BAB III1 Antigen Antibodi

8/17/2019 BAB III1 Antigen Antibodi

1/14

BAB 3

INTERAKSI ANTIGEN ANTIBODI

Dalam lingkungan sekitar kita terdapat banyak substansi bermolekul kecil

yang bisa masuk ke dalam tubuh. Substansi kecil tersebut bisa menjadi antigen

bila dia melekat pada protein tubuh kita yang dikenal dengan istilah hapten.

Substansi-substansi tersebut lolos dari barier respon non spesifik, kemudian

substansi tersebut masuk dan berikatan dengan sel limfosit B yang akan

mensintesis pembentukan antibodi. Pengikatan tersebut menyebabkan sel limfosit

B berdiferensiasi menjadi sel plasma. Sel plasma kemudian akan membentuk

antibodi yang mampu berikatan dengan antigen yang merangsang pembentukan

antibodi itu sendiri. Tempat melekatnya antibodi pada antigen disebut epitop,

sedangkan tempat melekatnya antigen pada antibodi disebut variabel.

Sebelum pertemuan pertamanya dengan sebuah antigen, sel-sel-B

menghasilkan molekul immunoglobulin g! dan gD yang tergabung pada

membran plasma untuk berfungsi sebagai reseptor antigen. Sebuah antigen

merangsang sel untuk membuat dan menyisipkan dalam membrannya molekul

immunoglobulin yang memiliki daerah pengenalan spesifik untuk antigen itu.

Setelah itu, limfosit harus membentuk immunoglobulin untuk antigen yang sama.

Pemaparan kedua kali terhadap antigen yang sama memicu respon imun sekunder

yang segera terjadi dan meningkatkan antibodi yang beredar lebih banyak dari

kadar sebelumnya. Sifat molekul antigen yang memungkinkannya bereaksi

dengan antibodi disebut antigenisitas. "esanggupan molekul antigen untuk

menginduksi respon imun disebut imunogenitas.


2/14

#ntigen dan antibodi terikat dengan ikatan nonkovalen dengan cara yang

sama seperti ikatan protein dengan reseptor selularnya, atau en$im dengan

substratnya. %amun reaksi antigen-antibodi sedikit berbeda karena adanya tidak

adanya perubahan kimia ireversibel dalam salah satu pengikat, yaitu, antigen atau

antibodi. #ntigen dan antibodi yang mengikat adalah reversibel dan dapat dicegah

atau dipisahkan oleh kekuatan ion tinggi atau p& yang ekstrim. Berikut ini adalah

beberapa gambaran umum interaksi antigen- antibodi'

Sifat Fisikokimia

katan elektrostatik, ikatan hidrogen, ikatan van der Waals, dan interaksi

hidrofobik adalah gaya antar molekul yang terjadi dalam reaksi antigen-antibodi.

Semua jenis gaya intermolekul tergantung pada kedekatan molekul antigen dan

antibod. (leh karena itu, ) good fit ) antara antigen tertentu dan combining site

antibodi menentukan stabilitas reaksi antigen-antibodi. Beberapa ikatan antara

antigen dan antibodi memastikan bah*a antigen akan terikat erat pada antibodi.

Afinitas

#finitas adalah "ekuatan total interaksi non kovalen antara ikatan antigen

dan antibodi tersebut. #ntibodi dengan afinitas yang rendah mengikat antigen

dengan lemah dan cenderung memisah. Sedangkan antibodi dengan afinitas tinggi

mengikat antigen dengan ketat dan terikat lama +gambar...


3/14

Aviditas

#viditas adalah ukuran kekuatan keseluruhan pengikatan antigen dengan

banyak determinan antigenik dan multivalen antibodi. #viditas adalah indikator

yang lebih baik dari kekuatan interaksi dalam sistem biologi yang nyata dari

afinitas. (leh karena itu, aviditas dari reaksi antigen-antibodi tergantung pada

valensi dari kedua antigen dan antibodi dan lebih besar dari jumlah total afinitas

individu.

Spesifisitas

Spesifisitas adalah kemampuan antibodi- combining site individu untuk

bereaksi dengan hanya satu antigen tertentu atau kemampuan dari populasi

molekul antibodi untuk bereaksi dengan satu antigen. eaksi antigen-antibodi

biasanya menunjukkan tingkat spesifisitas yang tinggi..

Reaksi Silang

eaksi silang +cross reaction antara antigen dan antibodi dapat terjadi dan

kadang-kadang bertanggung ja*ab menyebabkan penyakit pada host dan

menyebabkan hasil yang palsu dalam tes diagnostik !eskipun reaksi antigen-

antibodi sangat spesifik, dibeberapa kasus antibodi dapat bereaksi silang dari satu

antigen dengan antigen yang tidak terkait. "ebanyakan reaktivitas silang tersebut

terjadi jika dua antigen yang berbeda mempunyai epitop yang identik atau sangat

mirip. #finitas antibodi dengan epitop reaksi silang biasanya lebih kecil

dibandingkan dengan epitop aslinya. +gambar../.


4/14

0ambar . #finitas yang tinggi dan affinitas rendah

0ambar /. +a #ffinitas mengacu pada kekuatan interaksi tunggal antara antigen

dan antibodi, sementara aviditas mengacu pada kekuatan semua interaksi

gabungan. +b Suatu antibodi dapat silang bereaksi dengan epitop yang berbeda.


5/14

nteraksi antigen antibodi dapat dibagi menjadi tiga kategori yaitu tingkat

primer, sekunder dan tersier.

3. Inte!aksi Tingkat "!ime!

nteraksi tingkat primer adalah saat kejadian a*al terikatnya antigen

dengan antibodi pada suatu bagian kecil, bernama epitop. Pada tingkat ini, ikatan

antibodi yang terjadi merupakan ikatan yang melalui fragmen ikatan antigen ke

antigen homolog yang membentuk kompleks antigen antibodi. Setelah dua

substansi yang diba*a berkontak, penyatuan a*al akan berlangsung seketika

+dalam milidetik.

#ntibody binding site

0ambar struktur antibodi

nteraksi primer antigen dengan antibodi jarang dapat terlihat secara

langsung, dan visualisasi biasanya didukung dengan melakukan labeling antibodi

dan antigen dengan fluorescent, radioactive, electron-dense, atau enzymatic

markers. !etode ini meliputi metode kuantitatif dengan menggunakan serum dan

metode immunohistochemical pada jaringan.


6/14

#etode k$antitatif

Fl$o!oimm$noassa% &FIA'

1# menggunakan fluorescent sebagai pendeteksi. 1luorescent sendiri

merupakan pancaran foton cahaya yang ber*ujud elektron. Sistem ini

membutuhkan sumber cahaya pemicu loncatan electron, penyaring pancaran

cahaya, dan sistem deteksi menggunakan tabung cahaya yang memiliki pengait.

2ampu merkuri lebih sering dipergunakan sebagai sumber cahaya, meskipun

3enon, halogen, dan laser dapat dipergunakan. 1luorescent isothiosianat dan

rhodamin merupakan fluorescent yang popular.

Salah satu teknik yang popular adalah Fluoresence Polarization

Immunoassay. Polarisasi cahaya diukur dengan cara menyinari sampel

menggunakan dua polari$er pada bidang yang sama dengan bidang cahaya masuk

dan kemudian pada bidang yang telah diatur dalam posisi 456 antar bidang dengan

sampel. Pengujian ini didasarkan pada peningkatan polarisasi cahaya yang terjadi

ketika antigen fluorescent tag mengikat antibodi dan membentuk komplek imun.

#ntigen yang diberi label berukuran kecil sehingga dapat berputar cepat. Putaran

cepat inilah yang menyebabkan depolarisasi cahaya. "etika komplek antibodi

antigen terbentuk, kenaikan berat molekul menyebabkan rotasi lebih lambat dan

peningkatan emisi cahaya yang terpolarisasi. Teknik ini terutama biasanya

digunakan untuk pengukuran obat dan beberapa hormon, bagaimanapun, ia

memiliki utilitas untuk mendeteksi penyakit menular. Penggunaannya telah

dijelaskan untuk mendeteksi antibodi berbagai organisme seperti bakteri gram

negative +Brucella sp dan Salmonella sp dan virus yang menyebabkan anemia


7/14

pada kuda. 1# memiliki sejumlah keunggulan termasuk kepekaan dan kecepatan

tinggi dan sensitif. Selain itu, reagen stabil dan penggunaanya mudah dilakukan.

Fluorescent polarization immunoassay memiliki keterbatasan berupa antigen yang

harus kecil +tidak lebih dari /555 !7 untuk memungkinkan perbedaan yang

signifikan dalam polarisasi ketika membentuk komplek imun. "ekurangan lain

yang juga penting digarisba*ahi dalam penggunaan assay fluoresensi adalah

masalah senya*a autofluorescent yang digunakan baik dalam sampel pasien

maupun dalam campuran reaksi. ni bisa menjadi masalah dimana tidak ada

tahapan pencucian dan komponen sampel yang ada dalam tes. 8ntuk menghindari

masalah ini, sampel dapat ditambah dengan en$im proteolitik, agen o3ida, atau

reagen denaturasi yang akan membatasi jumlah autofluorescence.

0ambar . 1luoresen direk tes antibodi


8/14

Radioimm$noassa% &RIA'

# +adioimmunoassay adalah salah satu teknik immunoassay

yang lebih baik dan lebih sensitif yang menggunakan radioaktif antigen atau

antibodi. adioaktivitas memberikan sinyal, yang menunjukkan apakah suatu

antigen tertentu atau antibodi hadir dalam sampel. adioimmunoassay pertama

kali dijelaskan oleh osalyn Sussman 9alo* dan Salomo Berson diterbitkan pada

tahun 4:5. !eskipun # masih merupakan teknik yang layak, namun sebagian

besar telah digantikan oleh ;# di sebagian besar laboratorium klinis.

En(%me Imm$noassa% &EIA') e.g en(%meilinked imm$noso!*ent &E+ISA'

adioaktivitas menimbulkan ancaman kesehatan potensial, alternatif yang

lebih aman mulai dicari. ;2S# merupakan uji serologis yang umum digunakan

di berbagai laboratorium imunologi. 8ji ini memiliki beberapa keunggulan seperti

teknik pengerjaan yang relatif sederhana, ekonomis, dan memiliki sensitivitas

yang cukup tinggi. ;2S# diperkenalkan pada tahun 4.

Teknik ;2S# merupakan teknik kuantitatif yamg sangat sensitif,

penggunaannya sangat luas, memerlukan peralatan yang sedikit, reagen yang

diperlukan sudah tersedia dan dijual secara komersial dan sangat mudah didapat.

Tes ;2S# dapat digunakan untuk mendeteksi antibodi dalam tubuh manusia

maupun he*an.

http://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&prev=/search%3Fq%3Dtuan%2Bmetode%2BELISA%26hl%3Did%26biw%3D1366%26bih%3D578%26prmd%3Dimvns&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Rosalyn_Sussman_Yalow&usg=ALkJrhghavZCYdzRqzvZt1oRG3DtPwC-Iwhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&prev=/search%3Fq%3Dtuan%2Bmetode%2BELISA%26hl%3Did%26biw%3D1366%26bih%3D578%26prmd%3Dimvns&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Solomon_Berson&usg=ALkJrhgEs0p8VWjk9Qlf1q_mv4q8udomswhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&prev=/search%3Fq%3Dtuan%2Bmetode%2BELISA%26hl%3Did%26biw%3D1366%26bih%3D578%26prmd%3Dimvns&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Solomon_Berson&usg=ALkJrhgEs0p8VWjk9Qlf1q_mv4q8udomswhttps://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Serologi&action=edit&redlink=1https://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Serologi&action=edit&redlink=1https://id.wikipedia.org/wiki/Imunologihttps://id.wikipedia.org/wiki/Imunologihttps://id.wikipedia.org/wiki/Antigenhttps://id.wikipedia.org/wiki/Antibodihttps://id.wikipedia.org/wiki/Antibodihttps://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&prev=/search%3Fq%3Dtuan%2Bmetode%2BELISA%26hl%3Did%26biw%3D1366%26bih%3D578%26prmd%3Dimvns&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Solomon_Berson&usg=ALkJrhgEs0p8VWjk9Qlf1q_mv4q8udomswhttps://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Serologi&action=edit&redlink=1https://id.wikipedia.org/wiki/Imunologihttps://id.wikipedia.org/wiki/Antigenhttps://id.wikipedia.org/wiki/Antibodihttps://id.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&prev=/search%3Fq%3Dtuan%2Bmetode%2BELISA%26hl%3Did%26biw%3D1366%26bih%3D578%26prmd%3Dimvns&rurl=translate.google.co.id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Rosalyn_Sussman_Yalow&usg=ALkJrhghavZCYdzRqzvZt1oRG3DtPwC-Iw


9/14

Prinsip metode ELISA adalah mereaksikan antibodi dan antigen secara

spesifik, perbedaannya ada pada substrat ( zat yang digunakan untuk mendeteksi

suatu hasil reaksi yang digunakan. Pada ELISA, hasil reaksi akan memunculkan

!arna yang bisa diukur dengan alat yang disebut "olorimetri. Pada #luorescence,

hasil reaksi berupa pendaran cahaya yang terbaca oleh fluoresensi, sedangkan

pada "hemiluminescence hasil reaksi berupa pendaran kimia!i yang terbaca

oleh "hemiluminescent.

0ambar . Prinsip ;2S#

#etode Imm$no,istokimia

munohistokimia adalah suatu metode kombinasi dari anatomi, imunologi

dan biokimia untuk mengidentifikasi komponen jaringan yang memiliki ciri

tertentu dengan menggunakan interaksi antara antigen target dan antibodi spesifik

yang diberi label. munohistokimia merupakan suatu cara pemeriksaan

untuk mengukur derajat imunitas atau kadar antibodi atau antigen dalam sediaan

jaringan. %ama imunohistokimia diambil dari nama immune yang menunjukkan

bah*a prinsip dasar dalam proses ini ialah penggunaan antibodi

dan histo menunjukkan jaringan secara mikroskopis. Dengan kata lain,


10/14

imunohistokimia adalah metode untuk mendeteksi keberadaan antigen spesifik di

dalam sel suatu jaringan dengan menggunakan prinsip pengikatan antara antibodi

+#b dan antigen +#g pada jaringan hidup. Pemeriksaan ini membutuhkan

jaringan dengan jumlah dan ketebalan yang bervariasi tergantung dari tujuan

pemeriksaan. Teknik imunohistokimia bermanfaat untuk identifikasi, lokalisasi,

dan karakterisasi suatu antigen tertentu, serta menentukan diagnosis, therapi, dan

prognosis kanker. Teknik ini dia*ali dengan pembuatan irisan jaringan +histologi

untuk diamati diba*ah mikroskop.

nteraksi antara antigen-antibodi adalah reaksi yang tidak kasat

mata. Tempat pengikatan antara antibodi dengan protein spesifik diidentifikasi

dengan marker yang biasanya dilekatkan pada antibodi dan bisa divisualisasi

secara langsung atau dengan reaksi untuk mengidentifikasi marker. #dapun

beberapa marker yang berupa senya*a ber*arna antara lain luminescence' $at

berfluoresensi' ;n$im ? &orse adish Pero3idase +&P dan alkaline phosphatase.

;n$im +yang dipakai untuk melabel selanjutnya direaksikan dengan substrat

kromogen +yaitu substrat yang menghasilkan produk akhir ber*arna dan tidak

larut yang dapat diamati dengan mikroskop bright field +mikroskop bidang

terang. #kan tetapi seiring berkembangnya ilmu pengetahuan khususnya dunia

biologi, teknik imunohistokimia dapat langsung diamati +tanpa direaksikan lagi

dengan kromogen yang menghasilkan *arna diba*ah mikroskop fluorescense.

3.- Inte!aksi Tingkat Sek$nde!

Tahap kedua adalah interaksi ireversibel antara antigen dan antibodi,

dengan efek terlihat, seperti aglutinasi, presipitasi, netralisasi, fiksasi komplemen,


11/14

dan imobilisasi organisme motil. katan antara antigen dan antibodi selama tahap

ini adalah ikatan kovalen.

Sebuah antibodi tunggal mampu menyebabkan jenis reaksi antigen-

antibodi yang berbeda. Sebuah antigen tunggal mampu merangsang produksi

kelas yang berbeda dari imunoglobulin, yang berbeda dalam sifat biologis mereka.

&asil aglutinasi, presipitasi, netralisasi, dan tes lainnya biasanya

dinyatakan sebagai titer. Titer didefinisikan sebagai pengenceran tertinggi serum

yang memberikan reaksi positif pada pemeriksaan. Titer yang lebih tinggi berarti

tingkat yang lebih besar dari antibodi dalam serum. !isalnya, serum dengan titer

@/A mengandung antibodi lebih banyak dari serum dengan titer @A.

Serum dengan kekuatan tinggi atau tidak diencerkan hanya sedikit atau

tidak menunjukkan aglutinasi @presipitasi. &al ini disebut fenomen pro$on

disebabkan oleh antibodi berlebihan. Setiap antigen dapat diikat oleh satu

antibodi. &al yang sama bila serum di encerkan, juga hanya sedikit atau tidak

menunjukkan aglutinasi@ presipitasi yang disebut fenomena pos-$one, setiap

molekul antibodi bereaksi dengan antigen yang membentuk kompleks besar. ona

ini disebut $ona ekuivalen. "adar antigen dan antibodi dalam $ona ini merupakan

kadar relatif molekul- molekul yang membentuk kompleks. +gambar C

a. Presipitasi

#dalah jika komplek antigen-antibodi yang terbentuk berukuran terlalu

besar, sehingga tidak dapat bertahan untuk terus berada di larutan dan akhirnya

mengendap.


12/14

0ambar C. Pembentukan imun kompleks dan presipitasi

b. #glutinasi

#dalah jika sel-sel asing yang masuk, misalnya bakteri atau transfusi

darah yang tidak cocok berikatan bersama-sama membentuk gumpalan.

c. %etralisasi

#dalah jika antibody secara fisik dapat menghalangi sebagian antigen

menimbulkan efek yang merugikan. ontohnya adalah dengan mengikat toksin

bakteri, antibodi mencegah $at kimia ini berinteraksi dengan sel yang rentan.

d. 1agositosis

#dalah jika bagian ekor antibody yang berikatan dengan antigen mampu

mengikat reseptor fagosit +sel penghancur sehingga memudahkan fagositosis

korban yang mengandung antigen tersebut.

e. Sitotoksis


13/14

#dalah saat pengikatan antibodi ke antigen juga menginduksi serangan sel

pemba*a antigen oleh killer cell +sel ". Sel " serupa dengan natural killer cell

kecuali bah*a sel

" mensyaratkan sel sasaran dilapisi oleh antibody sebelum

dapat dihancurkan melalui proses lisis membran plasmanya.

Tipe da!i Reaksi Antigen Anti*odi

Tes serologis secara luas digunakan untuk mendeteksi baik serum antibodi

atau antigen untuk diagnosis berbagai penyakit menular +Tabel . Tes-tes serologi

juga digunakan untuk diagnosis penyakit autoimun dan typing darah dan jaringan

sebelum transplantasi. Berikut ini adalah contoh reaksi antigen-antibodi? +a

presipitasi, +b aglutinasi, +c test complement-dependent serologi, +d test

netralisasi, +e opsonisasi, +f *estern blotting, +g test

immunoelektronmikroscopik

Tabel . Tes mikrobiologis klinis yang sering digunakan


14/14

3.3 Inte!aksi Tingkat Te!sie!

nteraksi tingkat tersier adalah munculnya tanda-tanda biologis dari

interaksi antigen - antibodi yang dapat berguna atau merusak bagi penderitanya.

Pengaruh menguntungkan antara lain? aglutinasi bakteri, lisis bakteri, immnunitas

mikroba,dan lain-lain. Sedangkan pengaruh merusak antara lain? edema, reaksi

sitolitik berat, dan defisiensi yang menyebabkan kerentanan terhadap infeksi.

.

BAB III1 Antigen Antibodi

Documents