Page 1
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 1/77
EFEK EKSTRAK BUAH PEPAYA MUDA (Carica papaya)SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Staphylococcus aureus SECARA IN
VITRO
TUGAS AKHIR
Untuk Memenuhi PersyaratanMemperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Umum
OLEH :GANDHI ESTRADA ATMANTO
NIM: 0310710066
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UMUMFAKULTAS KEDOKTERANUNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2007
Page 2
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 2/77
HALAMAN PENGESAHAN
TUGAS AKHIR
EFEK EKSTRAK BUAH PEPAYA MUDA (Carica papaya)
SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP Staphylococcus Aureus
SECARA IN VITRO
Oleh:
Gandhi Estrada Atmanto
NIM: 0310710066
Telah diuji pada
Hari : Rabu
Tanggal : 9 Mei 2007
dan dinyatakan lulus oleh:
Penguji I
Agustina Tri Endharti, S.Si., PhD.
NIP: 132 206 313
Penguji II Penguji III
dr. Roekistiningsih, MS, SpMK Dr. dr. Setyawati S. Karyono, Mkes.
NIP: 130 687 356 NIP: 130 935 072
Page 3
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 3/77
SEBUAH PERSEMBAHAN...
BAGAI PELITA YANG TIDAK AKAN PERNAHREDUPKUPERSEMBAHKAN BUAH PENAKU INIUNTUK KEDUA ORANG TUAKUYANG DENGAN TULUS&IKHLASTELAH MERAWATKU&MEMBIMBINGKU
HINGGA AKU SIAP UNTUK MENERIMA DUNIAINI...
BAGAI SUCINYA ARTI SEBUAHHATI
KUPERSEMBAHKAN KARYAKU INIUNTUK ANITA RAHMAWATI, CALON ISTRIKU
YANG DENGAN PENUH CINTA&KASIH SAYANG
SELALU MENEMANIKU DALAM SETIAP SUKADUKAKU
TERIMA KASIH ATAS SEGALANYA SAYANGKUENGKAULAH YANG TERBAIK BAGIKU
SEPANJANG MASA...
DAN JUGA UNTUK IBUNYA ANITAYANG TELAH MEMBERIKU NASEHAT-NASEHAT
DEMI KEMAJUANKUTERIMA KASIH IBUENGKAULAH SEGALANYA...
Page 4
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 4/77
ABSTRAK
Atmanto, Gandhi, Estrada. 2007. Efek Ekstrak Buah Pepaya Muda (Carica papaya) Sebagai Antimikroba Terhadap Staphylococcus aureusSecara In Vitro. Tugas Akhir , Fakultas Kedokteran, Universitas BrawijayaMalang. Pembimbing: (1) dr. Roekistiningsih MS., SpMK. (2) Dr. dr. SetyawatiS. Karyono. MKes.
Resistensi akibat infeksi Staphylococcus aureus masih merupakan kasus yangsering dijumpai di Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui danmembuktikan bahwa ekstrak buah pepaya muda memiliki efek sebagai penghambatpertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro dengan menggunakanmetode eksperimental yang terdiri dari uji dilusi tabung dan uji gores NAP. Sebagaibahan uji adalah ekstrak buah pepaya muda dengan konsentrasi akhir 1%, 2%, 3%,4% dan 5% serta sebagai pembanding adalah kontrol kuman dan kontrol bahan;sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah isolat Staphylococcus aureus.Pada uji dilusi tabung didapatkan Kadar Hambat Minimum (KHM) pada konsentrasiakhir ekstrak 3% sedangkan pada uji gores NAP Kadar Bunuh Minimum (KBM) tidakdapat ditentukan karena pada konsentrasi tertinggi masih ditemukan pertumbuhankoloni bakteri. Berdasarkan uji ANOVA didapatkan hasil bahwa ekstrak buah pepayamuda secara signifikan dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcusaureus secara in vitro (p<0,05). Kesimpulan dari penelitian ini adalah ekstrak buahpepaya muda dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secarain vitro. Berdasarkan hasil penelitian ini disarankan agar diadakan penelitian lanjutandengan hewan coba atau uji klinik untuk mellihat farmakokinetik, farmakodinamik dantoksisitas bahan aktif yang terkandung di dalam ekstrak buah pepaya muda.
Kata kunci: Efek Antimikroba, Ekstrak Buah Pepaya Muda, Staphylococcusaureus, in vitro
Page 5
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 5/77
ABSTRACT
Atmanto, Gandhi, Estrada. 2007. The Effect Of The Young Papaya Fruit Extract (Carica papaya) As Antimicrobe Against Staphylococcus aureus In Vitro. Final Assignment, MedicalFaculty, Brawijaya University Malang. Supervisors: (1) dr.Roekistiningsih MS., SpMK. (2) Dr. dr. Setyawati S. Karyono.MKes.
The resistance resulted from the infection of Staphylococcus aureus is the casethat still more frequent faced in Indonesia. The aim of this research is to determine andto proof that the young papaya fruit extract have effect as a inhibitor for the growth of Staphylococcus aureus in vitro with the experimental method that consists of the tubedilution test and the streaking test on Nutrient Agar Plate (NAP). The latestconcentration of the young papaya fruit extract were 1%, 2%, 3%, 4% and 5% with thecomparation of the germ control and the substance control; sample that used in thisresearch was the isolate of Staphylococcus aureus. The Minimum InhibitionConcentration (MIC) was found on 3% while the Minimum BactericidalConcentration (MBC) was not obtained because at the highest concentration thecolony still be grown. Based on the ANOVA test the result was the young papaya fruitextract can inhibit the growth of Staphylococcus aureus in vitro significantly (p<0,05).The conclusion is the young papaya fruit extract can inhibit the growth of Staphylococcus aureus in vitro. Based on the result of this research there`s suggestedto the next research with the animal model or the clinical trial for looking thepharmacokinetics, pharmacodinamics, and the toxicity of the active substance thatcontained on the young papaya fruit extract.
Keywords: Antimicrobial Effect, The Young Papaya Fruit Extract (Carica papaya),Staphylococcus aureus, in vitro
Page 6
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 6/77
DAFTAR ISI
Halaman
Judul/Sampul Dalam .............................................................................................iHalaman Pengesahan ...........................................................................................iiHalaman Peruntukan ............................................................................................iiiKata Pengantar ......................................................................................................v
Abstrak .................................................................................................................viiAbstract ...............................................................................................................viiiDaftar Isi ...............................................................................................................ixDaftar Tabel ..........................................................................................................xiDaftar Gambar .....................................................................................................xiiDaftar Lampiran ..................................................................................................xiii
BAB 1. PENDAHULUAN1.1 Latar Belakang .................................................................................11.2 Rumusan Masalah ...........................................................................2
1.3 Tujuan .............................................................................................31.3.1 Tujuan Umum..........................................................................31.3.2 Tujuan Khusus.........................................................................3
1.4 Manfaat ...........................................................................................31.4.1 Manfaat Umum........................................................................31.4.2 Manfaat Khusus.......................................................................3
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA2.1 Pepaya (Carica papaya) ..................................................................5
2.1.1 Taksonomi Pepaya..................................................................52.1.2 Morfologi dan Karakteristik Pepaya........................................52.1.3 Komposisi dan Kandungan Kimiawi Pepaya..........................82.1.4 Manfaat Pepaya......................................................................8
2.2 Staphylococcus aureus .................................................................122.2.1 Epidemiologi Infeksi Staphylococcus aureus........................122.2.2 Morfologi dan Identifikasi.......................................................132.2.3 Struktur Antigen.....................................................................152.2.4 Toksin dan Enzim..................................................................162.2.5 Manifestasi Klinik Staphylococcus aureus............................18
2.2.6 Resistensi Staphylococcus aureus.......................................202.3 Bahan Antimikroba........................................................................22
2.3.1 Uji Kepekaan terhadap Antimikroba in vitro..........................232.3.1.1 Metode Dilusi Tabung...............................................232.3.1.1 Metode Difusi............................................................24
BAB 3. KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN
Page 7
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 7/77
3.1. Kerangka Konsep ........................................................................263.2. Hipotesis Penelitian.......................................................................26
BAB 4. METODE PENELITIAN4.1 Desain Penelitian ...........................................................................274.2 Waktu dan Tempat Penelitian .......................................................27
4.2.1 Waktu Penelitian....................................................................274.2.2 Tempat Penelitian..................................................................28
4.3 Sampel dan Besar Sampel ............................................................284.4 Variabel Penelitian .........................................................................28
4.4.1 Variabel Bebas......................................................................284.4.2 Variabel Tergantung..............................................................28
4.5 Definisi Operasional ......................................................................29
4.6 Alat dan Bahan ..............................................................................304.6.1 Alat.........................................................................................304.6.2 Bahan.....................................................................................31
4.7 Prosedur Penelitian .......................................................................314.7.1 Pembuatan Bahan Uji...........................................................314.7.2 Preparasi Bakteri...................................................................33
4.7.2.1 Pewarnaan Gram......................................................334.7.2.2 Tes Koagulase..........................................................33
4.7.2.2.1 Dengan Gelas Objek..................................334.7.2.2.2 Dengan Tabung.........................................34
4.7.2.3 Tes Katalase..............................................................344.7.2.4 Pembuatan Larutan Bakteri Uji.................................34
4.7.3 Pengujian Efek Antimikroba..................................................344.7.4 Penentuan Efektivitas Bahan Uji...........................................36
4.8 Rencana Analisis Data ..................................................................37
BAB 5. HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA5.1 Hasil Penelitian ..............................................................................39
5.1.1 Identifikasi Staphylococcus aureus.......................................395.1.2 Hasil Pengamatan Uji Dilusi Tabung....................................415.1.3 Hasil Pengamatan pada NAP...............................................43
5.1.3.1 Hasil Pengamatan Kepadatan Koloni Staphylococcusaureus pada NAP......................................................43
5.1.3.2 Hasil Penghitungan Koloni Staphylococcus aureuspada NAP....................................................... ...... 445.2 Analisis Data ..................................................................................46
BAB 6. PEMBAHASAN.......................................................................................50
BAB 7. PENUTUP7.1 Kesimpulan ..................................................................................557.2 Saran ...........................................................................................56
DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................57
Page 8
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 8/77
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Komposisi dan Kandungan Buah Pepaya ............................8
Tabel 5.1 Hasil Uji Katalase dan Koagulase .......................................40
Tabel 5.2 Jumlah Koloni Staphylococcus aureus pada pemberian
berbagai Konsentrasi Ekstrak Buah Pepaya Muda ..... …. 45
Page 9
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 9/77
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Buah Pepaya Muda ...........................................................6
Gambar 2.2 Pohon Pepaya ...................................................................6
Gambar 2.3 Penampang Daun Pepaya ................................................7
Gambar 2.4 Morfologi Staphylococcus aureus beserta struktur antigeniknya ………………………………………………...13
Gambar 5.1 Koloni Staphylococcus aureus yang diamati di bawahmikroskop dengan perbesaran total 400x ................... 39
Gambar 5.2 Hasil Uji Koagulase dan Uji Katalase ................………...41
Gambar 5.3 Berbagai Tingkat Kekeruhan yang terlihat pada Uji DilusiTabung ................................................................ …….. 42
Gambar 5.4 Berbagai Tingkat Kepadatan Koloni pada NAP ..............43
Gambar 5.5 Jumlah Koloni Staphylococcus aureus setelah perlakuanberbagai konsentrasi ekstrak buah pepaya muda ...... 46
Page 10
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 10/77
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Pernyataan Keaslian Tulisan ...........................................................61
Lampiran 2. Alat yang dipergunakan untuk pembuatan ekstrak .........................62
Lampiran 3. Ekstrak Buah Pepaya Muda ............................................................63
Lampiran 4. Analisis Statistik: Hasil Uji Normalitas .............................................64
Lampiran 5. Analisis Statistik: Hasil Uji Oneway-ANOVA dan Hasil Uji Post Hoc Tukey ........................................................................................65
Lampiran 6. Analisis Statistik: Hasil Uji Korelasi-Pearson ...................................67
Lampiran 7. Analisis Statistik: Hasil Uji Regresi Linear ......................................68
Page 11
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 11/77
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Indonesia merupakan sebuah negara kepulauan yang tidak pernah terlepas
dari masalah penyakit infeksi. Salah satu penyebab dari tingginya kasus penyakit
infeksi di Indonesia adalah ketidaksesuaian antara peningkatan pola perekonomian
dan kesejahteraan masyarakat dengan usaha untuk menjaga sanitasi lingkungan.
Salah satu bukti yang menunjukkan bahwa kejadian akibat penyakit infeksi masih
tinggi di Indonesia adalah munculnya kasus resistensi antimikroba pada bakteri
tertentu, yaitu pada Staphylococcus aureus.
Staphylococcus patogen sering menghemolisis darah, mengkoagulasi plasma,
serta menghasilkan berbagai enzim ekstraseluler dan toksin. Suatu jenis keracunan
makanan sering terjadi akibat enterotoksin tahan panas yang dihasilkan oleh galur
Staphylococcus tertentu. Bakteri Staphylococcus sp.cepat menjadi resisten terhadap
banyak zat antimikroba sehingga menimbulkan masalah pengobatan yang sulit
(Jawetz et.al ., 1995). Perkembangan yang cepat dari kasus resistensi bakteri terhadap
antibiotik disebabkan antara lain karena adanya peristiwa mutasi dan atau karena
proses transfer gen terhadap faktor penentu/determinan resistensi yang dimiliki oleh
suatu bakteri tertentu, sehingga cenderung menyebabkan timbulnya suatu strain
bakteri yang tahan terhadap terapi antibiotik (Berge, 2002).
Page 12
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 12/77
Menyadari hal tersebut di atas, maka tidak sedikit peneliti yang berusaha
mencari jalan keluar untuk mengatasi masalah resistensi antimikroba ini. Berbagai
obat-obatan kombinasi dan bahan-bahan alami pun telah diujicobakan
sebagai altenatif pemecahan masalahnya. Tidak jarang pula pengujian bahan-bahan
alternatif tersebut menimbulkan berbagai efek samping yang justru semakin merugikan
penderita. Salah satu bahan alternatif yang pernah diujicobakan adalah pepaya
(Carica papaya) (Senese et.al., 2005).
Pepaya merupakan jenis tanaman yang seluruh bagian tubuhnya sering
dipergunakan oleh masyarakat kita, mulai dari daun, akar, buah, maupun bunganya.
Beberapa penelitian juga telah menunjukkan bahwa buah pepaya memiliki efek
antimikroba terhadap beberapa bakteri tertentu (Senese et. al., 2005). Buah pepaya
mengandung papain, chymopapain, carpaine, dan tannin di mana pada beberapa
penelitian sebelumnya bahan-bahan tersebut diduga memiliki aktivitas antimikroba
terhadap jenis bakteri tertentu, termasuk Staphylococcus aureus (Agnol et.al.,2003;
Fitriani, 2006; Senese et.al., 2005; Simpson et.al., 2001; Quisumbing, 1951).
Berdasarkan apa yang sudah diuraikan di atas tadi maka penulis tertarik untuk
meneliti dan mengkaji lebih lanjut lagi tentang efektivitas enzim papain yang
terkandung di dalam buah pepaya muda sebagai antimikroba khususnya terhadap
Staphylococcus aureus. Dengan mempertimbangkan banyak hal akhirnya dipilih
ekstrak buah pepaya muda sebagai bahan yang akan diujicobakan secara in vitro di
dalam penelitian ini. Hal ini karena potensi dan kemanfaatan dari ekstrak buah pepaya
tersebut yang sangat besar di masyarakat ditinjau dari segi sosial dan ekonomi.
1.2 Rumusan Masalah
Page 13
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 13/77
1. Apakah ekstrak buah pepaya muda memiliki efek sebagai penghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro?
2. Berapakah konsentrasi ekstrak buah pepaya muda yang dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro?
1.3 Tujuan
1.3.1 Tujuan Umum
Untuk membuktikan bahwa ekstrak buah pepaya muda memiliki efek sebagai
penghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro
1.3.2 Tujuan Khusus
Untuk mengetahui konsentrasi ekstrak buah pepaya muda yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro
1.4 Manfaat
1.4.1 Manfaat Umum
Sebagai tambahan untuk lebih mendukung adanya perkembangan ilmu
pengetahuan dan teknologi di bidang kedokteran, terutama yang berhubungan dengan
aspek mikrobiologi.
1.4.2 Manfaat Khusus
1. Untuk memperkaya khasanah pengetahuan masyarakat tentang kegunaan dari
buah pepaya muda
2. Untuk meningkatkan kesadaran masyarakat agar lebih gencar lagi
mengkonsumsi pepaya muda
3. Menambah informasi ilmiah tentang ekstrak buah pepaya muda yang memiliki
manfaat untuk pengobatan
Page 14
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 14/77
4. Memacu pengembangan antimikroba baru yang memiliki kemampuan
membunuh bakteri setara atau lebih potensial dari antimikroba yang sudah ada
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Pepaya ( Carica papaya )
2.1.1 Taksonomi Pepaya
Adapun sistematika penamaan (taksonomi) dari tanaman pepaya adalah
sebagai berikut:
• Kingdom : Plantae
• Subkingdom : Tracheobionta
• Superdivisi : Spermatophyta
• Divisi : Magnoliophyta
• Class : Magnoliopsida
• Subclass : Dilleniidae
• Order : Violales
• Family : Caricaceae
• Genus : Carica
• Species : Carica papaya
(National Plant Database, 2005).
2.1.2 Morfologi dan Karakteristik Pepaya
Page 15
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 15/77
Pepaya (Carica papaya ) merupakan tumbuhan yang berbatang tegak dan
basah. Pohonnya menyerupai palma, bunganya berwarna putih dan buahnya yang
masak berwarna kemerahan. Tinggi pohon pepaya dapat mencapai 8 meter dengan
akar yang kuat. Helaian daunnya menyerupai telapak tangan manusia. Apabila daun
pepaya tersebut dilipat menjadi dua bagian persis
pepaya berbentuk bintang apabila penampang buahnya dipotong melintang. Tanaman
ini juga dibudidayakan di kebun karena buahnya yang segar dan bergizi (IPTEKnet,
2002).
Gambar 2.1 Buah Pepaya Muda
Page 16
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 16/77
Gambar 2.2 Pohon Pepaya
(National Plant Database, 2005)
Gambar 2.3 Penampang Daun Pepaya
Tanaman pepaya banyak ditanam orang, baik di daerah tropis maupun
subtropis, di daerah-daerah basah dan kering atau di daerah-daerah dataran dan
pegunungan (sampai 1000 m dpl). Tanaman pepaya tumbuh subur pada daerah yang
memiliki curah hujan 1000-2200 mm/tahun. Suhu udara optimum untuk pertumbuhan
pepaya adalah 22-26oC, sedangkan kelembaban udaranya adalah sekitar 40%. Tanah
yang baik untuk tanaman pepaya adalah tanah yang subur dan banyak mengandung
humus. Tanah itu harus banyak menahan air dan gembur. Derajat keasaman tanah
Page 17
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 17/77
(pH tanah) yang ideal adalah netral dengan pH 6-7. Kandungan air dalam tanah
merupakan syarat penting dalam kehidupan tanaman ini. Tinggi air yang ideal tidak
lebih dalam daripada 50-150 cm dari permukaan tanah (AKK, 1975; Tohir, 1978).
Tanaman ini termasuk familia Caricaceae. Tumbuhan ini dapat
dikembangbiakkan melalui biji yang disemaikan (15-25 cm) lalu dipindahkan ke
pekarangan. Nama lainnya : gedang (Sunda); kates (Jawa); peute, betik, ralempaya,
punti kayu (Sumatera); pisang malaka, bandas, manjan (Kalimantan); kalujawa, padu
(Nusa Tenggara); kapalay, kaliki, unti jawa (Sulawesi); papaw tree; papaya; papayer;
melonenbaum; fan mu gua (Dalimartha, 1999; Muhlisah, 1999; Tampubolon, 1995;
Tanaman Obat Keluarga, 1999).
2.1.3 Komposisi dan Kandungan Kimiawi Pepaya
Adapun komposisi dan kandungan gizi dari 100 gram buah pepaya, baik yang
telah masak maupun yang masih muda, dapat dilihat pada tabel berikut :
Tabel 2.1 Komposisi dan Kandungan Buah Pepaya
Komposisi dan kandungan gizi Per 100 gram
Buah pepaya
masak
Buah pepaya
muda
Kalori 46 kal 26 kal
Lemak - 0,1 g
Protein 0,5 mg 2,1 g
Air 86,7 g 92,4 gHidrat arang 12,2 g 4,9 g
Vitamin A 365 SI 50 SI
Vitamin B1 0,04 mg 0,02 mg
Vitamin C 78 mg 19 mg
Kalsium 23 mg 50 mg
Fosfor 12 mg 16 mg
Besi 1,7 mg - ( IPTEKnet, 2002 )
2.1.4 Manfaat Pepaya
Page 18
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 18/77
Seluruh bagian tumbuhan pepaya punya khasiat. Daun, akar, dan buahnya
mengandung zat-zat seperti papain, damar, papayotin, papayachin, kautsyuk, karpain,
kalium-mironat, mirosin, protein, glukosida karposid, tannin, enzim proteolitik, vitamin A
dan vitamin C . Daunnya merangsang nafsu makan. Senyawa caricaksantin dan
violaksantin menghambat terjadinya batu empedu (Anonim, 2005).
Papain adalah suatu enzim pemecah protein yang terdapat pada pepaya dan
beberapa tanaman yang lain. Papain adalah suatu molekul yang ringan dan dapat
membantu kerja saluran pencernaan, khususnya untuk mengentengkan perut, serta
membantu mencerna molekul protein. Biasanya papain digunakan sebagai pengempuk
daging (meat tenderizer). Papain telah dibuktikan untuk mengatasi ulkus, mencerna
membran pada bakteri difteri, dan mengurangi pembengkakan, demam serta reaksi
adhesi pasca operasi (Senese et.al., 2005). Carpaine, sebuah senyawa alkaloid yang
juga ditemukan pada pepaya hijau telah dilaporkan dapat menginaktivasi berbagai
macam bakteri dan parasit (Quisumbing, 1951).
Adapun beberapa manfaat yang dapat diambil dari tanaman pepaya, yaitu :
1. Buah masak yang populer sebagai ”buah meja”, selain untuk pencuci mulut
juga sebagai pensuplai nutrisi/gizi terutama vitamin A dan C. Buah pepaya
masak yang mudah rusak perlu diolah dijadikan makanan seperti sari pepaya,
dodol pepaya. Dalam industri makanan, buah pepaya sering dijadikan bahan
baku pembuatan (pencampur ) saus tomat yakni untuk penambah cita rasa,
warna dan kadar vitamin.
2. Dalam industri makanan, akarnya dapat digunakan sebagai obat penyembuh
sakit ginjal dan kandung kencing.
3. Daunnya sebagai obat penyembuh penyakit malaria, kejang perut dan sakit
panas. Bahkan daun mudanya enak dilalap dan untuk menambah nafsu
Page 19
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 19/77
makan, serta dapat menyembuhkan penyakit beri-beri dan untuk menyusun
ransum ayam.
4. Batang buah muda dan daunnya mengandung getah putih yang berisikan
enzim pemecah protein yang disebut papain sehingga dapat melunakkan
daging untuk bahan kosmetik dan digunakan pada industri minuman
(penjernih ), industri farmasi dan textile.
5. Bunga pepaya yang berwarna putih dapat dirangkai dan digunakan sebagai
“bunga kalung” pengganti bunga melati atau sering dibuat urap. Batangnya
dapat dijadikan pencampur makanan ternak melalui proses pengirisan dan
pengeringan (AKK, 1975; Tohir, 1978).
Buah tropis ini merupakan sumber beta karoten yang baik, sehingga mampu
mencegah kerusakan sel yang disebabkan oleh radikal bebas. Setengah buah pepaya
ukuran sedang sehari mampu memenuhi kebutuhan vitamin C harian seorang manusia
dewasa. Tidak hanya itu, pepaya juga mengandung sedikit kalsium dan besi. Buah ini
amat dianjurkan untuk orang sakit dan lanjut usia karena dagingnya mudah dikunyah
dan ditelan ( Depkes, 2005 )
Di antara sekian banyak bahan aktif yang terkandung di dalam pepaya, yang
paling sering menjadi bahan penelitian adalah papain. Papain adalah suatu enzim
pemecah protein yang tidak hanya didapatkan pada pepaya namun juga bisa
didapatkan pada tanaman lain. Enzim ini sebenarnya telah lama dipergunakan di
dalam pengobatan tradisional. Dari hasil penelitian di University of Nigeria telah
dibuktikan bahwa ekstrak buah pepaya, baik yang sudah masak maupun yang belum
masak, sangat efektif untuk infeksi akibat bakteri Gram positif. Dengan dosis yang
lebih tinggi lagi juga efektif untuk infeksi akibat bakteri Gram negatif (Senese et.al.,
2005). Buah pepaya juga mengandung unsur yang dapat membuat pencernaan
Page 20
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 20/77
makanan lebih sempurna, disamping memiliki daya yang dapat membuat air seni
bereaksi asam, yang ilmiah disebut zat caricaksantin dan violaksantin. Kandungan
carposide pada daun pepaya berkhasiat sebagai obat cacing ( IPTEKnet, 2002 ).
Salah satu kandungan aktif pada pepaya selain papain adalah tannin. Tannin
merupakan salah satu senyawa kimiawi yang termasuk dalam golongan polifenol yang
diduga dapat mengikat salah satu protein yang dimiliki oleh bakteri yaitu adhesin dan
apabila hal ini terjadi maka dapat merusak ketersediaan reseptor pada permukaan sel
bakteri. Tannin telah dibuktikan dapat membentuk kompleks senyawa yang irreversibel
dengan prolin, suatu protein lengkap, yang mana ikatan ini mempunyai efek
penghambatan sintesis protein untuk pembentukan dinding sel (Agnol et.al.,2003).
Beberapa laporan penelitian in vitro menunjukkan bahwa secara potensial
terdapat hubungan yang signifikan antara sistem biologi/organisme seperti virus,
bakteri, dan molluska dengan beberapa enzim penghambat, antioksidan, dan zat anti
radikal bebas. Adapun kecenderungan beberapa senyawa tersebut untuk bercampur
dengan sistem biologi yang ada, paling tidak salah satu sistem biologi, karena adanya
kemampuan khusus dari senyawa-senyawa tersebut untuk membentuk ikatan
kompleks dengan makromolekul tertentu, yang mana makromolekul tadi berkombinasi
dengan suatu senyawa polifenol yang berasal dari alam. Polifenol yang terdiri atas
tannin, flavonoid dan asam fenolat merupakan komponen yang paling menonjol dalam
kaitannya dengan aktivitas antimikroba. Beberapa literatur juga telah menunjukkan
bahwa aktivitas antibakteri pada beberapa tanaman obat juga diperankan oleh tannin
(Agnol et.al.,2003).
Terdapat sebuah obat yang akhir-akhir ini sering mendapat perhatian, obat
tersebut adalah chymopapain, di mana chymopapain ini sebenarnya adalah sebuah
enzim yang diisolasi dari tanaman pepaya (Carica papaya). Enzim ini termasuk ke
Page 21
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 21/77
dalam golongan papain yang telah lama digunakan sebagai bahan pengempuk
daging/meat tenderizer. Di dalam dunia kedokteran chymopapain dikenal karena
kemampuan spesifiknya dalam proses pemecahan protein-protein tertentu (Simpson
et.al., 2001).
2.2 Staphylococcus aureus
2.2.1 Epidemiologi Infeksi Staphylococcus aureus
Staphylococcus sp.adalah parasit pada manusia yang terdapat di mana-mana.
Sumber utama infeksi adalah lesi pada manusia, benda yang terkontaminasi bakteri
dari lesi itu, dan saluran pernapasan serta kulit manusia. Penyebaran infeksi melalui
kontak langsung bertambah penting di rumah sakit, karena sebagian besar karyawan
dan penderita mengandung bakteri Staphylococcus sp. yang resisten terhadap
antibiotika pada hidung atau kulit mereka. Kebersihan, higiene, dan penanganan lesi
secara aseptis dapat mengendalikan penyebaran bakteri dari lesi, tetapi hanya ada
sedikit cara untuk mencegah penyebaran Staphylococcus sp. dari para pembawa
bakteri (Jawetz et.al ., 1995).
Badan statistik nasional di Inggris mencatat bahwa telah terjadi peningkatan
jumlah kematian sebanyak dua kali lipat selama tahun 1999 hingga 2003. Saat
antibiotika pertama ditemukan di tahun 1940, kematian yang disebabkan infeksi secara
drastis menurun. Tapi kini, banyak antibiotika yang sudah tidak ampuh lagi untuk
membunuh kuman, karena banyak kuman yang sudah resisten atau kebal terhadap
antibiotika. Ini harus menjadi perhatian dari kita semua, karena bila semakin banyak
kuman yang telah kebal terhadap antibiotika, sebagai akibat pemakaian antibiotika
yang tidak rasional maka sudah dapat diperkirakan kasus seperti di atas akan semakin
banyak terjadi ( Infotech, 2005 ).
Page 22
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 22/77
2.2.2 Morfologi dan Identifikasi
(Jawetz et.al., 1995)Gambar 2.4 Morfologi Staphylococcus sp. beserta struktur antigeniknya
Staphylococcus adalah suatu genus bakteri Gram-positif, anaerobik fakultatif
dari famili Micrococcaceae , ordo Eubacteriales, terdiri dari cocci. Biasanya tidak
berkapsul, dengan diameter 0,5 sampai 1,5 µm. Organisme tersebut terbentuk secara
tunggal, berpasangan, dan kelompok tidak beraturan, serta merupakan
nonsporogenous dan nonmotile. Bakteri ini merupakan potensial patogen,
menyebabkan lesi lokal dan infeksi opportunistik yang serius. Staphylococcus aureus
adalah suatu spesies yang terdiri atas genus bentuk patogenik koagulase positif
berpigmen kuning, menyebabkan infeksi supurasi yang serius dan penyakit sistemik,
seperti impetigo bullosa, staphylococcal pneumonia, dan staphylococcal scalded skin
syndrome. Spesies ini juga menghasilkan toksin yang menyebabkan keracunan
makanan dan sindrom syok toksik ( Dorland, 2000 ).
Staphylococcus adalah sel-sel berbentuk bola dengan garis tengah sekitar 1
µm dan tersusun dalam kelompok-kelompok tak beraturan. Pada biakan cair tampak
juga kokus tunggal, berpasangan, berbentuk tetrad, dan berbentuk rantai. Kokus muda
Page 23
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 23/77
bersifat Gram-positif kuat; sedangkan pada biakan yang lebih tua, banyak sel menjadi
Gram-negatif. Staphylococcus tidak bergerak dan tidak membentuk spora.
Staphylococcus mudah tumbuh pada kebanyakan perbenihan bakteri dalam keadaan
aerobik atau mikroaerofilik . Bakteri ini tumbuh paling cepat pada suhu 37oC, tetapi
membentuk pigmen paling baik pada suhu kamar (20-25oC). Koloni pada perbenihan
padat berbentuk bundar, halus, menonjol, dan berkilau. Staphylococcus aureus
membentuk koloni berwarna abu-abu sampai kuning emas tua. Staphylococcus
menghasilkan katalase, yang membedakannya dengan Streptococcus sp. Bakteri ini
meragikan banyak karbohidrat dengan lambat, menghasilkan asam laktat , tetapi tidak
menghasilkan gas. Aktivitas proteolitik sangat bervariasi untuk setiap strain.
Staphylococcus relatif resisten terhadap pengeringan, panas (bakteri ini tahan
terhadap suhu 50oC selama 30 menit), dan terhadap natrium klorida 9% tetapi mudah
dihambat oleh zat-zat kimia tertentu, seperti heksaklorofen 3% (Jawetz et.al., 1995).
Pada bakteri Gram positif, termasuk Staphylococcus aureus, dinding selnya
mengandung polisakarida yang disebut asam teikhoat yang berperan pada proses
transportasi ion-ion dari dalam maupun ke luar sel (Dzen dkk., 2003). Dinding sel
berlaku sebagai struktur pemberi bentuk pada sel, melindungi sel terhadap lisis
osmotik (Jawetz et.al., 1995). Membran sitoplasma atau membran sel adalah lapisan
yang terletak di sebelah dalam dinding sel, tersusun oleh 60% protein dan 40 % lipid
yang umumnya berupa fosfolipid . Membran sitoplasma merupakan barier yang
fungsinya mengatur keluar masuknya bahan-bahan dari dalam sel atau dari luar sel,
dan hanya bahan-bahan tertentu saja dapat melewatinya. Fungsi membran sitoplasma
yang lain adalah mengatur masuknya bahan-bahan makanan atau nutrisi yang
diperlukan bakteri untuk menghasilkan energi (Dzen dkk., 2003).
Page 24
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 24/77
2.2.3 Struktur Antigen
Staphylococcus mengandung polisakarida dan protein yang bersifat antigen
yang merupakan substansi penting di dalam struktur dinding sel. Peptidoglikan, suatu
polimer polisakarida yang mengandung subunit-subunit yang terangkai, merupakan
eksoskeleton kaku pada dinding sel. Peptidoglikan dihancurkan oleh asam kuat atau
lisozim. Hal ini penting dalam patogenesis infeksi : zat ini menyebabkan monosit
membuat interleukin-1 (pirogen endogen) dan antibodi opsonik ; dan zat ini juga dapat
menjadi zat kimia penarik (kemoatraktan) untuk leukosit polimorfonuklir , mempunyai
aktivitas mirip endotoksin, menghasilkan fenomena Shwartzman lokal, dan
mengaktifkan komplemen (Jawetz et.al., 1995).
Asam teikoat , yang merupakan polimer gliserol atau ribitol fosfat , berikatan
dengan peptidoglikan dan menjadi bersifat antigenik. Antibodi antiteikoat , yang dapat
dideteksi dengan difusi gel, dapat ditemukan pada penderita endokarditis aktif yang
disebabkan Staphylococcus aureus. Protein A merupakan komponen dinding sel
kebanyakan strain Staphylococcus aureus yang terikat pada bagian Fc molekul IgG.
Bagian Fab pada IgG yang terikat pada protein A bebas untuk berikatan dengan
antigen spesifik. Protein A merupakan reagen penting dalam imunologi dan teknologi
diagnostik laboratorium; contohnya, protein A yang berikatan dengan molekul IgG yang
diarahkan terhadap antigen bakteri tertentu akan mengaglutinasi bakteri yang
mempunyai antigen itu (koaglutinasi ) (Jawetz et.al., 1995).
Staphylococcus aureus mengandung Ag-karbohidrat (Ag-KH) dan Ag-protein.
Pada strain yang pathogen ditemukan Ag-KH tipe A. Apabila Ag-KH tipe A disuntikkan
secara intradermal pada penderita yang terinfeksi stafilokokus akan memberikan reaksi
hipersensitif tipe segera (immediate type) dalam 20-30 menit berupa wheal dan
Page 25
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 25/77
eritrema. Polisakarida murni yang telah dipisahkan dari kompleks karbohidrat-protein
tidak bersifat antigenik dan tidak patogen terhadap kelinci dan tikus putih. Kompleks
antigen protein dari Staphylococcus bila disuntikkan pada kelinci akan menghasilkan
presipitin, sedangkan protein yang dimurnikan tidak toksik terhadap kelinci bila
disuntikkan secara intradermal (Dzen dkk., 2003).
Rantz menemukan suatu antigen pada kokus Gram positif dan basil Gram
positif. Antigen Rantz ini didapat dengan cara ekstraksi dari Staphylococcus galur
tertentu menggunakan lisozim. Sensitisasi sel darah merah dengan antigen ini dapat
menimbulkan pembentukan hemaglutinin dalam serum (Dzen dkk., 2003).
2.2.4 Toksin dan Enzim
Adapun toksin yang dimiliki oleh bakteri ini antara lain :
1. Katalase, mengubah hidrogen peroksida menjadi air dan oksigen. Tes katalase
membedakan Staphylococcus yang positif dari Streptococcus yang negatif.
2. Koagulase, protein yang mirip enzim yang dapat menggumpalkan plasma yang
telah diberi oksalat atau sitrat dengan bantuan suatu faktor yang terdapat
dalam banyak serum. Faktor serum bereaksi dengan koagulase untuk
menghasilkan esterase dan menyebabkan aktivitas pembekuan dengan cara
yang mirip dengan pengaktifan protrombin menjadi trombin. Daya kerja
koagulase tidak menggunakan jalur rangkaian reaksi untuk penggumpalan
plasma dalam keadaan normal. Koagulase dapat mengendapkan fibrin pada
permukaan Staphylococcus, mungkin dapat mengubah fagositosis sel bakteri
oleh sel fagosit atau perusakannya dalam sel ini.
3. Hyaluronidase atau faktor penyebar, staphylokinase , yang mengakibatkan
fibrinolisis tetapi kerjanya jauh lebih lambat daripada streptokinase, proteinase,
lipase, dan beta laktamase.
Page 26
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 26/77
4. Eksotoksin, meliputi alfa dan beta hemolisin. Toksin alfa merupakan protein
heterogen yang dapat melisiskan eritrosit, merusak trombosit, dan mungkin
identik dengan faktor letal dan faktor dermonekrotik eksotoksin. Toksin beta
merusak sfingomyelin dan bersifat racun pada berbagai jenis sel, termasuk sel
darah merah manusia.
5. Leukosidin, dapat mematikan sel darah putih.
6. Toksin eksfoliatif menyebabkan deskuamasi pada sindroma lepuh kulit
Staphylococcus (Staphylococcal Scalded Skin Syndrome).
7. Toksin Sindroma Syok Toksik , pada manusia toksin ini menyebabkan demam,
syok dan keterlibatan multisistem, termasuk ruam kulit deskuamatif .
8. Enterotoksin, toksin ini tahan panas, dan tahan terhadap daya kerja enzim-
enzim usus dan merupakan penyebab penting terjadinya keracunan makanan
pada manusia (Jawetz et.al , 1995).
2.2.5 Manifestasi klinik Staphylococcus aureus
Infeksi lokal staphylococcus muncul sebagai suatu “pimple” , infeksi folikel
rambut, atau abses. Biasanya reaksi peradangan berlangsung hebat, terlokalisasi, dan
nyeri, yang mengalami pernanahan sentral dan sembuh dengan cepat bila nanah
dikeluarkan. Dinding fibrin dan sel-sel di sekitar inti abses cenderung mencegah
penyebaran organisme dan sebaiknya tidak dirusak oleh manipulasi atau trauma
(Jawetz et.al., 1995).
Bila Staphylococcus aureus menyebar dan terjadi bakteremia, dapat terjadi
endokarditis, osteomyelitis akut hematogen, meningitis, atau infeksi paru-paru.
Gambaran klinisnya mirip dengan gambaran klinis yang terlihat pada infeksi lain yang
melalui aliran darah. Lokalisasi sekunder dalam suatu organ atau sistem diikuti oleh
Page 27
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 27/77
tanda-tanda dan gejala disfungsi organ dan pernanahan setempat yang hebat
( Jawetz et.al., 1995).
Hampir semua kuman patogen dapat menyebabkan osteomyelitis. Namun,
yang sering dijumpai adalah Staphylococcus aureus, Streptococcus, Pneumococcus,
Gonococcus, basil coli, dan basil influenza. Penyakit ini biasanya terjadi secara akut.
Sering juga pembengkakan ini terjadi akibat patah tulang majemuk, sehingga sumsum
tulang terpapar dan berhubungan dengan lingkungan luar. Penyebab akut ini pun bisa
terjadi akibat infeksi bakteri yang meluas (bakteremia). Penyebaran kumannya lewat
darah dan dapat pula berasal dari berbagai sumber. Contoh sumber kumannya adalah
dari infeksi gigi dan luka kulit. Osteomyelitis akut yang lama terjadi dan tak sembuh-
sembuh bisa mengakibatkan kekronisan. Osteomyelitis kronis ini bisa juga terjadi
karena adanya infeksi sampingan dari penyakit yang diderita pasien, seperti
tuberkulosis dan kadang-kadang pula karena sifilis ( Republika, 2004 ).
Infeksi bakteri pada sistem saraf pusat merupakan masalah yang menantang.
Beragam bakteri dapat menimbulkan infeksi pada meningen dan parenkim otak.
Bakteri penyebab yang paling sering adalah Staphylococcus aureus, Streptococcus
pneumoniae, dan Haemophilus influenzae. Bakteri memasuki sistem saraf pusat
melalui beberapa jalan. Tempat asal masuknya bakteri yang paling sering adalah
telinga, sinus, mastoid , dan wajah. Bakteri dapat berpindah dari tempat infeksi ke
sistem saraf pusat karena banyaknya vaskularisasi pada wajah dan leher, serta
struktur anatomik dari sinus venosus dalam otak (Price et.al., 1995).
Sindrom syok toksik adalah suatu penyakit sistemik akut yang disebabkan oleh
toksin yang dihasilkan oleh Staphylococcus aureus. Pada sekitar 6% wanita ditemukan
Staphylococcus aureus dalam vaginanya, tetapi hanya 2% tipe yang dapat
memproduksi toksin. Toksin dapat mempunyai efek sistemik karena bekerja langsung
Page 28
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 28/77
merusak membran sel pada jaringan perifer. Sindrom ini erat kaitannya dengan
menstruasi, khususnya jika memakai tampon, tapi dapat juga berkaitan dengan
melahirkan dan pembedahan mayor pada abdomen. Gambaran khas adalah awitan
yang mendadak dengan panas tinggi, mialgia, mual yang hebat, muntah, diare cair,
ruam difus mirip terbakar sinar matahari, dan deskuamasi kulit yang terjadi 1-2 minggu
setelah awitan. Kemudian terjadi hipotensi dan syok ringan, sering diikuti dengan
sindrom distress pernapasan dewasa ( ARDS) (Price et.al., 1995).
2.2.6 Resistensi Staphylococcus aureus
Bakteri yang didapat di rumah sakit biasanya lebih resisten terhadap agen
antimikroba yang biasa digunakan dan sangat bervariasi dari rumah sakit satu ke yang
lain. Mengetahui tipe organisme yang mungkin sedang mengkolonisasi penderita
adalah penting untuk memberikan terapi antimikroba empiris segera pada penderita
risiko tinggi ini (Shulman et.al., 1992). Pengenalan berbagai jenis antibiotik dan juga
penggunaan yang meningkat dari berbagai jenis antibiotik tersebut diduga sebagai
penyebab munculnya resistensi mikroorganisme, terutama yang berhubungan dengan
organisme penyebab penyakit pada manusia. Kejadian umum yang sering ada
kaitannya dengan beberapa bakteri patogen yang menyerang manusia adalah
terakumulasinya kemampuan resistensi multipel mereka terhadap berbagai jenis
antibiotik yang terseleksi (Berge, 2002).
Karena sering timbul strain yang resisten terhadap obat, isolat Staphylococcus
yang penting sebaiknya diperiksa kepekaannya terhadap antimikroba untuk membantu
pemilihan obat sistemik. Resistensi terhadap obat golongan eritromisin cenderung
timbul demikian cepat sehingga obat ini sebaiknya tidak digunakan sebagai obat
tunggal dalam pengobatan infeksi menahun. Resistensi obat (terhadap penisilin,
tetrasiklin, aminoglikosida, eritromisin, dan sebagainya) yang ditentukan oleh plasmid,
Page 29
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 29/77
dapat dipindah-pindahkan di antara Staphylococcus dengan transduksi dan mungkin
dengan konjugasi (Jawetz et.al., 1995).
Di antara bakteri yang tidak membentuk spora, Staphylococcus adalah yang
paling tahan terhadap bahan-bahan kimia; sehingga galur Staphylococcus tertentu
digunakan untuk standar tes evaluasi bahan-bahan antiseptika atau antibiotika,
misalnya Staphylococcus aureus ATCC 29213. Beberapa galur dari Staphylococcus
aureus menghasilkan enzim penisilinase sehingga resisten terhadap golongan obat
penisilin, tapi biasanya masih peka terhadap golongan penisilin yang tahan terhadap
penisilinase, misalnya metisilin dan oksasilin. Namun demikian, juga telah dikenal galur
Staphylococcus yang resisten terhadap metisilin yang disebut Methicillin-Resistant
Staphylococcus Aureus (MRSA) dan Methicillin-Resistant Staphylococcus
Epidermidis (MRSE). Galur ini sering menimbulkan masalah di klinik karena sifatnya
yang resisten terhadap berbagai antibiotika golongan β-laktam, tetapi biasanya masih
peka terhadap vankomisin atau golongan aminoglikosida (Dzen dkk., 2003).
Pada infeksi klinis, strain Staphylococcus aureus yang resisten terhadap
penisilin G selalu menghasilkan penisilinase. Sekarang bakteri ini merupakan 70-90%
isolat Staphylococcus aureus dalam masyarakat Amerika Serikat. Resistensi terhadap
nafsilin tidak bergantung pada pembentukan β-laktamase, dan insidensi klinisnya
sangat bervariasi di berbagai negara dan pada waktu yang berbeda. Pengaruh seleksi
obat antimikroba yang resisten terhadap β-laktamase mungkin bukan satu-satunya
faktor yang menentukan timbulnya resistensi terhadap obat ini. Contoh, di Denmark,
pada tahun 1970 S.aureus yang resisten terhadap nafsilin ditemukan pada 40% isolat
dan hanya 10% pada tahun 1980 tanpa perubahan dalam penggunaan nafsilin atau
obat yang serupa. Di Amerika Serikat, Staphylococcus aureus yang resisten terhadap
nafsilin hanya merupakan 0,1% isolat pada tahun 1970, tetapi pada tahun 1990-an
Page 30
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 30/77
ditemukan pada 10-30% isolat yang berasal dari infeksi nosokomial pada beberapa
rumah sakit. Vankomisin masih merupakan obat paling efektif untuk Staphylococcus
(Jawetz et.al., 1995).
Staphylococcus aureus yang didapat dari isolasi klinik sebagian besar adalah
tergolong jenis methicillin-resistant , dan secara praktis adalah resisten terhadap semua
jenis antibiotik golongan β-laktam. Strain Methicillin-Resistant Staphylococcus
Aureus (MRSA) ada hubungannya dengan mecA; komponen ini dibawa oleh suatu
elemen genetik yang unik yang selalu mobile/bergerak dari Staphylococcus aureus,
adapun elemen genetik yang dimaksud tersebut adalah Staphylococcal Casette
Chromosome mec (SCCmec); komponen ini selalu terintegrasi dan tertanam di dalam
kromosom Staphylococcus aureus. Beberapa klon yang telah berhasil diidentifikasi di
antara strain MRSA merupakan klon yang dihasilkan dari proses integrasi SCCmec ke
dalam kromosom klon tersebut (Hiramatsu et.al., 2002).
Bakteremia, endokarditis, pneumonia, dan infeksi hebat lain yang disebabkan
oleh Staphylococcus aureus memerlukan terapi intravena yang lama dengan penisilin
yang resisten terhadap β-laktamase. Vankomisin sering dicadangkan untuk
Staphylococcus yang resisten terhadap nafsilin. Jika infeksi disebabkan oleh
Staphylococcus aureus yang tidak menghasilkan β-laktamase, penisilin G merupakan
obat pilihan, tetapi hanya sedikit strain Staphylococcus aureus yang peka terhadap
penisilin G (Jawetz et.al., 1995).
2.3 Bahan Antimikroba
Suatu zat antimikroba yang ideal memiliki toksisitas selektif. Istilah ini berarti
bahwa suatu obat berbahaya bagi parasit tetapi tidak membahayakan inang.
Seringkali, toksisitas selektif lebih bersifat relatif dan bukan absolut; ini berarti bahwa
Page 31
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 31/77
suatu obat yang pada konsentrasi tertentu dapat ditoleransi oleh inang, dapat merusak
parasit (Jawetz et.al., 1995).
Obat antimikroba mempunyai susunan kimiawi cara kerja yang berbeda antara
obat satu dengan obat yang lainnya. Antimikroba mengganggu bagian-bagian mikroba
yang peka, yaitu :
1. Menghambat sintesis dinding sel
2. Merusak membran sel
3. Menghambat sintesis protein
4. Menghambat sintesis asam nukleat
5. Antagonis metabolit (Dzen dkk., 2003).
Obat antimikroba sering disebut sebagai bakteriostatik atau bakterisidal .
Istilah bakteriostatik menggambarkan suatu obat yang sewaktu-waktu menghambat
pertumbuhan mikroorganisme. Keberhasilan pengobatan ini sering bergantung pada
partisipasi mekanisme pertahanan tubuh inang. Lebih jauh, efeknya dapat berubah :
apabila obat dihilangkan, organisme akan tumbuh kembali, dan infeksi atau penyakit
akan kambuh. Istilah bakterisidal digunakan untuk obat yang menyebabkan kematian
organisme. Walaupun demikian, istilah bakteriostatik dan bakterisidal adalah relatif,
bukan absolut. Kadang-kadang pengobatan jangka panjang dengan obat-obat
bakteriostatik dapat membunuh populasi tertentu, sedangkan dengan obat
bakterisidal mungkin gagal, baik in vitro maupun in vivo (Katzung, 1994).
2.3.1 Uji Kepekaan terhadap Antimikroba In Vitro
Penentuan aktifitas bahan antimikroba dapat dilakukan dengan dua metode
dasar, yaitu :
Page 32
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 32/77
2.3.1.1 Metode dilusi
Tes ini dikerjakan dengan menggunakan satu seri tabung reaksi yang diisi
media cair dan sejumlah tertentu sel mikroba yang diuji. Kemudian masing-masing
tabung diisi dengan obat yang telah diencerkan secara serial. Selanjutnya, seri tabung
diinkubasikan pada suhu 37oC selama 18-24 jam dan diamati terjadinya kekeruhan
pada tabung. Konsentrasi terendah obat pada tabung yang ditunjukkan dengan hasil
biakan yang mulai tampak jernih (tidak ada pertumbuhan mikroba) adalah KHM (Kadar
Hambat Minimal) dari obat. Selanjutnya biakan dari semua tabung yang jernih
diinokulasikan pada media agar padat, diinkubasikan dan keesokan harinya diamati
ada tidaknya koloni mikroba yang tumbuh. Konsentrasi terendah obat pada biakan
padat yang ditunjukkan dengan tidak adanya pertumbuhan koloni mikroba adalah KBM
(Kadar Bunuh Minimal) dari obat terhadap bakteri uji. Untuk menentukan KHM obat,
dapat juga dengan cara menggunakan medium agar padat yang disebut dengan
metode E test (Dzen dkk., 2003).
2.3.1.2 Metode difusi
Tes ini dikerjakan dengan menggunakan cakram kertas saring yang
mengandung bahan antimikroba yang telah ditentukan kadarnya. Cakram tersebut
kemudian ditempatkan pada media padat yang telah diberi bakteri uji. Setelah
diinkubasi, diameter area hambatan dihitung sebagai daya hambat obat terhadap
bakteri uji (Jawetz et.al, 1995; Pelezar, 1981). Area hambatan yang terbentuk
ditunjukkan sebagai daerah yang tidak memperlihatkan adanya pertumbuhan bakteri di
sekitar cakram kertas saring (Bonang, 1989).
Untuk mengevaluasi hasil uji kepekaan tersebut (apakah isolat mikroba sensitif
atau resisten terhadap obat), dapat dilakukan dua cara seperti berikut ini :
Page 33
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 33/77
A. Cara Kirby Bauer , yaitu dengan cara membandingkan diameter dari area
jernih (zona hambatan) disekitar cakram dengan tabel standar yang dibuat oleh
NCCLS (`National Committee for Clinical Laboratory Standard`). Dengan tabel
NCCLS ini dapat diketahui kriteria sensitif, sensitif intermediet dan resisten.
B. Cara Joan-Stokes, yaitu dengan cara membandingkan radius zona hambatan
yang terjadi antara bakteri kontrol yang sudah diketahui kepekaannya terhadap
obat tersebut dengan isolat bakteri yang diuji. Pada cara Joan-Stokes, prosedur
uji kepekaan untuk bakteri kontrol dan bakteri uji dilakukan bersama-sama
dalam satu piring agar (Dzen dkk., 2003). Kriteria pada metode Joan-Stokes
adalah sebagai berikut :
- Sensitif : yaitu radius zona inhibisi kuman tes lebih luas, sama dengan atau
lebih kecil tetapi tidak lebih dari 3 mm terhadap kontrol.
- Intermediet : yaitu radius zona inhibisi kuman tes lebih besar dari 3 mm, tetapi
dibanding kontrol lebih kecil lebih dari 3 mm.
- Resisten : yaitu radius zona inhibisi kurang atau sama dengan 3 mm (Dzen
dkk., 2005).
Page 34
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 34/77
BAB 3
KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN
3.1 Kerangka Konsep
Ket: Efek dan akibat bahan aktif terhadap bakteri
Menunjukkan bagian atau kandungan yang dimiliki
3.2 Hipotesis Penelitian
Ekstrak buah pepaya muda dapat menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus
Pepaya (Carica papaya)
Ekstrak buah pepaya muda
papain
Tannin
chymopapai
Staphylococcus aureus
Membran sel(mengandung
protein danlipid /fosfolipid )
Hambatan pertumbuhan bakteriMati
Dinding sel(mengandung
polisakarida/asamteikhoat )
carpain
Page 35
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 35/77
BAB 4
METODE PENELITIAN
4.1 Desain Penelitian
Pada penelitian ini penulis menggunakan metode penelitian eksperimental
dengan uji laboratorium yang bertujuan untuk mengetahui dan membuktikan efek
antimikroba dari ekstrak buah pepaya muda terhadap pertumbuhan koloni
Staphylococcus aureus. Adapun uji kepekaan antimikroba yang dipakai adalah uji
kepekaan antimikroba dengan metode dilusi, di mana tes ini dikerjakan dengan
menggunakan satu seri tabung reaksi yang diisi media cair dan sejumlah tertentu sel
mikroba yang diuji kemudian masing-masing tabung diisi dengan obat yang telah
diencerkan secara serial. Di dalam penelitian ini penulis bermaksud untuk
mempergunakan ekstrak buah pepaya muda sebagai pengganti obat antimikroba
secara terukur, maksud terukur di sini adalah ekstrak buah pepaya muda tadi akan
diencerkan secara serial kemudian akan diujicobakan dengan mempergunakan
prinsip-prinsip metode dilusi tabung. Metode dilusi tabung dengan mempergunakan
ekstrak buah pepaya muda ini meliputi 2 tahap, yaitu tahap pengujian bahan di media
cair dengan tujuan untuk mencari seberapa besar Kadar Hambat Minimum (KHM),
kemudian dilanjutkan dengan tahap penggoresan pada media NAP yang ditujukan
untuk menentukan Kadar Bunuh Minimum (KBM) dari buah pepaya tersebut dalam
kaitannya dengan penghambatan pertumbuhan koloni Staphylococcus aureus.
4.2 Waktu dan Tempat Penelitian
4.2.1 Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan antara bulan Januari-Februari 2007
Page 36
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 36/77
4.2.2 Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi dan Laboratorium
Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang.
4.3 Sampel dan Besar Sampel
Sampel yang dipergunakan di dalam penelitian ini adalah bakteri
Staphylococcus aureus yang dimiliki oleh Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran Universitas Brawijaya yang diperoleh dari pus seorang penderita
osteomyelitis yang sedang menjalani rawat inap di sebuah rumah sakit di kota Malang.
Besarnya sampel yang diperlukan untuk penelitian ini dapat dihitung dengan
menggunakan rumus:
p(n-1) ≥ 15
5(n-1) ≥ 15
5n-5 ≥ 15
5n ≥ 20
n ≥ 4
(Loekito, 1998)
Berdasarkan perhitungan di atas, maka besar sampel yang diperlukan dalam
penelitian ini paling sedikit adalah 4.
4.4 Variabel Penelitian
4.4.1 Variabel Bebas
Ekstrak buah pepaya muda yang dibuat dalam konsentrasi tertentu (1%, 2%,
3%, 4%, 5%).
4.4.2 Variabel Tergantung
1. Tingkat kekeruhan yang dihasilkan pada media cair
Page 37
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 37/77
2. Kepadatan koloni Staphylococcus aureus yang dihasilkan pada media agar
padat (NAP= Nutrient Agar Plate)
4.5 Definisi Operasional
Di dalam penelitian ini ada beberapa hal yang perlu diketahui yaitu :
1. Bahan yang dipergunakan pada penelitian ini adalah buah pepaya yang masih
mengkal atau masih mentah; biasanya buah pepaya seperti ini sering
dimanfaatkan oleh masyarakat kita untuk dibuat sayur ataupun dibuat rujak.
2. Ekstrak buah pepaya adalah bentuk sediaan bahan yang dipergunakan dalam
penelitian ini, adapun ekstrak buah pepaya dibuat dengan cara mengeringkan
buah pepaya di dalam oven dengan rentang suhu antara 50o-60oC selama lebih
kurang 3 hari atau dikeringkan di bawah terik sinar matahari selama lebih
kurang 5 hari, kemudian buah pepaya tadi dihancurkan dengan
mempergunakan blender bumbu; buah pepaya yang telah hancur tadi akan
diproses bersama dengan etanol 70% sebagai pelarutnya dan kemudian akan
diuapkan atau dievaporasi secara bertahap sehingga akan terbentuk apa yang
dinamakan dengan ekstrak buah pepaya.
3. Konsentrasi ekstrak buah pepaya adalah kadar buah pepaya pasca pembuatan
ekstrak buah pepaya yang diharapkan dan siap digunakan di dalam penelitian
ini.
4. Pada penelitian ini besar sampel yang dipergunakan adalah 4; ke-4 sampel tadi
berupa media kultur yang berisi koloni bakteri Staphylococcus aureus.
5. Staphylococcus aureus yang dipergunakan di dalam penelitian ini berasal dari
pus seorang penderita osteomyelitis yang sedang menjalani rawat inap di
sebuah rumah sakit di kota Malang.
Page 38
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 38/77
6. Konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya yang dipergunakan di dalam penelitian
ini adalah disesuaikan dengan besar sampel yang ada.
7. Konsentrasi awal larutan bakteri uji Staphylococcus aureus yang dipergunakan
adalah 1 x 108 bakteri/ml sesuai dengan standar Mc Farland 0,5 yang kemudian
akan diencerkan secara serial di dalam tabung yang telah diisi dengan 9 ml MH
Broth sehingga akan diperoleh konsentrasi akhir larutan bakteri uji, yaitu (1-1,5)
x 106 bakteri/ml dan konsentrasi akhir inilah yang benar-benar siap
dipergunakan untuk penelitian.
4.6 Alat dan Bahan
4.6.1 Alat
1. Gelas objek.
2. Ose.
3. Bunsen.
4. Tabung reaksi kosong steril.
5. Oven dengan suhu antara 50o-60oC
6. Blender bumbu.
7. Evaporator.
8. Vorteks.
9. Inkubator dengan suhu 37oC.
10. Penggaris.
11. Tabel NCCLS (National Committee Centre for Laboratory Standart ).
12. Korek api.
13. Plate kosong steril.
14. Mikroskop.
Page 39
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 39/77
15. Mikropipet dan pipet tip.
4.6.2 Bahan
1. Buah pepaya yang masih muda 2 kg.
2. Alkohol 95%.
3. Etanol 70%.
4. NAP (Nutrient Agar Plate).
5. Larutan bakterisidal standar Mc Farland 0,5 .
6. Muller-Hinton Broth
7. Bahan pewarna Gram:
• Kristal Violet.
• Lugol
• Safranin.
8. Aquades.
9. Minyak Emersi.
10. Kertas penghisap.
11. Kertas Whartman no.1.
12. Kapas.
13. Larutan H2O2 3%.
4.7 Prosedur Penelitian
4.7.1 Pembuatan Bahan Uji
Di dalam penelitian ini dipergunakan bahan uji berupa ekstrak buah pepaya
muda yang dibuat dengan cara sebagai berikut:
1. Buah pepaya yang masih mentah dengan berat 2 kg dikupas kulitnya kemudian
biji-biji yang ada di dalam buah pepaya dibersihkan.
Page 40
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 40/77
2. Bersihkan buah pepaya dengan cara membasuhnya pada air yang mengalir
kemudian segera bilas buah pepaya dengan alkohol 95% agar lebih steril.
3. Proses selanjutnya adalah memotong atau mengiris buah pepaya; usahakan
agar buah pepaya dapat diiris tipis-tipis untuk mempercepat proses
pengeringan.
4. Buah pepaya tadi lalu dikeringkan dengan cara dimasukkan ke dalam oven
dengan temperatur antara 50o-60oC selama lebih kurang 3 hari atau dikeringkan
di bawah terik sinar matahari selama lebih kurang 5 hari.
5. Setelah melalui proses pengeringan buah pepaya tadi kemudian dihancurkan
dengan mempergunakan blender bumbu sehingga akan terbentuk bubuk buah
pepaya muda.
6. Bubuk buah pepaya muda tadi kemudian dicampur dengan etanol 70%.
7. Untuk mendapatkan bentuk sediaan bahan yang diharapkan maka dilakukan
proses pelarutan ulangan dengan etanol 70% sebanyak 2 kali dalam jangka
waktu lebih kurang satu minggu.
8. Setelah dilakukan proses pelarutan ulangan dengan etanol 70% maka bubuk
buah pepaya muda tadi kemudian diuapkan secara bertahap di dalam
evaporator; hasil akhir dari proses evaporasi ini adalah terbentuknya ekstrak
buah pepaya muda dengan konsistensi menyerupai pasta dan berwarna coklat
kehitaman serta berbau agak tajam.
9. Apabila tidak sedang dipergunakan dalam jangka waktu yang cukup lama maka
ekstrak buah pepaya tadi dapat disimpan di dalam suatu botol tertutup dan
kemudian didiamkan atau disimpan di dalam kulkas atau refrigerator.
4.7.2 Preparasi Bakteri
4.7.2.1 Pewarnaan Gram
Page 41
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 41/77
Prosedur pengecatan Gram:
1. Buatlah sediaan apusan kuman pada gelas obyek
2. Tuangi sediaan dengan Kristal Violet selama 1 menit. Buang sisa Kristal Violet
dan bilas dengan air. Kristal Violet di sini berfungsi sebagai bahan warna dasar.
3. Tuangi sediaan dengan Lugol selama 1 menit. Buang sisa Lugol dan bilas
dengan air.
4. Tuangi sediaan dengan Alkohol 96% selama 5-10 detik atau sampai warna cat
luntur. Buang sisa Alkohol dan bilas dengan air.
5. Tuangi sediaan dengan Safranin selama 0,5 menit. Buang sisa Safranin dan
bilas dengan air. Adapun Safranin di sini berfungsi sebagai bahan warna
pembanding.
6. Keringkan sediaan menggunakan kertas penghisap.
7. Lihat di bawah mikroskop dengan lensa objektif perbesaran 100x.
4.7.2.2 Tes Koagulase
4.7.2.2.1 Dengan gelas objek (slide coagulase test ) :
1. Ambillah gelas objek dan bersihkan.
2. Buatlah suspensi kuman pada gelas objek tersebut:
• 1 tetes larutan saline / aquades steril
• Tambahkan 1 koloni kuman dari biakan padat (NAP)
3. Tambahkan dengan 1 tetes plasma darah dan campurkan dengan cara
menggoyang gelas objek arah melingkar selama 5-10 detik.
4.7.2.2.2 Dengan tabung (tube coagulase test ) :
1. Ambillah tabung reaksi yang kosong.
2. Masukkan ke dalam tabung tersebut plasma darah (0,5 ml).
3. Tambahkan perbenihan cair kuman (0,1 ml).
Page 42
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 42/77
4. Eramkan pada suhu 37oC, diamati setiap 0,5 jam selama 4 jam. Bila belum
terjadi reaksi penggumpalan, dieramkan lagi selama 24 jam.
4.7.2.3 Tes Katalase
1. Ambillah sisa perbenihan cair yang sebagian telah dipergunakan untuk tes
koagulase pada tabung.
2. Tetesi dengan larutan H2O2 3%.
4.7.2.4 Pembuatan Larutan Bakteri Uji
1. Sediakan 1 ml bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 1 x 108
bakteri/ml sesuai dengan standar Mc Farland 0,5.
2. Ambil 1 ml larutan dari konsentrasi bakteri (1-1,5) x 108 bakteri/ml tersebut, dan
masukkan ke dalam tabung yang telah diisi 9 ml MH Boith. Konsentrasi bakteri
sekarang menjadi (1-1,5) x 107 bakteri/ml.
3. Ambil lagi 1 ml larutan dari konsentrasi bakteri (1-1,5) x 107 bakteri/ml tersebut,
dan masukkan ke dalam tabung yang telah diisi 9 ml MH Broth steril.
Konsentrasi bakteri sekarang menjadi (1-1,5) x 106 bakteri/ml. Bakteri siap
digunakan untuk penelitian.
4.7.3 Pengujian Efek Antimikroba
1. Sediakan tabung kosong dan steril berjumlah 7 buah.
2. Sediakan pula aquades dan larutan bakteri uji.
3. Tandai dan buat larutan untuk pengujian efek antimikroba pada tabung 2
sampai dengan tabung 6; adapun larutan antimikroba tersebut dibuat dengan
cara mencampurkan antara ekstrak buah pepaya muda, aquades dan larutan
bakteri uji dengan perbandingan sebagai berikut:
Page 43
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 43/77
• Tabung 2: konsentrasi awal: 10%, ekstrak buah pepaya muda (0,1 ml) + 0,9
ml aquades; konsentrasi akhir: 10% ekstrak buah pepaya muda + 1 ml
larutan bakteri uji (106 CFU/ml) = 5%
• Tabung 3: konsentrasi awal: 8%, ekstrak buah pepaya muda (0,08 ml) +
0,92 ml aquades; konsentrasi akhir: 8% ekstrak buah pepaya muda + 1 ml
larutan bakteri uji (106 CFU/ml) = 4%
• Tabung 4: konsentrasi awal: 6%, ekstrak buah pepaya muda (0,06 ml) +
0,94 ml aquades, konsentrasi akhir: 6% ekstrak buah pepaya muda + 1 ml
larutan bakteri uji (106 CFU/ml) = 3%
• Tabung 5: konsentrasi awal: 4%, ekstrak buah pepaya muda (0,04 ml) +
0,96 ml aquades, konsentrasi akhir: 4% ekstrak buah pepaya muda + 1 ml
larutan bakteri uji (106 CFU/ml) = 2%
• Tabung 6: konsentrasi awal: 2%, ekstrak buah pepaya muda (0,02 ml) +
0,98 ml aquades, konsentrasi akhir: 2% ekstrak buah pepaya muda + 1 ml
larutan bakteri uji (106 CFU/ml) = 1%
4. Tandai dan buat pula larutan kontrol positif pada tabung 7 dan larutan kontrol
negatif pada tabung 1; adapun kontrol positif berasal dari larutan bakteri uji
yang telah distandardisasi dengan standar Mc Farland 0,5 sebanyak 2 ml,
sedangkan kontrol negatif dibuat dengan cara mencampurkan antara ekstrak
buah pepaya muda sebanyak 1 ml (100%) dengan aquades sebanyak 1 ml
(konsentrasi akhir = 50%).
5. Semua tabung di atas, baik tabung yang dipergunakan untuk pengujian efek
antimikroba maupun tabung yang dipergunakan untuk kontrol positif dan kontrol
negatif, masing-masing dicampur hingga rata.
Page 44
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 44/77
6. Ambil dan tanamlah isi tabung kontrol positif pada medium agar padat (NAP)
sebanyak 0,1 ml (satu mata ose) sebagai Original Inoculum (OI).
7. Semua tabung dan plate yang berisi OI dieramkan pada suhu 37oC selama 18-
24 jam.
8. Keesokan harinya perhatikan dan catat pada tabung nomor berapa tampak
mulai terjadi kekeruhan. Kadar terendah pada tabung yang menunjukkan tidak
ada kekeruhan merupakan Kadar Hambat Minimum (KHM).
9. Tanamlah semua isi tabung mulai dari tabung 2 sampai dengan tabung 7
sebanyak 0,1 ml (satu mata ose) pada NAP yang telah ditandai untuk tabung 2
sampai dengan tabung 7. Eramkan semua NAP pada suhu 37oC selama 18-24
jam.
10. Keesokan harinya amati ada tidaknya pertumbuhan koloni kuman pada NAP
ke-2 sampai dengan NAP ke-6. Konsentrasi terendah di mana pada medium
agar padat tidak menunjukkan adanya pertumbuhan koloni merupakan Kadar
Bunuh Minimum (KBM).
4.7.4 Penentuan Efektivitas Bahan Uji
1. Bandingkan tabung reaksi yang berisi bahan uji dengan kontrol positif dan
kontrol negatif.
2. Bandingkan semua media NAP yang telah digoreskan bahan dari larutan uji.
4.8 Analisis Data
Di dalam penelitian ini penulis mempergunakan teknik analisis data secara
statistik. Beberapa uji statistik yang dipergunakan antara lain Uji Oneway ANOVA, Uji
Korelasi Pearson, dan Uji Regresi Linear . Adapun program komputer yang dijalankan
untuk dapat mengerjakan semua teknik analisis data tersebut adalah SPSS for
Page 45
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 45/77
Windows ver 13.0 . Penulis mempergunakan teknik analisis data secara statistik
karena penulis ingin berusaha tetap berorientasi pada tujuan yang hendak dicapai dan
hipotesis yang hendak diuji.
Sebelum dapat mengerjakan Uji Oneway ANOVA terlebih dahulu data yang
telah didapatkan dari hasil penelitian dibuat dalam bentuk tabel dan kemudian diuji
normalitas dan sebaran datanya apakah data-data tersebut bervariasi cukup tinggi
atau tidak dengan mempergunakan Tests of Normality by Shapiro-Wilk and
Kolmogorov-Smirnov . Dengan mempergunakan derajat kepercayaan 95% (α = 0,05)
dan nilai p apabila ternyata data yang dipergunakan memang normal dan sebaran
datanya tidak begitu bervariasi atau masih dalam batas normal (p>0,05) maka langkah
selanjutnya adalah menguji apakah data tersebut homogen atau tidak, apakah data
tersebut memiliki perbedaan makna yang cukup signifikan atau tidak dengan Uji
Oneway ANOVA. Adapun syarat keberhasilan Uji Oneway ANOVA adalah sebaran
datanya harus normal dan homogen yang ditunjukkan oleh nilai p>0,05. Apabila data
tersebut kurang homogen (p<0,05) maka diusahakan sedapat mungkin untuk dibuat
homogen dengan melakukan transformasi data. Apabila data hasil transformasi
tersebut homogen (p>0,05) maka analisis data dapat diteruskan dengan Uji Korelasi
Pearson dan Uji Regresi Linear . Uji Korelasi Pearson bertujuan untuk membuktikan
derajat keeratan hubungan antara dosis perlakuan ekstrak buah pepaya muda dengan
jumlah koloni Staphylococcus aureus yang terbentuk sebagai hasil dari perlakuan
dosis ekstrak buah pepaya muda itu sendiri, sedangkan Uji Regresi Linear bertujuan
untuk mencari seberapa besar hubungan antara dosis perlakuan ekstrak buah pepaya
muda dengan jumlah koloni Staphylococcus aureus yang terbentuk sebagai hasil dari
perlakuan dosis ekstrak buah pepaya muda itu sendiri.
Page 46
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 46/77
BAB 5
HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA
5.1 Hasil Penelitian
5.1.1 Identifikasi Staphylococcus aureus
Sebelum penelitian yang sesungguhnya dimulai terlebih dahulu dilakukan
proses identifikasi terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan cara melakukan
sejumlah tes atau reaksi biokimiawi dengan mempergunakan alat dan bahan yang
dimiliki oleh Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.
Sebagai langkah awal di dalam proses identifikasi Staphylococcus aureus adalah
dengan melakukan pengecatan Gram terhadap isolat bakteri yang telah ditumbuhkan
sebelumnya pada Medium Nutrient Agar Plate (NAP) dan hasil pengecatan tadi diamati
di bawah mikroskop dengan perbesaran total 400x.
Page 47
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 47/77
Gambar 5.1 Koloni Staphylococcus aureus yang diamati di bawahmikroskop dengan perbesaran total 400x
Langkah berikutnya adalah dengan menguji Staphylococcus aureus dengan
sejumlah tes atau reaksi biokimiawi antara lain Tes Katalase dan Tes Koagulase. Tes-
tes ini perlu dilakukan untuk menghindari kontaminasi dan kesalahan pengambilan
isolat bakteri yang mungkin saja terjadi sebelum penelitian ini dilakukan serta untuk
membedakan antara Staphylococcus aureus dengan sejumlah bakteri coccus Gram
positif yang lainnya, terutama Streptococcus sp., mengingat Staphylococcus aureus
dan Streptococcus sp. seringkali terdapat bersamaan sebagai satu isolat bakteri. Uji
Koagulase yang dipergunakan adalah Uji Koagulase Tabung dengan mempergunakan
plasma darah kelinci sedangkan Uji Katalase dengan mempergunakan gelas objek
(Dzen dkk., 2003). Uji Koagulase Tabung akan bernilai positif apabila terbentuk
gumpalan-gumpalan dalam tabung reaksi dalam waktu 1-4 jam sedangkan Uji
Katalase akan bernilai positif apabila terbentuk gelembung udara pada saat bakteri
ditetesi dengan larutan H2O2 di atas gelas objek (Jawetz et.al ., 1995). Adapun hasil
yang didapatkan adalah sebagai berikut :
Page 48
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 48/77
Tabel 5.1 Tabel Hasil Uji Katalase dan Koagulase
Gambar 5.2 Hasil Uji Koagulase dan Uji Katalase
Ket : (I) Tabung dengan hasil Uji Koagulase positif, (II) Tabung dengan hasil Uji Koagulase negatif, (III) Tabung dengan hasil Uji Katalase positif
Dari hasil di atas tampak bahwa bakteri yang diuji memang benar
Staphylococcus aureus. Hal ini ditunjukkan dengan bentuk koloni bakteri yang
berbentuk seperti buah anggur dan menunjukkan sifat pengecatan Gram positif
Jenis Bakteri Jenis Tes
TesKatalase
TesKoagulase
Staphylococcus aureus (+) (+)
Streptococcus sp. (-) (-)
I II III
Page 49
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 49/77
dengan pengamatan di bawah mikroskop dengan perbesaran 400x serta dengan hasil
Uji Koagulase Tabung dan Uji Katalase yang positif.
5.1.2 Hasil Pengamatan Uji Dilusi Tabung
Pada penelitian ini dipergunakan Uji Dilusi Tabung secara bertingkat atau
serial, yaitu dengan mencampurkan antara ekstrak buah pepaya muda, aquades, dan
larutan bakteri uji yang sebelumnya telah distandardisasi dengan skala Mc.Farland 0,5
dalam berbagai kombinasi. Tabung-tabung tadi kemudian diinkubasi selama 18-24 jam
untuk selanjutnya dilihat tingkat kekeruhan yang terjadi pada tabung-tabung tersebut
keesokan harinya. Kadar terendah ekstrak buah pepaya muda pada tabung di mana
tidak terdapat kekeruhan diinterpretasikan sebagai Kadar Hambat Minimum (KHM).
Pada tahap ini juga dilakukan penanaman pada NAP dari tabung yang berisi Kontrol
Kuman/Kontrol Positif, adapun tujuannya adalah untuk mencari Original Inokulum
(OI) yang secara langsung berhubungan dengan jumlah atau konsentrasi kuman yang
dapat dijadikan patokan nantinya untuk mencari Kadar Bunuh Minimum (KBM).
Gambar 5.3 Berbagai tingkat kekeruhan yang terlihat pada Uji DilusiTabung
Ket : a. Tabung 1 = KB ( Kontrol Bahan/Kontrol Negatif) = 1 ml (100%) ekstrakbuah pepaya muda + 1 ml aquades = 50% (konsentrasiakhir)
Page 50
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 50/77
b. Tabung 2 = 0,1 ml (10%) ekstrak buah pepaya muda + 0,9 ml aquades+ 1 ml larutan bakteri uji = 5% (konsentrasi akhir)
c. Tabung 3 = 0,08 ml (8%) ekstrak buah pepaya muda + 0,92 mlaquades + 1 ml larutan bakteri uji = 4% (konsentrasi akhir)
d. Tabung 4 = 0,06 ml (6%) ekstrak buah pepaya muda + 0,94 mlaquades + 1 ml larutan bakteri uji = 3% (konsentrasi akhir)
e. Tabung 5 = 0,04 ml (4%) ekstrak buah pepaya muda + 0,96 mlaquades + 1 ml larutan bakteri uji = 2% (konsentrasi akhir)
f. Tabung 6 = 0,02 ml (2%) ekstrak buah pepaya muda + 0,98 mlaquades + 1 ml larutan bakteri uji = 1% (konsentrasi akhir)
g. Tabung 7 = KK (Kontrol Kuman/Kontrol Positif) = 2 ml larutan bakteriuji (106 CFU/ml)
Dari hasil di atas terlihat bahwa kekeruhan tabung mulai terdapat pada tabung
ke-5 atau tabung dengan konsentrasi 2% sedangkan kekeruhan tabung yang lain tidak
tampak dengan jelas pada tabung ke-4 atau tabung dengan konsentrasi 3%
(ditunjukkan dengan tanda panah berwarna ungu).
5.1.3 Hasil Pengamatan pada Medium Nutrient Agar Plate (NAP)
5.1.3.1 Hasil Pengamatan Kepadatan Koloni Staphylococcus
aureus pada Medium Nutrient Agar Plate (NAP)
Untuk dapat lebih mengetahui keadaan dan kepadatan koloni Staphylococcus
aureus yang sesungguhnya pada medium NAP pada berbagai konsentrasi ekstrak
buah pepaya muda dapat dilihat pada gambar berikut :
5 % 4% 3%
C 4 C 5
C 2 C 31C
Page 51
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 51/77
Gambar 5.4 Berbagai tingkat kepadatan koloni pada NAP
Ket : A. Kontrol Bahan (KB)B. Kontrol Kuman (KK), berfungsi sebagai pembanding atau
Original Inoculum (OI)C.Tulisan angka pada NAP 1-5 (dinyatakan dalam persen)
menunjukkan konsentrasi akhir dari ekstrak buah pepaya muda
Dari gambar di atas tampak bahwa terdapat perbedaan jumlah dan kepadatan
koloni Staphylococcus aureus pada NAP pada berbagai perlakuan konsentrasi ekstrak
buah pepaya muda yang telah dilakukan pada Uji Dilusi Tabung satu hari sebelumnya.
Kepadatan koloni tertinggi terdapat pada plate dengan konsentrasi akhir ekstrak buah
pepaya muda 1% sedangkan kepadatan koloni terendah terdapat pada plate dengan
konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda 5%. Syarat suatu konsentrasi bahan uji
antimikroba disebut sebagai KBM (Kadar Bunuh Minimum) adalah apabila hasil
jumlah koloni yang didapatkan pada konsentrasi tersebut pada setiap kali pengulangan
penelitian yang telah ditentukan adalah <0,1% apabila dibandingkan dengan jumlah
koloni pada OI (Original Inoculum) (Finegold et.al., 1986).
5.1.3.2 Hasil Penghitungan Koloni Staphylococcus aureus pada Medium
1%2%
A B
Page 52
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 52/77
Nutrient Agar Plate (NAP)
Dari Uji Dilusi Tabung tahap selanjutnya adalah penggoresan pada medium
NAP dari masing-masing tabung. Semua NAP yang telah ditanam tadi kemudian
diinkubasikan selama 18-24 jam. Keesokan harinya NAP-NAP tersebut akan ditumbuhi
koloni di mana koloni-koloni tersebut selanjutnya akan dihitung dengan
mempergunakan Colony Counter dan akan dibandingkan dengan Original Inoculum
(OI) yang telah dihitung dengan alat yang sama satu hari sebelumnya. Adapun hasil
dari penghitungan koloni tersebut dapat dilihat pada tabel berikut :
Tabel 5.2 Jumlah Koloni Staphylococcus aureus pada Pemberian BerbagaiKonsentrasi Ekstrak Buah Pepaya Muda
Ket : a. N = Jumlah Pengulangan
b. OI = NAP yang berfungsi sebagai Original
Inoculum (OI), yaitu NAP yang telah ditanam
dari tabung reaksi sebelumnya yang terdiri dari 2 ml larutan bakteri
uji
c. KB = NAP yang berfungsi sebagai Kontrol Bahan/Kontrol
Na Konsentrasi Ekstrak Buah Pepaya Muda
OIb 1%d 2%d 3%d 4%d 5%d KBc
I 284 406 300 268 73 24 0
II 543 616 571 156 100 31 0
III 353 437 377 207 66 0 0
IV 235 588 506 484 0 0 0
Rata-
rata
353,75 511,75 438,5 278,75 59,75 13,75 0
SD 135,1329592 105,5979009 122,5792261 144,289928 42,44506253
16,1322658 0
Page 53
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 53/77
Negatif, yaitu NAP yang telah ditanam dari tabung reaksi
sebelumnya yang terdiri dari kombinasi antara ekstrak
buah pepaya muda 100% (1 ml) dan aquades 1 ml
d. NAP dalam berbagai kombinasi konsentrasi ekstrak buah pepaya
muda yang telah ditanam dari tabung reaksi sebelumnya yang juga
berisi kombinasi antara ekstrak buah pepaya muda, larutan bakteri uji
dan aquades sebagai pelarut
Apabila data dari bentuk tabel di atas tadi dikonversikan atau ditransformasikan
menjadi bentuk grafik maka akan tampak tampilan seperti berikut :
0
100
200
300
400
500
600
Jumlah Koloni
S. aureus
OI 1% 2% 3% 4% 5% KB
Konsentrasi Ekstrak Buah Pepaya Muda
Rata-rata
Gambar 5.5 Jumlah Koloni Staphylococcus aureus Setelah PerlakuanBerbagai Konsentrasi Ekstrak Buah Pepaya Muda
5.2 Analisis Data
Dari hasil penghitungan koloni pada tabel 5.2 selanjutnya akan dianalisis
dengan uji statistik untuk menentukan apakah data hasil penelitian yang didapatkan
oleh penulis memang benar-benar dapat dipergunakan untuk mencari hubungan
antara peningkatan dosis ekstrak buah pepaya muda dengan penurunan jumlah koloni
Page 54
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 54/77
Staphylococcus aureus. Program statistik yang dipergunakan adalah SPSS for
Windows ver 13.0 . Untuk menentukan apakah data hasil penelitian di atas
mempunyai nilai distribusi yang normal atau tidak maka uji statistik yang pertama
dipakai adalah Tests of Normality by Shapiro-Wilk and Kolmogorov-Smirnov . Dari hasil
Uji Normalitas (lampiran 4) tampak bahwa nilai Sig. pada kolom Kolmogorov-Smirnov
tidak terisi sedangkan pada kolom Shapiro-Wilk semua kelompok data dosis memiliki
nilai Sig.>0,05 (p>0,05) yang berarti bahwa data yang dipergunakan di dalam
penelitian ini memiliki nilai distribusi data yang normal sehingga memenuhi syarat
untuk dilakukan Uji Oneway-ANOVA dengan interval kepercayaan 95%.
Uji Oneway-ANOVA dipergunakan untuk mengetahui apakah rata-rata dua atau
lebih kelompok variabel dependent, dalam hal ini jumlah koloni yang terbentuk sebagai
akibat perlakuan berbagai dosis ekstrak buah pepaya muda, berbeda secara nyata
atau tidak. Analisis ini memiliki asumsi bahwa kelompok data yang dianalisis memiliki
varian yang sama atau nilai distribusi data yang normal. Hasil yang didapatkan pada
Uji Oneway-ANOVA berdasarkan tabel 5.2 di atas (lampiran 5) adalah bahwa nilai
Sig.= 0,081 (p>0,05) yang berarti bahwa data jumlah koloni Staphylococcus aureus
memiliki varian antarkelompok yang homogen dan sama. Nilai Sig.= 0,000 (p<0,05)
pada tabel ANOVA menunjukkan bahwa didapatkan pengaruh perlakuan dari berbagai
dosis atau konsentrasi ekstrak buah pepaya muda terhadap jumlah koloni
Staphylococcus aureus, nilai Sig.=0,000 (p<0,05) juga menunjukkan bahwa ke-5
kelompok data dosis, baik antar sesama dosis di dalam satu pengulangan maupun
antara dosis pada pengulangan yang satu dengan dosis pada pengulangan yang
lainnya, memiliki rata-rata nilai yang berbeda atau dengan kata lain paling tidak
terdapat dua kelompok data dosis yang memiliki perbedaan yang cukup signifikan atau
bermakna. Berdasarkan hasil Post Hoc Test Tukey pada tabel Multiple Comparison
Page 55
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 55/77
tampak bahwa dari konsentrasi dosis 0,02 ml, 0,04 ml, dan 0,06 ml tidak ada
perbedaan yang cukup bermakna atau signifikan pada jumlah koloni kuman apabila
dibandingkan terhadap jumlah koloni yang ada pada OI. Pada tabel perbandingan
antar dosis dan antar pengulangan pada tabel Multiple Comparison didapatkan pula
perbedaan yang cukup signifikan dari konsentrasi dosis 0,08 ml dan 0,10 ml
(ditunjukkan dengan tanda asterik) pada jumlah koloni kuman apabila dibandingkan
terhadap jumlah koloni yang ada pada OI.
Untuk mencari derajat keeratan hubungan dan arah hubungan antara dosis
ekstrak buah pepaya muda dengan jumlah koloni Staphylococcus aureus digunakan
Uji Korelasi Pearson dengan metode analisis korelasi bivariat. Berdasarkan tabel 5.2
dan dari hasil Uji Korelasi Pearson (lampiran 6) didapatkan nilai korelasi Pearson
sebesar -0,763 dengan arah hubungan antarvariabel yang negatif. Tanda negatif
menunjukkan bahwa arah hubungan antara dosis ekstrak buah pepaya muda dengan
jumlah koloni Staphylococcus aureus bersifat terbalik atau berlawanan yang berarti
bahwa peningkatan konsentrasi ekstrak buah pepaya muda akan diikuti dengan
penurunan jumlah koloni Staphylococcus aureus.
Untuk mencari seberapa besar hubungan antara dosis perlakuan ekstrak buah
pepaya muda dengan jumlah koloni Staphylococcus aureus yang terbentuk sebagai
hasil dari perlakuan dosis ekstrak buah pepaya muda itu sendiri dipergunakan Uji
Regresi Linear . Hasil Uji Regresi Linear seluruhnya dipaparkan pada lampiran 7. Tabel
Variabels Entered Removed menunjukkan metode regresi yang dipilih, yaitu Enter di
mana metode Enter memasukkan semua variabel independent, dalam hal ini dosis
ekstrak buah pepaya muda, sekaligus untuk dianalisis. Tabel Uji ANOVA memaparkan
uji kelinearan di mana pada Uji ANOVA didapatkan F hitung (30,654) > F tabel (1; 22; 0,05)
dan nilai Sig.= 0,000 (p<0,05) sehingga model linear antara variabel dosis ekstrak
Page 56
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 56/77
buah pepaya muda dengan variabel jumlah koloni Staphylococcus aureus memiliki
hubungan yang signifikan yang dapat diproyeksikan dalam bentuk grafik. Std. Error of
the Estimate pada Tabel Model Summary mengukur dispersi titik-titik pasangan X dan
Y dari garis duga regresi dengan nilai koefisien korelasi (R) sebesar 0,763. Dari hasil
Tabel Coefficients didapatkan persamaan linear : Y = 505,738-4593,929X (pada
lampiran 7).
BAB 6
PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui sampai sejauh mana
efektifitas ekstrak buah pepaya muda sebagai antimikroba terhadap Staphylococcus
aureus dengan melakukan percobaan secara in vitro. Percobaan tersebut
mempergunakan ekstrak buah pepaya muda yang dibuat dalam konsentrasi tertentu
yang diencerkan dengan aquades dan konsentrasi larutan bakteri uji yang telah
distandardisasi dengan skala Mc.Farland 0,5 , yaitu 1%, 2%, 3%, 4%, dan 5%. Pada
penelitian ini digunakan kontrol positif atau kontrol kuman yang terdiri dari larutan
bakteri uji sebanyak 2 ml (106 CFU/ml) tanpa penambahan ekstrak buah pepaya muda
dan aquades sebagai pelarut ekstrak serta kontrol negatif atau kontrol bahan yang
terdiri dari ekstrak buah pepaya muda sebanyak 1 ml (100%) dan aquades sebanyak 1
ml. Adapun bakteri Staphylococcus aureus yang dipergunakan berasal dari isolat
perbenihan bakteri yang dimiliki oleh Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya yang berasal dari pus seorang penderita osteomyelitis yang
Page 57
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 57/77
sedang menjalani rawat inap di sebuah rumah sakit di kota Malang. Percobaan
tersebut dilakukan secara serial sebanyak 4 kali pengulangan di mana pada masing-
masing pengulangan terdapat 2 tahap percobaan.
Sebagai tahap pertama adalah menguji bahan di media cair dengan uji dilusi
tabung untuk menentukan Kadar Hambat Minimum (KHM) kemudian dilanjutkan
dengan tahap penggoresan pada media NAP untuk menentukan Kadar Bunuh
Minimum (KBM). Pada penelitian ini digunakan kontrol bahan atau kontrol negatif dan
kontrol kuman atau kontrol positif baik pada uji dilusi
tabung maupun pada pengamatan jumlah koloni bakteri pada medium NAP. Adapun
tujuan digunakannya kontrol bahan dan kontrol kuman ini adalah sebagai alat
pembanding perlakuan bahan uji terhadap bakteri uji. Jika konsentrasi perlakuan
keadaannya sama dengan kontrol bahan, maka dapat dikatakan bahwa pada
konsentrasi tersebut mempunyai efek menghambat pertumbuhan atau membunuh
bakteri uji, sebaliknya jika konsentrasi perlakuan keadaannya tidak sama dengan
kontrol bahan (sama dengan kontrol kuman) maka dapat dikatakan bahwa konsentrasi
tersebut tidak mempunyai efek menghambat atau membunuh bakteri uji.
Buah pepaya mempunyai berbagai macam kandungan zat aktif yang
menjadikannya sangat potensial sebagai antimikroba terhadap beberapa jenis kuman,
parasit, cacing, dan virus. Kemampuan buah pepaya yang masih muda atau masih
mentah dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus lebih
disebabkan karena adanya empat kandungan zat aktif yang kesemuanya didapatkan di
dalam buah pepaya yang masih muda tersebut, diantaranya adalah papain,
chymopapain, tannin, dan carpaine. Selain mempunyai aktivitas sebagai antimikroba,
Page 58
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 58/77
papain dan chymopapain juga memiliki fungsi untuk memfasilitasi kerja enzim-enzim
pencernaan agar dapat bekerja dengan lebih kuat dan lebih cepat. Kedua enzim
tersebut dapat bekerja dalam rentang waktu yang lebih lama apabila dibandingkan
dengan obat-obatan antimikroba konvensional karena kedua enzim tersebut tidak
mudah dirusak oleh asam lambung bahkan mempunyai rentang kestabilan yang cukup
tinggi apabila berada di dalam suatu lingkungan yang memiliki tingkat keasaman yang
tinggi (pH 1,0-1,8) seperti misalnya di dalam lambung manusia (Quisumbing, 1951).
Adapun tannin merupakan salah satu senyawa kimiawi yang termasuk dalam golongan
polifenol yang diduga dapat mengikat salah satu protein yang dimiliki oleh bakteri yaitu
adhesin dan apabila hal ini terjadi maka dapat merusak ketersediaan reseptor pada
permukaan sel bakteri. Tannin telah dibuktikan dapat membentuk kompleks senyawa
yang irreversibel dengan prolin, suatu protein lengkap, yang mana ikatan ini
mempunyai efek penghambatan sintesis protein untuk pembentukan dinding sel.
Beberapa literatur juga telah menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri pada beberapa
tanaman obat juga diperankan oleh tannin (Agnol et.al.,2003). Carpaine juga ampuh
menghambat kinerja beberapa mikroorganisme. Carpaine mencerna protein
mikroorganisme dan mengubahnya menjadi senyawa turunan bernama pepton
(Fitriani, 2006).
Metode yang digunakan untuk mendapatkan kandungan aktif enzim proteolitik
dari pepaya, termasuk papain, pada penelitian ini dilakukan berdasarkan pada data
yang telah diuraikan oleh Fitriani (2006) tentang cara ekstraksi papain dari buah
pepaya muda hanya pada penelitian kali ini penulis tidak mempergunakan getah buah
pepaya muda akan tetapi dengan mempergunakan langsung buah pepaya muda itu
sendiri. Menurut Morton (1987) papain sesungguhnya tidak terbatas hanya terdapat
pada kulit buah pepaya yang masih muda saja akan tetapi juga terdapat pada buah
Page 59
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 59/77
pepaya yang masih muda itu sendiri (National Plant Database, 2005). Menurut
Quisumbing (1951) buah pepaya yang masih hijau atau dalam hal ini masih mentah
mengandung dua enzim proteolitik utama yang seringkali ditemukan pada tanaman
pepaya yaitu papain dan chymopapain. Untuk mendapatkan kandungan aktif kedua zat
di atas penulis mencoba untuk mengeringkan dan membuat buah pepaya yang masih
muda tersebut ke dalam bentuk serbuk atau bubuk kering kemudian dilarutkan dengan
etanol sebanyak 70%. Proses ekstraksi yang digunakan adalah dengan menggunakan
proses evaporasi bertingkat yang bertujuan untuk menguapkan etanol sehingga
diharapkan yang tersisa adalah kandungan zat aktif seperti yang telah disebutkan di
atas. Tujuan dilarutkannya buah pepaya muda yang telah kering tersebut dengan
etanol 70% adalah untuk mendapatkan kandungan papain, chymopapain, carpaine,
dan tannin dengan kadar yang lebih banyak dan lebih murni daripada hanya sekedar
dilarutkan dengan air biasa. Pelarutan bahan uji dengan etanol juga bertujuan untuk
mencegah kontaminasi yang tidak diinginkan selama proses ekstraksi buah pepaya
muda berlangsung. Hasil yang didapatkan dari proses ekstraksi dengan etanol tersebut
adalah ekstrak buah pepaya muda yang lengket, kental, berwarna coklat kehitaman,
dan berbau agak tajam.
Pada penelitian ini ekstrak buah pepaya muda yang telah didapatkan dilarutkan
dengan aquades steril agar hasil penelitian pada uji dilusi tabung dapat diamati dengan
lebih jelas. Dari uji dilusi tabung didapatkan hasil bahwa kekeruhan tabung mulai
terdapat pada konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda 2% yang berarti bahwa
kadar terendah ekstrak buah pepaya muda di mana tidak terdapat kekeruhan adalah
terdapat pada konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda 3%. Hal ini menunjukkan
bahwa Kadar Hambat Minimum (KHM) dari ekstrak buah pepaya muda terhadap
Staphylococcus aureus berdasarkan hasil uji dilusi tabung adalah sebesar 3%. Pada
Page 60
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 60/77
uji penggoresan NAP secara visual tampak bahwa kepadatan koloni kuman pada plate
dengan berbagai kombinasi konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda (1%, 2%,
3%, 4%, 5%) yang telah diuji secara serial cenderung menurun seiring dengan
pertambahan konsentrasi ekstrak buah pepaya muda. Hal ini diperkuat dengan hasil
Uji Korelasi Pearson yang menunjukkan arah hubungan antarvariabel yang negatif
sebesar -0,763. Berdasarkan hasil tabel 5.2 terdapat perbedaan yang cukup berarti
dari segi jumlah koloni pada konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda 5% pada
pengulangan I-IV, hal ini ditunjukkan dengan masih tumbuhnya koloni pada
konsentrasi tersebut pada pengulangan I dan II sedangkan hasil yang berbeda
ditunjukkan pada pengulangan III dan IV di mana pada pengulangan tersebut tidak
didapatkan pertumbuhan koloni pada konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda 5%.
Dengan demikian menurut kriteria dari Finegold et.al. (1986) dapat disimpulkan bahwa
Kadar Bunuh Minimum (KBM) hanya didapatkan pada konsentrasi akhir ekstrak
buah pepaya muda sebesar 5% pada pengulangan III dan IV saja sehingga Kadar
Bunuh Minimum (KBM) pada penelitian ini secara umum tidak dapat ditentukan.
Berdasarkan fakta hasil penelitian di atas dan juga dengan didukung oleh
perhitungan statistik yang ada serta diperkuat dengan adanya sumber yang
menyebutkan bahwa buah pepaya muda mengandung bahan aktif yang memiliki daya
antimikroba terhadap bakteri, termasuk Staphylococcus aureus, maka dapat
disimpulkan bahwa buah pepaya muda terbukti memiliki daya antimikroba yang dapat
menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus. Hal ini membuktikan bahwa
hipotesis yang telah disusun sebelumnya terbukti.
Page 61
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 61/77
BAB 7
PENUTUP
7.1 Kesimpulan
Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak buah pepaya muda memiliki efek menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus secara in vitro berdasarkan hasil uji dilusi tabung dan hasil
uji penggoresan pada medium Nutrient Agar Plate (NAP) dengan dibantu olah data
statistik.
2. Pada uji dilusi tabung didapatkan Kadar Hambat Minimum (KHM) terhadap
bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi akhir ekstrak buah pepaya muda
sebesar 3%.
3. Pada uji gores NAP Kadar Bunuh Minimum (KBM) terhadap bakteri
Staphylococcus aureus tidak dapat ditentukan karena pada konsentrasi tertinggi
ekstrak buah pepaya muda masih ditemukan pertumbuhan koloni.
Page 62
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 62/77
4. Semakin tinggi dosis ekstrak buah pepaya muda maka akan semakin tinggi pula
kandungan zat aktif dari ekstrak buah pepaya muda sehingga potensi kerja dari zat
aktif ekstrak buah pepaya muda tersebut akan semakin tinggi pula di dalam
menghambat pertumbuhan kuman Staphylococcus aureus, hal ini ditunjukkan oleh
nilai koefisien korelasi pada Uji Korelasi Pearson sebesar -0,763.
7.2 Saran
Dengan memperhatikan adanya kekurangan-kekurangan yang terdapat di
dalam penelitian ini maka perlu diadakan penelitian lebih lanjut dengan memperhatikan
hal-hal sebagai berikut:
1. Diperlukan penelitian dengan rentang konsentrasi ekstrak buah pepaya muda
yang lebih besar lagi terutama untuk mencari Kadar Bunuh Minimum (KBM)
yang lebih tepat.
2. Diperlukan cara lain untuk mendapatkan kandungan zat aktif (misalnya papain)
dari buah pepaya muda selain dengan metode ekstraksi kering disertai dengan
melakukan standardisasi konsentrasi ekstrak buah pepaya muda yang tetap,
terstruktur dan sistematis agar pada penelitian-penelitian selanjutnya diperoleh
hasil yang sama atau tidak jauh berbeda dengan penelitian pada saat ini.
3. Diperlukan adanya ekstraksi zat aktif dengan metode yang sama atau dengan
metode yang berbeda dari bagian tanaman pepaya muda yang berbeda dan
dilakukan secara bersamaan terhadap bakteri Staphylococcus aureus untuk
Page 63
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 63/77
mengukur pengaruh perbedaan konsentrasi dan aktivitas dari zat aktif terhadap
bakteri Staphylococcus aureus.
4. Diperlukan adanya penelitian lebih lanjut mengenai efek ekstrak buah pepaya
muda terhadap bakteri lain selain Staphylococcus aureus secara in vitro.
5. Diperlukan penelitian lebih lanjut dengan skala yang lebih besar lagi, misalnya
dengan mempergunakan hewan coba atau dengan uji klinik untuk melihat
farmakokinetik, farmakodinamik dan toksisitas bahan aktif yang terkandung di
dalam ekstrak buah pepaya muda
DAFTAR PUSTAKA
Agnol, R.Dall; Ferraz, A.; Bernardi, A.P.; Albring, D.; Nor, C.; Sarmento,
L; Lamb, L. 2003. Antimicrobial Activity of Some Hypericum species.
Brazil: TANAC SA. Hal: 511-516
AKK 1975. Bertanam Pohon Buah-buahan. Yogyakarta: Kanisius; Tohir,
Kaslan A. 1978. Bercocok Tanam Pohon Buah-buahan. Jakarta:
Pradnya Paramitha. http://info sehat_com.htm . Diakses 4 Maret
2004
Anonim. Blank Title. http://www.minggupagi.com/article.php?sid=7453.
Diakses 10 Mei 2000
Anonim. Aneka Ramuan Pencegah SARS.
http://www.depkes.go.id/index.php?
optionarticle&tast=viewarticle&artid=484xitemid=3. Diakses 18
November 2005
Page 64
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 64/77
Berge-Bachi. 2002. Resistence mechanism of gram positive bacteria.
Switzerland: Institute of Medical Microbiology University of
Zurich. Page: 27-35
Bonang, Gerard. 1982. Mikrobiologi Kedokteran: Untuk Laboratorium
dan klinik. Jakarta: Gramedia. Hal: 10-15
Dalimartha, Setiawan. 1999. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Ungaran:
Trubus Agriwidya; Muhlisah, Fauziah. 1999. Tanaman Obat
Keluarga. Jakarta: Penebar Swadaya; Tampubolon, Oswold T. 1995.
Tumbuhan Obat. Jakarta: Penerbit Bharata.
http://cyberman.cbn.net.id/detil.asp. Diakses 4 Maret 2004
Dorland. 2000. Kamus Saku Kedokteran Dorland. Jakarta: EGC. Hal:2058
Dzen, Sjoekoer M.; Roekistiningsih; Santoso, Sanarto; Winarsih, Sri. 2003.
Bakteriologi Medik. Malang: Bayumedia. Hal: 134-135
Dzen, Sjoekoer M.; Roekistiningsih; Santoso, Sanarto; Winarsih, Sri.
2005. Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Kedokteran. Malang:
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas
Brawijaya. Hal: 17, 24-27, 43-44
E., Quisumbing. 1951. Medicinal Plants of The Philippines. Manila:
Bureau of Print. Hal: 632-637
Finegold S.M., Baron E.J. 1986. Bailey and Scott`s Diagnostic
Microbiology , 7th Ed. USA: C.V. Mosby Co., St. Louis.
Fitriani, Vina. 2006. Getah Sejuta Manfaat . http://www.trubus-online.com.
Diakses 17 Mei 2006
Page 65
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 65/77
Hiramatsu K; Katayama Y; Yuzawa H; Ito T. 2002. Molecular Genetics of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Tokyo: Department
of Bacteriology, Juntendo University. Hal: 67-74
Infotech. MRSA Penyebab Kematian Bayi Baru Lahir.
http://infosehat_com.htm . Diakses 4 Maret 2002.
IPTEKnet. Tanaman Obat Indonesia: Pepaya. http://www.ipteknet.id/ind/warintek/budidaya-pertanian-
idx.php?doc=2a19 . Diakses 13 September 2005.
Jawetz; Melnick; Adelberg. 1995. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta:
EGC. Hal:211-217
Katzung, Bertram G. 1994. Farmakologi Dasar dan Klinik. Jakarta: EGC.
Hal: 699
Mark Gladwin, M.J., Trattler, Bill, MD. 1999. Clinical Microbiology:
Make Ridiculously Simple. Miami: Mc.Master Inc.
National Tropical Botanical Garden. 2005. Papaya: Meet The Plants.
http://www.ntbg.org/plants/index.php.Diakses 8 Desember 2005
Pelezar, Michael J. 1981. Element of Microbiology . Tokyo: Mc Graw-Hill
International Company. Hal: 138
Price, Anderson S.; Wilson, Lorraine. 1995. Patofisiologi: Konsep Klinis
Proses-proses Penyakit. Jakarta: EGC. Hal:1006
Page 66
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 66/77
Republika. 2004. Osteomielitis. http://republikaonline.co.id. Diakses 18
November 2005
Ross I. 1999. Medicinal Plants of The World: Chemical Constituents,
Traditional and Modern Medicinal Uses. Totowa: Humana Press
Senese et.al. 1987. Papain.
http://www.worthington-biochem.com/PAP/default.html. Diakses
12 Oktober 2005
Simpson, Beryl B.; Ogorzaly, Molly C. 2001. Economic Botany. New
York: Mc Graw-Hill International Company. Hal: 284
Simor, Andrew E. Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA)
Surveillance, Control, and Treatment Method.
http://www.postgramed.com/issues/2001/10.01/simor.htm. Diakses 4
April 2004
Weerakody, Y. MRSA. http://www.thnc.com/healthguide/article.asp.
Diakses 11 April 2004
Page 67
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 67/77
Lampiran 1. Pernyataan Keaslian Tulisan
PERNYATAAN KEASLIAN TULISAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Gandhi Estrada Atmanto
NIM : 0310710066
Program Studi : Program Studi Pendidikan Dokter
Fakultas Kedokteran Universitas
Brawijaya,
menyatakan dengan sebenarnya bahwa Tugas Akhir yang saya tulis ini benar-benar
hasil karya saya sendiri, bukan merupakan pengambilalihan tulisan atau pikiran orang
lain yang saya akui sebagai tulisan atau pikiran saya sendiri. Apabila di kemudian hari
dapat dibuktikan bahwa Tugas Akhir ini adalah hasil jiplakan, maka saya bersedia
menerima sanksi atas perbuatan tersebut.
Page 68
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 68/77
Malang, 9 Mei 2007
Yang membuat pernyataan,
(Gandhi Estrada Atmanto)
NIM: 0310710066
Lampiran 2. Alat yang dipergunakan untuk pembuatan ekstrak
Oven
Page 69
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 69/77
Evaporator
Lampiran 3. Ekstrak Buah Pepaya Muda
Page 70
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 70/77
Lampiran 4. Analisis Statistik: Hasil Uji Normalitas
Explore
dosis
Page 71
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 71/77
Case Processing Summary
4 100,0% 0 ,0% 4 100,0%
4 100,0% 0 ,0% 4 100,0%
4 100,0% 0 ,0% 4 100,0%
4 100,0% 0 ,0% 4 100,0%
4 100,0% 0 ,0% 4 100,0%
4 100,0% 0 ,0% 4 100,0%
dosis
,00
,02
,04
,06
,08
,10
sa
N Percent N Percent N Percent
Valid Missing TotalCases
Tests of Normality
,252 4 . ,909 4 ,477
,265 4 . ,858 4 ,254
,209 4 . ,957 4 ,760
,280 4 . ,888 4 ,376
,309 4 . ,904 4 ,450
,303 4 . ,820 4 ,142
dosis
,00
,02
,04
,06
,08
,10
sa
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk
Lilliefors Significance Correctiona.
Lampiran 5. Analisis Statistik: Hasil Uji Oneway-ANOVA dan Hasil Uji Post
Hoc Tukey
Oneway
Page 72
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 72/77
Test of Homogeneity of Variances
sa
2,364 5 18 ,081
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
ANOVA
sa
814304,2 5 162860,842 14,515 ,000
201956,8 18 11219,819
1016261 23
Between Groups
Within Groups
Total
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Page 73
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 73/77
Multiple Comparisons
Dependent Variable: saTukey HSD
-158,00000 74,89933 ,326 -396,0327 80,0327
-84,75000 74,89933 ,862 -322,7827 153,2827
75,00000 74,89933 ,912 -163,0327 313,0327
294,00000* 74,89933 ,011 55,9673 532,0327
340,00000* 74,89933 ,003 101,9673 578,0327
158,00000 74,89933 ,326 -80,0327 396,032773,25000 74,89933 ,919 -164,7827 311,2827
233,00000 74,89933 ,057 -5,0327 471,0327
452,00000* 74,89933 ,000 213,9673 690,0327
498,00000* 74,89933 ,000 259,9673 736,0327
84,75000 74,89933 ,862 -153,2827 322,7827
-73,25000 74,89933 ,919 -311,2827 164,7827
159,75000 74,89933 ,315 -78,2827 397,7827
378,75000* 74,89933 ,001 140,7173 616,7827
424,75000* 74,89933 ,000 186,7173 662,7827
-75,00000 74,89933 ,912 -313,0327 163,0327
-233,00000 74,89933 ,057 -471,0327 5,0327-159,75000 74,89933 ,315 -397,7827 78,2827
219,00000 74,89933 ,082 -19,0327 457,0327
265,00000* 74,89933 ,024 26,9673 503,0327
-294,00000* 74,89933 ,011 -532,0327 -55,9673
-452,00000* 74,89933 ,000 -690,0327 -213,9673
-378,75000* 74,89933 ,001 -616,7827 -140,7173
-219,00000 74,89933 ,082 -457,0327 19,0327
46,00000 74,89933 ,989 -192,0327 284,0327
-340,00000* 74,89933 ,003 -578,0327 -101,9673
-498,00000* 74,89933 ,000 -736,0327 -259,9673
-424,75000* 74,89933 ,000 -662,7827 -186,7173-265,00000* 74,89933 ,024 -503,0327 -26,9673
-46,00000 74,89933 ,989 -284,0327 192,0327
(J) dosis
,02
,04
,06
,08
,10
,00,04
,06
,08
,10
,00
,02
,06
,08
,10
,00
,02,04
,08
,10
,00
,02
,04
,06
,10
,00
,02
,04,06
,08
(I) dosis
,00
,02
,04
,06
,08
,10
Mean
Difference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
Lampiran 6. Analisis Statistik: Hasil Uji Korelasi-Pearson
Page 74
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 74/77
Correlations
Correlations
1 -,763**
,000
24 24
-,763** 1
,000
24 24
Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
N
Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
N
dosis
sa
dosis sa
Correlation is significant at the 0.01 level
2-tailed .
**.
Page 75
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 75/77
Lampiran 7. Analisis Statistik: Hasil Uji Regresi Linear
Regression
Variables Entered/Removedb
dosisa . Enter
Model
1
Variables
Entered
Variables
Removed Method
All requested variables entered.a.
Dependent Variable: sab.
Model Summaryb
,763a ,581 ,562 139,04609
Model
1
R R Square
Adjusted
R Square
Std. Error of
the Estimate
Predictors: (Constant), dosisa.
Dependent Variable: sab.
ANOVAb
590917,0 1 590917,032 30,564 ,000a
425343,9 22 19333,815
1016261 23
Regression
Residual
Total
Model
1
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Predictors: (Constant), dosisa.
Dependent Variable: sab.
Coefficientsa
505,738 50,317 10,051 ,000
-4593,929 830,959 -,763 -5,528 ,000
(Constant)
dosis
Model
1
B Std. Error
Unstandardized
Coefficients
Beta
Standardized
Coefficients
t Sig.
Dependent Variable: saa.
Page 76
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 76/77
Curve Fit
Model Description
MOD_1
sa
Linear
Growtha
Exponentiala
dosis
Included
Unspecified
Model Name
1Dependent Variable
1
2
3
Equation
Independent Variable
Constant
Variable Whose Values Label Observations in
Plots
The model requires all non-missing values to be positive.a.
Page 77
5/16/2018 TA Lengkap - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/ta-lengkap-55ab53fc508f9 77/77
Linear
700.00
600.00
500.00
400.00
300.00
200.00
100.00
0.00
0.100.080.060.040.020.00
dosis
Linear
Observed
sa