0aitu berupa sel bakteri kokus tunggal.

b. 'iplokokus 0aitu dua sel bakteri kokus berdempetan. bakteri %#

pneumoniae)

c. Tetrakokus 0aitu empat sel bakteri kokus berdempetan berbentuk

segi empat.

d. 6arkina 0aitu delapan sel bakteri kokus berdempetan membentuk

kubus.

e. 6treptokokus 0aitu lebih dari empat sel bakteri kokus berdempetan

membentuk rantai. bakteri S# thermophillus$

f. 6tapilokokus 0aitu lebih dari empat sel bakteri kokus berdempetan

seperti buah anggur. bakteri S# aureus$.

!. akteri asil:basil

a. Monobasil 0aitu berupa sel bakteri basil tunggal. bakteri E# coli/

Salmonella thypi$

b. 'iplobasil 0aitu berupa dua sel bakteribasil berdempetan


20/25


Teknik

20


c. 6treptobasil 0aitu beberapa sel bakteri basil berdempetan

membentuk rantai bakteri Azotobacter dan Bacillus antracis$

". akteri 6piriliaa. 6piral 0aitu bentuk sel bergelombang

b. 6piroseta 0aitu bentuk sel seperti sekrup

c. ibrio 0aitu bentuk sel seperti tanda baca koma

. &lasifikasi bakteri berdasarkan alat gerakn0a. Dlagellum memiliki jumlah 0ang

berbeda-beda pada bakteri dan letak 0ang berbeda-beda pula 0aitu:

1. Monotrik : bila han0a berjumlah satu

!. ofotrik : bila ban0ak flagellum disatu sisi

". 5mfitrik : bila ban0ak flagellum dikedua ujung

,. Peritrik : bila tersebar diseluruh permukaan sel bakteri

;. 5pa tujuan pemakaian imersion oil E

mmersion oil bertujuan untuk mencegah pembiasan karena pada

pembesaran lebih besar/ caha0a akan dibiaskan saat mele7ati udara. 6elain

itu/ immersion oil berguna untuk meningkatkan resolusi dari mikroskop

dengan menangkap caha0a lebih ban0ak karena caha0a n0a terperangkap oleh

oil itu sendiri sehingga gambar objek 0ang dihasilkan lebih tajam

Hogg/ !++2$

G. agaimana cara bakteri memperban0ak diriE

akteri berkembang biak dengan dua cara/ 0aitu secara aseksual dan

seksual. Perkembangbiakan secara aseksual dilakukan dengan pembelahan/

sedangkan Perkembangbiakan seksual dilakukan dengan cara transformasi/

transduksi/ dan konjugasi. 4amun/ proses pembiakan cara seksual berbeda

dengan eukariota lainn0a. 6ebab/ dalam proses pembiakan tersebut tidak ada

pen0atuan inti sel sebagaimana biasan0a pada eukarion/ 0ang terjadi han0a

berupa pertukaran materi genetika rekombinasi genetik $. erikut ini

beberapa cara pembiakan bakteri.


21/25


Teknik

21


a. Pembelahan iner

Pembelahan iner dapat dibagi atas tiga fase/ 0aitu sebagai berikut.

1$ Dase pertama/ sitoplasma terbelah oleh sekat 0ang tumbuh tegak lurus.

!$ Dase kedua/ tumbuhn0a sekat akan diikuti oleh dinding melintang.

"$ Dase ketiga/ terpisahn0a kedua sel anak 0ang identik. 5da bakteri

0ang segera berpisah dan terlepas sama sekali. 6ebalikn0a/ ada pula

bakteri 0ang tetap bergandengan setelah pembelahan/ bakteri

demikian merupakan bentuk koloni.Pada keadaan normal bakteri

dapat mengadakan pembelahan setiap !+ menit sekali. #ika

pembelahan berlangsung satu jam/ maka akan dihasilkan delapan

anakan sel.

b. Transformasi

Merupakan pemindahan sebagian materi genetika dari satu

bakteri ke bakteri lain. Pada proses transformasi tersebut 5'4 bebas sel

bakteri donor akan mengganti sebagian dari sel bakteri penerima/ tetapi

tidak terjadi melalui kontak langsung.

c. Transduksi

Merupakan pemindahan sebagian materi genetik dari sel bakteri

satu ke bakteri lain dengan perantaraan )irus. 6elama transduksi/

kepingan ganda 5'4 dipisahkan dari sel bakteri donor ke sel bakteri

penerima oleh bakteriofage )irus bakteri$.ila )irus-)irus baru sudah

terbentuk dan akhirn0a men0ebabkan lisis pada bakteri/ bakteriofage

0ang non)irulen menimbulakan respon lisogen$ memindahkan 5'4

dan bersatu dengan 5'4 inangn0a/ irus dapat men0ambungkan materi

genetikn0a ke '45 bakteri dan membentuk profag. &etika terbentuk

)irus baru/ di dalam '45 )irus sering terba7a sepenggal '45 bakteri

0ang diinfeksin0a. irus 0ang terbentuk memiliki dua macam '45

0ang dikenal dengan partikel transduksi transducing particle$.

d. &onjugasi


22/25


Teknik

22


Merupakan pemindahan sebagian materi genetika dari satu

bakteri ke bakteri lain melalui suatu kontak langsung.

Pelc9ar/!++;$

*. Daktor-faktor apa saja 0ang mempengaruhi pertumbuhan bakteriE

DaktorBfaktor 0ang mempengaruhi pertumbuhan bakteri atau kondisi untuk

pertumbuhan optimum adalah :

a. 4utrisi

4utrisi 0ang sesuai dibutuhkan bakteri untuk kulti)asi/ dimana nutrisi ini juga

meliputi unsure-unsur karbon/ nitrogen/ sulfur/ fosfor dan beberapa unsur

logam.

b. 6uhu

6uhu merupakan salah satu lingkungan fisik 0ang penting bagi kehidupan

mikroorganisme. 6emua pertumbuhan bergantung pada reaksi kimia7i dimana

reaksi tersebut juga dipengaruhi oleh suhu. &eragaman suhu ini dapat

mengubah proses-proses metabolic tertentu serta morfologi sel. 6uhu

pertumbuhan optimum merupakan suhu inkubasi 0ang memungkinkan

pertumbuhan tercepat selama periode 0ang singkat 1!-!+ jam$. akteri juga

dapat diklasifikasikan menurut suhu tertentu/ 0aitu:

• akteri psikrofil/ 0aitu bakteri 0ang hidup pada daerah suhu antara

+B "+

• akteri mesofil/ 0aitu bakteri 0ang hidup di daerah suhu antara

!2 B ,+

• akteri termofil/ 0aitu bakteri 0ang dapat hidup di daerah suhu tinggi 0aitu

2+ lebih.

c. 5tmosfir gas


23/25


Teknik

23


• 5erobik/ bakteri 0ang membutuhkan oksigen

• 5naerobik/ bakteri 0ang tumbuh tanpa oksigen molecular

• 5naerobik fakultatif/ bakteri 0ang dapat tumbuh secara aerobik dan anaerobic

• Mikroaerofilik/ bakteri 0ang tumbuh optimum bila ada sedikit oksigen

atmosferik

d. 'erajat keasaman atau kebasaan pH$

6etiap mikroorganisme mempun0ai kiaran hidup pada pH tertentu 0ang terdiri

atas pH minimum/ optimum dan maksimum. akteri mempun0ai kisaran pH

untuk pertumbuhan sekitar daerah netral antara =/2-;/2 namun beberapa bakteri

dapat tumbuh dalam keadaan sangat asam atau sangat basa. iasan0a bakteri

dikulti)asi dalam keadaan netral/ tetapi seringkali berubah akibat adan0a sen0a7a

asam atau basa 0ang dihasilkan selama pertumbuhan tersebut/ oleh karena itu

dapat dicegah dengan menggunakan larutan pen0angga dalam medium

e. &ondisi lain-lain

&ondisi ini disesuaikan oleh bakteri 0ang sekiran0a memiliki pers0aratan

tambahan/ contohn0a seperti bakteri fotoautotrofik 0ang membutuhkan caha0a/

selain itu juga dapat dipengaruhi oleh tekanan osmotik tenaga atau tegangan 0ang

terhimpun saat air berdifusi$ atau tekanan hidrostatik tegangan 9at alir$ bahkan

bakteri 0ang dapat tumbuh pada konsentrasi garam 0ang tinggi.

Pelc9ar/!++;$

. Kesim!ulan

.1 Inokulasi Mikroorganisme

erdasarkan percobaan inokulasi mikroorganisme 0ang telah dilakukan/maka dapat disimpulkan bah7a teknik inokulasi bakteri Escherichia coli/ bakteri

Bacillus subtilis' jamur Aspergilus niger dan jamur Sacharomyces cerevisiae

memerlukan kondisi aseptik sehingga setiap langkah harus steril dan dia7ali

dengan proses sterilisasi/ pembakaran jarum ose/ penggunaan sumbat kapas

tabung reaksi dan kertas min0ak coklat sebagai pembungkus petridish/ serta

inokulasi dalam incase.


24/25


Teknik

24


. Penggunaan Mikrosko!

erdasarkan percobaan mikroskop 0ang telah dilakukan/ maka dapat disimpulkan

bah7a:1. Morfologi bakteri dan jamur dapat dilihat dengan mikroskop dengan

perbesaran.

!. Hasil pengamatan bentuk bakteri dimana dalam percobaan ini digunakan

bakteri Escherichia coli berbentuk basil. 6edangkan jamur Sacharomyces

cerevisiae adalah berbentuk bulat.

". Preparat dapat dibuat untuk mengamati suatu ob0ek melalui mikroskop

dengan menempatkan objek diatas preparat lalu ditutup dengan dec+ glass.

Da5#ar Pus#aka

5hmad/ Ri9a Jainuddin. !++2# Pemanfaalan Khamnir Saccharomyces cerevisiae

unlu+ 2erna+# ogor : %arta9oa

enson. !++1. .icrobiological Applications 3ab .anual in /eneral

.icrobiology' Eighth Edition. 4e7 Kork : the Mc > , : 8nijo0o


25/25


25


Tortora/

inokulasi-mikrobiologi

Documents