HBsAg- ის თვისობრივი ტესტისა და B ჰეპატიტის ვირუსის PCR -ის კორელაციის დადგენა

HBsAg- ის თვისობრივი ტესტისა და B ჰეპატიტის

ვირუსის PCR- ის კორელაციის დადგენა

ვარდენ ჯიჯიაშვილიIV კურსი

გამოყენებითი ბიომეცნიერება და ბიოტექნოლოგიები

ხელმძღვანელი - პროფ. თენგიზ ცერცვაძე

ხელმძღვანელი (თსუ-დან) - ასოც. პროფ. ნინო გაჩეჩილაძე

თბილისი, 2013 წ

განსახილველითემები

B ჰეპატიტის ეპიდემიოლოგია დაავადებები ადამიანში ვირუსის სტრუქტურა ლაბორატორიული დიაგნოსტიკის მეთოდები  HBsAg-ს ანტისხეულების იმუნოფერმენტული განსაზღვრა პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის მეთოდი (Real time-PCR) მეთოდების შედარება დასკვნა

B ჰეპატიტი აღმოჩენილია მე-19 საუკუნეში

დღესდღეობით ფართოდაა გავრცელებული

ხშირად გვხვდება ქრონიკული ხასიათის

Hepadna – hepa-ღვიძლი; dna-დნმ

ეპიდემიოლოგია

მწვავე და ქრონიკული B ჰეპატიტის გავრცელება

ქრონიკული B ჰეპატიტის ხვედრითი წილი ვირუსული 2008-2010 ჰეპატიტებით ავადობაში წლებში

21%

15%

7%

4%3%

50%

ქრ B A ჰპტარადიფ. ჰპტ მწ. Bმწ. C ქრ C

ქრონიკული B ჰეპატიტითდაავადებულთა 2008-ასაკობრივი სტრუქტურა საქართველოში

2010 წლების მონაცემებით

1 წლამდე 1-4 წელი 4-14 წელი 15-19 წელი 20-29 წელი 30-59 წელი 60 . წ და მეტი0

50

100

150

200

250

300

350

ავადობის მაჩვენებელი

100 000 მოსახლე

ქრონიკული B ჰეპატიტით ავადობის დინამიკასაქართველოში

2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 20110

5

10

15

20

25

30

35

40

ავადობის მაჩვენებელი

ავადობის მაჩვენებელი

443 600 მოსახლე

ქრონიკული B ჰეპატიტის ტერიტორიული განაწილება 2008-2010 საქართველოში წლების მონაცემებით

თბილ

ისი

კახე

თი

იმერ

ეთი

-

სამე

გრელ

ოზე

მოსვ

ანეთ

ი

აჭარ

ა

შიდა ქა

რთლი

ქვემ

ოქა

რთლი

გურია

-

სამც

ხეჯა

ვახე

თი

-

მცხე

თა მთია

ნეთი

-

რაჭა ლ

ეჩხუ

მი0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

1800

788

178

1542

416

929

165 132 11751 12 7

1080

407

700

466376

314

500

143208

12551

შემთხვევათა რაოდენობა (1000)მოსახლეობა

პათოლოგიები

ჰეპატოციტების

ინფიცირება

იმუნური სისტემის

რეაგირება

მეორადი ვირუსემია

ვირუსის სტრუქტურადაავადება

სისტ. კომპ.

განსაზღვრება

B ჰეპატიტი

HBV B ჰეპატიდის ვირუსი

HBsAg ზედაპირული ანტიგენი

HBeAg კაფსიდის ცილა

HBcAg გულგულის ანტიგენი

Anti-HBs ანტისხეული (s ანტიგენის მიმართ)

anti-HBe ანტისხეული (e)

anti-HBc ანტისხეული (c)

Anti- IgM HBc

IgM- ანტისხეული (c)

HBs- უზრუნველყოფს ადსორbციას

HBe- რეპლიკაციის მარკერი

HBc- დეინის ნაწილაკის შუაგულშია

დიაგნოსტიკა

Rapid

Elisa

Roche Elecs

ys

ბლოტინგ

ი

Real Time PCR

სადიაგნოსტიკო მეთოდები იყოფა სკრინინგულ და დამადასტურებელ მეთოდებად

მეთოდები ერთმანეთისაგან განსხვავდებიან სპეციფიურობით და მგრძნობელობით

იმუნოფერმენტული მეთოდიიმუნოფერმენტული მეთოდი

გამოიყენება საკვლელვ ნიმუშში კონკრეტული ანტისხეულის ან ანტიგენის აღმოსაჩენად

HBV-ს დასადგენად ყველაზე ხშირად იკვლევენ HBsAg

Mmyarfaziani ifa, imunofluorescencia

Roche Elecsys

ავტომატიზირებული სისტემა

დაანგარიშებული შედეგებიმოქნილი ფუნქციებისპეციფიურობა-98.8%მგრძნობელობა-98.5%

აქტუალობადიაგნოსტიკაში

ძირითადად გამოიყენება იმუნოფერმენტული მეთოდი

მკურნალობის პერიოდში ვირუსის საკონტროლოდ მიმართავენ Real-Time PCR მეთოდს

Real-Time PCR

Real Time PCR მონაცემებს გვაძლევს გრაფიკის სახით

მისი სპეციფიურობა და მგრძნობელობა 99.9%-ია

უზრუნველყოფს დნმ-ის სამიზნე ფრაგმენტის ამპლიფიკაციას

შესაძლებელია ინფექციური აგენტის გამოვლენა

Real-Time PCR

პრინციპი ემყარება ტემპერატურულ რეჟიმებსთითოეული ციკლის შემდეგ დნმ-ის ფრაგმენტი

ორმაგდებაწარმოქმნილი ამპლიკონები წარმოადგენენ

მატრიცებს

ტესტების მგრძნობელობა

ტესტის დასახელება

მგრძნობელობა სპეციფიურობა

იმუნოქრომატოგრაფია (სწრაფი ტესტები)

85-90% 88-92%

იმუნოფერმენტული ანალიზი

(თხევადფაზიანი, მყარფაზიანი)

90-95% 92-97%

იმუნოფლუორესცენცია

95-98% 95-99%

პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია

99, 9999% 99,9999%

კვლკევის მიზანი

ჩვენი კვლევის მიზანი იყო:შეგვეფასებინა სხვადასხვა ტესტ სისტემების

ეფექტურობა B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში გამოგვევლინა ყველაზე მაღალსპეციფიური

და მაღალმგრძნობიარე მეთოდი B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში პჯრ-თან მიმართებაში.

გამოყენებული მასალა დამეთოდები

მასალა21 ადამიანის

სისხლიპჯრ საშუალებით

14-ს დაუდასტურდა

Rapid HBsAg

Intec EIA HBsAg

Abbott Axsym

Abbott Architect

მიღებული შედეგები

იმუნოქრომატოგრაფიული მეთოდით (rapid) დეტექტირებული იქნა 9 პაციენტში, 5-ში ცრუ უარყოფითი

თხევადფაზიანი იფა-თი 12 პაციენტში მყარფაზიანი იფა-თი და

იმუნოფლუორესცენციით 13 პაციენტშიიმ პაციენტის შემთხვევაში რომელშიც

დადებითი ვერ მივიღეთ, პჭრ-ის შედეგმაც ძალზედ მცირე ვირუსის რაოდენობა ჩვენა

შედეგები

შედეგები

დასკვნები

პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია წარმოადგენს ვირუსის სისხლში არსებობა/არარსებობის და მისი ციკლის კონტროლირების ყველაზე საიმედო ტესტს,

პჯრ შემდგომ პირველობა სადიაგნოსტიკო ტესტ სისტემებში საიმედოობის, მაღალმგრძნობელობის, მაღალსპეციფიურობის მხრივ ეკუთვნის იმუნოფლუორესცენტულ კვლევას და მიკრონაწილაკოვან, მყარფაზიან იფა-ს,

ჩვეულებრივი, თხევადფაზიანი იფა წარმოადგენს, მართალია ყველაზე პოპულარულ, გამოყენებად და ხელმისაწვდომ მეთოდს ლაბორატორიულ დიაგნოსტიკურ საშუალებებს შორის, მაგრამ მისი საიმედოობა მხოლოდ 80-90%,

დასკვნები

ხოლო სწრაფი მარტივი იმუნოქრომატოგრაფიული ტესტ სისტემები შეიძლება გამოყენებული იქნან მხოლოდ საველე პირობებში, სადაც სხვა აპარატურასთან წვდომა არ არის, ვინაიდან მათი საიმედოობა მხოლოდ 70-80%, რაც არასაკმარისია სწორი დიაგნოზირებისათვის, მაგრამ ისეთ პირობებში, სადაც შეუძლებელია ლაბორატორიული აპარატურით სარგებლობა ( მაგ. დროებით სამხედრო ჰოსპიტალებში საომარი ოპერაციების დროს) ისინი ქმნიან კარგ ალტერნატივას, ვინაიდან არ საჭიროებენ არანაირ

დამატებით აპარატურას და ხსნარებს.

გმადობთ ყურადთებისათვის!