sel

sel-sel endothelial adalah jenis sel epitel khusus yang membentuk lapisan dalam pembuluh darah.

Sel-sel ini memainkan peran kunci dalam angiogenesis, perkembangan pembuluh darah baru dari pembuluh pra-ada.Angiogenesis adalah sebuah proses multi-langkah yang penting bagi perkembangan fisiologis dan patologis. Selama angiogenesis, sel-sel endotel yang diaktifkan dan matriks metaloproteinase mengekspresikan (MMPs), yang menurunkan membran basal pembuluh darah. Menanggapi isyarat lingkungan, sel-sel endotel MMPs rahasia dan kemudian menyerbu melalui membran basement untuk membentuk jaringan kapiler baru.

sel endotel diuji dalam berbagai tes untuk fungsi-fungsi yang berkontribusi pada proses angiogenesis. Kolagen Saya permukaan dilapisi cocok untuk kultur sel endotel seperti sel-sel jantung janin bovine endotel (FBHECs) dan sel endotel vena umbilikalis manusia (HUVECs) (Gambar 1). Dalam pengujian in vitro fungsi sel endotel meliputi migrasi sel 1, invasi 2, dan pembentukan tubulus 3-9. Baik BD BioCoat ™ Angiogenesis Sistem: Sel endotel Invasi dan BD BioCoat Angiogenesis Sistem: Sel endotel Migrasi memungkinkan pengumpulan data yang cepat tanpa langkah-langkah penanganan ganda. Ini tes kuantitatif menggunakan BD FluoroBlok ™ mikroporous polyethylene terephthalate (PET) membran (3 pM ukuran pori) yang secara efektif memblokir sinyal fluoresensi dari sel-sel label yang belum menyerang atau bermigrasi melalui membran, masing-masing, sehingga memungkinkan pendeteksian selektif sel yang berada di bagian bawah membran (Gambar 2). Untuk melakukan deteksi fluoresensi, mungkin sel pra-label atau pasca-dilabeli dengan pewarna fluorescent (Gambar 3). Teknik pra-label memungkinkan pengukuran kinetik real-time migrasi sel atau invasi. sel endotel harus mampu bermigrasi dan enzimatis menurunkan membran basal dalam rangka untuk angiogenesis terjadi.Sumur dari BD BioCoat Angiogenesis Sistem: Endothelial Cell Invasion secara merata dilapisi dengan BD Matrigel Matrix ™, yang memungkinkan para peneliti untuk menguji kemampuan sel endotel untuk menyerbu melalui membran basal dilarutkan dalam menanggapi chemoattractants, seperti VEGF, di hadapan atau tidak adanya agen anti-angiogenik (Gambar 4).

BD BioCoat Angiogenesis Sistem: Sel endotel Migrasi terdiri dari sisipan BD FluoroBlok merata dilapisi dengan fibronektin manusia (Gambar 5). Studi yang dilakukan menggunakan teknik post-label menunjukkan bahwa BD ™ HUVEC-2 sel bermigrasi ke arah VEGF secara konsentrasi bergantung (Gambar 6).

Selama angiogenesis, sel-sel endotel kapiler bentuk setelah mereka menyerbu melalui membran basal. Permukaan budaya yang benar adalah penting untuk pembentukan sel tabung berhasil endotel in vitro. Kedua sel endotel primer dan garis sel endotel telah ditunjukkan untuk membentuk tubulus pada BD BioCoat Angiogenesis Sistem: Endothelial Cell Tube Formasi (Angka 7-9) yang terdiri dari gel 3D BD Matrigel Matrix. BD BioCoat Angiogenesis Sistem yang tersedia dalam 24 - dan 96-Multiwell format, yang dapat digunakan untuk moderat untuk skrining senyawa throughput tinggi. BD Matrigel Matrix ™ juga telah banyak digunakan untuk belajar di 4-5vivo, angiogenesis 10-12 sebagai teknis kurang menantang alternatif model implantasi kornea.Sebuah "plug" materi ditempatkan subkutan, diikuti oleh

kuantifikasi histologis 7-10 hari kemudian. Ini in vitro dan in vivo tes peneliti memberikan beberapa pilihan untuk menjelajahi fungsi sel endotel yang penting selama angiogenesis.

* BD BioCoat Angiogenesis Sistem: Sel endotel Tube Formasi menawarkan dan kuat assay standar untuk mempelajari tubulogenesis sel

endotel. Untuk pelanggan yang tertarik dalam membangun sebuah assay untuk pembentukan tabung menggunakan vialed BD Matrigel

Matrix, kami sarankan pra-pengujian banyak untuk memastikan kinerja yang optimal.

Gambar 1. Dampak Lingkungan Cell Biocoat BD Endothelial Growth di HUVEC

Gambar 2. Pelabelan Sel Pasca-Invasi dengan Calcein AM

Gambar 3. Pelabelan Metode untuk Endpoint atau Migrasi Kinetic Real-Time dan tes Invasi

Gambar 4. Pengaruh TIMP-2 dan Phenathanthroline 1'10 'di Invasi HMVEC VEGF-Mediated

Gambar 5. HUVEC Migrasi pada tidak dilapisi dan Sisipan Manusia fibronektin berlapis

Gambar 6. BD HUVEC-2 Sel migrasi menunjukkan konsentrasi yang bergantung terhadap VEGF

Gambar 7. Manusia endotel Cell Jenis pameran Tube Formasi

Gambar 8. Confocal Gambar Formasi Tube-2 Cell BD HUVEC

Gambar 9. Suramin menghambat HMEC-1 Tube Formasi

Referensi

1. K Nakamura, Taguchi E, T Miura, Yamamoto A, Takahashi K, Bichat F, Guilbaud N, Hasegawa K, Kubo K, Fujiwara Y, Suzuki R, Kubo K, Shibuya M, Isoe T. (2006) KRN951, yang sangat ampuh inhibitor vaskular faktor pertumbuhan reseptor tirosin kinase endotel, memiliki kegiatan antitumor dan mempengaruhi sifat pembuluh darah fungsional. Cancer Res. 66 (18): 9134.

2. Steinle JJ, Booz GW, Meininger CJ JNE, Hari, Granger HJ. (2003) β 3 - reseptor adrenergik mengatur migrasi sel endotel dan proliferasi retina Chem. J Biol. 278 (23): 20681.

3. Simone di N, De Santis M, Tamburrini E, Di Nicuolo F, Lucia MB, Riccardi P, D'Ippolito S, R equina,, Caruso A. (2007) Pengaruh ART terhadap pembentukan jaringan seperti tabung-sel endotel manusia Biol Pharm Bull.. 30 (5): 982.

4. Kong D, Li Y, Wang Z, Banerjee S, FH Sarkar. (2007) Penghambatan angiogenesis dan invasi oleh 3,3 '-diindolylmethane dimediasi oleh NF-kB target hilir gen MMP-9 dan UPAyang diatur bioavailabilitas VEGF pada kanker prostat Res. Kanker. 67 (7): 3310.

5. Michaud-Levesque J, Demeule M, Beliveau R. (2007) Dalam penghambatan vivoangiogenesis dengan bentuk yang larut dari melanotransferrin. Karsinogenesis. 28 (2): 280.

6. Nishiyama K, Takaji K, Uchijima Y, Kurihara Y, T Asano, Yoshimura M, Ogawa H, Kurihara H. (2007) Protein kinase A-diatur nucleocytoplasmic bolak dari ID1 selama angiogenesisBiol. J Chem. 282 (23): 17200.

7. Takeda Y, AR Kazarov, CE Butterfield, Hopkins BD, Benjamin LE, Kaipainen A, Hemler ME.(2007) Pencabutan tetraspanin Cd151 hasil dalam angiogenesis patologis menurun in vivo dan in vitro. Darah. 109 (4): 1524.

8. Simone di N, Di Nicuolo F, Sanguinetti M, Castellani R, D'Asta M, Caforio L, Caruso A. (2006) resistin invasif mengatur perilaku manusia sel koriokarsinoma dan angiogenik proses sel endotel Endocrinol. J. 189:691.

9. Folkman J dan Haudenshschild C. (1980) Angiogenesis in vitro. Sifat. 288 (5791): 551.

10. GM Birdsey, NH Dryden, V Amsellem, Gebhardt F, K Sahnan, Haskard DO, E Dejana, JC Mason, Rand AM. (2008) Transkripsi faktor Erg mengatur angiogenesis dan apoptosis endotel melalui VE-kaderin. Darah. 111 (7): 3498.

11. Murphy EZ, BK Majeti, Barnes LA, M Makale, Weis SM, Lutu-Fuga K, Wrasidlo W, DA Cheresh. (2008) Nano Partikel-dimediasi obat pengiriman ke pembuluh darah tumor menekan metastasis. Proc Natl Acad Sci. 105 (27): 9343.

12. Kisuck J, CE Butterfield, DG Duda, Eichenberger SC, S Saffaripour, Ware J, ZM Ruggeri, RK Jain, Folkman J, Wagner DD. (2006) Trombosit dan dukungan angiogenesis adhesi trombosit sementara mencegah perdarahan yang berlebihan. Proc Natl Acad Sci. 103 (4): 855.

AlexaFluor adalah merek dagang dari Invitrogen Corporation. CytoFlour adalah merek dagang dari Terapan Biosystems. Metamorf adalah merek dagang terdaftar dari Universal Imaging Corporation (UIC). mTeSR1 dan WiCell adalah milik WiCell Research Institute. PuraMatrix adalah merek dagang terdaftar dari 3DM, Inc Victor2 adalah merek dagang dari PerkinElmer, Inc

Endotelium

Diagram menunjukkan lokasi sel endotel

Endotel sel, yang membentuk tunika intima , mengelilingi sebuah eritrosit (E).

Artikel ini adalah tentang lapisan pembuluh darah . Untuk endotelium dari kornea , lihat endotelium kornea

endotelium adalah lapisan tipis sel yang melapisi permukaan bagian dalam pembuluh darah , [1] membentuk

sebuah antarmuka antara sirkulasi darah dalam lumen dan sisanya dari dinding kapal. Sel-sel ini disebut sel

endotel. Sel endotel baris seluruh sistem sirkulasi , darihati ke terkecil kapiler . Sel-sel ini

mengurangi turbulensi aliran darah memungkinkan cairan yang akan dipompa lebih jauh.

jaringan endothelial adalah jenis khusus epitel jaringan (salah satu dari empat jenis jaringan biologis pada

hewan). Lebih khusus lagi, adalah epitel skuamosa sederhana .

endotelium ini biasanya menyediakan permukaan yang non-thrombogenic karena mengandung sulfat

heparan yang bertindak sebagaikofaktor untuk mengaktifkan antithrombin III , protease yang memotong

beberapa faktor dalam kaskade koagulasi.

Isi 

[hide]

1 Terminologi

2 Fungsi

3 Patologi

4 Lihat juga

5 Referensi

o 5.1 Catatan

o 5.2 Bibliografi

6 Pranala luar

[ sunting ]Terminologi

Model dasar dari anatomi membuat perbedaan antara sel endotel dan sel epitel atas dasar yang jaringan

mereka mengembangkan dari dan menyatakan bahwa kehadiran vimentin daripada keratin filamen dari epitel

sel ini terpisah. [2]

Endotelium dari permukaan interior ruang jantung disebut endocardium . Baik darah dan kapiler limfatik terdiri

dari satu lapisan sel endotel disebut monolayer sebuah.

[ sunting ]Fungsi

sel endotel terlibat dalam banyak aspek biologi vaskuler, termasuk:

Aterosklerosis

Barrier fungsi  - endotelium bertindak sebagai penghalang selektif antara

lumen kapal dan jaringan di sekitarnya, mengendalikan bagian bahan dan

transit sel-sel darah putih masuk dan keluar dari aliran darah. atau lama

kenaikan berlebihan dalam permeabilitas dari monolayer endotel, seperti

dalam kasus peradangan kronis, dapat mengakibatkan jaringanedema /

pembengkakan.

Pembekuan darah  ( trombosis & fibrinolisis )

Peradangan

Pembentukan pembuluh darah baru ( angiogenesis )

Vasokonstriksi  dan vasodilatasi , dan karenanya kontrol tekanan darah

Dalam beberapa organ, ada yang sangat berbeda sel endotel untuk melakukan spesialisasi 'penyaringan'

fungsi. Contoh seperti struktur endotel yang unik termasuk glomerulus ginjaldan penghalang darah-otak .

[ sunting ]Patologi

disfungsi endotel , atau hilangnya fungsi endotel yang tepat, merupakan ciri khas untuk penyakit pembuluh

darah, dan sering dianggap sebagai peristiwa kunci awal dalam perkembangan aterosklerosis . Gangguan

fungsi endotel sering terlihat pada pasien dengan penyakit arteri koroner , diabetes

melitus , hipertensi , hiperkolesterolemia , serta pada perokok. disfungsi endotel juga telah terbukti prediksi

masa depan kejadian kardiovaskular yang merugikan. Salah satu mekanisme utama dari disfungsi endotel

adalah berkurangnyaoksida nitrat , sering karena tingkat tinggi dimethylarginine asimetris , yang mengganggu

yang normal -L arginine -merangsang sintesis oksida nitrat . Mekanisme yang berlaku sebagian besar

disfungsi endotel adalah peningkatan spesies oksigen reaktif , yang dapat mengganggu produksi oksida nitrat

dan aktivitas melalui beberapa mekanisme. [3] The protein signaling ERK5 sangat penting untuk menjaga fungsi

sel endotel normal [4] .

[ sunting ]Lihat pula

Apelin

Caveolae

Endocardium

Endotel mikropartikel

Nenek moyang sel endotel

Santai yang diturunkan endotelium faktor  ( EDRF )

Robert F. Furchgott  (1998 hadiah Nobel untuk penemuan EDRF)

Aktivasi trombosit

Susac Sindrom

Tunica intima

VE-kaderin

Weibel-Palade badan

[ sunting ]Referensi

[ sunting ]Catatan

1. ̂  endotelium di Dorland's Medical Dictionary

2. ̂  "FMA" . Diakses 2008-12-12.

3. ̂  Deanfield J, Donald A Ferri C,, C Giannattasio, Halcox J, S Halligan,

Lerman A, Mancia G, Oliver JJ, AC Pessina, Rizzoni D, GP Rossi, Salvetti A,

Schiffrin EL, Taddei S, Webb DJ (Januari 2005). "Fungsi dan disfungsi

endotel Hipertensi. Bagian I Metodologi: isu-isu untuk penilaian dalam

vaskuler yang berbeda tempat tidur: pernyataan Kerja Grup Astra dalam

endotelin endotel dan Faktor Eropa Masyarakat":. J Hypertens 23 (1). 7-

17 PMID 15643116 .

4. ̂  Roberts OL, K Holmes, Müller J, DA Cross, Cross MJ. (Des 2009). "ERK5

dan pengaturan fungsi sel endotel."). Biochem Soc: Trans. 37 (6 1254-

9. PMID 19909257 .

[ sunting ]Bibliografi

Biologi Molekuler dari CELL, edisi 4, Alberts et al, 2002.

[ sunting ]Pranala luar

Endotelium  di eMedicine Dictionary

Organology di UC Davis  Circulatory/vessels/capillaries1/capillaries3 , "Kapiler,

non-fenestrated (EM, Rendah)"

Histologi di BU  21402ooa

Endotelium Jurnal Penelitian Sel endotel  , Informa Kesehatan

Aktivasi platelet  , Universitas Washington

[hide]v • d • e

Sistem peredaran darah : Arteri dan vena ( TA A12.0 , GA 6,543 / GA 7,641

Sirkulasi sistemik ( Heart , sebelah kiri) → Aorta → Arteri → arteriol → Kapiler → venula → Vena → Vena cava → ( Heart , sebelah kanan)

Sirkulasi paru ( Heart , sebelah kanan) → Pulmonary arteri → ( Paru ) → paru vena → ( Heart , sebelah kiri)

Pembuluh darah

Endotelium · Tunica intima · Tunica media · Tunica externa

Vasa vasorum · Vasa nervorum

Rete mirabile · arteriovenous anastomosis

Arteri Gizi arteri

Veins comitans Vena · Superficial vena · Deep vein · utusan vena · pleksus vena

Kurus Getah kapal · getah bening · Limfe kapiler

M : VAS Anat (a: h , u , t , a , l , v: h , u , t , a , l ) / Phys / devp noco / syva / cong / tumr , sysi / Epon

Hepatosit

Sinusoida dari tikus hati dengan sel endotel fenestrated.Fenestration adalah sekitar 100 nm diameter, dan lebar sinusoidal

5 pM . Memindai elektron mikrograf oleh Robin Fraser, University of Otago .

Cross-bagian dari hati manusia.

hepatosit adalah sel dari jaringan utama hati . Hepatosit make up 70-80% dari hati's sitoplasma massa. Sel-

sel ini terlibat dalam:

Sintesis protein

Protein penyimpanan

Transformasi karbohidrat

Sintesis kolesterol , garam empedu dan fosfolipid

Detoksifikasi, modifikasi, dan ekskresi zat eksogen dan endogen

hepatosit juga memprakarsai pembentukan dan sekresi empedu .

Isi 

[hide]

1 hepatosit histologi

2 Protein sintesis

3 Karbohidrat metabolisme

4 Lipid metabolisme

5 Detoksifikasi

6 tambahan gambar

7 Referensi

8 Pranala luar

[ sunting ]histologi hepatosit

Hepatosit menampilkan eosinofilik sitoplasma, mencerminkan banyak mitokondria , dan basofilik stippling

karena jumlahnya besar retikulum endoplasma kasar dan bebas ribosom . Brown lipofuscin butiran juga

diamati (dengan bertambahnya usia) bersama-sama dengan daerah tak bercacat tidak teratur sitoplasma, ini

sesuai dengan sitoplasma glikogen dan lemak toko dihapus selama persiapan histologis. Rentang hidup rata-

rata dari hepatosit adalah 5 bulan, mereka mampu beregenerasi .

Hepatosit inti berbentuk bulat dengan tersebar kromatin dan menonjol nukleolus . Anisokaryosis adalah umum

dan sering mencerminkan tetraploidy lain derajat dan poliploidi , fitur normal lebih dari 50% dari hepatosit. sel

binukleat juga umum.

Hepatosit diatur dalam pelat dipisahkan oleh saluran vaskuler ( sinusoid ), pengaturan didukung

oleh reticulin (kolagen tipe III) jaringan. Pelat hepatosit adalah satu sel tebal pada mamalia dan dua sel tebal di

ayam. Sinusoid menampilkan terputus-putus, fenestrated endotel lapisan sel. Sel-sel endotel tidak

memiliki membran basal dan dipisahkan dari hepatosit oleh ruang Disse , yang mengalir getah bening ke

saluran portal limfatik .

sel Kupfer tersebar antara sel-sel endotel, mereka adalah bagian dari sistem retikuloendotelial dan

phagocytose menghabiskan eritrosit . stellata (Ito) sel menyimpan vitamin A dan menghasilkan matriks

ekstraseluler dan kolagen , mereka juga didistribusikan antara sel endotel tetapi sulit untuk memvisualisasikan

dengan mikroskop cahaya .

Hepatosit adalah contoh fisiologis yang penting bagi evalutation baik dan metabolisme efek biologis

dari xenobiotik . Mereka dipisahkan dari hati oleh kolagenase pencernaan, yang merupakan proses dua

langkah. Pada langkah pertama, hati ditempatkan dalam isotonik solusi, di mana kalsium dibuang untuk

mengganggu sel-sel sambungan ketat oleh penggunaan kalsium agen Chelating . Selanjutnya, yang berisi

kolagenase solusi ditambahkan untuk memisahkan hepatosit dari hati stroma . Proses ini menciptakan

suspensi hepatosit, yang dapat dibudidayakan dan disebar pada 96 baik piring untuk segera digunakan,

atau cryopreserved oleh pembekuan. [1] Mereka tidak berkembang biak dalam budaya.Hepatosit yang sangat

peka terhadap kerusakan selama siklus kriopreservasi termasuk pembekuan dan pencairan. Bahkan setelah

penambahan klasik krioprotektan masih ada kerusakan yang dilakukan saat sedang cryopreserved. [2]

[ sunting ]sintesis protein

hepatosit adalah sel dalam tubuh yang memproduksi serum albumin , fibrinogen ,

dan prothrombin kelompok faktor pembekuan (kecuali untuk Factor3, 4).

Ini adalah situs utama untuk sintesis lipoprotein , ceruloplasmin , transferin , melengkapi ,

dan glikoprotein . Hepatosit memproduksi struktur protein sendiri dan intraseluler enzim .

Sintesis protein oleh retikulum endoplasma kasar (RER), dan kedua yang kasar dan retikulum endoplasma

halus (SER) yang terlibat dalam sekresi protein terbentuk.

The retikulum endoplasma (ER) yang terlibat dalam konjugasi protein untuk lipid dan gugus karbohidrat

disintesis oleh, atau diubah dalam, yang hepatosit.

[ sunting ]metabolisme Karbohidrat

Lihat juga: Lipogenesis

Para hati bentuk asam lemak dari karbohidrat dan trigliserida mensintesis dari asam lemak dan

gliserol. Hepatosit juga mensintesis apoproteins dengan yang mereka kemudian berkumpul dan ekspor

lipoprotein ( VLDL , HDL ).

Hati juga merupakan situs utama dalam tubuh untuk glukoneogenesis , pembentukan karbohidrat dari

prekursor seperti alanin , gliserol , dan oksaloasetat .

[ sunting ]metabolisme Lipid

Hati menerima banyak lipid dari sirkulasi sistemik dan memetabolisme chylomicron sisa-sisa. Hal ini juga

mensintesis kolesterol dari asetat lebih lanjut sintesis dan garam empedu .Hati adalah satu-satunya tempat

pembentukan garam empedu.

[ sunting ]Detoksifikasi

Sel-sel hati memiliki kemampuan untuk metabolisme, detoksifikasi, dan menonaktifkan senyawa eksogen

seperti obat-obatan , ( metabolisme obat ), dan insektisida , dan senyawa endogen seperti steroid .

Drainase dari usus vena darah ke dalam hati membutuhkan detoksifikasi efisien menyerap zat lain-lain untuk

mempertahankan homeostasis dan melindungi tubuh terhadap racun tertelan.

Salah satu fungsi detoksifikasi dari hepatosit adalah untuk mengubah amonia menjadi urea untuk ekskresi.

[ sunting ]gambar Tambahan

Schemic diagram sistem bilier

[ sunting ]Referensi

1. ̂  Li, Albert P.; "Skrining untuk manusia obat ADME properti Tox / dalam

Penemuan Obat": Drug Discovery Today, Vol. 6, No 7, April 2001, hlm 357-

366

2. ̂  Hamel et al www.interscience.wiley.com.; "Ekstrak Gandum sebagai Efisien

Cryoprotective Agen Primer untuk Kultur dari Tikus hepatosit": dipublikasikan

secara online 21 Agustus 2006 InterScience Wiley di. Departemen ilmu des

bogiques, Montreal University.

[ sunting ]Pranala luar

Histologi di BU  22101ooa - "Ultrastruktur Cell: hepatosit dan sinusoid"

Hati Histologi: hepatosit (Universitas Colorado State

[show]v • d • e

Anatomi dari batang tubuh , sistem pencernaan : pencernaan kelenjar aksesori ( TA A05.8-9

[show]v • d • e

Manusia jenis sel / daftar terutama berasal dari endoderm

Kategori : Hati anatomi | Hewan sel | sel Manusia | Jaringan

Suhu-responsif polimerDari Wikipedia, ensiklopedia bebas

Artikel ini ditulis seperti suatu refleksi pribadi atau esai dan mungkin memerlukan pembersihan Harap. membantu memperbaikinya dengan menulis ulang dalam sebuah gaya ensiklopedis . (Juli 2008)

A-responsif polimer suhu adalah polimer yang mengalami perubahan fisik saat stimuli thermal eksternal disajikan. Kemampuan untuk mengalami perubahan seperti di bawah kondisi yang dikontrol dengan mudah membuat polimer kelas ini jatuh ke dalam kategori bahan cerdas . Perubahan fisik dapat dimanfaatkan untuk teknik analisis banyak, terutama untuk kimia pemisahan. Setelah penyelidikan berbagai poli (isopropylacrylamide-N) (poli-NIPAAm), ada suatu kepentingan dipicu pada aplikasi ini dan banyak polimer rangsangan-responsif lainnya. Telah ada penelitian yang luas dalam aplikasi polimer cerdas untuk digunakan sebagai fasa diam, senyawa ekstraksi, pengubah permukaan, penghantaran obat, dan pengiriman gen.

Fokus dari artikel ini akan meninjau pengenalan, pengembangan, dan masa depan polimer termo-responsif (TRP) dalam penerapannya pada teknik kromatografi dan analisis kuantitatif.Sebagian besar dari kajian ini akan mencakup penggunaannya sebagai fase stasioner untuk ukuran-pengecualian, interaksi hidrofobik, ion, serta teknik kromatografi afinitas karena kebanyakan semata-mata riset yang didasarkan pada polimer cerdas [1] .

Isi 

[hide]

1 Sejarah latar belakang suhu polimer responsif 2 Mayor Terobosan & Novel Teknik Kimia Talak

o 2.1 Kromatografi Interaksi hidrofobik 2.1.1 GPC 2.1.2 Meningkatkan Interaksi hidrofobik 2.1.3 Memodifikasi LCST untuk Parameter Eksperimental Perbaikan

o 2.2 Ukuran Pengecualian Kromatografi o 2.3 Kromatografi Pertukaran Ion- o 2.4 Afinitas Kromatografi

3 Perkembangan di Ekstraksi dan Prekonsentrasi 4 kini dan masa depan arah 5 Pentingnya Polimer Thermoresponsive di Pengobatan 6 Konklusif Catatan

7 Referensi

[ sunting ]Sejarah latar belakang suhu polimer responsif

Efek dari stimulus eksternal dari polimer tertentu telah diselidiki sejak tahun 1960 oleh Heskins dan Guillet [2] . Mereka mendirikan suhu larutan yang lebih rendah kritis (LCST) untuk poli-N-Isopropylacrylamide (poli-NIPAAm) menjadi 32 ° C. Berlawanan dengan perilaku kebanyakan senyawa dalam larutan air, termal polimer responsif menjadi kurang larut (lebih hidrofobik) di dalam air pada suhu yang tinggi. Ini juga tidak berlaku untuk polimer apapun, misalnya prosedur untuk melarutkan polietilen oksida (PEO) atau polietilen glikol (PEG) dalam air memerlukan suhu yang tinggi dan sejumlah besar waktu di bawah kondisi pengadukan. Titik di mana poli-NIPAAm mengalami transisi fase dari larut ke larut telah ditentukan terjadi pada 32 ° C. Hal ini didasarkan pada kondisi standar seperti pH netral dan tanpa spiking dengan senyawa ion. Penurunan pH dan meningkatkan kekuatan ion akan menurunkan LCST dan transisi fase akan terjadi lebih cepat. Dalam LCST, permukaan hidrofilik rantai polimer 'berinteraksi dengan air dan memanjang. Pada titik kritis, rantai polimer mengerut menjadi glob larut sebagai permukaan hidrofobik berinteraksi dan rantai mengalami dehidrasi. Perubahan konformasi terutama hasil dari dehidrasi pada kelompok sisi isopropil [3] . Ada beberapa karya memeriksa sifat poli-NIPAAm yang diikuti, tapi tidak sampai 1990-an bahwa sifat menguntungkan dari polimer dan lain-lain yang diterapkan untuk kromatografi dalam gelombang penelitian, banyak yang terjadi di laboratorium Jepang.

[ sunting ]Mayor Terobosan & Novel Teknik di Talak Kimia

[ sunting ]Interaksi hidrofobik Kromatografi

[ sunting ]GPC

Penelitian yang tampaknya memicu serangan gencar aplikasi dimodifikasi adalah Gel Permeation teknik kromatografi memperbaiki alur PIPA untuk manik-manik kaca dan memisahkan campuran dekstran, yang dikembangkan oleh Gewehr et al. [4] . Mereka menemukan bahwa antara suhu 25-32 o C, waktu elusi dekstran pada berat molekul yang berbeda dipamerkan ketergantungan pada suhu. Dekstran dari berat molekul tertinggi dielusi pertama sejak pameran PIPA hidrofilisitas rantai pada suhu di bawah LCST tersebut.Sebagai suhu elusi meningkat, ketika rantai berperilaku dengan cara yang lebih hidrofobik, waktu elusi meningkat untuk masing-masing analit untuk rentang yang diberikan.Kecenderungan umumnya berlaku selama rentang suhu seluruh, tetapi ada mendatarkan kurva sebelum 25 ° C dan setelah 32 ° C (LCST perkiraan untuk percobaan ini). Penting untuk dicatat bahwa di atas LCST, yang PIPA bertindak sebagai fase diam nonpolar khas yang akan digunakan secara terbalik-kromatografi

bertahap. Ada juga kasus besar kali elusi meningkat di bawah 15 ° C, yang kemungkinan besar dapat dikaitkan dengan pengaruh suhu rendah terhadap transfer massa memainkan peran yang lebih signifikan terhadap retensi dari perilaku fase diam. Studi ini menunjukkan bahwa resolusi dasarnya bisa disetel dengan menyesuaikan suhu operasi . Ruang lingkup penelitian ini adalah terbatas pada kondisi isotermal dan melampirkan rantai polimer untuk manik-manik kaca. Hasilnya, bagaimanapun, cukup memuaskan untuk menginspirasi penyelidikan lain dan modifikasi untuk membuat fase diam lebih fleksibel untuk kemajuan kromatografi.

[ edit ]Meningkatkan Interaksi hidrofobik

Teman-kelompok Kanazawa diperluas pada keberhasilan mereka dengan menggunakan pengubah yang berbeda untuk meningkatkan hidrofobisitas melalui lampiran butil metakrilat (BMA), sebuah komonomer hidrofobik [5] . Untuk penyederhanaan polimer yang dihasilkan telah diberi label sebagai IBC (Isopropylacrylamide kopolimer butil metakrilat). Polimer yang disintesis menggunakan telomerization radikal dengan berbagai konten BMA. Dimana murni poli-NIPAAm tidak dapat menyelesaikan steroid hidrofobik pada suhu apa pun, IBC-dicangkok fasa diam silika mampu menyelesaikan steroid puncak dengan waktu retensi semakin terbelakang dalam korelasinya dengan kedua konten BMA meningkat dan suhu meningkat. Mereka terus mengembangkan metode untuk phenylthiohydantoin terpisah PTH)-asam amino (menggunakan fasa diam IBC mereka dengan penekanan kuat menerapkan kondisi ramah lingkungan dengan menggunakan berair fase murni dalam HPLC [6] . Dalam publikasi Jepang, kelompok yang sama di bawah dipisahkan catechin Sakamoto menggunakan pNIPAAm memperkuat keberhasilan teknik ini [7] .

[ sunting ]Memodifikasi LCST untuk Perbaikan Parameter Eksperimental

Sejak pemisahan molekul biologis seperti protein akan lebih baik dilayani oleh elusi isokratik dengan resolusi pelarut air, analisis HPLC harus tweak di bidang fasa diam untuk mengelusi analit tersebut yang mungkin sensitif terhadap pelarut organik. Kanazawa et al. mengakui kemungkinan mengubah parameter LCST melalui penambahan gugus yang berbeda [8] . kelompok Kanazawa's diselidiki perubahan reversibel poli-NIPAAm sekali modifikasi dengan ujung karboksil. Disarankan bahwa modifikasi yang menyebabkan perubahan cepat dalam konformasi karena pembatasan diperkenalkan oleh kelompok karboksil. Mereka terpasang karboksil-dihentikan rantai poli-NIPAAm untuk (aminopropil) silika dan digunakan sebagai bahan kemasan untuk analisis HPLC steroid. Pemisahan berlangsung di bawah kondisi isokratik menggunakan air murni sebagai fase gerak, dan mengontrol suhu menggunakan air mandi. Satu catatan penting adalah bahwa mereka mampu menggeser LCST dari 32 ° C sampai 20 ° C dengan membuat 1M solusi dalam konsentrasi NaCl. Dari 5 steroid dan benzene, hanya testosteron bisa diselesaikan dari puncak lain di bawah LCST (5 o C, LCST = 20 o C di 1M NaCl). Di atas LCST (25 o C, LCST = 20 o C di 1M NaCl), semua puncak diselesaikan dengan baik, dan ada kecenderungan meningkat dari waktu retensi versus suhu hingga 50 ° C.

[ sunting ]Ukuran Pengecualian Kromatografi

Sebelum studi ini, analisis HPLC yang disetel dengan memodifikasi fase gerak dan diam saja. elusi Gradient untuk HPLC hanya berarti mengubah rasio pelarut untuk meningkatkan efisiensi kolom, dan hal ini membutuhkan penggunaan canggih mekanisme pemompaan pelarut bersama dengan langkah-langkah ekstra dan tindakan pencegahan dalam analisis kromatografi. Tercerahkan dengan prospek menggunakan elutions gradien suhu untuk analisis HPLC, Hosoya et al. berusaha untuk membuat permukaan modifikasi HPLC fase stasioner lebih mudah diakses. Studi mereka menggunakan tipe kopolimerisasi Tempel poli-NIPAAm ke bahan polimer berpori [9] . Dalam persiapan situ dibandingkan penggunaan sikloheksanol dan toluena sebagai porogens dalam penyusunan biji polistiren dimodifikasi. Reverse-bertahap kromatografi ukuran pengecualian (SEC) menunjukkan ukuran pori dan distribusi ukuran pori partikel dan ketergantungan pada suhu. Sikloheksanol bertindak sebagai porogen berhasil menunjukkan hubungan tergantung ukuran pori terhadap suhu.Penggunaan toluena sebagai sebuah porogen memberikan hasil yang mirip dengan partikel berpori dimodifikasi. Hal ini menunjukkan bahwa poli-NIPAAm dapat berhasil dicangkokkan ke permukaan dan dalam pori-pori bahan berpori. Penerapan teknik persiapan menimbulkan ukuran pori merdu. Suhu elutions gradien dapat dimanfaatkan untuk meningkatkan efisiensi kolom melalui perubahan ukuran pori di SEC. Mekanisme dari perubahan ukuran pori sederhana, pori-pori yang lebih kecil di bawah LCST karena rantai memanjang poli-NIPAAm dalam pori-pori, dengan meningkatnya suhu dan atas LCST, rantai menarik kembali ke dalam formasi globular meningkatkan ukuran pori.

[ sunting ]Ion-Exchange Kromatografi

Modifikasi juga telah diperpanjang lampiran hidrofobik dan hidrofilik masa lalu, dibebankan senyawa juga telah diperkenalkan untuk TRPs. Kobayashi et al. sebelumnya dilakukan modifikasi berhasil memisahkan senyawa ion bioaktif, dan melanjutkan sukses bahwa untuk meningkatkan efisiensi pemisahan senyawa bioaktif [10] . Metode umum peptida angiotensin memisahkan telah melibatkan reverse-bertahap kromatografi cair kinerja tinggi (RP-HPLC) dan kromatografi kation-tukar. RP-HPLC memerlukan penggunaan pelarut organik, yang tidak disukai dan tren saat ini bergerak jauh dari itu. kromatografi interaksi hidrofobik membutuhkan elutions konsentrasi garam tinggi dan membutuhkan pembersihan eluen untuk menghilangkan garam. Untuk mengatasi kekurangan dari metode sebelumnya, kelompok asam akrilik Kobayashi's dicangkokkan (akrilat anionik dalam kondisi netral) dan tert-butylacrylamide (hidrofobik) monomer ke poli-NIPAAm, mengakibatkan poli--co NIPAAm-aac-co-tBAAm (IAtB) silika ke manik-manik sebagai media fase diam. Alasan untuk menggabungkan kedua senyawa ion dan hidrofobik adalah segi. Senyawa ion meningkatkan interaktivitas dengan spesies ionik, tetapi menimbulkan LCST secara signifikan.Penambahan hidrofobik melawan terhadap meningkatkan di LCST dan menurunkan ke nilai lebih standar, tetapi juga berinteraksi dengan permukaan hidrofobik senyawa biologis. Hal ini mengakibatkan elusi sukses dan diselesaikan peptida angiotensin. Selain itu, mereka dapat menyesuaikan faktor retensi untuk analit

melalui elusi gradien suhu isokratik. elutions Ideal terjadi pada 35 o C, namun penurunan suhu sampai 10 o C atau menaikkan ke 50 o C disebabkan elutions lebih cepat either way. Ini merupakan indikasi yang kuat bahwa interaksi elektrostatik dan hidrofob dapat juga dipengaruhi oleh perubahan suhu. Keuntungan utama dari menerapkan keberhasilan penelitian ini mencakup fleksibilitas fasa diam dan bioaktivitas menjaga dari analit.

Dalam sebuah studi terpisah, Ayano et al. diubah poli-NIPAAm dengan N kationik, N-dimethylaminopropylacrylamide (DMAPAAm) dan BMA hidrofobik dan membentuk IDB dicangkok itu ke manik-manik silika [11] . Penelitian ini paralel dengan kelompok Kobayashi, tetapi juga digunakan untuk menyesuaikan perubahan pH LCST tersebut. Pengaruh pH pada LCST adalah sebagai berikut, dari nilai dataran tinggi antara pH 4,5 dan pH 6,0, LCST menurun hingga pH 9 dan pH di bawah 4,5. Hal ini dapat diinterpretasikan sebagai membutuhkan kondisi sedikit dasar atau agak asam, sebagai wilayah pH 4,5-6,0 memegang nilai maksimum LCST, kondisi kurang baik. Mereka menggunakan properti ini untuk memisahkan beberapa obat anti-inflamasi non-steroid (NSAID). Analisis obat asam (asam salisilat: BA, SA, MS, dan As) dilakukan di bawah pH 4,5. MS hidrofobik hanya waktu retensi yang dipengaruhi oleh peningkatan suhu pada kolom tanpa penukar-anion tersembuhkan diubah (IB kolom). Namun, dengan hadir anion-penukar, dipisahkan obat asam ditahan lagi pada suhu di bawah LCST, dan lebih pendek pada suhu di atas LCST. Ketika kolom IBD dibandingkan dengan kolom PNIPAAm baru-baru ini didirikan, gaya elektrostatik menunjukkan kemampuan retensi sangat tinggi senyawa dibebankan dari pendahulunya hidrofilik nya. Fase stasioner tunggal dapat mencapai pemisahan farmasi berdasarkan interaksi hidrofobik, interaksi hidrofilik, dan interaksi elektrostatik hanya dengan mengatur suhu (ketika menyesuaikan pH untuk men-tweak LCST tersebut).

[ sunting ]Afinitas Kromatografi

enzim Selektif dan perpisahan antibodi dapat dicapai dengan menggunakan kelompok akhir tertentu yang konjugat dengan senyawa tertentu. Hal ini menghasilkan pembentukan konjugat polimer-enzim yang dapat reversibel diendapkan dan dibubarkan oleh perubahan suhu. Dalam Chen dan Teman-studi Hoffman, 1993, N-hydroxysuccinimide (NHS) gugus fungsi ester berakhir pada NIPAAm digunakan untuk konjugasi selektif dengan β-D-glucosidase [12] . Mereka menemukan bahwa enzim konjugasi bisa berulang kali diendapkan dan terlarut dalam larutan dan masih mempertahankan aktivitas enzimatik yang cukup.

Dalam sebuah penelitian yang dipublikasikan pada tahun 1998, Hoshino et al. menyiapkan TRP dengan ligan maltosa, dievaluasi dengan concanavalin A (Con A), dan berusaha untuk memurnikan / memisahkan α-glukosidase (AG), suatu senyawa termolabil [13] . Karena tujuannya adalah untuk selektif mengisolasi enzim termolabil, sebuah TRP dengan nilai LCST kecil yang diinginkan. Untuk disesuaikan dengan kondisi ini, TRP terpilih poli (N-acryloylpiperidine)-cysteamine (PAP), yang memiliki LCST dari 4 o C. Terikat pada molekul maltosa tersembuhkan terikat mempertahankan afinitas untuk kedua analit, sehingga dimodifikasi TRP, pAPM, bertemu dengan kondisi

kritis persyaratan suhu eksternal dan afinitas untuk kedua analit target. Sifat kelarutan berubah dari 4 o C (larut) sampai 8 o C (larut). Beberapa reagen diuji untuk pemulihan A Con oleh desorpsi yang mengikat afinitas yang lebih tinggi kepada Con A daripada maltosa. Reagen ini adalah α-D-glucopyranoside, D-mannose, metil α-D-mannopyranoside, dan glukosa. α-D-mannopyranoside adalah yang paling efektif untuk desorbing Con A dari pAPM di hampir 100% setelah 1 jam. Sebagai kontrol, pAPM digunakan untuk mengikat Con A dari ekstrak kasar, yang menemukan beberapa pickup dari kotoran tetapi masih berhasil memulihkan 80% dari Con A. ini mencontohkan kebutuhan gugus selektif, maltosa tidak bertempat tinggal di antara mereka. Akhirnya, penerapan pAPM diuji dengan mencoba untuk memisahkan AG dari ekstrak ragi dalam kondisi suhu rendah. Sebagai kesimpulan, pAPM ditemukan untuk memulihkan 68% dari kegiatan AG diuji terhadap, maltosa menjadi reagen desorpsi dipilih.

Perkembangan lain yang menarik untuk AC terlibat dengan pemisahan antibodi menggunakan kombinasi lain TRP-ligan. Anastase-Ravion et al. melampirkan dekstran derivatif ke poli klasik-NIPAAm untuk menghasilkan) poli (NIPAAm-DD, dan menggunakan fase diam untuk memisahkan antibodi poliklonal dari serum kelinci subkutan [14] . Dari penelitian ini, derivatif dekstran pilihan adalah karboksimetil dekstran benzylamide sulfonat / sulfat, dan ketika terikat pada TRP adalah berlabel poli (NIPAAm)-CMDBS. Para LCST untuk poli (NIPAAm)-CMDBS dibangkitkan dari 32 o C sampai 33 o C. Untuk menguji keberhasilan afinitas pengikatan, antibodi yang dielusi dengan buffer glisin (disesuaikan dengan pH 2.6 dengan HCl).

Sebuah studi dengan hasil yang sangat menjanjikan keluar dari Departemen Teknik di Universitas Washington, 2003. Penelitian ini Malmstadt et al. bergabung perkembangan baru dalam kromatografi afinitas dengan perangkat mikofluida. Setelah perkembangan teknologi mikofluida, kopling dengan kromatografi afinitas berarti memodifikasi permukaan saluran, pengemasan dilapisi manik-manik, atau pengemasan dengan bahan berpori dilapisi, yang tidak memungkinkan untuk mengisi kolom [15] . Ini menghasilkan keterbatasan yang mencegah bahan kemasan dari yang berubah atau kolom yang sedang regenerasi. Pendekatan yang mereka ambil untuk mengatasi tantangan-tantangan tersebut berarti memasukkan TRP partikel sebagai fase diam reversibel amobil. Apa yang membedakan ini pengembangan dari metode AC lain adalah bahwa manik-manik di mana TRP dimodifikasi melekat reversibel dapat mengikuti permukaan bagian dalam saluran mikofluida. Perumusan dari bead pintar matriks kompleks sedikit, tetapi secara umum poli-NIPAAm yang diubah dua kali, pertama dengan NHS, kemudian dengan poli (etilena glikol)-biotin (PEG-b) menghasilkan manik-manik PEG-b/pNIPAAm. Permukaan bagian dalam saluran mikofluida terdiri dari poli (etilena tereftalat), dimana PEG-b/pNIPAAm reversibel mengikat manik-manik di atas LCST tersebut. Ketika larutan sampel dilewatkan melalui saluran, analit target mengikat ke ligan biotin. Suhu kemudian bisa dibawa di bawah LCST untuk memisahkan dan menjadi dikeluarkan dari saluran batin. Hal ini memungkinkan untuk sistem mahir untuk menjadi reloaded dengan fase diam dalam kondisi ringan. Mereka berhasil dipisahkan dan dielusi streptavidin. aplikasi lebih lanjut

dari prosedur ini memungkinkan untuk kolom AC portabel yang dapat dikemas di situs dan digunakan untuk pemisahan analitik lokal atau klinis cairan biologis kompleks.

[ sunting ]Perkembangan di Ekstraksi dan Prekonsentrasi

TRPs tidak perlu dipandang sebagai fasa diam kromatografi sederhana, mereka juga dapat digunakan sebagai pengkelat senyawa ekstraksi. Dengan modifikasi yang tepat dari-poli NIPAAm atau TRP lain, bagian tersebut dapat kompleks dengan analit target, maka suhu larutan dapat dibawa di atas LCST di mana titik TRP dimodifikasi dikomplekskan dengan analit akan mengendap. endapan yang kemudian dapat dikumpulkan dan diperkenalkan kembali ke solusi volume jauh lebih kecil. Pada saat itu suhu dari solusi volume yang lebih kecil harus di bawah LCST, yang akan melarutkan yang TRP dimodifikasi, dan reagen yang mengambil keuntungan dari kesetimbangan kimia bisa memaksa analit kembali ke dalam larutan. Contoh dari jenis aplikasi ini ditunjukkan dengan metode dieksplorasi oleh Saitoh et al. [16] . Beberapa gugus pengujian untuk ekstraksi beberapa kation logam berat, tembaga (II), nikel (II), kobalt (II), timbal (II), dan kadmium (II). Beberapa gugus diuji adalah N, N, N ", N"-tetramethylethylene-diamina (TEMED), imidazol (Im), asam karboksilat (COOH), asam iminodiacetic (IDA), dan 1-etil-3-(3 - dimethylaminopropyl) karbodiimida (EDC). Pencabutan hasil ditemukan poli-NIPAAm-Im, relatif berhasil untuk mengeluarkan semua logam kecuali untuk kadmium (II). Ekstraksi yang paling efisien dicapai oleh poli-NIPAAm-IDA dengan memulihkan lebih dari 95% dari semua logam yang diuji. Untuk menganalisis ekstrak, polimer dilarutkan dalam N, N-dimetilformamida (DMF). Hasilnya dibandingkan dengan metode tradisional kromatografi pertukaran ion. Satu-satunya utama dari metode ini adalah penggunaan pelarut organik, tapi volume kecil itu merupakan faktor yang relatif kecil.

Contoh lain menunjukkan dibantu TRP pengendapan makromolekul asam untuk aplikasi ekstraksi RNA dan glukosaminoglikan dari sel budidaya [17] . Prosedur yang rumit digunakan untuk memodifikasi poli-NIPAAm dengan bagian poli-L-lisin, menghasilkan polimer-PL (poli-NIPAAm-PL). Dalam larutan garam 0.5m, poli-NIPAAm diperkenalkan dan kemudian membawa beberapa derajat Celcius di atas LCST, ketika polimer presipitat dengan makromolekul asam ditangkap. Endapan kemudian dapat ditempatkan dalam volume yang lebih kecil pada konsentrasi garam yang lebih tinggi (di atas 1M) dan di bawah LCST, pada titik mana analit akan dirilis. Setelah ini, prosedur desalting diperlukan, menguntungkan, tetapi masih tidak memerlukan penggunaan pelarut organik. Hasilnya dianalisis dengan elektroforesis gel agarosa untuk memverifikasi kehadiran analit target terhadap menjalankan standar.Penelitian ini memiliki aplikasi potensial yang luas menghilangkan gangguan dari studi biologi secara selektif menghilangkan analit target. Penelitian lebih lanjut akan menyelidiki gugus lain untuk ekstraksi makromolekul dengan sifat yang berbeda (seperti dalam makromolekul multi-anionik non).

[ sunting ]kini dan arah masa depan

investigasi yang lebih baru telah meneliti perubahan konformasi lain yang pengalaman TRPs. Polimer ini tidak hanya mengubah kondisi kelarutan mereka, tetapi juga dapat mengubah ukuran mereka dalam larutan. Castellanos et al. digunakan litografi untuk pola hidrogel poli-NIPAAm pada permukaan padat. Karena perubahan suhu, hidrogel bisa membengkak (mengambil lebih pelarut) atau runtuh (mengusir pelarut) dalam hubungan dihitung dengan suhu [18] . Selektivitas untuk menargetkan analit bergantung pada ukuran celah dibuat dalam hidrogel, yang bisa membengkak hingga 70% dalam arah lateral. Hal ini mengurangi ukuran celah di hidrogel. Ukuran gap dapat berkisar dari 3 pM bawah LCST sampai 12 pM atas LCST. Metode ini berjudul sebagai suatu teknik "menangkap dan release". Untuk menguji metode, kelompok berusaha untuk selektif memisahkan 2 ukuran mikrosfer polistirena, dengan ukuran diameter 6 pM dan 20 pM. Metode ini divalidasi oleh beberapa teknik pencitraan mikroskopis untuk mengakomodasi setup, dan itu diverifikasi bahwa setelah menaikkan suhu di atas LCST, dan menurunkan di bawah ini LCST lagi, efektif hidrogel terjebak semakin kecil 6 pM partikel dan tidak lebih besar 20 pM partikel. Pengembangan lebih lanjut akan memerlukan mengurangi ukuran kesenjangan untuk berbagai skala nano terkendali.

Lebih baru-baru ini telah melihat perkembangan munculnya dicantumkan polimer molekuler (MIP). Ini mengambil keuntungan dari pengakuan molekul alami antara senyawa biologis, serta sifat pembengkakan dan kontraktor dari TRPs tertentu. Satu studi et al Suedee. (2006) menggabungkan teknik pencetakan molekuler dengan kemajuan dalam penelitian TRPs untuk merancang template yang berhasil dapat mengekstrak dopamin kutub dari sampel urin [19] . imprinting Molekuler kebanyakan melibatkan penggunaan N-polyacrylamides tersubstitusi. Dalam studi ini, mereka digunakan (N, N-methylene-bis-akrilamida cross-linked) polimer. Molekul template dalam kasus ini adalah dopamin. Hal ini terbukti efektif mengikat dan melepaskan dopamin, epinefrin, isoproterenol, salbutamol, dan serotonin dengan menyesuaikan suhu dalam sistem ekstraksi fasa padat. The LCST polimer tidak ditetapkan, karena perubahan konformasi terus menerus dan tidak ada suhu kritis untuk perubahan fase utama. Percobaan menguji efisiensi selama rentang 25-70 o C. adsorpsi selektif dapat dicapai dengan memilih suhu ekstraksi yang paling efisien untuk analit target, karena tidak semua senyawa yang diekstraksi paling efisien pada suhu yang sama.

[ sunting ]Pentingnya Thermoresponsive Polimer di Pengobatan

Hal ini dapat digunakan untuk berbagai aplikasi biomedis termasuk

drug delivery rekayasa jaringan bio molekul teknik fungsional bagi perilaku cerdas

[ sunting ]Catatan Konklusif

Ketika diperkenalkan dengan kemungkinan memiliki pemisahan serbaguna tersedia beberapa dan teknik ekstraksi yang hanya memerlukan variabel eksternal mudah dikendalikan untuk mengubah properti yang lebih ideal untuk analisis analit tertentu, dan bahwa orang-orang teknik yang sama ramah lingkungan, maka Anda mengintip ke masa depan analisis kimia. Banyak perkembangan telah membuka jalan bagi tidak hanya aplikasi siap digunakan, tetapi juga penelitian mudah beradaptasi untuk kemungkinan tak terbatas. Analisis manfaat besar dari sifat poli (-isopropil akrilamida N) (PNIPAAm) karena itu memiliki paling terkemuka tahap transisi dan tercepat dari semua polimer thermoresponsive [20] .

Selain itu, manfaat termal terkait kromatografi gas sekarang dapat diterapkan untuk kelas senyawa yang dibatasi untuk kromatografi cair karena thermolability mereka. Di tempat elusi gradien pelarut, TRPs memungkinkan penggunaan gradien temperatur di bawah isokratik kondisi air murni [21] . Fleksibilitas dari sistem ini dikontrol tidak hanya melalui perubahan suhu, tetapi melalui penambahan memodifikasi gugus yang memungkinkan untuk pilihan interaksi hidrofobik yang disempurnakan, atau dengan memperkenalkan prospek interaksi elektrostatik [22] . Perkembangan ini telah memperkenalkan perbaikan besar bidang HIC, SEC, IEC, dan pemisahan AC serta pseudo ekstraksi fasa padat (pseudo karena transisi fase). Pertumbuhan aplikasi TRP juga bergabung dengan teknologi baru dalam kasus MIP dan nanoteknologi. Tidak ada keraguan bahwa polimer responsif suhu akan tumbuh semakin populer sebagai peraturan lingkungan hidup menjadi lebih ketat dan peneliti menemukan kesederhanaan mengontrol kondisi kromatografi lebih sedikit pada saat eksplorasi dari topik.

[ sunting ]Referensi

1. ̂  Pankaj Maharjan, Brad W. Woonton, Louise E. Bennett, Geoffrey W. Smithers, Kirthi DeSilva, Milton TW Hearn, Ilmu Makanan Inovatif dan Emerging Technologies (2008), 9, 232-242.

2. ̂  Michael Heskins, James E. Guillet, J. Macromol. Sci. Chem. (1968), 2 (8), 1441-1455.3. ̂  Hideko Kanazawa, Kazuo Yamamoto, Yoshikazu Matsushima, Takai Nobuharu,

Akihiko Kikuchi, Yasuhisa Sakurai, Teruo Okano, Anal. Chem. (1996), 68, 100-105.4. ̂  Markus Gewehr, Katsunori Nakamura, Ise Norio, Makromol. Chem. (1992), 193, 249-

256.5. ̂  Hideko Kanazawa, Kashiwase Yuki, Kazuo Yamamoto, Yoshikazu Matsushima,

Akihiko Kikuchi, Yasuhisa Sakurai, Teruo Okano, Anal. Chem. (1997), 69, 823-830.6. ̂  Hideko Kanazawa, Tastuo Sunamoto, Yoshikazu Matsushima, Akihiko Kikuchi, Teruo

Okano, Anal. Chem. (2000), 72, 5961-5966.7. ̂  Chikako Sakamoto, Yuji Okada, Hideko Kanazawa, Akihiko Kikuchi, Teruo Okano,

Kagaku Bunseki (2003), 52 (10), 903-906.8. ̂  Hideko Kanazawa, Kazuo Yamamoto, Yoshikazu Matsushima, Takai Nobuharu,

Akihiko Kikuchi, Yasuhisa Sakurai, Teruo Okano, Anal. Chem. (1996), 68, 100-105.9. ̂  Ken Hosoya, Etsuko Sawada, Kimata Kazuhiro, Takeo Araki, Nabuo Tanaka, Fréchet

MJ Jean, J. Macromol. (1994), 27, 3973-3976.10. ̂  Juni Kobayashi, Akihiko Kikuchi, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano, Anal. Chem. (2003),

75, 3244-3249.

11. ̂  Eri Ayano, Nambu Kyoko, Sakamoto Chikako, Kanazawa Hideko, Akihiko Kikuchi, Teruo Okano, J. Chromatogr. A (2006), 1119, 58-65.

12. ̂  Guohua Chen, Allan S. Hoffman, Chem Bioconjugate. (1993), 4, 509-514.13. ̂  Kazuhiro Hoshino, Masayuki Taniguchi, Kitao Taichi, Morohashi Shoichi, Sasakura

Toshisuke, Biotech. & Bioeng. (1998), 60 (5), 568-579.14. ̂  S. Anastase-Ravion, Z. Ding, A. Pelle, AS Hoffman, D. Letourneur, J. Chromatogr. B

(2001), 761, 247-254.15. ̂  Nuh Malmstadt, Allan Paul, Yager S. Hoffman, Patrick S. Stayton, Anal. Chem. (2003),

75, 2943-2949.16. ̂  T. Saitoh, F. Satoh, M. Hiraide, Talanta (2003), 61, 811-817.17. ̂  Tomonori Hayashi, Shin-ichi Yasueda, Yasuharu Nakanishi, Hiroko Ohta, Mitsuhiro

Kinoshita, Yasuyoshi Miki, Takashi Masuko, Kazuaki Kakehi, Analis (2004), 129, 421-427.

18. ̂  Alexandro Castellanos, Samuel J. DuPont, Agustus J. II Heim, Matthews Garrett, Peter G. Stroot, Wilfrido Moreno, Ryan G. Toomey, Langmuir (2007), 23, 6391-6395.

19. ̂  Roongnapa Suedee, Seechamnanturakit Vatcharee, Canyuk Bhutorn, Chitchamai Ovatlarnporn, Gary P. Martin, J. Chromatogr. A (2006), 1114, 239-249.

20. ̂  Hideko Kanazawa, Anal. Bioanal. Chem. (2004), 378, 46-68.21. ̂  Hideko Kanazawa J., September Sci. (2007), 30, 1646-1656.22. ̂  Eri Ayano, Kanazawa Hideko, J. September Sci. (2006), 29, 738-749.

Kategori : Polymer kimia

Kultur selDari Wikipedia, ensiklopedia bebas

Epitel sel dalam budaya, diwarnaiuntuk keratin (merah) dan DNA (hijau)

budaya Cell adalah proses kompleks yang sel-sel yang tumbuh di bawah kondisi yang terkendali. Dalam

prakteknya, istilah "sel" budaya telah datang untuk merujuk pada kultur sel yang berasal dari

multisel eukariota , terutama hewan sel. Namun, ada juga budaya tanaman , jamur danmikroba ,

termasuk virus , bakteri dan protista . Perkembangan historis dan metode kultur sel secara erat berhubungan

dengan yang kultur jaringan dan kultur organ .

kultur sel hewan menjadi umum laboratorium teknik pada pertengahan 1900-an, [1] tetapi konsep

mempertahankan jalur sel hidup terpisah dari jaringan sumber aslinya ditemukan di abad ke-19. [2]

Isi 

[hide]

1 Sejarah

2 Konsep dalam kultur sel mamalia

o 2.1 Isolasi sel

o 2.2 Mempertahankan sel-sel dalam budaya

o 2.3 Cell line kontaminasi silang

o 2.4 Manipulasi sel budidaya

2.4.1 Media perubahan

2.4.2 Passaging sel

2.4.3 Transfeksi dan transduksi

o 2,5 Didirikan baris sel manusia

o 2.6 Generasi hibridoma

3 Aplikasi kultur sel

o 3.1 Kultur jaringan dan rekayasa

o 3.2 Vaksin

4 Budaya non-mamalia sel

o 4.1 Metode kultur sel Tanaman

o 4.2 ragi budaya metode dan Bakteri

o 4.3 Metode budaya Viral

5 garis sel Common

6 Daftar jalur sel

7 Lihat juga

8 Referensi dan catatan

9 Pranala luar

[ sunting ]Sejarah

The-abad Inggris 19 fisiolog Sydney Ringer dikembangkan larutan garam yang mengandung natrium klorida,

kalium, kalsium dan magnesium yang cocok untuk menjaga detak hati yang hewan terisolasi di luar

tubuh. [1] Pada tahun 1885 Wilhelm Roux dihapus sebagian meduler piring dari embrio ayam dan dipelihara

dalam hangat larutan garam selama beberapa hari, menetapkan prinsip kultur jaringan. [3] Ross Granville

Harrison , bekerja di Johns Hopkins Medical School dan kemudian di Universitas Yale , hasil percobaan yang

dipublikasikan dari 1907 -1910, menetapkan metodologi kultur jaringan . [4]

teknik kultur sel yang canggih secara signifikan di tahun 1940-an dan 1950-an untuk mendukung penelitian

di virologi . virus Bertumbuh dalam kultur sel memungkinkan penyusunan dimurnikan virus untuk

pembuatan vaksin . Para suntik vaksin polio dikembangkan oleh Jonas Salk adalah salah satu produk pertama

yang diproduksi secara massal dengan menggunakan teknik kultur sel. Vaksin ini dimungkinkan oleh penelitian

kultur sel dari John Franklin Enders , Thomas Huckle Weller , dan Frederick Chapman Robbins , yang

dianugerahi Hadiah Nobel untuk penemuan mereka tentang metode pertumbuhan virus pada

monyet ginjal kultur sel.

[ sunting ]Konsep dalam kultur sel mamalia

[ sunting ]Isolasi sel

Sel dapat diisolasi dari jaringan untuk ex vivo budaya dalam beberapa cara. Sel dapat dengan mudah

dimurnikan dari darah, namun hanya sel darah putih mampu tumbuh dalam budaya. sel mononuklear dapat

dilepaskan dari jaringan lunak oleh pencernaan enzimatis dengan enzim seperti kolagenase , tripsin ,

atau pronase , yang memecah matriks ekstraseluler . Atau, potongan jaringan dapat ditempatkan pada media

pertumbuhan , dan sel-sel yang tumbuh keluar yang tersedia untuk budaya. Metode ini dikenal sebagai budaya

eksplan .

Sel yang berbudaya langsung dari subjek yang dikenal sebagai sel primer. Dengan pengecualian beberapa

berasal dari tumor, budaya sel yang paling utama memiliki jangka hidup terbatas. Setelah sejumlah doubling

populasi (disebut batas Hayflick ) sel menjalani proses penuaan dan berhenti membagi, sedangkan umumnya

mempertahankan kelangsungan hidup.

Sebuah diabadikan sel garis atau didirikan telah memperoleh kemampuan untuk berkembang biak tanpa

batas baik melalui mutasi acak atau modifikasi yang disengaja, seperti

buatan ekspresi dari telomerase gen . Ada banyak mapan sel baris wakil dari jenis sel tertentu.

[ sunting ]Mempertahankan sel-sel dalam budaya

Sel yang tumbuh dan dipelihara pada yang sesuai suhu dan campuran gas (biasanya, 37 ° C , 5% CO 2 untuk

sel mamalia) dalam inkubator sel . Budaya kondisi sangat bervariasi untuk setiap jenis sel, dan variasi kondisi

untuk jenis sel tertentu dapat mengakibatkan berbagai fenotipe diungkapkan.

Selain suhu dan campuran gas, faktor yang paling sering bervariasi dalam sistem kultur adalah medium

pertumbuhan. Resep untuk media pertumbuhan dapat bervariasi dalam pH , konsentrasi glukosa, faktor

pertumbuhan , dan adanya zat gizi lain. faktor pertumbuhan yang digunakan untuk melengkapi media sering

berasal dari hewan darah , seperti serum betis .Salah satu komplikasi yang berasal dari bahan darah adalah

potensi kontaminasi budaya dengan virus atau prion , khususnya di bioteknologi aplikasi medis. praktek saat ini

adalah untuk meminimalkan atau menghilangkan penggunaan bahan-bahan ini sedapat mungkin, namun ini

tidak selalu bisa dicapai. Alternatif strategi melibatkan sumber darah hewan dari negara-negara dengan

minimum BSE / TSE risiko seperti Australia dan Selandia Baru, dan menggunakan nutrisi dimurnikan

konsentrat yang berasal dari serum di tempat serum seluruh binatang untuk kultur sel. [5]

kepadatan Plating (jumlah sel per volume medium kultur) memainkan peran penting untuk beberapa jenis

sel. Sebagai contoh, kepadatan plating yang lebih rendah membuat sel-sel granulosa menunjukkan produksi

estrogen, sedangkan kepadatan plating yang lebih tinggi membuat mereka muncul

sebagai progesteron memproduksi sel-sel teka lutein . [6]

Sel dapat tumbuh di suspensi atau budaya patuh. Beberapa sel alami hidup di suspensi, tanpa melekat pada

permukaan, seperti sel-sel yang ada dalam aliran darah. Ada juga sel baris yang telah dimodifikasi untuk dapat

bertahan hidup dalam budaya suspensi sehingga mereka dapat tumbuh untuk kerapatan yang lebih tinggi dari

kondisi patuh akan memungkinkan. sel Pemeluk memerlukan permukaan, seperti budaya plastik jaringan

atau microcarrier , yang mungkin dilapisi dengan komponen matriks ekstraseluler untuk meningkatkan sifat

adhesi dan memberikan sinyal lainnya yang diperlukan untuk pertumbuhan dan diferensiasi. Kebanyakan sel-

sel yang berasal dari jaringan padat yang patuh. Tipe lain dari budaya patuh adalah organotypic budaya yang

melibatkan sel-sel tumbuh dalam lingkungan tiga dimensi yang bertentangan dengan dimensi budaya piring-

dua. Sistem budaya 3D biokimia dan fisiologis lebih mirip dengan di jaringan vivo, namun secara teknis

menantang untuk menjaga karena banyak faktor (misalnya difusi).

[ sunting ]Cell line kontaminasi silang

Cell line kontaminasi silang dapat menjadi masalah bagi ilmuwan yang bekerja dengan sel kultur. Studi

menunjukkan bahwa antara 15-20% dari waktu, sel-sel yang digunakan dalam percobaan telah salah

mengartikannya atau terkontaminasi dengan baris lain sel. [7] [8] [9] Masalah dengan garis silang kontaminasi sel

bahkan telah terdeteksi di baris dari NCI-60 panel, yang digunakan secara rutin untuk-screening studi

obat. [10] [11] garis repositori sel utama termasuk Amerika Tipe Budaya Collection (ATCC) dan Koleksi Jerman

Mikroorganisme dan Cell Budaya (DSMZ) telah menerima lini sel kiriman dari para peneliti yang salah

diidentifikasi oleh peneliti. [10] [12] kontaminasi tersebut menimbulkan masalah bagi kualitas penelitian yang

dihasilkan dengan menggunakan garis kultur sel, dan repositori utama sekarang mengautentikasi pengiriman

cell line semua. [13] ATCC menggunakanpendek tandem repeat (STR) DNA fingerprinting untuk mengotentikasi

garis selnya. [14]

Untuk mengatasi masalah ini lini sel-kontaminasi silang, peneliti dianjurkan untuk mengotentikasi baris sel

mereka pada bagian awal untuk menentukan identitas dari garis sel.Otentikasi harus diulang sebelum saham

lini pembekuan sel, setiap dua bulan selama kultur aktif dan sebelum setiap publikasi data penelitian yang

dihasilkan dengan menggunakan garis sel. Ada banyak metode untuk mengidentifikasi baris sel

termasuk isoenzyme analisis, manusia limfosit antigen (HLA) mengetik, analisis kromosom, Karyotyping,

Morfologi dananalisis STR . [14]

Satu signifikan sel-line kontaminasi silang adalah abadi Hela garis sel.

[ sunting ]Manipulasi sel budidaya

Seperti umumnya sel terus membelah dalam kultur, mereka umumnya tumbuh untuk mengisi area yang

tersedia atau volume. Hal ini dapat menghasilkan beberapa hal:

Hara deplesi di media pertumbuhan

Akumulasi apoptosis / nekrotik (mati) sel.

Sel-untuk-sel menghubungi dapat merangsang siklus penangkapan sel,

menyebabkan sel untuk berhenti membelah dikenal sebagai inhibisi

menghubungi atau penuaan .

Sel-untuk-sel menghubungi dapat merangsang diferensiasi selular .

Di antara manipulasi umum dilakukan pada sel kultur adalah media perubahan, sel passaging, dan sel

transfecting. Biasanya ini dilakukan dengan menggunakan metode kultur jaringan yang mengandalkan

pada teknik steril . teknik steril bertujuan untuk menghindari kontaminasi dengan bakteri, ragi, atau garis sel

lain. Manipulasi biasanya dilakukan dalam tudung Keamanan Hayati atau aliran laminar kabinet untuk

mengeluarkan kontaminasi mikro-organisme. Antibiotik (misalnya penisilin dan streptomisin ) dan antijamur

(misalnya Amfoterisin B) juga dapat ditambahkan ke media pertumbuhan.

Seperti sel-sel mengalami proses metabolisme, asam diproduksi dan pH menurun. Seringkali, suatu indikator

pH ditambahkan ke media dalam rangka untuk mengukur penipisan gizi.

[ sunting ]Media perubahan

Dalam kasus budaya yang patuh, media dapat dihilangkan langsung oleh aspirasi dan diganti.

[ sunting ]sel Passaging

Artikel utama: Passaging

Passaging (juga dikenal sebagai sel subkultur atau membelah) melibatkan mentransfer sejumlah kecil sel ke

dalam pembuluh baru. Sel dapat dibudidayakan untuk waktu yang lebih lama jika mereka dibagi secara teratur,

karena menghindari penuaan yang terkait dengan kepadatan sel berkepanjangan tinggi. budaya Suspensi

mudah passaged dengan sejumlah kecil budaya mengandung beberapa sel dilarutkan dalam volume yang

lebih besar media segar. Untuk budaya yang patuh, sel pertama harus terpisah, ini umumnya dilakukan

dengan campuran tripsin - EDTA , namun enzim campuran lainnya sekarang tersedia untuk tujuan

ini. Sejumlah kecil sel terpisah kemudian dapat digunakan untuk bibit budaya baru.

[ sunting ]Transfeksi dan transduksi

Artikel utama: Transfeksi

Artikel utama: Transformation (genetika)

Metode lain yang umum untuk memanipulasi sel melibatkan pengenalan DNA asing oleh transfeksi . Hal ini

sering dilakukan untuk menyebabkan sel untuk mengekspresikan proteinyang menarik. Baru-baru ini,

transfeksi dari RNAi konstruksi telah direalisasikan sebagai mekanisme yang nyaman untuk menekan ekspresi

gen tertentu / protein. DNA juga dapat disisipkan ke dalam sel dengan menggunakan virus , dalam metode

disebut transduksi , infeksi atau transformasi . Virus, sebagai agen parasit, sangat cocok untuk

memperkenalkan DNA ke dalam sel, karena ini adalah bagian dari program normal reproduksi.

[ sunting ]manusia jalur sel Didirikan

Salah satu jalur sel manusia yang paling awal, turun dari Henrietta Lacks , yang meninggal dari sel-sel kanker yang berasal

dari, berbudaya HeLa sel yang ditampilkan di sini telah diwarnai dengan Hoechstmengubah mereka inti biru.

baris Cell yang berasal dengan manusia telah menjadi agak kontroversial di bioetika , karena mungkin hidup

lebih lama organisme induknya dan kemudian digunakan dalam penemuan perawatan medis

menguntungkan. Dalam keputusan perintis di daerah ini, Mahkamah Agung California diadakan di Moore v.

Bupati dari University of California bahwa pasien manusia memiliki hak properti tidak dalam baris sel yang

berasal dari organ dikeluarkan dengan persetujuan mereka. [15]

[ sunting ]Generasi hibridoma

Untuk detail lebih lanjut tentang topik ini, lihat hibridoma .

Hal ini dimungkinkan untuk sel sekering normal dengan garis sel diabadikan. Metode ini digunakan untuk

menghasilkan antibodi monoklonal. Secara singkat, limfosit diisolasi dari limpa (atau mungkin darah)

dari diimunisasi hewan yang dikombinasikan dengan garis sel myeloma abadi (B garis keturunan sel) untuk

menghasilkan hibridoma yang memiliki kekhususan antibodi lymphoctye primer dan keabadian myeloma

tersebut. medium selektif pertumbuhan (HA atau HAT) digunakan untuk memilih melawan sel-sel myeloma

tidak disatukan; lymphoctyes utama cepat mati dalam budaya dan hanya sel menyatu bertahan. Ini disaring

untuk produksi antibodi yang diperlukan, umumnya di kolam untuk memulai dengan dan kemudian setelah

kloning tunggal.

[ sunting ]Aplikasi kultur sel

budaya massa garis sel hewan merupakan dasar pembuatan virus vaksin dan produk lainnya dari bioteknologi

Biologi produk yang dihasilkan oleh rekombinan DNA (rDNA) teknologi pada kultur sel hewan meliputi enzim ,

sintetis hormon , immunobiologicals ( antibodi monoklonal , interleukin ,limfokin ), dan agen

antikanker . Meskipun banyak protein sederhana dapat dihasilkan dengan menggunakan rDNA dalam budaya

bakteri, protein yang lebih kompleks yang glikosilasi(karbohidrat-dimodifikasi) saat ini harus dibuat dalam sel-

sel hewan. Salah satu contoh penting seperti protein kompleks adalah hormon eritropoietin . Biaya tumbuh

kultur sel mamalia yang tinggi, sehingga penelitian sedang dilakukan untuk memproduksi protein kompleks

seperti di serangga sel atau di tinggi tanaman , penggunaan sel embrio tunggal dan somatikembrio sebagai

sumber untuk transfer gen langsung melalui penembakan practicle, transit ekspresi gen dan mikroskop

confocal pengamatan adalah salah satu aplikasi. Ia juga menawarkan untuk mengkonfirmasi asal tunggal sel

embrio somatik dan asimetri pembelahan sel pertama, yang memulai proses tersebut. -

[ sunting ]kultur jaringan dan rekayasa

budaya Cell adalah komponen fundamental dari kultur jaringan dan rekayasa jaringan , seperti menetapkan

dasar-dasar tumbuh dan mempertahankan sel-sel ex vivo. Aplikasi utama dari kultur sel manusia di industri sel

induk di mana sel-sel batang mesenchymal dapat dibudidayakan dan cryopreserved untuk penggunaan masa

depan.

[ sunting ]Vaksin

Vaksin untuk polio , campak , gondok , rubella , dan cacar air saat ini dibuat dalam kultur

sel. Karena H5N1 pandemi , penelitian ancaman ke menggunakan kultur sel untuk vaksin influenza ini didanai

oleh Amerika Serikat pemerintah. Novel ide di lapangan termasuk DNA rekombinan berbasis-vaksin, seperti

satu dibuat dengan menggunakan manusia adenovirus(virus flu biasa) sebagai vektor, [16] [17] , seperti

adjuvant. [18]

[ sunting ]Budaya non-mamalia sel

[ sunting ]metode kultur sel Tanaman

Artikel utama: Tanaman kultur jaringan

Lihat juga: Tembakau OLEH-2 sel

kultur sel Tanaman biasanya ditanam sebagai kultur suspensi sel dalam medium cair atau sebagai kultur

kalus pada media padat. The kultur sel tanaman berdiferensiasi dan kalus memerlukan keseimbangan yang

tepat dari tanaman hormon pertumbuhan auksin dan sitokinin .

[ sunting ]Bakteri dan budaya metode ragi

Artikel utama: Budaya mikrobiologi

Untuk bakteri dan ragi, jumlah kecil sel biasanya tumbuh pada dukungan solid yang mengandung nutrisi

tertanam di dalamnya, biasanya gel seperti agar-agar, sedangkan budaya skala besar yang tumbuh dengan

sel disuspensikan dalam kaldu nutrisi.

[ sunting ]Budaya metode Viral

Artikel utama: Budaya Viral

Budaya virus memerlukan budaya sel, tanaman, jamur atau bakteri asal mamalia sebagai tuan rumah untuk

pertumbuhan dan replikasi virus. Seluruh wild type virus, rekombinan virus atau produk virus dapat dihasilkan

pada tipe sel lain selain host alami mereka di bawah kondisi yang tepat. Tergantung pada jenis infeksi, virus

dan replikasi virus dapat mengakibatkan lisis sel inang dan pembentukan plak virus .

[ sunting ]jalur sel Common

Manusia sel baris

National Cancer Institute  's 60 kanker jalur sel

ESTDAB database http://www.ebi.ac.uk/ipd/estdab/directory.html

DU145  ( kanker prostat )

Lncap  ( kanker prostat )

MCF-7  ( kanker payudara )

MDA-MB-438  ( kanker payudara )

PC3  ( kanker prostat )

T47D  ( kanker payudara )

THP-1  (akut myeloid leukemia )

U87  ( glioblastoma )

SHSY5Y  sel neuroblastoma manusia, kloning dari myeloma

Saos-2 sel-sel  ( kanker tulang )

Primata sel baris

Vero  (Afrika monyet hijau Chlorocebus ginjal epitel lini sel dimulai 1962)

Tikus sel tumor baris

GH3  ( tumor hipofisis )

PC12  ( pheochromocytoma )

Mouse sel baris

MC3T3  (embrio calvarial )

Tanaman sel baris

Tembakau OLEH-2 sel  (disimpan sebagai kultur suspensi sel , mereka

adalah model sistem sel tanaman)

Spesies lainnya sel baris

zebrafish  ZF4 dan AB9 sel.

Madin-Darby Canine Ginjal (MDCK) epitel lini sel

Xenopus  A6 ginjal epitel sel.

[ sunting ]Daftar jalur sel

Cell line  Arti  Organisme  Asal jaringan  Morfologi  Link 

293-T Manusia Ginjal (embrio)Turunan dari HEK 293 ECACC

Sel 3T3"3 hari transfer, inokulum 3 x 105 sel"

MouseEmbrionik fibroblast

Juga dikenal sebagai NIH 3T3 ECACC

721 Manusia Melanoma

9L Tikus Glioblastoma

A2780 Manusia Indung telurOvarian Cancer

ECACC

A2780ADR

Manusia Indung telurAdriamycin-tahan derivatif

ECACC

A2780cis Manusia Indung telurCisplatin-tahan derivatif

ECACC

A172 Manusia glioblastoma ganas glioma ECACC

A20 Murine B limfoma B limfosit

A253 ManusiaKepala dan leherkarsinoma

submandibular saluran

A431 Manusia Kulit epitelsquamous carcinoma

ECACC Cell Line Data Base

A-549 Manusia Lungcarcinoma Epitel DSMZ ECACC

ALC Murine tulang sumsum Stroma PubMed

B16 Murine Melanoma ECCAC

B35 Tikus Neuroblastoma ATCC

BCP-1 sel Manusia PBMCHIV + Limfoma

ATCC

BEAS-2BEpitel bronkial + adenovirus 12-SV40 hibrida virus (Ad12SV40)

Manusia Lung Epitel ATCC

bEnd.3 Otak endotel Mouse Otak / Cerebral cortex

Endotelium ATCC

BHK-21"Baby Hamster Ginjal fibroblast sel "

Hamster Ginjal fibroblast ECACC Olympus

BR 293 Manusia PayudaraKanker payudara

BxPC3Biopsi xenograph garis karsinoma pankreas 3

Manusiaadenokarsinoma pankreas

Epitel ATCC

C3H-10T1 / 2

MouseEmbrio baris sel mesenchymal

ECACC

C6/36 Asia harimau nyamuk larva jaringan ECACC

Cal-27 Manusia Lidahsquamous cell carcinoma

CHO Ovarium hamster cina hamster Indung telur Epitel ECACC ICLC

COR-L23 Manusia Lung ECACC

COR-L23/CPR

Manusia Lung ECACC

COR-L23/5010

Manusia Lung ECACC

COR-L23/R23

Manusia Lung Epitel ECACC

COS-7Cercopithecus aethiops, asal-cacat SV-40

Ape - aethiops Cercopithecus( Chlorocebus )

Ginjal fibroblast ECACC ATCC

COV-434 Manusia Indung telurMetastasis karsinoma sel granulosa

[2] ECACC

CML T1Myelod kronis Leukemia limfosit T-1

Manusia CML fase akutT sel leukemia

Darah

CMT taring susu tumor Anjing Kelenjar susu Epitel

CT26 MurineKarsinoma Kolorektal

Usus besar

D17 taring osteosarcoma ECACC

DH82 taring histiocytosis monosit / makrofag

ECACC

J Vir Meth

DU145 Manusia Androgen sensitifkarsinoma

Prostat

DuCaP Dura mater Kanker Prostat

ManusiaMetastasis Kanker Prostat

Epitel PubMed

EL4 MouseT sel leukemia

ECACC

EM2 Manusia CML ledakan krisisPh + CML line

Cell Line Data Base

EM3 Manusia CML ledakan krisisPh + CML line

Cell Line Data Base

EMT6/AR1

Mouse Payudara Epitel seperti ECACC

EMT6/AR10.0

Mouse Payudara Epitel seperti ECACC

FM3 ManusiaMetastasis kelenjar getah bening

melanoma

H1299 Manusia LungKanker paru-paru

H69 Manusia Lung ECACC

HB54 hibridoma hibridoma

mengeluarkan L243 mAb (terhadap HLA-DR)

Manusia Imunologi

HB55 hibridoma hibridoma

mengeluarkan MA2.1 mAb (terhadap HLA-A2 dan HLA-B17)

Journal of Immunology

HCA2 Manusia fibroblastJournal of Virology Umum

HEK-293 Embrio manusia ginjal Manusia Ginjal (embrio) Epitel ATCC

HeLa Henrietta Lacks Manusia Kanker serviks Epitel DSMZ ECACC

Hepa1c1c7

7 klon klon 1 line hepatoma 1

Mouse Hepatoma Epitel

ECACC

ATCC

HL-60 Manusia leukemia Manusia Myeloblast bloodcells ECACC DSMZ

HMEC Manusia sel epitel susu Manusia Epitel ECACC

HT-29 Manusia Colon epitelAdenokarsinoma

ECACC

Cell Line

Data Base

Jurkat Manusia T-Cell- Leukemiasel darah putih

ECACC

DSMZ

JY sel Manusia LymphoblastoidEBV diabadikan sel B

K562 sel Manusia LymphoblastoidCML ledakan krisis

ECACC

Ku812 Manusia Lymphoblastoiderythroleukemia

ECACC

LGCstandar

ds

KCL22 Manusia Lymphoblastoid CML

KG1 Manusia Lymphoblastoid AML

KYO1 Kyoto 1 Manusia Lymphoblastoid CML DSMZ

LNCapKelenjar getah bening Kanker Prostat

Manusiaadenokarsinoma prostat

Epitel ECACC ATCC

Ma-Mel 1, 2, 3 .... 48

Manusiaberbagai jalur sel melanoma

MC-38 MouseAdenokarsinoma

MCF-7Michigan Yayasan Kanker-7

Manusia Kelenjar susu

Invasif karsinoma payudara duktal

ER +, PR +

MCF-10AMichigan Yayasan Kanker

Manusia kelenjar susu Epitel ATCC

MDA-MB-231

MD Anderson - Payudara Metastasis

Manusia Payudara Cancer ECACC

MDA-MB-468

MD Anderson - Payudara Metastasis

Manusia Payudara Cancer ECACC

MDA- MD Anderson - Payudara Manusia Payudara melanoma Cambridge

MB-435 Metastasis

atau karsinoma (diperdebatkan)

Patologi ECACC

MDCK IIMadin Darby ginjal anjing

Anjing Ginjal Epitel ECACC ATCC

MDCK IIMadin Darby ginjal anjing

Anjing Ginjal Epitel [3] ATCC

MOR/0.2R

Manusia Lung ECACC

MONO-MAC 6

Manusia WBCmyeloid metaplasic AML

Cell Line Data Base

MTD-1A Mouse Epitel

MyEnd Miokard endotel Mouse Endotelium

NCI-H69/CPR

Manusia Lung ECACC

NCI-H69/LX10

Manusia Lung ECACC

NCI-H69/LX20

Manusia Lung ECACC

NCI-H69/LX4

Manusia Lung ECACC

NIH-3T3NIH , transfer hari 3, inokulum 3 x 10 5sel

Mouse embrio fibroblast ECACC ATCC

NALM-1 darah periferledakan krisis CML

Kanker Genetika dan Sitogenetik

NW-145 Melanoma ESTDAB

OPCN / OPCT sel baris

Onyvax [4] Kanker Prostat ....

Rentang baris tumor prostat

Asterand

Peer Manusia T sel leukemia DSMZ

PNT-1A / 2 PNT

Prostat tumor baris

ECACC

RenCa Renal Carcinoma Mousekarsinoma ginjal

RIN-5F Mouse Pankreas

RMA / RMAS

Mouse T sel tumor

Saos-2 sel Manusia Osteosarcoma ECACC

Sf-9 Spodoptera frugiperdaserangga - Spodoptera frugiperda (ngengat)

Indung telur DSMZ ECACC

SkBr3 ManusiaKarsinoma payudara

T2 Manusia

T sel leukemia / sel hibridoma jalur B

DSMZ

T-47D Manusia Kelenjar susukarsinoma duktal

T84 ManusiaCarcinoma kolorektal / Lungmetastasis

Epitel ECACC ATCC

THP1 cell line

Manusia Monosit AML ECACC

U373 ManusiaGlioblastoma-astrocytoma

Epitel

U87 Manusiaglioblastoma-astrocytoma

Epitel seperti Abcam

U937 ManusiaLeukaemic monocytic limfoma

ECACC

VCaP Ruas Kanker Prostat ManusiaMetastasis kanker prostat

Epitel ECACC ATCC

Vero sel'Vera Reno' ('Hijau ginjal') / 'Vero' ('kebenaran')

Afrika Green Monkey

Ginjal epitel ECACC

WM39 Manusia kulitPrimer melanoma

WT-49 Manusia Lymphoblastoid

X63 Mouse Melanoma

YAC-1 Mouse LimfomaData Line Cell Base ECACC

Yar Manusia B-selEBV transofrmed

[5] Manusia Imunologi

Catatan: daftar ini adalah contoh baris sel yang tersedia, dan tidak komprehensif

[ sunting ]Lihat pula

Biologi keabadian

Kultursel tes

Listrik sel-substrat impedansi penginderaan

Daftar jalur sel terkontaminasi

Organ budaya

Tanaman kultur jaringan

Kultur jaringan

[ sunting ]Referensi dan catatan

1. ̂  "Cell Budaya" . Diakses 2006-04-19.

2. ̂  "Beberapa landmark dalam pengembangan jaringan dan kultur

sel." . Diakses 2006-04-19.

3. ̂  "Hewan dan alternatif dalam pengujian." . Diarsipkan

dari aslinya pada . Diakses 2006-04-19.

4. ̂  Schiff, Judith Ann. "Seorang pahlawan tanpa tanda jasa penelitian

medis." . Diakses 2006-04-19. Yale Alumni Magazine , Februari 2002.

5. ̂  "LipiMAX solusi lipoprotein dimurnikan dari serum sapi" Hayati Selborne.

Services. . Diperoleh 2010/02/02.

6. ̂  Portela VM, G Zamberlam, Harga CA (April 2010). "Plating kepadatan Cell

mengubah rasio estrogenik untuk ekspresi gen progestagenic enzim dalam

sel granulosa berbudaya". Subur.Steril:. 93 (6) 2050-

5. DOI : 10.1016/j.fertnstert.2009.01.151 . PMID 19324349 .

7. ̂  Drexler, HG; Dirks, WG; Macleod, RA (Oktober 1999). "Hematopoietic sel

baris manusia Palsu: cross-kontaminasi dan salah tafsir":. Leukemia 13 (10)

1601-7. DOI :10.1038/sj/leu/2401510 . ISSN 0887-6924 . PMID 10516762 .

8. ̂  Drexler, HG; Macleod, RA; Dirks, WG (Des 2001). "Cross-kontaminasi: HS-

Sultan bukanlah myeloma tetapi garis sel Burkitt limfoma" (teks bebas penuh)

-. Darah 98 (12): 3495 6. DOI :10.1182/blood.V98.12.3495 . ISSN 0006-

4971 . PMID 11732505 .

9. ̂  Cabrera, CM; Cobo, F, Nieto, A; Cortés, JL; Montes, RM, Catalina, P;

concha, A (Jun 2006). "Identitas tes: penentuan garis sel kontaminasi silang"

45-50. Cytotechnology 51 (2).: DOI :10.1007/s10616-006-9013-8 . ISSN 0920

-9069 . PMID 19002894 .

10. ^ a b Chatterjee, R (Feb 2007). "Cell biologi.. Kasus-kasus salah

identitas":. Sains (New York, NY) 315 (5814) 928-

31. DOI : 10.1126/science.315.5814.928 . ISSN 0036-8075 . PMID 17303729  

.

11. ̂  Liscovitch, M; Ravid, D (Jan 2007). "Sebuah studi kasus di salah

identifikasi garis sel kanker: sel MCF-7/AdrR (re-ditunjuk NCI / ADR-RES)

adalah berasal dari OVCAR-8 karsinoma sel ovarium manusia.": Kanker.

Huruf 245 (1-2) 350 -2. DOI : 10.1016/j.canlet.2006.01.013 . ISSN 0304-

3835 . PMID 16504380 .

12. ̂  Macleod, RA; Dirks, WG,, M; Kaufmann, Matsuo Y; perah, H, Drexler, HG

(Nov 1999). "Antar-spesies luas kontaminasi silang garis sel tumor manusia

yang timbul pada sumber.".International jurnal kanker. Jurnal internasional du

kanker 83 (4): 555-63. DOI : 10,1002 / (SICI) 1097-0215 (19991112) 83:4

<555:: AID-IJC19> 3.0.CO; 2-2 . ISSN 0020-7136 . PMID 10508494  .

13. ̂  Masters, JR (Apr 2002). "Sel Hela 50 tahun pada: baik, yang buruk dan

jelek. Itu". Sifat review. Kanker 2 (4): 315-

9. DOI : 10.1038/nrc775 . ISSN 1474-175X . PMID 12001993 .

14. ^ a b Dunham, JH dan Guthmiller, P. (2008) Melakukan sains yang baik: baris

Otentikasi identitas sel. Cell Catatan 22, 15-17.

15. ̂  Ceb.com

16. ̂  Reuters (2006/01/26). Wired.com "Quickie Vaksin Flu Burung

Dibuat" Wired Diperoleh 2010/01/31.

17. ̂  Gao W, Soloff AC, Lu X, Montecalvo A, Nguyen DC, Matsuoka Y, Robbins

PD, Swayne DE, Donis RO, Katz JM, Barrat-Boyes SM, Gambotto A.

(Februari 2006). "Perlindungan tikus dan unggas dari unggas influenza H5N1

virus mematikan melalui berbasis imunisasi adenovirus " ). Journal of

Virology (Amerika: American Society for Microbiology 80 (4):. 1959-

1964 DOI :10.1128/JVI.80.4.1959-1964.2006 . ISSN 0022-538X . PMID 1643

9551 . PMC 1367171 . Diperoleh 2010/01/31.

18. ̂  "NIAID Taps Chiron Kembangkan Vaksin Flu Burung Terhadap

H9N2" . Institut Nasional Alergi dan Penyakit Infeksi (NIAID). . Diperoleh

2010/01/31. [ dead link ]

Hpacultures.org.uk  , Kesehatan Budaya Badan Perlindungan Koleksi

(ECACC)

MacLeod, RAF et al:. (1999) luas antar-spesies kontaminasi silang garis sel

tumor manusia. International Journal of Cancer 83 :555-563.

Masters, John R. (2002): HeLa sel 50 tahun pada: yang baik, yang buruk dan

jelek. Alam Tinjauan Kanker 2 :315-319.

ultrathin poli (N-isopropylacrylamide) lapisan dicangkokkan pada permukaan polistiren untuk adhesi sel / kontrol detasemen.

Akiyama Y , Kikuchi A , Yamato M , T Okano .

Institut Teknik Biomedis Advanced dan Ilmu, Program COE untuk Abad 21, Kedokteran Universitas Tokyo Women's, 8-1

Kawadacho, Shinjuku-ku, Tokyo 162-8666, Jepang.

AbstrakKami menyelidiki sifat fisikokimia dari dua jenis poli (isopropylacrylamide-N) (PIPAAm)-jaringan polystyrene budaya

dicangkokkan (TCP) permukaan, untuk menjelaskan faktor-faktor yang berpengaruh untuk adhesi sel termal diatur

dan detasemen untuk PIPAAm-permukaan dicangkokkan. Kedua jenis permukaan PIPAAm-dicangkokkan disusun

dengan metode polimerisasi berkas elektron. Atenuasi refleksi total Fourier transform spektroskopi inframerah

menunjukkan bahwa jumlah polimer dicangkok adalah 1,4 + / - 0,1 microg/cm2 untuk PIPAAm-1.4 dan 2.9 + / - 0,1

microg/cm2 untuk PIPAAm-2.9. Kedua permukaan PIPAAm-dicangkok menunjukkan perubahan properti hidrofobik /

hidrofil dalam menanggapi suhu. Namun, PIPAAm-1.4 permukaan lebih hidrofobik (cos theta = 0,21 pada 37 derajat

C dan cos theta = 0,35 pada 20 derajat C) dari theta PIPAAm-2,9 (cos = 0,42 pada 37 derajat C dan cos theta = 0,50

pada 20 derajat C ) baik di atas dan di bawah temperatur transisi PIPAAm itu. Ketebalan lapisan PIPAAm

dicangkokkan diperkirakan menjadi 15,5 + / - 7,2 nm untuk PIPAAm-1.4 dan 29,5 + / - 8,4 nm untuk PIPAAm-2.9,

dengan menggunakan laser excimer UV dan mikroskop atom. Bovine sel endotel arteri karotid (ECs) mematuhi

permukaan PIPAAm-1.4 dan berkembang biak untuk membentuk sel monolayers konfluen. Para monolayers sel

dipanen sebagai lembar sel tunggal oleh penurunan suhu 37-20 derajat C. Sebaliknya, ECs tidak mengikuti

permukaan PIPAAm-2.9. Fenomena ini berkorelasi dengan adsorpsi protein adhesi sel, fibronektin, ke permukaan

ofPIPAAm-1.4 dan -2,9. Dalam kasus nano-memerintahkan permukaan dicangkokkan tipis, mobilitas rantai

permukaan sangat dipengaruhi oleh ketebalan lapisan PIPAAm dicangkokkan karena dehidrasi rantai PIPAAm harus

ditingkatkan oleh TCP permukaan hidrofobik. PIPAAm jumlah korupsi, yaitu, ketebalan lapisan PIPAAm dicangkok,

memainkan peran penting dalam suhu-induced hidrofilik / perubahan properti hidrofobik dan adhesi sel / perilaku

detasemen.

PMID: 15986693 [PubMed - diindeks untuk MEDLINE]

Poli (N-isopropylacrylamide)Dari Wikipedia, ensiklopedia bebas

Struktur kimia poli(isopropylacrylamide-N)

Poli (N-isopropylacrylamide) (disingkat dengan berbagai PNIPA, PNIPAAm, PNIPAA atau PNIPAm)

adalah polimer yang responsif-suhu yang pertama kali disintesis pada tahun 1950. [1]

Ini membentuk tiga-dimensi hidrogel ketika silang dengan N, N '-methylene-bis-akrilamida (MBAM) atau N, N'-

cystamine-bis-akrilamida (CBAm).Ketika dipanaskan dalam air di atas 33 ° C, itu mengalami reversibel kritis

suhu yang lebih rendah solusi transisi fase dari keadaan basah bengkak ke keadaan dehidrasi menyusut,

kehilangan sekitar 90% dari yang massa . Dalam larutan encer, itu mengalami sesuai -untuk-globul transisi

kumparanpada kondisi yang sama) [2] .. Sejak PNIPAm mengusir isi cair pada suhu dekat yang dari tubuh

manusia, PNIPAm telah diteliti oleh banyak peneliti untuk aplikasi mungkin dalam dikontrol pengiriman

obat . [3] [4] [5]

[ sunting ]Referensi

1. ̂  Schild, HG "Poli (N-isopropylacrylamide): eksperimen, teori dan

aplikasi" Kemajuan dalam Polimer Ilmu 1992, 17 (2), 163-249.

2. ̂  Wu, C; Wang X (1998). "-ke-Coil Transisi globul dari homopolimer Single

Chain Dalam Larutan" 4092-4094. Physical Review Letters 80 . Diakses 25

September 2010.

3. ̂  Chung, JE; Yokoyama, M., Yamato, M.; Aoyagi, T.; Sakurai, Y.; Okano, T.

"Thermo-responsif drug delivery dari polimer misel dibangun menggunakan

kopolimer blok poli (isopropylacrylamide-N) dan poli (butylmethacrylate)

"Journal of Controlled Release 1999,, 62, 115-127.Abstrak

4. ̂  Hu Yan dan Tsujii Kaoru. "Potensi aplikasi poli (N-isopropylacrylamide) gel

yang mengandung misel polimer dengan sistem penghantaran obat" Koloid

dan Permukaan B: Biointerfaces. 2005, 46, 142-146. Abstrak

5. ̂  Antunes F., Gentile L., Tavano L., Oliviero Rossi C., "karakterisasi

rheological dari gelasi termal poli (N-isopropylacrylamide) dan poli (N-

isopropylacrylamide) co-Acrylic Acid". Terapan rheology, 2009, Vol. 19, n. 4,

hal 42064-42069. Abstrak

Artikel mengenai ilmu polimer adalah sebuah tulisan rintisan . Anda dapat membantu Wikipedia mengembangkannya .

Kategori : Polimer | Rintisan bertopik Polymer

SitemapHom

eOpiniSiaran PersLink Kategori

J-TIMUR

TOP > J-TIMUR > Daftar Jurnal Judul (B) > Bunseki Kagaku (2003) > prekonsentrasi polimer-dimediasi Thermoresponsive untuk analisis jejak.

prekonsentrasi Thermoresponsive polimer-dimediasi untuk analisis jejak.Nomor akses; 03A0251090

Judul; prekonsentrasi polimer-dimediasi Thermoresponsive untuk analisis jejak.

Penulis;) JPN Matsubara Tokyo (Chiyo Coll. Farmasi) HIRAIDE Masataka (Nagoya Univ., Sekolah Pascasarjana Teknik, JPN) Saito Nagoya (Tooru Univ., Graduate School of Engineering,

Judul Jurnal; Kagaku Bunseki

Jurnal Kode: F0008A

ISSN: 0525-1931

VOL;. 52 NO;. 4 PAGE). 221-229 (2003

Gambar & Tabel &Reference; Gbr.12, TBL.1, REF.48

Pub. Negara; Jepang

Bahasa; Jepang

Abstrak; Sederhana dan teknik prekonsentrasi cepat menggunakan polimer themoresponsive dikembangkan untuk penentuan jejak dan anorganik unsur organik dalam larutan berair. polimer Thermoresponsive, termasuk poli (N-isopropylacrylamide) dan poli (eter vinylmethyl), air-larut pada suhu kamar, tapi menjadi sedikit larut di atas temperatur kritis mereka solusi (ca. 3.DEG.C.) untuk membentuk presipitat seperti permen karet . hidrofobik senyawa organik dalam larutan air secara efektif dikumpulkan pada presipitat polimer, tergantung pada sifat hidrofobik mereka. Di sisi lain, komponen hidrofilik tetap dalam

larutan berair massal. Karena fase polimer sangat kental, konsentrasi analit yang mudah meningkat 100 kali lipat. ion logam Terhidrasi dikonversi menjadi chelates hidrofobik dengan 8-hidroksikuinolin atau dithiocarbamate amonium pirolidin, yang berhasil dimasukkan dalam tahap polimer. Larut air chelates logam dibebankan juga terkonsentrasi dengan menggunakan ion counter yang memadai. Setelah melarutkan fase polimer dalam jumlah kecil pelarut organik, solusinya langsung dianalisis dengan HPLC, AAS tungku grafit atau ICP-MS. teknik prekonsentrasi Polimer-dimediasi juga dapat berlaku untuk klarifikasi air limbah industri. (Penulis abst.)

BACK

Tentang J-TIMUR Bagaimana menggunakan Daftar Publikasi Ketentuan Layanan

Home Opini

Siaran Pers Link Kategori

J-TIMUR Cafe Teras

Topik Hot Artikel

Link ke Kami

Daftar pertanyaan

Hubungi Kami

FAQ

Kebijakan Privasi Kebijakan Hak Cipta

Copyright (c) 2006-2007 Jepang Sains dan Teknologi Badan. Semua Hak Dilindungi.