7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
1/38
Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfsme dan
D Tingkat Vitamin dasar sebagai Prediktor Antiviral
Respon kronis Hepatitis C
Kekurangan vitamin D tampaknya untuk memprediksi pencapaian berhasil darivirus berkelanjutan
response ( SVR ) setelah pengobatan antivirus pada virus hepatitis C ( HCV ) sulit to treat geno
jenis ! "engikat protein Vitamin D ( #C ) polimor$sme gen yang diketahuimempengaruhi vita
min tingkat D ! %enelitian ini dilakukan untuk menilai apakah interaksi antarabasal
beredar vitamin D dan polimor$sme #C memainkan peran dalam mempengaruhitingkat
tanggapan antivirus pada pasien yang terkena hepatitis C kronis Secarakeseluruhan& ' pasien HCV
diobati dengan terapi kombinasi pegylated ( %*# ) inter+eron plus ribavirin yangret
rospectively dievaluasi ! #C rs, -. #
/
0 & #C rs-122 C
/
3 & dan 45 '26 rs.'7,72 C
/
0
polimor$sme genotyped ! 8rekuensi #C rs, -. #
/
0 dan rs-122 C
/
Sebuah poli
morphisms adalah 9 # : #
1
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
2/38
- ( ;.&. < ) & # : 0
1
. ( -2&1 < ) & 0 : 0
1
-' ( ' &- < ) dan C : C
1
. 2 ( 1'&- < ) & C : 3
1
2- ( - &2 < ) & 3 : 3
1
.- ( &2 < ) ! %asien dibagi menjadi mereka memba=a
ing
; alel utama ( =ildtype > ?0 @
.
9 # C:# C & # C:0 C & # C:# 3 & A
1
. ) dan
tersisa ( ?0
'
9 # C:0 3 & 0 3:0 C & 0 3:0 3 & 0 C:0 C & A
1
. ) ! *mpat kelompok yang
diidenti$kasi 9 vitamin D
' ng : m5 dan ?0
'
& Vitamin D
' dan ?0
.
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
3/38
& Vitamin D
/
'
dan ?0
'
& Vitamin D
/
' dan ?0
.
! Dalam sulit untuk mengobati HCV genotipe proporsi
pasien mencapai SVR secara signi$kan meningkat dengan tren linear daripertama sampai
Kelompok terakhir 9 :'1 ( '-& < ) & 7:'- ( ;,&1 < ) & .': '7 ( -.&- < ) & .7:'7( 1&1 < ) (
%
1
& ; ) ! di
analisis multivariat & memiliki basal vitamin D
/
' ng : m5 ditambah pengangkutan #C ?0
.
ditemukan menjadi prediktor independen SVR ( rasio odds -&1' &
%
1
& .1 ) !
kesimpulan
sion
9 Dalam genotipe HCV yang sulit diobati & pretreatment simultan serum yang
normal vita
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
4/38
min D tingkat dan pengangkutan #C globulin ?0 iso+orm sangat memprediksi
pencapaian SVR setelah %*# inter+eron plus terapi antiviral ribavirin !
( H
*%30B5B#
' .' 1 9. -. . 1 )
A
e= virus hepatitis C langsung (HCV) protease
inhibitor (boceprevir dan telaprevir) memiliki
baru ini telah diperkenalkan untuk digunakan dalam
kombinasi dengan pegylated (%*#) inter+eron dan
ribavirin dalam pengobatan hepatitis C kronis
.&'
0erapi antivirus tiga dikaitkan dengan signi$kan
Kenaikan tidak bisa di respon virus berkelanjutan (SVR) di
pasien yang terin+eksi HCV genotipe .! Aamun demikian&
kebutuhan inter+eron kepekaan& yang sering rendah
tolerabilitas& dan terjadinya beberapa obat to
interaksi obat mungkin akan membatasi penggunaan ini
molekul untuk populasi yang dipilih!
;
Bleh karena itu& membayar
prediktor pretreatment mampu SVR standar
0erapi akan berguna untuk memilih nai
E
ve pasien dalam
siapa e+ek samping dan biaya terapi tiga bisa
dihindari tanpa mengurangi tingkat SVR
prestasi!
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
5/38
6eberapa prediktor keberhasilan pengobatan kronis
hepatitis C telah diidenti$kasi!
-&1
8aktor +aktor yang berhubungan dengan
virus tampaknya hati hati ditandai9 in+eksi
oleh genotipe HCV ' ; menganugerahkan %BSS4 jauh lebih besar
bility dari pengobatan yang berhasil daripada in+eksi oleh geno
tipe . dan - prediktor lainnya adalah virus HCV basal
beban dan variabilitas genetik HCV ! tuan prediktor
yang diklasi$kasikan ke dalam genetik dan nongenetik ! antara
yang terakhir & yang lebih tinggi dari peradangan hati dan
$brosis dan serum yang lebih rendah nilai kolesterol muncul
memiliki peran utama !
-&
Di antara yang pertama&
penentu genetik utama clearance HCV telah
diidenti$kasi dalam interleukin '26 ( 45 '26 ) polimor$sme
phisms !
,&2
ang memiliki rs.'7,72 45 '26 C : C ge
notype menganugerahkan keuntungan yang lebih besar untuk clearance HCV
dengan terapi standar daripada pengangkutan satu atau dua
3lel 0 !
,
Konsentrasi serum vitamin D sudah sangat
baru baru ini diusulkan sebagai prediktor novel HCV yang jelas
3nce ! %ada pasien dengan genotipe . hepatitis kronis
C & di ba=ah standar %*# inter+eron plus ribavirin
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
6/38
pengobatan & serum basal vitamin '1 hidroksilasi D
Konsentrasi ditemukan menjadi independen pra
dictor dari pemberantasan virus !
7
Selain itu & basal yang normal
nilai vitamin D dikaitkan dengan lebih baik antivi
respon terhadap terapi ral daripada kehadiran vitamin
Kekurangan D pada pasien dengan sama 45 '26 geno
ketik !
.
3khirnya & suplemen vitamin D adalah asosiasi
diasosiasikan dengan tingkat peningkatan SVR pada pasien dengan
#enotipe HCV . hepatitis kronis !
..
6erdasarkan sev
laporan terbaru eral &
.'
vitamin D tampaknya memiliki
e+ek kekebalan modulator penting yang mungkin
menjelaskan pengamatan ini !
6eberapa +aktor yang terlibat dalam mengatur vitamin
D tingkat dan aktivitas !
.;
#C globulin adalah serum utama
vitamin D mengikat protein itu adalah polimor$k dan
dicirikan oleh populasi Kaukasia besar variabel
kemampuan pada dua lokus ( rs, -. dan rs-122 ) ! kereta
dari alel minor telah dikaitkan dengan penurunan C4R
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
7/38
culating kadar vitamin D !
.-
%engaruh ini
polimor$sme pada tingkat vitamin D pada pasien dengan
hepatitis C kronis dan pada tingkat antivirus
respon terhadap terapi standar untuk in+eksi ini memiliki
pernah diselidiki !
%enelitian ini dilakukan untuk menilai apakah
interaksi antara basal beredar vitamin D dan
polimor$sme transporter nya ( D sumbu vitamin )
memainkan peran dalam mempengaruhi tingkat antivirus
respon pada pasien yang terkena hepatitis C kronis
%asien dan "etode
%asien !
%opulasi penelitian termasuk total
' berturut turut & pengobatan nai
E
ve hepatitis C Kaukasia
pasien yang retrospekti+ dievaluasi ! semua
pasien menerima pengobatan antivirus pada salah satu dari tiga
pusat pusat akademik di 4talia utara ( Hati "edis
0ransplantasi Fnit Fniversity o+ Fdine > A
G
,. & ;-&1 < @ & Departemen #astroenterologi dari
Fniversitas Verona > A
G
22 & -'&, < @ & dan
Departemen Clinical and * perimental "edicine &
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
8/38
Fniversity o+ %iemonte Brientale di Aovara > ( A
G
-, &
''&2 < @ ) dari September ' 1 sampai Bktober ' 7!
4n+eksi hepatitis C kronis dide$nisikan oleh pres
ence antibodi C virus antihepatitis & HCV serum
RA3 positi+ & dan elevasi persisten dari alanin
aminotrans+erase ( 350 ) selama minimal bulan ! Di samping
tion & .-' pasien telah memiliki biopsi hati dilakukan
dalam bulan sebelum dimulainya antivirus
terapi! Kriteria eksklusi adalah 9 hati dekompensasi
sirosis ( skor Child %ugh
/
) & kehadiran H*%3
karsinoma tocellular ( HCC ) & koin+eksi H4V & H6V
koin+eksi & penyakit hati autoimun & hati genetik dis
kemudahan ( yaitu & penyakit ?ilson & hemochromatosis ) & concom
penggunaan itant obat yang dikenal untuk mempengaruhi serum vitamin D
konsentrasi & dan penggunaan narkoba suntikan akti+ ! itu
karakteristik klinis dan demogra$s utama
populasi yang diteliti dilaporkan dalam 0abel . ! %enelitian
dilakukan sesuai dengan prinsip prinsip Dec
laration dari Helsinki dan disetujui oleh rumah sakit
4nstitutional Revie= 6oard dan Komite *tik ! semua
pasien menandatangani in+ormed consent tertulis kepada par
berperan serta dalam penelitian! Variabel berikut adalah
direkam sebelum pengobatan 9 umur& jenis kelamin & berat badan &
tinggi dan indeks massa tubuh ( 6"4 ) & dihitung berdasarkan
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
9/38
dasar berat badan dalam kilogram dan tinggi dalam
meter ! 3supan alkohol dievaluasi dengan pertanyaan
naire dan diukur dalam gram per hari ! semalam
puasa sampel darah diambil untuk menentukan basis
tes darah line& termasuk RA3 HCV kuanti$kasi &
menggunakan real time polymerase chain reaction ( %CR ) ( 0aI
"an& Roche & 6asel & S=iss ) & dan genotipe HCV &
dideteksi dengan menggunakan kit 4nno5ipa genotip ( 4nnoge
netics & J=ijndrecht & 6elgia ) ! Secara keseluruhan& ..7 sehat
donor darah digunakan sebagai kontrol ! "ereka adalah ,;
laki laki ( .&; < ) dengan rata rata berusia 1 tahun (kisaran
'1 1 ) dan dengan 6"4 rata rata '- (kisaran .2 ;; )
kg : m
'
! 0idak ada perbedaan signi$kan yang diamati antara
pasien dan kontrol gender (
%
G
& 2- ) & usia (
%
G
&7-- ) & atau 6"4 (
%
G
!..' ) !
Vitamin D 3ssay !
Sampel darah untuk pretreatment
' pasien dan standar 2 jam puasa darah
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
10/38
sampel untuk ..7 kontrol dikumpulkan & dipisahkan &
dan disimpan di
2
C sampai digunakan ! Fntuk mengukur '1 BH
kadar serum vitamin D vitamin DiaSorin '1 BH
D chemoluminescent immunoassay pada 5iaison auto
analy er matic ( DiaSorin & Still=ater & "A ) digunakan !
6iologi "olekuler !
#enotip untuk 45 '26
rs.'7,72 C : 0 & untuk #C rs, -. 0 : # ( 3sp-;'#lu ) &
dan #C rs-122 C : 3 ( 0hr-; 5ys ) polimor$sme
dilakukan oleh %CR berbasis +ragmen restriksi
panjang uji polimor$sme ! #enomic DA3
diekstraksi dari sampel darah seluruh dengan cara
"ini darah L43amp DA3 kit ( Liagen & "ilan & 4talia )
sesuai dengan instruksi dari pabriknya ! Fntuk 45
'26 rs.'7,72 C : 0 produk .-1 basepair ( bp ) adalah
diperoleh dengan primer maju 1
#CC0#0C#0
#03C0#33CC3 ;
dan primer mundur 1
3##C0C3###0C330C3C3# ;
! Fntuk #C rs, -.
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
11/38
0 : # dan #C rs-122 C : 3 polimor$sme .'1 bp
amplikon diperoleh dengan 1
0##00000C3
#3C0##C3#3 ;
maju dan 1
##3##0#3#
00030##33C3#C ;
reverse primer ! semua %CR
ampli$kasi dilakukan dalam total volume
.
l
5! Sampel yang mengandung . ng DA3 genom
menjadi sasaran - siklus denaturasi ( 71
C untuk
; detik ) & anil (
C selama ; detik ) & dan perpanjangan
( ,'
C selama ; detik ) menggunakan 0echne 0C 1 termal
pengendara sepeda ! Dalam volume total '
l
5 & DA3 diampli$kasi
( .
l
5 ) yang dicerna semalam dengan ' unit pembatasan
7/25/2019 Vitamin D Binding Protein Gene Polimorfisme Dan
12/38
endonuklease tion menggunakan buMer dan suhu
direkomendasikan oleh produsen ! Hpy. 44 pembatasan
tion endonuklease digunakan untuk 45 '26 rs.'7,72 C :
0 & Hae444 untuk #C rs , -. 0 : # & dan 6tg4 untuk #C
rs-122 C : 3 polimor$sme ( semua endonuklease dari
Ae= *ngland 6iolabs & Hitchin & FK ) ! %embatasan
+ragmen yang .;1
N
. bp untuk alel C dan
. 1
N
;
N
. bp untuk alel 0 dari 45 '26
rs.'7,72 & .'1 bp untuk alel 0 dan 27
N
; untuk
# alel rs, -. #C & .'1 bp untuk alel 3
dan ,.
N
1- bp untuk alel C dari rs-122 #C ! itu
+ragmen diselesaikan dengan elektro+oresis pada ;&1