Lampiran 1. Kromatogram Larutan Baku Isoniazid dan Pyridoxin HCleprints.unwahas.ac.id/1538/7/LAMPIRAN.pdf · 2019. 2. 1. · 43 Lampiran 1. Kromatogram Larutan Baku Isoniazid dan

43

Lampiran 1. Kromatogram Larutan Baku Isoniazid dan Pyridoxin HCl

a. Larutan standar baku Isoniazid 10 µg/mL dan Pyridoxin HCl 2 µg/mL

b. Larutan standar baku Isoniazid 20 µg/mL dan Pyridoxin HCl 4 µg/mL

c. Larutan standar baku Isoniazid 30 µg/mL dan Pyridoxin HCl 6 µg/mL

d. Larutan standar baku Isoniazid 40 µg/mL dan Pyridoxin HCl 8 µg/mL

44

e. Larutan standar baku Isoniazid 50 µg/mL dan Pyridoxin HCl 10 µg/mL

f. Larutan standar baku Isoniazid 60 µg/mL dan Pyridoxin HCl 12 µg/mL

Lampiran 2. Contoh Kromatogram Sampel Isoniazid dan Pyridoxin HCl

a. Kromatogram Sampel Isoniazid dan Pyridoxin HCl sirup A

b. Kromatogram Sampel Isoniazid dan Pyridoxin HCl sirup B

45

Lampiran 3. Contoh Perhitungan Perolehan Kembali Isoniazid dengan

Metode Standard Addition Method sirup A

1. Perolehan kembali pada sampel yang ditambah baku sejumlah 80% dari target

kadar analit dalam sampel

a. Konsentrasi sampel sebelum penambahan bahan baku (B)

1) Luas puncak isoniazid = 969139

2) Kadar isoniazid berdasarkan persamaan garis Y = 24817.54x

+230862.5 adalah 29,748 µg/mL

b. Konsentrasi bahan baku yang ditambahkan (C)

1) Luas puncak isoniazid = 695874

2) Kadar isoniazid berdasarkan persamaan garis Y = 24817.54x

+230862.5 adalah 18,737µg/mL

c. Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan bahan baku (A)

1) Luas puncak total analit 1 = 1435130

Luas puncak total analit 2 = 1435335

Luas puncak total analit 3 = 1436053

2) Berdasarkan persamaan garis Y = 24817.54x +230862.5 maka :

Kadar total analit 1 = 48,52 µg/mL

Kadar total analit 2 = 48,53 µg/mL

Kadar total analit 3 =48,56 µg/mL

46

2. Perhitungan perolehan kembali

a. Analit 1

= 100,02%

b. Analit 2

= 100,25%

c. Analit 3

= 100,41%

47

Lampiran 4. Perhitungan LOD dan LOQ Isoniazid

No X Xi² - - ² Yi Yc (Yi-Yc) (Yi-Yc)²

1 10 100 -25 625 501979 479037.9 22941.1 526294069.2

2 20 400 -15 225 695874 727213.3 -31339.3 982151724.5

3 30 900 -5 25 969139 975388.7 -6249.7 39058750.09

4 40 1600 5 25 1226697 1223564 3132.9 9815062.41

5 50 2500 15 225 1494874 1471740 23134.5 535205090.3

6 60 3600 25 625 1708295 1719915 -11619.9 135022076

35 ∑9100 ∑1750

∑2227546772

Dari persamaan Y = 24817.54x +230862.5maka Yc dapat dihitung :

1. Y = 24817.54x +230862.5

Y = 24817.54(10) +230862.5

Y = 479037,9

2. Y = 24817.54x +230862.5

Y = 24817.54(20) +230862.5

Y = 727213,3

3. Y = 24817.54x +230862.5

Y = 24817.54(30) +230862.5

Y = 975388,7

4. Y= 24817.54x +230862.5

Y = 24817.54(40) +230862.5

Y = 1223564,1

5. Y = 24817.54x +230862.5

Y = 24817.54(50) +230862.5

Y = 1471739,5

6. Y = 24817.54x +230862.5

48

Y = 24817.54(60) +230862.5

Y =1719914,9

Persamaan kurva baku : Y = 24817.54x +230862.5(r = 0,9989)

∑

= (2227546772/4)½

= 23598,45

⁄ √∑

∑

= 23598,45x√

=23598,45x 0,930

= 21946,55

Perhitungan nilai LOD :

Nilai Y pada batas deteksi ditentukan dengan persamaan Y = YB + 3 SB

Y = nilai intersept (a) pada persamaan kurva kalibrasi

SB = simpangan baku intersept (a) (Sa)

Y = 230862,5 + 3 (21946,55)

= 296702,15

Y = 24817.54x +230862.5

296702,15= 24817.54x +230862.5

LOD = X = 2,65 µg/mL

Perhitungan nilai LOQ :

Nilai Y pada batas kuantifikasi ditentukan dengan persamaan Y = YB + 10 SB

Y = nilai intersept (a) pada persamaan kurva kalibrasi

SB = simpangan baku intersept (a) (Sa)

Y = 230862,5+ 10 (21946,55)

49

= 450328

Y = 24817.54x +230862.5

450328 = 24817.54x +230862.5

LOQ = X = 8,843 µg/mL

50

Lampiran 5. Contoh Perhitungan Kadar Isoniazid

Persamaan regresi linier kurva baku adalah

Y = BX + A

Y = 24817.54x +230862.5

Replikasi 1

Y = 24817.54x +230862.5

1225784 = 24817.54x +230862.5

X = 40,09µg/mL

Sampel dilarutkan dalam 50 ml air, sehingga kadar isoniazid adalah

X = 40,09 µg/mL x 50

= 2004,5µg/mL

Kadar sebelum pengenceran 10x= 2004,5 µg/ml x 10 = 20045 µg/ml

Kadar isoniazid dalam 1 ml sampel (mg) =

= 20,04 mg

% Kadar isoniazid =

= 100,22 %

51

Lampiran 6. Perhitungan selektivitas Pyridoxin HCl dan Isoniazid

R = 4,8

52

Lampiran 7. Surat Permohonan Bahan Baku

53

Lampiran 8.Certificate of Analysis Isoniazid

54

Lampiran 9.Certificate of Analysis Pyridoxin HCl

55

Lampiran 10. Surat Keterangan Laboratorium

56

Lampiran 11. Dokumentasi Penelitian