HBsAg- ის თვისობრივი ტესტისა და B ჰეპატიტის ვირუსის PCR -ის კორელაციის დადგენა
Post on 28-Jan-2016
188 Views
Preview:
DESCRIPTION
Transcript
HBsAg- ის თვისობრივი ტესტისა და B ჰეპატიტის
ვირუსის PCR- ის კორელაციის დადგენა
ვარდენ ჯიჯიაშვილიIV კურსი
გამოყენებითი ბიომეცნიერება და ბიოტექნოლოგიები
ხელმძღვანელი - პროფ. თენგიზ ცერცვაძე
ხელმძღვანელი (თსუ-დან) - ასოც. პროფ. ნინო გაჩეჩილაძე
თბილისი, 2013 წ
განსახილველითემები
B ჰეპატიტის ეპიდემიოლოგია დაავადებები ადამიანში ვირუსის სტრუქტურა ლაბორატორიული დიაგნოსტიკის მეთოდები HBsAg-ს ანტისხეულების იმუნოფერმენტული განსაზღვრა პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის მეთოდი (Real time-PCR) მეთოდების შედარება დასკვნა
B ჰეპატიტი აღმოჩენილია მე-19 საუკუნეში
დღესდღეობით ფართოდაა გავრცელებული
ხშირად გვხვდება ქრონიკული ხასიათის
Hepadna – hepa-ღვიძლი; dna-დნმ
ეპიდემიოლოგია
მწვავე და ქრონიკული B ჰეპატიტის გავრცელება
ქრონიკული B ჰეპატიტის ხვედრითი წილი ვირუსული 2008-2010 ჰეპატიტებით ავადობაში წლებში
21%
15%
7%
4%3%
50%
ქრ B A ჰპტარადიფ. ჰპტ მწ. Bმწ. C ქრ C
ქრონიკული B ჰეპატიტითდაავადებულთა 2008-ასაკობრივი სტრუქტურა საქართველოში
2010 წლების მონაცემებით
1 წლამდე 1-4 წელი 4-14 წელი 15-19 წელი 20-29 წელი 30-59 წელი 60 . წ და მეტი0
50
100
150
200
250
300
350
ავადობის მაჩვენებელი
100 000 მოსახლე
ქრონიკული B ჰეპატიტით ავადობის დინამიკასაქართველოში
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 20110
5
10
15
20
25
30
35
40
ავადობის მაჩვენებელი
ავადობის მაჩვენებელი
443 600 მოსახლე
ქრონიკული B ჰეპატიტის ტერიტორიული განაწილება 2008-2010 საქართველოში წლების მონაცემებით
თბილ
ისი
კახე
თი
იმერ
ეთი
-
სამე
გრელ
ოზე
მოსვ
ანეთ
ი
აჭარ
ა
შიდა ქა
რთლი
ქვემ
ოქა
რთლი
გურია
-
სამც
ხეჯა
ვახე
თი
-
მცხე
თა მთია
ნეთი
-
რაჭა ლ
ეჩხუ
მი0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
788
178
1542
416
929
165 132 11751 12 7
1080
407
700
466376
314
500
143208
12551
შემთხვევათა რაოდენობა (1000)მოსახლეობა
პათოლოგიები
ჰეპატოციტების
ინფიცირება
იმუნური სისტემის
რეაგირება
მეორადი ვირუსემია
ვირუსის სტრუქტურადაავადება
სისტ. კომპ.
განსაზღვრება
B ჰეპატიტი
HBV B ჰეპატიდის ვირუსი
HBsAg ზედაპირული ანტიგენი
HBeAg კაფსიდის ცილა
HBcAg გულგულის ანტიგენი
Anti-HBs ანტისხეული (s ანტიგენის მიმართ)
anti-HBe ანტისხეული (e)
anti-HBc ანტისხეული (c)
Anti- IgM HBc
IgM- ანტისხეული (c)
HBs- უზრუნველყოფს ადსორbციას
HBe- რეპლიკაციის მარკერი
HBc- დეინის ნაწილაკის შუაგულშია
დიაგნოსტიკა
Rapid
Elisa
Roche Elecs
ys
ბლოტინგ
ი
Real Time PCR
სადიაგნოსტიკო მეთოდები იყოფა სკრინინგულ და დამადასტურებელ მეთოდებად
მეთოდები ერთმანეთისაგან განსხვავდებიან სპეციფიურობით და მგრძნობელობით
იმუნოფერმენტული მეთოდიიმუნოფერმენტული მეთოდი
გამოიყენება საკვლელვ ნიმუშში კონკრეტული ანტისხეულის ან ანტიგენის აღმოსაჩენად
HBV-ს დასადგენად ყველაზე ხშირად იკვლევენ HBsAg
Mmyarfaziani ifa, imunofluorescencia
Roche Elecsys
ავტომატიზირებული სისტემა
დაანგარიშებული შედეგებიმოქნილი ფუნქციებისპეციფიურობა-98.8%მგრძნობელობა-98.5%
აქტუალობადიაგნოსტიკაში
ძირითადად გამოიყენება იმუნოფერმენტული მეთოდი
მკურნალობის პერიოდში ვირუსის საკონტროლოდ მიმართავენ Real-Time PCR მეთოდს
Real-Time PCR
Real Time PCR მონაცემებს გვაძლევს გრაფიკის სახით
მისი სპეციფიურობა და მგრძნობელობა 99.9%-ია
უზრუნველყოფს დნმ-ის სამიზნე ფრაგმენტის ამპლიფიკაციას
შესაძლებელია ინფექციური აგენტის გამოვლენა
Real-Time PCR
პრინციპი ემყარება ტემპერატურულ რეჟიმებსთითოეული ციკლის შემდეგ დნმ-ის ფრაგმენტი
ორმაგდებაწარმოქმნილი ამპლიკონები წარმოადგენენ
მატრიცებს
ტესტების მგრძნობელობა
ტესტის დასახელება
მგრძნობელობა სპეციფიურობა
იმუნოქრომატოგრაფია (სწრაფი ტესტები)
85-90% 88-92%
იმუნოფერმენტული ანალიზი
(თხევადფაზიანი, მყარფაზიანი)
90-95% 92-97%
იმუნოფლუორესცენცია
95-98% 95-99%
პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია
99, 9999% 99,9999%
კვლკევის მიზანი
ჩვენი კვლევის მიზანი იყო:შეგვეფასებინა სხვადასხვა ტესტ სისტემების
ეფექტურობა B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში გამოგვევლინა ყველაზე მაღალსპეციფიური
და მაღალმგრძნობიარე მეთოდი B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში პჯრ-თან მიმართებაში.
გამოყენებული მასალა დამეთოდები
მასალა21 ადამიანის
სისხლიპჯრ საშუალებით
14-ს დაუდასტურდა
Rapid HBsAg
Intec EIA HBsAg
Abbott Axsym
Abbott Architect
მიღებული შედეგები
იმუნოქრომატოგრაფიული მეთოდით (rapid) დეტექტირებული იქნა 9 პაციენტში, 5-ში ცრუ უარყოფითი
თხევადფაზიანი იფა-თი 12 პაციენტში მყარფაზიანი იფა-თი და
იმუნოფლუორესცენციით 13 პაციენტშიიმ პაციენტის შემთხვევაში რომელშიც
დადებითი ვერ მივიღეთ, პჭრ-ის შედეგმაც ძალზედ მცირე ვირუსის რაოდენობა ჩვენა
შედეგები
შედეგები
დასკვნები
პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია წარმოადგენს ვირუსის სისხლში არსებობა/არარსებობის და მისი ციკლის კონტროლირების ყველაზე საიმედო ტესტს,
პჯრ შემდგომ პირველობა სადიაგნოსტიკო ტესტ სისტემებში საიმედოობის, მაღალმგრძნობელობის, მაღალსპეციფიურობის მხრივ ეკუთვნის იმუნოფლუორესცენტულ კვლევას და მიკრონაწილაკოვან, მყარფაზიან იფა-ს,
ჩვეულებრივი, თხევადფაზიანი იფა წარმოადგენს, მართალია ყველაზე პოპულარულ, გამოყენებად და ხელმისაწვდომ მეთოდს ლაბორატორიულ დიაგნოსტიკურ საშუალებებს შორის, მაგრამ მისი საიმედოობა მხოლოდ 80-90%,
დასკვნები
ხოლო სწრაფი მარტივი იმუნოქრომატოგრაფიული ტესტ სისტემები შეიძლება გამოყენებული იქნან მხოლოდ საველე პირობებში, სადაც სხვა აპარატურასთან წვდომა არ არის, ვინაიდან მათი საიმედოობა მხოლოდ 70-80%, რაც არასაკმარისია სწორი დიაგნოზირებისათვის, მაგრამ ისეთ პირობებში, სადაც შეუძლებელია ლაბორატორიული აპარატურით სარგებლობა ( მაგ. დროებით სამხედრო ჰოსპიტალებში საომარი ოპერაციების დროს) ისინი ქმნიან კარგ ალტერნატივას, ვინაიდან არ საჭიროებენ არანაირ
დამატებით აპარატურას და ხსნარებს.
გმადობთ ყურადთებისათვის!
top related