UJI EFEK ANTIINFLAMASI INFUSA AKAR Eurycoma … · 2016-11-14 · terhadap udema kaki belakang mencit jantan galur Swiss yang terinduksi karagenin ... Pemberian obat antiinflamasi

UJI EFEK ANTIINFLAMASI INFUSA AKAR Eurycoma longifolia Jack

PADA MENCIT JANTAN GALUR SWISS TERINDUKSI KARAGENIN

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Program Studi Farmasi

Diajukan Oleh :

Indriyani Permatasari

NIM : 138114118

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2016

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i



SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Program Studi Farmasi

Diajukan Oleh :


NIM : 138114118

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2016


ii

Persetujuan Pembimbing



Skripsi yang diajukan oleh :


NIM : 138114118

telah disetujui oleh

Pembimbing Utama

Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. tanggal 3 November 2016


iii

Pengesahan Skripsi Berjudul



Oleh :


NIM : 138114118

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma

Pada tanggal 17 Oktober 2016

Mengetahui

Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma

Dekan

Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt.

Panitia Penguji : Tanda Tangan

1. Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. ..........................

2. Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt. ..........................

3. Damiana Sapta Candrasari, M.Sc. ..........................


iv

HALAMAN PERSEMBAHAN

“Whatever you are, be a good one” – Abraham Lincoln

Kupersembahkan karya ini untuk Tuhan Yesus Kristus sumber kekuatanku

Keluarga tercinta atas kasih sayang yang begitu tulus

Sahabat-sahabatku atas dukungan dan semangatnya

Almamaterku tercinta Universitas Sanata Dharma


v


vi

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, atas

berkat, cinta kasih dan penyertaan-Nya penulis dapat menyelesaikan penelitian

dan penyusunan naskah skripsi yang berjudul “Uji Efek Antiinflamasi Infusa

Akar Eurycoma longifolia Jack Pada Mencit Jantan Galur Swiss Terinduksi

Karagenin”. Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma,

Yogyakarta.

Penulis menyadari bawasannya dalam penyusunan naskah ini tidak lepas

dari bantuan dan dukungan berbagai pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini

penulis hendak menyampaikan terima kasih kepada:

1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi,

Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing atas

kesabaran, bimbingan, pengarahan, dan dukungan selama penelitian hingga

penyusunan naskah skripsi ini.

3. Bapak Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt., selaku Dosen Penguji yang

telah memberi kritik dan saran yang membangun hingga skripsi ini

tersusun.

4. Ibu Damiana Sapta Candrasari, M.Sc., selaku Dosen Penguji yang telah

memberi kritik dan saran yang membangun hingga skripsi ini tersusun.

5. Ibu Dita Maria Virginia, S.Farm., M.Sc., Apt., selaku Dosen Pembimbing

Akademik atas bimbingan selama ini.

6. Pak Heru, Pak Parjiman, Pak Wagiran, Pak Agung, selaku laboran yang

telah membantu selama penelitian.

7. Keluarga tersayang Bapak Hartanto Hartawan, Ibu Legi Anis Yohana,

Kakak Indah Permatasari, Adik Ingrid Ivana Permatasari dan Intan Ivena

Permatasari, atas segala kasih, cinta, nasihat, saran, dukungan, dan doa

yang selalu mengiringi langkah penulis.


vii

8. Teman-teman Eurycoma longifolia Jack, Jessy Florensia, Wina Susana,

Monita Natalia Siregar, Bernadetha Estika Pangestuti, dan Putu Ririn

Andreani, terimakasih untuk dukungan dan bantuannya selama ini.

9. Adovan Pujianta Ginting, S.T., atas doa, pengarahan, kesabaran, nasihat,

dan bantuan yang diberikan hingga skripsi ini tersusun.

10. Sahabat-sahabat penulis, Cindy dan Regina Hiacinta Eva Angelista, terima

kasih untuk kebersamaan yang terjalin, semangat dan dukungan selama ini.

11. Teman-teman “Kos Fasya” atas canda tawa dan kebersamaan selama ini.

12. Serta semua pihak yang telah banyak membantu penulis dalam

menyelesaikan naskah skripsi ini, namun tidak dapat penulis sebutkan satu

per satu.

Penulis menyadari bahwa tidak ada manusia yang sempurna, demikian juga

untuk skripsi ini yang masih jauh dari kata sempurna. Oleh karena itu

penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun, sehingga

skripsi ini dapat berguna bagi perkembangan ilmu pengetahuan serta bagi

para pembaca.

Yogyakarta, September 2016

Penulis


viii

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini

tidak memuat karya atau bagian karya orang lain, kecuali yang telah disebutkan

dalam kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.

Apabila di kemudian hari ditemukan indikasi plagiarisme dalam naskah

ini, maka saya bersedia menanggung segala sanksi sesuai peraturan perundang-

undangan yang berlaku.

Yogyakarta, 22 September 2016

Penulis



ix

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .............................................. ii

HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ...................................................................... iv

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ............................................ v

PRAKATA ....................................................................................................... vi

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .......................................................... viii

DAFTAR ISI .................................................................................................... ix

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xi

ABSTRAK ....................................................................................................... xiii

ABSTRACT ..................................................................................................... xiv

PENDAHULUAN ........................................................................................... 1

METODE PENELITIAN ................................................................................. 2

Bahan penelitian ............................................................................................... 2

Alat penelitian .................................................................................................. 2

Metode.............................................................................................................. 2

Determinasi tanaman ................................................................................... 2

Pengumpulan bahan uji ............................................................................... 3

Pembuatan infusa akar Eurycoma longifolia Jack ...................................... 3

Preparasi hewan uji ..................................................................................... 3


x

Pengukuran aktivitas antiinflamasi ............................................................. 3

Analisis hasil ............................................................................................... 4

HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................ 5

Hasil pengujian aktifitas antiinflamasi infusa akar Eurycoma longifolia

Jack ................................................................................................................... 6

KESIMPULAN ................................................................................................ 8

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 9

LAMPIRAN ..................................................................................................... 11

BIOGRAFI PENULIS ..................................................................................... 34


xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Akar dan infusa Eurycoma longifolia Jack .............................. 11

Lampiran 2. Cara pembuatan dan pengukuran udema pada kaki

mencit ....................................................................................... 12

Lampiran 3. Surat pengesahan determinasi Eurycoma longifolia Jack ........ 13

Lampiran 4. Surat keterangan tanaman Eurycoma longifolia Jack............... 14

Lampiran 5. Surat Ethical Clearance (EC) ................................................... 15

Lampiran 6. Surat kalibrasi jangka sorong (Digital Caliper) ....................... 16

Lampiran 7. Sertifikat penetapan kadar air serbuk akar

Eurycoma longifolia Jack ......................................................... 17

Lampiran 8. Surat legalitas penggunaan aplikasi SPSS untuk pengujian data

secara statistik ....................................................................... 19

Lampiran 9. Perhitungan dosis ...................................................................... 20

Lampiran 10. Hasil analisis statistika data orientasi penentuan dosis dan selang

waktu pemberian natrium diklofenak antara kelompok kontrol

negatif rentang 15 dan 30 menit ............................................... 23

Lampiran 11. Rata-rata AUC tebal udema dengan standard error (SE) pada uji

pendahuluan antara kelompok kontrol negatif dan kelompok

diklofenak rentang 15 dan 30 menit ......................................... 24

Lampiran 12. Hasil analisis dengan uji ANOVA satu arah dan uji Scheffe nilai

AUC total pada kelompok uji pendahuluan antara kelompok

kontrol negatif dan kelompok diklofenak rentang 15 dan 30

menit ......................................................................................... 26


xii

Lampiran 13. Hasil analisis uji statistik nilai AUC total pada uji antiinflamasi

infusa akar E. longifolia Jack ................................................... 28

Lampiran 14. Rata-rata AUC tebal udema dan standard error (SE) pada uji

antiinflamasi infusa akar E. longifolia Jack ............................. 29

Lampiran 15. Hasil analisis ANOVA satu arah dan uji Scheffe nilai AUC total

pada semua kelompok uji antiinflamasi infusa akar E. longifolia

Jack ........................................................................................... 32


xiii

Abstrak

Eurycoma longifolia Jack merupakan salah satu tanaman yang memiliki

potensi antiinflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan efek

antiinflamasi yang dihasilkan oleh infusa akar Eurycoma longifolia Jack (IAEL)

terhadap udema kaki belakang mencit jantan galur Swiss yang terinduksi

karagenin 1%, serta untuk mengetahui persentase penghambatan inflamasi dari

IAEL.

Sebanyak dua puluh lima ekor mencit akan dikelompokan menjadi lima

kelompok perlakuan. Kelompok I merupakan kelompok kontrol positif yang

diberikan natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kg BB, kelompok II

merupakan kelompok kontrol negatif yang diberikan aquadest dengan dosis 25

g/kg BB, kelompok III, IV, dan V merupakan kelompok perlakuan yang diberikan

IAEL dengan dosis masing-masing 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kg BB secara peroral.

Lima belas menit kemudian, kaki belakang mencit diinjeksikan dengan larutan

karagenin 1% secara subplantar. Udema diukur menggunakan jangka sorong

digital selama enam jam. Analisis hasil dilakukan dengan menghitung nilai AUC

yang selanjutnya digunakan untuk menghitung persen penghambatan inflamasi.

Hasil dianalisis secara statistik menggunakan Shapiro-Wilk, dilanjutkan dengan

ANOVA dan uji Scheffe dengan taraf kepercayaan 95%.

Hasil penelitian menunjukan bahwa IAEL memiliki aktivitas

antiinflamasi. Persen penghambatan inflamasi oleh IAEL pada dosis 0,83; 1,67;

dan 3,33 mg/g BB secara berturut-turut adalah 24,95; 21,87; dan 29,92%.

Kata Kunci: Antiinflamasi, Infusa, Akar Eurycoma longifolia Jack


xiv

Abstract

Eurycoma longifolia Jack is one of the plants that have potential anti-

inflammatory effect. This study aims to observe the anti-inflammatory effect by

infusion roots of Eurycoma longifolia Jack (IAEL) using carragenaan-induced

paw edema in mice as animal model and to determine the percentage inhibition of

inflammation of IAEL.

Twenty-five mice will be grouped into five treatment groups. Group I

represents the positive control group were given diclofenac sodium at dose 4.48

mg/kg, group II is the negative control group were given distilled water at a dose

of 25 g/kg, group III, IV, and V is the treatment group were given IAEL was

given at dose of 0.83; 1.67; and 3.33 g/kg BW orally. Fifteen minutes later, the

hind paw of mice were injected carragenaan 1%. Edema was measured using a

digital caliper for six hours. Analysis of the results is done by calculating the

AUC values were then used to calculate the percent inhibition of inflammation.

The results were statistically analyzed using the Shapiro-Wilk, followed by

ANOVA and Scheffe test with a level of 95%.

The results showed that IAEL has anti-inflammatory activity. Percent

inhibition of inflammation by IAEL at doses of 0.83; 1.67; and 3.33 mg/g BW

respectively is 24.95; 21.87; and 29.92%.

Keywords: Anti-inflammation, Infusion, Eurycoma longifolia Jacks roots


1

PENDAHULUAN

Inflamasi merupakan respon protektif terhadap kerusakan jaringan yang

disebabkan oleh trauma fisik, agen kimia berbahaya, atau agen mikrobiologi (Kumar dkk.,

2013). Pemberian obat antiinflamasi Non Steroidal Anti Inflammatory Drugs (NSAID)

sering digunakan untuk mengobati gejala inflamasi, namun pengobatan dengan obat ini

dapat disertai dengan efek samping seperti kerusakan gastrointestinal dan disfungsi platelet

(Aygun dkk., 2012). Selain penggunaan obat-obat sintetik digunakan pula pengobatan

alternatif dengan obat-obat tradisional. Dewasa ini, penggunaan obat tradisional semakin

diminati karena maraknya gerakan kembali ke alam (back to nature). Kecenderungan

untuk kembali ke alam membuat masyarakat memilih menggunakan obat alami yang

diyakini tidak memiliki efek samping seperti obat kimia, dan harga yang lebih terjangkau

daripada obat sintetik (Hernani, 2011).

Eurycoma longifolia Jack adalah salah satu tanaman yang memiliki potensi

antiinfamasi. Pada E. longifolia Jack terdapat beberapa senyawa bioaktif, seperti

eurycomalide, eurycomalactone, 7α-hydroxyeurycomalactone, 5,6-

dehydroeurycomalactone, eurycolactone, longilactone, 14,15β-dihydroxyklaieanone, 11-

dehydroklaieanone, eurycomanone, 13,21-dehydroeurycomanone, 1-methoxycarbonyl-β-

carboline, 9-hydroxycanthin-6-one, 9-methoxycanthin-6-one, 9,10-dimethoxycanthin-6-

one, 3,5,6,7,8,3′,4′-heptamethoxyflavone (Tran dkk., 2014). Rasa pahit yang ditemukan

pada akar E.longifolia Jack disebabkan oleh adanya kandungan utama, yaitu quassinoid

(Fiaschetti dkk., 2010). Quassinoid merupakan senyawa fenolik yang dapat berperan

sebagai donor proton. Mekanisme kerja quassinoid adalah dengan melepaskan atom

hidrogennya untuk meredam aktivitas oksidan. Selain itu, berperan dalam pemerangkap

(scavenger) logam pembentuk radikal bebas (Adikusuma dan Bachri, 2014). Bagian

tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah akar, dimana akar Eurycoma

longifolia Jack kaya akan kandungan quassinoid.

Penelitian sebelumnya terkait akar E. longifolia Jack juga telah dibuktikan oleh

Varghese dkk. (2012) yang melaporkan bahwa ekstrak akar Eurycoma longifolia Jack

memiliki aktivitas antioksidan dan antiinflamasi. Widiyantoro (2014) melaporkan bahwa

salah satu senyawa golongan quassinoid yaitu, eurycomasida dari fraksi etil asetat kulit

batang pasak bumi (E. longifolia) memiliki aktifitas antiinflamasi dengan mereduksi

radang akibat pemberian karagenin.


2

Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah induksi udema dengan

karagenin 1% secara subplantar pada telapak kaki belakang mencit. Bentuk sediaan yang

digunakan adalah infusa yang menggunakan air sebagai penyarinya. Pertimbangan

pemilihan bentuk sediaan infusa karena quassinoid yang terkandung dalam akar E.

longifolia Jack merupakan senyawa glikosida yang lebih mudah larut dalam air namun

kurang larut dalam pelarut organik (Supriyatna dkk., 2014). Oleh karena itu diharapkan

senyawa glikosida tersebut dapat tersari secara optimal dalam sediaan infusa.

Pertimbangan lainnya terkait pemilihan bentuk sediaan infusa pada penelitian ini karena

menyesuaikan dengan penggunaan di masyarakat yang mudah dan sederhana. Penelitian

ini bertujuan untuk membuktikan efek antiinflamasi dan untuk mengetahui persentase

penghambatan inflamasi dari infusa akar E. longifolia Jack (IAEL) yang diujikan pada

hewan uji berupa mencit jantan galur Swiss.

METODE PENELITIAN

Bahan

Akar E. longifolia Jack, mencit (Swiss) jantan umur 2-3 bulan, natrium-

diklofenak dalam serbuk Cataflam® (Novartis) yang diperoleh dari apotek Kimia Farma

Yogyakarta, larutan NaCl fisiologis 0,9% diperoleh dari apotek K-24 Yogyakarta,

karagenin tipe I (Sigma Chemical Co.) dan aquadest.

Alat

Timbangan analitik Mettler Teledo®, Jangka Sorong Digital Caliper “Wipro”,

spuit injeksi oral, alat-alat gelas (labu ukur, pengaduk, beaker glass, gelas ukur), ayakan

dengan nomor 40 dan 50, alat untuk membuat infusa (panci enamel, pengaduk, kain

flannel, termometer, heater).

Metode

Determinasi tanaman Eurycoma longifolia Jack

Determinasi tanaman E. longifolia Jack dilakukan di Fakultas Farmasi Universitas

Gadjah Mada, Yogyakarta


3

Pengumpulan bahan uji

Akar E. longifolia Jack diperoleh dari CV. Merapi Farma, Yogyakarta.

Pembuatan IAEL

Serbuk kering akar E. longifolia Jack ditimbang dan ditambahkan aquadest

sebanyak 100 mL. Setelah itu, dipanaskan pada suhu 90oC dan dijaga tetap dalam suhu

tersebut selama 15 menit. Waktu 15 menit dihitung ketika suhu campuran mencapai 90oC.

Setelah 15 menit, campuran tersebut diambil dan diperas menggunakan kain flannel

kemudian ditambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume

infusa akar E. longifolia Jack yang diinginkan (Direktorat Obat Asli Indonesia, 2010).

Dosis IAEL yang digunakan dalam penelitian ini adalah 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kg

BB. Kontrol positif yang digunakan adalah natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kg

BB (data terlampir). Kontrol negatif yang digunakan adalah aquadest dengan dosis 25g/kg

BB. Karagenin 1% digunakan sebagai zat inflamatogen.

Preparasi hewan uji

Hewan uji yang digunakan adalah mencit galur Swiss sebanyak 25 ekor, jenis

kelamin jantan, umur 2-3 bulan, berat badan 20-30 g. Sebelum digunakan, hewan uji

dipuasakan selama 18-24 jam dan hanya diberikan air minum. Hewan uji diadaptasikan di

lingkungan tempat penelitian selama 18-24 jam. Penelitian ini telah mendapat persetujuan

dari Komisi Etik, Fakultas Kedokteran, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, dengan

nomor referensi KE/FK/841/EC/2016.

Pengukuran aktivitas antiinflamasi

Pada penelitian ini digunakan 25 ekor mencit yang dibagi secara acak menjadi 5

kelompok perlakuan. Kelompok I merupakan kontrol negatif yang diberikan aquadest

secara peroral. Kelompok II merupakan kontrol positif yang diberikan natrium diklofenak

secara peroral. Kelompok III, IV, dan V merupakan kelompok perlakuan yang diberikan

IAEL dengan dosis 0,83; 1,67, dan 3,33 g/kgBB. Setelah selang waktu tertentu, mencit

diinjeksi dengan karagenin 1% secara subplantar. Udema yang terbentuk kemudian diukur

menggunakan jangka sorong digital selama 6 jam (Tjandrawinata dkk., 2014).


4

Hasil pengamatan berupa udem pada kaki belakang mencit ditunjukan dari luas

area dibawah kurva (AUC-Area Under Curve) yang merupakan selisih ketebalan udem

pada telapak kaki mencit yang terinduksi karagenin 1%. Pehitungan nilai AUC

menggunakan metode trapezoid yang ditunjukan dengan rumus sebagai berikut:

AUC0-x =( x t1-t0 ) + ( x t2-t0 ) + …. + ( x tn-tn-1 )

Keterangan:

AUC0-x = Area Under Curve dari ketebalan udema telapak kaki mencit pada menit ke-0

sampai menit ke-360

Cn – Cn-1 = Besarnya tebal udema dari menit ke-0 sampai menit ke-360

tn – tn-1 = Lamanya waktu pengukuran mulai dari menit ke-0 sampai menit ke-360

(Ikawati, Supardjan, Asmara, 2007).

Adanya aktifitas antiinflamasi dapat dilihat dari persen (%) penghambatan

inflamasi.

Penghambatan inflamasi (%) = x 100 %

Keterangan:

(AUC0-x)0 = AUC0-x rata-rata dari AUC ketebalan udema telapak kaki mencit

pada kelompok kontrol negatif (mm.menit)

(AUC0-x)n = AUC0-x rata-rata dari AUC ketebalan udema telapak kaki mencit

pada masing-masing hewan uji yang diberi senyawa uji dengan dosis sebesar n (mm.menit)

(Ikawati, Supardjan, Asmara, 2007).

Analisis hasil

Hasil pengujian kemudian dianalisis secara statistik untuk membandingkan antara

kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol positif dan negatif. Penelitian ini

menggunakan uji Shapiro-Wilk, dilanjutkan dengan ANOVA satu arah dengan taraf

kepercayaan 95%. Kemudian digunakan uji Scheffe untuk mengetahui kelompok mana

yang berbeda secara bermakna. Jika diperoleh nilai p<0,05 maka diartikan terdapat

perbedaan rerata yang bermakna antara dua kelompok data, jika diperoleh p>0,05 maka

diartikan perbedaan tersebut tidak bermakna (Dahlan, 2008). Untuk mengolah data

digunakan program komputer SPSS versi 22 dan Microsoft Excel.


5

HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan efek antiinflamasi dari IAEL dan

melihat seberapa besar persen penghambatan inflamasi yang dihasilkan. Metode yang

digunakan dalam penelitian ini adalah metode induksi udema pada kaki belakang hewan

uji menggunakan karagenin 1%. Udema yang terbentuk kemudian akan diukur

ketebalannya menggunakan jangka sorong digital. Alasan pemilihan metode induksi

udema karena pengukurannya yang cepat, akurat, objektif, serta mudah dilakukan karena

pengamatannya yang visible atau mudah diamati (Ma dkk., 2013). Karagenin dipilih

sebagai zat inflamatogen karena memiliki manfaat khusus sebagai senyawa iritan yang

digunakan pada pengujian obat antiinflamasi dan merupakan senyawa penginduksi

inflamasi akut pada hewan uji tanpa menyebabkan kerusakan pada kaki hewan uji yang

meradang (Necas dan Bartosikova, 2013).

Mekanisme aksi karagenin sebagai senyawa penginduksi inflamasi sinergis

dengan beberapa mediator inflamasi seperti bradikinin, serotonin, histamin, prostaglandin,

leukotrien, dan agen kemotaktik. Karagenin menginduksi udema dengan 2 fase yaitu: fase

awal merupakan fase pelepasan histamin, serotonin, dan bradikinin. Fase akhir

dihubungkan dengan pelepasan prostaglandin dan adanya induksi siklooksigenase (COX-

2) yang meningkatkan permeabilitas vaskular dan infiltrasi neutrofil yang menghasilkan

radikal bebas yang dapat menimbulkan udema, terjadinya peradangan lokal atau sistemik

dikaitkan dengan peningkatan sitokin pro-inflamasi TNF-α, IL-1, dan IL-6 (Necas dan

Bartosikova, 2013).

Penelitian mengenai E. longifolia Jack juga diakukan oleh Tran dkk. (2014) yang

mengisolasi kandungan senyawa bioaktif dari ekstrak metanol akar E. longifolia Jack

kemudian dari senyawa biokatif yang didapatkan selanjutnya dilihat penghambatan NF-kB

dengan menggunakan sel HEK-293/NF-kB-luc. Penghambatan NF-kB digambarkan dari

nilai IC50 pada masing-masing senyawa. Hasil menunjukan bahwa ekstrak metanol akar E.

longifolia Jack mengandung beberapa senyawa bioaktif, diantaranya eurycomalactone,

14,15β-dihydroklaieanone, dan 13,21-dehydroeurycomanone yang terbukti berpotensi

dalam menghambat NF-kB. Penghambatan ditunjukan dari nilai IC50 yang didapat berkisar

pada range µM. Penelitian lainnya juga dibuktikan oleh Hajjouli dkk. (2014) yang melihat

aktivitas dari eurycomanone dan eurycomanol yang terkandung dalam akar E. longifolia

Jack dalam menghambat TNFα dan aktifasi jalur NF-kB pada sel Jurkat dan K-562.


6

Keterangan:

: kontrol negatif

aquadest dosis 25 g/kg BB mencit

: kontrol positif

cataflam dosis 4,48 mg/kg BB mencit

: IAEL dosis 0,83

g/kg BB mencit : IAEL dosis 1,67

g/kg BB mencit

: IAEL dosis 3,33

g/kg BB mencit

Penghambatan NF-kB terlihat dari nilai IC50 yang didapatkan dari kedua senyawa, yakni

eurycomanone dan eurycomanol. Hasil penelitian menunjukan bahwa eurycomanone lebih

aktif dibanding eurycomanol, hal ini terbukti dari nilai IC50 eurycomanone yang lebih

rendah dibanding eurycomanol.

Bentuk sediaan yang dipilih adalah infusa menggunakan air sebagai penyarinya.

Alasan pemilihan bentuk sediaan infusa juga diperkuat dengan pustaka yang mengatakan

bahwa quassinoid yang terkandung dalam akar E. longifolia Jack memiliki kelarutan

dalam air yang baik, sehingga diharapkan quassinoid yang tersari juga semakin optimal.

Quassinoid merupakan senyawa glikosida yang lebih mudah larut dalam air namun kurang

larut dalam pelarut organik (Supriyatna dkk., 2014). Selain itu pertimbangan lain terkait

pemilihan bentuk sediaan infusa pada penelitian ini karena menyesuaikan dengan

penggunaan di masyarakat yang mudah dan sederhana, bentuk sediaan infusa juga

dianggap cocok untuk pemberian obat tradisional.

Hasil pengujian aktifitas antiinflamasi infusa akar E. longifolia Jack

Digunakan tiga peringkat dosis IAEL untuk pengujian aktifitas antiinflamasi pada

mencit jantan galur Swiss, yaitu 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kg BB. Kontrol positif yang

digunakan adalah natrium diklofenak 4,48 mg/kg BB (data terlampir), sedangkan kontrol

negatif yang digunakan adalah aquadest 25 g/kg BB yang diberikan secara peroral

kemudian setelah selang waktu 15 menit hasil orientasi (data terlampir) diinjeksikan

larutan karagenin 1% secara subplantar. Pengujian dilakukan dengan mengukur tebal udem

akibat pemberian karagenin 1% pada kaki belakang mencit selama 6 jam. Hasil pengujian

aktifitas antiinflamasi ditunjukan pada gambar 1.

Gambar 1. Kurva rata-rata volume udem kaki mencit yang diinduksi karagenin 1% selama 6 jam

pengamatan pada pengujian aktivitas antiinflamasi IAEL.


7

Gambar 1 menunjukan pada kelompok kontrol negatif didapatkan profil kurva

yang paling tinggi diantara dengan kurva lainnya, kurva yang terbentuk pada kontrol

negatif akan dijadikan pembanding untuk selanjutnya dibandingkan dengan kurva

kelompok kontrol positif dan perlakuan. Kelompok kontrol positif memiliki profil kurva

yang paling rendah jika dibandingkan dengan kurva lainnya. Kelompok perlakuan IAEL

dosis 0,83; 1,67 dan 3,33 g/kg BB memiliki kurva yang berada diantara kurva kelompok

kontrol negatif dan kurva kelompok kontrol positif. Tabel 1 menunjukan hasil penelitian

berupa nilai AUC, %PI, dan hasil analisa statistik pada tiap kelompok.

Tabel 1. Rata-rata AUC, %PI, serta hasil analisis Scheffe pada masing-masing kelompok pada pengujian

aktivitas antiinflamasi IAEL.

Kelompok Rata-rata

AUC

(mm.menit)

( ± SE)

Persentase

penghambatan

inflamasi (%)

Perbandingan

dengan

kontrol

negatif

Perbandingan

dengan

kontrol

positif

Kontrol negatif

(aquadest 25 g/kg

BB)

446,19 ± 2,60 0 - BB

Kontrol positif (Na-

diklofenak 4,48

mg/kg BB)

255,88 ± 7,50 42,65 BB -

IAEL 0,83 g/kg BB 334,86 ± 5,60 24,95 BB BB

IAEL 1,67 g/kg BB 348,59 ± 6,16 21,87 BB BB

IAEL 3,33 g/kg BB 312,70 ± 4,68 29,92 BB BB

Tabel 1 menunjukan nilai AUC pada masing-masing kelompok perlakuan. Pada

kelompok kontrol negatif, kontrol positif, dan perlakuan tiga peringkat dosis IAEL

didapatkan nilai AUC secara berturut-turut sebesar 446,19; 255,88; 334,86; 348,59; dan

312,70. Nilai AUC kelompok perlakuan berada di antara nilai AUC pada kontrol negatif

dan positif. Dimana kemampuan mengurangi tebal udema pada kelompok perlakuan lebih

besar dibandingkan dengan kontrol negatif, namun masih lebih kecil bila dibandingkan

dengan kontrol positif.

Persentase penghambatan inflamasi dari IAEL dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kg BB

secara berturut-turut adalah 24,95; 21,87; dan 29,92%. Kontrol positif yaitu, natrium

diklofenak mampu mengurangi tebal udema sebesar 42,65%. Hasil analisis statistik

digunakan untuk membandingkan antara kelompok perlakuan dengan kontrol positif dan

negatif. Hasil yang diperoleh menunjukan bahwa semua kelompok perlakuan dosis IAEL


8

memiliki hasil yang berbeda bermakna dengan kontrol negatif, hal ini menunjukan bahwa

semua kelompok perlakuan dosis IAEL memiliki aktifitas antiinflamasi dalam mengurangi

tebal udema yang terbentuk dibuktikan dengan nilai persen penghambatan inflamasi yang

dihasilkan oleh masing-masing kelompok perlakuan dosis IAEL (tabel 1). Hasil statistik

juga menunjukan bahwa semua kelompok perlakuan dosis IAEL memiliki perbedaan yang

bermakna dengan kontrol positif. Hal ini menunjukan bahwa kelompok perlakuan dosis

IAEL memiliki aktifitas dalam menghambat inflamasi, namun efeknya berada dibawah

kontrol positif (tabel 1).

Hasil penelitian menunjukan bahwa IAEL terbukti memiliki aktifitas antiinflamasi

Hal ini didukung oleh pustaka yang menyebutkan bahwa E. longifolia Jack memiliki

aktifitas antiinflamasi dengan menghambat aktivasi jalur NF-kB, dimana penghambatan

jalur NF-kB merupakan target utama dari aktivitas antiinflamasi. Disamping itu juga E.

longifolia Jack yang mengandung senyawa quassinoid, dimana quassinoid memiliki

potensi antiinflamasi dengan cara menghambat biosintesis prostaglandin. Prostaglandin

merupakan salah satu mediator inflamasi, dimana biosintesisnya berlangsung dengan

bantuan radikal bebas. Jika radikal bebas tidak ditangkap maka biosintesis prostaglandin

akan terus berjalan dan menyebabkan terjadinya inflamasi (Wulandari dan Hendra, 2011).

KESIMPULAN

1. IAEL memiliki aktifitas antiinflamasi pada mencit jantan galur Swiss yang terinduksi

karagenin 1%.

2. Persentase penghambatan inflamasi oleh IAEL pada dosis 0,83; 1,67; dan 3,33 g/kg BB

berturut-turut adalah 24,95; 21,87; dan 29,92%.


9

DAFTAR PUSTAKA

Adikusuma, W., dan Bachri, M.S., 2014. Efek Hepatoprotektif Serbuk Akar Pasak Bumi

(Eurycoma longifolia Jack) Dilihat Dari Aktivitas SGPT-SGOT Tikus Jantan

Yang Diinduksi CCl4. Pharmaciana, 4 (2), 165-170.

Aygun, D., Kaplan, S., Odaci, E., Onger, M.E., dan Altunkaynak, M.E., 2012. Toxicity of

Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs: A Review of Melatonin and Diclofenac

Sodium Association. Histology Histopatology, 27, 417-436.

Dahlan, M.S., 2008. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Edisi 3. Salemba Medika,

Jakarta, 53-58.

Direktorat Obat Asli Indonesia, 2010. Acuan Sediaan Herbal Volume Kelima, Edisi ke-1.

Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta, 3.

Djunarko, I., Donatus, I.A., dan Noni, 2003. Pengaruh Perasan Buah Mengkudu (Morinda

citrifolia L.) terhadap Daya Antiradang Diklofenak pada Mencit Jantan, Jurnal

Farmasi Sains dan Komunitas, 1, 10-17.

Fiaschetti, G., Grotzer, M., Shalaby, T., Castelletti, D., Arcaro, A., 2010. Quassinoids:

From traditional drugs to new cancer therapeutics. Curr. Med. Chem., 18, 316–

328.

Hajjouli, S., Chateauvieux, S., Teiten, M.H., Orlikova, B., Schumacher, M., Dicato, M.,

Choo, C.Y., Diederich, M., 2014. Eurycomanone and Eurycomanol from

Eurycoma longifolia Jack as Regulators of Signaling Pathways Involved in

Proliferation, Cell Death and Inflammation. Molecules, 19, 14649-14665.

Harmita, dan Radji, M., 2008. Buku Ajar Analisis Hayati, Edisi 3, Penerbit Buku

Kedokteran EGC, Jakarta, 66-67.

Hernani, 2011. Pengembangan Biofarmaka Sebagai Obat Herbal Untuk Kesehatan. Buletin

Teknologi Pascapanen Pertanian, 7, 20-29.

Ikawati, Z., Supardjan, A.M., Asmara, L.S., 2007. Pengaruh Senyawa Heksagamavunon-1

terhadap Inflamasi Akut Akibat Reaksi Anafilakasis Kutaneus Aktif pada Tikus

Wistar Jantan Terinduksi Ovalbumin. Laporan Penelitian, Universitas Gadjah

Mada, Yogyakarta, 34-36.

Kumar, S., Bajwaa, B.S., Kuldeep, S., dan Kalia, A.N., 2013. Anti-Inflammatory Activity

of Herbal Plants:A Review, International Journal Of Advances In Pharmacy,

Biology And Chemistry, 2, 272-281.


10

Ma, Y., Li, Y., Li, X., dan Wu, Y., 2013. Anti-Inflammatory Effects of 4-

Methylcyclopentadocanone on Edema Models in Mice. Int. J. Mol. Sci., 14,

23980-23992.

Manurung, D.Y.S., 2013, Efek Antiinflamasi Infusa Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

pada Udema Telapak Kaki Mencit Betina Terinduksi Karagenin dengan

Pengukuran Jangka Sorong, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Necas, J., dan Bartosikova, L., 2013. Carragenan: a review. Veterinarni Medicina, 58, 187-

205.

Supriyatna, Moelyono, M.W., Iskandar, Y., Febriyanti, R.M., 2014. Prinsip Obat Herbal:

Sebuah Pengantar Untuk Fitoterapi. Edisi ke-1, Deepublish, Yogyakarta, 31.

Tjandrawinata, R. R., Djunarko, I., Fenty, dan Hendra, P., 2014. Anti-Inflammation Effects

of Bioactive Fraction DLBS0533 Containing Phaleria Marcocarpa and Nigella

Sativa on Animal Model. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical

Sciences, 7, 408-411.

Tran, T.V.A., Malainer, C., Schwaiger, S., Atanasov, A.G., Heiss, E.H., Dirsch, V.M.,

Stuppner, H., 2014. NF-kB Inhibitors from Eurycoma longifolia. J. Nat. Prod.,

77, 483–488.

Varghese, C.P., Ambrose, C., Jin, S.C., Lim, Y.J., dan Keisaban, T., 2012. Antioxidant and

Anti-inflammatory Activity of Eurycoma longifolia Jack, A Traditional Medicinal

Plant in Malaysia. International Journal of Pharmaceutical Sciences and

Nanotechnology, 5(4), 1875-1878.

Widiyantoro, A., 2014, Metabolit Sekunder Prospektif Dari Famili Simaroubaceae. Jurnal

Penelitian Saintek, 19 (2), 14-22.

Williamson, S.M., Okpako,D.T., dan Evans, F.J., 1996. Pharmacological Method in

Phytotherapy Research Volume 1 : Selection, Preparation, and Pharmacologycal

Evaluation of Plant Material, John Willey and Sons Ltd., England, 131-136.

Wulandari, D., dan Hendra P., 2011, Efek Analgesik Infusa Daun Macaranga tanarius L.

Pada Mencit Betina Galur Swiss. Jurnal Bionatura, 13 (2), 108-117.


11

LAMPIRAN

Lampiran 1. Akar Eurycoma longifolia Jack dan infusa Eurycoma longifolia

Jack

Gambar 2. Akar dan serbuk Eurycoma longifolia Jack

Gambar 3. Infusa akar Eurycoma longifolia Jack


12

Lampiran 2. Cara pembuatan dan pengukuran udema pada kaki mencit

Gambar 4. Udema pada kaki belakang mencit dan pemberian infusa

secara peroral

Gambar 5. Pengukuran udema pada kaki belakang mencit menggunakan

jangka sorong digital.


13

Lampiran 3. Surat pengesahan determinasi Eurycoma longifolia Jack


14

Lampiran 4. Surat keterangan tanaman


15

Lampiran 5. Surat Ethical Clearance (EC)


16

Lampiran 6. Surat kalibrasi jangka sorong (Digital Caliper)


17

Lampiran 7. Sertifikat penetapan kadar air dan cara penetapan kadar air

serbuk akar Eurycoma longifolia Jack


18


19

Lampiran 8. Surat legalitas penggunaan aplikasi SPSS untuk pengujian data

secara statistik


20

Lampiran 9. Perhitungan dosis

a. Dosis aquadest

Perhitungan dosis untuk aquadest dengan menetapkan ½ dari volume

maksimal yaitu 0,5 ml. Berat jenis aquadest adalah 1 g/ml. Dosis aquadest yang

digunakan adalah 25 g/kg BB mencit. Perhitungan dosis untuk aquadest adalah

sebagai berikut:

D x BB = C x V

D x 20 g = 1000 mg/ml X 0,5 ml

D = 25 mg/g = 25 g/kg BB mencit

b. Dosis karagenin

Dosis karagenin yang digunakan mengacu pada penelitian Williamson

dkk. (1996) yang menggunakan konsentrasi 1% dalam pelarut NaCl fisiologis

0,9% kemudian diinjeksikan secara subplantar pada telapak kaki belakang mencit

sebanyak 0,05 ml. Bobot mencit adalah 20 g. Diperoleh dosis karagenin 25 mg/kg

BB mencit.

D x BB = C x V

D x 20 g = 10 mg/ml x 0,05 ml

D = 0,0025 mg/g = 25 mg/kg BB

c. Dosis natrium diklofenak

Terdapat dua dosis natrium diklofenak yang digunakan, yaitu dosis 4,48

dan 9,1 mg/kg BB.


21

- Dosis 4,48 mg/kg BB, mengacu pada penelitian Djunarko, Donatus, dan Noni

(2003) dimana dosis diklofenak untuk tikus 250 g adalah 40 mg/kg BB.

Perhitungan dosis diklofenak adalah sebagai berikut:

=

X = = 32 mg/kg BB

Selanjutnya mengkonversi dosis tikus 200g ke mencit 20g. Faktor konversi

adalah sebesar 0,14 (Harmita dan Radji, 2008), sehingga diperoleh:

Dosis = 0,14 x 32 mg/kg BB = 4,48 mg/kg BB

- Dosis 9,1 mg/kg BB, mengacu pada penelitian Manurung (2011). Perhitungan

dosis dikofenak adalah sebagai berikut:

Dosis diklofenak untuk manusia dengan BB 50 kg adalah 50 mg, maka dosis

untuk manusia dengan BB 70 kg adalah 70 mg. konversi dosis dari manusia 70

kg ke mencit 20 g adalah sebesar 0,0026, sehingga dosis untuk mencit 20 g

adalah:

Dosis diklofenak = 0,0026 x 70 mg

= 0,182 mg/20 g BB mencit

= 9,1 mg/kg BB mencit

Berdasarkan hasil orientasi, didapatkan bahwa dosis diklofenak yang

digunakan adalah 4,48 mg/kg BB mencit dengan selang waktu 15 menit, hal ini

dikarenakan dosis dan selang waktu tersebut dapat menurunkan tebal udema pada

kaki belakang mencit secara berarti.


22

d. Dosis infusa akar Eurycoma longifolia Jack

Penetapan peringkat dosis infusa akar Eurycoma longifolia Jack

berdasarkan pada:

1) Bobot tertinggi mencit adalah 30 g

2) Pemberian infusa akar Eurycoma longifolia Jack menggunakan volume

maksimal pemberian secara peroral (1 ml)

3) Konsentrasi infusa akar Eurycoma longifolia Jack yang digunakan yaitu

10% (serbuk dapat terendam sempurna dalam air)

Penetapan dosis tertinggi infusa akar Eurycoma longifolia Jack, yaitu :

D x BB = C x V

D x 30 g = 10g/100mL x 1 ml

D x 30 g = 100 mg/ml x 1 ml

D = 3,33 mg/g BB

= 3,33 g/kg BB

Dua dosis lainnya diperoleh dengan membagi 2 dari dosis 3,33 g/kg BB

kemudian dibagi 2 lagi sehingga diperoleh 3 peringkat dosis yaitu 3,33 g/kg BB,

1,67 g/kg, dan 0,83 g/kg BB.


23

Lampiran 10. Hasil analisis statistika data orientasi penentuan dosis dan

selang waktu pemberian natrium diklofenak antara kelompok kontrol

negatif rentang 15 dan 30 menit

Uji Normalitas


24

Lampiran 11. Rata-rata AUC tebal udema dengan standard error (SE) pada

uji pendahuluan antara kelompok kontrol negatif dan kelompok diklofenak

rentang 15 dan 30 menit


25


26

Lampiran 12. Hasil analisis dengan uji ANOVA satu arah dan uji Scheffe

nilai AUC total pada kelompok uji pendahuluan antara kelompok kontrol

negatif dan kelompok diklofenak rentang 15 dan 30 menit

Uji Homogenitas


27

AUC Scheffe


28

Lampiran 13. Hasil analisis uji statistik nilai AUC total pada uji

antiinflamasi infusa akar E. longifolia Jack

Uji Normalitas


29

Lampiran 14. Rata-rata AUC tebal udema dan standard error (SE) pada uji

antiinflamasi infusa akar E. longifolia Jack


30


31


32

Lampiran 15. Hasil analisis ANOVA satu arah dan uji Scheffe nilai AUC

total pada semua kelompok uji antiinflamasi infusa akar E. longifolia Jack

Uji Homogenitas


33

AUC Scheffe


34

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul “Uji Efek Antiinflamasi

Infusa Akar Eurycoma longifolia Jack pada Mencit

Jantan Galur Swiss Terinduksi Karagenin” memiliki

nama lengkap Indriyani Permatasari, lahir di

Cirebon pada tanggal 1 Mei 1996, merupakan anak

kedua dari empat bersaudara pasangan Hartanto

Hartawan dan Legi Anis Yohana. Pendidikan formal

yang ditempuh penulis yaitu TK Kristen BPK

Penabur Jamblang (2000-2001), pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Negeri 1

Arjawinangun (2001-2007), pendidikan Sekolah Menengah Pertama di SMP

Kristen 1 BPK Penabur Cirebon (2007–2010), pendidikan Sekolah Menengah

Atas di SMA Kristen BPK Penabur Cirebon (2010-2013). Penulis melanjutkan

pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma pada Tahun

2013. Semasa diperkuliahan, penulis mendapat beasiswa Bantuan Pendidikan

Peningkatan Prestasi Akademik dari Dikti (2014). Penulis terlibat dalam berbagai

kepanitiaan, antara lain menjadi anggota divisi humas pada acara Pharmacy

Badminton Cup (2013), anggota divisi acara pada Cara Belajar Ibu Aktif (2014),

anggota divisi acara pada Komisi Pemilihan Umum Presiden dan Wakil Presiden

Badan Eksekutif Mahasiswa Universitas (2015), sekertaris pada Pharmacy 3 ON

3 (2015), dan anggota divisi acara Pengambilan Sumpah Apoteker Angkatan

XXX Universitas Sanata Dharma (2016). Selain itu penulis juga pernah menjadi

asisten praktikum Farmakologi-Toksikologi (2015-2016).


UJI EFEK ANTIINFLAMASI INFUSA AKAR Eurycoma … · 2016-11-14 · terhadap udema kaki belakang mencit jantan galur Swiss yang terinduksi karagenin ... Pemberian obat antiinflamasi

Documents