farmakognosi dan fitokimia

8/10/2019 farmakognosi dan fitokimia

1/53

i

IDENTIFIKASI SENYAWA GLIKOSIDA PADA EKSTRAK

BIJI KLUWAK (Pangium edule Reinw) DARI

DESA GANRA KABUPATEN SOPPENG

Oleh :

AZIMA

PO.71.3.251.11.1.011

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN MAKASSAR

JURUSAN FARMASI

2014


2/53

ii

IDENTIFIKASI SENYAWA GLIKOSIDA PADA EKSTRAK

BIJI KLUWAK (Pangium edule Reinw) DARI

DESA GANRA KABUPATEN SOPPENG

Karya Tulis Ilmiah Diajukan Untuk Memenuhi Syarat

Dalam Menyelesaikan Tugas Akhir Program

Pendidikan Ahli Madya Farmasi

Oleh:

AZIMA

PO.71.3.251.11.1.011

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN MAKASSAR

JURUSAN FARMASI

2014


3/53

iii

LEMBAR PENGESAHAN

KARYA TULIS ILMIAH

IDENTIFIKASI SENYAWA GLIKOSIDA PADA EKSTRAK BIJI

KLUWAK (Pangium edule Reinw) DARI DESA GANRA

KABUPATEN SOPPENG

Oleh:

AZIMA

PO.71.3.251.11.1.011

Menyetujui,


4/53

iv

LEMBAR PENGESAHAN TIM PENGUJI

Karya Tulis Ilmiah Telah Dipertahankan di Hadapan Tim Penguji Ujian

Karya Tulis Ilmiah Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kementerian

Kesehatan RI Makassar Pada Tanggal 10 Juni 2014

Tim Penguji


5/53

v

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Allah SWT atas berkah dan limpahan rahmat-Nya

sehingga Karya Tulis Ilmiah dengan judul Identifikasi Senyawa Glikosida Pada

Ekstrak Biji Kluwak (Pangium Edule Reinw) Dari Desa Ganra Kabupaten

Soppeng dapat terselesaikan sebagai salah satu syarat akademik dalam

menyelesaikan tugas akhir pada Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar.

Karya Tulis Ilmiah ini diharapkan dapat memberikan manfaat bagi pembaca

khususnya mahasiswa farmasis dalam penelitian di bidang Farmakognosi/

Fitokimia.

Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Bapak Drs. H. Ismail

Ibrahim, M.Kes., Aptselaku pembimbing I dan Ibu DR. Hj. Nurisyah, M.Si.,

Apt selaku pembimbing II atas bimbingan yang telah diberikan selama proses

penyelesaian tugas akhir ini.

Pada kesempatan ini pula, penulis menyampaikan rasa terimah kasih kepada:

1. Bapak Drs. H. Ashari Rasyid, SKM, MS, Direktur Politeknik Kesehatan

Makassar yang telah memberikan kesempatan kepada saya mengikuti

pendidikan di Politeknik Kesehatan Makassar.

2. Bapak Drs. Rusli, Sp.FRS, Apt, Ketua Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan

Makassar atas kesempatan yang diberikan kepada saya menjadi mahasiswa

Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar.

3. Tim Penguji atas saran dan masukan untuk penyempurnaan karya tulis ilmiah

ini.


6/53

vi

4. Ibu Ratna dan Pak Tang sebagai laboran Laboratorium Farmakognosi/

Fitokimia dan Ibu Ika, Ibu Idha, Ibu Ratna sebagai laboran Laboratorium

Kimia atas bimbingannya selama proses penelitian.

5. Bapak dan Ibu dosen Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar yang

telah memberikan motivasi selama mengikuti pendidikan. Serta staf tata

usaha yang membantu menyelesaikan administrasi pendidikan hingga tugas

akhir.

6. Kedua orang tua (Bapak Andi Abd. Hakim AT dan Ibu Hj. Sukma) serta

saudara-saudara saya atas nasihat, dukungan dan perhatiannya selama

menjalani pendidikan dan menyelesaikan tugas akhir ini

7. Anak-anak Tami n Friends(Winda, Erna, Ilha, Uchi, Indah, Hajar dan Lia)

atas perhatian dan bantuannya selama penyusunan tugas akhir dan 3 tahun

kebersamaan kita selama menempuh pendidikan di jurusan Farmasi.

8. Rekan-rekan mahasiswa seangkatan (Indication 2011), serta adik tingkat

(Generik 2012 dan Injeksi 2013)

9.

Seluruh pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu serta berbagai

sumber yang digunakan sebagai pedoman dalam penyusunan tugas akhir ini.

Semoga Allah SWT berkenan membalas segala kebaikan yang telah

diberikan.

Makassar, Mei 2014

Azima


7/53


8/53

viii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................ i

HALAMAN PRASYARAT ................................................................................. ii

LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................. iii

KATA PENGANTAR ......................................................................................... iv

ABSTRAK ........................................................................................................... vii

DAFTAR ISI ........................................................................................................ viii

DAFTAR TABEL ................................................................................................ x

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xi

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xii

DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiii

BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................... 1

A. Latar Belakang ................................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ........................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 3

D. Manfaat Penelitian .......................................................................... 3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 4

A.

Uraian Tanaman Kluwak ................................................................ 4

B. Glikosida .......................................................................................... 7

C. Ekstraksi .......................................................................................... 9

D. Ekstraksi dengan Metode Sokletasi ................................................ 11

E. Kromatografi Lapis Tipis ................................................................. 12

F.

Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ................................................ 13


9/53

ix

G.

KLT 2 Dimensi ................................................................................ 15

H.

Spektrofotometri .............................................................................. 15

BAB III. METODE PENELITIAN ...................................................................... 18

A. Jenis Penelitian ................................................................................ 18

B. Tempat dan Waktu Penelitian .......................................................... 18

C. Bahan dan Alat ............................................................................... 18

D. Cara Kerja ...................................................................................... 18

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 23

A.

Hasil Penelitian ............................................................................... 23

B.

Pembahasan ..................................................................................... 24

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 28

A. Kesimpulan ..................................................................................... 28

B.

Saran ................................................................................................. 28

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 29

LAMPIRAN ......................................................................................................... 31


10/53

x

DAFTAR TABEL

Tabel 1: Komposisi kandungan Biji Kluwak Tiap 100 gram ............................. 6

Tabel 2: Indeks Polaritas Pelarut.......................................................................... 10

Tabel 3: Hasil Kromatografi Lapis Tipis ............................................................. 23

Tabel 4: Hasil Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ............................................ 23

Tabel 5: Hasil KLT 2 Dimensi ............................................................................ 23

Tabel 6: Hasil Spektrofotometri Ultraviolet ........................................................ 24

Tabel 7: Hasil Spektrofotometri Inframerah ........................................................ 24

Tabel 8: Nilai Rf ekstrak n-butanol dengan eluen CHCl3-MeOH-H2O ............... 32

Tabel 9: Nilai Rf ekstrak n-butanol dengan eluen EtOAc-EtOH-H2O ................ 32


11/53

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran I. Skema Kerja ...................................................................................... 31

Lampiran II. Metode perhitungan nilai Rf tiap noda pada KLT .......................... 32

Lampiran III. Daftar nilai Rf dan warna noda pada KLT .................................... 33

Lampiran IV. Grafik Spektrofotometri UV .......................................................... 34

Lampiran V. Grafik Spektrofotometri Inframerah .............................................. 35

Lampiran VI. Gambar .......................................................................................... 36


12/53

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1: Pengeringan Sampel Biji Kluwak ...................................................... 36

Gambar 2: Ekstraksi Metode Soklet .................................................................... 36

Gambar 3: Pengujian Busa ................................................................................... 36

Gambar 4: Ekstrak n-butanol dan sisa H2O ......................................................... 36

Gambar 5: Pengeringan ekstrak n-butanol ........................................................... 37

Gambar 6: Penimbangan ekstrak n-butanol ......................................................... 37

Gambar 7: Ekstrak kering n-butanol .................................................................... 37

Gambar 8: Penotolan lempeng/ plat KLT ............................................................ 37

Gambar 9: Ekstrak n-Butanol dengan eluen CHCl3-MeOH-H2O (16 : 6 : 1) ...... 38

Gambar 10: Ekstak n-Butanol dengan EtOAc-EtOH-H2O (10 : 2 : 1) ................ 38

Gambar 11: Penotolan pada Plat Kaca KLT ........................................................ 38

Gambar 12: Hasil bercak noda pada plat kaca KLT yang tampak pada

UV 254 nm ........................................................................................ 38

Gambar 13: Hasil kerok plat kaca KLT ............................................................... 39

Gambar 14: Fraksi KLT Preparatif ...................................................................... 39

Gambar 15: Fraksi satu (F1) ................................................................................ 39

Gambar 16: Proses Identifikasi Secara Spektrofotometri Inframerah ................. 40


13/53

xiii

DAFTAR SINGKATAN

n-BuOH : n-Butanol

EtOAc : Etil Asetat

EtOH : Etanol

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

Et2O : Dietil eter

MeOH : Metanol

CHCl3 : Kloroform

F1 : Fraksi satu

F2 : Fraksi dua

F3 : Fraksi tiga

F4 : Fraksi empat


14/53

1

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Tanaman obat merupakan suatu komponen penting dalam pengobatan

tradisional.Pengobatan tradisional dipilih sebagai salah satu alternatif.Secara

umum kegunaan tumbuhan obat sebenarnya disebabkan oleh kandungan kimia

yang dimiliki.Meskipun tidak diketahui secara rinci, tetapi pendekatan secara

farmakologis menghasilkan informasi dan kegunaan tumbuhan. Menyikapi hal

tersebut maka dalam upaya meningkatkan penggunaan obat tradisional di

Indonesia diperlukan suatu penelitian komponen kimia dan khasiatnya, agar

penggunaannya tidak berdasarkan pada pengalaman tapi didukung oleh data

kimia yang cukup (Arif, Hariani: 2004).

Salah satu dari sekian banyak tanaman yang tumbuh yang dapat

dimanfaatkan sebagai tanaman obat adalah Kluwak (Pangium edule Reinw).

Masyarakat pada umumnya, khususnya masyarakat Desa Ganra Kabupaten

Soppeng yang merupakan salah satu Desa penghasil Kluwak hanya

menggunakan untuk dikonsumsi sebagai makanan. Sebagaian diantaranya

masyarakat mengetahui bahwa Kluwak dapat berfungsi sebagai obat.Menurut

Mangontan et al., (1985) dalam Dian Aprianti (2011) mengatakan padabijinya

sebagai antiseptik dan daunnya sebagai obat cacing.

Penelitian tentang kandungan Biji Kluwak sudah pernah dilakukan

oleh Pratiwi Sumiar dkk (2006) dan hasilnya menujukkan bahwa Fraksinasi

ekstrak etanol Kluwak dengan etil asetat dilanjutkan dengan kromatografi


15/53

2

lapis tipis preparatif menghasilkan dua isolat. Satu isolat (isolat P 1) yang

bereaksi dengan pereaksi Dragendorff dan larutan kalium hidroksida

menunjukkan absorbansi maksimum pada 219 dan 272 nm merupakan

senyawa golongan kumarin. Isolat lain (isolat P 2) yang bereaksi dengan

larutan besi (III) klorida dan menunjukkan absorbansi maksimum pada 216

dan 269 nm diidentifikasi sebagai suatu fenolat yang spektrum inframerahnya

mengungkapkan adanya gugus hidroksil, keton, karbonil, dan alkil.

Beberapa literatur juga mengemukakan bahwa pada Biji Kluwak juga

mengandung karbohidrat. Dimana komponen penyususn glikosida disebut

glikson (gula) yang merupakan bagian dari karbohidrat dan aglikon (bukan

gula / genin).

Senyawa glikosida memiliki efek yang digunakan untuk

mengendalikan aritmia jantung supraventikuler (atrial), dan juga mempunyai

aksi diuretik yang penting untuk penyembuhkan busung air, karena

memberikan efek memperbaiki peredaran darah (Wiryowidagdo, Sumali:

2008). Selain itu glikosida juga memiliki manfaat sebagai cadangan gula

temporer, sebagai pengatur tekanan turgor, proses glikosidasi untuk menjaga

diri terhadap pengaruh luar yang mengganggu dan sebagai petunjuk

sistematik(Hertin, Frianka: 2010).

Berdasarkan dari uraian diatas, mendorong peneliti untuk

mengidentifikasi senyawa Glikosida yang terdapat pada Biji Kluwak

(Pangium edule Reinw) yang berasal dari Desa Ganra Kabupaten Soppeng.


16/53

3

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan uraian diatas, maka yang menjadi rumusan masalah

dalam penelitian ini adalah Apakah ekstrak Biji Kluwak dari Desa Ganra

Kabupaten Soppeng mengandung senyawa glikosida?

C. Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk megetahui kandungan senyawa

glikosida yang terdapat pada ekstrak Biji Kluwak dari Desa Ganra

KabupatenSoppeng.

D. Manfaat Penelitian

Manfaat penelitian ini yaitu sebagai bukti ilmiah kepada masyarakat

tentang kandungan glikosida Biji Kluwak dari Desa Ganra Kabupaten

Soppeng dan sebagai refrensi untuk penelitian selanjutnya.


17/53

4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A.Uraian Tanaman Kluwak

1. Sistematika Tumbuhan ( T.Gembong)

Regnum : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Sub divisi : Angiospermae

Kelas : Dicotyledonae

Sub Kelas : Chorypetalae-Dialypetalae

Bangsa : Parietales/Cistales

Suku : Flacourtiaceae

Marga : Pangium

Jenis :Pangium edule Reinw

2. Morfologi Tumbuhan ( Van Steenis C.G.G.J danT.Gembong)

Pohon, tinggi 18-40 cm. ranting muda berambut coklat rapat. Daun

terkumpul pada ujung ranting, bertangkai panjang, pada pohon muda

berlekuk 3, pada yang tua bulat telur lebar, dengan pangkal yang

terpancung atau berbentuk jantung, meruncing; mengkilat, hijau tua dan

sisi atas gundul; berambut coklat rapat dan sisi bawahnya buram; 20-60

kali 15-40 cm; tulang daun pada sisi bawah sangat menonjol. Bunga

berkelamin 1, berumah 2, yang jantan dalam tandan yang berbunga

sedikit, yang betina berdiri sendiri, kadang-kadang dalam tandan.Ada lagi

25


18/53

5

bunga yang bawah betina, yang atas jantan.Anak tangkai bunga dan

kelopak berambut coklat. Kelopak tinggi 1-2 cm. daun mahkota 5-8, oval

memanjang, hijau muda, panjang 1,5-2,5 cm, di sisi dalam pada

pangkalnya dengan sisik bulat yang berambut. Benang sari 20-30, kipas

pada bunga betina dengan kepala sari yang kosong atau tanpa kepala sari,

tangkai sari besar.Bakal buah berambut coklat; papan biji 2.Kepala putik

bertaju 2-4.Buah buni berbentuk telur ellipsoid, 10-25 cm diameter,

berambut coklat rapat.Biji banyak, berusuk, keras. Di hutan, tepi sungai,

juga ditanam orang; 10-1000 m. Pangi, Ind, Pakem J, Pucung, J, Ind,

Picung, S. Pangium edule Reinw

Catatan : seluruh pohon mengandung asam cyan yang sangat beracun

dengan kadar yang tinggi. Ini biasa juga dipakai untuk alat

mencegah busuk dan alat pembunuh serangga.Biji yang

mengandung lemak sangat setelah pengolahan, menjadi

makanan, yaitu sebagai kluwek, dage, dan sebagainya; juga

dipakai untuk mengolah lemak lauk sebagai pengganti minyak

kelapa.

3.

Komposisi Kimia dan Kegunaan Biji Kluwak (Pangium edule Reinw)

Biji Kluwak mempunyai kandungan minyak/lemak yang tinggi,

dua kali lipat kandungan protein maupun karbohidratnya. Lemak Biji

Kluwak apabila diasamkan akan menghasilkan asam lemak siklik yang

tidak jenuh yaitu asam hidnokarpat (C16H28O2) dan asam khaulmograt

(C18H32O2).


19/53

6

Daging Biji Kluwak mengandung senyawa golongan alkaloida,

flavonoid, tannin dan sianida (Sulistiyani, 2005). Biji Kluwak juga

mengandung tannin, yaitu senyawa polifenol atau polialkohol sehingga

apabila dibiarkan diudara terbuka akan cepat berwarna coklat.

Mangontan et al., (1985) dalam Dian Aprianti (2011) menyatakan

bahwa selama ini tanaman Kluwak lebih banyak digunakan sebagai obat-

obatan tradisional. Penggunaan tersebut antara lain:

a.

Daun dan Biji Kluwak setelah diseduh dapat digunakan sebagai

desinfektan dan obat cacing.

b.

Kulit dan daun Kluwak dapat digunakan sebagai racun ikan.

c. Minyak dari daging Kluwak dapat digunakan untuk membuat ekstrak

yang dipakai untuk obat reumatik dan penyakit kulit.

d.

Daging Biji Kluwak segar yang dilarutkan dalam air dapat digunakan

untuk obat pembasmi kutu.

Tabel 1: komposisi kandungan Biji Kluwak tiap 100 gram

Kluwak

Kandungan Hasilnya

Air (gram) 51Kalori (kal) 275

Protein (gram) 10

Lemak (gram) 24,0

Karbohidrat(gram) 13,5

Ca (mg) 40

P (mg) 100

Fe (mg) 2,0


20/53

7

A (SI) 0

Vitamin

BI (mg) 0,15

C (mg) 300

Bydd (gram) 80

Sumber : Poedjiadi, anna: 2007 : 462

B.Glikosida

Sejumlah tanaman yang tersebar di alam mengandung glikosida steroid

dengan23 atau 24 atom karbon yang memberikan efek memperkuat pada

jantung yang melemah.Didunia pengobatan modern, glikosida dari berbagai

jenis digitalis digunakan untuk itu. Cerita yang menarik tentang pengobatan

penyakit busung air (drpsy) pertama kali dilakukan pada tahun 1785 oleh

seorang dokter dan ahli botani William Withering dengan menggunakan

tanaman digitalis (D. purpurea). Tanpa diduga, diperoleh hasil bahwa penyakit

busung air tersebut merupakan gejala kelainan jantung. Penyelidikan yang

dilakukan kemudian membuktikan bahwa pengobatan ini juga memperoleh

pembenaran secara farmakologis (Wiryowidagdo, Sumali : 2008).

Glikosida merupakan senyawa yang menghasilkan satu atau lebih gula

di antara hasil hidrolisisnya. Gula yang paling sering terbentuk adalah D-

glukosa, walaupun ramnosa, digitoksosa, simarosa, dan gula lain juga bisa

terdapat dalam komponen glikosida. Atom yang menghubungkan antara gula

dan bukan gula pada glikosida bisa S, N, O, ataupun C. Glikosida kelompok

thiol, disebut sebagai S glikosida, begitu juga jika bagian nukleofiliknya


21/53

8

adalah nitrogen disebut Nglikosida. Komponen penyususn glikosida disebut

sebagai glikson (gula) dan aglikon (bukan gula / genin).

Di dalam tatanama glikosida, nama yang umum mempunyai suatu

akhiran in,dan nama ini mengindikasikan adanya sumber glikosida. Contoh

glikosida adalah digitoxin dari Digitalis, salicin dari Salix, dan prunasin dari

Prunus. Nama yang sitematis pada umumnya dibentuk dengan menggantikan

akhiran ose dari gula pembentuk dengan osida. Awalan anomerik (-

dan -) dan awalan konfigurasi (D atau L) mendahului nama gula, dan nama

kimia dari aglikon mendahului nama gula. Sebagai contoh nama salicin yang

sitematis adalah O-hidroksi-metilfenil -D-Glikopiranosida. Namun demikian,

glikosida yang berbentuk beta yang terdapat di dalam tanaman. Hal ini

didukung kenyataan bahwa emulsin dan enzim alamiah hanya mampu

menghidrolisis glikosida bentuk . Glikosida sering diberi nama sesuai dengan

bagian gula yang terdapat di dalamnya, dengan menambahkan kata

osida. Misalnya, glikosida yang mengandung glukosa disebut glukosida,

yang mengandung arabinosa disebut arabinosida, yang mengandung asam

galakturonat disebut galakturonosida, dan lain-lain.

Secara kimiawi glikosida merupakan senyawa asetal dengan satu gugus

hidroksi dari gula mengalami kondensasi degnan gugus hiroksi dari komponen

bukan gula. Sedangkan gugus hidroksi yang kedua mengalami kondensasi di

dalam molekul gula itu sendiri membentuk suatu lingkaran oksida. Jika

dicermati, maka terlihat sebagai eter gula, jika dihubungkan oleh atom O antara

gula dan bukan gula (Hertin,Frianka: 2010).


22/53

9

Secara uji kimia dan uji aktivitas hayati obat kardioaktif tergantung

pada aktivitas hayati, reaksi rantai samping glikosida dan sifat sifat rantai

samping butenolida. Pada daerah ultraviolet, rantai samping butenolida

menunjukkan maks 217 nm dan jika menggunakan zat murni, misalnya hasil

pengerokan lapis tipis yang telah dielusi, cara ini merupakan cara yang cepat.

Tetapi uji spektroskopi ini tidak dapat digunakan untuk membedakan glikosida

dan aglikonnya (Wiryowidagdo, Sumali : 2008)..

Berdasarkan dari sudut pandang farmakologi, senyawa glikosida

memiliki efek yang digunakan untuk mengendalikan aritmia jantung

supraventikuler (atrial), dan juga mempunyai aksi diuretik yang penting untuk

penyembuhkan busung air, karena memberikan efek memperbaiki peredaran

darah (Wiryowidagdo, Sumali : 2008). Selain itu, glikosida juga memiliki

manfaat sebagai cadangan gula temporer, sebagai pengatur tekanan turgor,

proses glikosidasi untuk menjaga diri terhadap pengaruh luar yang

mengganggu dan sebagai petunjuk sistematik(Hertin, Frianka: 2010).

C.Ekstraksi

Pengetahuan tentang kandungan komponen tumbuhan berkembang

sangat pesat karena berkembangnya metode ekstraksi, isolasi, dan

karakterisasinya.Hal ini mendorong berkembangnya suatu bidang baru yang

disebut kemotaksonomi (chemotaxonomy) atau sistematik kimia

(chemosystematic) yang mengarah ke pembagian kandungan tumbuhan

berdasarkan taksa tumbuhan (plant taxa). Dengan demikian kandungan


23/53

10

tumbuhan dianggap sebagai tanda bagi evolusi dan klasifikasi tumbuhan

(Wiryowidagdo, Sumali: 2008).

Ekstraksi adalah proses penarikan komponen/ zat suatu simplisia

dengan menggunakan pelarut tertentu. Pemikiran metode ekstraksi senyawa

bukan atom dipergunakan oleh beberapa faktor, yaitu sifat jaringan tanaman,

sifat kandungan zat aktif serta kelarutan dalam pelarut yang digunakan.Prinsip

ekstraksi adalah melarutkan senyawa polar dalam pelarut polar dan senyawa

non polar dalam pelarut non polar. Secara umum ekstraksi dilakukan secara

berturutturut mulai dengan pelarut non polar (n heksan), lalu pelarut yang

kepolarannya menengah (diklor metan atau etil asetat) kemudian pelarut yang

bersifat polar (metanol atau etanol) (Harborne.I.B, 1996).

Tabel 2 : Indeks Polaritas Pelarut

Pelarut Indeks Polaritas (P)

Heksan (C6H14) 0

Toluene (C3H8) 2,4

Dietileter (C4H10O) 2,8

Diklorometan (CH2Cl2) 3,1

Butanol (C4H9OH) 3,9

Kloroform (CHCl3) 4,1

Etil asetat (C2H5COOCH3) 4,4

Aseton (CH3COCH3) 5,1

Metanol (CH3OH) 5,1

Etanol (C2H5OH) 5,2

Air (H2O) 9,0

Sumber : Fessenden et al: 1997


24/53

11

Ekstraksi digolongkan kedalam dua bagian besar berdasarkan bentuk

fase yang diekstraksi cair cair dan ekstraksi cair padat, ekstraksi cair padat

terdiri dari beberapa cara yaitu maserasi, perkolasi, refluks dan sokhletasi.

D.Ekstraksi dengan Metode Sokletasi

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah sokletasi.Metode

sokletasi ini dipilih karena pelarut yang digunakan lebih sedikit (efesiensi

bahan) dan larutan sari yang dialirkan melalui sifon tetap tinggal dalam labu,

sehingga pelarut yang digunakan untuk mengekstrak sampel selalu baru dan

meningkatkan laju ekstraksi serta waktu yang digunakan lebih cepat.

Adapun prinsip sokletasi ini adalah penyaringan yang berulangulang

sehingga hasil yang didapat sempurna dan pelarut yang digunakan relatif

sedikit.Bila penyaringan ini telah selesai, maka pelarutnya diuapkan kembali

dan sisanya adalah zat yang tersari.Metode sokletasi menggunakan suatu

pelarut yang mudah menguap dan dapat melarutkan senyawa organik yang

terdapat pada bahan tersebut.Metode sokletasi merupakan penggabungan

antara metoda maserasi dan perkolasi.

Ekstraksi komponen kimia Biji Kluwak dengan cara Biji Kluwak yang

telah kering ditimbang, dimasukkan kedalam selongsong dan ditambah dengan

etanol dipasangkan pada labu alas bulat yang telah berisi cairan penyari

sebanyak dari labu alas bulat kemudian dipasangkan pada kondensor setelah

itu diberikan vaselin dan Bunsen dinyalakan bersamaan dengan air yang masuk

melalui pipa masuk dan keluar melalui pipa keluar. Proses ini berlangsung

secara berkesinambungan hingga diperoleh ekstrak cair (Ziska, dkk: 2012).


25/53

12

E.Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi adalah metode yang dapat digunakan untuk memisahkan

dua atau lebih senyawa dalam suatu campuran. Kromatografi dapat

diklasifikasikan berdasarkan cara pemisahannya, yaitu adsorpsi, partisi,

pertukaran ion, dan penetrasi pori (Christian: 2004).

Kromatografi lapis tipis (KLT) termasuk dalam kromatografi adsorpsi.

Senyawa yang dipisahkan akan terjerap dalam fase diam berupa padatan atau

ikut mengalir bersama fase gerak yang berwujud cair. Fase diam pada KLT

umumnya disangga oleh pelat alumunium atau plastik. Hampir semua bahan

yang dapat digunakan sebagai fase diam dalam kromatografi kolom dapat

digunakan sebagai fase diam pada KLT (Christian : 2004).

Kromatografi Lapis Tipis (KLT) merupakan salah satu analisis

kualitatif dari suatu sampel yang ingin dideteksi dengan memisahkan

komponen-komponen sampel berdasarkan perbedaan kepolaran.Adapun

prinsip kerjanya yaitu memisahkan sampel berdasarkan perbedaan kepolaran

antara sampel dengan pelarut yang digunakan. Teknik ini biasanya

menggunakan fase diam dari bentuk plat silika dan fase geraknya disesuaikan

dengan jenis sampel yang ingin dipisahkan. Larutan atau campuran larutan

yang digunakan dinamakan eluen. Semakin dekat kepolaran antara sampel

dengan eluen maka sampel akan semakin terbawa oleh fase gerak tersebut.

Semua kromatografi memiliki fase diam (dapat berupa padatan, atau kombinasi

cairan-padatan) dan fase gerak (berupa cairan atau gas).Fase gerak mengalir

melalui fase diam dan membawa komponen-komponen yang terdapat dalam


26/53

13

campuran.Komponen-komponen yang berbeda bergerak pada laju yang

berbeda.campuran pelarut pengembang dan fasa diamnya dapat berupa serbuk

halus yang berfungsi sebagai permukaan penyerap (kromatografi cair-padat)

atau berfungsi sebagai penyangga untuk lapisan zat cair (kromatografi cair-

cair). Fasa diam pada KLT sering disebut penyerap walaupun berfungsi

sebagai penyangga untuk zat cair di dalam sistem kromatografi cair-

cair.Hampir segala macam serbuk dapat dipakai sebagai penyerap pada KLT,

contohnya silika gel (asam silikat), alumina (aluminium oksida), kiselgur

(tanah diatomae) dan selulosa. Silika gel merupakan penyerap paling banyak

dipakai dalam KLT (Christian: 2004).

F.Kromatografi Lapis Tipis Preparatif

KLT Preparatif dapat digunkaan untuk memisahkan bahan dalam

jumlah gram, namun sebagian besar pemakaian hanya dalam jumlah milligram

(Kristanti, 2008).Seperti halnya KLT secara umum, KLT Preparatif juga

melibatkan fase diam dan fase gerak. Dimana fase diamnya adalah sebuah plat

dengan ukuran ketebalan bervariasi. Untuk jumlah sampel 10-100 mg, dapat

dipisahkan dengan mengunakan KLT Preparatif dengan adsorben silika gel

atau aluminium oksida, dengan ukuran 20x20 cm dan tebal 1 mm, jika tebalnya

di dua kalikan, maka banyaknya sampel yang dapat dipisahkan bertambah

50%, seperti halnya KLT biasa, adsorben yang paling umum digunakan pada

KLT Preparatif adalah silika gel (Kristanti: 2008).

Sebelum ditotolkan pada plat KLT Preparatif, sampel dilarutkan

terlebih dahulu dalam sedikit pelarut. Pelarut yang baik adalah pelarut yang


27/53

14

mudah menguap, misalnya n-heksana, diklorometana atu etil asetat. Karena

jika pelarut yang digunakan tidak mudah menguap, maka akan terjadi

pelebaran pita. Konsentrasi sampel juga sebaiknya hanya 5-10%. Sampel yang

ditotolkan harus berbentuk pita yang sesempit mungkin karena baik tidaknya

pemisahan juga bergantung pada lebarnya pita (Kristanti: 2008).

Setelah plat KLT Preparatif dielusi, pita yang kedudukannya telah

diketahui dikerok dari plat. Selanjutnya senyawa harus diekstraksi dari

adsorben dengan pelarut yang sesuai (5 ml pelarut untuk 1 gram

adsorben).Diupayakan untuk menggunakan pelarut yang paling nonpolar yang

mungkin.Harus diperhatikan bahwa makin lama senyawa kontak dengan

adsorben, maka makin besar kemungkinan senyawa tersebut mengalami

peruraian.Selanjutnya ekstrak yang diperoleh disaring menggunakan corong

berkaca masir atau menggunakan membran.

Kelebihan dari penggunaan KLT Preparatif adalah biaya yang

digunakan murah dan memakai peralatan paling dasar. Sementara

kekurangannya antara lain : adanya kemungkinan senyawa yang diambil dari

plat adalah senyawa beracun, waktu yang diperlukan dalam proses pemisahan

cukup panjang ,adanya pencemar setelah proses ekstraksi senyawa dari

adsorben dan biasanya rendemen yang diperoleh berkurang dari 40%-50% dari

bahan awal (Kristanti: 2008).

G.KLT 2 Dimensi

KLT 2 arah atau 2 dimensi ini bertujuan untuk meningkatkan resolusi

sampel ketika komponen komponen solut mempunyai karakteristik kimia


28/53

15

hampir sama, karenanya nilai Rfjuga hampir sama, sebagaimana dalam asam

asam amino. Selain itu, 2 sistem fase gerak yang sangat berbeda dapat

digunakan secara berurutan pada suatu campuran tertentu sehingga

memungkinkan untuk melakukan pemisahan analit yang mempunyai tingkat

polaritas yang hampir sama.

KLT dua dimensi dilakukan dengan melakukan penotolan sampel

disalah satu sudut lapisan lempeng tipis dan mengembangkannya sebagaimana

biasa dengan eluen pertama. Lempeng kromatografi selanjutnya dipindahkan

dari chamber pengembangan dan eluen dibiarkan menguap dari lempeng.

Selanjutnya, lempeng dimasukkan dalam chamber yang menggunakan eluen

kedua sehingga pengembangan yang pertama. Suksesnya pemisahan

tergantung pada kemampuan untuk memodifikasi selektifitas eluen kedua

dibandingkan dengan selektifitas eluen pertama (Rahman, Abdul: 1985).

H.Spektrofotometri

Spektrofotometri merupakan suatu metode analisa yang didasarkan

pada pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna

pada panjang gelombang spesifik dengan mengguankan monokromator prisma

atau kisi difraksi dengan detector Fototube. Dalam analisis cara

spektrofotometri terdapat tiga daerah panjang gelombang elektromagnetik yang

digunakan, yaitu daerah UV (200 380 nm), daerah Visible (380 700 nm),

daerah Inframerah (7003000 nm).

Prinsip kerja spektrofotometri berdasarkan hokum Lambert-Beer, bila

cahaya monokromatik (I0),melalui suatu media (larutan), maka sebagian


29/53

16

cahaya tersebut diserap (Ia), sebagian dipantulkan (Ir), dan sebagian lagi

dipancarkan (It). Transmitans adalah perbandingan intensitas cahaya yang di

transmisikan ketika melewati sampel (It) dengan intensitas cahaya mula-mula

sebelum melewati sampel (Io). Persyaratan hokum Lambert-Beer antara lain :

Radiasi yang digunakan harus monokromatik, rnergi radiasi yang di absorpsi

oleh sampel tidak menimbulkan reaksi kimia, sampel (larutan) yang

mengabsorpsi harus homogeny, tidak terjadi flouresensi atau phosphoresensi,

dan indeks refraksi tidak berpengaruh terhadap konsentrasi, jadi larutan harus

pekat (tidak encer).

Aspek aspek praktis spektrofotometri UV/ Visible yang perlu

diperhatikan (G. Watson, David : 2010) :

1. Perhatian harus diberikan untuk tidak menyentuh permukaan optik sel

sampel dengan jari jari karena dapat menyebabkan absorbans yang

besar. Permukaan optik sel tertentu dapat dibersihkan dengan tisu.

2. Presisi panjang jalur sel tersebut penting. Toleransi untuk sel sel yang

bermutu baik lebih kurang 0,01 mm untuk panjang jalur. Untuk akurasi

kuantitatif maksimum, sel yang sama harus digunakan untuk pengukuran

baku dan sampel. Sel tersebut harus selalu menghadap kearah yang sama

didalam suatu penahan sel untuk memastikan bahwa semua efek optik sel

yang identik dengan pengukuran blangko dan sampel.

3. Air destilasi adalah pelarut yang ideal, tetapi tidak cocok untuk banyak

senyawa organik. Metanol dan etanol adalah pelarut yang ideal yang


30/53

17

cocok pada urutan berikutnya tetapi tidak dapat digunakan dibawak

panjang gelombang 210 nm.

4. Pelarut yang digunakan untuk melarutkan sampel, konsentrasi, pH, dan

suhu dapat dapat memengaruhi posisi dan intensitas pita serapan molekul.

Faktor faktor ini harus dikendalikan sedapat mugkin. Pemuaian pelarut

organik akibat suhu dapat menyebabkan perubahan dalam pembacaan,

seperti yang dapat terjadi pada penguapan maka sel sampel harus tertutup,

terutama jika yang digunakan adalah pelarut organic.

5.

Idealnya absorbans yang diukur harus berada dalam rentang 0,4 1,0

untuk mencegah berada diluar rentang linear instrument.

6. Penghamburan menimbulkan peningkatan absorbans yang nyata dan

disebabkan oleh partikel yang tersuspensi didalam larutan. Larutan sampel

harus bebas dari partikelnya.


31/53

18

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian observasi laboraturium yang

bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa glikosida pada ekstrak Biji

Kluwak.

B. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian telah dilaksanakan di Laboraturium Farmakognosi Jurusan

Farmasi Politeknik Kesehatan Makassar pada bulan April 2014.

C. Alat dan Bahan

1. Alat yang digunakan :

Seperangkat Alat Soklet, Botol Semprot, Chamber, Kertas Saring, Batang

Pengaduk, Timbangan Analitik, Rotavapor, Pinset, Pensil, Waterbath,

Corong Pisah, Oven Dan Beker, Lempeng Silika Gel F254, Lempeng Kaca,

Pipet Tetes, Vial, Spektrofotometer UV/ Vis Dan Inframerah.

2. Bahan yang digunakan:

Aluminium foil, aquadest, asam sulfat (H2SO4) 10%, etil astat, metanol,

etanol, n Butanol, dietil eter n-heksan dan Biji Kluwak (Pangium edule

Reinw).

D. Cara Kerja

1. Pengambilan sampel

Sampel berupa Biji Kluwak (Pangium edule Reinw) yang cukup tua tapi

belum masak diambil di Desa Ganra Kabupaten Soppeng.


32/53

19

2.

Pengolahan sampel

Biji Kluwak (Pangium edule Reinw) diambil, dicuci hingga bersih,

dipotong kecilkecil kemudian dikeringkan dengan oven pada suhu 40 -

50 selama 4 hari.

3. Ekstraksi Sampel

a. Ekstraksi Biji Kluwak dengan pelarut metanol (MeOH)

Sampel yang telah kering diekstraksi menggunakan pelarut

metanol 300 ml dengan metode sokletasi.Ditimbang sampel 100 gram,

dimasukkan kedalam klonsom, dipasang alat kondensor dan labu alas

bulat yang telah diisi dengan metanol 300 ml, dipanaskna diatas

waterbath dengan suhu pemanasan sedang.Proses ekstraksi

berlangsung sampai 20 siklus.Selanjutnya diangkat dan dikeluarkan

dari labu alas bulat, ekstrak metanol diuapkan dengan rotavafor hingga

kental.

Ekstrak metanol Biji Kluwak yang diperoleh selanjutnya

diupkan diatas waterbath hingga kering.

b. Ekstraksi sampel dengan pelarut dietil eter (Et2O)

Ekstrak kering yang diperoleh dari proses ekstraksi

sebelumnya, disuspensikan dengan H2O 50 ml, dimasukkan kedalam

corong pisah, ditambahkan pelarut eter dan ekstraksi dilakukan

sebanyak 3 kali masingmasing 10 ml.


33/53

20

c.

Ekstraksi sampel dengan pelarut n-Butanol.

Fase air selanjutnya diekstraksi dengan pelarut n-butanol.

Proses ekstraksi ini dilakukan sebanyak 3 kali masingmasing 10 ml.

Ekstrak n-butanol selanjutnya diuapkan hingga kering diatas

waterbath.

4. Identifikasi senyawa Glikosida secara KLT

Ekstrak n-butanol diidentifikasi kandungan senyawa glikosidanya

dengan metode Kromatografi Lapis Tipis dengan langkah langkah

sebagai berikut:

a.

Pengaktifan lempeng Kromatografi Lapis Tipis

Lempeng silika gel F254 diaktifkan dengan cara dipanaskan

dalam oven pada suhu 50 - 60 selama 30 menit, lalu dikeluarkan dan

siap digunakan.

b. Pembuatan Cairan Pengelusi

Cairan pengelusi yang digunakan untuk mengidentifikasi

senyawa glikosida pada sampel yaitu: etil asetat: etanol : air dengan

perbandingan 10 ml : 2 ml : 1 ml dimasukkan kedalam chamber.

c.

Penjenuhan Eluen

Kertas saring dipotong memanjang dimasukkan dari dasar

chamber yang berisi cairan pengelusi hingga menjulur keluar

kemudian ditutup.Eluen atau cairan pengelusi yang telah dimasukkan

kedalam chamber dikatakan jenuh bila seluruh bagian kertas saring

menjulur keluar telah terbasahi.


34/53

21

d.

Penotolan sampel pada lempeng KLT

Dibuat garis lurus pada lempeng KLT 1 cm (dari batas bawah)

dan 0,5 cm (dari batas atas). Ekstrak n-butanol dilarutkan dengan eluen

kemudian ditotolkan pada batas bawah lempeng, dilakukan elusi

sampai batas atas telah ditentukan.

5. Fraksinasi ekstrak n-butanol menggunakan Kromatografi Lapis Tipis

Preparatif

Fraksinasi dilakukan untuk mendapatkan isolat (ekstrak) murni

glikosida dari ekstrak n-butanol Biji Kluwak. Sampel ditimbang 1 gram,

dilarutkan dengan eluen (etil asetat :etanol : air), ditotolkan pada lempeng

kaca, dimasukkan kedalam chamber, dielusi selama beberapa menit hingga

terjadi penyerapan pada eluen sampai batas atas lempeng, diangkat dan

untuk mendeteksi bercak pada lempeng dilakukan dengan menggunakan

lampu UV pada panjang gelombang 254 nm, bercak ditandai dengan

menggunakan pensil, selanjutnya dikerok masing masing bercak dan

ditampung kedalam vial.

Setiap bercak ditampung dalam bentuk fraksi fraksi.Selanjutnya

setiap fraksi diidentifikasi dengan Kromatografi Lapis Tipis 2 dimensi.

untuk menetukan fraksi yang memberikan efek noda tunggal (senyawa

murni).


35/53

22

6.

KLT 2 Dimensi

Pada pengidentifikasian KLT 2 Dimensi, dibuat dua eluen dengan

perbandingan yang berbeda yaitu (Etil asetat : Etanol : Air) dengan

perbandingan eluen pertama (15 ml : 2 ml : 1 ml) dan eluen kedua (8 ml :

2 ml : 1 ml). Selanjutnya fraksi yang telah diperoleh masing masing

ditotolkan pada sudut lempeng yang telah digaris, kemudian dimasukkan

kedalam chamber yang berisi eluen pertama setelah dielusi sampai batas

atas, selanjutnya dipindahkan ke chamber yang berisi eluen kedua dengan

posisi yang dibalik.

7.

Penentuan kandungan glikosida dalam ekstrak n-butanol Biji Kluwak

menggunakan spektrofotomtri UV-Vis dan Inframerah.

Fraksi senyawa murni dilanjutkan dengan identifikasi pada

spektrofotometri UV/ Vis dan Inframerah.


36/53

23

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A.Hasil Penelitian

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka diperoleh hasil

sebagai berikut:

Tabel 3 :Hasil Kromatografi Lapis Tipis

EkstrakJumlah noda

Eluen

UV H2SO4

n-butanol1 1 CHCl3-MeOH-H2O (16 : 6 : 1)

4 4 EtOAc-EtOH-H2O (10 : 2 : 1)

Ket:Hasil KLT menunjukkan bahwa eluen EtOAc-EtOH-H2O(10 : 2 : 1) dapat memisahkan

noda dengan baik

Tabel 4 :Hasil Kromatografi Lapis Tipis Preparatif

EkstrakJumlah noda

UV

n-butanol 4

Tabel 5 :Hasil KLT 2 Dimensi

FraksiJumlah noda

EluenUV H2SO4

F11 1 EtOAc-EtOH-H2O (15 : 2 : 1)

1 1 EtOAc-EtOH-H2O (8 : 2 : 1)

F22 2 EtOAc-EtOH-H2O (15 : 2 : 1)

2 2 EtOAc-EtOH-H2O (8 : 2 : 1)

F32 2 EtOAc-EtOH-H2O (15 : 2 : 1)

2 2 EtOAc-EtOH-H2O (8 : 2 : 1)

F43 3 EtOAc-EtOH-H2O (15 : 2 : 1)

3 3 EtOAc-EtOH-H2O (8 : 2 : 1)

Ket:Hasil KLT 2 Dimensi menunjukkan bahwa F1 adalah senyawa tunggal/ murni


37/53

24

Tabel 6: Hasil identifikasi senyawa glikosida secara Spektrofotometri Ultraviolet

No. Fraksi (F) Peaks (nm)1. F1 0

2. F2 207

3. F3 205

4. F4 204

Tabel 7: Hasil identifikasi senyawa glikosida secara Spektrofotometri Inframerah

No. Bilangan gelombang (cm- )Gugus Fungsi

Peak Pada Pustaka

1. 3448,72 3570 - 3200 OH (hidroksi)

2. 2926,01 2924 CH alifatik

3. 1745,58 1757 C = O ester

4. 1649,58 1680 - 1600 C = C

5. 1575,64 1587 Benzen

6. 1462,04 1471 CH2CH3(metil metilen)Ket: Hasil Spektrofotometri Inframerah Fraksi Satu (F1)

B.Pembahasan

Telah dilakukan penelitianIdentifikasi Senyawa Glikosida Pada Ekstrak

Biji Kluwak (Pangium eduleReinw) Dari Desa Ganra Kabupaten Soppeng.

Senyawa glikosida dapat diidentifikasi setelah dilakukan proses ekstraksi.

Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode sokletasi,metode soklet

memungkinkan terjadinya ekstraksi berkesinambungan, sehingga senyawa

glikosida dapat larut sempurna, disamping itu metode ini adalah tergolong cara

dingin agar senyawa glikosida yang terkandung pada Biji Kluwak tidak rusak.

Sebelum diekstraksi dengan pelarut metanol, terlebih dahulu diekstraksi

dengan pelarut n-heksan selama 30 menit, ini bertujuan untuk memisahkan

kandungan minyak dari sampel karena Biji Kluwak banyak mengandunglemak.


38/53

25

Selanjutnya,sampel diekstraksi dengan pelarut metanol dan diperoleh

ekstrak kering 6,65 gram. Kemudian ekstrak ini diekstraksi kembali dengan

pelarut dietil eter dan H2O, sisa H2O kemudian diekstraksi dengan pelarut n-

butanol, ini dilakukan karena senyawa glikosida bersifat polar.

Pada pemisahan sisa H2O dari pelarut dietil eter yang selanjutnya

diekstraksi dengan pelarut n-butanol terdapat busa, ini merupakan salah satu

cara mengidentifikasi adanya kandungan senyawa glikosida pada Biji Kluwak.

Kemudian, ekstrak n-butanoldikeringkan diatas waterbath dan didapati

ekstrak kering sebanyak 2,25 gram, selanjutnya dilakukan KLT uji

pendahuluan untuk mengetahui eluen yang cocok dilakukan untuk KLT

Preparatif.

Pada KLT uji pendahuluan dengan komposisi berbagai eluen, didapati

nilai Rf 0,56 pada eluen Kloroform : metanol : air (16 : 6 : 1) dan Rf 0,91, Rf

0,76, Rf 0,52, dan Rf 0.37 pada eluen Etil asetat : etanol : air (10 : 2 : 1).

Berdasarkan dari hasil diatas maka dapat disimpulkan bahwa eluen yang dapat

digunakan untuk KLT Preparatif yaitu eluen Etil asetat : etanol : air (10 : 2 : 1).

Pada KLT preparatif diperoleh 4 fraksi masingmasing F1, F2, F3 dan

F4 selanjutnya dari fraksi fraksi tersebut dilakukan KLT dua dimensi untuk

mengetahui dari keempat fraksi tersebut yang mana merupakan senyawa murni

dan hasil dari KLT dua dimensi yang dilakukan dengan modifikasi eluen

menunjukkan bahwa pada fraksi satu (F1) merupakan senyawa tunggal atau


39/53

26

murni, dan dapat disimpulkan bahwa hasil dari KLT dua dimensi dapat

dilanjutkan dengan analisis spektrofotometri UV/ Vis dan Inframerah.

Data spektrum senyawa hasil isolasi menggunakan Spektrofotometri

Ultraviolet menunjukkan adanya serapan pada panjang gelombang () masing

masing pada fraksi F2, F3 dan F4 yaitu 207, 205 dan 204 nm, hasil ini

mengidentifikasi bahwa pada F2, F3 dan F4 terdapat suatu senyawa glikosida

yang sama jika dilakukan pengidentifikasian lebih lanjut, namun pada fraksi

satu (F1) yang diidentifikasi tidak nampak pada spektrofotometri ultraviolet,

namun karena pada KLT dua dimensi menunjukkan bahwa pada F1 merupakan

senyawa tunggal atau senyawa murni maka dilakukan analisa lanjutan pada

Spektrofotometri Inframerah.

Data spektrum hasil analisa spektrofotometri inframerah

memperlihatkan pada bilangan gelombang v max 3448,72 cm-1

mengidentifikasi adanya gugus Hidroksil (OH), pada bilangan gelombang v

max2926,01 cm-1merupakan serapan C-H alifatik, pada bilangan gelombang v

max1745,58 cm-1mengidentifikasi ( C = O) merupakan ester, pada bilangan

gelombang v max 1649,58 (C = C) merupakan senyawa karbonil, pada

bilangan gelombang v max1575,64 mengidentifikasi adanya benzen dan pada

pada bilangan gelombang v max1462,04 mengidentifikasi CH2CH3 (metil-

metilen). Gambar spektrofotometri inframerah mengidentifikasi bahwa hasil

isolasi mengandung gugus Hidroksil (OH), C-H alifatik,ester, senyawa

karbonil, benzen dan metil-metilen.


40/53

27

Berdasarkan data spektrum serapan inframerah pada Fraksi satu (F1)

menunjukkan bahwa senyawa pada F1 tersebut dapat menyerap radiasi UV

Vis, sehingga unuk pemastian perlu dilakukan pengkajian ulang. Demikian

pula pada F2, F3, dan F4 perlu dilakukan pengkajian ulang karena berdasarkan

hasil spektrum UV Vis perbedaan panjang gelombang pada fraksi tersebut

hampir sama menunjukkan adanya suatu senyawa yang sama pada fraksi

tersebut dan dugaan ini juga diperkuat pada hasil KLT 2 Dimensi dimana pada

masing masing fraksi F2, F3 dan F4 bukan merupakan senyawa tunggal/

murni.


41/53

28

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A.Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka diperoleh hasil

isolasi senyawa kimia terhadap Biji Kluwak sebanyak 4 Fraksi, Fraksi 1

merupakan senyawa murni, berdasarkan hasil identifikasi Spektrofotometri UV

dan Spektrofotometri Inframerah menggambarkanadanyagugus OH (hidroksil),

C H alifatik, C = O ester, C = C, Benzen dan CH2 CH3(metil

metilen).Sehingga dapat dinyatakan bahwa senyawa tersebut merupakan

senyawa glikosida.

B.Saran

Ditinjau dari hasil yang diperoleh maka peneliti mengharapkan dimasa

yang akan datang dapat dilakukan penelitian lanjutan karena adanya suatu

senyawa yang sama pada F2, F3 dan F4 dan penelitian lanjutan terhadap fraksi

tersebut melalui elusidasi spektro lanjutan.


42/53

29

DAFTAR PUSTAKA

Aprianti, Dian, 2011, Aktivitas Antibakteri Ekstrak Biji Picung (Pangium edule

Reinw) dan Pengaruhnya Terhadap Stabilitas Fisiko Kimia, Mikrobiologi

dan Sensori Ikan Kembung (Rastrelliger neglectus), [Skripsi], Jakarta:

Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah

Jakarta.

Astuty, Widya, 2012,Kromatografi Lapis Tipis, (https://www.google.com), diakses

tanggal 6 Januari 2014.

Eskaria Chandra, 2008, Ekstraksi Lemak Kasar Menggunakan Soxhlet Extractor,

(http://eskariachandra.wordpress.com) diakses tanggal 14 Januari 2014.

Frianka, Hertyn, 2010, Pengertian Glikosida Dan Manfaatnya

(http://hertynfrianka.blogspot.com)diakses tanggal 06 Januari 2014.

Harborne, J.B., 1996, Metode Fitokimia,Terbitan Kedua, ITB, Bandung, halm1-7.

Ibrahim, Ismail, 2009, Identifikasi Komponen Kimia Ekstrak Daun Keluwek

(Pangium Edule Reinw) Dari Lajoa Kabupaten Soppeng, Poltekkes Makassar

: Makassar.

Kristianti, 2008, Kromatografi Lapis Tipis,(http://mypharmacyworld.blogspot.com)diakses tanggal 21 Januari 2014.

Pratinida, Intan, 2008, Pemisahan Dan Pencirian Senyawa Aktif Daun Kepayang

Dan Pengaruhnya Pada Mortalitas Ulat Kubis Instar III, [Skripsi], Bogor:

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.

Rahman, Abdul, 1985, Kromatografi Untuk Analisis Obat, Ghalia Indonesia :

Bandung, Halm 4951.

Stahl, Egon, 1985, Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi, ITB :

Bandung.

Sudjadi dkk, 2008, Analisis Kuantitatif Obat, Gadjah Mada University Press,

Yogyakarta.

Sudjadi, 1983,Penetuan Struktur Senyawa Organik, Ghalia Indonesia: Bandung.

Sumiar, Pratiwi dkk, 2006, Telaah Fitokimia Kluwak (Pangium edule Reinw),

[Skripsi], Fakultas Farmasi, Institut Teknologi Bandung:Bandung.
https://www.google.com/https://www.google.com/https://www.google.com/http://eskariachandra.wordpress.com/http://eskariachandra.wordpress.com/http://eskariachandra.wordpress.com/http://hertynfrianka.blogspot.com/2010/11/glikosida.htmlhttp://hertynfrianka.blogspot.com/2010/11/glikosida.htmlhttp://hertynfrianka.blogspot.com/2010/11/glikosida.htmlhttp://mypharmacyworld.blogspot.com/http://mypharmacyworld.blogspot.com/http://mypharmacyworld.blogspot.com/http://mypharmacyworld.blogspot.com/http://hertynfrianka.blogspot.com/2010/11/glikosida.htmlhttp://eskariachandra.wordpress.com/https://www.google.com/


43/53

30

Watson, David G., 2010, Analisi Farmasi, Edisi 2, EGC : Jakarta, Halm 106

112.

Wiryowidagdo, sumali., 2008, Kimia dan Farmakologi Bahan Alam, Edisi 2,

EGC : Jakarta. Halm 2834.

Ziska, dkk, 2012, Laporan Farmakognos II, Poltekkes Makassar : Makassar,

Halm 34.


44/53

31

LampiranI: Skema Kerja

Ekstraksi MeOH

Disuspensi dengan H2O

Diekstraksi dengan Et2O

Ekstraksi n-BuOH/ H2O

Ekstrak MeOH biji

Kluwak

Sampel Biji Kluwak

Ampas

Ekstrak Et2OFase H2O

Fase H2O Ekstrak n-BuOH

Fraksinasi

Spektrofotometri

UV/ Vis dan

Inframerah

Sen awa Murni

KLT 2 Dimensi


45/53

32

32

Lampiran II:Metode Perhitungan Nilai Rf tiap noda pada KLT

Rf =

=

Catatan : Nilai b berbeda untuk setiap noda.

1

2

3

a

b


46/53

33

33

Lampiran III . Daftar nilai Rfdan warna noda KLT

Ekstrak n-butanol

Tabel 8:Nilai Rf ekstrak n-butanol dengan eluen CHCl3-MeOH-H2O (16 : 6 : 1)

Eluen

Nilai Rf

UV Warna NodaH2SO4

10 %Wrana Noda

CHCl3-MeOH-H2O

(16 : 6 : 1)

0.56 hijau 0.56 Ungu

Tabel 9:Nilai Rf ekstrak n-butanol dengan eluen EtOAc-EtOH-H2O (10 : 2 : 1)

Eluen

Nilai Rf

UV Warna NodaH2SO4

10 %Warna Noda

EtOAc-EtOH-H2O

(10 : 2 : 1)

0.91

0,76

0,520,37

0.91

0,76

0,520,37

Ungu

Coklat muda

Coklat mudaCoklat muda


47/53

34

34

Lampiran IV :Hasil Spektrum UV-Vis


48/53

35

35

Lampiran V: Hasil Spektrofotometri Inframerah


49/53

36

36

Lampiran IV. Gambar

A.

Proses Ekstraksi

Gambar 1:Pengeringan Sampel Biji

Kluwak

Gambar 2:Ekstraksi Metode Soklet

B.

Pengujian Busa dan pemisahan ekstrak n-butanol dengan sisa H2O

Gambar 3:Pengujian Busa Gambar 4: Ekstrak n-butanol dan

sisa H2O


50/53

37

C. Pengeringan ekstrak

Gambar 5:Pengeringan ekstrak n-

butanol

Gambar 6:Penimbangan ekstrak n-

butanol

D. Kromatografi Lapis Tipis

Gambar 7: Ekstrak kering n-butanol Gambar 8:Penotolan lempeng/ plat

KLT


51/53

38

Gambar 9: Ekstrak n-Butanol dengan

eluen CHCl3-MeOH-H2O

(16 : 6 : 1)

Gambar 10:Ekstak n-Butanol

denganEtOAc-EtOH-H2O

(10 : 2 : 1)

E. KLT Preparatif

Gambar11:Penotolan pada Plat Kaca

KLT

Gambar 12:Hasil bercak noda pada plat

kaca KLT yang tampak

pada UV 254 nm


52/53

39

Gambar 13:Hasil kerok plat kaca

KLT

Gambar 14:Fraksi KLT Preparatif

F. KLT 2 Dimensi

Gambar 15:Fraksi satu (F1)


53/53

40

G.

Spektrofotometri Inframerah

Gambar 16:Proses Identifikasi Secara Spektrofotometri Inframerah

farmakognosi dan fitokimia

Documents