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Antracnosis causada por Colletotrichum acutatumSimmonds en
frutos de fresa en los estados
Lara y Trujillo, Venezuela
Antracnosis caused by Colletotrichum acutatum Simmondsin
strawberry fruit in Lara and Trujillo states, Venezuela
L. Urdaneta1, M.E. Sanabria2, D. Rodríguez2 y M. Pérez de
Camacaro2
1Departamento Fitosanitario. Facultad de Agronomía.
Universidaddel Zulia. Maracaibo, estado Zulia.2Postgrados de
Agronomía, Universidad Centroccidental LisandroAlvarado,
Barquisimeto, estado Lara.
Resumen
La antracnosis es la enfermedad de mayor importancia económica
en elcultivo de la fresa en Venezuela, y es causada por un complejo
de especies deColletotrichum (C. acutatum, C. gloeosporioides y C.
fragarie). Con la finalidadde identificar la o las especies de éste
género presentes en las zonas productorasde los estados Lara y
Trujillo, se realizó la caracterización morfológica de cuaren-ta y
siete aislamientos monospóricos de hojas, peciolos, sépalos,
pedúnculos ypredominantemente de frutos. Cada uno de aislamientos
del hongo fueronreactivados en agar agua acidificado a 25-27°C y 12
horas luz-oscuridad paracomprobar la formación de clamidosporas y
en papa dextrosa agar acidificado(PDAA) bajo las mismas
condiciones, para establecer sus características cultura-les y
morfológicas. Las colonias en PDAA presentaron un micelio grisáceo
cubier-to de masas de conidios de color salmón y en base a la forma
predominante deéstas estructuras (fusiformes), su tamaño promedio
(13,35 x 3,60 µm), la ausen-cia de setas en los acérvulos
desarrollados sobre los frutos y a la formación declamidosporas
marrones, en todos los aislamientos se identificó la especie
C.acutatum. Frutos fisiológicamente maduros se inocularon, por
inmersión en unasuspensión de 1.106 conidios.mL-1, presentándose en
estos órganos síntomas ysignos similares a los observados en el
campo, y de todos fue aislado e identificadoconsistentemente C.
acutatum, lo que constituye el primer reporte del hongocausando la
antracnosis de la fresa en los estados Lara y Trujillo de
Venezuela.Palabras clave: morfología, hongos, frutos, necrosis,
Fragaria x ananassa Duch.
Recibido el 25-7-2012 Aceptado el 27-9-2013Autor de
correspondencia e-mail: [email protected]
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Abstract
Anthracnose is a mayor disease of cultivated strawberry and is
caused bycomplex species of Colletotrichum (C. acutatum, C.
gloeosporioides and C.fragariae). In order to identify the species
of this genus presented in the productionzones of Lara and Trujillo
states, the morphological characterization was performedin
forty-seven monosporic isolate leaves, petioles, sepals, peduncles
and fruitsmainly. Each of fungal isolates were reactivated in
acidified water agar at 25-27°C and 12 h light-dark to see the
formation of chlamydospores and potatodextrose agar acidified
(PDAA) under the same conditions, to establish theircultural and
morphological characteristics. The colonies of PDAA had a
grayishmycelium covered with salmon conidial masses and based on
the predominantform of these structures (fusiform), their average
size (13.35 x 3.60 µm), theabsence of setae on the acervuli
developed on the fruits and the formation ofbrown chlamydospores on
all isolates and were identified as C. acutatum.Physiologically
mature fruits were inoculated by immersion in a suspension of1.106
conidia.mL-1, occurring in these organs symptoms and signs similar
tothose observed in the field, and in all cases was isolated and
identified consistentlyas C. acutatum, which is the first report of
the fungus causing strawberryanthracnose in Lara and Trujillo
states.Key words: morphology, fungus, fruits, necrosis, Fragaria x
ananassa Duch
Introducción
La antracnosis en el cultivo dela fresa (Fragaria x ananassa
Duch)produce daños en todos los órganos dela planta y es causada
por tres espe-cies de Colletotrichum: C. fragariae A.N. Brooks; C.
acutatum J. H.Simmonds y C. gloeosporioides (Penz.)Penz. & Sacc
(Smith, 2008; Xie et al.,2010), éstos hongos pueden infectarlas
hojas, pecíolos, flores y pedúnculos,donde se presentan manchas
oscuras,circulares, inicialmente pequeñas, peroque pueden coalescer
y formar lesio-nes de mayor tamaño (Ivanoviæ et al.,2007). De
acuerdo a Smith (2007), C.fragariae y C. acutatum ocasionannecrosis
que afectan rápidamente lasflores y parte de los pedúnculos,
loscuales se tornan oscuros, secos y que-bradizos.
Introduction
Antracnosis in the strawberrycrop (Fragaria x ananassa Duch)
pro-duces damages in the organs of theplant and is caused by three
species ofColletotrichum: C. fragariae A. N.Brooks; C. acutatum J.
H. Simmondsand C. gloeosporioides (Penz.) Penz.& Sacc (Smith,
2008; Xie et al., 2010),these fungi might infect the
leaves,petioles, flowers and peduncles, wheredark, circular and
initially small dotsare seen, but that may coalescence andform
lesions of a higher size (Ivanoviæet al., 2007). According to
Smith(2007), C. fragariae and C. acutatumcause necrosis that affect
rapidly theflowers and the parts of the peduncles,which turn dark,
dry and fragile.
The three species ofColletotrichum might infect the
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Las tres especies deColletotrichum pueden infectar los fru-tos
de la fresa, pero C. acutatum es lamás frecuentemente asociada a
laantracnosis de éstos órganos, observán-dose sobre los frutos
maduros, lesio-nes circulares, inicialmente son ma-rrón claro y
acuosas, que se tornanoscuras, secas y hundidas. Puedenpresentarse
de una a varias manchasy sobre éstas se aprecian masas deconidios
rosadas, y en el caso de losfrutos verdes las áreas necróticas
sonindividuales y permanecen pequeñasy negras, hasta que éstos
maduran(Smith, 2007), según Farrera et al.(2007) éstas áreas son
pardas o negras,presentándose inicialmente en la re-gión apical y
luego se extienden hastacubrirlos y momificarlos.
La taxonomía del géneroColletotrichum se ha basado en
supatogenicidad y en ciertas caracterís-ticas morfológicas como el
color de lacolonia en medio de cultivo, forma ytamaño de los
conidios, formación declamidosporas, presencia o ausencia delas
setas en los acérvulos y del estadoperfecto o teleomórfico (Freeman
yKatan, 1997).
En Venezuela, la antracnosis esde importancia económica ya que
inci-de negativamente en los rendimientosdel cultivo, por afectar a
los frutos;además puede ocasionar la muerte dela planta. De acuerdo
a Farrera et al.(2007), la enfermedad ocasiona pérdi-das entre el
60-75%, pudiendo serlimitante para el cultivo de la fresa,debido a
su naturaleza devastadora, lasusceptibilidad de los cultivares y
labaja efectividad de medidas para con-trolarla.
strawberry fruits, but C. acutatum isthe one related with more
frequencyto the antracnosis of these organs,observing on the mature
fruits circledlesions, which are initially light brownand aqueous,
and then turn dark, dryand deep. One to several dots canappear and
on these are seen themasses of pink conidials, and in thecase of
the green fruits, the necroticareas are individual and remain
smalland are black, until they mature(Smith, 2007), according to
Farrera etal. (2007) these areas are brownish orblack, presenting
initially in the apicalregion and later extending untilcovering of
mummified them.
The taxonomy of the genusColletotrichum is based on
itspathogenicity and in somemorphological characteristics, such
asthe color of the colony in a crop culture,shape and size of the
conidial,formation of the chlamydospore,presence or absence of
setae in theacervuli and the perfect phase of orteleomorphic
(Freeman and Katan,1997).
In Venezuela, the antracnosishas a great economic importance,
sinceit has a negative influence in the yieldsof the crops, by
affecting the fruits;also, it can cause the death of the
plant.According to Farrera et al. (2007), thedisease causes losses
from 60-75%, andthis can become into a limitation forthe crop of
the strawberry due to itsdevastating nature, the sensitivity ofthe
cultivars and the low effectivenessof measures to control it.
The first report of the antracnosisin strawberry fruits in the
country wascarried out by Cedeño and Carrero
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El primer reporte de laantracnosis en frutos de fresa, en
elpaís, fue realizado por Cedeño y Ca-rrero (1997), en el municipio
Bolívardel estado Mérida, quienes identifica-ron a Colletotrichum
acutatum comoel agente causal de la enfermedad.Posteriormente,
Guevara et al. (2004)señalaron a C. gloeosporioides comoel
responsable de la enfermedad en losmunicipios Tovar (estado Aragua)
y ElJarillo (estado Miranda). Farrera et al.(2007) señalaron
nuevamente la pre-sencia de la especie C. acutatum, estavez en el
estado Táchira.
La presente investigación seplanteó con la finalidad de
determinarlas especies de Colletotrichum que cau-san la antracnosis
de la fresa en losestados Lara y Trujillo, Venezuela.
Materiales y métodos
Se colectaron cuarenta y sietemuestras provenientes de dos
fincasubicadas en la localidad HumocaroAlto, municipio Moran y una
finca enLas Lajitas, municipio Torres del es-tado Lara; y tres
fincas de la localidadCabimbu y una finca en La Lagunita,municipio
San Rafael de Carvajal delestado Trujillo, las mismas consistie-ron
de hojas, peciolos, sépalos, frutosy pedúnculos de las plantas de
fresaque presentaron los síntomas caracte-rísticos de la
antracnosis. El muestreose realizó durante los meses de mayo,junio
y julio del 2008.
Los órganos fueron lavados conjabón líquido (Mas® acido
sulfonico15%) y enjuagados con agua corrien-te. Del margen de las
lesiones, se cor-taron segmentos de 0,25 cm2, los cua-
(1997), in Bolívar county, Mérida state,they identified
Colletotrichumacutatum such as the agent causingthe disease.
Consequently, Guevara etal. (2004) mentioned C. gloeosporioidesas
the responsable of the disease in thecounties Tovar (Aragaua
states) andEl Jarillo (Miranda state). Farrera etal. (2007) also
mentioned the presenceof C. acutatum but this time in
Táchirastate.
The objective of this research isto determine the species
ofColletotrichum that cause theantracnosis on the strawberry, in
Laraand Trujillo states, Venezuela.
Materials and methods
Forty seven samples werecollected from two farms located
onHumocaro Alto, Moran county, and afarm located on Las Lajitas,
Torrescounty, Lara state; and three farmson La Lagunita, San Rafael
de Carva-jal county, Trujillo state. The samplesconsisted on
leaves, petioles, sepals,fruits and peduncles of the
strawberryplants that presented thecharacteristics symptoms of
theantracnosis. The sampling was doneduring May, June and July of
2008.
The organs were washed withliquid soap (Mas® sulphonic acid
15%)and rinsed with running water. In themargin of the lesions,
segments of 0.25cm2, were cut, which were disinfectedfor 2 min with
isopropyl alcohol (70%),and were washed 3 times in steriledistilled
water (ADE), were dried insterile absorbent paper and taken toPetri
plates with acidified water-agar(AAA) with 10 drops of lactic acid
(88%)
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les se desinfectaron durante 2 min conalcohol isopropílico
(70%), se lavaron3 veces en agua destilada estéril (ADE),se secaron
en papel absorbente estéril,se transfirieron a platos Petri con
agar-agua-acidificado (AAA) con 10 gotasde ácido láctico (88%) por
cada 250 mLde medio y se incubaron a 25-27°C, bajoun régimen de 12h
de luz blanca fluo-rescente/12h de oscuridad, hasta quese observó
el desarrollo micelial delhongo (French y Hebert, 1980; Casta-ño,
1998). Las colonias desarrolladasfueron subcultivadas en
papa-dextro-sa-agar-acidificado (PDAA). Los platosse incubaron bajo
las mismas condi-ciones de luz y temperatura antes des-critas,
hasta que se observó laesporulación característica deColletotrichum
en el medio de cultivo.
Los aislamientos del hongo secodificaron, de acuerdo al estado
deprocedencia, finca, órgano de la plan-ta donde fueron obtenidos y
número deplanta muestreada; de cada uno de ellosse realizaron dos
cultivos monospóricossiguiendo la metodología propuesta porFrench y
Hebert (1980), los cuales sepreservaron en tubos de ensayo conPDAA
a 8±2ºC.
Caracterización cultural delos aislamientos deColletotrichum
sp.
Cada uno de los cultivosmonospóricos preservados
deColletotrichum se reactivaron enPDAA, se incubaron a 25-27°C,
bajocondiciones de 12h luz blanca fluores-cente y 12h de oscuridad.
Una vez ob-servada la coloración naranja caracte-rística de la
esporulación (7-15 días deedad) se realizó la caracterización
delcrecimiento en PDAA, considerando elcolor y aspecto de la
colonia (algodonosa
for each 250 mL of the medium, and wereincubated at 25-27ºC,
with a regimen of12h of fluorescent white light/12 h ofdark, until
was observed the myceliumdevelopment of the fungi (French
andHebert, 1980; Castaño, 1998). Thecolonies developed were
sub-cultivated inacidified-potato-dextrose-agar (PDAA).The plates
were incubated under thesame light conditions and
temperaturedescribed before, until observing thecharacteristic
sporulation ofColletotrichum in the culture medium.
The isolations of the fungus werecodified according to the
origin, farm,and organ of the plant where thesewere obtained, as
long as the numberof the sampled plant; two monosporiccultures were
performed on each ofthese, following the methodologyproposed by
French and Hebert (1980),which were preserved in assay tubeswith
PDAA at 8±2ºC.
Cultural characterization ofthe isolations of Colletotrichum
sp.
Each of the preserved monosporiccultures of Colletotrichum
activated inPDAA, were incubated at 25-27ºC,under conditions of 12h
of fluorescentwhite light and 12h of dark. Onceobserved the
characteristic orangecoloring of the sporulation (7-15 daysold) the
growth characterization inPDAA was performed, considering thecolor
and the aspect of the colony(cottony or dusty), the presence
ofconcentric rings and the coloring ofconidial masses in both the
surface asin the reverse of the colonies (Smith,2008; Xie et al.,
2010).
Determination of the shapeand size of the conidial
5 semi-permanent preparationswere prepared with phenol lact
through
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o polvorienta), la presencia de anillosconcéntricos y la
coloración de lasmasas de conidios, tanto en la superfi-cie como en
el reverso de las colonias(Smith, 2008; Xie et al., 2010).
Determinación de la forma ytamaño de los conidios
Se realizaron 5 preparacionessemipermanentes con lactofenol
poraislamiento (French y Hebert, 1980) yse observaron los conidios
con un mi-croscopio óptico Olympus, modeloCH20 (400X), a través del
ocular setomaron de 2-3 fotografías·lámina conuna cámara
fotográfica Cyber-shotDSC-W70 de 7,2 megapíxeles y con unzoom de
2,3, para un total de 10-15fotografías.aislamiento-1. Utilizando
elsoftware ImageJ® (ImageJ, 2009), sedeterminó el largo y ancho de
100conidios por aislamiento, los resulta-dos fueron expresados en
pixeles por elprograma ImageJ (ImageJ, 2009) y setransformaron en
micrómetros (µm).Simultáneamente, a partir de las foto-grafías se
estableció la forma de cadauno de los conidios medidos en base ala
terminación de sus puntas (ambosextremos ahusados, ambos
redondea-dos o uno ahusado y el otro redondea-do) y se calculó el
porcentaje de cadauna de las formas presentadas, paraasí establecer
la predominante, si-guiendo la metodología propuesta porOliveira et
al. (2005).
Formación de clamidosporasde Colletotrichum sp.
Los cultivos monospóricos deColletotrichum se reactivaron en
AAA(2%), se incubaron a 25-27ºC, bajo con-diciones de 12h luz
blanca fluorescen-te y 12h de oscuridad, durante 25-30días (Cedeño
y Carrero, 1997). Utili-zando los equipos y procedimientos ya
isolation (French and Hebert, 1980)and the conidial were
observed withan optical microscope Olympus, modelCH20 (400X), 2-3
photographs-laminawere taken using the ocular, with aphotograph
camera Cyber-shot DSC-W70 of 7.2 megapixels and a 2.3 zoom,for a
total of 10-15photographs.isolations. Using the soft-ware
ImageJ®(ImageJ, 2009), thelength and width of 100 conidials
weredetermined by isolations, the resultswere expressed in pixels
using theprogram ImageJ® (ImageJ, 2009), andwere transformed in
micrometers(µm). Simultaneously, after thephotographs the shape of
each of themeasured conidials were established inbase of the
termination of their spikes(both extremes tapered, both roundedor
one tapered and the other rounded),and the percentage of each of
thepresented shapes was calculated, toestablish the predominant
andfollowing the methodology proposed byOliveira et al. (2005).
Chlamydospore formation ofColletotrichum sp.
The monosporic cultures ofColletotrichum were reactivated inAAA
(2%), were incubated at 25-27ºC,under conditions of 12 h of
fluorescentwhite light and 12 h of darkness for25-30 days (Cedeño
and Carrerp, 1997).Using the equipments and proceduresdescribed
before, the width and lengthwere measured in 25 chlamydosporesby
isolation of the fungus.
Pathogenicity test in fruitsA suspension of 1x106
conidials.mL-1 was prepared from eachof the 47 isolations
obtained from thefungus, which were reactivated inPDAA (7 days
old).
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descritos, se midió el ancho y largo de25 clamidosporas por
aislamiento delhongo.
Prueba de patogenicidad enfrutos
De cada uno de los 47 aislamien-tos obtenidos del hongo, los
cuales fue-ron reactivados en PDAA (7 días deedad), se preparó una
suspensión de1x106 conidios.mL-1.
Los frutos de fresa utilizados fue-ron adquiridos en mercados
informa-les de la ciudad de Cabudare, estadoLara, todos presentaban
el mismo gra-do de madurez (estado 9) recomendadopor Smith (2007),
para garantizar lamayor uniformidad en su susceptibili-dad a la
infección por el patógeno.
Los frutos fueron lavados con ja-bón líquido (Mas® acido
sulfonico 15%)y enjuagados con agua corriente, des-infectados
durante 3 min conhipoclorito de sodio al 1,5%, lavados 3veces en
ADE y secados con papel ab-sorbente estéril, finalmente
fueroninoculados por inmersión durante 2min en la suspensión de
conidios, seinocularon 5 frutos por cada aisla-miento y 5 se
sumergieron en ADEsolamente, como tratamiento testigo.Luego fueron
colocados en bandejasplásticas transparentes, con tapas decierre
hermético, de 10 x 8,5 x 5 cm,las cuales contenían mallas
metáli-cas colocadas sobre papel absorbentehumedecido con ADE. Las
bandejas,fueron colocadas en una cámara de cre-cimiento con luz
fluorescente (22,6 -26,9 µ mol S-1m2, por períodos de 12hde luz y
12 de oscuridad) a 18-20°C,utilizando para ello un aire
acondicio-nado de 11.500 Btu.h-1, se mantuvie-ron cerradas
herméticamente duran-te 48h (incubación) y se realizaron ob-
The strawberry fruits wereacquired in informal markets
ofCabudare, Lara state, all the fruitspresented the same maturity
degree(phase 9) recommended by Smith(2007) to guarantee the
highestuniformity on its susceptibility towardsthe infection by the
pathogen.
The fruits were washed withliquid soap (Mas® sulphonic acid
15%)and rinsed with running water,disinfected for 3 min with
sodiumhypochlorite at 1.5%, washed 3 timesin ADE and dried with
sterileabsorbent paper, finally wereinoculated by immersion for 2
min inthe suspension of the conidials, 5 fruitsper each isolation
were inoculated and5 were only immersed in ADE, aswitness
treatment. Later, were put onclear plastic trays, with hermetic
lidsof 10 x 8.5 x 5 cm, which has metallicmesh put on wet absorbent
paper withADE. The trays were put on a growthchamber with
fluorescent light (22.6-26.9 µ mol S-1m2, for periods of 12 h
oflight and 12 of darkness) at 18-20°C,using for it an air
conditioning of11.500 Btu.h-1, were kept hermeticallyclosed for 48
h (incubation) and dailyobservations were done until
thecharacteristics symptoms of theantracnosis appeared on the
fruits (3-5 days)
Two inoculated fruits perisolation were selected, examiningtheir
surfaces with a stereoscopicmagnifier Olympus, model SZ51 (10X),to
determine the presence of acervuli,which were taken with a
steriledissection needle to perform 5 semi-permanent preparations
with phenollact by isolation. In these, it was alsodetermined the
shape and size (length
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servaciones diarias, hasta que los sín-tomas característicos de
laantracnosis aparecieron sobre los fru-tos (3-5 días).
Se seleccionaron dos frutos ino-culados por aislamiento,
examinandosus superficies con una lupaestereoscópica Olympus,
modelo SZ51(10X) para determinar la presencia delos acérvulos, los
cuales fueron toma-dos con una aguja de disección estérilpara
realizar 5 preparacionessemipermanente con lactofenol por
ais-lamiento. En las mismas también sedeterminó la forma y tamaño
(largo yancho) de 100 conidios a través del pro-grama ImageJ
(ImageJ, 2009), segúnel procedimiento antes descrito.
El reaislamiento del hongo de losfrutos de fresa inoculados se
realizósiguiendo el mismo procedimiento se-ñalado para los órganos
vegetales co-lectados en campo. Las colonias desa-rrolladas a
partir de los segmentos deéste órgano fueron subcultivadas en
elmedio PDAA, los platos se incubaronbajo las mismas condiciones de
luz ytemperatura antes descritas, hastaapreciar la esporulación
característi-ca de Colletotrichum en el medio, serealizaron cinco
preparacionessemipermanentes con lactofenol poraislamiento para
definir nuevamentela forma y tamaño de 100 conidios poraislamiento,
a través del programaImageJ (ImageJ, 2009).
Se utilizó un diseño de bloquesal azar para el análisis del
tamaño delos conidios considerando como bloquelas condiciones
experimentales dondeel hongo los formó (procedencia):
1)reactivación en PDAA de los cultivosmonospóricos de los
aislamientos deórganos vegetales, 2) frutos inocula-
and width) of 100 conidials using thesoftware (ImageJ, 2009),
following theprocedure described before.
The fungus re-isolation of theinoculated strawberry fruits was
donefollowing the same procedurementioned for the vegetal
organscollected in the field in the culturePDAA, the plates were
incubatedunder the same light conditions andtemperature described
before, untilappreciating the characteristicsporulation of
Colletotrichum in themedium; five semi-permanentpreparations with
phenol lact wereprepared to define one more time thesize and shape
of 100 conidials perisolation, using the program ImageJ(ImageJ,
2009).
A completely split-plotrandomized design was used for
theanalysis of the conidials considering asplots the experimental
conditionswhere the fungus formed (origin): 1)reactivation in PDAA
of themonosporic cultures of the isolationsof vegetal organs, 2)
inoculated fruitsin the pathogenicity and 3) developedcolonies
after the segments ofinoculated fruits and sub-cultivated inPDAA,
with 100 replications(conidials) by isolation and
plot(100x47x3=14.100 conidialsmeasured), the variance analysis
andthe mean comparison were performed(Tukey test, P
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dos en la prueba de patogenicidad y3) colonias desarrolladas a
partir delos segmentos de frutos inoculados ysubcultivadas en PDAA,
con 100 re-peticiones (conidios) por aislamientoy por bloque
(100x47x3= 14.100conidios medidos), se realizaron aná-lisis de
varianza y comparación demedias (prueba de Tukey, P
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blancas, con el centro gris oscuro yanillos concéntricos color
naranjatanto en el centro como en los már-genes.
Características y forma delos conidios
Los conidios observados en todoslos casos (monospóricos, frutos
inocu-lados y reaislamientos) fueron hialinos,unicelulares y rectos
(figura 1), ademáséstos presentaron tres formas, por loque se
clasificaron en tres categorías:1) mixtos, con un extremo
redondeadoy otro ahusado (R-A), 2) con ambos ex-tremos ahusados
(A-A) y 3) con ambosredondeados (R-R), además, se determi-nó la
frecuencia de cada una de éstasformas (cuadro 1). Se
presentaronmayoritariamente conidios fusiformes,
Figura 1. Conidios de Colletotrichum acutatum sp. predominantes
enlos aislamientos, con ambos extremos ahusados (400X).Bar=10
µm.
Figure 1. Colletotrichum acutatum sp. conidials predominant on
theisolations with both extremes tapered (400X). Bar=10 µm.
monosporic cultures, from 47 to 100%(87%) on the inoculated
fruits, andfrom 63 to 100% (89.3%) after the re-isolation of the
fruits, only themonosporic of L1F1, L1F5, L1Pd3 andTr1F4 presented
the lowest percentageof these structures (table 1). Accordingto
Smith (1990), C. acutatum produ-ces conidials with the three types
oftermination (rounded-tapered, tapered-tapered and
rounded-rounded) butwith a predominance on the taperedextremes, and
also mentioning thatthis was observed in nine isolations ofthis
pathogen (87% average), likewise,Denoyes and Baudry
(1995)determined that the isolations of C.acutatum presented a
dominance ofthe fusiforms.
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con ambos extremosahusados, la pro-porción de éstos fue de 54 a
90% (86%)en las colonias fúngicas desarrolladasa partir de la
reactivación de los culti-vos monospóricos, de 47 a 100% (87%)sobre
los frutos inoculados y de 63 a100% (89,3%) a partir del
reaislamientode los frutos, solo los monospóricos deL1F1, L1F5,
L1Pd3 y Tr1F4 presentaronel menor porcentaje de éstas estructu-ras
(cuadro 1). Según Smith (1990), C.acutatum produce conidios con los
trestipos de terminación (redondeados-ahusados, ahusados-ahusados y
redon-deados-redondeados) pero conpredominancia de los
extremosahusados, señalando además que nue-ve aislamientos de este
patógeno lospresentaron (87% en promedio), asímismo Denoyes y
Baudry (1995) deter-minaron que los aislamientos de C.acutatum
presentaban dominancia delos fusiformes.
Por otra parte, Villanueva et al.(2008) encontró que C. fragarie
presen-taba conidios con un extremo obtuso yotro ahusado, mientras
que en C.gloeosporioides ambos eran obtusos.De la misma manera, Xie
et al. (2010)señalaron que en C. fragarie fueronovalados y en C.
gloeosporioides, oblon-gos con puntas obtusas, de acuerdo aéste
criterio morfológico, todos los ais-lamientos en la presente
investigaciónse correspondieron con Colletotrichumacutatum.
Caracteristicas de losconidios durante el proceso degerminación
(cultivosmonospóricos)
Los conidios de Colletotrichumsp. al germinar formaron un septo
ylos tubos germinativos en uno o am-bos extremos, resultados que
coincidie-
On the other hand, Villanueva etal. (2008) found that C.
fragariepresented conidials with an obtuse ex-treme and another
tapered one;meanwhile, in C. gloeosporioides bothwere obtuse.
Likewise, Xie et al. (2010)mentioned that in C. fragarie wereoval
and in C. gloeosporioides, oblongswith obtuse spikes, according to
thismorphological criterion, all theisolations, in the current
research,corresponded to Colletotrichumacutatum.
Conidial characteristicsduring the germination
process(monosporic cultures)
Conidials of Colletotrichum sp.when germinated formed a
septumand germinative tubes in one or bothextreme, these results
agree to thosementioned by Leandro et al. (2001),Sutton (1980) and
Cedeño and Carre-ro (1997), the latter authors alsoreported the
lateral germination for C.acutatum obtained from strawberrysamples
in Venezuela, which was notobserved in this research However,Arroyo
et al. (2005) observed that thelateral germination is not a
frequentevent, and it only predominates in oneof the two
extremes.
Size of the Colletotrichumsp. conidials
Significant differences presentedfor the variables longitude and
widthof the conidials, for both the isolationsand the precedence
factor (table 2),these presented a higher longitude(13.76 µm) when
developed on theinoculated fruits, follow by the onesformed after
the re-isolations of theseorgans (13.53 µm), reaching the
lowestlongitude (12.78 µm) after themonosporic cultures, this
tendency
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Urdaneta et al.
518
ron con los señalados por Leandro etal. (2001), Sutton (1980) y
Cedeño yCarrero (1997), estos últimos autoresreportaron, además la
germinaciónlateral para C. acutatum obtenido demuestras de frutos
de fresa en Vene-zuela, la cual no fue observada en
éstainvestigación. Sin embargo, Arroyo etal. (2005) observaron que
lagerminación lateral es un evento pocofrecuente, predominando sólo
en unode los dos extremos.
Tamaño de los conidios deColletotrichum sp.
Se presentaron diferencias signi-ficativas para las variables
longitud yancho de los conidios, tanto para losaislamientos como
para el factor proce-dencia (cuadro 2), estos presentaron unamayor
longitud (13,76 µm) cuando sedesarrollaron sobre los frutos
inocula-dos, seguidos por los formados a partirde los
reaislamientos de éstos órganos(13,53 µm), alcanzando la menor
longi-tud (12,78 µm) a partir de los cultivosmonospóricos, ésta
tendencia fue simi-lar para la variable ancho (cuadro 2).Siendo los
frutos uno de los sustratosnaturales donde se
desarrollaColletotrichum sp. en el patosistemafresa-antracnosis,
era de esperarse quesobre éstos, los conidios alcanzaranmayores
medidas, además, la pruebade patogenicidad se realizó a
18-20°C,rango de temperatura considerado óp-timo para el
crecimiento de éste pató-geno (Smith, 2008).
Los aislamientos de Colletotrichumdel estado Trujillo, que
presentaron lamayor y menor longitud fueron Tr3Pd1 yTr1F3 (14,22 y
12,21 µm, respectivamen-te) y para el estado Lara fueron L1Pd2
yL2Pd2 (14,03 y 12,58 µm respectivamen-te). Con relación al ancho
L1Pd3 y Tr3Pd1
was similar for the variable width(table 2). Since the fruits
are one ofthe natural substrates whereColletotrichum sp. develops
in thestrawberry-antracnosis scab, it wasexpected that the
conidials reachhigher measures on these; thepathogenicity test was
carried out at18-20ºC, which is an optimumtemperature rank for the
growing ofthis pathogen (Smith, 2008).
The isolations of Colletotrichumof Trujillo that presented the
highestand lowest longitude were Tr3Pd1 andTr1F3 (14.22 and 12.21
µm,respectively) and for Lara were L1Pd2and L2Pd2 (14.03 and 12.58
µmrespectively). In relation to the widthL1Pd3 and Tr3Pd1 (4.06 and
3.63 µm)presented the highest values and,Tr3S1 and L2Pc1 (3.22 and
3.44 µm) thelowest (table 3).
Conidials presented ranks from12.21-14.22 x 3.22-4.06 µm,
withaverages of 13.36 x 3.6 µm, which donot correspond to the ones
reported byGunnel and Gubler (1992) and Xie etal. (2010) for C.
gloeosporioides (15 x4.3 µm and 13.5 x 5.5 µm) and for C.fragariae
(18 x 4 µm and 16 x 4.5 µm).According to these results the
averagemeasured obtained for the forty sevenisolations are closer
to the onesmentioned by these authors for C.acutatum (15.5 x 3.7 µm
and 13.5 x4.4 µm).
Chlamydospore formation ofColletotrichum sp.
In the culture media AAA, all theisolations formed
chlamydospores inthe hyphae after 25d of incubation,initially were
hyalines and later turnedout dark brown, most presented doublewall
and were interspersed (figura 2).
-
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 504-528
519
(4,06 y 3,63 µm) presentaron los mayo-res valores, y Tr3S1 y
L2Pc1 (3,22 y 3,44µm) los menores (cuadro 3).
Los conidios presentaron rangos de12,21-14,22 x 3,22-4,06 µm,
con prome-dios de 13,36 x 3,6 µm, los cuales no secorresponden con
los reportados porGunnel y Gubler (1992) y Xie et al. (2010)para C.
gloeosporioides(15 x 4,3 µm y13,5 x 5,5 µm) y para C. fragariae(18
x 4µm y 16 x 4,5 µm). De acuerdo a estosresultados las medidas
promedios obte-nidas para los cuarenta y siete aislamien-tos se
acercan más a las señaladas porestos autores para la especie C.
acutatum(15,5 x 3,7 µm y 13,5 x 4,4 µm).
Formación de clamidosporasde Colletotrichum sp.
En el medio de cultivo AAA, to-dos los aislamientos formaron
Cuadro 2. Longitud y ancho (µµµµµm) promedio de conidios de
cuarenta ysiete aislamientos de Colletotrichum acutatum de
fresa(Fragaria x ananassa Duch.), observados en la reactivaciónde
los cultivos monospóricos, frutos inoculados yreaislamiento de
frutos.
Table 2. Average longitude and width (µm) of conidials from
forty sevenisolations of Colletotrichum acutatum of strawberry
(Fragariax ananassa Duch), observed in the reactivation of
monosporiccultures, inoculated fruits and re-isolation of
fruits.
Procedencia de los conidios Longitud (µm)
Frutos inoculados 13,76aReaislamiento de frutos inoculados
13,53bCultivos monospóricos 12,78c
Procedencia de los conidios Ancho (µm)
Frutos inoculados 3,80aCultivos monospóricos 3,60bReaislamiento
de frutos inoculados 3,38c
Valores con la misma letra no difieren estadísticamente, Tukey
(P≤0,05).
Cedeño and Carrero (1997) mentionedthat C. acutatum developed
theseresistance structures after themycelium immersed in
culturesproduced by three weeks in AAA.
The variance analysis done forthe size of the
chlamydosporedetermined that there are significantdifferences among
the isolations, theone which presented the highest valuefor the
longitude was Tr3S1 (12.33 µm),followed by L2Pd1 (11.74 µm),
thesmallest were produced by Tr4F2 andTr4F3 (8.59 and 8.92 µm,
respectively)(table 4). In relation to the width, thehighest value
was Tr3S1 (10.94 µm)and the lowest Tr3F5 (7.08 µm), theisolations
of Lara which produced thechlamydospores with higher and lowerwidth
were L2Pd1 (10.48 µm) and L2F1
-
Urdaneta et al.
520
Cuadro 3. Longitud y ancho (ìm) promedio de conidios de cuarenta
ysiete aislamientos de Colletotrichum acutatum (AÑADIR) defrutos
(F) de fresa (Fragaria x ananassa Duch.), pedúnculos(Pd), sépalos
(S), hojas (H), pecíolos (Pc), observados en lareactivación de los
cultivos monospóricos, frutos inoculadosy reaislamientos de frutos,
colectados en tres fincas delestado Lara (L1,2,3) y cuatro fincas
en el estado Trujillo (Tr1,2,3,4).
Table 3. Average longitude and width (µm) of conidials from
forty sevenisolations of Colletotrichum acutatum of strawberry
fruits(F) (Fragaria x ananassa Duch), peduncles (Pd), sepals
(S),leaves (H), petioles (Pc), observed in the reactivation
ofmonosporic cultures, inoculated fruits and reisolation of
thefruits, collected in three farms of Lara state (L1,2,3) and
fourfarms in Trujillo state (Tr1,2,3,4).
Aislamiento Longitud Grupo Ancho Grupo(µm) (µm)
Tr3Pd1 14,22 A 3,63 ATr3F6 14,07 AB 3,49 BL1Pd2 14,03 AB 3,91
BL1Pd3 14,02 AB 4,06 BCTr4F3 13,98 ABC 3,32 BCDL1Pd1 13,96 ABCD
3,85 BCDEL3F1 13,96 ABCD 3,64 BCDEL1Pc1 13,92 ABCDE 3,67 BCDEFL1F1
13,87 ABCDEF 3,68 BCDEFTr3F5 13,87 ABCDEF 3,49 CDEFGTr2F3 13,86
ABCDEFG 3,53 CDEFGTr3F2 13,76 ABCDEFGH 3,55 DEFGHL1Pd4 13,76
ABCDEFGH 3,73 EFGHTr4F2 13,71 ABCDEFGHI 3,49 EFGHITr4F1 13,64
BCDEFGHI 3,32 FGHITr1F4 13,63 BCDEFGHIJ 3,55 FGHIL1F2 13,61
BCDEFGHIJK 3,88 GHIJL1H1 13,60 BCDEFGHIJK 3,76 GHIJKTr3Pd2 13,55
BCDEFGHIJKL 3,53 GHIJKTr2F2 13,53 BCDEFGHIJKLM 3,47 GHIJKLTr3F1
13,43 CDEFGHIJKLMN 3,39 HIJKLL2Pd1 13,43 DEFGHIJKLMNO 3,64
HIJKLTr2F1 13,41 EFGHIJKLMNOP 3,50 IJKLML2F4 13,40 EFGHIJKLMNOP
3,86 JKLMN
Valores con la misma letra no difieren estadísticamente, Tukey
(P
-
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 504-528
521
Cuadro 3. Longitud y ancho (ìm) promedio de conidios de cuarenta
ysiete aislamientos de Colletotrichum acutatum (AÑADIR) defrutos
(F) de fresa (Fragaria x ananassa Duch.), pedúnculos(Pd), sépalos
(S), hojas (H), pecíolos (Pc), observados en lareactivación de los
cultivos monospóricos, frutos inoculadosy reaislamientos de frutos,
colectados en tres fincas delestado Lara (L1,2,3) y cuatro fincas
en el estado Trujillo (Tr1,2,3,4)(Continuación).
Table 3. Average longitude and width (µm) of conidials from
forty sevenisolations of Colletotrichum acutatum of strawberry
fruits(F) (Fragaria x ananassa Duch), peduncles (Pd), sepals
(S),leaves (H), petioles (Pc), observed in the reactivation
ofmonosporic cultures, inoculated fruits and reisolation of
thefruits, collected in three farms of Lara state (L1,2,3) and
fourfarms in Trujillo state (Tr1,2,3,4) (Continuation).
Aislamiento Longitud Grupo Ancho Grupo(µm) (µm)
Tr1Pd1 13,35 FGHIJKLMNOPQ 3,45 JKLMNL2Pc1 13,32 GHIJKLMNOPQ 3,44
JKLMNL1F5 13,27 HIJKLMNOPQ 3,83 KLMNTr1Pd2 13,22 HIJKLMNOPQ 3,34
KLMNL1F3 13,20 IJKLMNOPQ 3,74 LMNOL1F3 13,20 IJKLMNOPQ 3,74
LMNOL2Pd3 13,19 IJKLMNOPQ 3,63 MNOTr3F4 13,16 IJKLMNOPQR 3,50
MNOL1F4 13,08 JKLMNOPQRS 3,89 MNOTr3F3 13,06 KLMNOPQRS 3,33 NOL2Pc3
13,04 LMNOPQRS 3,61 NOTr4F4 13,00 LMNOPQRS 3,36 NOPL2F5 12,99
MNOPQRS 3,81 NOPL2F1 12,98 MNOPQRS 3,75 NOPL2F2 12,95 NOPQRS 3,75
NOPQL1S1 12,88 OPQRS 3,80 NOPQRL2Pc2 12,88 PQRS 3,47 OPQRL2F6 12,85
QRST 3,65 PQRTr1F2 12,85 QRST 3,48 QRSL2F3 12,63 RSTU 3,69 QRSTr3S1
12,60 STU 3,22 QRSL2Pd2 12,58 STU 3,52 RSTr1F1 12,31 TU 3,56
RSTr1F3 12,21 U 3,34 S
Valores con la misma letra no difieren estadísticamente, Tukey
(P
-
Urdaneta et al.
522
clamidosporas en las hifas, a partir delos 25 d de incubación,
inicialmentefueron hialinas y después se tornaronmarrón oscuro, la
mayoría presen-taron doble pared y estaban interca-ladas (figura
2). Cedeño y Carrero(1997) señalaron que C. acutatum de-sarrolló
éstas estructuras de resisten-cia a partir del micelio inmerso
encultivos producidos por tres semanasen AAA.
El análisis de varianza realizadopara el tamaño de las
clamidosporasdeterminó que existen diferencias sig-nificativas
entre los aislamientos, laque presentó el mayor valor para
lalongitud fue Tr3S1 (12,33 µm), seguidade L2Pd1 (11,74 µm), las
más peque-ñas fueron producidas por Tr4F2 yTr4F3 (8,59 y 8,92 µm,
respectivamen-
Figura 2. Clamidosporas formadas por Colletotrichum acutatum en
elmedio agar agua acidificado. A y B. Coloración marrón
pálidapresente en las etapas iniciales de formación y presencia
dedoble pared celular y C. Clamidospora madura marrónoscuro. Bar=10
µµµµµm.
Figure 2. Chlamydospore formed by Colletotrichum acutatum sp.
inacidified water agar. A and B. Pale brownish coloring presenton
the initial formation phases and the presence of doublecellular
wall and mature C. Chlamydospore dark brown.Bar=10 µm.
(7.27 µm) (table 4). The rank reachedwas of (8.59-12.33 µm) x
(7.08-10.94µm), with averages of 10.33 x 8.74 µm;these resistance
structures resulted tobe bigger than the ones reported byCedeño and
Carrero (1997), whichmeasures were of 5-11 x 4-6 µm.
Pathogenicity testColletotrichum sp. Fungus was
re-isolated consistently from all theinoculated strawberry
fruits, on whichthree days after the post-inoculationsome initial
symptoms of antracnosiswere observe, such as circular smallareas
and slightly tapered with darkcoffee color, these lesions
incrementedrapidly after the fifth day. Thesesymptoms agreed to the
ones describedby Carrero and Cedeño (1997) andFarrera et al. (2007)
in fruits collected
-
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 504-528
523
Cuadro 4. Largo y ancho promedio (ìm) de las clamidosporas de
loscuarenta y siete aislamientos de Colletotrichum acutatumde
frutos (F) de fresa (Fragaria x ananassa Duch.),pedúnculos (Pd),
sépalos (S), hojas (H), pecíolos (Pc),observados en la reactivación
de los cultivos monospóricos,frutos inoculados y reaislamientos de
frutos, colectados entres fincas del estado Lara (L1,2,3) y cuatro
fincas en el estadoTrujillo (Tr1,2,3,4).
Table 4. Average length and width (µm) of chlamydospore from
theforty seven isolations of Colletotrichum Acutatum ofstrawberry
fruits (F) (Fragaria x ananassa Duch.), peduncles(PD), sepals (S),
leaves (H), petioles (Pc), observed in thereactivation of
monosporic cultures, inoculated fruits andre-isolation of fruits,
collected into three farms of Lara state(L1,2,3) and four farms in
Trujillo state (Tr1,2,3,4).
Aislamiento Longitud Grupo Ancho Grupo(µm) (µm)
Tr3S1 12,33 A 10,94 AL2Pd1 11,74 AB 10,48 ABL1Pd4 11,64 AB 10,15
ABCTr3F3 11,61 AB 10,22 ABCL1Pd2 11,53 ABC 9,73 ABCDL1Pd3 11,34
ABCD 9,91 ABCDEL2PC2 11,32 ABCD 9,83 ABCDEFL2F3 11,28 ABCD 9,43
ABCDEFGL1F4 11,21 ABCDE 8,84 ABCDEFGHTr2F3 11,16 ABCDE 9,49
ABCDEFGHITr3Pd2 11,15 ABCDE 9,17 ABCDEFGHIL1F5 11,10 ABCDE 9,16
ABCDEFGHITr3F1 11,09 ABCDE 9,34 ABCDEFGHIL1S1 11,01 ABCDE 8,31
ABCDEFGHIJTr3F6 11,00 ABCDE 9,34 ABCDEFGHIJL2Pc3 10,95 ABCDE 8,45
ABCDEFGHIJKTr1F4 10,89 ABCDEF 9,35 ABCDEFGHIJKL1F3 10,84 ABCDEF
9,36 ABCDEFGHIJKL2F5 10,69 ABCDEF 9,08 ABCDEFGHIJKTr3F4 10,66
ABCDEF 8,97 ABCDEFGHIJKL1Pd1 10,60 ABCDEF 8,64 ABCDEFGHIJKL2F2
10,60 ABCDEF 9,23 ABCDEFGHIJKTr1Pd2 10,52 ABCDEF 9,19
BCDEFGHIJKTr1F3 10,44 ABCDEF 8,64 BCDEFGHIJKTr4F4 10,25 ABCDEF 8,96
BCDEFGHIJK
Valores con la misma letra no difieren estadísticamente, Tukey
(P
-
Urdaneta et al.
524
Cuadro 4. Largo y ancho promedio (ìm) de las clamidosporas de
loscuarenta y siete aislamientos de Colletotrichum sp. de frutos(F)
de fresa (Fragaria x ananassa Duch.), pedúnculos (Pd),sépalos (S),
hojas (H), pecíolos (Pc), observados en lareactivación de los
cultivos monospóricos, frutos inoculadosy reaislamientos de frutos,
colectados en dos localidades delestado Lara (L) y del estado
Trujillo (Tr) (Continuación).
Table 4. Average length and width (µm) of chlamydospore from
theforty seven isolations of Colletotrichum Acutatum ofstrawberry
fruits (F) (Fragaria x ananassa Duch.), peduncles(PD), sepals (S),
leaves (H), petioles (Pc), observed in thereactivation of
monosporic cultures, inoculated fruits andre-isolation of fruits,
collected into three farms of Lara state(L1,2,3) and four farms in
Trujillo state (Tr1,2,3,4) (Continuation).
Aislamiento Longitud Grupo Ancho Grupo(µm) (µm)
L2F4 10,22 ABCDEF 9,16 BCDEFGHIJKL2Pd3 10,19 ABCDEF 8,85
BCDEFGHIJKL2Pd2 10,15 ABCDEF 8,72 BCDEFGHIJKL2Pc1 10,05 ABCDEF 8,58
BCDEFGHIJKTr2F2 9,89 BCDEF 8,72 BCDEFGHIJKL1H1 9,84 BCDEF 7,76
CDEFGHIJKTr2F1 9,70 BCDEF 8,22 CDEFGHIJKL1Pc1 9,62 BCDEF 7,79
CDEFGHIJKL1F2 9,55 BCDEF 8,25 CDEFGHIJKTr3F2 9,53 BCDEF 8,40
CDEFGHIJKL2F1 9,52 BCDEF 7,27 DEFGHIJKTr1F2 9,48 BCDEF 8,31
DEFGHIJKL3F1 9,46 BCDEF 8,21 EFGHIJKTr4F1 9,25 CDEF 7,38
EFGHIJKTr1F1 9,20 DEF 7,84 EFGHIJKL1F1 9,17 DEF 7,54 FGHIJKTr1Pd1
9,11 DEF 8,02 GHIJKL2F6 9,09 DEF 7,76 GHIJKTr3Pd1 9,08 DEF 7,65
HIJKTr3F5 9,05 DEF 7,08 IJKTr4F3 8,92 EF 7,22 JKTr4F2 8,59 F 7,60
K
Valores con la misma letra no difieren estadísticamente, Tukey
(P
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Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 504-528
525
te) (cuadro 4). Con relación al ancho,el mayor valor fue para
Tr3S1 (10,94µm) y el menor para Tr3F5 (7,08 µm),los aislamientos de
Lara que produje-ron las clamidosporas con mayor ymenor ancho
fueron L2Pd1 (10,48 µm)y L2F1 (7,27 µm) (cuadro 4). El
rangoalcanzado fue de (8,59-12,33 µm) x(7,08-10,94 µm), con
promedios de10,33 x 8,74 µm; estas estructuras deresistencia
resultaron ser más gran-des que las reportadas por Cedeño yCarrero
(1997), cuyas medidas fueronde 5-11 x 4-6 µm.
Prueba de patogenicidadEl hongo Colletotrichum sp. fue
reaislado consistentemente de todos losfrutos de fresa
inoculados, sobre loscuales, a los tres días postinoculaciónse
observaron los síntomas iniciales dela antracnosis, pequeñas áreas
circu-lares, ligeramente hundidas de colorcafé oscuro, estas
lesiones seincrementaron rápidamente a partirdel quinto día. Estos
síntomas coinci-dieron con los descritos por Carrero yCedeño (1997)
y Farrera et al. (2007)en frutos colectados en los estadosMérida y
Táchira. Con relación al pe-riodo de incubación, este fue similaral
señalado por Tanaka y Passos(2002), Ferreira et al. (2009)
yStaòková et al. (2011) quienes deter-minaron que las lesiones en
frutos ino-culados en campo y en condicionespostcosecha con C.
acutatum fueronvisibles también a partir del 3-4 d.
También se observaron masas deconidios de color naranja o salmón
so-bre los frutos de fresa, 6 d después dela inoculación, los
cuales se formaronen acérvulos constituidos porconidióforos
hialinos, que se caracteri-zaron por la ausencia de setas
(figura
in Mérida and Táchira. In relation tothe incubation period, this
was similarto the one mentioned by Tanaka andPassos (2002) Ferreira
et al. (2009) andStaòková et al. (2011) who determinedthat the
lesions on the fruits inoculatedin the field and on
post-harvestconditions with C. acutatum were alsovisible after days
3-4.
There were also observedconidials with orange or light
orangecolor on the strawberry fruits 6 daysafter the inoculations,
which wereformed in acervuli constituted byhyaline conidiophores
which werecharacterized by the absence of setae(figure 3). Smith
(2008) mentioned thatout of the three species that causeantracnosis
in the crop of strawberry,only C. gloeosporioides and C.
fragariaeformed it, meanwhile, C. acutatumdoes not. Likewise,
Zivkoviae et al.(2010) mentioned that the nineisolations of tomato
fruits withantracnosis, which were morphologicaland molecular
identified as C.acutatumdid not show it either. On the contrary,Xie
et al. (2010) mentioned that the threespecies identified causing
antracnosisin the strawberry crops in China (C.gloeosporioides, C.
fragariae and C.acutatum) did produce it.
Identification of the specieThe cultural characterization of
each of the isolations of the fungus, thechlamysdospore in the
AAA media, theabsence of setae in the acervuli formedon the
inoculated fruits, thepredominant shape of the conidials andthe
size of these allowed determiningthat the isolated and identified
speciewas C. acutatum (Sutton, 1980;Smith, 1990; Cedeño y Carrero,
1997;Freeman y Katan, 1997; Oliveira et
-
Urdaneta et al.
526
3). Smith (2008) señaló que de las tresespecies que causan
antracnosis en elcultivo de la fresa, sólo C.gloeosporioides y C.
fragariae las for-man, mientras que C. acutatum no.Igualmente,
Zivkoviae et al. (2010)señalaron que los nueve aislamientosde
frutos de tomate con antracnosis,identificados morfológica
ymolecularmente como C. acutatum,tampoco las presentaron. En
contras-te con estos autores, Xie et al. (2010)señalaron que las
tres especies identi-ficadas causando antracnosis en culti-vos de
fresa en China (C.gloeosporioides, C. fragariae y C.acutatum) las
produjeron.
Identificación de la especieLa caracterización cultural de
cada uno de los aislamientos del hon-
Figura 3. Estructuras reproductivas producidas por
Colletotrichum sp.A. Acérvulos sobre la superficie de frutos de
fresa (Fragariax ananassa Duch.) inoculados. B. Detalles de un
acérvulo(400X). Bar=10 µm.
Figure 3. Reproductive structures produced by Colletotrichum sp.
A.Acervuli on the surface of inoculated strawberry fruits(Fragaria
x ananassa Duch.). B. Details of an acervulus (400X).Bar=10 µm.
al., 2005; Farrera et al., 2007; Smith,2008; Zivkoviae et al.,
2010; Xie et al.,2010) in the forty seven samplescollected from
sepals, peduncles,petioles, foliar lamina and strawberryfruits, in
the production units of Laraand Trujillo.
Conclusion
In the states of Venezuela, Lara(Morán and Torres
counties,Humocaro Alto and Las Lajitasrespectively) and Trujillo
(San Rafaelde Carvajal, Cabimbú and LaLagunita), the antracnosis of
thestrawberry crop is caused byColletotrichum acutatum. It was
alsoobserved the variability on the size ofthe conidials and the
chlamydospore,
-
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go, la formación de clamidosporas enel medio AAA, la ausencia de
setas enlos acérvulos formados sobre los fru-tos inoculados, la
forma predominan-te de los conidios y el tamaño de losmismos,
permitieron determinar quela especie aislada e identificada en
cua-renta y siete muestras colectadas, desépalos, pedúnculos,
pecíolos, láminafoliar y frutos de fresa, en las unida-des de
producción de los estados Laray Trujillo, fue C. acutatum
(Sutton,1980; Smith, 1990; Cedeño y Carrero,1997; Freeman y Katan,
1997; Oliveiraet al., 2005; Farrera et al., 2007;Smith, 2008;
Zivkoviaeet al., 2010; Xieet al., 2010).
Conclusión
En los estados de Venezuela,Lara (municipios Morán y Torres,
lo-calidades Humocaro Alto y Las Lajitasrespectivamente) y Trujillo
(munici-pio San Rafael de Carvajal, localida-des Cabimbú y La
Lagunita), laantracnosis del cultivo de la fresa, esocasionada por
Colletotrichumacutatum. Se observó, además, varia-bilidad en el
tamaño de los conidios ylas clamidosporas, lo cual no pareceestar
relacionado con el lugar de pro-cedencia, ni con el órgano del cual
fueaislado.
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End of english version
which does not seem to be related tothe origin place or the
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