WINLAB Manual

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Practicario del UVWinLab

El UVWinLab es una programa que se ejecuta con una computadora personal PC, que sirve para controlar las operaciones básicas del espectrofotómetro uv/vis serie Lambda 10 y 20 de Perkin-Elmer. Se asume que la persona que opere dicho

sistema ya está familiarizada con programas en Windows y con el mouse. El Manual del Programa UVWinLab da una descripción mas detallada de las

funciones utilizadas en cada práctica. Material

Se va a utilizar acetona, polvo de gis y los colorantes Fuchsina Básica y Orange G. Los detalles se mencionan en cada práctica.

Como iniciar

Se debe de encender la computadora personal y el espectrofotómetro. En la pantalla aparecen varios íconos, se debe de hacer doble clic en el que dice Lambda y el programa se iniciara, a continuación se muestra como.

Dentro del programa aparecerá esta pantalla

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Scan (Barrido)

Se usa para establecer los parámetros que controlan el barrido del espectro. Se puede entrar haciendo click en su ícono y también con la opción de Scan que está en el menú Application.

Para aprender a usar este método se va a hacer una práctica con acetona. Se debe de preparar una solución de acetona diluida en agua con la proporción de 1:200.

Lo primero que se debe de hacer al abrir el método de Scan es llenar los datos de la página Scan tal y como se muestra a continuación.

A continuación se hace click en la etiqueta Inst. que se encuentra en la parte baja de la pantalla. También se pone lo mismo que se muestran a continuación.

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Por último se hace click en la etiqueta de Sample y se le da un nombre a la muestra.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos están correctos se hace click en File y se elige la opción de Save as para darle el nombre de acetona al método. Después se oprime

Setup para que la computadora actualice la información y cuando está listo el instrumento para trabajar el botón de Start cambia a color verde. Se oprime Start y se espera a que aparezca la siguiente leyenda.

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Se coloca el blanco (en este caso agua) en el portaceldas del espectrofotómetro

y se hace clic en Aceptar. Al acabar de leer el blanco el instrumento pide que se inserte la muestra, en este caso la solución de acetona.

Se hace clic en Aceptar y aparece en la pantalla una gráfica de longitud de onda (nm) vs. Absorbancia.

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Para arreglar fácilmente la escala de la gráfica del espectro, se hace clic en el

ícono de Radar y aparece una pantalla mas pequeña en donde se debe de marcar con la ayuda del mouse el área que se desea observar del espectro.

En el método de Scan también se puede hacer el barrido de varias muestras al

mismo tiempo, lo único que se tiene que hacer es darle el numero de muestras

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en la página de Sample que anteriormente usamos. Esto se tiene que hacer antes de que empiece a trabajar el instrumento. A continuación se muestra el

espectro de la acetona a diferentes concentraciones 1:100, 1:200 y 1:400.

Para encontrar los picos de máxima absorción se debe de hacer click en el icono

Find peaks y oprimir en el botón de OK, esto se hace para cada espectro.

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Una vez encontrados los picos se le puede agregar un texto haciendo clic en el icono de Text.

Finalmente queda así el espectro y está listo para imprimirse con la opción de Print que se encuentra en el menú de File.

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También es muy importante guardar tanto los resultados como el método creado

esto se hace con la opción de Save as que está en el menú de File. Time Drive (manejo del tiempo)

Se usa para establecer los parámetros que controlan las mediciones que se hacen en un periodo de tiempo. Se puede entrar también con la opción de Time Drive que está en el menú Application.

Para esta práctica vamos a utilizar una solución de gis en polvo disuelto en 10 ml de agua. Se agita la solución y se llena una celda para su medición.

En la página de Timed. se deben de establecer las mismas condiciones que se muestran abajo.

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A continuación se hace click en la etiqueta de Inst. y se establece lo siguiente.

A continuación haciendo click en la etiqueta de Sample se debe establecer el

nombre de la muestra y del archivo en donde se quedaran almacenados los resultados.

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Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos están correctos se hace click en File y se elige la opción de Save as para darle el nombre de “gis” al método. Después se oprime Setup para que la computadora actualice la información y cuando está listo el instrumento para trabajar el botón de Start cambia a color verde. Se oprime Start y se siguen las instrucciones que da el programa primero insertando en el portaceldas el Blanco y después la muestra. En esta práctica es importante agitar bien la muestra antes de que el instrumento la empiece a medir. Al terminar aparece en la pantalla una gráfica como la siguiente y para calcular la pendiente de la gráfica se hace clic en Data calculator que esta en el menú Data handing.

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Esta pantalla aparece cuando se selecciona en Dataset el archivo con el que estamos trabajando que es gis.td. También en Algorithm se debe de escoger la

opción de Slope al igual que en Function.

Se tiene que dar el rango de la escala para calcular la pendiente y se puede hacer fácilmente haciendo click en el icono del cursor y llevando el puntero del mouse a la gráfica y haciendo click en donde se crea conveniente; al terminar se oprime OK. Finalmente se hace clic en Calculate.

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Inmediatamente el programa calcula la pendiente y da el resultado numéricamente como a continuación se muestra.

Wave Prog (programación de longitudes de onda).

Se usa para establecer los parámetros que controlan las mediciones a varias longitudes de onda. Se puede entrar también con la opción de Wave Prog que está en el menú Application.

Para esta práctica se van a usar dos colorantes Fuchsina Básica (rosa) y Orange G (amarillo). Se pesa aprox. 1 mg de cada muestra y se disuelve en 20 ml de agua. De la solución madre se toma una alícuota de 3 ml y se disuelve nuevamente en 17 ml de agua, con esta solución se trabaja. Se puede hacer un barrido de los colorantes en Scan para ver los picos de máxima Absorción, obteniendo una gráfica como la siguiente.

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En el método de Wave Prog vamos a analizar una mezcla de los dos colorantes anteriores y vamos a medir la Absorbacia en las dos longitudes de onda en que

tienen su pico máximo; en este caso 478.3 y 543.5. En la página de Wavep se deben de establecer las mismas condiciones que se muestran abajo.

A continuación se hace click en la etiqueta de Inst. y se establece lo siguiente.

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A continuación haciendo clic en la etiqueta de Sample se debe establecer el nombre de la muestra y del archivo en donde se quedarán almacenados los resultados.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos están correctos se hace click en File y se elige la opción de Save as para darle el nombre de “mezcla” al

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método. Después se oprime Setup para que la computadora actualice la información y cuando está listo el instrumento para trabajar el botón de Start

cambia a color verde. Se oprime Start y se siguen las instrucciones que da el programa, primero insertando en el portaceldas el Blanco y después la Muestra

Finalmente en la pantalla aparece una tabla con los resultados de la medición.

Conc (concentraciones) Se usa para establecer los parámetros que controlan la medición de concentraciones. Se puede entrar también con la opción de Conc que está en el menú Application.

Para esta práctica vamos a utilizar el colorante Orange G (amarillo) y se van a preparar varias disoluciones a diferentes concentraciones. Se pesa 1 mg de Orange G y se disuelve en 20 ml de agua. De la solución madre se toma una alícuota de 1, 3, 5 y 7 ml y se disuelven cada uno en 10 ml de agua, con estas soluciones se va a trabajar. Se puede hacer un barrido de las muestras en Scan para ver los picos de máxima Absorción, obteniendo una gráfica como la siguiente.

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En la página de Conc se deben de establecer las mismas condiciones que se muestran abajo.

A continuación se hace click en la etiqueta de Inst. y se establece lo siguiente.

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En la página de Refs. se debe de dar toda la información de las muestras que

preparamos, porque estas se van a usar para construir una curva de calibración que nos va a servir para determinar la concentración de una muestra problema. La siguiente imagen muestra exactamente como se deben de establecer los

datos para esta práctica.

A continuación haciendo click en la etiqueta de Sample se debe establecer el nombre de la muestra problema y del archivo en donde se quedarán

almacenados los resultados.

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En la página de Output se recomienda únicamente seleccionar la opción de

Autosave.

Ya que se tiene la seguridad de que todos los datos están correctos se hace click en File y se elige la opción de Save as para darle el nombre de “amari” al

método. Después se oprime Setup para que la computadora actualice la información y cuando está listo el instrumento para trabajar el botón de Start cambia a color verde.

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Se oprime Start y se siguen las instrucciones que da el programa insertando en el portaceldas el Blanco. Después se pide que se inserten las muestras para la

curva, es muy importante que lleven el mismo orden que se estableció en la página de Refs.

Cuando el instrumento termina de leer todas las muestras aparece en la pantalla de la computadora una gráfica de calibración como la siguiente.

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También se despliega una tabla en donde se comparan los valores exactos de Absorbancia y Concentración. En la tabla se incluye la ecuación de la línea que satisface estos puntos y también el coeficiente de correlación.

Después de estos resultados el programa da varias opciones para mejorar la curva de calibración creada y aparece un recuadro en donde se puede volver a analizar una muestra con Reanalyze, añadir una nueva con Add ó borrar una

existente con Delete. También es posible cambiar el tipo de curva seleccionada con Change Calibr. Function para mejorar el coeficiente de correlación. Una vez que se esta satisfecho con la curva de calibración se oprime Analyse

Sample para que el instrumento analice la muestra problema. A continuación se muestra el resultado de este análisis.

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Este método se puede utilizar posteriormente sólo para analizar muestras

problema, lo que se tiene que hacer es guardar la curva de calibración haciendo click en Use existing calibration que esta en la página de Refs.

Como Salir del Programa

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Para salir del programa UV WINLAB hacer clic en FILE y elegir EXIT. Aparecerá una pantalla donde nos pregunta si queremos almacenar resultados, gráficos y métodos

obtenidos en la sesión que deseamos finalizar. Se hace clic en SAVE ALL si queremos guardar todo lo establecido y obtenido durante la sesión de trabajo. Si sólo se desea guardar algunos métodos, resultados o gráficas se hace clic en SAVE

SELECTED y elegir la información que deseamos almacenar.

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INDICE:

Pág

Repaso de cómo iniciar la sesión en Windows ................................................ 1

Scan (Barrido) ................................................................................................... 2

Time Drive (Manejo del tiempo) ...................................................................... 8

Wave Prog (Programación de longitudes de onda)…………………………... 12

Conc (Concentraciones)……………………………………………………… 15

Como salir del programa ……………………………………………………. 21