Universidad de Costa Rica
Facultad de Ciencias Agroalimentarias
Escuela de Agronoma
Reguladores de Crecimiento Vegetal AF-5408
Catalina Acua Gutirrez
A70049
Control hormonal de la sntesis de - amilasa
Resumen
Con el objetivo de demostrar el efecto de las giberelinas sobre
la sntesis de la alfa amilasa, se realiz un ensayo utilizando dos
concentraciones de ste regulador de crecimiento; 0.1 ppm y 0.01 ppm
de GA3. Se utiliz un medio agar agua al 2% al cual se le aadi las
distintas concentraciones de regulador y almidn. Se colocaron
semillas de avena en los platos petri, a las cuales se les haba
removido el embrin previamente, y se evaluaron a las 24 y 48 horas
con la ayuda de lugol al 4%. Luego se procedi a evaluar el dimetro
de la aureola formada alrededor de la semilla con una regla. El
tratamiento con 0.1 ppm de GA3 fue el que consumi ms almidn del
medio en comparacin con el de 0.01 ppm; por ende el primero present
una aureola ms marcada que el segundo. Adems, las evaluaciones
realizadas a las 48 horas presentaron mayores diferencias entre s
que los evaluados a las 24 horas. Introduccin
La germinacin de las semillas est mediado por varios factores
como los son la temperatura, la cantidad de agua, la luz, la
cantidad de oxgeno presente en el medio donde germinar y los
niveles hormonales adecuados (Garca et al. s.f.; Simn y Moysset
2006). Una vez que las semillas cumplen con los factores necesarios
para la germinacin, se desencadenan procesos metablicos, como lo
son la sntesis de enzimas, las cuales ayudan a acelerar el proceso
de hidrlisis (Koolman 2004) del almidn para utilizar los productos
como energa, para seguir con el proceso de germinacin.Uno de los
pasos de la germinacin es el aumento en la produccin de giberelinas
por parte del embrin. sta hormona se encarga de codificar los genes
encargados de la produccin de la alfa amilasa, enzima que se
encarga de desdoblar los almidones que se encuentran almacenados en
el endospermo, para ser utilizados por el embrin como energa (Jordn
y Casaretto 2006; Herrera et al. 2006).La importancia de las
giberelinas sobre la germinacin de las semillas ha sido aprovechada
por la industria cervecera, y para uniformizar la germinacin de las
semillas en los cultivos (Taiz y Zeiger 2006).El objetivo de esta
prctica es demostrar el efecto de diferentes concentraciones de
giberelinas sobre la sntesis de la alfa amilasa.
Materiales y mtodos
Se prepar un medio agar agua al 2% con 200 mg de almidn por cada
100 ml de medio. El medio fue dividido en tres grupos a los cuales
se les deba adicionar diferentes concentraciones de giberelinas. El
primer tratamiento consista en adicionar una concentracin de 0.1
ppm GA3, el segundo a una concentracin de 0.01 ppm, y al tercero no
se le adicionaba GA3 ya que era el control (anexo 1).
Posteriormente se calent el medio hasta lograr que se viera
traslucido y se autoclav por 20 minutos. Luego en condiciones
estriles fue dispensado en cajas petri. Se utilizaron 120 semillas
de avena, las cuales fueron desinfectadas con hipoclorito de sodio
al 2% en agitacin por 20 min. Luego se llevaron a una cmara estril
donde se realizaron tres enjuagues con agua desionizada
autoclavada. Posteriormente se procedi a cortar un tercio de la
semilla para eliminar el embrin de sta (Figura 1).
Fig.1. Sitio donde se debe de realizar el corte de la semilla de
avena.Luego de cortadas las semillas, se procedi a poner 4 semillas
por plato petri (Figura 2), cada tratamiento cont con un total de
10 platos petri por tratamiento para un total 40 semillas por
tratamiento y 30 platos en total.
Fig. 2. Arreglo de las semillas en el plato petri
Se realizaron dos evaluaciones, una a las 24 horas y otra a las
48 horas. Para analizar los resultados se prepar una solucin de
lugol al 4%, la cual fue vertida sobre cada plato petri, luego se
enjuag con agua desionizada y posteriormente se procedi a analizar
el dimetro de la aureola formada alrededor de la semilla con una
regla.
Resultados y discusin
La Figura 2 muestra que s existen diferencias significativas
entre el tratamiento de 0.1 ppm y el control, de igual forma el de
0.1 ppm y el de 0.01 ppm; sin embargo no se encontraron diferencias
significativas entre el control y el tratamiento 0.01 ppm (anexo
2). El mayor dimetro de aureola fue formado por el tratamiento de
0.1 ppm GA3, alcanzando 0.4 cm, seguido por el tratamiento de 0.01
ppm con 0.3 cm y por ltimo el control con 0.16 cm.
Fig.3. Dimetro de la aureola formada alrededor de las semillas
de avena para tres diferentes tratamientos evaluado a las 24 horas.
Las barras verticales corresponden al error estndar. (*p