260110140078_Ayu Apriliani_Modul 7,8,9

7/24/2019 260110140078_Ayu Apriliani_Modul 7,8,9

1/23

PEMERIKSAAN BAHAN BAKU KLORAMFENIKOL SERTA

PENETAPAN KADARNYA DALAM SEDIAAN KRIM DENGAN

METODE SPEKTROFOTOMETRI UV

NAMA : AYU APRILIANI

NPM : 260110140078

HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : SENIN, 3, 10, 17 NOVEMBER 2015

ASISTEN :1. HASYA AQDAN

2. HESTI JUWITA SARI

LABORATORIUM ANALISIS FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

JATINANGOR

2015


2/23

Abstrak

Kloramfenikol adalah bahan aktif obat yang banyak digunakan di masyarakat

sebagai obat antibiotik. Menurut Farmakope Indonesia ed III kloramfenikol ini

memiliki pemerian hablur halus berbentuk jarum atau lempeng memanjang;putih

sampai putih kelabu atau putih kekuningan;tidak berbau;rasa sangat pahit;dalam

larutan asam lemah mantap. Tujuan dari praktikum ini yaitu menetapkan kadar

bahan baku kloramfenikol dengan metode spektrofotometri Uv-Vis, melakukan

uji kualitatif warna kloramfenikol dengan berbagai metode yaitu uji nessler dan

uji fujiwara, dan menetapkan kadar air dalam kloramfenikol, dilakukan pula

penetapan kadar dari bahan baku kloramfenikol dan juga penetapan kadar

kloramfenikol dalam sediaan krim menggunakan spektrofotometri UV-Vis yang

didasarkan pada pengukuran absorbansi dan konsentrasi sebagai fungsi panjang

gelombang. Metode penetapan kadar kloramfenikol menggunakan

Spektrofotometer UV yang digunakan yaitu prinsip serapan gelombang

elektromagnetik yang menghasilkan berbagai absorbansi pada sampel dan,

sedangkan metode kualitatif meliputi reaksi warna denga pereaksi fujiwara dan

nessler memberikan kompleks warna. Didapatkan hasil kadar air dari

kloramfenikol yang memenuhi standar, yaitu 0,175%. Kadar bahan baku

kloramfenikol pada Spektrofotometri UV adalah 82,86%, kadar ini tidak sesuai

denga standar, yaitu 97%-103%. Ini dikarenakan pembuatan kurva baku yang

tidak linier, akurat dan presisi. Kemudian kadar kloramfenikol dalam krim didapat

hasilnya adalah 0,733%. Kadar ini tidak sesuai dengan teoritis, yaitu 2%. Karena

kloramfenikol dalam 10 gram krim adalah 200 mg.

Kata Kunci: Kadar, kloramfenikol, kualitatif, kuantitatif.


3/23

Abstract

Chloramphenicol is the active ingredient that is widely used in the community as

an antibiotic drug. According to the Indonesian Pharmacopoeia III

chloramphenicol has pemerian finely crystalline needle-shaped or elongated

plates; white to gray-white or yellowish white; odorless; taste very bitter; the

steady weak acid solution. The purpose of this practicum is to set the levels of raw

materials chloramphenicol by spectrophotometric Uv-Vis method, perform

qualitative test of color chloramphenicol with various methods of testing Nessler

and Fujiwara test , and set the water content in chloramphenicol, also conducted

assay of raw materials chloramphenicol and also determination levels of

chloramphenicol in cream using UV-Vis spectrophotometry is based on

measuring the absorbance and concentration as a function of wavelength.

Chloramphenicol assay method using a UV spectrophotometer used, namely the

principle of absorption of electromagnetic waves that produce a wide range of

absorbance of the sample and, while qualitative methods include color reaction

premises Fujiwara and Nessler reagent gives color complex. Showed the water

content of chloramphenicol that meets the standard, ie 0.175%. Content of

chloramphenicol raw materials in UV spectrophotometry is 82.86%, this content

is not conformed to the standard, which is 97% -103%. This is because the

manufacture of the raw curve is not linear, accurate and precise. Then the levels of

chloramphenicol in cream obtained result is 0.733%. This level does not

correspond to the theoretical, ie 2%. Because of chloramphenicol in 10 grams of

the cream is 200 mg.

Keywords: Content, chloramphenicol, qualitative, quantitative.


4/23

I. Pendahuluan

Tujuan Praktikum kali ini adalah

menetapkan kadar bahan baku

kloramfenikol dengan metode

spektrofotometri Uv-Vis, melakukan uji

kualitatif warna kloramfenikol dengan

berbagai metode yaitu uji nessler dan uji

fujiwara, dan menetapkan kadar air dalam

kloramfenikol, dilakukan pula penetapan

kadar dari bahan baku kloramfenikol dan

juga penetapan kadar kloramfenikol dalam

sediaan krim menggunakan

spektrofotometri UV-Vis yang didasarkan

pada pengukuran absorbansi dan

konsentrasi sebagai fungsi panjang

gelombang.

Saat ini pengunaan antibiotic sangat

marak digunakan oleh masyarakat. Banyak

juga asyarakat yang menggunakan

antibiotic tanpa pengetahuan yang cukup

mengenai antibiotic tersebut oleh karena

itu sering kali ditemukan pasien yang tidak

patuh dalam penggunaan antibiotic

ataupun dosis antibiotic yang diberikan

tidak sesuah sehingga menyebabkan

resistensi terhadap obat tersebut. Oleh

karena itu percobaan kali ini dilakukan

untuk mengetahui parameter-parameter

dalam pengujian bahan baku

kloramfenikol, dengan beberapa metode

pengujian bahan baku seperti susut

pengeringan/kadar air, kelarutan, dan uji

kualitatif warna.

Prinsip yang digunakan yaitu penetutan

kadar air. Pengukuran kandungan air yang

berada dalam bahan ataupun sediaan yang

dilakukan dengan cara yang tepat

diantaranya cara titrasi, destilasi atau

gravimetri yang bertujuan memberikan

batasan minimal atau rentang tentang

besarnya kandungan air dalam bahan ,

dimana nilai maksimal atau rentang yang

diperbolehkan terkait dengan kemurniaan

dan kontaminasi.(Ditjen POM, 2000).

Prinsip selanjutnya yaitu Analisis

Kualitatif. Analisis kualitatif berkaitan

dengan identifikasi zat zat kimia :

mengenali unsur atau senyawa apa yang

ada dalam suatu sampel. ( Underwood,

2002), Analisis Kuantitatif.Analisis

kuantitatif berkaitan dengan penetapan

berapa banyak suatu zat tertentu yang

terkandung dalam suatu sampel. (

Underwood, 2002)

Kloramfenikol atau kloramisetin adalah

antibiotic yang mempunyai spectrum luas,


5/23

berasal dari jamur Streptomyces

venezuelae, dan sekarang telah dapat

dibuat dsecara sintetik di laboratorium.

Dalam keadaan murni, kloramfenikol

berupa kristal bentuk jarum atau lempeng

memanjang, warna putih keabu-abuan,

tidak berbau dan rasanya pahit.

Kloramfenikol

sukar larut dalam air, mudah larut dalam

methanol, etanol, etil asetat, dan aseton,

serta tidak larut dalam benzene

(Sumardjo,2009) Kloramfenikol adalah

salah satu jenis antibiotika turunan

amfenikol yang secara alami diproduksi

oleh Streptomyces venezuelae (Reynolds,

1982). Melalui pengembangan teknologi

fermentasi, kloramfenikol dapat diisolasi,

disemisintesis menjadi antibitoka

turunannya, antara lain tiamfenikol dan

turunan lain melalui berbagai reaksi kimia

dan enzimatis. Senyawa dengan rumus

molekul C11H12Cl2N2 O5 dan nama

kimia D(-) treo-2-dikloroasetamido- 1-p-notrofenilpropana-1,3-diol, memiliki

struktur molekul tersaji pada Gambar di

bawah ini (Susanti,2009)

Kloramfenikol biasanya digunakan

untuk menurunka demam tifoid. Menurut

salah satu jurnal menyatakan bahwa pasien

demam tifoid anak yang menggunakan

antibiotika kloramfenikol mengalami

penurunan suhu tubuh rata-rata pada hari

ke 3,969 dan Hilangnya demam pada

pasien demam tifoid anak yang

menggunakan obat kloramfenikol rata-rata

dialami pada hari ke 4,6 (Musnelina

dkk,2004)

Pada percobaan ini digunakan metode

spektrofotometri UV VIS. Metode ini

mempunyai keuntungan sensitif, batas

deteksinya rendah, mudah, akan tetapi

kelemahannya adalah perlu perlakuan awal

untuk menghilangkan unsur-unsur

penganggu, dan menggunakan beberapa

macam bahan kimia sebagai pereaksi.

Untuk mendapatkan data pengujian yang

valid, diperlukan validasi metode analisis

dengan parameter adalah akurasi, presisi,

batas deteksi, selektivitas, linieritas kisaran

konsentrasi. (Purwanto dkk,2012).


6/23

II. Metode

Alat

Batang pengaduk, beaker glass,

cawan penguap,oven,pipet volume,

spektrofotometer UV Vis dan tabung

reaksi .

Bahan

Aquades, etanol, kloramfenikol,propilenglikol, reagen fujiwara,

reagen piridin.

Uji Kelarutan Kloramfenikol

Kloramfenikol ditimbang sebanyak

900 mg. Lalu kloramfenikol dibagi

menjadi tiga bagian masing-masing

300 mg. setelah itu bagian

kloramfenikol pertama dilarukan

dengan 400 bagian air, bagian kedua

dilarutkan dalam 2,5 bagian etanol,

dan bagian ketiga dilarutkan dengan

7 bagian propilenglikol. Setelah itu

diamati kelarutan kloramfenikol

Penentuan Kadar Air

Kloramfenikol

Kloramfenikol ditimbang sebanyak

0.5 gram. lalu cawan porselen

kosong

ditimbang dan dikeringkan pada

temperatur 105C selama 360 menit.

Setelah didinginkan dalam eksikator

selama 15 menit, kemudian

masukkan kloramfenikol yang sudah

ditimbang kedalam cawan, kemudian

dikeringkan pada temperatur 105C

hingga bebas air selama 15 menit.

Setelah itu, didinginkan dalam

eksikator selama 15 menit, botoltimbang dan isinya ditimbang.

Pekerjaan dilakukan rangkap 3

(triplo) sampai didapatkan berat dari

kloram yang konsisten dan dihitung

kadar airnya.

Uji Kualitatif Kloramfenikol:Uji

Fujiwara

Sampel kloramfenikol dimasukkan

ke dalam tabung reaksi.

Ditambahkan 2 ml reagen fujiwara

dan 1 ml reagen piridin. Lalu

dipanaskan pada suhu 100oC selama

2 menit degan pengocokkan, dan

diamati perubahan warna yang

terjadi .

Uji Kualitatif Kloramfenikol: Uji

Nessler

Sampel dimasukkan ke dalam tabung

reaksi, kemudian ditambahkan

pereaksi ke dalam tabung yang berisi


7/23

sampel. Campuran dipanaskan pada

suhu 100oC di atas penangas air,

kemudian diperiksa selama 10 menit

sekali apakah terjadi perubahan

warna kemudian amati perubahan

warna yang terjadi.

Uji Kadar Baku Kloramfenikol

Pertama, dibuat larutan baku

kloramfenikol 0,02% dengan cara

dtimbang seksama 10,0 mg

kloramfenikol, dimasukan dalam

beaker glass dan dilarutkan dengan

etanol, jika perlu dihangatkan,

diaduk hingga larut sempurna.

Dimasukkan dalam labu ukur 50 mL

dan diencerkan dengan etanol hingga

tanda batas. Dibuat seri larutan baku

5, 10, 15, 20, 25, dan 30 ppm.

Ditentukan maksimum dengan cara

mengukur konsentrasi 15 ppm pada

panjang gelombang 200-400 nm.

Setelah mendapatkan maksimum,

deret standar kemudian diukur

serapannya masing-masing pada

maksimum mulai dari kadar terkecil.

Dihitung persamaan regresi linier

yang merupakan hubungan antara

konsentrasi dan serapan, serta

ditentukan koefisien kolerasinya.

Ditimbang seksama sejumlah sampel

bahan baku kloramfenikol 10,0 mg.

Dimasukkan dalam beaker glass dan

dilarutkan dengan etanol, bila perlu

dihangatkan hingga larut sempurna.

Dimasukkan dalam labu ukur 50 mL

dan diencerkan dengan etanol hingga

tanda batas. Pipet 5,0 mL larutan

tersebut dimasukkan dalam labu ukur

50 mL, diencerkan dengan etanol

hingga tanda batas untuk

mendapatkan larutan 20 ppm. Diukur

serapan pada maksimum dan

dihitung kadar kloramfenikol dengan

menggunakan persamaan regresi

linier.

Uji Kadar Krim Kloramfenikol

Dibuat larutan baku dari

kloramfenikol dengan cara baku

kloramfenikol ditimbang sebanyak

25 mg, kemudian dilarutkan

menggunakan methanol didalam labu

ukur 25 ml hingga larut dan di add

methanol hingga tanda batas. Larutan

baku dibuat variasi konsentrasi yaitu

10,15,20,25,30 ppm. Deret standar

kemudian diukur serapannya masing-

masing pada maksimum mulai dari

kadar terkecil. Dihitung persamaan


8/23

regresi linier yang merupakan

hubungan antara konsentrasi dan

serapan, serta ditentukan koefisien

kolerasinya. Ditimbang krim

kloramfenikol setara dengan 40 mg

kloramfenikol (2 gram). Kemudian

dilarutkan sedikit dengan methanol

dan dimasukkan ke dalam labu ukur

100 ml, larutan tersebut disinokasi

sampai terlarut sempurna kemudian

di add hingga tanda batas. Larutan

dalam labu ukur di saring

menggunakan kertas saring filtrate .

Pipet aliquot sebanyak 1.25 ml lalu

dimasukkan ke dalam labu ukur 25

ml dan di add dengan methanol

hingga tanda batas. Kemudian dilihat

absorbansinya pada panjang

gelombang maksimum dengan

menggunakan spektrofotometer UV

VIS. Kadar Kloramfenikol dalam

sampel dapat dihitung.

III. Hasil

3.1 Pemeriksaan Bahan Baku Kloramfenikol

Penentuan Kadar Air

No Perlakuan Hasil

1 Cawan penguap ditimbang dan

dikeringkan dalam oven pada suhu

1050C selama 30 menit

Bobot cawan penguap sebelum

pengeringan 39,1406 gram

2 Cawan didinginkan di dalam

desikator selama 15 menit

kemudian ditimbang

Bobot cawan penguap setelah


3 Sampel ditimbang kira-kira 3 gram

dan dimasukan kedalam cawan

Bobot cawan + sampel

sebelum pengeringan 42,1187

gram

4 Keringkan sampel dalam cawan Sampel mengalami


9/23

pada suhu 105 C hingga bebas air

kurang lebih 60 menit

pengurangan air

5 Setelah dingin timbang cawan

beserta isinya

Bobot cawan + sampel setelah


Perhitungan :

% kadar air =

x 100%

=() ()

()x 100%

= 0,175 %

Uji dengan Reagen Fujiwara

No Perlakuan Hasil

1 Campurkan 2 ml reagen NaOH

dengan 1 ml piridin

Larutan berwarna kuning dan

terbentuk endapan berwarna

kuning terang

2 Tambahkan sampel kloramfenikol

dalam reagen, panaskan pada suhu

1000C selama 2 menit dengan

pengocokan kuat

Terbentuk larutan2 fase

berwana merah tua dan

endapan dengan warna

merah.

Hasil : positif

Uji dengan Reagen Nessler

No Perlakuan Hasil


10/23

1 Tambahkan sampel kloramfenikol

pada reagen nessler

Blanko = larutan kuning bening

Sampel = larutan kuning keruh

2. Panaskancampuran tersebut pada

suhu 1000C

10 menit pertama

Blanko = larutan kuning

bening + endapan berwarna

putih

Sampel = larutan berwarna

orange terang + endapan

berwarna putih

10 menit kedua

Blanko = larutan kuning

bening + endapan berwarna

hitam

Sampel = larutan orange

kecoklatan + endapan

berwarna hitam

Hasil : positif

Uji Kelarutan

No Perlakuan Hasil

1 Melarutkan kloramfenikol 100 mg

dalam aquadest 40 ml

Tidak larut

2 Melarutkan kloramfenikol 100 mg

dalam 0,2 ml etanol

Larut

3.2

Absorbansi baku


11/23

Konsentrasi I II III Rata-rata

8 ppm 0,0245 0,0245 0,0249 0,024667

12 ppm 0,4802 0,4806 0,4799 0,480233

16 ppm 0,5082 0,5084 0,5089 0,5085

20 ppm 0,5625 0,5620 0,5627 0,5627

24 ppm 0,5670 0,5633 0,5637 0,564667

Absorbansi baku pada konsentrasi 50 ppm

Konsentrasi I II III Rata-rata

50 ppm 1,4722 1,310 1,4749 1,4760

Absorbansi sampel pada 20 ppm

Sampel ke

Absorbansi

1 2 3

I 0,4474 0,4484 0,4382

II 0,4475 0,4492 0,4378

III 0,4477 0,4482 0,4381

Rata-Rata 0,447533 0,4488 0,438033

y = 0,029x - 0,036

1. y = 0,4475

y = 0,029x - 0,036

0,4475 = 0,029x - 0,036

0,029x = 0,4835

X = 16,67 ppm

% kadar =

x 100% = 83,53%

2.

y = 0,4488


12/23

y = 0,029x - 0,036

0,4488 = 0,029x - 0,036

0,029x = 0,4848

X = 16,71 ppm

% kadar =

x 100% = 83,55%

3.

y = 0,438

y = 0,029x - 0,0360,439 = 0,029x - 0,036

0,029x = 0,474

X = 16,34 ppm

% kadar =

x 100% = 81,7 %

Rata-Rata Kadar Kloramfenikol =

= 82,86 %

3.3

Pengenceran konsentrasi larutan kloramfenikol untuk kurva baku

1000 ppm dibuat dengan 100 mg kloramfenikol dalam methanol ad

100 ml

(1)

Pengenceran menjadi 25 ppm

1000 ppm . x = 25 ppm. 20 ml

X =

X = 0,5 ml

(2)Pengenceran menjadi 20 ppm

1000 ppm . x = 20 ppm. 20 ml

X =


13/23

X = 0,4 ml


1000 ppm . x = 15 ppm. 20 ml

X =

X = 0,3 ml


1000 ppm . x = 10 ppm. 20 ml

X =

X = 0,2 ml


1000 ppm . x = 5 ppm. 20 ml

X =

X = 0,1 ml

Kurva baku

A C 5 ppm 10 ppm 15 ppm 20 ppm 25 ppm

I 0,2694 0,4171 0,5634 0,6840 0,7996

II 0,2691 0,4167 0,5633 0,6839 0,8003

III 0,2690 0,4169 0,5628 0,6838 0,8000

Rata-rata 0,2692 0,4167 0,5632 0,6839 0,7999

Grafik kurva kalibrasi


14/23

Perhitungan sampel

Sampel krim yang tersedia 200mg / 10 gram sediaan

Sampel yang akan diuji kadarnya adalah 40 mg kloramfenikol maka

sediaan yang ditimbang sekitar 2 gram .

=

200 x = 400

X =

X = 2 gram dimana x = krim kloramfenikol

Perhitungan ppm sampel

40 mg dilarutkan dalam 100 ml

= 400 ppm pengenceran 20 ppm

Absorbansi sampel

Perlakuan

sampel ke

Serapan Rata-rata

serapanI II III


15/23

1 0,1518 0,1520 0,1519 0,1519

2 0,0811 0,0807 0,0812 0,0810

3 0,1318 0,1318 0,1317 0,1317

Perhitungan kadar kloramfenikol

1) 20 ppm A = 0,1519

Y = 0,0266x + 0,148

0,1519 = 0,0266x + 0,148

X =

X = 0,1466

% ppm =

x 100%

% ppm = 0,733 %

2) 20 ppm A = 0,0810

Y = 0,0266x + 0,148

0,0810 = 0,0266x + 0,148

X =

X = - 2, 5188

% ppm =

x 100%

% ppm = - 12, 594 %

3) 20 ppm A = 0,1317

Y = 0,0266x + 0,148

0,1317 = 0,0266x + 0,148

X =

X = - 0,6278


16/23

% ppm =

x 100%

% ppm = - 3,139 %

IV. Pembahasan

Dalam praktikum

pemeriksaan bahan baku

kloramfenikol serta penetapan

kadarnya dalam sediaan krim dengan

metode spektrofotometri uv

bertujuan untuk menetapkan kadarbahan baku kloramfenikol dengan

metode spektrofotometri Uv-Vis,

melakukan uji kualitatif warna

kloramfenikol dengan berbagai

metode yaitu uji nessler dan uji

fujiwara, dan menetapkan kadar air

dalam kloramfenikol, dilakukan pula

penetapan kadar dari bahan baku

kloramfenikol dan juga penetapan

kadar kloramfenikol dalam sediaan

krim menggunakan spektrofotometri

UV-Vis yang didasarkan pada

pengukuran absorbansi dan

konsentrasi sebagai fungsi panjang

gelombang.

Kloramfenikol adalah bahan

aktif obat yang banyak digunakan di

masyarakat sebagai obat antibiotik.

Menurut Farmakope Indonesia ed III

kloramfenikol ini memiliki pemerian

hablur halus berbentuk jarum atau


17/23

lempeng memanjang;putih sampai

putih kelabu atau putih

kekuningan;tidak berbau;rasa sangat

pahit;dalam larutan asam lemah

mantap. Dan dilihat dari

kelarutannya kloramfenikol ini larut

dalam 400 bagian air, larut dalan 2,5

bagian etanol dan larut dalam 7

bagian propilenglikol. Untuk

pengujian bahan baku dari

kloramfenikol ini dilakukan beberapa

metode yaitu uji kelarutan

kloramfenikol, uji kadar air

kloramfenikol, dan uji kualitatif

menggunakan reaksi warna.

Uji pertama yang dilakukanadalah uji kelautan kloramfenikol

dimana 100 mg kloramfenikol

dilarutkan dalam 400 bagian air, 2,5

ml etanol dan 0,2 ml metanol.

Didapatkan hasil adalah tidak larut

dalam 400 bagian air, larut dalam 2,5

ml etanol, dan tidak larut dalam 0,2

ml etanol. Ini dikarenakan kekuatan

solvatasi dari pelarut kurang

berpotensi karena volume yang sanga

sedikit untuk melarutkan 100 mg

kloramfenikol.

Uji Selanjutnya adalah

penentuan kadar air dalam

kloramfenikol. Tujuan dari uji kadar

air ini adalah untu mengetahui

berapa banyak air yang masih

tertinggal dalam bahan baku

kloramfenikol. Kadar air yang terlalu

banyak akan mengganggu kualitas

dari bahan baku. Dilakukan dengan

cara ditimbang terlebih dahulu

kloramfenikol yang ingin diuji. Lalu

cawan penguap dikeringkan selama

30 menit dalam desikator pada suhu

105 C lalu setelah itu dimasukkan

kloramfenikol kedalam cawan

ditimbang dan dipanaskan pada suhu

105 C selama 60 menit kemudian

ditimbang kembali cawan dan

kloram yang setelah dikeringkan.

Pengeringan harus dilakukan terus

menerus sampai didapatkan berat

kloramfenikol yang konstan yang

kemudian bisa dihitung kadar airnya.

Digunakan berat konstan karena

berat konstan ini menunjukkan

bahwa air didalam kloramfenikol

sudah sepenuhnya menguap sehingga

bisa dilihat berapa kadar air yang

hilang dari kloramfenikol. Dari

percobaan yang dilakukan

didapatkan kadar air kloramfenikol

yaitu 0,175 %yang menandakan

bahwa kloramfenikol yang diuji


18/23

termasuk kloramfenikol murni yang

memenuhi syarat mengatakan kadar

air dari dari bahan baku

kloramfenikol tidak boleh melebihi

20 %.

Uji selanjutnya adalh uji

kualitatif yaitu uji fujiwara dan uji

nessler. Untuk uji fujiwara dilakukan

dengan cara sampel kloramfenikol

dimasukkan ke dalam tabung reaksi.

Ditambahkan 2 ml reagen fujiwara

dan 1 ml reagen piridin. Lalu

dipanaskan pada suhu 100oC selama

2 menit degan pengocokkan, dan

diamati perubahan warna yang

terjadi . Hasil dari reaksimenggunakan reagen fujiwara adalah

terbentuknya larutan berwarna

merah. Warna merah pada lapisan

piridin menunjukkan adanya

senyawa yang memiliki paling tidak

dua atom halogen yang terikat pada

suatu atom karbon, ini sesuai dengan

rumus senyawa Kloramfenikol yaitu

C11H12Cl12N2O5 yang

menunjukkan adanya ikatan 2 atom.

Untuk uji kualitatif

selanjutnya adalah uji nessler.

Dilakukan dengan cara sampel

dimasukkan ke dalam tabung reaksi,

kemudian ditambahkan pereaksi ke

dalam tabung yang berisi sampel.

Campuran dipanaskan pada suhu

100oC di atas penangas air,

kemudian diperiksa selama 10 menit

sekali apakah terjadi perubahan

warna kemudian amati perubahan

warna yang terjadi. Dihasilkan

larutan cokelat dengan endapan

cokelat jingga. Warna cokelat jingga

dihasilkan dari amida alifatik dan

tioamida. Namun, dalam praktikum

kali ini warna yang dihasilkan adalah

warna kuning bening dan endapan

kehitaman. Ini dikarenakan struktur

dari amida alifatik dan tioamida yang

tertutup oleh konsentrasi pereaksi

nessler yang terlalu tinggi.

Uji selanjutnya adalah uji

kuantitatif penentuan kadar dari baku

kloramfenikol menggunakan

spektrofotometer uv. Kloramfenikol

dapat diuji menggunakan uv karena

klramfenikol mempunyai gugus

kromofor yang dapat menyerap

cahaya pada daerah uv, gugus

kromofor yang pada senyawa

kloramfenikol adalah gugus benzen

(ikatan rangkap terjonjugasi).

Pertama tentukan terlebih dahulu


19/23

panjang gelombang maksimun dari

kloramfenikol dengan cara membuat

larutan kloramfenikol dengan

konsentrasi 10 ppm untuk

menentukan panjang gelombang

maksimum. Panjang gelombang

maksimum ini akan dibuat sebagai

acuan untuk penentuan kadar

kloramfenikol. Dan didapatkan

panjang gelombang maksimum dari

kloramfenikol adalah 279 nm.

Metode yang digunakan pada

penentuan kemurnian adalah metode

kurva kalibrasi, yang mana dibuat

terlebih dahulu deret standar pada

konsentrasi yaitu 8,12, 16, 20, dan 24

ppm kemudian dibuat kurva yang

menunjukan hubungan antara

konsentrasi vs absorbansi.

Persamaan yang didapat adalah

yaitu y = 0,029x-0,036 dan nilai

regresi liniernya 0,64. Nilai regresi

ini merupakan nilai regresi yang

tidak linier, karena nilainya jauh dari

1. Ini dikarenakan konsentrasi yang

tidak tepat, penentuan panjang

gelombang maksimum yang tidak

akurat, dan pelarut etanol yang sudah

terkontaminasi zat lain.

Selanjutnya dilakukan

pembuatan larutan sampel

kloramfenikol dengan menimbang

100 mg kloramfenikol dan dilarutkan

dengan 50 ml etanol. Kemudian

diencerkan hingga didapatkan

konsentrasi sebanyak 20 ppm.

Kemudian diukur absorbansinya

pada panjang gelombang 279 nm.

Hasil absorbansi dimasukkan ke

dalam persamaan dan didapatkan

kadar bahan baku kloramfenikol

adalah 82,86%. Kadar ini tidak

memenuhi standar. Ini dikarenakan

konsentrasi larutan yang kurang

akurat, pelarut yang terkontaminasi

sehingga mengganggu pembacaan

absorbansi sampel.

Selanjutnya uji Penentuan

kadar kloramfenikol dalam bentuk

krim .Pertama adalah menentukan

kurva kalibrasi dengan variasi

konsentrasi, yaitu 5 ppm, 10 ppm, 15

ppm, 20 ppm, dan 25 ppm.

Kemudian ditentukkan


gelombang maksimum yang telah

ditentukan. Dan dihasilkan

persamaan kurva kalibrasi adalah y =

0,0266x + 0,148 dan nilai regresi


20/23

liniernya adalah 0,99667. Nilai ini

merupakan nilai yang mendekati 1,

sehingga persamaan ini merupakan

persamaan yang valid untuk

penentuan kadar dari sampel krim.

Kemudian dengan cara yang sama

dengan penentuan kemurnian pada

bahan baku, hanya saja pelarut yang

digunakan adalah metanol dan

preparasi sampel yang berbeda.

Pertama sampel krim ditimbang dan

dilarutkan dalam 50 mL metanol

kemudian disonikasi.Sonikasi

bertujuan untuk mempercepat

pemisahan partikel dalam sampel,

dengan cara memecah interaksi

antarmolekul sehingga kloramfenikol

dalam basisnya dapat cepat larut.

Setelah disonikasi, add hingga 100

mL dan kemudian saring. itu,

diambil 10 ml dan dilarutkan dalam

50 ml metanol hingga didapatkan

konsntrasi dari zat aktif, yaiu 20

ppm. Pada saat proses penyaringan,

alat gelas yang digunakan haruslah

kering karena jika tidak akan

mempengaruhi konsentrasi dari

aliquot. Didapatkan hasil


gelombang maksimal yang telah

ditentukan. Nilai absorbansi

dimasukkan kedalam persamaan

kurva kalibrasi dan didaptkan kadar

zat aktif kloramfenikol dalam

sediaan krim sebanyak 0,733%.

Kadar ini tidak memenuhi data

teoritis dari zat aktif kloramfenikol

yang seharusnya mempunyai kadar

2% dalam 10 gram sediaan krim.

Hal ini terjadi dikarenakan

kesalahan prosedur pada saat

formulasi sediaan krim. Pada saat

formulasi, sediaan krim mengalami

creaming pada bentuk sediaannya.

Untuk mengtasai ceraming saat

formulasi ditambahkan

TEA(TriEtanolAmine) sebagaisurfaktan agar air dengan foaming

yang terjadi dapat bercampur

sehingga sediaan krim dapat sesuai

dengan teksturnya. Penambahan

surfaktan ini menyebabkan

berkurangnya persentase kadar dari

bahan baku kloramfenikol dalam

sediaan krim dikarenakan

penambahan TEA menyebabkan

penambahan bobot dari krim

sehingga kadar zat aktif

kloramfenikol pun berubah dari yang

seharusnya.


21/23

V. Kesimpulan

1. Uji kualitatif kloramfenikol dapat

dilakukan dengan beberapa metode

diantaranya uji fujiwara, uji

kelarutan, dan uji nessler.

2. Kadar air kloramfenikol sampel

adalah 0,175 %, memenuhi

persyaratan yang mengatakan kadar

air dari dari bahan baku

kloramfenikol tidak boleh melebihi

20 %.

3. Dari penentuan kurva kalibrasi di

dapat R2 = 0,9966, dan didapat

persamaan y = 0,0266 x + 0,148.

Dan dihasilkan kadar bahan baku

kloramfenikol sebesar 0,55782877%.

4. Kadar bahan baku kloramfenikol

dalam sediaan krim adalah 0,733%

dan tidak sesuai dengan teoritis, yaitu

2%.

Daftar Pustaka

Depkes RI.1995.Farmakope

Indonesia ed IV.Jakarta:Depkes RI

Depkes RI.Farmakope Herbal

Indonesia ed 1.Jakarta:Depkes RI

Ditjen POM.2000.Parameter Standar

Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat.Jakarta: Depkes RI

Musnelina,L.,A.F.Afdhal.,A.Gani.,P.

Andayani. ANALISIS

EFEKTIVITAS BIAYA

PENGOBATAN DEMAM

TIFOID ANAK

MENGGUNAKAN

KLORAMFENIKOL DAN

SEFTRIAKSON DI RUMAH

SAKIT FATMAWATI

JAKARTA TAHUN 2001

2002.Makara Kesehatan.Vol

8(2):59-64

Purwanto,A dan

F.Ernawati.2012.METODE

SPEKTROFOTOMETRI UV-

VIS UNTUK PENGUJIAN

KADAR SILIKA DALAM

NATRIUM ZIRKONAT.

PROSIDING SEMINAR

PENELITIAN DAN

PENGELOLAAN

PERANGKAT NUKLIR.vol

1:56-62

Sumardjo,D.2009.Pengantar Kimia:

Buku Panduan Kuliah


22/23

Mahasiswa Kedokteran dan

Program Strata I.Jakarta:EGC

Susanti,M..,Isnaeni.,S.Poedjiarti.200

9. Validasi Metode

Bioautografi untuk

Determinasi

Kloramfenikol.Journal

Kedoketeran Indonesia.vol

1(1):15-24

Underwood,A.L.2002.Analisis

Kimia Kuantitatif.Jakarta:Erlangga


23/23

260110140078_Ayu Apriliani_Modul 7,8,9

Documents