8/15/2019 hasil thoriq
1/33
ISOLASI BAKTERI ENDOFIT
DARI DAUN NANAS DANPENGARUHNYA TERHADAPPERTUMBUHAN TANAMAN
Thoriq Khoironi
1114121186
8/15/2019 hasil thoriq
2/33
Latar Belakang
Nanas
Pengendalian
Peningkatan
Produksi nanas
SeranganOPT
Faktor
penghambat
Bakteri endofit
Pengendalian hayati
8/15/2019 hasil thoriq
3/33
Tujuan Penelitian Mengisolasi dan mengkarakterisasi bakteri
endofit dari daun tanaman nanas.
Mengetahui kemampuan isolat bakteri
endofit yang ditemukan dalam memacu
pertumbuhan tanaman.
8/15/2019 hasil thoriq
4/33
Kerangka pemikiran
Bakteri endofit adalah semua bakteri yang adadalam jaringan tanaman.
Pemacu pertumbuhan tanaman
Tanaman menjadi sehat dan tahan terhadap
serangan patogen
ntagonis
8/15/2019 hasil thoriq
5/33
Hipotesis
!. Bakteri endofit pada daun tanaman
nanas bersifat hipo"irulen.
#. Bakteri endofit yang ditemukan ada yang
berperan sebagai pemacu pertumbuhan
tanaman.
8/15/2019 hasil thoriq
6/33
Tempat dan WaktuTempat & Waktu
Laboratorium Proteksi
Tanaman & rumah kaca
Fakultas PertanianUniversitas Lampung ,
Juli – Oktober 2!" #ampel
#ampel tanaman PT$ %reat
%iant Pineapple %%P'
Terbanggi (esar, Lampung
Tengah )an PT$ *usantara
Tropical Farm *TF'$
8/15/2019 hasil thoriq
7/33
Alat dan Bahan lat$alat yang akan digunakan
dalam penelitian ini adalahca%an petri& tabung
erlenmeyer& tabung reaksi& bor
gabus& lampu bunsen& laminar
air flow & gelas ukur !'' ml&
penggaris& jarum ose&ependorf& jarum& pipet tetes&
almunium foil& plastik wrap&
kertas label& nampan& plastik
tahan panas& autoklaf &
polibag& alat pemotong& terpal&
ember plastik& kertas merang&timbangan dan alat tulis.
Bahan$bahan yang
akan digunakan dalampenelitian ini adalah
sampel daun dari
tanaman nanas yang
sehat & media Nutrient Agar ( N(& )O* +,&
larutan NaO-l& media
Oksidatif$Fermentatif &
minyak paraffin& alkohol',& air& dan a/uades.
8/15/2019 hasil thoriq
8/33
Metode PenelitianPenelitian ini terdiri dari dua tahap percobaan:
0Isolasi bakteri endofit dari daun tanaman
nanas.
0Uji untuk mengetahui karakteristik bakteri
endofit dari tanaman nanas.
8/15/2019 hasil thoriq
9/33
Isolasi Bakteri Endoft
+iren)am )g larutan
*aOl selama !
menit )an )ibilas
)engan a-ua)esh
+aun Tanaman
)ipotong !.! cm
+ihancurkan )i
)alam epen)o/
#uspensi )aun
)iisolasi ke
)alam me)ia *0
+iinkubasi
selama 1 hari
(iakan murni
8/15/2019 hasil thoriq
10/33
Uji ram dengan K!H"#
engambil biakan
murni bakteri
seban3ak ! ose
Letakkan pa)a
kaca preparat
0pabila terbentuk benang
len)ir 3ang ti)ak
terputus, maka bakteri
3ang )ibiakkanmerupakan kategori
bakteri gram negati/,
namun apabila ti)ak
terbentuk, maka bakteritersebut termasuk
kategori bakteri gram
positi/
Tusuk gigi steril
)itempelkan )an
)itarik keatas
8/15/2019 hasil thoriq
11/33
Uji !ksedati$%&ermentati$'!&(
asukan me)ia
OF seban3ak " ml
ke )alam masing4
masing tabung
reaksi
Pa)a tabung 2
ti)ak )itutupi
min3ak para/in
Pa)a tabung !)itutupi )engan
min3ak para/in
seban3ak ! ml$
#atu tusuk ose
bakteri)imasukkan
me)ia tersebut
+iingkubasi
selama 54!6
hari
8/15/2019 hasil thoriq
12/33
Lanjutan)*
0pabila ter7a)i perubahan 8arna men7a)i
kuning pa)a ke)ua me)ia baik 3ang
)itambahkan )an ti)ak )itambahkan min3akpara/in, hal ini menun7ukkan bah8a bakteri
tersebut bersi/at /ermentati/$ #ebalikn3a 7ika
ter7a)i perubahan 8arna men7a)i kuning han3a
pa)a tabung 3ang ti)ak )iberi min3ak para/in,hal ini menun7ukkan bah8a bakteri tersebut
bersi/at oksi)ati/
8/15/2019 hasil thoriq
13/33
Uji Hipo+irulen
benih )iren)am)engan air
hangat selama1 menit
)i)isin/eksi)engan
menggunakanetanol 59
)iren)am )alamsodium
hypochlirite 29selama 1 )etik
)icuci )enganmenggunakan
air sterilseban3ak 1 kali
benih mentimun)i kecambahkan
)alam ca8anpetri selama 2
hari
:mpat bibit)ipin)ahkan )i
agar air 29)alam ca8an
petri
)iinkubasiselama ! hari
pa)a suhukamar
Perema7aanisolat isolat
berumur 2 hari'
;solat bakteri)isuspensikan
)engan air steril)an )iletakkanseban3ak !<pa)a tengah4
tengah hipokotil
8/15/2019 hasil thoriq
14/33
o =:P0>0?0* P:*@0=;T
Lanjutan…
P0>0:T:>
T;*%=0T
=:P0>0?0*
P:*@0=;T
0 = sehat, tidak ada infeksi pada hipokotil
1 = satu atau dua bercak coklat muda
< 0,2 cm
2 = berak coklat muda < 0, cm dan area
kebasahan < 10! pada hipokotil" = bercak coklat muda sampai tua # 1,0 cm
dan kemudian ber$abun$ den$an
bercak lainn%a dan daerah kebasahan
10!
8/15/2019 hasil thoriq
15/33
Uji Bakteri pea!uPertu"u#an
;solathipovirulen)irema7akan)alam me)ia
*0 untuk 2 hari
;solat bakteri )ipanen)engan caramemasukkan air steril
seban3ak " ml$kemu)ian suspensi
)imasukkan ke )alam
air 1ml
(enih mentimun)i)isin/eksi
)engan etanol 59 )an natriumhypochlorite 29
(enih )isemai)alam ca8an petri
)engan lapisankertas merangselama 2 hari
#uspensi isolathipovirulen
seban3ak 2 ml)isebar )alampolibag 3ang beisitanah steril seberat
" gramPengamatan)ilakukanselama 2!
hari
=ecmbahmentimun)ipin)ahke)alampolibag
8/15/2019 hasil thoriq
16/33
Lanjutan…P0>0:T:>
P:*%00T0*
Tinggi tanaman 2 hari
sekali selama 2! hari
pengamatan (erat basah akar root' )an
berangkas shoot' pa)aakhir pengamatan (erat kering akar )an
berangkas shoot' pan7ang akar pa)a akhir
pengamatan$>ancangan 3ang)igunakan a)alahrancangan acak lengkap>0L', )engan 1 ulangan)an u7i rerata )enganmenggunakan (*T pa)atara/ A B "9$
8/15/2019 hasil thoriq
17/33
Hasil dan Pembahasan
Dari hasil isolasi yang dilakukan terhadap jaringan daun tanaman nanas
yang sehat dan sakit dengan menggunakan media NA diperoleh sebanyak
1 isolat bakteri!
Dari 1 isolat yang diperoleh terdapat perbedaan "arna isolat! Isolat
tersebut ada yang ber"arna merah #isolat N$% # &ambar 1%' ber"arna
kuning #isolat &(SH' )*' &(S+)' *+' N+' &+S++' &+S+,' &+S+* %
# &ambar -%' ber"arna hijau kekuningan #isolat *H%# &ambar )% dan isolat
yang ber"arna putih #isolat NS' (!1' A)!1' AP' &+S+P%#&ambar .%!
8/15/2019 hasil thoriq
18/33
;solat bakteri Warna (entuk Permukaan
N)
)uning Bulat -embung
1)S)!
)uning Bulat -embung
1BS)
)uning Bulat -embung
NM
Merah muda Bulat -embung
NS*
*ijau kekuningan Bulat -embung
NSP!
Putih Bulat -embung
1)S)#
)uning Bulat -embung
1B)#
)uning Bulat -embung
1B)!
)uning Bulat -embung
1)S)+
)uning Bulat -embung
NP!
Putih Bulat -embung
NS)Putih Bulat -embung
NSP#
Putih Bulat -embung
1)S)P
Putih Bulat -embung
NP#
Putih Bulat -embung
8/15/2019 hasil thoriq
19/33
2solat ber%arna merah muda
2solat ber%arna kuning
8/15/2019 hasil thoriq
20/33
2solat ber%arna hijau kekuningan
2solat ber%arna putih
8/15/2019 hasil thoriq
21/33
Hasil /ji &ram $enggunakan +0H )
*solat bakteri +asil ui
N+ &ram positi2
&+S+1&ram positi2
&(S+ &ram positi2
N$&ram positi2
NSH&ram positi2
NP-&ram positi2
&+S+-&ram positi2
&(+-&ram positi2
&(+1&ram positi2
&+S+)&ram positi2
NP1&ram positi2
NS+ &ram positi2
NSP-&ram positi2
&+S+P&ram positi2
NSP1&ram negati2
8/15/2019 hasil thoriq
22/33
Lanjutan **
*asil uji gram menggunakan )O* +,
8/15/2019 hasil thoriq
23/33
Hasil Uji !,&*solat bakteri -ksidatif .ermentatif
N+ 3 4
&+S+13 4
&(S+ 3 4
N$3 4
NSH3 4
NSP1 3 4
&+S+-3 4
&(+-3 4
&(+13 4
&+S+)3 4
NP1 3 4
NS+ 3 4
NSP-3 4
&+S+P3 4
NP-3 4
8/15/2019 hasil thoriq
24/33
Lanjutan**
*asil uji O3F
8/15/2019 hasil thoriq
25/33
/ji hipo5irulensi*solat bakteri /* '!(
NP--'67
NS+ -'8)
NSP--'77
NP1-'77
&+S+P-'.16
&(+- -'777
N+ 1'916
NSH1'8))
&+S+-1'::6
&(+11'::6
N$
1')))
NSP11'1:6
&+S+11'777
&(S+ 7'67
&+S+)7')))
+ontrol7'777
8/15/2019 hasil thoriq
26/33
2solat yang mempunyai nilai 4S2 5 # 6isolat NS)& 1)S)P&
NP#& NSP# dan NP!( menunjukkan bah%a bakteri
tersebut dapat menginfeksi tanaman indikator bahkan
dapat menyebabkan kematian pada tanaman di akhir
pengamatan 6!7 hari(. Nilai tersebut menyatakan bah%abakteri tersebut patogen pada tanaman ketimun secara in
vitro.
isolat 1)S)! & 1B)# & NM& 1BS) & NS*& 1)S)+ 1B)!&
1)S)#& NSP!& N) mempunyai nilai 4S2 8 # sehinggadapat dikatakan bah%a isolat$isolat tersebut bersifat
hipo"irulen dan digunakan untuk uji pemacu pertumbuhan
tanaman.
8/15/2019 hasil thoriq
27/33
/ji hipo5irulensi isolat bakteri endo2it pada tanaman indikator ketimun'
A% Isolat AP' isolat yang mempunyai nilai DSI = .; (% Isolat &(S+)'
isolat yang mempunyai nilai DSI < -; *% +ontrol!
0(
8/15/2019 hasil thoriq
28/33
8/15/2019 hasil thoriq
29/33
4ari ke !' isolat hipo"irulen diuji kemampuannya dalam memacu
pertumbuhan tanaman. *asil analisis menunjukkan bah%a semua
isolat memiliki kecenderungan tidak berbeda nyata antar perlakuan.
Pada tinggi tanaman dan berat kering berangkasan isolat 1)S)!
memiliki kecenderungan berbeda nyata lebih baik dari kontrol pada
taraf uji BNT 9,& pada peubah kehijauan daun isolat 1)S)! dan
1B)# memiliki kecenenderungan berbeda nyata lebih baik dari
kontrol& sedangkan pada peubah berat basah tanaman isolat1)S)!& 1B)#& NM& 1BS) yang berbeda nyata lebih baik dari
kontrol dengan kontrol.
Pertumbuhan tanaman pada isolat 1)S)! & 1B)# & NM
1BS)&1)S)#& NSP! dan N) cenderung lebih baik dari kontrol&tetapi isolat NS*& 1)S)+ dan 1B)! memiliki pertumbahan lebih
rendah dari kontrol. *al ini menunjukkan bah%a bakteri endofit
mampu memacu pertumbuhan tanaman dengan menghasilkan
hormon pengatur tumbuh.
8/15/2019 hasil thoriq
30/33
penelitian yang dilakukan 6 Munif dkk,#'!#( menunjukkan bah%a
bakteri endofit memiliki kemampuan sebagai pemacu pertumbuhan
tanaman. Bakteri endofit diketahui mampu menghasilkan berbagai
:at pengatur tumbuh dan hormon yang penting bagi pertumbuhan
tanaman.
Mekanisme kerja bakteri endofit sebagai pemacu pertumbuhantanaman karena dapat merangsang produkti"itas hormon indole
acetic acid 62( & menghasilkan siderofor 6 senya%a biotik yang
dapat digunakan untuk pengendalian( yang diperlukan dalam
pertumbuhan tanaman.
*al ini sesuai dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh 1usmaini
dkk 6#'!+( bah%a bakteri endofit dari tanaman sambiloto
menghasilkan hormon 2 dan mampu meningkatkan pertumbuhan
tanaman sambiloto.
!
8/15/2019 hasil thoriq
31/33
'
!'
#'
+'
7'
9'
;'
'
Tinggi
kehijauan daunberat basah tanaman
'
'.#
'.7
'.;
'.<
!
!.#
!.7
!.;
!.<
Berat keringberangkasan
berat kering akar
Panjang akar berat basah akar
(eberapa jenis isolat bakteri endo2it yang diinokulasikan ke
tanaman ketimun menunjukkan pengaruh yang lebih baik pada
pertumbuhan tanaman! Pada semua peubah pengamatan' isolat
&+S+*' )*' N$' &(S+)'&+S++' (1 dan N+ menunjukkan pertumbuhan yang lebih baik dari kontrol! Hal ini menunjukkan
bah"a isolat tersebut adalah isolat yang berpotensi sebagai pemau
pertumbuhan tanaman!
8/15/2019 hasil thoriq
32/33
Kesimpulan dan -aran
=esimpulan
4ari !9 isolat bakteri endofit dari daun tanaman nanas
semuanya bersifat oksidatif& !7 isolat berasal dari kelompok
gram positif dan ! isolat dari kelompok gram negatif 6isolat B!( .
2solat 1)S)-& +-& M& 1BS)+&1)S))& B! dan N)
merupakanisolat yang berpotensi sebagai bakteri pemacu
pertumbuhan tanaman.
#aran
Masih perlu adanya kajian tentang kandungan hormon yang
dihasilkan oleh bakteri P1PB.
)ajian tentang sifat antagonis bakteri P1PB terhadap patogen
tanaman nanas.
8/15/2019 hasil thoriq
33/33
Teriaka$i#