Identification de facteurs impliqués dans la Mécanosensibilité colique. Alison Accarie / 1 er année de thèse Directeur de thèse : Pr. Michel Dapoigny Directeurs du laboratoire : Pr. Alain Eschalier et Pr. Denis Ardid UMR/INSERM 1107 Neuro Dol, Pharmacologie Fondamentale et Clinique de la
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Identification de facteurs impliqués dans la Mécanosensibilité colique. Alison Accarie / 1 er année de thèse Directeur de thèse : Pr. Michel Dapoigny Directeurs.
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Identification de facteurs
impliqués dans la
Mécanosensibilité colique.Alison Accarie / 1er année de thèse
Directeur de thèse : Pr. Michel Dapoigny
Directeurs du laboratoire : Pr. Alain Eschalier et Pr. Denis Ardid
UMR/INSERM 1107 Neuro Dol, Pharmacologie Fondamentale et Clinique de la douleur
U1107 / Pharmacologie fondamentale et clinique de la douleur
prise en charge insuffisante des douleurs chroniques
Introduction
Axe : Douleur viscérale
Douleurs abdominales
• Première cause de consultation en gastroentérologie
• Symptôme commun au SII et MICI en période de rémission
Mécanosensibilité colique : implication de canaux ioniques
ASIC (Acid sensing ion channels): sensible au pHTRPV (Transient Receptor Potential Vanilloid) : sensible au chaudTRPA (Transient Receptor Potential family A): sensible au stretch, température et irritants
Senseurs périphériques? Pas de rôle clair.
Stuart M. Brierley Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical 2010
Introduction
Identification d’un nouveau Facteur de Transcription dans cas de stimulation mécanique des tiges chez Arabidopsis & Popular sp. (Equipe MECA, UMR PIAF)
PtaZFP2
Expression précoce
Motif doigt de zinc
Mécanosenseurs présents aussi chez les plantes, avec équivalent génique chez l’animal
Introduction
Martin, 2009
Cinétique d’expression courte
Induit pour une stimulation
Phénomène de sensibilisation
NGF1-C/egr-4 équivalent génique de PtaZFP2 chez la souris
Introduction
Famille Egr :
4 sous types
Facteur de transcription / Gène de réponse précoce
Structure à doigt de zinc liaison à l’ADN Cys2-His2
Modulation d’expression de gènes lors de la transmission nerveuses
Même séquence de reconnaissance de l’ADN : GCC G/TGG GCG
Induction par NGF (culture cellulaire )
Zhican Qu 1998Impliqué dans stimuli douloureux
Egr-4 :
Deux principales études
Impliqué dans mecanosensation (vibris et cortex somata-sensoriel) suite à un stimulus mécanique physiologique
Introduction
(Mack et al., 1995).
PCR ARNm egr-4
Objectif de la thèse
Implications et rôles du facteur de transcription
EGR-4 en tant mécano senseur
Objectifs
Egr-4 impliqué dans Hypersensibilité colique chez l’animal?
Quels sont ces partenaires?
Par quels mécanismes cela passe-t-il?
Implications et rôles du facteur de transcription EGR-4 en tant que
mécanosenseurs
Plan de travail
Souris saines
Rôle dans Mécanosensibilité viscérale?
Quels sont les partenaires?
Dans quels tissus et à quel moment est-il le plus présent?
Caractérisation de la cible
Plan de travail
Souris saines
Rôle dans Mécanosensibilité viscérale?
Implication dans hypersensibilité colique?
Quels sont les partenaires?
Dans quels tissus et à quel moment est-il le plus présent?
Caractérisation de la cible
Modèle post-infectieux
Modèle stress
Modification d’expression?
Changement de partenaires?
Cinétique différente?
Protocole
Souris wt sans traitement.
Distension à 100 µL pendant 10 s.
Prélèvement 30 min, 1h30 et 3h30 après distension.
Colon
• Partie distendue
Moelle
DRG viscéraux
• L6 et S1
seringue + sonde rectale
Premiers résultats IHC
Anticorps au point pour les trois structure
Colocalisation avec des fibres nerveuses plus précisement sensitives