30/12/2010 1 Hematologia Marcos K. Fleury Laboratório de Hemoglobinas Faculdade de Farmácia - UFRJ [email protected]• Coleta com anticoagulante adequado. • Identificação do paciente. • Rotulagem prévia dos frascos de coleta. • Posição do paciente –sentado ou deitado. • Imobilização correta de crianças. • Uso de luvas durante a coleta. 1. Coleta de sangue φ Fleury Fleury
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Hematologia
Marcos K. FleuryLaboratório de HemoglobinasFaculdade de Farmácia - UFRJ
• Um macrófago fagocita um determinado antígeno e processa-o. O determinante antigênico liga-se a uma proteína e é apresentado à superfície do macrófago;
• O determinante antigênico é reconhecido linfócitos T auxiliares;
• O clone de linfócitos B é ativado e sofre multiplicação;
• Os linfócitos B diferenciam-se em plasmócitos (produzem anticorpos) e em células de memória (atuam na segunda resposta imunitária);
• Os anticorpos interagem com o antígeno e levam à sua destruição;
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Imunidade celular
• Os determinantes antigênicos são reconhecidos pelos linfócitos T auxiliares;
• Os linfócitos T auxiliares diferenciam-se em linfócitos T citotóxicos e linfócitos T de memória. Liberam mediadores químicos que estimulam a fagocitose, a produção de interferon e a produção de anticorpos pelos linfócitos B;
• Os linfócitos T citotóxicos ligam-se às células estranhas e libertam perforina (proteína que provoca a lise celular);
• Os linfócitos T de memória desencadeiam uma resposta mais rápida e vigorosa num segundo contato com o mesmo antígeno.
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Ag 1ª Exposição
Macrófagos
Células apresentadorasde antígeno
Linfócitos THelper
Linfócitos B Linfócitos Tcitotóxicos
Plasmócitos
Anticorpos
Células Bde memória
Linfócitos TCitotóxicos
ativos
Ativação
direta
Ag presentes em células
Infectadas ativam diretamente
Ag 2ª Exposição
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Técnicas Básicasφφ
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plasma
hemácias
X cm
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Hematologia Básica
Técnicas básicas• Hematócrito – fração ocupada pelos eritrócitos em
uma coluna de sangue centrifugado expresso como
fração decimal volume/volume.
Hematócrito - Representa o percentual de células vermelhas na amostra de sangue.VN: 39 a 48%
É determinado por meio de centrifugação a uma velocidade de 10.000 a 15.000 g por 5 minutos de um capilar preenchido com sangue.
Pode ser usado sangue com EDTA ou heparina.
Pode apresentar uma variação de 2 a 3% em relação aos equipamentos automatizados.
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
• Hemoglobina – medida por colorimetria sendo expressa como uma fração decimal massa/volume.
A dosagem é feita pela dissolução de um volume de sangue em diluente que lisa as hemácias produzindo uma solução de hemoglobina. VN: 13,0 a 16,0 g/dl
A dosagem é feita por densidade ótica (ou absorvância) em 540 nm.
O método recomendado pelo ICSH é o da cianometehemoglobina.
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Hematologia BásicaTécnicas básicas
• Contagem de eritrócitos – Contados automaticamente permite uma estimativa do volume globular correlacionando-a ao hematócrito. Expressa como número de células por unidade de volume.
• Realizada em contadores automatizados pelo método de impedância.VN: 4,30 a 5,60 x 1012/l
Os equipamentos contam de 20.000 a 50.000 células melhorando a reprodutibilidade.
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
• Contagem de leucócitos – contados em câmara (hemocitômetro) ou automaticamente. Expressos em número de células por unidade de volume.
VN – 5 a 9 x 109/l
Na contagem manual é difícil distingui-los dos eritroblastos.
Amostras leucopênicas devem ser contadas manualmente.
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
• Contagem manual de leucócitos.
N = no de células contadas nos 4 quadrantes.D = diluição empregada (1:20)V = volume total contado.
Se 200 células forem contadas:
200 x (10 x 20) /4 = 10.000 /mm3
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
• Contagem de plaquetas – Contadas por microscopia ótica ou automaticamente são expressas como número de células por unidade de volume.
VN de 150 a 450 x 109/l
As técnicas manuais incluem metodologias usando sangue total ou plasma rico em plaquetas sedimentado ou centrifugado.
O tamanho das plaquetas pode interferir nas contagens.
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
Índices hematimétricos - calculados a partir dos dados relativos a série vermelha
• Volume globular médio (VGM) - VN: 80 a 96 fL.
VGM (fL) = Ht (%) x 10Hm (milhões/µl)
• Hemoglobina globular média (HGM) – VN: 27 a 32 pg
HGM (pg) = Hb (g/dl) x 10Hm (milhões/µl)
• Concentração de Hemoglobina globular média (CHGM) – VN: 31 a 35%
CHGM (g/dl ou %) = Hb (g/dl) x 100Ht (%)
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
• Contagem de reticulócitos – Podem ser contados manualmente ou por métodos automatizados.
Os métodos manuais carecem de reprodutibilidade devido ao pequeno número de células contadas.
As metodologias automatizadas podem classificar os reticulócitos de acordo com o grau de maturação da célula além de calcular os índices hematimétricos.
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Hematologia Básica
Técnicas básicas
• Contagem diferencial de leucócitos – é a especificação dos tipos leucocitários expressa em percentagem.
O ICSH preconiza a expressão dos resultados em valores absolutos.
Distribuição desigual dos leucócitos na lâmina.
Neutrófilos – final da lâmina.Monócitos - nas bordas ao longo de toda a lâmina.Blastos e células imaturas – concentram-se nos bordos.
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Alterações dos Leucócitos.Alterações dos Leucócitos.
Eosinofilia ( > 700 cels. /mm3)
• Alergias - asma brônquica, urticária e dermatite herpetiforme.
• Infestações parasitárias - esquistossomose e a estrongiloidíase.