ي ن رو كت ل رالإ ه ج م ل ا ة ي ن ق تElectron Microscopy technique اد / عد ا ق" ئ ا% ش ل ل ا ع ا% ش م ة ي* ن ط ل ا ساتم والدرا و ل ع لم ا شا ق" ا- ي ز ك ر م ل ر ا ت ت خ م ل ا
المجهراإللكتروني تقنيةElectron Microscopy technique
الشائق إعداد / مشاعل - العلوم أقسام المركزي المختبر
الطبية والدراسات
الطرق هذه ذكر إلى نتطرق أن قبلفيما النقاط بعض على التأكيد يجب
اإللكتروني المجهر يخص
العينة المراد رؤيتها ستفحص تحت تفريغ عالىHigh vacuum لذا يجب أن التحتوى العينة على أية نسبة
من الماء حتى ال تعوق مرور تيار األكترونات .
تعتمد فكرة الرؤية على المنظر المتكون على اللوحةالفوتوغرافية التي يمكن تحميضها .
1924
. األجسام ومشاهدة الخلوية التراكيب لفحص الضوء مصدر بدل االلكترونات باستخدام التفكير بدأ مرة ألول
قطبين عن عبارة أنه لمبة أي خالل من نراه الذي الضوء نتخيل عندمااللمبة = فمثال ذاته الضوء هي كهربائية أشعة عن صادر وسالب موجب
عن عبارة النيون األبيض الضوء ذاتاللمبة) + & - ( بينما األبيض اللون ليعطي النيون غاز بينهما يوصلفينتج ) + / - ( بعضهما مع سلكين بتوصيل شبيه األحمر الضوء ذات
معالج غير لكنه الضوء فتعطي شرارة = جدا خاص معدني سلك أستخدم االلتماس هذا في لذلك منه ومستفاد
الكهرباء مرور عند ويلتهب الفولتات من ومقدار العالية الحرارة يتحملمفرغ محيط في خاصة الضوء ثم الحرارة ليعطي فيه
) ليرى ) بااللكترونات يفكر بروجلي دي لويس العالم جعل ما وهذاالدقيقة األجسام
1955
-له العينات تحضير وطرق بسرعة يتقدم الجهاز هذا تطور بدأكبيرة تغيرات ونجم الحيوية التراكيب خبايا من الكثير لنا فكشفت
الحيوية العلوم تاريخ في الخلية ومعرفة والفيروسات واألوليات البكتريا ودراسة فاكتشاف
الكروموسومات ومعرفة والحيوان للنبات أساسية بنائية كوحدةباكتشاف ثم الله بفضل كان الوراثية الصفات نقل في ودورها
وبواسطته االلكترونية وباألخص المجاهر هذه .E.Mوتطويرو الصغيرة الخلوية السيتوبالزمية التراكيب من كثير أكتشف
مضى وقت أي من أكثر الدقيقة النفاذ للمجهر التحضيرات طرق تطوير في االهتمام فترة كانت
المجهر على الستينات نهاية حتى والتطوير العمل واستمرالنفاذ االلكتروني
الماسح استخدام بداية السبعينات أول في وكان
1980
كان تطور المجهر االلكتروني الماسح
1986ماسح الكتروني مجهر (SEM)أفضل
مثل (35JSM)أستخدم
تصنيف المجاهر و أنواعها
L.M
ضوئية E.M
إلكترونية
L.Mضوئية E.Mإلكترونية
1-Transmission Electron Microscopy
2- Scanning Elect Microseopy
3 -Enery Dispersiv X-ray Spectroscop
4 -Field Emission Scanning Electron Microscopy
5- Electron Probe Micro- Analyzer.
1 -Inverted L.M
Compound L.M
2 -Dark field L.M
3 -Phase Contrast Microscop
4 -U.V.M.
5 -Immuno flourecent I.F.L.M.
6 -Descetting L.M attaching
7 -Camera L.M
8 -Cooliscop L.M
(TEM)
(SEM)
(F E.SEM)
(EPMA( =)SEM&EDS)
Simple L.M
Single lenses
االلكتروني المجهر أهمية معرفة على يساعد ممابينه مقارنة عمل
ومن الفيزيائية الناحية من الضوئي المجهر وبينالتركيب ناحية
. المشتركة واألجزاء هذه من كل وأنواع للتصنيف أخرى ومقارنة
المستخدمة المجاهر. تستخدم وفيما
: بين تتراوح الضوئي المجهر عند التكبير قوة1500x , الجودة عالي الضوئي المجهر 25xللمجهر أو البسيط للمجهر
التشريحي
وهيMagnification power )M.P.( × الشيئية العينية ضرب حاصل وتساوي
تعطي أن إلى تصل فلن الضوئي عند التكبير قوة بلغت مهما لذلكداخل واضحة تفاصيل
غيرها و البكتريا مثل الحية الدقيقة الكائنات مع خاصة ومكوناتها الخلية التبيين و التمييز قوة على التكبير قوة وتعتمد التمييز قوة أو التبيين بقوة يعرف ما بسبب Resolution powerوذلك
)R.P.(
إلى الحين ذلك في وصلت النفاذ االلكتروني المجهر عند التكبير قوة عن أمامرة 600,000
مما جزء مائتي من جزء من أقل إلى الصفر من تصل = أجساما يظهر أن فيمكنهأحسن تظهره
قوة عن أضعاف وهي التمييز بقوة يعرف ما بفضل وذلك الضوئية المجاهرالمجهر في التمييز
ضعف ألف = تقريبا وتساوي الضوئي
- ؟: – اإلظهار التبيين قدرة أو التمييز قوة في السر هو ما إذن
التبيين قوة أو التمييز :(Resolving power)أو (Resolution power)قوةتام بوضوح نراهما أن يمكن متقاربين جسمين أصغر بين مسافة أصغر هي
= تماما مفصولينتداخل أي غير من بعضهما عن
كبيرة زيادة االلكتروني المجهر اكتشاف حقق لقدتغلبت حيث الوضوح قوة في
اإلظهار قوة في الضوئية على االلكترونية المجاهرإلى إضافة والتمييز والتبيين
علي يعتمد الذي العالي تمرير .(R.P)التكبير عندخالل االلكتروني الشعاع
) ( لوحة على لنراها العينة فحصه المراد الجسمثم ومن حساسة ضوئي تصوير
بالمجهر متصل كمبيوتر إلى أو أفالم إلى نقلهاااللكتروني
1m = 1000mm 1mm = 1000um
0,1mm = 100um1nm = 10 um 1um = 1000nm
0,1um = 100 nm 1nm = 1000A
و التمييز قوة على = كليا اعتمادا تعتمد التكبير قوةالتبيين
في التكبير قوة الضوئية لذلك العدسات المجاهر على تعتمد) ملموسة) زجاجية عدسات الشيئية
في- التكبير قوة االلكترونية بينما على المجاهر تعتمدملموسة ) ( غير الكترونية عدسات
تصميمها مكان في تحصل وإنما الواقع في موجودة غيرالكهربائي التيار يمر عندما
) االلكتروني ) أو الضوئي في العدسة نوع يحددها ال التبيين قوةالموجي ) الطول يحددها لندا wave length (=)وإنما
)
: الضـوئي يساوي المجهر الذي و الضوء لشعاع الموجي الطول (500 ) = تقريبا نانومتر
(0,5 um) األزرق أو العادي للضوءالضوئي: عند التبيين قوة (um 0,2)مثال
بعض: في البنفسجية فوق األشعة استخدام عند مثالالموجي .U.V.Mالمجاهر الطول فيكون
W.L.=0,3um يكون R.P.=0,1umوكلما وقصر الموجي الطول قل كلما أنه المثالين من نالحظ
أكثر والوضوح التبيين قوة كانت
: االلكتروني وهو المجهر بالنانومتر يقاس الذي و االلكتروني للشعاع الموجي الطول = جدا قصير
الضوئي للمجهر بالنانومتر مقارنة
R.P
105
V=
؟ رؤيته المطلوب للجسم الصورة دقة عليها يعتمد الذي والتبيين التمييز قوة لنعرف االلكتروني للشعاع الموجي الطول كم
موجة أقصر ذو الكتروني شعاع إلطالق المستخدمة الكهربائية الفولتات كم على يعتمد هذا
: التالية بالمعادلة االلكتروني للمجهر االلكتروني للشعاع الموجي الطول ويقاس
لندا ) ( حيث الموجي الطول V للمجهر الداخلة الفولتية
إلطالق الكتروني .(60K.v) فولت 60,000فعند استخدام طول موجته...........؟
نحسب:1,5
V=
تساوي تمييز قوة على (0,05um)أو (0,5nm)نحصل
القيمتين بين الشاسع الفرق نرى الضوئي المجهر مع التبيين قيمة مع القيمة هذه مقارنة وعند
ال فإنه العادي المجهر باستخدام أنه المعروف منتبعدان نقطتين بين التمييز يمكن
نصف عن قطرها يقل بمسافة البعض بعضهما عن. للضوء الموجي الطول
أي لنا يميز ال الضوئي المجهر أن يعني هذاإلى يصل قطريهما بين البعد جسمين
من (250nm)أقل: أخرى بعبارة
تمييزهما يمكن نقطتين بين بعد أصغر إنهو الضوء هذا (250nm)باستخدام
القدرة ليس العادي للمجهر الشيئية العدسة أن أيتقل التي األشياء إظهار على
عن جزيئاتها بين نانومتر 250المسافة
المجهر في التكبير لقوة المحدد العامل أن عرف لذلكهو الضوئي
ذاته للضوء الموجي الطول
حد لها الضوئي للمجهر التبيين وقوة الموجي الطول لذلكمعين
ثابت وهو للضوء الموجي بالطول مرتبطة محددة قيمة ذا
االلكتروني المجهر عليها تغلب السلبية هذهللشعاع الموجي للطول باستغالله
p بدال لإلضاءة كمصدر العالية السرعة ذات االلكترونيالمرئي الضوء من
يعتمد متغير الموجي الطول ذات االلكترونات أن حيثالفولتات قوة على
العدسات خالل االلكترونات إرسال في المستخدمةما عادة ،لذلك االلكترونيةبين يتراوح تيار فولت 60.000يستخدم
المجاهر (180K.V)إلى ( 60K.V)أي بعض وهناكشدته تيار تستخدم
فولت ( 1000K.V)مليون
بين ما التكبير قوة وصلت (600,000X)ووصلت وحتى (1,600,000X)إلى
ما تصل االلكترونية المجاهر لهذه التمييزية والقوة 0,1nm-0,2بين
المجاهر ألقوى التمييز لقدرة ضعف ألف حوالي أيالضوئية.
الذي األجزاء نفس من االلكتروني المجهر ويتركبالمجهر منها يتركب
فتيلة من هو الضوء مصدر في االختالف أن إال العاديالتنجستن
. التيار فيه يمر الذي المهبط وهومحلها فيحل والعينية الشيئية والعدسات المكثفات أما
كهرومغناطيسي ملف من كل. المهبط لشدة مساوية شدته متغير تيار فيه يمر
يتم حتى الفحص بدء قبل الشدة هذه تغيير ويمكنالجسم على االلكترونات بؤرة تركيز
اللوحة على واضحة صورة على والحصول المفحوصالفلورنسية.
المجهر بين الفروق أهم يوضح التالي الجدولالضوئي والمجهر االلكتروني
L.ME.M
إذاp فكرة المجهر اإللكتروني
أنه على الصورة تكوين تعتمدإلرتطام نتيجة يحدث
العينة بسطح اإللكتروناتمتفاوت تشتت ومنها
لإللكترونات.
فإن الضوئي المحهر في أمايرجع الصورة تكوين
للضوء . اإلختياري إلمتصاصغزالة إلى يعود التباين أن أى
الفوتونات من Photonsعددطولها حيث من المختلفة
Differentالموجي wavelengths الشعاع من
للمنظر المكون
اإللكتروني المجهر فكرة pإذا
Electron microscope divided into the following Basic components-:
1 -Illumination system.
2 -Imaging system.
3 -Specimen stage.
4 -Vacuum pump system.
5 -Image recording system.
Basic structure
1 -Illumination system.
1 -Cathode housing.
Electron gun
Cathode )filament(
Anode
2 -Electromag Alignment system
الشعاع مصدر أو اإلضاءة نظامتكوين عن المسؤول اإللكتروني
الصورة:أوال المهبط بيت من الذي Cathodeيتكون
) ويحتوي ) العمود الجهاز أعلى يوجدعلى:-
1 -االلكترونات التي Electron gunمدفعهالفتيل على Filamentتحتوي
المهبط على Cathodeوهي وهوحرف .Vشكل
/ سلك من عادة يصنع الفتيل المهبطااللكترونات تحرير بسهولة يمتاز معدني
تسخينه عند ( سلكها تسخين عند اللمبة مبدأ تذكر
الضوء ( تعطي حيث التنجستن بمعدن خاص وهذا
حرارة درجة يتحمل ( من أكثر إلى مئوية ( 3000تصل درجة قوة هو الحرارة بدرجة يتحكم والذي
. االستخدام عند فيه المار التيار مقدار البيولوجي المجال في pفمثال
المستخدمة الفولتية بين ( 40000 – 12000وحتى K.V 40ما
K.Vفولت( فيها يصل حديثة مجاهر وهناك
. فولت ) ( مليون حتى التيار شدة الفولت
2 -المصعد(wehneltyl cylinder )Anode وهي
مخروطية معدنية قطعةصغير ثقب بها الشكل
قطره مركزها 1mm )فيDia). يمر الثقب هذا خالل من
االلكتروني الشعاع جهد فرق تيار مرور عند
تسخن الفتيل في عاليفتحرر المهبط الفتيلة
ذات االلكترونات فتجذب السالبة الشحنة
الشحنة ذو المصعد نحوالمضادة
الشعاع مصدر أو اإلضاءة نظامتكوين عن المسؤول اإللكتروني
الصورة
-:pثانيا Electromagnetic Alignment system
الكهرومغناطيسي المجال هوفيها يحدث التيار فيها يمر عندما كهربائية ملفات من ويتكون
مغناطيسي مجالمن ويمنعه بالوسط يتمركز االلكتروني الشعاع يجعل
الوسط مسار عن االنحرافThe electron beam can be focused by passing
trough a magnetic field
Lensesنظام تكوين الصورة:-
العدسات :-
يتكون المجهر االلكتروني النفاذ من أربع عدسات إلكترونية تعمل على تكوين الصورة المكبرة
والعدسات هي:
) .Objective lens ) O.L- العدسة المكثفة 1
) .Projector lens ) P.L- العدسة الشيئية 2
) .Intermediate lens ) I.L - العدسة المتوسطة 3
) .Condenser lens )C.L-العدسة العارضة 4
2 -Imaging system.
تصنع كل عدسة من معدن قابل للتمغنط وتتكون من:- - ملف كهربائي :1
وهو عبارة عن سلك ملفوف آالف المرات يشبه األنبوب ويمر فيه تيار كهربائي تصل قوته إلى واحد أمبير
و المجال المغناطيسي الناتج من مرور التيار الكهربائي يركز بواسطة محفظة حديدية ناعمة تحيط بهذه اللفات
بالقطع القطبية وهما: ويساعد في تركيز هذه الحزم االلكترونية قطع من الحديد تعرف - قطعتين إحداهما عليا يمكن تحريكها والسفلى مبرومة في علبة العدسة 2
ويعتمد البعد البؤري للعدسة االلكترونية على قوة التيار الكهربائي الذي يصل لهذه القطع
= يصل البعد البؤري للعدسات ويمكن أن نغير البعد البؤري بتغيير شدة التيار وغالبا (5mm-3) االلكترونية إلى عدة ملليمترات
العدسات مواقع تحديدووظائفها
1 -الفلوروسنتية الشاشة من القريبة العدسة على يطلق المجسمة العارضة projector lens العدسة. الضوئي المجهر في العينية العدسة تقابل التي وهي2 -المتوسطة العدسة Intermediate lensيليها3 -الشيئية العدسة Projector lensثم بالمجهر الشيئية وتشابه منها والقريبة للعينة المباشرة العدسة وهي
الضوئي / الشيئية بالعينية سميت ولذلك4 -المكثفة العدسة = Objective lensوأخيرا المهبط إلى شيء أقرب أي العمود في عدسة أعلى Cathodeوهي من صدورها حين االلكترونية الحزم بجمع العدسة هذه تقوم حيث
) المهبط ) الفتيل . معين ومسار معينة نقطة في االلكتروني الشعاع تكثف
يوجد حاجزان متحركان من البالتين يقعان بين العدسة الشيئية والعدسة المتوسطة ۞ (Aperture)ويعرف الحاجز بـ
ويوجد على هذا الحاجز ثالث فتحات أقطارها على الترتيب:-Apertune 1=25um, Apertune 2=50um & Apertune 3=100um
يستخدم حاجز العدسة الشيئية )العلوي( إليقاف األشعة االلكترونية المائلة والتي تمر من۞خالل العدسة الشيئية، وبذلك يمنع التباين في الصورة النهائية
( contrast diaphragm)لذلك يطلق عليه بعض األحيان حاجز التباين
ويستخدم حاجز العدسة الوسطى )السفلي( إليقاف األشعة االلكترونية المبعثرة ۞ حافة العدسة الشيئية ويسمح باختيار بعض األشعة الالزمة لتوضيح الصورة
(selective diaphragm) ولذلك يطلق عليه الحاجز المنتخب . I.Lوهو يقع في مستوى الصورة المتوسطة األولى فوق العدسة المتوسطة
والعدسة الشيئية مصممة بطريقة تسمح بوضع الجسم المراد فحصه ۞وكذلك حاجز التباين بين قطعتيها القطبيتين
تعريف جهاز التكبير Magnification instrument
التكبير §داة Magnification instrumentجهاز ا عن عبارةوبالذات = جدا الصغيرة العينات وتوضيح تكبير على القدرة لها علميةالمجردة بالعين رؤيتها يستحيل التي العينات تلك
الماسح اإللكتروني المجهر
المجهر اإللكتروني الماسح للمجهر الخطيطي الرسم توضح الصورة
الماسح المجهر في الموجود ذلك العمود يشبة
النافذ ألشعة المنتجة المواد على يحتوي
لمسح والمستعملة فقط اإللكتروناتفحصها المراد العينة
في كما المدفعه في المواد هذة تتمثلالنافذ . المجهر
تعمل التي المكثفة العدسات وجود كذلكاإللكترونات من ضيقة حزمة تكوين على
المسح لبقعة الحقيقي القطر يصل 5nmحوالي
دائرة مع الحارفة الملفات من ومجموعةالعينة يمسح الشعاع جعل في تتسبب
أم تماما مفرغ الماسح المجهر عمودوإمالة أجهزة من وملحقاته العينة مسرح
من العمود قاعدة عند فتوجد العينةالمجهر .
Resolvingقدرة التبيين
من العادي الضوئي المجهر يتكونمن أطقم وثالثة اإلضاءة مصدر
العدسات . المكثفة Condenser) فالعدسة
lens) الضوء تجميع على تعملتكبير بينما المفحوص الشئ على
طريقة عن يكون المفحوص الشئالشيئية العدستين بين التكاتف
والعينية (Objective & eye Piece lens)
موضح . هو كماالنسبة بأنها عنها التكبيريعبر وقوة
الجسم وطول الصورة طول بينالمجاهر , تكبير ويتراوح المفحوص
مابين عادة x1500و x25بأنهاالنقاب كشف على المجهر وقدرةللجسم pجدا الدقيقة التفاصيل عنبقدرة تعرف التي هى المفحوص
مسافة , أصغر بأنها وتعرف التبيينأن يمكن متقاربين جسمين بين
بعضهما عن مفصولين تراهماالبعض .
Resolvingقدرة التبيين
العدسات انواع التحدها هذه التبيين وقدرةالذي . ولكن التكبير في pدورا تلعب التي
موجة طول هو فيها الرئيسي الدور يلعبوكذلك , لإلضاءة pمصدرا المستخدم الضوء
الشيئية . العدسة فتحة العددية القيمة
إستخدام هو المجهر تبيين قدرة ولزيادةقصير موجة طول ذو . ضوء
الماسح اإللكتروني المجهر
فية تستخدم أنة المجاهر من النوع هذا فيلتمسح اإللكترونات من ضيقة حزمة
لألمام تتحرك اإللكترونات أن أى العينةالعينة سطح ماسحة والخلف
اإللكترونات عكس في تتسب العينة كذلكويمكن ثانوية الكترونات عليها يطلق
الصورة إلنتاج إستخدامها
وتجاري واسع نطاق على الماسح المجهر أستخدم هذا وعلىاألبحاث 1965 عمل في بارز دور لة أصبح الوقت ذلك ومنذ م
الماسح . المجهر ويعتبر والصناعية والجيولوجية الحيويةالنافذ لعمل مكمل
الماسح المجهر في التبيين قدرة وتعتمدResolving Power
أشعة نقطة حجمتمسح التي اإللكترونات
العينة
المفحوصة العينة طبيعةتتداخل التي والطريقة
اإللكترونات أشعة فيها
المسح خطوط. سرعة وعددالمتكون الخيال
إلى تصل الماسح في التبيين قدرة بأن العموم وعلى10nm
Tissue Processing
التثبيتFixation العينات Washingغسيل الماء Dehydrationنزع الحرجة بالنقطة Critical Pointالتجفيف
drying التجفيف بعد ما عملياتProcessing Specimens after drying العينات الحوامل على Specimen stubs التحميل
Fixation التثبيت
مرحلتين على يكون األول Primary Fixationالمثبت
الجلوالدهيد Bufferd glutraaldhyd% 3-2بمحلول
لمد الغرفة حرارة درجة ليلة – 3-2عند أو ساعاتالثالجة في كاملة
مادة تثبيت في مهم في glycogen & proteinوهووالخاليا النسيج
Fixation التثبيت
الثانوي Secondary Fixationالمثبت
األوزميوم حمض Bufferd Osmic acid% 1بإستخدام
Osmium tetroxid –OsO4
الغرفة حرارة درجة عندفي مهم وهو
الدهنية- 1 المادة والخاليا Lipidتثبيت النسيج فيالكيمياء- 2 وعينات اإللكتروني المجهر لعينات أولية كصبغة
النسيجية الحزم- 3 وشعاع العينة بين الكهربائي التوصيل عملية من يزيد
زيادة بسبب التباين زيادة إلى يؤدي وذلك اإللكترونيةالكهربائي التوصيل
العامة : التثبيت أهمية
. والتفسخ التفتتت من العينة على الحفاظ بفعل الذاتي التحلل من العينة على الحفاظ
والبكتيريا . اإلنزيمات وتويل والقسوة الصالبة من شئ العينة إعطاء
صلب . إلى السائل النسيج محتوى . اإلنكماش عيوب من النسيج حماية . والكحول المثبتات بين كوسيط يعمل . مصدرة في وحالتة طبيعتة على النسيج بقاء
التثبيت على تؤثر هامة عوامل
العينة أخذ قبل األولي المثبت تركيز ) ( صغيرة تكون العينة حجم مصدرها من العينة نقل سرعة العينة حجم مع تتناسب أن يجب التثبيت مدة التثبيت كمية – – – – ( لون بدون ال أم متاكسد قديم جديد المثبت جودة
أسود – ( أصفر المنظم المحلول نوع الحموضة درجة اإلسموزية
العينات Washingغسيل
بعد خاصة هام أمر وبعدها المثبتات بين العينة غسيلالثاني لفترة , O.Aالمثبت آثارة أو بقاءة حيث
النسيج على يؤثر طويلةتليها التي المادة مع المثبت مكونات تتغاعل قد وكذلكالنسيج مكونات في تغيرات التفاعل هذا عن فينتج
والخلية .: التالية الطرق بأحد الغسيل إلى نحتاج لذلك
dehydrationالتجفيف
العينة من الماء نزع عملية الماء جزيئات من التخلص عملية النسيج H2Oهي من
انواع احد بواسطة وذلك والنباتية الحيوانية والخالياواإليثانول الميثانول فقط الكحوالت
األقل من بالتركيز التدرج بشرط االسيتون مادة بواسطة أولألعلي
ذات للمادة الالحقة للخطوة النسيج تقبل اجل من مهم وهذاالمتصلبة العالية الكثافة
لمادة العينة تعرض وقت زاد كلما التالي الجدول وحسبالصالبة زادت كلما الماء نزع
االنكماش سلبية زادت كلما الماء نزع مدة قلت وكلما
الكحول تركيزالمستخدم
المرات الفترة عدد حلول
30% ETHANOL2X10 MIN
50% ETHANOL2X10 MIN
70% ETHANOL2X10 MIN
90% ETHANOL2X10 MIN
95% ETHANOL2X10 MIN
100% ETHANOL3X10 MIN
الماء نزع لعملية هامة عوامل
من 1. والبداية للكحوالت العينة تعريض الخفيف % 30التدرجمن نبدأ النباتات عينات بعض في بل الحيوانية % 5للعينة
لها% 100وحتى% 10ثم السيتوبالزم مكونات ان حيثقد التدرج عدم وكذلك الخلية خدران عن لالنفصال القابلية
للخلية والتشوة الإلنكماش الى يؤديبالترتيب- 2. االلتزام التتابعالماء 3. مع تحضيرة يتم الذي الكحوالت احد على االستقرار
المقطر.4) العينة ) نوع علي تعتمد والفترة الوقت
وقت ←الخاليا أقل. ) - - وقت ) اكثر قاسية طرية كبيرة االنسجة
بالمجهر العينات تحضير عند أخذه الواجب اإلحتياطات بعض هناكاإللكتروني
حجم العينةكبيرة تكون ال أن
التثبيت في أطول زمنالسوائل نزع صعوبة
تنظيف العينةالمحاليل في بغمرها وذلك
مناسبة التثبيتفسيولوجيةمباشرة التثبيت تتم أن البد
تنظيفها بعد
مجموعة من المسطبة الخاصة بحمل العينات النعدة للفحص بالمجهر اإللكتروني الماسح