Frank Frank Diagnosztika Diagnosztika - - Dako Dako Szimp Szimp ó ó ziuma ziuma 200 200 8.12.05. 8.12.05. dr. Udvarhelyi N dr. Udvarhelyi N ó ó ra ra MOLEKUL MOLEKUL Á Á RIS PATHOL RIS PATHOL Ó Ó GIAI GIAI C C É É LPONTOK AZ EML LPONTOK AZ EML Ő Ő R R Á Á KBAN KBAN
45
Embed
MOLEKULÁRIS PATHOLÓGIAI - Frank DiagnMolekularis célpontok a kezelésben ((„target treatment”) Olyan molekuláris célpontokra irányul, amelyek - a jó és rosszindulatú sejteket
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
Frank Frank DiagnosztikaDiagnosztika--DakoDako SzimpSzimpóóziumaziuma2002008.12.05.8.12.05.
dr. Udvarhelyi Ndr. Udvarhelyi Nóórara
MOLEKULMOLEKULÁÁRIS PATHOLRIS PATHOLÓÓGIAI GIAI CCÉÉLPONTOK AZ EMLLPONTOK AZ EMLŐŐRRÁÁKBANKBAN
Az emlAz emlőőrráák genotk genotíípusa, pusa, fenotfenotíípusapusa éés s klinikai lefolyklinikai lefolyáása is igen sa is igen heterolheterolóógg. . Jelenleg a terJelenleg a teráápipiáás ds dööntntéést a patolst a patolóógiai giai éés s klinikai prognosztikus klinikai prognosztikus éés predikts prediktíív faktorok v faktorok hathatáározzrozzáák meg.k meg.De: a hasonlDe: a hasonlóó klinikokliniko--patolpatolóógiaigiaimegjelenmegjelenééssűű daganatok kdaganatok kóórlefolyrlefolyáása sa éés s terteráápipiáás vs váálaszreakcilaszreakcióója is eltja is eltéérrőő..FokozFokozóóddóó igigéény van olyan tovny van olyan továábbi bbi prognosztikusprognosztikus--prediktprediktíív faktorokra, amelyek v faktorokra, amelyek javjavíítjtjáák a betegek rizikk a betegek rizikóó besorolbesoroláássáát t éés a s a ccéélzott kezellzott kezeléések sek indikindikááccóójjáátt..
Nottingham prognosztikai index (NPI):Nottingham prognosztikai index (NPI):Tumor nagysTumor nagysáág x 0.2 + Gr (1g x 0.2 + Gr (1--3) + 3) + NyirokcsomNyirokcsomóó ststáádiumdium
Az NPI prognosztikai értékeAz NPI prognosztikai Az NPI prognosztikai éértrtéékeke
TerTeráápipiáás csoportok as csoportok a NPI alapján
Csoportok:Csoportok:
80% OS80% OS15 15 éévv
ha NPIha NPI<3.4 <3.4
42% OS 42% OS 15 15 éévv
ha NPIha NPI3.43.4--5.4 5.4
13% OS13% OS15 15 éévv
ha NPIha NPI>5.4 >5.4
KKöövetkezmvetkezméény:ny:
adjuvadjuváánsnskemoterkemoteráápia pia szszüükskséégesges--ee
KKéétstséégesgesKemoterKemoteráápiapia
HASZNOS HASZNOS LEHETLEHET
KemoterKemoteráápiapiaKELLKELL
Molekularis célpontok a kezelésben(„target treatment”)MolekularisMolekularis ccéélpontok a kezellpontok a kezeléésbensben((„„targettarget treatmenttreatment””))
Olyan molekulOlyan molekulááris cris céélpontokra irlpontokra iráányul, amelyeknyul, amelyek
-- a ja jóó éés rosszindulats rosszindulatúú sejteket elksejteket elküüllöönníítiktik-- a daganatos sejtek na daganatos sejtek nöövekedvekedéésséében ben ééss
progressziprogresszióójjáában fontos szerepban fontos szerepüük vank van-- ttööbbnyire a felszbbnyire a felszíínen vagy a sejtmagban levnen vagy a sejtmagban levőő
TTööbb bb scoringscoring rendszer lrendszer léétezik. Csak a magfesttezik. Csak a magfestőőddéés vehets vehetőőfigyelembe figyelembe éés az s az invazinvazíívv komponens egkomponens egéészszéét kell t kell éértrtéékelni.kelni.Ahhoz, hogy a kAhhoz, hogy a küüllöönbnböözzőő laboratlaboratóóriumok riumok éértrtéékei kei öösszehasonlsszehasonlííthatthatóók legyenek, ajk legyenek, ajáánlott a nlott a Quick (Quick (AllredAllred) ) scorescorehasznhasznáálatalata. Ez a fest. Ez a festőőddéés ars aráánynyáán n éés s intenzintenzíívitvitáássáánn alapul:alapul:
Sejtmagok arSejtmagok aráánynyáának pontja Intenzivitnak pontja Intenzivitáás pontjas pontja0 = nincs fest0 = nincs festőőddéés 0 = nincs fests 0 = nincs festőőddééss1 = < 1% mag fest1 = < 1% mag festőőddéés 1 = gyenge fests 1 = gyenge festőőddééss2 = 12 = 1––10% mag fest10% mag festőőddéés 2 = ks 2 = köözepes festzepes festőőddééss3 = 113 = 11––33% mag fest33% mag festőőddéés 3 = ers 3 = erőős fests festőőddééss4 = 344 = 34––66% mag fest66% mag festőőddééss5 = 675 = 67––100% mag fest100% mag festőőddééss
A pontok A pontok öösszeadsszeadóódnak, maximum 8 pontdnak, maximum 8 pont
QQ-- scorescore
QQ--scorescore 5
QQ--scorescore 88
QQ--scorescore 33
0 pont : endokrin kezel0 pont : endokrin kezeléés hats hatáástalanstalan
HER 2 immunhisztokémiaHER 2 HER 2 immunhisztokimmunhisztokéémiamia
Wolff, A. C. et al. J Clin Oncol; 25:118Wolff, A. C. et al. J Clin Oncol; 25:118--145 2007145 2007
Fig 1. Algorithm for immunohistochemistry (IHC)Fig 1. Algorithm for immunohistochemistry (IHC)
American Society of American Society of ClinicalClinical OncologyOncology/College of American /College of American PathologistsPathologistsGuidelineGuideline RecommendationsRecommendations forfor HumanHumanEpidermalEpidermal GrowthGrowth FactorFactor Receptor 2 Testing Receptor 2 Testing inin BreastBreast CancerCancer
LowLow riskrisk ETET ETET ControversialControversialNodeNode negativenegative AND AND allall of of thethe followingfollowing:: NilNil NilNil SeeSee texttext
pTpT <2 cm, AND<2 cm, ANDGradeGrade 1, AND1, ANDNo No peritumoralperitumoral vascularvascular invasioninvasion, AND, ANDHER2/HER2/neuneu genegene notnot overexpressedoverexpressed nornor amplifiedamplified, AND, ANDAgeAge >> 35 35 yearsyears
IntermediateIntermediate riskrisk ET ET alonealone, , ororNodeNode negativenegative AND AND atat leastleast oneone of of thethe followingfollowing:: CT ETCT ET CT CT ETET CTCT
pTpT >2 cm, OR>2 cm, OR (CT + ET)(CT + ET) (CT + ET)(CT + ET)GradeGrade 22––3, OR3, OR TrastuzumabTrastuzumab TrastuzumabTrastuzumab TrastuzumabTrastuzumab
PresencePresence of of peritumoralperitumoralvascularvascular invasioninvasion, OR, ORHER2/HER2/neuneu genegene overexpressedoverexpressed ororamplifiedamplified, OR, OR
A gén expressziós microarray-en alapulómolekuláris profilozás két módszere:
A gA géén n expressziexpresszióóss microarraymicroarray--enen alapulalapulóómolekulmolekulááris profilozris profilozáás ks kéét mt móódszere:dszere:
SzSzáámos eset mos eset ggéénn--expressziexpresszióóss profiljprofiljáát elemezve, t elemezve, olyan olyan „„termterméészetesszetes”” csoportok felfedezcsoportok felfedezéése, amelyek se, amelyek hasonlhasonlóó marker profillal rendelkeznekmarker profillal rendelkeznek ((hierarchicalhierarchicalclusteringclustering))
Unsupervised analysisUnsupervised analysis
Az eltAz eltéérrőő kkóórlefolyrlefolyáássúú esetek esetek öösszehasonlsszehasonlííttáássáával val meghatmeghatáározni a molekulrozni a molekulááris kris küüllöönbsnbséégeket illetve geket illetve jellegzetessjellegzetesséégeket az geket az íígy kialakgy kialakíított csoportokbantott csoportokban
PerouPerou CM et al NatureCM et al Nature406: 747406: 747--752, 2000752, 2000
A transcripciós profilon alapuló osztályok szorosan megfelelnek a klinikai csoportoknak
A tA transcripranscripcciióóss profilprofilonon alapulalapulóó osztosztáályok lyok szorosan megfelelnek a klinikai csoportoknakszorosan megfelelnek a klinikai csoportoknak
A B
R R RouzierRouzier et al, et al, ClinClin Cancer Res, 11:5678, 2005Cancer Res, 11:5678, 2005
LuminLumináálislis A A : (ER+ : (ER+ éés / vagy s / vagy PrRPrR+, HER2 +, HER2 --))
LuminLumináálislis B B : (ER+ : (ER+ éés / vagy s / vagy PrRPrR+, HER2 +)+, HER2 +)
1 1 LuminalLuminal--AA 1919––39% 39% DemonstrateDemonstrate thethe highesthighest expressionexpression of of thethe ER and ER and ERER--relatedrelatedgenesgenes and show and show thethe bestbest prognosisprognosis
2 2 LuminalLuminal--BB 1010––23% 23% HaveHave profilesprofiles enrichedenriched forfor ‘‘luminalluminal genesgenes’’ butbut show show lowlow toto moderatemoderateexpressionexpression of of genesgenes pertainingpertaining toto thethe ER ER clustercluster. . ComparedCompared withwithluminalluminal--AA, , theythey maymay havehave a a higherhigher proliferationproliferation raterate, , expressexpress genesgenesthatthat seemseem toto be be sharedshared withwith thethe basalbasal--likelike and HER2 and HER2 subtypessubtypes andandareare associatedassociated withwith less less favourablefavourable outcomeoutcome
B. ERB. ER-- tumourstumours (30(30––45%), 45%), characterizedcharacterized byby lacklack of HR of HR expressionexpression and and lowlow toto absentabsent expressionexpression of of somesome otherother luminalluminal markers.Thismarkers.Thisclassclass is is furtherfurther subclassifiedsubclassified intointo atat leastleast threethree distinctdistinct subtypessubtypes thatthat shareshare a a commoncommon featurefeature ‘‘e.ge.g. HR and GATA3 . HR and GATA3 negativitynegativity’’, , butbut areare otherwiseotherwise molecularlymolecularly and and biologicallybiologically differentdifferent
1 1 BasalBasal--likelike 1616––37% Express 37% Express genesgenes previouslypreviously identifiedidentified toto be be characteristiccharacteristic of of basalbasal ⁄⁄myoepithelialmyoepithelial cellscells suchsuch asas CK5 and CK17, CK5 and CK17, integrinintegrin 4, 4, lamininlaminin,,cc--KITKIT, a6, a6--integrin, integrin, metallothioneinmetallothionein 1X, 1X, fattyfatty acidacid bindingbinding protein 7,protein 7,PP--cadherincadherin, EGFR and , EGFR and NFNF--jBjB InIn additionaddition, , itit is is nownow recognizedrecognizedthatthat tumourstumours fromfrom patientspatients carryingcarrying BRCA1 BRCA1 mutationsmutationsfallfall withinwithin thethe basalbasal--likelike subgroupsubgroup
2 HER2+2 HER2+ 44––10% Express 10% Express highhigh levelslevels of of genesgenes locatedlocated inin thethe HER2 HER2 ampliconamplicon (17q11),(17q11),includingincluding HER2, GRB7, GATA4, HER2, GRB7, GATA4, highhigh--levelslevels of of NFNF--jBjB activationactivation..Both Both basalbasal--likelike and HER2 and HER2 tumourstumours shareshare certaincertain additionaladditional featuresfeatures,,suchsuch asas highhigh levelslevels of p53 of p53 mutationmutation, , aggressiveaggressive clinicalclinical behaviourbehaviour,,poorpoor prognosisprognosis and and dodo notnot respondrespond toto hormonalhormonal therapytherapy
3 3 NormalNormal breastbreast--likelike UpUp toto 10%10%of of allall breastbreast cancerscancers
CharacterizedCharacterized mainlymainly byby highhigh expressionexpression of of genesgenes characteristiccharacteristicof of parenchymalparenchymal basalbasal epithelialepithelial cellscells and and adiposeadipose ⁄⁄ mesenchymalmesenchymalstromalstromal cellscells withwith lowlow expressionexpression of of genesgenes characteristiccharacteristic ofof luminalluminalepithelialepithelial cellscells. . TheseThese tumourstumours havehave a a prognosisprognosis thatthat seemsseems toto bebebetterbetter thanthan thatthat of of basalbasal--likelike cancerscancers and and dodo notnot appearappear totorespondrespond toto neoadjuvantneoadjuvant chemotherapychemotherapy atat thethe samesame ratesrates asas otherothertumourstumours pertainingpertaining toto thethe ER) ER) clustercluster
ER+ ER+ ééss ERER-- ccarcinomarcinomáákk molekulmolekulááris ris szinten alapvetszinten alapvetőően ken küüllöönbnbööznekznek
A mA moleolekulkuláárisris abnormalitabnormalitáásoksok, amelyek, amelyeka klinikai a klinikai fenotfenotíípustpust meghatmeghatáározzrozzáák k úúj j terteráápipiáás lehets lehetőősséégeket nygeket nyúújthatnakjthatnak..
PrediktPrediktíív:v:LehetLehet--e olyan molekule olyan molekulááris profilt ris profilt azonosazonosíítani, amely korreltani, amely korreláál a vl a váárhatrhatóóterteráápipiáás vs váálasszallasszal.
A A St. St. GallenGallen kritkritéérium nem idejemrium nem idejemúúltltprognosztikai modell !prognosztikai modell !
KKöönnyen kivitelezhetnnyen kivitelezhetőő
MJ van de MJ van de VijverVijver et al, et al, New New EnglEngl J Med 347:1999, 2002J Med 347:1999, 2002
70-gén prognosztikai profil
(Partial) Validation results on n=296 patients(Partial) Validation results on n=296 patients
N=98
C Fan et al., N C Fan et al., N EnglEngl J Med 355:560, 2006J Med 355:560, 2006
21 genes
200+ genes
70 genes
500+ genes
Despite < 5% overlap in genes, there was70-80% concordance in assignment of prognosis
Az elAz előőrejelzrejelzéés eredms eredméényeinek egyeznyeinek egyezéése se 5 5 kküüllöönbnböözzőő prediprediktktíívvvizsgvizsgáálattal ugyanazon lattal ugyanazon 295 295 esetbenesetben
A klinikai A klinikai éés s genomikusgenomikus predipredikcikcióókk nem teljesennem teljesenegybehangzegybehangzóóakak, , az esetek az esetek 30% 30% --banban elteltéérnek.rnek.
Az eltAz eltéérrőő esetek tesetek tööbbnyire a klinikai bbnyire a klinikai borderlineborderlinecsoportba tartoznak: csoportba tartoznak: hishiszztoltolóógigiaiai grade 2grade 2..–– A A genomikusgenomikus tesztek jobban oszttesztek jobban osztáályozzlyozzáák a k a lowlow éés s
highhigh gradegrade eseteket, keseteket, küüllöönnöösen akkor ha sen akkor ha borderlineborderlinemorfolmorfolóógigiáával rendelkeznek.val rendelkeznek.
Genomikus Grade IndexGenomiGenomikuskus Grade IndexGrade Index
C Sotiriou et al, JNCI 98:262C Sotiriou et al, JNCI 98:262--272, 2006272, 2006
9977 ggéén, amely an, amely a hishiszztoltolóógigiaiai grade 3 grade 3 éés s grade 1 grade 1 tumotumorokatrokat elkelküüllöönníítiti
Histologic grade groups Genomic grade groupsHistologic grade 2 group
restratified by genomic grade
A genomikus teszt (GGI) javíthatja a grade besorolásta szövettanilag intermedier grade esetekben
Kik azok a ER - pozitív betegek akiknéladjuvans kemoterápia szükséges az
endokrin terápia mellett?
Kik azok aKik azok a ERER -- popozzititíív betegek akiknv betegek akiknéélladjuvanadjuvanss kkemoteremoterááppiaia szszüüksksééges az ges az
SSzzáámosmos molemolekkululáárisris mmarkerarker azonosazonosííthatja azthatja az olyan olyan ERER--popozitzitíívvbetegeketbetegeket akik kakik kóórlefolyrlefolyáása csak sa csak endoendokrinkrin terteráápipiáával kivval kiváállóó
OncotypeOncotype DxDxLuminal A molecular classLuminal A molecular classGenomic Grade IndexGenomic Grade Index8181--gene predictorgene predictorHOX13 / IL17B ratioHOX13 / IL17B ratio200200--gene SET indexgene SET index
Ezek nem mindegyike alkalmas Ezek nem mindegyike alkalmas mméég klinikai haszng klinikai hasznáálatralatra
16 Cancer and 5 Reference Genes16 Cancer and 5 Reference Genes
Risk Risk CategoryCategory
Recurrence Recurrence scorescore
Low riskLow risk RS <18RS <18Int riskInt risk RS RS ≥≥18 and <3118 and <31High riskHigh risk RS RS ≥≥3131
Paik et al. Paik et al. N Engl J Med.N Engl J Med. 2004;351:28172004;351:2817--2826.2826.
RSRS= + 0.47 x HER2 Group Score 0.47 x HER2 Group Score -- 0.34 x ER Group Score 0.34 x ER Group Score + 1.04 x Proliferation Group + 1.04 x Proliferation Group
ScoreScore+ 0.10 x Invasion Group Score + 0.10 x Invasion Group Score + 0.05 x CD68+ 0.05 x CD68-- 0.08 x GSTM10.08 x GSTM1-- 0.07 x BAG10.07 x BAG1
Oncotype DX™ Klinikai Validálás: B-14 Results – All Tam treated x 5 yrs (n=668)OncoOncotypetype DXDX™™ Klinikai Klinikai ValidValidáállááss: : BB--14 Results 14 Results –– All Tam treated x 5 yrs (n=668)All Tam treated x 5 yrs (n=668)
Distant Recurrence Free SurvivalDistant Recurrence Free Survival by RS Groupsby RS Groups
Univariate correlation of variables withOncotype DX™ Recurrence Score
Melina BMelina B FlanaganFlanagan, , ModMod PatholPathol 20082008
ÖsszefoglalásÖÖsszefoglalsszefoglaláássA gA géén n expressexpresszziióó ééss CGH CGH anaanallííziszis azt mutatja, hogy az azt mutatja, hogy az emlemlőő invainvazzíívv carcinomcarcinomáájaja nem egy betegsnem egy betegséég, hanem g, hanem molekulmolekuláárisan krisan küüllöönbnböözzőő daganatok gydaganatok gyűűjtemjteméénye. nye. A tA tööbb gbb géénen alapulnen alapulóó csoportoscsoportosííttáás hats hatéékonyabb a konyabb a daganat komplexitdaganat komplexitáássáának megismernak megismeréésséében. ben. ERER-- ééss ER+ ER+ daganatok nemcsak az daganatok nemcsak az estrogenestrogen receptor receptor tekintettekintetéében kben küüllöönbnböözzőők, hanem tk, hanem tööbb ezer eltbb ezer eltéérrőő ggéén n expressziexpresszióójjáábanban is.is.Mindez Mindez úúj terj teráápipiáás cs céélpontok felfedezlpontok felfedezéésséének alapjnek alapjáát t kkéépezi. pezi. Olyan gOlyan genomienomikuskus prognosprognoszztitikaikai profilt profilt alkalkíítottaktottak ki, amely a ki, amely a ER+ daganatokat hatER+ daganatokat hatéékonyan sorolja a konyan sorolja a low low éés s high risk high risk kategkategóóririáákba.kba.
De:De:A szA száámos vizsgmos vizsgáálat sorlat soráán eltn eltéérrőő ggéénn--profil profil jellemezte ugyanazt a csoportot.jellemezte ugyanazt a csoportot.EsetenkEsetenkéént a reproduknt a reprodukáálhatlhatóóssáág hig hiáányzik.nyzik.Egyedi esetek besorolEgyedi esetek besoroláása korlsa korláátozott.tozott.
A gA géén n expressziexpresszióóss vizsgvizsgáálatok eredmlatok eredméényeit nyeit integrintegráálni kell a tradicionlni kell a tradicionáális diagnosztikus lis diagnosztikus algoritmusba.algoritmusba.