Page 1
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK BIJI
KELOR (Moringa oleifera Lmk.) TERHADAP
BAKTERI Shigella dysenteriae
SKRIPSI
OLEH:
ENI RAHMAWATI
H71214009
PROGRAM STUDI BIOLOGI
JURUSAN SAINS
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SUNAN AMPEL
SURABAYA
2018
Page 6
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
xii
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK BIJI KELOR (Moringa oleifera
Lmk.) TERHADAP BAKTERI Shigella Dysenteriae
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi esktrak biji
kelor (Moringa oleifera Lmk.) terhadap bakteri Shigella dysenteriae dengan
menggunakan pelarut metanol. Penelitian eksperimental ini menggunakan RAL
(Rancangan Acak Lengkap) yang terdiri atas uji difusi dan uji dilusi. Uji difusi terdiri
atas 4 konsentrasi ekstrak, masing-masing terdiri atas (75, 100, 200, 400 mg/ml).Uji
dilusi terdiri atas 5 konsentrasi ekstrak, masing-masing terdiri atas (75, 60, 45, 30, 15
mg/ml). Parameter yang diukur untuk uji difusi adalah diameter zona hambat (mm),
masing-masing perlakuan terdiri atas 3 ulangan. Uji dilusi digunakan untuk mencari
nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dan Konsentrasi Bunuh Minimum
(KBM). Data diameter daerah zona hambat dianalisis secara statistik menggunakan
uji Kruskall-Wallis dilanjutkan uji Mann-Whitney, sedangkan data uji dilusi
dianalisis secara deskriptif. Hasil penelitian uji difusi menunjukkan bahwa
konsentrasi ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) berpengaruh menghambat
pertumbuhan bakteri. Nilai zona hambat tertinggi untuk ekstrak biji kelor pada
konsentrasi 400 mg/ml sebesar 7,8 mm. Nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
pada 75 mg/ml dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) belum dapat ditemukan,
namun memberikan pengaruh penghambatan pertumbuhan.
Kata kunci : Moringa oleifera Lmk., Shigella dysenteriae, KHM KBM.
Page 7
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
xiii
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF MORINGA SEED EXTRACTS (Moringa
oleifera Lmk.) AGAINST BACTERIA Shigella dysenteriae
ABSTRACT
This research was aimed to determine the effects of concentration of moringa
seed extracts (Moringa oleifera Lmk.) against bacteria Shigella dysenteriae using
solvent methanol. This experimental study using the CRD (Completely Randomized
Design) which consists of diffusion test and the test dilution. Diffusion test consisted
of 4 concentrations of extracts, each consisted of (75, 100, 200, 400 mg/ml). Dilution
test consisted of 5 concentrations of extract, each consisted of (75, 60, 45, 30, 15
mg/ml). The parameters measured for the diffusion test is the diameter of the
inhibition zone (mm), each treatment consisted of 3 replications. Dilution test was
used to find the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum
Bactericidal Concentration (MBC). Diameter of the inhibition zone data were
analyzed using a statistical test of Kruskall-Wallis test followed Mann-Whitney, the
dilution of the test data were analyzed descriptevely. The results of diffusion tests
showed that the concentration of moringa seed extract (Moringa oleifera Lmk.) gives
the effect of growth inhibition. The inhibition zone highest value for the Moringa
oleifera seed extract at a concentration of 400 mg/ml 7,8 mm. Minimum Inhibitory
Concentration (MIC) values are at 75 mg/ml and Minimum Bactericidal
Concentration (MBC) can not be found, but it gives the effect of growth inhibition.
Key word : Moringa oleifera Lmk., Shigella dysenteriae, MIC MBC
Page 8
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
vi
DAFTAR ISI
HALAMAN SAMPUL .................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. ii
PERNYATAAN KEASLIAN .......................................................................... iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv
DAFTAR ISI .................................................................................................... vi
DAFTAR TABEL ............................................................................................ ix
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xi
ABSTRAK ....................................................................................................... xii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1
A. Latar Belakang .......................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .................................................................... 6
C. Tujuan Penelitian ...................................................................... 6
D. Batasan Penelitian .................................................................... 7
E. Manfaat Penelitian .................................................................... 8
BAB II KAJIAN PUSTAKA ......................................................................... 9
A. Kelor (Moringa oleifera Lmk.) ................................................ 9
1. Deskripsi Umum ................................................................... 9
2. Klasifikasi ............................................................................. 10
B. Komponen Kimiawi Biji Kelor (Moringa oleifera Lmk.) ........ 10
C. Manfaat Biji Kelor (Moringa oleifera Lmk.) ........................... 11
D. Metode Ekstraksi ...................................................................... 13
1. Ekstraksi ............................................................................... 13
2. Ekstraksi dengan Menggunakan Pelarut .............................. 13
a. Cara Dingin ...................................................................... 13
1). Maserasi ..................................................................... 13
2). Perkolasi .................................................................... 14
b. Cara Panas........................................................................ 14
1). Refluks ....................................................................... 14
2). Soxhlet ....................................................................... 14
3). Digesti ........................................................................ 14
4). Infus ........................................................................... 14
5). Dekok ......................................................................... 14
3. Destilasi Uap ........................................................................ 15
E. Antimikroba .............................................................................. 15
1. Mekanisme Kerja Antimikroba ............................................ 15
a. Menghambat Sintesis Dinding Sel ................................... 16
b. Menghambat Sintesis Asam Nukleat ............................... 16
c. Menghambat Sintesis Protein........................................... 16
d. Merusak Keutuhan Membran sel ..................................... 16
e. Menghambat Sintesis Metabolisme Esensial ................... 16
2. Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Antimikroba ............ 17
a. Konsetrasi Antimikroba ................................................... 17
b. Jumlah Mikroorganisme .................................................. 17
c. Suhu ................................................................................. 17
Page 9
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
vii
d. Jenis Mikroorganisme ...................................................... 17
e. pH ..................................................................................... 17
f. Adanya Senyawa Organik ................................................ 17
3. Metode Pengujian Antimikroba ........................................... 18
a. Metode Penyebaran (diffusion method) ........................... 18
1). Metode cakram kertas (disc diffusion method) .......... 18
2). Metode garis tingkat (E-Test) .................................... 18
b. Metode Pengenceran (dilution method) ........................... 18
1). Metode dilusi cair (broth dilution test) ...................... 18
F. Senyawa Fitokimia ................................................................... 19
1. Flavonoid .............................................................................. 19
2. Alkaloid ................................................................................ 20
3. Saponin ................................................................................. 20
4. Tanin ..................................................................................... 20
G. Bakteri Shigella dysenteriae ..................................................... 21
1. Deskripsi Umum ................................................................... 21
2. Klasifikasi ............................................................................. 23
H. Patogenitas Shigella dysenteriae .............................................. 23
BAB III KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN ............ 25
A. Kerangka Konsep ..................................................................... 25
B. Hipotesis Penelitian .................................................................. 26
BAB IV METODOLOGI PENELITIAN ........................................................... 27
A. Rancangan Penelitian ............................................................... 27
B. Waktu dan Lokasi Penelitian .................................................... 28
C. Bahan dan Alat Penelitian ........................................................ 29
1. Bahan Penelitian ................................................................... 29
2. Alat Penelitian ...................................................................... 29
D. Variabel Penelitian ................................................................... 29
1. Variabel Bebas ...................................................................... 29
2. Variabel Terikat .................................................................... 30
3. Variabel Terkendali .............................................................. 30
E. Prosedur Penelitian ................................................................... 30
1. Koleksi Tumbuhan ............................................................... 30
2. Ekstraksi Tumbuhan ............................................................ 30
3. Uji Fitokimia ........................................................................ 32
a. Uji Alkaloid .................................................................... 32
b. Uji Flavonoid .................................................................. 32
c. Uji Saponin ..................................................................... 32
d. Uji Tanin ......................................................................... 32
4. Sterilisasi Alat dan Bahan .................................................... 33
5. Pembuatan Stok Bakteri....................................................... 33
6. Pembuatan Suspensi Mikroba Uji........................................ 33
7. Penentuan Aktivitas Antimikroba ........................................ 34
a. Metode Cakram Kertas/Disc Diffusion Method.............. 34
b. Metode Pengenceran dalam Tabung/Dilusi .................... 34
F. Analisis Data ............................................................................ 35
Page 10
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
viii
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 36
A. Hasil .......................................................................................... 36
1. Hasil Uji Difusi Kertas Cakram (disc diffusiom method)
terhadap Shigella dysenteriae .............................................. 36
2. Hasil Uji Dilusi (tube dilution method) terhadap
Shigella dysenteriae ............................................................. 39
B. Pembahasan .............................................................................. 40
1. Pembahasan Uji Difusi Kertas Cakaram (disc diffusion
method) terhadap Shigella dysenteriae ................................. 40
2. Pembahasan Uji Dilusi (tube dilution method) terhadap
Shigella dysenteriae .............................................................. 42
BAB VI PENUTUP ............................................................................................ 47
A. Simpulan ...................................................................................... 47
B. Saran ............................................................................................ 47
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 48
LAMPIRAN ........................................................................................................ 53
Page 11
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Disentri merupakan salah satu penyakit diare akut dengan kondisi
kronis meliputi diare, nyeri perut, demam, mual dan muntah. Tinja yang
melewati usus besar berjalan dengan cepat karena bakteri telah menembus
usus besar (Munfaati et al., 2015).
Salah satu penyebab disentri adalah Shigella dysenteriae atau disebut
penyakit disentri basiler, yaitu suatu infeksi peradangan akut saluran
pencernaan dengan kondisi kronis yang dapat berakibat fatal pada penderita
jika tidak ditangani dengan benar (Arthasari., 2015). Menurut WHO (2016)
dari 165 juta angka kejadian diare yang disebabkan oleh Shigella dysenteriae
setiap tahun, kebanyakan 99 % terjadi di negara berkembang. Pada tahun 2013
, menunjukkan angka kematian sebanyak 28.000 hingga 48.000 kasus kematian
yang disebabkan oleh Shigella dysenteriae, sebagian besar kasus terjadi di
negara berkembang dan lebih dominan terjadi pada anak-anak usia di bawah 5
tahun.
Shigella dysentriae dapat bertahan hidup di lingkungan asam (lambung)
dan menyerang sel-sel epitel usus besar untuk dapat menginfeksi manusia.
Menyebabkan usus mengalami inflasi serta sel- sel akan mati, sehingga diare
tampak berdarah dan berlendir. Inilah yang menjadi karakteristik infeksi
Shigella dysenteriae (Sari, 2015).
Page 12
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
2
Diare shigellosis pada anak usia di bawah 5 tahun merupakan masalah
serius karena manifestasinya cukup berat akibat komplikasi yang dapat
menyebabkan kematian (Abdullah et al., 2012). Komplikasi shigelosis
penyebab kematian meliputi perforasi usus, prolapse rekti, kejang, anemia,
hiponatremia, toxic megacolon dan sindrom hemolitik uremik. Pada kasus E.
coli apabila terjadi komplikasi berlanjut akan menyebabkan sindrom hemolitik
uremik (Kusumaningsih, 2010).
Antibiotik yang resisten terhadap Shigella dysenteriae diantaranya
streptomycin, ampisilin, tetrasiklin, chloramphenicol dan ciprofloxacin.
Penggunan antibiotik dapat menganggu fungsi kinerja pada organ hati, jantung
dan ginjal jika penggunaannya dalam waktu yang lama (Munfaati et al., 2015).
Pada saat ini diperlukan pengobatan alternatif dari tanaman herbal untuk
menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae.
Shigella dysenteriae memiliki resistensi terhadap beberapa antibiotik
diantaranya tetrasiklin, ampisilin, streptomycin dan chloramphenicol.
Penggunaan antibiotik dalam jangka panjang dan tidak tepat dosis juga dapat
menganggu fungsi kinerja pada organ ginjal, jantung dan hati (Munfaati et al.,
2015). Oleh karena itu, perlu dikembangkan alternatif pengobatan dengan
menggunakan bahan alam yang diharapkan lebih efektif, efisien dan aman
dalam upaya menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae.
Sebagai manusia yang dikaruniai akal, manusia diperintahkan untuk
selalu berpikir dan mencari sesuatu yang belum diketahui manfaat dan
bahayanya, baik itu benda mati maupun makhluk hidup seperti hewan dan
Page 13
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
3
tumbuhan. Allah SWT menciptakan segala sesuatu agar kita berpikir, seperti
yang dijelaskan di dalam firman-Nya Surat Ar-Ra’d (13) ayat 4:
واحد لا ء با وان يسقى وان وغي ر صن يل صن و ف الرض قطع متجورت وجن ت من اعناب وزرع ون
عقلون ال ك لقلي ان ف ذلك ليت ل قوم ي ون فضل ب عضها على ب عض ف
Artinya : ”Dan di bumi ini terdapat bagian-bagian yang berdampingan, dan
kebun-kebun anggur, tumbuhan-tumbuhan dan pohon korma yang bercabang
dan yang tidak bercabang, disirami dengan air yang sama. Kami melebihkan
sebagian tumbuh-tumbuhan itu atas sebagian yang lain tentang rasanya.
Sesungguhnya pada yang demikian itu terdapat tanda-tanda (kebesaran Allah)
bagi kaum yang berfikir” (QS ar Ra’d (13) : 4)
Ayat di atas menyeru kita untuk berfikir bahwa semua yang ada di bumi
diciptakan memiliki tujuan. Seperti Allah menciptakan berbagai macam
tumbuh-tumbuhan yang sesungguhnya tumbuhan tersebut memiliki banyak
manfaat bagi manusia. Salah satu manfaat dari tumbuhan tersebut adalah
memiliki khasiat sebagai obat.
Wa fil ardli qitha’um mutajaawiraatun (“Dan di bumi ini terdapat
bagian-bagian yang berdampingan.”) maksudnya, tanah-tanah yang berdekatan
antara satu dengan yang lain diantaranya ada yang subur dan ada yang tandus
dan diantaranya lagi ada yang kekurangan air dan yang banyak airnya. Wa
jannaatum min a’naabiw wa zar’uw wa nakhiilun (“Dan kebun-kebun anggur,
tanaman-tanaman dan pohon kurma.”) kedua kata zar’un’ dan nakhilun’ dapat
di athaf kan kepada kata jannaatun, jadi dibaca marfu’ dan dapat diathafkan
Page 14
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
4
kepada a’naabin, jadi dibaca majrur. Karena itu ada sekelompok ulama yang
membaca dengan kedua bacaan tersebut.
Yusqaa bimaa-iw waahidiw wa nufadl-dhilu ba’dlahaa ‘alaa ba’dlin fil
ukuli (“Disirami dengan air yang sama, kami melebihkan sebagian tanaman-
tanaman yang lain tentang rasanya.”). Al-A’masy meriwayatkan dari Abu
Shalih dari Abu Hurairah, ia berkata: Rasulullah saw, bersabda: “ Ad-daqal dan
Al-Farisi, yang manis dan yang asam.” (HR at-Tirmidzi, ia berkata: “(Hadits
ini) hasan gharib”. Maksudnya meskipun tanaman tersebut ditanam ditanah
yang sama, disiram dengan air yang sama, namun tetap memiliki rasa, bentuk,
warna, bau yang berbeda. Inna fii dzalika la-aayaatil liqaumiy yatafakkaruun
(“Sesungguhnya dalam hal yang demikian itu terdapat tanda-tanda (kebesaran
Allah) bagi kaum yang memikirkan. Maksudnya, dalam anugerah, kebijakan
dan petunjuk Allah itu terdapat tanda-tanda kebesaran-Nya. Tinggal bagaimana
manusia menyadari kebesaran tersebut (Abinyazahid, 2010).
Perkembangan ilmu pengetahuan dan teknologi yang pesat sekarang ini
membuat kita lebih membuka diri dalam menerima perubahan-perubahan yang
terjadi akibat kemajuan dan perkembangan tersebut. Belakangan ini
masyarakat cenderung mendayagunakan alternatif bahan alam sebagai obat,
salah satu bahan alam yang dapat digunakan sebagai anti-bakteri adalah
tanaman kelor (Moringa oleifera Lmk.). Hampir seluruh bagian dari tanaman
kelor dapat dimanfaatkan sebagai obat salah satunya adalah biji kelor
(Krisnadi,2015).
Page 15
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
5
Kelor dapat bertahan hidup di kondisi lingkungan apapun bahkan pada
lingkungan ekstrim bahkan pada tanah lempung ataupun pasir, daerah
berpenghujan antara 250 sampai 1500 mm. Dibandingkan dengan tanaman lain
seperti mengkudu yang tidak mampu bertahan hidup pada kondisi lingkungan
ekstrim dan perbanyakan tanaman terbatas menggunakan biji. Tanaman kelor
mudah dikembangbiakkan dengan biji ataupun stek batang (Anwar et al.,
2007).
Hasil uji skrining fitokimia pendahuluan terhadap ekstrak alkohol biji
kelor yang dilakukan oleh (Kheir et al., 2014) ternyata mengandung senyawa
fitokimia sebagai antibakteri, seperti tanin, alkaloid, saponin dan flavonoid.
Walter et al., (2011), melakukan uji terhadap ekstrak biji kelor dengan n-
heksana dapat menghambat bakteri Eschericia coli pada konsentrasi 2,5 %, 5
%, 10 %, 20 %, dan 40 % yang menghasilkan zona hambat berturut-turut 17,5
mm, 9,4 mm, 11,2 mm, 19,6 mm dan 36,8 mm.
Uji in vitro dengan metode kertas cakram dan uji dilusi dilakukan untuk
mengetahui bahwa biji kelor dapat digunakan sebagai antibakteri. Adanya zona
penghambatan berupa lingkaran bening bisa dilihat disekeliling kertas cakram
dan untuk mengetahui konsentrasi hambat (KHM) dan juga kadar bunuh
minimum (KBM) pada uji difusi (Maharani, 2012).
Berdasarkan penelitian sebelumnya tentang khasiat ekstrak etanol biji
kelor terhadap Shigella flexneri pada konsentrasi 400 mg/ml, 200 mg/ml, 100
mg/ml dan 50 mg/ml yang menghasilkan zona hambat berturut-turut 15 mm, 12
mm, 9 mm dan 0 mm. Banyaknya penelitian tentang biji kelor sebagai zat
Page 16
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
6
antibakteri sehingga peneliti ingin melakukan penelitian serupa ke spesies
berbeda yaitu Shigella dysenteriae, karena spesies ini memiliki tingkat
keparahan yang lebih tinggi. Ekstraksi biji kelor menggunakan pelarut metanol
dengan konsentrasi 75 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml dan 400 mg/ml,
diharapkan menghasilkan zona hambat berturut-turut yang lebih besar. Oleh
karena itu, peneliti ingin mengetahui “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Biji
Kelor (Moringa oleifera Lmk.) Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae”.
B. Rumusan Masalah
1. Apakah ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) memiliki aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Shigella dysenteriae ?
2. Berapa konsentrasi minimum ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
yang mampu menghambat pertumbuhan (KHM = konsentrasi hambat
minimum) bakteri Shigella dysenteriae ?
3. Berapa konsentrasi minimum ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
yang mampu membunuh (KBM = konsentrasi bunuh minimum) bakteri
Shigella dysenteriae ?
C. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak biji kelor (Moringa
oleifera Lmk.) terhadap bakteri Shigella dysenteriae.
Page 17
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
7
2. Untuk mengetahui konsentrasi minimum ekstrak biji kelor (Moringa
oleifera Lmk.) yang efektif menghambat pertumbuhan (KHM = konsentrasi
hambat minimum).
3. Untuk mengetahui konsentrasi minimum ekstrak biji kelor (Moringa
oleifera Lmk.) yang efektif mampu membunuh (KBM = konsentrasi bunuh
minimum) bakteri Shigella dysenteriae.
D. Batasan Penelitian
Batasan masalah yang digunakan dalam penelitian ini adalah :
1. Biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) yang digunakan dalam penelitian ini
berasal dari PT. moringa organik indonesia.
2. Biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) diidentifikasi di LIPI kebun raya
Purwodadi.
3. Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
adalah pelarut Metanol.
4. Bakteri yang digunakan pada penelitian ini adalah bakteri Shigella
dysenteriae.
5. Uji difusi mengukur diameter daerah penghambatan (mm) terdiri 3 ulangan
dan uji dilusi secara visualisasi untuk menemukan nilai kadar hambat
minimum (KHM) dan kadar bunuh minimum (KBM).
Page 18
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
8
E. Manfaat Penelitian
1. Penelitian ini secara umum diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah
mengenai potensi biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) sebagai antibakteri
dalam menghambat bakteri Shigella dysenteriae.
2. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai
kandungan fitokimia pada ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.).
3. Penelitian ini diharapkan dapat dijadikan dasar pertimbangan untuk
menciptakan sebuah produk antibakteri dari bahan alam yang lebih efektif,
aman dan terjangkau.
Page 19
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
9
BAB II
KAJIAN PUSTAKA
A. Kelor (Moringa oleifera Lmk.)
1. Deskripsi Umum
Kelor (Moringa oleifera Lmk.) yang paling terkenal dari tiga belas
spesies genus Moringacae, berasal dari Agra, India.. Nama "Shigon" ada
dalam kitab "Shushruta Sanhita" dituliskan pada awal abad pertama
Masehi. Bukti bahwa kelor masuk pertama kali di India, karena mereka
tahu bahwa biji-bijian bisa untuk obat (Amjad et al., 2015).
Morfologi kelor termasuk jenis pohon, batangnya berkayu,
permukaannya kasar dengan kulit tipis, berumur panjang, tinggi mencapai 7
- 12 m dengan diameter 20-40 cm (Amjad et al., 2015). Kelor sangat
mudah untuk diperbanyak dengan stek batang dan biji. Hidupnya didataran
rendah ketinggian ± 1000 m dpl. Kelor tumbuh di wilayah tropis maupun
sub tropis dengan suhu ± 25–35◦C. Kelor juga mampu tumbuh pada daerah
bersalju ringan, daerah ekstrim sekaligus dengan hujan 250 sampai 3000
mm.
Kelor diketahui merupakan tanaman asli India biasanya tingginya
mencapai 1.400 m dari permukaan laut. Kelor mampu tumbuh diluar
daerah maupun Negara asalnya seperti Asia Tenggara, Arab, Himalaya,
Bangladesh, Sri lanka (Krisnadi, 2015).
Page 20
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
10
Gambar 2.1 Penampakan Keseluruhan Pohon Kelor
Sumber: Krisnadi (2015), hal 21-22
2. Klasifikasi
Adapun klasifikasi kelor, menurut Chukwuebuka, 2015 :
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Brassicales
Famili : Moringaceae
Genus : Moringa
Spesies : Moringa oleifera Lmk.
B. Komponen Kimiawi Biji Kelor (Moringa oleifera Lmk.)
Gambar 2.2 Biji Kelor
Sumber : Amjad et al., 2015
Page 21
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
11
Salah satu bagian dari tanaman kelor yang dapat dimanfaatkan oleh
manusia yaitu biji kelor, ada banyak kandungan kimia pada biji kelor misalnya
sterol 92 %, abu 6,2 %, protein 31,4%, serat 7,3 %, karbohidrat 18,4 % dan
lemak 36,7 % (Leone, 2016). Biji kelor juga mengandung komponen bioaktif
penting termasuk alkaloid, flavonoid (catechin, epichatechin, quercetin,
kaempferol), asam fenolik dan glikosida. Hasil uji skrining fitokimia
pendahuluan terhadap ekstrak alkohol biji kelor Kheir et al., (2014) ternyata
ada kandungan fitokimia seperti saponin, tanin, flavonoid dan alkaloid. Biji
kelor juga memiliki kandungan asam lemak tak jenuh dan asam lemak jenuh,
sterol, tocopherol, protein, asam amino dan antioksidan. Fraksi protein biji
kelor memiliki kadar methionine dan sistein yang tinggi. Fraksi sterol terdiri
dari sitosterol, stigmasterol, campesterol yang menyumbang 92% dari total
sterol. Kandungan fenolik total dari biji kelor berkisar 4.581-4.953 mg/100 g.
C. Manfaat Biji Kelor (Moringa oleifera Lmk.)
Menurut Aney et al, (2009) biji kelor mengandung antibiotik yang dikenal
sebagai pterigospermin yang bertanggung jawab untuk membunuh
mikroorganisme dalam air. Folkard dan Sutherland (2005) juga menyarankan
pemanfaatan biji kelor untuk dikonsumsi karena biji kelor mampu
menghambat dan menghancurkan dinding sel Salmonella typhii yang hidup di
saluran usus manusia. Penelitian lain juga menunjukkan bahwa biji kelor
mempunyai aktivitas antibakteri terhadap kedua jenis bakteri, yaitu gram
negatif dan gram positif (Walter et al, 2011).
Page 22
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
12
Hasil uji skrining fitokimia pendahuluan terhadap ekstrak alkohol biji
kelor Kheir et al., (2014) positif terdapat senyawa fitokimia tanin, flavonoid,
alkaloid, saponin. Sehingga biji kelor memiliki kemampuan sebagai anti
inflamasi, anti diabetik, anti kanker, anti tumor, anti fungi, dan anti bakteri.
Masyarakat juga menggunakan serbuk biji kelor untuk mengobati sakit
perut dan untuk membantu masalah pencernaan. Penelitian yang dilakukan oleh
Leone et al (2016) bahwa fraksi sterol yang terkandung di dalam biji kelor
memiliki keterlibatan dalam metabolisme kolestrol ditandai dengan
menurunnya tingkat LDL. Biji kelor memiliki potensi sebagai antidiabetes,
karena adanya kandungan sitosterol (Gupta et al., 2011).
Biji kelor telah ditemukan mengandung antioksidan yang mampu
mengurangi kerusakan oksidatif yang terkait dengan penuaan dan kanker.
Senyawa bioaktif yang diisolasi dari biji kelor juga digunakan sebagai
promotor antitumor. Hasil penelitian lain menunjukkan bahwa biji kelor
memiliki hepatoprotektif, antiinflamasi dan Anti-fibrotik terhadap kerusakan
hati akibat CCl4 dan fibrosis. Aktivitas anti-fibrotik terkait dengan kandungan
antioksidan dari ekstrak biji kelor (Hamza AA, 2010).
Penelitian eksperimental menggunakan ekstrak etanol dari biji kelor
terhadap tikus, diketahui mampu meredakan peradangan bronkus alveolar
dengan mengurangi infiltrasi sel-sel inflamasi di paru-paru dan mengurangi
inflamasi di saluran pernapasan karena asma. Ekstrak etanol biji kelor juga
mampu mengurangi volume edema pada tikus (Mahajan et al., 2007).
Page 23
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
13
D. Metode Ekstraksi
1. Ekstrasksi
Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan zat terlarut dengan
pelarutnya berdasarkan titik didih pelarut. Pemilihan metode ekstraksi
tergantung pada sifat bahan dan senyawa yang akan diisolasi.
Tujuan ekstraksi bahan alam adalah menarik komponen kimia yang
terdapat pada bahan alam. Ekstraksi ini didasarkan pada prinsip perpindahan
massa komponen zat kedalam pelarut, dimana perpindahan mulai pada
lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut. Sarker et al
(2006), menyebutkan berbagai cara ekstraksi :
2. Ekstraksi dengan Menggunakan Pelarut
a. Cara Dingin
1) Maserasi
Maserasi merupakan metode yang paling sederhana dan paling
banyak digunakan. Metode ini dilakukan dengan memasukkan serbuk
tanaman dan pelarut yang sesuai ke dalam wadah tertutup rapat.
Proses ekstraksi dihentikan ketika tercapai kesetimbangan antara
konsentrasi senyawa dalam pelarut dengan konsentrasi dalam sel
tanaman. Setelah proses ekstraksi, pelarut dipisahkan dari sampel
dengan penyaringan. Kerugian utama dari metode maserasi ini adalah
memakan banyak waktu, pelarut yang digunakan cukup banyak dan
kemungkinan besar senyawa fitokimia ikut menguap. Namun disisi
Page 24
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
14
lain, metode maserasi dapat menghindari rusaknya senyawa-senyawa
yang bersifat termolabil.
2) Perkolasi
Membutuhkan pelarut yang lebih banyak dan memakan waktu
lebih lama.
b. Cara Panas
1) Refluks
Sampel dimasukkan dengan pelarut ke labu yang sudah
terhubung dengan kondensor, pelarutnya konstan karena adanya
pendinginan balik saat melakukan ekstraksi.
2) Soxhlet
Menggunakan metode ini memiliki keuntungan prosesnya
cepat, sampelnya murni, pelarutnya sedikit. Namun ada kerugiannya
senyawanya bersifat termolabil.
3) Digesti
Ekstraksi bisa dilakukan dalam suhu kamar 40-50° C dan
diaduk terus menerus.
4) Infus
Ekstraksi simplisia dengan air (90° C) dalam 15-20 menit.
5) Dekok
Membutuhkan waktu lama hingga mencapai titik didih.
Page 25
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
15
3. Destilasi Uap
Selama pemanasan, uap terkondensasi dan destilat (terpisah
sebagai 2 bagian yang tidak saling bercampur) ditampung dalam wadah
yang terhubung dengan kondensor. Kerugian dari kedua metode ini adalah
senyawa yang bersifat termolabil dapat terdegradasi.
E. Antimikroba
Secara garis besar antimikroba dibagi menjadi dua jenis yaitu yang dapat
membunuh mikroorganisme (bakterisidal) dan yang hanya mampu
menghambat pertumbuhan mikroorganisme (bakteriostatik). Agen antimikroba
dapat berupa desinfektan, antiseptik maupun antibiotik yang sering digunakan
dalam mengendalikan dan membunuh mikroorganisme (Utami, 2012)..
Adanya zona penghambatan dibuktikan dengan adanya lingkaran berwana
bening disekitar kertas cakram. Hampir semua suatu senyawa mampu menjadi
antibakteri. Penentuan agen antimikroba yang bersifat membunuh bakteri yaitu
dengan memperoleh dan mengetahui nilai KBM (Kadar Bunuh Minimum).
1. Mekanisme Kerja Antimikroba
Mekanisme kerja dari antimikroba dapat diketahui karena adanya
kerusakan suatu komponen penting mikroorganisme hingga terjadi
kematian sel . Mekanismenya antara lain :
Page 26
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
16
a. Menghambat sintesis dinding sel
Mekanismenya ditentukan pada adanya peptidoglikan di dinding
sel prokariotik, sedangkan pada eukariotik tidak ada peptidoglikan.
b. Menghambat sintesis asam nukleat
Terjadi penghambatan pada transkripsi dan replikasi DNA yang
disebabkan oleh radiasi maupun pemanasan sehingga sel tidak bisa
bereplikasi.
c. Menghambat sintesis protein
Hidup suatu sel bergantung pada terpeliharanya molekul-molekul
protein dan asam nukleat dalam keadaan alamiahnya. Suatu kondisi atau
substansi yang mengubah keadaan ini, yaitu mendenaturasikan protein
dan asam-asam nukleat dapat merusak sel tanpa diperbaiki kembali.
d. Merusak keutuhan membran sel
Mekanismenya dapat megganggu keutuhan sek bakteri sehingga
komponen-komponen dalam sel (protein, asam nukleat, nukleotida)
keluar.
e. Menghambat sintesis metabolisme esensial
Cara penghambatan apabila suatu bakteri strukturnya hampir sama
dengan substrat.
Page 27
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
17
2. Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Antimikroba
Faktor yang mampu membunuh suatu bakteri antara lain (Midun,
2012) :
a. Konsentrasi Antimikroba
Bisa berpengaruh dalam membunuh bakteri apabila zat
antimikroba yang diberikan konsentrasinya tinggi.
b. Jumlah Mikroorganisme
Semakin banyak jumlah bakteri yang tumbuh maka memerlukan
waktu pembasmian yang cukup lama .
c. Suhu
Jika suhu naik secara optimal maka reaksi kimiawi juga ikut naik.
d. Jenis Mikroorganisme
Kerentanan masing-masing mikroorganisme berbeda-beda
terhadap setiap perlakuan.
e. pH
Apabila suatu bahan sifatnya asam maka apabila dalam suhu
rendah mudah dibanding pH basa.
f. Adanya Bahan Organik
Keefektifan zat kimia dapat diinaktifkan dengan bahan organik
dari bahan alam.
Page 28
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
18
3. Metode Pengujian Antimikroba
Metode in vitro bisa dilakukan dengan beberapa cara (Balouiri et al.,
2016) :
a. Metode Penyebaran (diffusion method)
Metode penyebaran ini merupakan metode yang mudah dan biaya
murah.
1). Metode cakram kertas (disc diffusion method)
Metode yang sering atau bahkan umum digunakan untuk
menentukan sensitivitas suatu bakteri yang diinkubasi dan diamati
adanya lingkaran bening disekitar cakram.
2). Metode garis tingkat
Ini merupakan metode yang efektif dalam menghambat
pertumbuhan bakteri dan juga untuk memperoleh nilai KHM (kadar
hambat minimum). Strip plastik yang sudah dicelupkan ke agen
antibakteri dalam media yang sudah ditanami bakteri, lalu diamati
tingkat kekeruhannya.
b. Metode Pengenceran (dilution method)
1). Metode dilusi cair
Dilusi merupakan metode terbaik untuk mengukur KHM dan
KBM. Dilakukan dengan seri pengenceran ditambah bakteri uji,
namun harus sesuai standar Mc Farland 0,5. Larutan uji antimikroba
pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan
Page 29
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
19
mikroba uji ditetapkan sebagau KHM, media yang digunakan Muller-
Hilton Borth (MHB). Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut
selanjutnya dikultur ulang pada media cair tanpa penambahan mikroba
uji ataupun agen antimikroba dan dilakukan selama 18-24 jam. Media
cair yang tetap erlihat jernih setelah diinkubasi ditetapkan sebagai
KBM.
F. Senyawa Fitokimia
Fitokimia merupakan ilmu pengetahuan yang menguraikan aspek kimia
suatu tanaman. Kajian fitokimia meliputi uraian yang mencakup aneka ragam
senyawa organik yang dibentuk dan disimpan oleh organisme, yaitu struktur
kimianya, biosintesisnya, perubahan serta metabolismenya, penyebarannya
secara alamiah dan fungsi biologisnya, isolasi dan perbandingan komposisi
senyawa kimia dari bermacam-macam jenis tanaman.
Menurut Saxena (2013), uji fitokimia dilakukan untuk menentukan
kandungan kimia secara kualitatif untuk mengetahui golongan senyawa yang
terkandung dalam suatu tumbuhan. Melakukan uji fitokimia antara lain.
1. Flavonoid
Senyawa flavonoid terdiri dari C6-C3-C6 dan sering ditemukan di
berbagai macam sayuran, buah-buahan, dan minuman seperti teh, kopi.
Senyawa flavonoid yang sering dijumpai pada tumbuhan dalam bentuk
glikosida atau gugusan gula bersenyawa pada satu atau lebih grup hidroksil
fenolik.
Page 30
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
20
2. Alkaloid
Semua alkaloid mengandung paling sedikit satu atom nitrogen
yang biasanya bersifat basa, mengandung satu atau lebih atom nitrogen
biasanya dalam gabungan berbentuk siklik serta bereaksi dengan pereaksi
alkaloid. Menurut sifatnya umumnya berbentuk kristal padat dan sebagian
kecil bersifat cair. Alkaloid bentuk bebas atau basanya mudah larut dalam
pelarut organik dan sukar larut dalam air.
3. Saponin
Saponin merupakan glikosida yaitu metabolit sekunder yang
banyak terdapat di alam, terdiri dari gugus gula yang berikatan dengan
aglikon atau sapogenin. Keberadaan saponin sangat mudah ditandai dengan
pembentukan larutan koloidal dengan air yang apabila dikocok
menimbulkan buih yang stabil. Busa yang ditumbulkan saponin karena
adanya kombinasi struktur senyawa penyusunnya yaitu rantai sapogenin
nonpolar dan rantai samping polar yang larut dalam air.
4. Tanin
Tanaman yang memiliki tanin sebagai komponen utama yang ada
pada zat dari alam dan digunakan untuk mengobati gangguan usus seperti
diare dan disentri. Di Jepang dan Cina, ekstrak tumbuhan yang mengandung
tanin digunakan sebagai pengobatan diare, anti inflamasi, melawan tumor
perut dan duodenum. Tanin biasanya ditemukan dalam buah-buahan seperti
anggur, kesemek, blueberry, teh, coklat, kacang polong, pohon legum
seperti Acacia spp., Sesbania spp., di rerumputan seperti sorgum, jagung
Page 31
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
21
dan lain-lain. Tanin merupakan senyawa fenolik yang larut dalam air.
Senyawa ini banyak terdistribusi pada daun, buah, batang dan biji,
umumnya berasa sepat.
G. Bakteri Shigella dysenteriae
1. Deskripsi Umum
Gambar 2.3 Shigella dysenteriae
Sumber : Kurniasih, 2014
Bakteri Shigella dysentriae termasuk bakteri Gram negatif, berbentuk
kokus atau batang, tidak berspora, tidak berflagel, fakultatif anaerob. Pada
manusia menyebabkan disentri basiler dengan masa inkubasi 1-7 hari.
Bentuk koloni dari Shigella dysenteriae konveks, bulat, transparan dengan
tepi yang utuh dan mencapai diameter kira-kira 2 mm dalam 24 jam
(Shrotriya, 2015).
Shigella dysenteriae mampu memfermentasikan glukosa, sehingga
membentuk asam dari karbohidrat. pH pertumbuhan Shigella dysenteriae 6-
8, suhu pertumbuhan optimum 370C dan akan mati pada suhu 55
0C serta
kurang tahan terhadap agen kimia. Infeksi yang disebabkan bakteri Shigella
Page 32
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
22
dysenteriae hampir selalu terbatas pada saluran pencernaan. Bakteri ini
mengasilkan endotoksin dan eksotoksin. Endotoksin berperan menimbulkan
iritasi pada dinding usus, sedangkan eksotoksin yang dikeluarkan Shigella
dysenteriae tidak tahan panas yang dapat mengenai usus dan sistem saraf
pusat. Setelah masa inkubasi yang pendek (1- 4 hari), akan menimbulkan
nyeri perut, demam dan tinja encer (Kurniasih, 2014).
Menurut WHO (2016), infeksi yang disebabkan oleh bakteri Shigella
dysenteriae umumnya dapat disembuhkan dengan antibiotik ciprofloxacin,
pivmecillinam atau ceftriaxone telah dilaporkan mampu menekan
pertumbuhan Shigella dysenteriae dan memperpendek durasi gejala dalam
persentae 96 %.
Page 33
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
23
2. Klasifikasi
Adapun klasifikasi menurut Microbesinfo, 2015 :
Kingdom : Monomychota
Divisi : Scizomycetea
Class : Scizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Family : Enterobacteriaceae
Genus : Shigella
Spesies : Shigella dysenteriae
H. Patogenitas Shigella dysenteriae
Shigella dysenteriae adalah bakteri kelompok gram negatif dan bersifat
fakultatif anaerobik yang dapat hidup dalam usus manusia dan termasuk flora
normal. Bakteri ini dapat menyebabkan shigellosis pada manusia. Shigellosis
disebut juga disentri basiler. Kombinasi diare yang disebabkan oleh Shigella
dysenteriae yaitu tinja teksturnya lembek dan berdarah, diare teksturnya cair
dan kombinasi tekstur lembek berdarah dan cair (Shrotriya, 2015).
Pada awalnya Bakteri ini masuk dan berada di usus halus, menuju
terminal ileum dan kolon, melekat pada permukaan mukosa dan menembus
pada lapisan epitel kemudian berkembang biak di dalam lapisan mukosa.
Berikutnya adalah terjadinya reaksi peradangan hebat yang menyebabkan
Page 34
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
24
terlepasnya sel-sel dan timbulnya tukak pada permukaan mukosa usus (WHO,
2016).
Shigella dysenteriae mampu memproduksi endotoksin dan eksotoksin.
Endotoksin berperan menimbulkan iritasi pada dinding usus, sedangkan
eksotoksin akan merangsang produksi suatu antitoksin sehingga banyak
mematikan pasien (WHO, 2016).
Toksin (shigatoksin) dapat dihasilkan oleh golongan dari Shigella sp.
didalam jejunum bakteri melakukan multipikasi tanpa invasi di dalam
jejunum. Toksin ini menyebabkan kondisi awal ditandai dengan tekstur diare
menjadi cair (WHO, 2016). Selanjutnya menyerang usus besar sehingga
gejalanya Nampak semakin parah.
Page 35
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
25
BAB III
KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESA PENELITIAN
A. Kerangka Konsep
Gambar 3.1 Kerangka Konsep Penelitian
DIARE
Tanin
Mengerutkan
dinding sel
bakteri
sehingga
dapat
mengganggu
permeabilitas
sel.
Alkaloid
Menggangu
komponen penyusun
peptidoglikan pada
sel bakteri, sehingga
lapisan dinding sel
tidak terbentuk
secara utuh dan
menyebabkan
kematian sel.
Saponin
Menganggu
permeabilitas
membran sel
bakteri
sehingga
menyebabkan
sel bakteri lisis.
Flavonoid
Penghambat
an fungsi
DNA gyrase
bakteri
sehingga
kemampuan
replikasi dan
translasi
bakteri
dihambat.
Pertumbuhan dihambat dan
dibunuh (KHM dan KBM)
Pengobatan Kimiawi Pengobatan Alami
Ekstrak Biji Kelor
Uji Aktivitas
Antibakteri
Page 36
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
26
B. Hipotesa Penelitian
H0 : Tidak ada beda rata-rata kemampuan ekstrak biji kelor (Moringa oleifera
Lmk.) pada beberapa konsentrasi dalam menghambat dan membunuh
bakteri Shigella dysenteriae.
H1 : Ada beda rata-rata kemampuan ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
pada beberapa konsentrasi dalam menghambat dan membunuh bakteri
Shigella dysenteriae.
Page 37
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
27
BAB IV
METODE PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan eksperimental laboratorium menggunakan desain
penelitian rancangan acak lengkap (RAL) dengan tiga kali pengulangan.
Sebagaimana yang tergambar pada tabel berikut :
Tabel 4.1 Pengulangan Uji Aktivitas Antibakteri
Konsentrasi
Pengulangan
1 2 3
P
P1
P2
P3
P4
N
Keterangan :
P (+) : Kontrol positif yang diberi 50µL ciprofloxacin dan 1 ml
suspensi mikroba
P1 : Konsentrasi ekstrak biji kelor 75 mg/ml dan 1 ml suspensi
mikroba
P2 : Konsentrasi ekstrak biji kelor 100 mg/ml dan 1 ml suspensi
mikroba
Page 38
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
28
P3 : Konsentrasi ekstrak biji kelor 200 mg/ml dan 1 ml suspensi
mikroba
P4 : Konsentrasi ekstrak biji kelor 400 mg/ml dan 1 ml suspensi
mikroba
N (-) : Kontrol negatif yang diberi aquades steril dan 1 ml suspensi
mikroba
B. Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Universitas Islam
Negeri Sunan Ampel Surabaya. Jadwal pelaksanaan penelitian dapat dilihat
pada tabel dibawah ini.
Tabel 4.2 Timeline Penelitian
No Kegiatan Bulan
1 2 3 4 5
1. Pengumpulan alat dan
bahan
2. Persiapan ekstraksi
3. Ekstraksi dan Uji fitokimia
4. Persiapan penelitian
5. Uji aktivitas antimikroba
difusi dan dilusi
6. Pengumpulan data
penelitian
7. Pemasukan data penelitian
Page 39
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
29
C. Bahan dan Alat Penelitian
1. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah 300 gram serbuk
biji kelor (Moringa oleifera Lmk.), media Salmonella Shigella Agar (SSA),
media Muller Hinton Agar (MHA) dan Muller Hinton Broth (MHB),
biakan Shigella dysenteriae,aquades, spirtus, 600 ml pelarut metanol,
ciprofloxacin, alkohol 70%, HCl, pereagen wagner, HCl pekat, FeCl3.
2. Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Autoklaf, laminar
air flow (LAF), cawan petri, tabung reaksi, jarum ose, Erlenmeyer, vortex,
jangka sorong, inkubator, neraca analitik, pinset, bunsen, colony counter,
kaca arloji, spreader, spatula, gelas ukur, gelas beker, cuvet glass, botol
kultur (100 ml) rak tabung reaksi, serangkaian alat rotary evaporator, hot
plate, magnetic stirrer, water bath, kertas saring, kertas cakram, korek
api,alumunium foil, kertas coklat, plastik wrap, kertas label, tissue, kamera,
mikropipet 1000 µL, tip pipet.
D. Variabel Penelitian
1. Variabel Bebas
Ekstrak biji kelor (Moringa oleífera Lmk.) dengan variasi
konsentrasi 75 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml, 400 mg/ml serta cakram
antibiotik 50µL siprofloksasin sebagai kontrol positif dan aquades steril
sebagai kontrol negatif.
Page 40
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
30
2. Variabel Terikat
Diameter zona penghambat (mm), kadar hambat minimum (KHM)
dan kadar bunuh minimum (KBM) oleh bakteri Shigella dysenteriae.
3. Variabel Terkendali
Volume ekstrak (ml), diameter kertas cakram (mm), suhu inkubasi,
waktu inkubasi, media inkubasi dan kepadatan mikroba uji (Optical
density).
E. Prosedur Penelitian
1. Koleksi Tumbuhan
Biji kelor (Moringa oleífera Lmk.) yang digunakan dalam
penelitian ini diperoleh dari PT. Moringa Organik Indonesia, Blora-Jawa
Tengah.
2. Ekstraksi Tumbuhan
Biji kelor (Moringa oleífera Lmk.) dikeringkan menggunakan oven
pada suhu 35°C - 40°C hingga kering dan selanjutnya digiling untuk
dijadikan serbuk dengan mesin stainless steel. Biji kelor yang sudah halus
ditimbang sebanyak 1.200 gram menggunakan neraca analitik dan
dipindahkan ke dalam gelas beker. Biji kelor diberi pelarut metanol
sebanyak 2.400 ml sampai serbuk biji kelor terendam sempurna dan
diaduk-aduk, lalu gelas beker ditutup alumunium foil. Proses maserasi
dilakukan selama 24 jam pada suhu ruangan dan terlindung dari cahaya
matahari langsung. Setelah 24 jam dimaserasi, filtrat disaring
Page 41
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
31
menggunakan kertas saring untuk memisahkan filtrat dan residunya.
Kemudian residu diremaserasi dengan pelarut metanol selama 24 jam.
Pelarut pada filtrat diuapkan dengan rotary evaporator (50°C). Hasil
penguapan dengan rotary evaporator dituang ke dalam cawan porselin
kemudian penguapan disempurnakan dengan menggunakan waterbath
hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak yang diperoleh sebanyak 60 gr
dikerok dan dimasukkan kedalam botol ekstrak.
Pembuatan larutan induk, sebanyak 20 gr ekstrak metanol
dilarutkan ke dalam 50 ml aquades, sehingga didapat larutan induk dengan
konsentrasi 400 mg/ml, dilanjutkan pengenceran untuk berbagai
konsentrasi sesuai perhitungan dibawah ini :
a. Konsentrasi 200 mg/ml b. Konsentrasi 100 mg/ml
V1.M1 = V2.M2 V1.M1 = V2.M2
V1.400 = 50.200 V1.400 = 50.100
V1 = 10000
400 V1 =
5000
400
= 25 ml = 12,5 ml
c. Konsentrasi 75 mg/ml
V1.M1 = V2.M2
V1.400 = 50.75
V1 = 3750
400
= 9,3 ml
Page 42
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
32
3. Uji Fitokimia
Uji fitokimia pada ekstrak biji kelor dengan pelarut metanol dengan
uji kualitatif diantaranya :
a. Uji Alkaloid
Sebanyak 5 gram ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi,
ditambahkan HCl 2 M, dipanaskan sambil diaduk kemudian
didinginkan dan disaring, filtrat ditambahkan HCl 10 tetes dan reagen
Wagner (Yodium-Kalium iodida), apabila terbentuk endapan kuning
menunjukkan positif terhadap alkaloid.
b. Uji Flavonoid
Sebanyak 5 gram ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi,
ditambahkan 10 tetes larutan FeCl3, apabila terbentuk warna merah
kehitaman atau ungu menunjukkan positif terhadap flavonoid.
c. Uji Saponin
Sebanyak 5 gram ekstrak, ditambahkan 5 ml aquades dalam tabung
reaksi, kemudian kocok kuat selama 10 detik sampai terbentuk buih
yang stabil.
d. Uji Tanin
Sebanyak 5 gram ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi
ditambahkan 10 tetes larutan FeCl3 1 %. Terbentuknya warna biru
kehitaman, hijau atau biru kehijauan dan endapan menunjukkan adanya
tanin.
Page 43
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
33
4. Sterilisasi Alat dan Bahan
Sterilisasi bahan dan alat yang sudah dicuci, dikeringkan,
dibungkus kertas coklat dan plastik tahan panas menggunakan Autoclave
diatur tekanan 1 atm, waktu 20 menit dan temperatur 121 °C.
5. Pembuatan Stok Bakteri
Diambil satu koloni bakteri Shigella dysenteriae dengan
menggunakan jarum ose steril, lalu digoreskan secara aseptis didekatkan
dengan api bunsen pada tabung reaksi miring yang berisi media Salmonella
Shigella Agar (SSA) , setelah itu diinkubasi dalam inkubator dengan suhu
37°C selama 18-24 jam.
6. Pembuatan Suspensi Mikroba Uji
Suspensi mikroba dibuat dengan memindahkan beberapa ose
bakteri kedalam botol kultur berukuran 100 ml yang berisi air aquades,
campuran bakteri tersebut dihomogenkan menggunakan vortex. Suspensi
mikroba tersebut kemudian dimasukkan ke dalam tabung kuvet beberapa
ml untuk diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer sesuai
dengan standar Mc Farland 0,5 (setara dengan ± 108 CFU/ml atau 5x10
6
CFU/ml, λ625 nm = 0.08-0.1 untuk bakteri dan λ600 nm = 0.08-0.1 untuk
fungi). Penambahan mikroba atau aquades terus dilakukan hingga OD
mencapai 0,1.
Page 44
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
34
7. Penentuan Aktivitas Antimikroba
Untuk mengetahui aktivitas antimikroba ekstrak biji kelor
(Moringa oleífera Lmk.) digunakan metode cakram kertas dan metode
pengenceran dalam tabung.
a. Metode Cakram Kertas / Disc diffusion method
Langkah awal yang dilakukan adalah menyiapkan media Mueller
Hinton Agar (MHA) untuk uji antimikroba. Mengatur rapat optis
(Optical Density) suspensi bakteri 0,1 pada λ625 nm untuk bakteri setara
dengan standar Mc Farland 0,5 (108 CFU/ml),1 ml suspensi dimasukkan
ke cawan petri steril ditambah 15 ml media Mueller Hinton Agar
(MHA), kemudian menggerakan cawan petri membentuk angka delapan
agar homogen, ditunggu hingga memadat. Sebanyak 3x pengulangan, 3
kertas cakram (6mm) diinjeksikan sebanyak 50µL ekstrak biji kelor yang
sudah dilarutkan aquades pada masing-masing cawan petri membentuk
segitiga. Konsentrasi ekstrak biji kelor 75 mg/ml, 100 mg/ml, 200
mg/ml, 400 mg/ml. Cawan petri kemudian dinkubasi suhu 37°C hingga
48 jam. Selanjutnya zona hambat disekitar cakram diukur menggunakan
jangka sorong (mm).
b. Metode Pengenceran Dalam Tabung/ Dilusi
Menyiapkan 10 ml suspensi bakteri dalam media Mueller Hinton
Broth (MHB) diukur rapat optis (Optical Density) setara dengan standar
Mc Farland 0,5 (108
CFU/ml). 1 ml masing-masing ekstrak biji kelor
Page 45
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
35
dimasukkan ke tabung reaksi yang terisi 1 ml suspensi bakteri,
dihomogenkan dan inkubasi 24 jam. Apabila larutan terlihat jernih
berarti tidak ada aktivitas antimikroba. 1 ml suspensi semua konsentrasi
ditanam di media Mueller Hinton Agar (MHA). Setelah inkubasi 24 jam
dilihat pertumbuhnnya, jika ada pertumbuhan adalah nilai KHM, jika
tidak ada berarti nilai KBM.
F. Analisis Data
Data dianalisis Normalitas dan Homogenitasnya, kemudian dilakukan uji
lanjutan menggunakan uji Kruskall-Wallis untuk melihat beda rerata setiap
konsentrasi. Jika terdapat perbedaan pada konsentrasi, dilakukan uji lanjutkan
uji Mann-Whitney untuk mengetahui data pada konsentrasi mana yang
memiliki perbedaan signifikan.
Page 46
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
36
BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil
1. Hasil Uji Difusi Kertas Cakram (disc diffusiom method) terhadap Shigella
dysenteriae
Tabel 5.1 Hasil Pengukuran Uji Difusi Kertas Cakram (disc diffusion
method)
No Konsentrasi Pengulangan
1 2 3
1 Ciprofloxacin (+) 8,0 mm 8,5 mm 9,0 mm
2 75 mg/ml 6,5 mm 6,8 mm 7,0 mm
3 100 mg/ml 7,0 mm 7,0 mm 7,2 mm
4 200 mg/ml 7,1 mm 7,3 mm 7,5 mm
5 400 mg/ml 7,6 mm 7,8 mm 8,0 mm
6 Aquades (-) 0 mm 0 mm 0 mm
Hasil pengukuran diameter zona hambat pada masing-masing
konsentrasi dikurangi dengan diameter kertas cakram 6 mm. Pada masing-
masing konsentrasi dilakukan pengulangan kertas cakram sebanyak 3x.
Zona hambat terbesar ditunjukkan pada perlakuan kontrol (+) menggunakan
antibiotik ciprofloxacin, sedangkan pada kontrol (-) menggunakan aquades
tidak menunjukkan adanya zona hambat.
Page 47
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
37
Diameter zona hambat pertumbuhan Shigella dysenteriae disajikan
dalam bentuk grafik dapat dilihat pada Gambar 5.2.
Gambar 5.2 Grafik diameter daerah penghambatan pertumbuhan Shigella
dysenteriae pada setiap konsentrasi ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
Selanjutnya untuk data diameter zona hambat (mm) dilanjutkan ke uji
analisis statistik yakni uji normalitas dan uji homogenitas. Uji normalitas
data dengan menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov dan didapatkan
signifikansi sebesar 0,012. Nilai tersebut lebih kecil dari α=0,05. Hal ini
menunjukkan bahwa data berdistribusi normal. Tahap selanjutnya yaitu
melakukan uji Homogeneity of variances. Dari hasil uji homogenitas
didapatkan nilai sebesar 0,000 pada ekstrak biji kelor (Moringa oleifera
Lmk.). Nilai tersebut lebih kecil dari α = 0,05. Hal ini menunjukkan bahwa
012345678910
Dia
met
er
Zo
na
Ha
mb
at
(mm
)
Konsentrasi Ekstrak mg/ml
Grafik Zona Hambat Pertumbuhan
Shigella dysenteriae
Pengulangan 1
Pengulangan 2
Pengulangan 3
Page 48
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
38
data tidak homogen. Sehingga dilanjutkan dengan uji non parametrik
alternatif yaitu uji Kruskal-Wallis.
Hasil uji Kruskal-Wallis menunjukkan bahwa, nilai signifikansi
perbedaan rata-rata diameter zona hambat pada setiap kelompok perlakuan
sebesar 0,006. Konsentrasi ekstrak biji kelor memiliki pengaruh terhadap
diameter zona hambat. Selanjutnya analisis dilanjutkan dengan uji Mann-
Whitney untuk mengetahui beda pengaruh antar perlakuan. Hasil uji beda
rata-rata diameter zona hambat Shigella dysenteriae pada setiap konsentrasi
dapat dilihat pada Tabel 5.3.
Tabel 5.3 Rata-rata diameter zona hambat pertumbuhan Shigella
dysenteriae pada setiap konsentrasi
No Konsentrasi
Ekstrak (mg/ml)
Rata-Rata
Diameter Zona Hambat
(mm)
Sig.
1 Ciprofloxacin (+) 8,5ab
0,006
2 75 6,7c
3 100 7,0ade
4 200 7,3f
5 400 7,8dg
6 Aquades (-) 0bcefg
Keterangan : a,b,c,d,e,f,g berbeda signifikan.
Pada Tabel 5.4 dapat diketahui bahwa rata-rata diameter zona hambat
biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) memiliki perbedaan yang signifikan pada
masing-masing konsentrasi ekstrak saat dilakukan analisis data dengan
Mann-Whitney. Zona hambat perbedaan yang signifikan tersebut terlihat
pada pengujian kelompok 3 terhadap 1 dan 5 , kelompok 6 terhadap seluruh
kelompok.
Page 49
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
39
2. Hasil Uji Dilusi (tube dilution method) terhadap Shigella dysenteriae
Konsentrasi ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) yang diujikan
aktivitas anti-bakteri dilakukan dengan metode pengenceran dalam tabung
(tube dilution method) 1 ml ekstrak ditambah 1 ml suspensi bakteri
dimasukkan ke tabung reaksi dan pengenceran dilakukan bertingkat
sebanyak 106. Setelah diinkubasi selama 24 jam dan diamati secara visual.
Tabel 5.4 Visualisasi Kultur Uji Dilusi Shigella dysenteriae setelah 24
jam dengan Penambahan Variasi Ekstrak Biji Kelor (Moringa oleifera
Lmk.).
Konsentrasi
Perlakuan
Pengamatan
75 (mg/ml) 1 ml suspensi bakteri + 1 ml
ekstrak
Kuning Kecoklatan (+),
tidak terdapat lapisan
putih
60 (mg/ml) 1 ml suspensi bakteri + 1 ml
ekstrak
Kuning keruh (+),
terdapat lapisan putih
(++)
45 (mg/ml) 1 ml suspensi bakteri + 1 ml
ekstrak
Kuning keruh (+),
terdapat lapisan putih
(+++)
30 (mg/ml) 1 ml suspensi bakteri + 1 ml
ekstrak
Kuning keruh (++),
terdapat lapisan putih
(++)
15 (mg/ml) 1 ml suspensi bakteri + 1 ml
ekstrak
Kuning keruh (+++),
terdapat lapisan putih
(+) Keterangan :
(+) : Menandakan tingkat kekeruhan dan tingkat ketebalan lapisan putih.
Hasil uji Dilusi pada ke-lima konsentrasi dilakukan pengenceran hingga
pengenceran 106. Selanjutnya dari pengenceran 10
4, 10
5, dan 10
6 Media NA
bakteri ditanam dan diinkubasi 24 jam lalu dihitung (Colony Counter).
Page 50
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
40
Tabel 5.5. Nilai Total Plate Count (TPC) dan Log TPC Shigella
dysenteriae pada kultur uji dilusi ekstrak biji kelor dengan berbagai
variasi konsentrasi.
Konsentrasi
(mg/ml)
Nilai TPC
Log TPC
75 41 x 106 7,61
60 56 x 106 7,74
45 100 x 106 8
30 120 x 106 8,07
15 212 x 106 8,32
Nilai TPC dan Log TPC dapat dilihat pada tabel 5.3. Log TPC terendah
dari ekstrak biji kelor adalah 7,61 pada konsentrasi 75 mg/ml.
B. Pembahasan
1. Pembahasan Uji Difusi Kertas Cakaram (disc diffusiom method) terhadap
Shigella dysenteriae
Berdasarkan grafik 5.1 zona hambat pada masing-masing pengulangan
menunjukkan diameter zona hambat tertinggi pada kontrol positif
menggunakan antibiotik ciprofloxacin dengan diameter berturut-turut yaitu
8 mm, 8,5 mm dan 9 mm. Pada konsentrasi 75 mg/ml diameter berturut-
turut yaitu 6,5 mm, 6,8 mm dan 7 mm. Pada konsentrasi 100 mg/ml
diameter berturut-turut yaitu 7 mm, 7 mm dan 7,2 mm. Pada konsentrasi
200 mg/ml diameter berturut-turut yaitu 7,1 mm, 7,3 mm dan 7,5 mm. Pada
konsentrasi 400 mg/ml diameter berturut-turut yaitu 7,6 mm, 7,8 mm dan 8
mm. Kontrol negatif menggunakan aquades tidak menunjukkan adanya zona
Page 51
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
41
hambat pertumbuhan terhadap bakteri Shigella dysenteriae. Ini
menunjukkan bahwa konsentrasi ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
yang semakin tinggi maka semakin besar kemampuan dalam menghambat
suatu mikroorganisme (Rahmah et al, 2017).
Pada penelitian ini kontrol positif yang digunakan yaitu antibiotik
ciprofloxacin sebagai kontrol positif. Ciprofloxacin termasuk ke dalam
golongan kuinolon yang sangat aktif terhadap golongan bakteri gram negatif
dan bersifat bakterisidal dengan menghambat DNA girase (Andries et al,
2014). Menurut WHO (2016), infeksi yang disebabkan oleh bakteri Shigella
dysenteriae sendiri umumnya dapat disembuhkan dengan antibiotik
ciprofloxacin yang telah dilaporkan mampu menekan pertumbuhan Shigella
dysenteriae dan memperpendek durasi gejala sebesar 96 %. Aquades pada
penelitian ini digunakan sebagai kontrol negatif yang menunjukkan tidak
adanya zona hambat. Hal ini mengindikasikan bahwa kontrol yang
digunakan tidak memiliki aktivitas anti-bakteri.
Kelemahan pada penelitian ini adalah zona hambat yang dihasilkan
sangat kecil, ini dimungkinkan karena suhu inkubator tidak optimal untuk
pertumbuhan bakteri (Suriani, 2013). Pada saat penelitian inkubator
laboratorium terjadi pemadaman, sehingga suhu turun. Namun kelebihan
penelitian ini yaitu saat diberikan perlakukan pada konsentrasi 75 mg/ml
ekstrak biji kelor menghambat Shigella dysenteriae, sedangkan Lar et al
(2011) pada Escherichia coli, Shigella flexneri dan Salmonella typhi pada
konsentrasi 100 mg/ml.
Page 52
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
42
Penelitian Bukar et al., (2010) menggunakan ekstrak biji kelor lebih
baik dibandingkan menggunakan ekstrak daun kelor. Daya hambat berturut-
turut yang diperoleh pada saat diujikan pada E. coli, biji kelor sebesar 10
mm, 11 mm , 11 mm, 11 mm dan daun kelor sebesar 6 mm, 6 mm, 6 mm, 6
mm. Perbandingan penelitian lain yang dilakukan oleh Sayeed et al (2012),
dengan ekstrak buah kelor (Moringa oleifera Lmk.) yang sama-sama
menggunakan bakteri Shigella dysenteriae konsentrasi 30 μg/disc, 50
μg/disc dan 100 μg/disc, menunjukan adanya zona hambat pada konsentrasi
100 μg/disc, namun penelitian ini tidak melakukan uji fitokimia dan uji
dilusi untuk menentukan nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dan
Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM).
2. Pembahasan Uji Dilusi (tube dilution method) terhadap Shigella dysenteriae
Teknik perhitungan koloni bakteri dilakukan secara sederhana dengan
metode TPC, selanjutnya secara deskriptif dijabarkan bahwa Shigella
dysenteriae yang telah ditambah biji kelor pada beberapa konsentrasi pada
media MHA (Muller Hinton Agar) dan dihitung tiap koloni (Rofi’i, 2009).
Satuan perhitungan koloni CFU (Colony Forming Unit) untuk populasi
mikroba. Metode TPC merupakan solusi terbaik dalam mengetahui
banyaknya populasi bakteri dan diukur sebagai nilai OD (Bichi et al., 2012).
Pada konsentrasi 75 mg/ml didapatkan nilai TPC 41x 106.
merupakan
nilai KHM tertinggi, dengan adanya penurunan nilai TPC. Nilai TPC bisa
memperkuat uji dilusi. Konsentrasi tinggi mampu menekan bakteri untuk
Page 53
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
43
tumbuh (Andries et al, 2014). Perlu melakukan uji lanjutan untuk
memperoleh nilai KBM. Konsentrasi yang diujikan pada penentuan nilai
KBM kurang tinggi, sehingga perlu meningkatkan konsentrasi melebihi
KHM (Julianti et al., 2017).
Berdasarkan analisis statistik pada uji difusi hasil positif diperlihatkan
dengan adanya zona hambat konsentrasi ekstrak biji kelor pada Gambar 5.1,
dimulai dari 75 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml, 400 mg/ml.
Menurut Bangkele et al (2015), menggunakan ekstrak lengkuas putih
(Alpinia galangal [L] Swartz, dilakukan uji fitokimia dan uji dilusi untuk
menentukan nilai Kadar Hambat Minimum (KHM) dan Kadar Bunuh
Minimum (KBM). Hasil uji fitokimia ditemukan adanya senyawa flavonoid
dan tanin. Sedangkan pada uji dilusi dengan konsentrasi 6,25%, 12,5%, 25%
dan 50% didapatkan nilai KHM pada konsentrasi 25% sudah tidak terjadi
kekeruhan dibanding konsentrasi 6,25%, 12,5% dan dari hasil perhitungan
dengan Colony Counter didapatkan konsentrasi 50% sudah tidak terdapat
pertumbuhan koloni ini berarti menunjukkan nilai KBM, karena syarat
KBM yaitu tidak ada pertumbuhan koloni (Julianti et al., 2017).
Hasil penelitian ini berkaitan dengan keberadaan senyawa fitokimia
yang terkandung didalam ekstrak biji kelor yang dianalisis secara kualitatif.
Menurut Saxena (2013), uji fitokimia dilakukan untuk menentukan
kandungan kimia secara kualitatif untuk mengetahui golongan senyawa
yang terkandung dalam suatu tumbuhan. Pemeriksaan uji fitokimia meliputi
Page 54
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
44
kandungan senyawa alkaloid, flavonoid, tanin dan saponin. Senyawa
fitokimia dalam biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) mendukung penelitian
ini seperti yang disajikan pada Tabel 5.6.
Tabel 5.6 uji fitokimia ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.)
Golongan
Senyawa
Perlakuan
Hasil Fitokimia
Alkaloid 5 gr ekstrak + HCl 2 M
+ HCl + reagen Wagner
+
(Endapan kuning)
Flavanoid 5 gr ekstrak + FeCl3 +
(Merah kehitaman)
Saponin 5 gr ekstrak + aquades +
(Terbentuk buih
yang stabil)
Tanin 5 gr ekstrak + FeCl3 1% +
(Hijau atau biru
kehijauan)
Pada Tabel 5.6 dapat diketahui bahwa ekstrak biji kelor yang di
esktraksi dengan pelarut metanol dapat mengangkat senyawa alkaloid,
flavonoid, saponin dan tanin. Sedangkan pada penelitian yang dilakukan
oleh Bukar et al (2010) menggunakan pelarut kloroform hanya mampu
mengangkat senyawa saponin. Hasil uji fitokimia yang dilakukan pada
pelarut yang berbeda akan menunjukkan hasil yang berbeda dalam kekuatan
sinyal yang diidentifikasi, yaitu tingkat kepekatan yang berbeda pada setiap
pelarut. Senyawa polar hanya akan larut pada pelarut polar seperti metanol.
Page 55
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
45
Sehingga senyawa alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin dapat terangkat
karena merupakan senyawa polar (Egwaikhide dan Gimba, 2007).
Alkaloid mengganggu penyusunan peptidoglikan pada dinding sel
sehingga terjadi kematian sel (Dima et al, 2016).
Flavonoid merupakan golongan senyawa polar yang dapat larut dalam
pelarut polar etanol, metanol, DMSO dan lain-lain. Flavanoid merupakan
bagian dari senyawa fenol yang dapat bersifat sebagai anti-bakteri.
Mekanisme kerja dari flavonoid yaitu melalui penghambatan fungsi DNA
gyrase sehingga menurunkan kemampuan replikasi dan translasi bakteri
(Wulandari et al, 2012).
Saponin mampu mengeluarkan busa seperti sabun. Efek dari saponin
mengganggu permeabilitas sel bakteri sehingga membran sel rusak dan lisis
(Sulastrianah et al, 2014).
Shigella dysenteriae adalah Gram negatif lapisan peptidoglikan tipis
tersusun pada dinding sel. Mekanisme awal penghancuran dinding sel
Shigella dysenteriae akan diikuti kerusakan yang lain (Nurhasanah, 2014).
Pengaruh ekstraksi dan pelarut metanol yang digunakan akan
mempengaruhi aktivitas antibakteri. Ngazizah (2016), menyatakan
perbedaan sensitivitas antibakteri terhadap dinding sel bakteri Gram negatif
dan bakteri Gram positif.
Page 56
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
46
Pengobatan merupakan suatu usaha yang dilakukan untuk
menyembuhkan diri dari suatu penyakit. Pada dasarnya pengobatan secara
tradisional diperbolehkan dalam ajaran islam selama tidak menjurus kepada
kemusyrikan. Nabi Muhammad saw telah menjelaskan bahwa ada dua
macam penyakit pada diri manusia, yaitu penyakit jasmani dan rohani.
Pengobatan untuk penyakit rohani adalah Al-Qur’an, sedangkan untuk
pengobatan jasmani adalah dengan apa yang Allah ciptakan.
Pada dasarnya semua penyakit berasal dari Allah, maka hanya Allah lah
yang dapat menyembuhkannya. Akan tetapi untuk mencapai kesembuhan,
seorang hamba harus mengusahakannya. Sesungguhnya Allah
mendatangkan penyakit maka bersamaan dengan itu Allah juga
mendatangkan obat. Hal ini sesuai dengan riwayat Imam Muslim dari Jabir
bin Abdillah dia berkata bahwa Rasulullah saw bersabda :
اء ب رأ بإذن الله عز وجل لكل داء دواء، فإذا أصيب دواء الد
“Setiap penyakit ada obatnya. Apabila obat itu tepat untuk suatu penyakit,
penyakit itu akan sembuh dengan seizin Allah 'azza wajalla.” (HR.Muslim)
Berdasarkan hadist diatas dapat diartikan bahwa Allah swt tidak akan
menurunkan penyakit apapun kecuali Allah juga menurunkan obatnya baik
itu penyakit yang muncul pada zaman Nabi maupun sesudahnya. Setiap
penyakit pasti ada obatnya, tergantung bagaimana cara mengatasi penyakit
tersebut sehingga penyakit tersebut bisa sembuh atas izin Allah swt.
Page 57
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
47
BAB VI
PENUTUP
A. Simpulan
1. Konsentrasi ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) mempengaruhi
diameter zona hambat pertumbuhan Shigella dysenteriae. Rerata diameter
daerah zona hambat terbesar pada konsentrasi 400 mg/ml sebesar 7,8 mm.
2. Nilai KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) ekstrak biji kelor (Moringa
oleifera Lmk.) yaitu pada konsentrasi 75 mg/ml.
3. Belum ditemukan nilai KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum) terhadap
Shigella dysenteriae.
B. Saran
1. Penelitian lebih lanjut ekstrak biji kelor (Moringa oleifera Lmk.) sangat
penting dilakukan untuk mencari nilai KBM.
2. Perlu dilakukan uji fitokimia secara kuantitatif agar diperoleh hasil yang
lebih akurat terkait pengaruh senyawa fitokimia terhadap bakteri Shigella
dysenteriae.
Page 58
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
48
DAFTAR PUSTAKA
Abdillah, M., Nazilah, N.R.K., E. Agustina. 2017. Identifikasi Senyawa Aktif
Dalam Ekstrak Metanol Daging Buah Kurma Jensi Ajwa (Phoenix
dactylvera L.) . Jurnal Prosiding Seminar Nasional III. UIN Sunan Ampel
Surabaya, Surabaya.
ssAbdullah, A.Z., Arsin, A.A., and L. Dahlan. 2012. Faktor Resiko Diare
Shigellosis Pada Anak Balita. Jurnal Kesehatan Masyarakat 7 (1) : -.
Amjad, M. S., Qureshi H. Arsyad, S.K. Chaudhari, and M. Masood .2015. The
Incredible Queen Of Green: Nutritive Value And Therapeutic Potential Of
Moringa Oleifera Lam. Journal Of Coastal Life Medicine 3(9): 744-751.
Andries, J.R., Gunawan, P.N., A. Supit. 2014. Uji Efek Antibakteri Ekstrak Bunga
Cengkeh terhadap Bakteri Streptococcus mutans secara In Vitro. Jurnal e-
Gigi, 2 (2) : -
Aney, J., Rashmi, T., Maushumi, K and Kiran, B. 2009. Pharmacological and
Pharmaceutical Potential of Moringa oleifera. A Review Journal
Pharmacist Research. 2 (9) : 1424-1426.
Anwar, F., Latif, S., Ashraf, M., and A.H, Gilani. 2007. Moringa oleifera: A Food
Plant with Multiple Medicinal Use. Journal Phytotherapy Research, 21 :
17-25.
Arthasari, D.A.A. 2015. Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanol Biji Dan
Batang Pepaya (Carica Papaya L.) Terhadap Bakteri Shigella Dysenteriae
Dan Streptococcus Pyogenes Serta Bioautografinya. Naskah Publikasi.
Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Bangkele, E.Y., Nursyamsi, S. Greis. 2015. Efek Anti Bakteri Dari Ekstrak
Lengkuas Putih (Alpinia Galangal [L] Swartz) Terhadap Shigella
Dysenteriae. Jurnal Kesehatan Tadulako, 1 (2) : 1- 78.
Balouiri, M., Sadiki, M., S.K, Ibnsouda. 2016. Methods for in vitro evaluating
antimicrobial activity. Journal of Pharmaceutical Analysis, 6 : 71–79.
Bichi. M. H., Agunwambas. J. C., S. A. Muyibi., M. I. Abdulkarim. 2012. Effect
of Extraction Method on the Antimicrobial Activity of Moringa oleifera
Seeds Extract. Journal of American Science. 8 (9) : -
Page 59
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
49
Bukar, A., Uba, A., Oyeyi, T.I. 2010. Antimicrobial Profile of Moringa oleifera
Lam. Extracts Against Some Food-Borne Microorganisms. Journal
Bajopas, 3 (1) : 43-48.
Chukwuebuka,E. 2015. Moringa oleifera “The Mother’s Best Friend”.
International Journal of Nutrition and Food Sciences 4(6) : 624-630.
Dima, L.L.R.H., Fatmawati., and W.A, Lolo.2016. Uji Aktivitas Antibakteri
Ekstrak Daun Kelor (Moringa oleifera L.) Terhadap Bakteri Escherichia
coli dan Staphylococcus aureus. Jurnal Ilmu Farmasi, 5 (92) : - .
Egwaikhide, P.A., C.E Gimba. 2007. Analysis of thr Phytochemical Content and
Anti-microbial Activity of Plectranthus glandulosis Whole Plant. Journal
of Scientific Research, 2 (3-4) : 135-138.
Folkard, G., Sutherland, J. 2005. Moringa oleifera a multipurpose tree. Journal
Tropical Medicine Hygiene, 90 : 101-109.
Gupta, R., Sharma, A.K., Dobhal, M.P., Sharma, M.C., and R.S. Gupta. 2011.
Antidiabetic And Antioxidant Potential Of Sitosterol In Streptozotocin-
Induced Experimental Hyperglycemia. J. Diabetes 3 : 29–37. Diakses
Selasa, 6 Juni 2017.<https://Www.Ncbi.Nlm.Nih.Gov/Pubmed/21143769>
Hamza, A.A. 2010. Ameliorative Effects Ofmoringa Oleifera Lamseed Extract On
Liver Fibrosis In Rats. Food Chem. Toxicol. 2010, 48 : 345–355. Diakses
pada 6 Juni 2017. <https://Www.Ncbi.Nlm.Nih.Gov/Pubmed/19854235>.
Julianti. E., Kasturi K. R., Irda. F. 2017. Antibacterial Activity Of Ethanolic
Extract Of Cinnamon Bark, Honey and Their Combination Effects Against
Acne-Causing Bacteria. Journal Sci.Pharm. 85 (19) : -.
Kheir, S.M., Kafi S. K and H. Elbir. 2015. Evaluation Of The Antifungal Activity
Of Moringa Oleifera Seeds, Leaves And Flowers. World Journal Of
Pharmaceutical Research. 4 (2) : 18-25.
Khotimah , K. 2016. Skrining Fitokimia Dan Identifikasi Metabolit Sekunder
Senyawa Karpain Pada Ekstrak Metanol Daun Carica Pubescens Lenne &
K. Koch Dengan Lc/Ms (Liquid Chromatograph-Tandem Mass
Specttrometry). Skripsi . Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam
Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Krisnadi, A. D. 2015. “Kelor Super Nutrisi”. Diakses Minggu, 15 Januari 2017.
<http://Kelorina.com/Blog/Ebook-Super-Nutrisi.com>
Page 60
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
50
Kurniasih, D. 2014. Efektivitas Ekstrak Lidah Buaya (Aloe Vera) Sebagai
Antibakteri Pada Pertumbuhan Shigella dysenteriae Secara In Vitro.
Skripsi. Fakultas Keguruan Dan Ilmu Pendidikan, Universitas Pasundan.
Bandung.
Kusumaningsih, A. 2010. Beberapa Bakteri Patogenik Penyebab FoodBorne
Disease Pada Bahan Pangan Asal Ternak. Jurnal Wartazoa, 20 (3) : -.
Lar, P.M ., Ojile, E.E, E. Danshe., and J.N Oluoma. 2011. Antibacterial Activity
Of Moringa Oleifera Seed Extracts On Some Gram Negative Bacterial
Isolates. African Journal Of Natural Sciences, 14: 57-62.
Leone, A., Alberto, S., A. Battezzati, A. Schiraldi, J. Aristil and S. Bertoli. 2016.
Moringa Oleifera Seeds And Oil: Characteristics And Uses For Human
Health. International Journal Of Molecular Sciences. 17 (12) : 2141.
Lutz. M., Hernandez. J., Carolina. H. 2015. Phenolic Content and Antioxidant
Capacity in Fresh and Dry Fruits and Vegetables Grown in Chile. Journal
of Food. 13(4) : 541-547.
Maharani, K. 2012. Uji Aktivitas Ekstrak Kulit Buah Dan Biji Manggis (Garcinia
mangostana) Pada Bakteri Penyebab Jerawat (Staphylococcus
epidermidis) Dengan Menggunakan Solven Etanol. Skripsi. Fakultas Sains
dan Teknologi, Universitas Airlangga, Surabaya.
Mahajan, S.G., Mali, R.G., and A.A. Mehta. 2007. Effect Of Moringa Oleifera
Lam. Seed Extract On Toluene Diisocyanateinduced Immune-Mediated
Infla Mmatory Responses In Rats. Juornal Immunotoxicol. 4 : 85–96.
Diakses Selasa, 6 Juni 2017.
<https://Www.Ncbi.Nlm.Nih.Gov/Pubmed/18958717>.
Microbesinfo. 2014. Definition, Classification, Morphology And Cultural
Characteristics Of Shigella. Microbiology And Infectious Diseases.
Diakses Minggu, 4 Juni 2017. <http:// Microbesinfo.com.>.
Midun, 2012. Uji Efektivitas Ekstrak Lengkuas Merah (Alpina purpurata K.
Schum) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus
dan Bakteri Escherichia coli dengan Metode Disc Difussion. Skripsi.
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah,
Jakarta.
Munfaati, P.N., Ratnasari, E and G. Trimulyono. 2015. Aktivitas Senyawa
Antibakteri Ekstrak Herba Meniran (Phyllanthus Niruri) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Shigella Dysenteriae Secara In Vitro. Jurnal
LenteraBio, 4 (1) : 64-71.
Page 61
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
51
Ngazizah, F.N., Ekowati, N., A.T, Septiana. 2016. Potensi Daun Trembilungan
(Begonia hirtella Link) sebagai Antibakteri dan Antifungi. Jurnal Biosfera,
33 (3) : 126-133.
Novalina, D., Sugiyarto, A. Susilowati. 2012. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun
Carica pubescens dari Dataran Tinggi Dieng terhadap Bakteri Penyebab
Penyakit Diare. Jurnal pasca sarjana uns.ac.id, 1 (1) : 1-12.
Nurhasanah. 2014. Antimicrobial Activity of Nutmeg (Myristica fragrans Houtt)
Fruit Methanol Extract Againts Growth Staphylococus aureus and
Eschericia coli. Jurnal BIOedukasi, 3 (1) : -.
Pakki. E., Kasim Syaharuddin. K., Muzakkir. R., Sony. K. 2009. Uji Aktivitas
Antibakteri Enzim Papain Dalam Sediaan Krim Terhadap Staphylococcus
aureus. Majalah Farmasi dan Farmakologi. 3 (1) : -.
Perwira, I.D. 2013. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak N-Heksana, Etil Asetat Dan
Etanol 70% Daun Binahong (Anredera Cordifolia (Ten.) Steenis)
Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus Aureus Secara In Vitro. Skripsi.
Fakultas Farmasi, Universitas Jember, Jember.
Rofi’i. F. 2009. Hubungan Antara Jumlah Total Bakteri dan Angka Katalase
Terhadap Daya Tahan Susu. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan, Institut
Pertanian Bogor, Bogor.
Sari, M. 2015. Uji Bakteriologis dan Resistensi Antibiotik Terhadap Bakteri
Escherichia coli dan Shigella sp Pada Makanan Gado-Gado di Kantin UIN
Syarif Hidayatullah Jakarta. Skripsi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu
Kesehatan, Uin Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Sarker, S.D, Latif, Z., Gray A.I. 2006. Natural Products Isolation. Journal, 6 : 10-
18.
Saxena, M., Saxena, J., R. Nema, D. Singh, A. Gupta. 2013. Phytochemistry of
Medicinal Plants. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. 1 (6) : -
Sayeed, M.A., Hossain, M.S., M.E.H, Chowdhury, M. Haque. 2012. In Vitro
Antimicrobial Activity of Methanolic Extract of Moringa oleifera Lam.
Fruits. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, 1(4) : -
Shrotriya, A. 2015. An Introduction To Shigellosis And Strategies Against Potent
Drug. International Journal Of Pharmacy & Life Sciences. 6 : 8-9.
Sulastrianah, Imran, E.S, Fitria. 2014. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Sirsak
(Annona muricata L.) dan Daun Sirih (Piper betle L.) terhadap
Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli. Jurnal, 1 (1) : -
Page 62
digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id digilib.uinsby.ac.id
52
Sulaeman, L.P. 2015. Deteksi Bakteri Eschericia Coli Dan Shigella Sp Dalam
Telur Balado Serta Resistensinya Terhadap Beberapa Antibiotik. Skripsi.
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah,
Jakarta.
Suriani. S., Soemarno, Suharjono. 2013. Pengaruh Suhu dan pH Terhadap Laju
Pertumbuhan Lima Isolat Bakteri Anggota Genus Pseudomonas Yang
Diisolasi Dari Ekosistem Sungai Tercemar Deterjen Di Sekitar Kampus
Universitas Brawijaya. Jurnal-PAL. 3 (2) : -
Threenesia, A. 2017. Perbandingan Efek Pemberian Ekstrak Etanol Daun
Kemangi (Ocimum Sanctum L.) Terhadap Daya Hambat Pertumbuhan
Staphylococcus Aureus Dan Salmonella Typhi Secara In Vitro. Skripsi .
Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung, Bandar Lampung.
Utami, E.R. 2012. Antibiotika, Resistensi dan Rasionalitas Terapi. Jurnal Saintis,
1 (1) : -
Vimalkumar, C.S., V.B Hosagaudar., S.R Suja., V.Vilash., N.M Krishnakumar.,
and P.G, Latha. 2014. Comparative preliminary phytochemical analysis of
ethanolic extracts of leaves of Olea dioica Roxb., infected with the rust
fungus Zaghouania oleae (E.J. Butler) Cummins and non-infected plants.
Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry 3 (4) : 69-72.
Walter, A., Samuel, W., Peter, A And O. Joseph. 2011. Antibacterial Activity Of
Moringa Oleifera And Moringa Stenopela Methanol And N-Hexane Seed
Extracts On Bacteria Implicated In Water Borne Diseases. African Journal
Of Microbiology Research 5 (2) : 153-157.
WHO. 2016. Dysenterie (Shigellosis). Diakses Selasa, 6 Juni 2017.
http://www.who.int/selection_medicines
Wulandari, P., Suswati, E., Misnawi., and A. Rianul. 2012. Antibacterial Effect
Of Ethanol Extract Cocoa Beans (Theobroma Cacao) On Growth In Vitro
By Shigella Dysentriae. Jurnal Medika Planta 1 (5) : -.
Zhou, G., Shi, Q.S., X.M. Huang., X.B. Xie. 2015. The Three Bacterial Lines of
Defense Against Antimicrobial Agents. Journal of Molecular Sciences, 16
: 21711-21733.