A "programozott sejthalál" (apoptosis) in vivo körülmények közötti kimutatását célzó peptid előállítása és jelzése 99m Tc-radionukliddal Szemenyei Erzsébet 1 , Tóth Géza 1 , Környei József 2 Őszi Radiokémiai Napok Eger 2004 1 MTA SZBK, Biokémiai Intézet, Szeged, 2 Izotóp Intézet Kft. Budapest
13
Embed
A "programozott sejthalál" (apoptosis) in vivo körülmények közötti kimutatását
A "programozott sejthalál" (apoptosis) in vivo körülmények közötti kimutatását célzó peptid el ő állítása és jelzése 99m Tc-radionukliddal. Szemenyei Erzsébet 1 , Tóth Géza 1 , Környei József 2. 1 MTA SZBK , Biokémiai Intézet, Szeged, 2 Izotóp Intézet Kft. Budapest. - PowerPoint PPT Presentation
Welcome message from author
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
A "programozott sejthalál" (apoptosis)
in vivo körülmények közötti kimutatását
célzó peptid előállítása és jelzése
99mTc-radionukliddal Szemenyei Erzsébet1, Tóth Géza1, Környei József 2
Őszi Radiokémiai NapokEger 2004
1MTA SZBK, Biokémiai Intézet, Szeged, 2Izotóp Intézet Kft. Budapest
Apoptózis: Programozott sejthalál. A természetes sejthalál egyik formája, a sejtek mindig ugyanazon a helyen és időben genetikailag meghatározott program szerint halnak el. Az elnevezés a régi görög nyelvből származik, ahol falevelek hullását jelentette.
Az elhaló sejtek felszínén, a kettős membrán külső odalán megjelennek ezen sejtek felismerését lehetővé tévő molekulák, pl. a foszfatidil-szerin lipid-molekula.
Bevezetés
BevezetésAnnexin V: • Ca2+ és foszfolipid kötő fehérjék családjának tagja, antikoaguláns tulajdonságokkal
• Nagyrészt a plazmamembrán citoszol felőli részén található
• Az érett annexin V 320 aminosavból áll, 35-36 kDa tömegű
• A fehérje négy ismétlődő rész, síkban ciklikus elrendeződésével alakul ki,
az ismétlődő részek öt alfa-helikális szegmenst tartalmaznak
Patrick Raynal, Harvey B. Pollard(1994) Biochimica et Biophysica Acta
ÖsszefoglalásSikeresen előállítottuk a Ala-Gln-Val-Leu-Arg-Gly-Thr-Val-Thr-Asp-Phe-Pro-Gly-OH
és Ala-Gln-Val-Leu-Arg-Gly-Thr-Val-Thr-Asp-Phe-Pro-Gly-NH2 peptideket.A stabiltás vizsgálatból kiderült, hogy az –OH végű forma stabilabb, ezért a további vizsgálatokat ezzel végeztük.
Elkészítettük a nitrido-jelzéshez szükséges, két ciszteinnel kiegészített ANX13-at, ennekhővel szembeni stabilitás eredménye azt mutatja, hogy a jelzésnél alkalmazhatjuk
az 1 órás reakcióidőt.
A jelzési reakció után vékonyréteg-kromatográfiával kimutattuk, hogy nincs szabad 99mTcO4-
a rendszerben. (ET-31, aceton)
A további vizsgálatok azt mutatták, hogy intermedier sincs jelen. (Kieselgel 60, EtOH: víz 1:1)Ugyanakkor, ebben a rendszerben nem válik el egyértelműen a 99mTc-PCN-komplexés a 99mTc-ANX13-PCN-komplex.
Egy újabb futtatórendszeren és lapon elvégzett vizsgálatokból egyértelműen látszik, hogy a jelzés sikeres volt. (ITLC-SA, 0,3 M HCl-val telített BuOH)
Célunkat elértük, sikerült előállítanunk a 99mTc-ANX13-komplexet, amely jelentős előrelépés egy tervezett radiogyógyszer kifejlesztésének következő fázisához, a preklinikai vizsgálatok megtervezéséhez.
Köszönetnyilvánítás
Köszönöm a figyelmüket!
Szeretnék köszönetet mondani munkatársaimnak:Tóthné Papp Évának és Papp Jánosné, Andreának
valamintRupert Anikónak és Paál Margitnak a hatékony segítségért.