Pengukuran Hormon

Pengukuran Hormon

Dr. ANIK WIDIJANTI, Sp.PK (K)

Laboratorium Patologi Klinik FK.UNIBRAW - RS. Dr.Saiful anwar Malang

HORMON

- DILEPAS WAKTU DIBUTUHKAN

- MASUK ALIRAN DARAH

- JUMLAH SEDIKIT & TAK HABIS PAKAI

- BEKERJA JAUH dari TEMPAT PRODUKSINYA

- KADAR DI DALAM DARAH RENDAH

- BERFUNGSI SEBAGAI KATALISATOR

- DAPAT BERUPA PROTEIN, GLIKO PROTEIN, POLI-

PEPTIDA, ASAM AMINO, STEROID

- BEDA-NYA DARI ENSIM : ENSIM SELALU PROTEIN

- METODE PENGUKURAN : IMMUNOASSAY

PRINSIP DASAR PENGUKURAN HORMON

* BIOLOGIK : BIO ASSAY, R.R.A.

* KIMIAWI : Kromatografi,

Ekstraksi, Elektroforesa, Purifikasi

* IMMUNO-ASSAY : Dengan / tanpa label sering digabung dg kromatografi, turbidimetri,

nefelometri

BIOLOGIK : BIO – ASSAY RADIO RECEPTOR ASSAY

• TIDAK PRAKTIS

• SENSITIFITAS & SPESIFITAS RENDAH

• RUMIT DAN MEMBUTUHKAN WAKTU

• MAHAL

• MEMERIKSA AKTIFITAS BIOLOGIK

IMMUNO ASSAY BERLABEL

1. RADIO IMMUNO ASSAY ( RIAs)

2. ENZYME IMMUNO ASSAY ( EIA )

• HETEROGENUS EIA : ELISA, FIA, ICMA, MEIA

• HOMOGENUS EIA

3. RADIO RECEPTOR ASSAY

( RRAs ) : BIOLOGIK / BIO-ASSAY

IMMUNOASSAY

ENSIME.I.A

RADIOAKTIFR.I.A

ELISA

KOLORIMETER

L.I.A / ICMALUMINOMETER

F.I.AFLUOROMETER

KOMPETITIF / KONVENSIONIL

SANDWICHIRMA

RRA

PRINSIP DASAR PEMERIKSAAN R.I.A :• Kompetitif antara antibodi terbatas dg antigen berlabel dan

antigen sampel

• Pemisahan konyugat yang terikat dan bebas

• Pehitungan dengan kurve standar

PERBEDAAN R.I.A E.I.ALABEL RADIOISOTOP ENSIM

LIMBAH BERBAHAYA TIDAK

LISENSI / IJIN KHUSUS DIBUTUHKAN TIDAK DIBUTUHKAN

ALAT PEMBACA SIGNAL LEBIH MAHAL MURAH, LUAS TERSEDIA

UNTUK DAPAT SIGNAL LEBIH MUDAH LEBIH KOMPLEKS

DETEKSI SIGNAL TANPA OPTIMASI DENGAN OPTIMASI

ANTIBODI Yg DIGUNAKAN POLIKLONAL

AFINITAS MONOKLONAL

AFINITAS

HARGA REAGEN LEBIH MURAH LEBIH MAHAL

EXPIRED REAGEN E.D PENDEK E.D PANJANG

INTERFERENS LEBIH SEDIKIT ANALIT PLASMA LN

SENSITIF & SPESIFITAS BAIK / TINGGI BAIK / TINGGI

PERBEDAAN ANTARA R.I.A DAN E.I.A.

Faktor yang dapat mempengaruhi hasil pengukuran hormon :

METODE• PILIHAN TEPAT• KONTROL KUALITAS• STANDART IDENTIK• NILAI RUJUKAN• NILAI CUT – OFF• SENSITIF, SPESIFITAS• DETEKTABILITAS• KONDISI SESUAI

SAMPEL• HETEREROGENITAS HORMON• PERLAKUAN PANTAS• VARIASI BIOLOGIK• BENTUK / ASAL BAHAN• UTUH / HASIL METABOLISME• PERSIAPAN PENDERITA

VALIDITAS PENGUKURAN HASIL

UJI IN VIVO• KLIRENS•METABOLISME

UJI IN VITRO• INTERFERENS DIKENDALIKAN• SERING TAK SAMA IN VIVO

PTH

5 MENIT

SEDIKIT

DISEKRESI

KELENJAR

METAB KALSIUM

INTAK-PTH : AKTIF

1.6 X NORMAL

[ 2 – 2.5 X ]

COOH-TER

30 MENIT

80 – 90 %

DISEKRESI

METABOLITNYA

TAK AKTIF

FRAGMEN NON 1-84

20 % INTAK-PTH

FRAGMEN NON 1-84

55 % INTAK-PTH

[ 40 – 60 % ]

NH2-TER

-

< PTH

SEKRESI ?

METABOLIT ?

FUNGSI ?

AKTIFITAS ?

MASA PAROH

DI SIRKULASI

ASAL HORMON

FUNGSI BIOLOGIK

IMMUNO

REAKTIFITAS

GAGAL GINJAL

BIO-ASSAY

JARANG DIPAKAI RUTIN

RIADIPENGARUHI

METABOLIT

IRMA15 MENIT [ I-PTH ]INTRA OPERASIFRAGMEN 1- 84

ICMA7 MENIT INTRA

OPERASISUKSES 88 %

PEMERIKSAAN HCG

• Bahan pemeriksaan : darah / urine ( kalau perlu

diencerkan)

• Yang diperiksa sebaiknya sub unit

• Cara pemeriksaan : Hemaglutinasi, EIA, RIA , dll

• Cara pemeriksaan lama bio assay : galimanini

PEMERIKSAAN HCG

• Jenis pemeriksaan HCG serum : > 40 uji, urine :

> 24 uji, home pregnancy test : > 23 uji

• Untuk pilih metode : harus memperhatikan titer,

Dx klinik, standar/kalibrator, prinsip pemeriksaan,

bahan pemeriksaan, dll

• Jika minta pemeriksaan cantumkan Dx klinik :

penting untuk pemilihan metode

PEMERIKSAAN HCG

VARIASI METODE

EIA, RIA, IHA dllVARIASI STANDAR WHO

St 1 : Prep kasar, 2 : IRP 75/735,

3 : IS 75/537 ,4 : IS 75/589

ISOFORM HCG

hCG hiperglikosilasi,

hCGb, hCGbcf

Nicked / non-nicked

VARIASI PABRIK

Dx PENYAKIT

HAMIL / TROPOBLASTIK

SAMPEL : URINE /SERUMHATI-HATI

INTERPERTASI HASIL

MEMBANDINGKAN HASIL/

MENGIKUTI Tx

KESIMPULAN Permintaan pengukuran hormon harus disertati

Dx klinis

Pemilihan metode pemeriksaan yang tepat

sangat mempengaruhi diagnosa

Untuk follow up Tx harus dengan metode

pemeriksaan yg sama

Terdapat berbagai variasi metode pengukuran

hormon masing-2 dg kelemahan & kelebihan

KESIMPULAN Terdapat berbagai variasi bentuk hormon di

dalam tubuh

Terdapat berbagai variasi bahan pemeriksaan

hormon dari darah, urine, ludah, cairan tubuh

Harus berhati-hati dalam menginterpertasi hasil

pemeriksaan dari masing-2 metode pengukuran &

dari masing-2 hormon