PROF A . MARCELA AZEVEDO REPLICAÇÃO DO DNA
PROFA. MARCELA AZEVEDOREPLICAÇÃO DO DNA
REAÇÃO EM CADEIA PELA POLIMERASE - PCR
GENE X
DNA pol
PRIMERS
PRIMERS
Bases Nitrogenada
s
Desoxirribonucleotídeos
Fosfatados dNTP's
Água
TampãoMagnésio
95°C
Primer (DNA)
Síntese (pol + dNTPs)
95°C
Primer
Síntese
Múltiplas cópias
REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE - PCR
Temperatura anelamento: 45-52°C
Temperatura extensão: 72°C
ELETROFORESE EM GEL DE AGAROSE
3000 pares de bases
Nitrogenadas (bp) 1000 bp
300 bp
Padrão
REAÇÃO EM CADEIA PELA POLIMERASE - PCR
• A Reação em Cadeia pela Polimerase é definida como uma técnica de amplificação do DNA;
• Foi descrita primeiramente por Kary Mullis, no ano de 1983 (Prêmio Nobel da Química dez anos depois).
TELOMERASE
Fita descontínua Primer
Exonuclease degrada o primer de RNA
Telomerase alonga fita contínua
Novo primer se anela à nova sequência
Porção final é reconstituída