ICSC48 - Criação e manejo de cobaias

Universidade Federal da BahiaInstituto de Ciências da Saúde

ICSC48 – Bioterismo e Modelos Animais

Criação e Manejo de Cobaias

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ORIGEM

• Cavia porcellus - cobaia, coelhinho, porquinho da Índia

• Provenientes da América do Sul

• WAGNER, J. E. & MANNING, P. J. The Biology of the Guinea Pig. New York: Academic Press, 1976.

• De roedor nativo a animal de laboratório

• Vistos pela primeira vez pelos espanhóis no Peru (século XVII)

• Levados por marinheiros para a Europa com o propósito de domesticação e exposição

• Primeiras tentativas de obtenção de germ-free na Alemaha (Nuttal & Thierfelder, 1895)

• Reyniers (1946) obteve com sucesso a produção de GF

Posição taxonômica

• Classe: Mamífera

• Ordem: Rodentia

• Família: Cavidae

• Gênero: Cavia

• Cavia aperea – "Brazilian guinea pig" (preá), até os Andes• Cavia fulgida – "shiny guinea pig", leste do Brasil• Cavia intermedia – "intermediate guinea pig", Santa Catarina, Brasil, descrita em 1999• Cavia magna – "greater guinea pig", Uruguay, sudeste do Brasil• Cavia porcellus – "domestic guinea pig", sem ancestral exatamente conhecido• Cavia anolaimae - considerado sinônimo de C. porcellus - Colombia• Cavia guianae - considerado sinônimo de C. porcellus - Venezuela, Guiana, Brasil• Cavia tschudii (C. cutleri)– "montane guinea pig", Peru, Chile e Argentina• Cavia nana - considerado sinônimo de C. tschudii, Chile

Importância na experimentação biológica

• Modelo animal para:

• Nutrição

• Farmacologia

• Imunologia / alergia

• Radiologia

• Obtenção de sistema complemento

• Lavoiser, 1790

• Primeiras utilizações experimentais

Algumas variedades de C. porcellus

• Identificadas pelo tamanho e pela direção dos pelos

• inglesa (Dunkin – Hartley, 1926)- pêlo curto, liso e macio

• Mais comum em pesquisas.

• Abissínia (também inglesa)

• mutante de pêlos curtos e ásperos em ‘rosetas’,

• Peruana - mutante de pêloslongos e sedosos

• domesticação e de exposição

Comportamento• Sociais, tímidos, dóceis e raramente mordem ou arranham

• Assustam-se facilmente

• Defecam e urinam nos comedouros e derramam sua alimentação pelo piso da gaiola

• Adultos mordem as orelhas dos jovens e os machos podem brigar violentamente

• Disputas por uma fêmea em estro até que se estabeleça a hierarquia do grupo

• Extremamente susceptíveis a estímulos estressantes (alterações ambientais, modificações na ração, no comedouro, na água e no bebedouro, barulho intenso, movimentos bruscos)

• Miopatia de contenção!!!

• Cuidados com fêmeas gestantes

Características fisiológicas importantes

• Eritrócitos menos frágeis em soluções eletrolíticas

• Protrombina - longo tempo para sua conversão

• Escassa produção de tromboplastina no pulmão

• Excelentes fontes de complemento para ensaios sorológicos

• Sistema linfático bem desenvolvido e gânglios da cabeça e do pescoço facilmente acessíveis

• Maior formação de abscessos bacterianos ( Ernst, 2012)

Relação com a fisiologia humana• Metabolismo lipídico

• Altas concentrações de colesterol livre

• Maior parte do colesterol é LDL (alta proporção LDL/HDL)

• Possuem as lipoproteínas plasmáticas CETP, LCAT e LPL

• Reduzem TGs e LDL com exercícios e medicamentos e elevam HDL

Influência do colesterol dietético

• Outras influências dietéticas interessantes: fibras, gorduras, carboidratos, deficiência de vitamina C

• Associação das respostas fisiológicas com gênero e status hormonal

• Modelo para estudos de aterosclerose e inflamação

Nutrição

• Fundamentalmente herbívoros (grãos, verduras e pasto)

• Rações comerciais são peletizadas (max 5mm)

• Consumo médio diário: 40 g / adulto

• Validade das rações - 90 dias

• Dependentes de fontes exógenas de ácido ascórbico

• 10 mg/kg para manutenção de animais / 30 mg/kg fêmeas gestantes

Sistema de reprodução

• Animal poliéstrico

• Estro - menos de 12 hs

• Ciclo estral completo de 13 a 25 dias (em média 16 dias)

• Filhotes por ninhada - 1 a 8

• Gestação - 59 a 72 dias (média 63 dias)

• Puberdade - entre 55 e 70 dias

• Filhotes nascem com pêlos, olhos abertos e dentição completa

• Precocidade e auto-suficiência – ingestão de alimentos sólidos 3-5 dias Desmame - 14 – 21 dias (180g)

• Amamentam crias de outras fêmeas (do mesmo grupo)

• Peso ao nascer - 80 - 100 g

SISTEMA DE ACASALAMENTO• Seleção por valores genéticos

• Fêmeas - três meses de idade (400 g - 500 g)

• Machos - quatro meses (500 g - 600 g)

• Primeiro parto - antes dos 6 meses de idade

• Calcificação da pelve – partos distócicos

• Acasalamento monogâmico – macho/fêmea acasalados durante toda a vida reprodutiva

• Vantagem de fácil identificação dos filhotes e registros

• Acasalamento poligâmico – 1 macho / 5 a 12 fêmeas

• Espaço mínimo por animal (1200 cm2)

• Vantagem de maior número de animais produzidos em menos espaço

• Dificuldade para registro de crias e fêmeas inférteis

• Vida útil dos reprodutores na colônia - 24 a 30 meses idade

Desmame e sexagem

• Desmame - 180 g

• Separação por sexo e tamanho

• Machos e fêmeas apresentam o orifício genital em igual distância do ânus

• Machos - área arredondada com sulco único e contínuo

• Fêmeas - sulco interrompido pela membrana vaginal

Controle da consangüinidade na colônia

• ANIMAIS CONSANGÜÍNEOS – INBRED

• acasalamento entre irmãos e/ou pais e filhos

• 20 gerações consecutivas

• 35 cepas inbred destinadas principalmente ao estudo do câncer

• ANIMAIS NÃO-CONSANGÜÍNEOS – OUTBRED

• constituição genética variada

• estado de heterozigose - Método Poiley

• Colônia 510 fêmeas e 102 machos

• Gaiolas para cada unidade reprodutiva (5 fêmeas x 1 macho)

• Colônia dividida em 6 grupos (cada grupo 85 fêmeas e 17 machos)

Produção mensal estimada em uma colônia 510 fêmeas / 102 machos

• Período médio de gestação = 63 dias

• Número médio de filhotes/parto = 2,75

• Taxa de mortalidade de lactente = 10%

• Número de filhotes desmamados/parto = 2,5

• Desmame = 21 dias de idade

• Acasalamento = média de 90 dias de idade

• Intervalo entre partos = 63 dias de gestação + 16 dias de ciclo estral = 79 dias

• 365 dias (ano): 79 dias (intervalo) = 4,6 partos/ano (arredonda 5 partos)

• 5 partos x 2,5 filhotes = 12,5 filhotes desmamados/ano/fêmea

• 12,5 desmamados/ano x 510 fêmeas = 6.375 desmamados/ano

• Ou seja, 531,25 desmamados/mês

• índice reprodutivo = 1 filhote/fêmea/mês.

Planejamento da reposição

• Filhotes desmamados: 50% fêmeas / 50% machos

• Reposição de 100% dos reprodutores - cada período de 24 meses

• Reposição mensal – 510 / 24 = 21,25 (fêmeas) e

• 102 / 24 = 4,25 (machos)

• Taxa de mortalidade dos reprodutores e animais em crescimento = 3%

• Reserva mensal de 22 fêmeas e 5 machos de filhotes desmamados para futuros reprodutores

Identificação dos animais e registro da colônia de cobaia

• Tatuagem individual nas orelhas

• Cada orelha - três letras ou números

• Aplicação de corantes -solução de ácido pícrico (amarelo)

• Curta duração e deve ser periodicamente renovado

• Registros dos eventos ocorridos: data do acasalamento, nascimento, quantidade de filhotes nascidos, mortos, desmame, variações ambientais etc.

Contenção

• Mão sob o tórax e com a outra apoiar a parte posterior

• Suportar o peso do animal

• Deve ficar sentado sobre a palma da mão

• Os anestésicos devem ser utilizados sempre que necessário, obtendo-se maior facilidade e tempo de

• manipulação do animal.