EVALUACIÓN DEL EFECTO ANALGÉSICO DEL Plantago major (LLANTÉN) EN RATONES CON CONTORSIONES ABDOMINALES INDUCIDAS POR ÁCIDO ACÉTICO AUTORES Gallegos Toribio, Rocío Guevara Bueno, Yahaira Laureano Colca, Andrea Varas Villafuerte, Jazmín ASESOR Mg. Q.F. Robles Esquerre, Mónica RESUMEN El Plantago major (Llantén) ha despertado gran interés y expectativa dentro de la población internacional debido a las propiedades medicinales que se le atribuyen a algunas de las partes de esta planta, especialmente sus hojas. Se han reportado diferentes efectos farmacológicos para el P. major, teniendo en cuenta la actividad antiinflamatoria demostrada del extracto acuoso de Plantago major en estudios anteriores. Objetivo: Evaluar las propiedades analgésicas del Plantago major en un modelo experimental en ratones inducidos por ácido acético. Metodología: Se utilizaron dosis de 3000mg/kg y 5000mg/kg del extracto acuoso de P. major, a partir del contenido en peso seco; se administró por vía intraperitoneal a ratones por ácido acético
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EVALUACIÓN DEL EFECTO ANALGÉSICO DEL Plantago major
(LLANTÉN) EN RATONES CON CONTORSIONES
ABDOMINALES INDUCIDAS POR ÁCIDO ACÉTICO
AUTORES
Gallegos Toribio, Rocío
Guevara Bueno, Yahaira
Laureano Colca, Andrea
Varas Villafuerte, Jazmín
ASESOR
Mg. Q.F. Robles Esquerre, Mónica
RESUMEN
El Plantago major (Llantén) ha despertado gran interés y expectativa dentro de la población
internacional debido a las propiedades medicinales que se le atribuyen a algunas de las partes de
esta planta, especialmente sus hojas. Se han reportado diferentes efectos farmacológicos para el
P. major, teniendo en cuenta la actividad antiinflamatoria demostrada del extracto acuoso de
Plantago major en estudios anteriores. Objetivo: Evaluar las propiedades analgésicas del
Plantago major en un modelo experimental en ratones inducidos por ácido acético.
Metodología: Se utilizaron dosis de 3000mg/kg y 5000mg/kg del extracto acuoso de P. major,
a partir del contenido en peso seco; se administró por vía intraperitoneal a ratones por ácido
acético al 1 % y se cuantificó el número de contorsiones o estiramientos. Además, se tuvo como
control positivo el AINE “Ketorolaco”. Resultados: Se obtuvo que el extracto acuoso de P.
major fue efectivo en concentración de 5000mg/kg para reducir el número de contorsiones
inducidas por el ácido acético, demostrando así su efecto analgésico. Conclusión: El análisis
indicó que el extracto acuoso de Plantago major en dosis de 5000mg/kg ejerce un efecto
analgésico en un 77%.
Palabras clave: Plantago major, Llantén, analgesia, contorsiones por ácido acético.
ABSTRACT
Plantago major (Plantain) has aroused great interest and expectation within the international
population because of the medicinal properties that are attributed to some parts of this plant,
especially the leaves. Many different pharmacological effects have been reported for P. major,
emphasizing in the anti-inflammatory activity of the aqueous extract of Plantago major reported
in previous studies. Objective: To evaluate the analgesic properties of Plantago major in an
experimental model in mice induced by acetic acid. Methodology: Doses of 3000 and 5000
mg/kg of the aqueous extract of P. major were used, which were obtained from the dry weight
content. Acetic acid (1%) was administered intraperitoneally to mice 1% and then proceeds to
measure the number of writhing. In addition, as a positive control was used the NSAID
"ketorolac". Results: It was found that the aqueous extract of P. major with a concentration of
500mg/ml reduced the number of writhing induced by acetic acid, thereby demonstrating its
analgesic effect. Conclusion: The analysis indicated that the aqueous extract of Plantago major
on dose of 5000mg/kg exerts an analgesic effect by 77%.
astringentes, gastroprotectoras, emolientes y expectorantes, resultando beneficiosa
contra la psoriasis y la dermatitis (Abud, 2009)15.
La infusión de las hojas se usa en gárgaras para curar el dolor de garganta y en buchadas
para tratar las infecciones de la boca (Godínez y Volpato, 2008)16. El jugo de sus hojas
se usa para calmar el dolor de oídos, introduciendo unas gotas en este órgano, dos o más
veces al día (Hoffman, 2005)17.
Las hojas del P. major pueden aliviar el dolor de estómago, hirviendo 10 gr de éstas en
medio litro de agua y se toma una taza o dos en el día, mañana o tarde como agua de
tiempo. Asimismo, su asociación con malva y trébol es utilizado para el tratamiento de
cólico de calor. (Biblioteca digital de la Medicina Tradicional Mexicana -base de datos
en línea-, 2009)18.
Los cataplasmas preparados del P. major se utilizan para combatir la diarrea y
congestión del estómago (dolor de empacho) y la decocción de las semillas se brinda
como diurético, laxante y contra el dolor producido por las hemorroides (Godínez y
Volpato, 2008)16.
En los estudios realizados con esta planta, se han utilizado diferentes extractos, los
cuales han demostrado tener propiedades curativas. Por ejemplo, el homeopático de P.
major se prepara en dilución D3 contra el dolor de dientes y neuralgias, se administran
entre 5 y 15 gotas varias veces al día. Para el dolor de oído se administran 3 gotas en
cada aplicación (Fonegra y Jiménez, 2007)19.
Se ha evidenciado que los extractos de la hoja y raíz de Plantago major han evidenciado
una acción antiespasmódica (sobre íleon aislado de cobayo) y analgésica en modelos
experimentales de dolor sobre lesiones de edema plantar en cobayos inducidos por
carragenina. En dicho mecanismo estarían involucrados los flavonoides de la planta.
(Cambar, 1989)20.
Los resultados obtenidos del trabajo realizado por Núñez et al. publicado en el
International Journal of Pharmacology indican que el extracto acuoso del P. major está
dotado de actividades antiinflamatorias y analgésicas efectivas (Núñez et al., 1997)21.
Del mismo modo, se realizaron muchos estudios específicamente sobre los compuestos
químicos que posee esta planta. Un ejemplo es la quercetina, un flavonoide componente
del P. major, que muestra propiedades analgésicas, antiinflamatorias, antiulcéricas,
cicatrizantes, antihistamínicas, entre otras. (Redrobán, 2012)22. Otro es el
plantamajósido, sustancia derivada del ácido caféico, que posee actividad
antiinflamatoria, antioxidante y antibacterial, y el acteósido tiene actividad analgésica,
antibacterial y efecto antihipertensivo (Gómez, 2005)23.
Otras investigaciones señalan que está indicado para mitigar o curar el dolor opresivo,
desgarrante o punzante, producto del movimiento o manipulación dental (Saquelli,
2010)24. Arango señala que el P. major puede ser utilizado para calmar el dolor de
hemorroides, cicatrización de heridas, inflamaciones de la boca, catarros bronquiales,
diarrea leve (Arango, 2004)25. También se utiliza para el dolor de distintos órganos
como garganta, amígdalas, muelas y oído (Blair y Madrigal, 2005)26.
STATUS LEGAL
Las hojas de Plantago major han sido aprobadas por el Ministerio de salud de Bulgaria,
para uso interno en casos de gastritis crónica, úlcera gastroduodenal, diabetes y heridas.
También está reconocida por las Farmacopeas de Argentina, Corea, Filipinas, Francia,
Indonesia, Japón, Paraguay y Vietnam. (Alonso, 2004)12.
Los Ministerios de Sanidad de Cuba (hoja) y Venezuela (hoja y planta entera) han
aprobado el empleo medicinal humano, del Plantago major (García, 2000)27.
MATERIALES
1. Material biológico: 8 ratones de 30gr
Extracto acuoso de Plantago major (Llantén)
2. Material farmacológico: Ketorolaco (1 tableta)
Ácido Acético al 1%
Suero fisiológico
3. Otros: 16 jeringas de 1mL
Cánula intragástrica
Guantes
DESCRIPCION DEL DISEÑO EXPERIMENTAL
Para el estudio de la actividad analgésica se utilizó un diseño experimental cuantitativo,
experimental in vivo y con intervención.
METODOLOGIA
Método de evaluación
Para el estudio de la actividad analgésica se utilizó un modelo experimental de analgesia
inducida por ácido acético al 1% de tal manera que luego se evaluó el efecto del
extracto acuoso de Plantago major (llantén) sobre el número de contorsiones
producidas por el dolor.
Modelo biológico
Se emplearon ocho ratones albinos de laboratorio en buen estado aparente de salud,
obtenidos en el Bioterio del Laboratorio de Farmacología de la Universidad Ricardo
Palma, los que se adaptaron durante una semana a las condiciones del laboratorio, y se
mantuvieron con libre acceso a agua y comida.
Preparación del extracto acuoso
El producto a evaluar consistió en el extracto acuoso de Plantago major (llantén), el
cual requirió de un proceso basado en sus hojas que poseen las propiedades terapéuticas
antiinflamatorias. El material vegetal fue colectado en una casa naturista y tuvo un
secado en estufa de recirculación de aire a 40oC durante 4 días, luego se trituró las hojas
y se pesó 25 gr. De P. major para disolverlo en 50 ml de agua y obtener la dosis de
5000 mg/kg.
Y para obtener la concentración de 3000 mg/kg, se substrajo 12 ml del frasco con la
dosis de 5000 mg/kg, y se completó con 20 ml de agua destilada. Los tratamientos se
conservaron en diferentes frascos etiquetados hasta su empleo, cada uno con la cantidad
suficiente para cada experimento particular.
Distribución de la muestra
Los ratones se distribuyeron aleatoriamente, para separarlos en grupos
correspondientes:
1. Grupo A: control negativo tratado con suero fisiológico a una dosis de
0.1ml/10gr.
2. Grupo B: control positivo con tratamiento de Ketorolaco a dosis de
12mg/kg.
3. Grupo C: experimental 1, con tratamiento de Plantago major a una dosis
de 3000mg/kg.
4. Grupo D: experimental 2, con tratamiento de Plantago major a una dosis
de 5000mg/kg.
TABLA N°1. Peso de los ratones y volumen administrado del tratamiento según grupo
Nro. ratón GRUPO PESO Vol. (ml)
1 GRUPO CONTROL –Suero fisiológico (0.1ml/kg)
31 g 0.31ml
2 27 g 0.27ml
3 GRUPO CONTROL +Ketorolaco (12mg/kg)
29 g 0.29ml
4 34 g 0.34ml
5 Extracto acuoso de Plantago major (3000mg/kg)
29 g 0.29ml
6 26 g 0.26ml
7 Extracto acuoso de Plantago major (5000mg/kg)
34 g 0.34ml
8 25 g 0.25ml
Se les administró un tratamiento profiláctico a cada grupo A, B, C y D (los que
recibirán suero fisiológico a dosis de 0.1ml/kg, Ketorolaco a dosis de 12mg/kg y
extracto acuoso de Plantago major a las dosis de 3000 mg/kg y 5000 mg/kg,
respectivamente) por vía intragástrica con el uso de la sonda gástrica según el volumen
para cada uno y la dosis presentada.
Después de 30 min, para inducir el dolor se administró por vía intraperitoneal el ácido
acético al 1% que provocó contorsiones y estiramientos. Se anotó la hora en la cual se
presenta la primera contorsión y se registró el número de contorsiones durante los 10
minutos posteriores para cada animal.
Procesamiento estadístico
Los resultados obtenidos con los diferentes tratamientos, se expresaron en términos de
los valores resultantes del número de contorsiones y del tiempo de respuesta. Se calculó
el promedio de contorsiones obtenidas por pareja y en cada tratamiento, para procesarlo
con la siguiente fórmula:
% Analgesia = (Control – tratamiento)/ control x 100
RESULTADOS
En el perfil conductual se observó un aumento a la pasividad y una disminución a la
respuesta al dolor.
TABLA N°2. Número de contorsiones individuales de los ratones
La tabla 2 presenta particularmente el número de contorsiones que presentó cada
ratón.
En el grupo control negativo se observó que al ratón N°1, a quien se le administró
suero fisiológico presentó 38 contorsiones; mientras que al ratón N°2, a quien
también se le administró la misma sustancia presentó un número menor de
contorsiones no por mucha diferencia siendo este de 32.
En el otro grupo control positivo se administró ketorolaco, presentándose 5
contorsiones en el ratón N°3 y 6 contorsiones en el ratón N°4. Produciéndose un
número similar de contorsiones en cuanto a la respuesta analgésica de este AINE.
En los grupos experimentales con extracto acuoso de Plantago major (3000mg/kg)
se observó que el ratón N°5 presentó 39 contorsiones, debido a las dificultades en el
procedimiento. Mientras que en el ratón N°6 se vieron efectos completos de este
Nro. ratón GRUPONúmero de
contorsiones
1 GRUPO CONTROL –Suero fisiológico (0.1ml/kg)
38
2 32
3 GRUPO CONTROL +Ketorolaco (12mg/kg)
5
4 6
5 Extracto acuoso de Plantago major (3000mg/kg)
39
6 11
7 Extracto acuoso de Plantago major (5000mg/kg)
16
8 0
extracto ya que no se presentó defectos en la administración, mostrando
verdaderamente el poder analgésico del Plantago major con solo 11 contorsiones.
En el otro grupo experimental con extracto acuoso de Plantago major (5000mg/kg)
se observó que el ratón N°7 presentó 16 contorsiones. Mientras que el ratón N°8
no presentó ninguna contorsión, a pesar de que se le observó por un largo tiempo
(40 minutos).
TABLA N°3. Promedio de los efectos del suero fisiológico, del Ketorolaco y del efecto del extracto acuoso de Plantago major a dosis de 3000mg/kg y 5000mg/kg
sobre los perfiles de analgesia
GRUPO EXPERIMENTALPeriodo de Latencia de dolor (minutos)
Promedio de contorsiones (ratón cabeza y lomo)
GRUPO CONTROL –Suero fisiológico (0.1ml/kg)
6´ 35
GRUPO CONTROL +Ketorolaco (12mg/kg)
10´ 6
Extracto acuoso de Plantago major (3000mg/kg)
12´ 25
Extracto acuoso de Plantago major (5000mg/kg)
12´ 8
La tabla 3 resume los datos presentados en la tabla 2. Se puede observar que el grupo
control negativo, tratado con suero fisiológico, en un periodo de latencia de 6 minutos,
produce el mayor número de contorsiones, con un promedio de 35 contorsiones.
En el grupo control positivo tratado con Ketorolaco, se observa una mayor resistencia a
las contorsiones, tanto en tiempo como en número, puesto que en 10 minutos se produce
un promedio de 6 contorsiones siendo este un número muy reducido con respecto al
grupo control negativo por lo que se ve el efecto propio del ketorolaco.
En el primer grupo experimental tratado con Plantago major a una dosis de 3000mg/kg,
en un periodo de latencia de 12 minutos se produce un promedio de 25 contorsiones y
estiramientos.
En el segundo grupo experimental tratado con Plantago major a una dosis de
5000mg/kg, en un periodo de latencia de 12 minutos se produce un promedio de 8
contorsiones.
Ketorolaco (12mg/kg) Plantago major (3000mg/Kg)
Plantago major (5000mg/Kg)
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90% 83%
29%
77%
FIGURA N°1. Representación porcentual de analgesia según tratamientos:
Ketorolaco (12mg/kg), Plantago major (3000 mg/kg) y Plantago major (5000
mg/kg)
Se observa de la figura N°1 que el Ketorolaco (AINE con propiedades analgésicas)
presenta un efecto analgésico de 83%, mientras que el Plantago major a una dosis de
5000 mg/kg posee un 77% de poder analgésico. Esto nos demuestra que el extracto
acuoso de Plantago major en altas concentraciones posee propiedades analgésicas
comparables a un fármaco sintético. Sin embargo, a una menor concentración del
extracto del Plantago major (3000 mg/ml) el efecto analgésico fue mucho menor
(29%), es decir, no presenta cambios significativos en el alivio de las contorsiones.
DISCUSION
Los resultados demuestran que la planta posee efectos analgésicos y esto se observó a
través de la conducta exploratoria de los ratones (contorsiones y estiramientos),
respaldando la bibliografía consultada previo al estudio.
El hecho de que el extracto acuoso atenúe la respuesta analgésica inducida por la
administración de ácido acético, demuestra que hay varios mecanismos de acción
involucrados en la acción analgésica del Plantago major. En este modelo, se decidió
compararlo frente a un AINE basándose en investigaciones anteriores.
En el grupo control con suero fisiológico se ven los efectos totales del ácido acético,
debido a que el suero fisiológico no tiene efectos significativos en el cuerpo por su
composición de agua y electrolitos. En un periodo de 6 minutos se manifestó el inicio
del dolor a través de la primera contorsión, y durante el tiempo observado se registró un
promedio de 35 contorsiones (tabla N°3). Por esta razón, el número de contorsiones
producidas es tomado como control negativo para poder evaluar y comparar las
propiedades analgésicas de los distintos tratamientos (control positivo y experimental)
frente a una cifra basal de 35 contorsiones de promedio, lo que corresponde al 0% de
analgesia. El ácido acético, utilizado como conservante, quitaóxido o vinagre, en dosis
tóxicas por vía oral provoca a nivel del estómago un píloro espasmo con retención de la
sustancia, disminuyendo el pH a menos de 4, causando lesiones a nivel de la mucosa
que se manifiestan a través de perforación y estenosis pilórica, ulceraciones, odinofagia
y depapilación lingual (Saracco, s/a)28.
En el grupo control positivo, tratamiento con Ketorolaco, existe una mayor resistencia a
los efectos del ácido acético, por que el periodo de latencia fue de 10 minutos con un
promedio de 6 contorsiones, lo que equivale a un 85% de analgesia (tabla N°3). Esto se
debe a que el Ketorolaco como un antiinflamatorio no esteroideo (AINE) está indicado
en el tratamiento a corto plazo del dolor agudo de moderado a severo. Siendo el
mecanismo de acción la inhibición de la actividad enzimática de la ciclooxigenasa, que
da como resultado una disminución en la síntesis de prostaglandinas y tromboxanos
procedentes del ácido araquidónico, citoquinas producidas por la acción del ácido
acético cuando existe una lesión a nivel de la mucosa..
En el grupo experimental con Plantago major a una dosis de 3000mg/kg, se observó
que el ratón N°5 a los 2 minutos presentó la primera contorsión, con un total de 39
contorsiones durante el tiempo observado de 10 minutos, sin embargo este ratón sangró
durante el manejo del estudio, por lo que no se observa eficientemente los efectos
analgésicos del Plantago major. No obstante, no podemos descartar esta muestra por la
poca cantidad de sujetos de observación, sin embargo esto altera la media, al presentar
una desviación estándar de ±12.72. En el ratón N°6 se observó un total de 11
contorsiones, con el inicio del dolor a los 23 minutos. A pesar de haberse presentado
dificultades en este grupo se observó que el Plantago major presentó un 29% de poder
analgésico.
En el grupo experimental con Plantago major a una dosis de 5000mg/kg se obtuvo una
media de 8 contorsiones, considerando que el ratón N°7 perdió una gota del tratamiento.
Este ratón presentaba dificultades al caminar, y cuando sufría las contorsiones se
inmovilizaba durante un rato, asimismo no respondía mucho frente a ciertos estímulos
hechos con el lapicero. El ratón N°8 sin embargo, no presentó ninguna contorsión, a
pesar de que se le observó esperando la primera contorsión por cuarenta (40) minutos.
Su movilidad era normal y respondía rápidamente a estímulos con el lapicero, no
parecía estar afectado por el ácido acético.
A pesar de que el ratón N°7 sufrió malos manejos en la administración y sangrado,
presentó un reducido número de contorsiones a comparación de otros grupos y el ratón
N°8 que no tuvo ninguna de estas dificultades no presentó contorsiones a pesar de un
tiempo de observación cuatro veces mayor a la media de los períodos de latencia de
todos los grupos (10 minutos aproximadamente). El efecto analgésico probablemente se
deba a la presencia de flavonoides y ácido salicílico, por lo que es comparable a un
AINE. Por otro lado, la presencia de mucílagos incrementa la facilidad de absorción y
biodisponibilidad de los compuestos activos que estarían involucrados en la analgesia
(Blanco, 2008)4.
Comparando los resultados obtenidos con un trabajo realizado por María Elena Núñez
Guillén y colaboradores en 1997, se respalda la validez del estudio realizado. Núñez
señala que el extracto acuoso de P. major reduce eficazmente las cortorsiones inducidas
por ácido acético pero no cambió las respuestas de cola frente al dolor inducido por
calor. Asimismo, indica que posee una mayor efectividad en reducir el dolor producido
por edema de oreja que el aceite de crotón (control positivo) (Núñez et al., 1997)21.
CONCLUSIONES
Luego de realizar el presente trabajo experimental, se demostró el efecto analgésico del
Plantago major (llantén) a una dosis de 5000mg/kg en un modelo de contorsiones
inducidas por ácido acético con un poder de analgesia del 77%. Esto nos confirma su
propiedad terapéutica como analgésico.
Sin embargo, se concluye que Plantago major (llantén) a una dosis de 3000mg/kg no
posee propiedades analgésicas significativas, porque al presentar un poder de analgesia
del 29% no muestra una marcada disminución en el número de contorsiones y por ende
del dolor.
Por consiguente, este trabajo nos permite aportar mediante métodos experimentales pre-
clínicos empleados en el laboratorio, la eficacia de Plantago major (llantén) en la
analgesia.
RECOMENDACIONES
Según las evidencias del efecto analgésico del Plantago major (llantén) se puede
considerar como terapia alternativa para el alivio de contorsiones abdominales.
La infusión de hojas secas del Plantago major (llantén) se puede utilizar como
analgésico natural debido a sus propiedades medicinales.
Es recomendable el uso del Plantago major (llantén) por vía oral por ser una vía de
fácil administración para la persona.
Se podría realizar estudios más detallados a nivel clínico y con una mayor muestra
para poder determinar más específicamente el mecanismo de acción que presenta el
Plantago major (llantén) y además poder comprobar alguna otra de propiedad
medicinal.
A nivel social, en una terapéutica rural, en familias cuya situación económica es
baja, o en zonas de difícil acceso a los medicamentos, es recomendado el uso de las
hojas secas del Plantago major (llantén) como reemplazo al Ketorolaco.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Salud y bienestar. Los espasmos abdominales (base de datos en línea). [fecha de acceso:
15 de Junio del 2013]. Disponible en: http://lasaludi.info/los-espasmos-abdominales.html
2. Hospital cruces- urgencia pediatría. Dolor de tripa (base de datos en línea). [fecha de
Anexo 1: Presentación del material farmacológico (2 y 5) y material biológico (1, 3 y 4). 1: Suero fisiológico. 2: Ketorolaco (12mg/kg). 3: Extracto acuoso de Plantago major (3000mg/kg). 4: Extracto acuoso de Plantago major
(5000mg/kg). 5: Ácido acético al 1%
Anexo 2: Se procedió a pesar los ratones (material biológico)
Anexo 3: Se marcó los ratones según los grupos experimentalesGrupo A (ratones 1 y 2): Grupo control negativo con suero fisiológico
Grupo B (ratones 3 y 4): Grupo control positivo con ketorolaco a una dosis de 12mg/kg.Grupo C (ratones 5 y 6): Grupo experimental 1 con extracto acuoso de Plantago major a una dosis de
3000mg/kgGrupo D (ratones 7 y 8): Grupo experimental 2 con extracto acuoso de Plantago major a una dosis de
5000mg/kg
1 2 3 4 5
Anexo 4:Cargado de las agujas con los tratamientos a administrar. 1: Suero fisiológico. 2: Ketorolaco (12mg/kg). 3: Extracto acuoso de Plantago major (3000mg/kg). 4: Extracto acuoso de Plantago major (5000mg/kg).
Anexo 5:Administración del tratamiento a los ratones vía intragástricaVerde: Grupo control negativo con suero fisiológico
Azul: Grupo control positivo con ketorolaco a una dosis de 12mg/kgRojo: Grupo experimental 1 con extracto acuoso de Plantago major a una dosis de 3000mg/kg
Negro: Grupo experimental 2 con extracto acuoso de Plantago major a una dosis de 5000mg/kg
Anexo 6:Administración del ácido acético vía intraperitoneal
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Anexo 7:Observación de las contorsiones en 10 minutos1: Grupo control negativo con suero fisiológico
2: Grupo control positivo con ketorolaco a una dosis de 12mg/kg3: Grupo experimental 1 con extracto acuoso de Plantago major a una dosis de 3000mg/kg4: Grupo experimental 2 con extracto acuoso de Plantago major a una dosis de 5000mg/kg
Anexo 81:Comparación del ratón N°7 (izquierda: normal) con ratón 8 (derecha: contorsión)
2: El ratón N°8 no presentó ninguna contorsión durante el tiempo observado de 40 min (4 veces la media del período de latencia de los otros ratones)