UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS INSTITUTO SUPERIOR DE POSTGRADOS ESCUELA DE MEDICINA POSTGRADO DE PATOLOGIA CLINICA / MEDICINA DE LABORATORIO Estabilidad de TP, TTP e INR en muestras de sangre total y plasma citrato, en diversas condiciones de almacenamiento y tiempo de procesamiento, en pacientes con insuficiencia renal crónica en hemodiálisis, con tratamiento anticoagulante y pacientes clínicamente sanos. Informe final de investigación presentado como requisito para optar por el Título de Especialista en Patología Clínica-Medicina de Laboratorio Autora: Dra. Asanza Morales.Gabriela del Rocío Tutor : Dr. Francisco Barrera. Quito, Diciembre 2016
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR …€¦ · de la muestra, en pacientes con ERC en tratamiento dialítico, pacientes anticoagulados y pacientes clínicamente sanos. Material y métodos.
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
INSTITUTO SUPERIOR DE POSTGRADOS
ESCUELA DE MEDICINA
POSTGRADO DE PATOLOGIA CLINICA / MEDICINA DE LABORATORIO
Estabilidad de TP, TTP e INR en muestras de sangre total y plasma
citrato, en diversas condiciones de almacenamiento y tiempo de
procesamiento, en pacientes con insuficiencia renal crónica en
hemodiálisis, con tratamiento anticoagulante y pacientes clínicamente
sanos.
Informe final de investigación presentado como requisito para optar por el
Título de Especialista en Patología Clínica-Medicina de Laboratorio
Autora: Dra. Asanza Morales.Gabriela del Rocío
Tutor : Dr. Francisco Barrera.
Quito, Diciembre 2016
II
DEDICATORIA
A mi madre, por su ejemplo de generosidad y compasión, pese a todas las
adversidades, no dejó de confiar en mi.
A mi hijo, Rodrigo por su paciencia, apoyo y confianza.
Gracias
III
RECONOCIMIENTO
La realización del presente trabajo fue posible al apoyo y asesoramiento de
mis profesores, Doctor Kléver Sáenz y Doctor Francisco Barrera.
“Estabilidad de TP, TTP e INR en muestras de sangre total y plasma citrato, en diversas condiciones de almacenamiento y tiempo de procesamiento, en pacientes con insuficiencia renal crónica en
hemodiálisis, con tratamiento anticoagulante y pacientes clínicamente sanos.”
Autora: Dra. Gabriela del Rocío Asanza Morales
Tutores: Dr. Juan Francisco Barrera Guarderas
Dr. Washintong Paz
RESUMEN
El procesamiento de las muestras para tiempos de coagulación, tiene que llevar un estricto control (tiempo y almacenamiento) dado la sensibilidad de la prueba. Sin embargo cuando el transporte de la muestra se retrasa y tiene que ser preservada como laboratorio se debe garantizar la veracidad de los resultados. Objetivo: Establecer las diferencias en las concentraciones del TP, TTP e INR, en muestras de sangre total y plasma citrato, si varía la condición de almacenamiento y tiempo de procesamiento de la muestra, en pacientes con ERC en tratamiento dialítico, pacientes anticoagulados y pacientes clínicamente sanos. Material y métodos. Se utilizó un diseño factorial mixto de bloques. Se incluyeron 3 grupos de pacientes todos adultos y de ambos sexos. Se extrajo, un tubo de sangre con citrato de sodio por paciente. Las muestras fueron procesadas en el coagulómetro CS 2100 sysmex. De cada muestra se guardó una alícuota y se preservó a temperatura ambiente, el resto de la muestra fue centrifugada y refrigerada. Las muestras fueron procesadas a las 6, 18 y 24 horas. Para análisis estadístico se usó el programa SPSS v18. Resultados: Previo al cálculo se excluyeron los valores aberrantes ―outliers‖. En el análisis existen diferencias estadísticamente significativas (p<0.05) en TP a las 6-18 y 24 horas, el TTP a las 18h e INR a las 18 y 24h de los pacientes sanos. Los pacientes con enfermedad renal crónica que presentaron p<0.05 fue en TP e INR 6 y 18 horas. Los pacientes anticoagulados presentaron diferencia en TP, TTP e INR a las 18horas (p<0.05). Sin embargo, el análisis Deltacheck, cumple criterios de aceptabilidad para la toma de decisión clínica, excepto en los pacientes con anticoagulantes. Conclusión: La estabilidad de la muestra no presenta cambios clínicamente relevantes, si es preservada a temperatura ambiente (22°C) y temperatura de refrigeración (4±2°C).
“Stability of TP, TTP and INR in samples of total blood and citrate plasma, in different conditions of storage and time of processing, in patients with
chronic renal insufficiency in hemodialysis, with anticoagulant treatment and clinically healthy clients.”
Author: Dra. Gabriela del Rocio Asanza Morales Tutors: Dr. Juan Francisco Barrera Guarderas
Dr Washington Paz
ABSTRACT.
The processing of samples for coagulation times has to maintain a strict control (time and storage) due to sensitivity of the test. However, when transportation of the sample delays and has to be stored, the laboratory must guarantee accuracy of the results. Objetive: Establish differences in concentrations of storage condition and processing time of the sample in patients with IRC in dialysis treatment, anticoagulated patients and clinically healthy patients. Material and methods: a mixed factorial design of blocks was used. Three groups of patients were included, adults and both genders. A tube of blood with sodium citrate per patient was extracted. The samples were processed in the coagulometer CS 2100 sysmex. An aliquot from every sample was kept and stored at room temperature, the rest of the sample was centrifuged and cooled. The samples were processed in 6, 18, and 24 hours. The program SPSS v18 was used for the statistical analysis. Results: Prior to calculations, outliers were excluded. There are statically significant differences in the analysis (p<0.05) en TP at 6-18 and 24 hours, TPP at 18 hours and INR at 18 and 24 hours in healthy patients. Patients with chronic renal disease present p<0.05 in TP and INR 6 and 18 hours. Anticoagulated patients presented differences in TP, TTP and INR at 18 hours (p<0.05). However, the Deltacheck analysis, complies criteria of acceptability for clinic decision making, expect in patients with anticoagulants. Conclusion: Stability of the sample does not present clinically
relevant changes if it is stored at room temperature (22 C) and cool temperature (4+/-2 C) Key words: TP, TTPa, INR, STABILITY, TOTAL BLOOD, CITRATE PLASMA.
El Centro Educacional de Idiomas y Especializaciones Administrativas CENDIA C.A, acuerdo ministerial número 3904, certifica, mediante firma del traductor y sello de la institución, haber realizado la traducción del presente documento.
INTRODUCCIÓN.
Al considerar la diversidad de criterios, en cuanto al manejo y conservación
de las muestras, para la realización de tiempos de coagulación y ante la
escasa información respecto al comportamiento de las variables en muestras
preservadas, este trabajo valorará el efecto del tiempo 6 - 18 y 24 horas pos
toma, sobre los tiempos de coagulación, bajo condiciones de manejo de
muestras sanguíneas diferentes a las recomendadas (temperatura y
condición de almacenamiento), y se definirá si la estabilidad (resultados) se
alteran, aplicando a tres grupos de pacientes, clínicamente sanos, otros con
enfermedad renal crónica en hemodiálisis y pacientes en tratamiento con
anticoagulantes independientemente de su patología.
De acuerdo a las recomendaciones del Clinical and Laboratory Standards
Institute (CLSI) norma H21-A5 , las muestras para Tiempo De Protrombina
(TP) tienen que ser procesadas dentro de las primeras 24 horas pos toma y
para Tiempo Parcial De Tromboplastina Activada (TTP) se procesará,
máximo 4 horas posteriores a su toma a temperatura de 25 ° C.(1) Sin
embargo, no existen recomendaciones si fuese necesario almacenar la
muestra a temperatura de refrigeración.
Dado la relevancia clínica que tienen los estudios de coagulación, en el
diagnóstico y seguimiento de ciertas patologías hematológicas, se ha
enfocado este estudio en cómo influenciaría en el resultado de los
parámetros de coagulación TP, TTP e INR si se modifican: la temperatura de
almacenamiento, y tiempo de procesamiento; al resultado obtenido se aplicó
variabilidad biológica intra e interindividual mediante la herramienta de
calidad en laboratorios DeltaCheck.
2
Este estudio se lo realizará bajo estrictas normas de calidad, en un
laboratorio especializado de referencia a nivel nacional, NETLAB S.A.
ubicado en Quito, cuenta con la garantía de Certificación ISO 9001: 2008,
ISO 15189, está acreditado por Accreditation Canada (ISQua).
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura ambiente
(< 25 oC).
Las diferencias promedio entre las diferentes mediciones de muestras
almacenadas por parámetro y grupo de estudio se muestran en las Tablas V
a VII
Tabla V Diferencias promedio TP, TTP e INR en diferentes condiciones de almacenamiento y tiempo de resguardo. Pacientes Clínicamente Sanos.
TP difX±SD IC 95% diferencia
P
TP1H –TP 6H* 0.053±0.10 0.01 a 0.09 < 0.05
TP1H-TP18H* TP1H-TP24H**
-0.33±0.13 -0.39 a -0.28 < 0.05
-0.15±0.11 -0.20 a - 0.11 < 0.05
29
Tabla V Continuación
TTP difX±SD IC 95% diferencia
P
TTP1H–TTP6H* -0.17±0.79 -0.48 a 0.13 > 0.05
TTP1H-TTP18H* -0.80±0.72 -1.08 a -0.51 < 0.05
TTP1H-TTP24H** -0.20±1.33 -0.72 a 0.31 > 0.05
INR difX±SD IC 95% diferencia
P
INR1H–INR6H* 0.002±0.01 -0.001 a 0.007 > 0.05
INR1H-INR18H* 0.01±0.003 -0.04 a -0.29 < 0.05
INR1H-INR24H** 0.01±0.002 -0.023 a -0.011 < 0.05
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura
ambiente (< 25 oC).
Tabla VI Diferencias promedio TP, TTP e INR en diferentes condiciones de almacenamiento y tiempo de resguardo. Pacientes ERC - hemodiálisis.
TP
difX±SD
IC 95% diferencia
P
TP1H –TP 6H* 0.31±0.27 0.20 a 0.42 < 0.05
TP1H-TP18H* TP1H-TP24H**
-0.26±0.34 -0.40 a -0.12 < 0.05
-0.12±0.32 -0.25 a 0.005 > 0.05
TTP difX±SD IC 95% diferencia
P
TTP1H–TTP6H* 1.71±7.97 -1.44 a 4.86 > 0.05
TTP1H-TTP18H* 0.48±4.84 -1.42 a 2.40 > 0.05
TTP1H-TTP24H** 2.57±6.81 -0.12 a 5.26 > 0.05
INR difX±SD IC 95% diferencia
P
INR1H–INR6H* 0.03±0.03 0.02 a 0.04 < 0.05
INR1H-INR18H* -0.02±0.03 -0.04 a -0.01 < 0.05
INR1H-INR24H** -0.01±0.03 -0.02 a 0.001 > 0.05
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura
ambiente (< 25 oC)
30
Tabla VII Diferencias promedio TP, TTP e INR en diferentes condiciones de almacenamiento y tiempo de resguardo. Pacientes anticoagulados
TP difX±SD IC 95% diferencia
P
TP1H –TP 6H* -0.02±0.66 -0.29 a 0.24 > 0.05
TP1H-TP18H* TP1H-TP24H**
-0.98±1.75 -1.69 a -0.27 < 0.05
0.11±0.92 -0.25 a 0.49 > 0.05
TTP difX±SD IC 95% diferencia
P
TTP1H–TTP6H* -0.17±1.57 -0.81 a 0.46 > 0.05
TTP1H-TTP18H* -1.88±2.35 -2.83 a -0.93 < 0.05
TTP1H-TTP24H** -0.64±2.52 -1.66 a 0.37 > 0.05
INR difX±SD IC 95% diferencia
P
INR1H–INR6H* -0.002±0.07 -0.03 a 0.02 > 0.05
INR1H-INR18H* -0.14±0.19 -0.22 a -0.07 < 0.05
INR1H-INR24H** -0.03±0.09 -0.07 a 0.003 > 0.05
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura
ambiente (< 25 oC)
El análisis del comportamiento de las diferencias porcentuales entre las
diferentes mediciones de muestras almacenadas por parámetro y grupo de
estudio se muestran en las Tablas VIII a X.
(Estas tablas de cumplimiento, comparan, los valores promedio de variación
y su intervalo de confianza frente al criterio.)
Tabla VIII Diferencias porcentuales (mediana) TP, TTP e INR en diferentes condiciones de almacenamiento y tiempo de resguardo. Pacientes Clínicamente Sanos.
TP %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (16.1%)
TP1H –TP 6H* 0 -2.58 a 0.909 Cumple
TP1H-TP18H* TP1H-TP24H**
3.1 0.9 a 5 Cumple
1.68 - 0.9 a 2.8 Cumple
31
Tabla VIII Continuación
TTP %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (15.1%)
TTP1H–TTP6H* 0.5 -4,7 a 6.23 Cumple
TTP1H-TTP18H* 1.7 -1.8 a 7.1 Cumple
TTP1H-TTP24H** 1.2 -6,4 a 10 Cumple
INR %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (16.1%)
INR1H–INR6H* 0 -2.6 a 1.7 Cumple
INR1H-INR18H* 3.3 0 a 6,6 Cumple
INR1H-INR24H** 1.7 -0.8 a 4.1 Cumple
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura
ambiente (< 25 oC).
Tabla IX Diferencias porcentuales (mediana) TP, TTP e INR en diferentes condiciones de almacenamiento y tiempo de resguardo. Pacientes ERC - hemodiálisis.
TP %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (16.1%)
TP1H –TP 6H* -2.6 -6.7 a 1.8 Cumple
TP1H-TP18H* TP1H-TP24H**
1.2 -3.3 a 9.7 Cumple
0.4 -4.2 a 7.2 Cumple
TTP %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (15.1%)
TTP1H–TTP6H* -6.9 -27.1 a 10.9 Cumple
TTP1H-TTP18H* -0.5 -27.6 a 27.6 Cumple
TTP1H-TTP24H** -8.7 -39.3 a 3.0 No Cumple
INR %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (16.1%)
INR1H–INR6H* -2.9 -7.0 a 1.8 Cumple
INR1H-INR18H* 1.2 -3.4 a 10.7 Cumple
INR1H-INR24H** 0 -4.2 a 6.3 Cumple
32
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura
ambiente (< 25 oC).
Tabla X. Diferencias porcentuales (mediana) TP, TTP e INR en diferentes condiciones de almacenamiento y tiempo de resguardo. Pacientes en tratamiento anticoagulante.
TP %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (16.1%)
TP1H –TP 6H* 0 -6 a 6.4 Cumple
TP1H-TP18H* TP1H-TP24H**
4.0 -4.4 a 27.2 No Cumple
0 -7.2 a 7.1 Cumple
TTP %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (15.1%)
TTP1H–TTP6H* 0.1 -7.8 a 7.7 Cumple
TTP1H-TTP18H* 3.7 -4.5 a 18.1 No Cumple
TTP1H-TTP24H** 0.7 -9.6 a 19.1 No Cumple
INR %
diferencia
(mediana)
P2.5 – p97.5% Estado Delta Crítico (16.1%)
INR1H–INR6H* 0 -6.1 a 7.0 Cumple
INR1H-INR18H* 6.0 -2.3 a 31.7 No Cumple
INR1H-INR24H** 1.3 -5.3 a 9.7 Cumple
* Muestras mantenidas en refrigeración (2-8 oC)/** Muestra mantenida temperatura
ambiente (< 25 oC).
Los porcentajes de adecuación a criterio clínico de variación biológica
aceptable (Delta Crítico), se muestra en los siguientes gráficos.
33
Gráfico II
Gráfico III
100 100 100
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . T P 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S S A N O S
OK OUT
100 100 100
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . T T P 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S
S A N O S
OK OUT
34
Gráfico IV
Gráfico V
100 100 100
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . I N R 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S
S A N O S .
OK OUT
100 100 100
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . T P 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S C O N
E R C E N H E M O D I Á L I S I S
OK OUT
35
Gráfico VI
Gráfico VII
100 100
80
20
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . T T P 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S C O N
E R C E N H E M O D I Á L I S I S
OK OUT
100 100 100
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . I N R 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S C O N
E R C E N H E M O D I Á L I S I S
OK OUT
36
Gráfico VIII
Gráfico IX
100 96 100
4
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . T P 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S
A N T I C O A G U L A D O S
OK OUT
100 92 96
8 4
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . T T P 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S
A N T I C O A G U L A D O S
OK OUT
37
Gráfico X
100 92
100
8
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
6 horas 18 horas 24 horas
E S T A D O D E A D E C U A C I Ó N ( O K ) A C R I T E R I O S D E D E L T A C R Í T I C O . I N R 6 * , 1 8 * Y 2 4 * * H O R A S . P A C I E N T E S
A N T I C O A G U L A D O S
OK OUT
38
Si bien, la variación promedio está dentro de criterio de delta crítico, un 10%
(out) de muestras variaron más que el mismo.
4.1 Discusión
En el presente estudio, se analizó el impacto de modificar la temperatura de
almacenamiento, y tiempo de procesamiento en muestras de sangre total y
de plasma citrato, en 3 grupos de pacientes.
Los resultados de este estudio muestran que, en el grupo de pacientes
sanos, después de realizar una t de diferencia de promedios, con un intervalo
de confianza del 95% el TTP a las 6 y 24 horas e INR a las 6 horas, no
presentan cambios estadísticamente significativos (p>0.05). Sin embargo en
el TP 6, 18 y 24 horas, TTP a las 18 horas y el INR de las 18 y 24 horas hubo
cambios estadísticamente significativos (p<0.05). No obstante, al realizar la
diferencia porcentual y determinar el estado del delta crítico (tabla VIII) se
concluye que cumplen criterios de aceptabilidad para la interpretación de
resultados, en otras palabras el resultado entregado no cambiará la
interpretación clínica del mismo. Esto se corrobora con el estudio realizado
por Rao LV. 2000 (3), donde la recomendación es que, en plasma o sangre
entera se pueden aceptar las muestras para TP hasta 24 horas y TTP hasta
12 horas pos toma para su procesamiento, y el transporte se lo puede
realizar a temperatura ambiente o a 4°C.
Al estudiar el grupo de pacientes con enfermedad Renal Crónica en
hemodiálisis las diferencias de promedios obtenidas con un intervalo de
confianza de 95% se observa que existen diferencias estadísticamente
significativas (p<0.05) en el TP e INR a las 6 y 18h, en los otros parámetros
no existen diferencias estadísticamente significativas (p>0.05). Pero al
determinar el delta crítico, únicamente el TTP procesado a las 24 horas no
39
cumple con criterios de aceptabilidad y su resultado si modificará la decisión
clínica frente al paciente. En el estudio de Adcock 1998 (26) , se analizaron
cuatro grupos de pacientes (sanos, hospitalizados, anticoagulados con
heparina y pacientes en tratamiento con anticoagulantes orales), sus
muestras fueron sometidas a cuatro condiciones: se centrifugó
inmediatamente y se almacenaron las muestras a temperatura ambiente (20-
22 °C), se centrifugaron inmediatamente las muestras y se almacenaron en
hielo (4 ° C), almacenaron como sangre completa y la preservaron sin
centrifugación a temperatura ambiente y almacenaron las muestras sin
centrifugación, en hielo. Si bien es cierto en este estudio no se contemplan
pacientes con enfermedad renal crónica en tratamiento dialítico, aquí constan
pacientes en tratamiento con heparina, (la heparina es el anticoagulante
usado más comúnmente para evitar la coagulación de la sangre en los tubos
de los equipos de diálisis y las complicaciones que derivan de ello), donde
las muestras de los pacientes que no fueron centrifugadas inmediatamente y
estuvieron almacenadas a temperatura ambiente presentan diferencias
clínicamente significativas en los niveles de TTPa, con una disminución
superior al 50% de los factores de coagulación. Existiendo concordancia con
el presente estudio.
El grupo de pacientes en tratamiento con anticoagulantes presentaron
diferencias estadísticamente significativas (p<0.05) a las 18 horas de
procesamiento de las muestras tanto de TP, TTP e INR, en las pruebas
procesadas a las 6 y 24 horas, no existe diferencia estadísticamente
significativa (p>0.05). En este grupo de pacientes el cálculo de delta crítico o
delta check únicamente cumple con criterio de aceptabilidad las muestras
procesadas hasta las 6 horas pos toma, en el caso de TP e INR en 24 horas
también cumple la tolerancia a variación, sin embargo el TTP no, ni a las 18 y
24 horas. (un 10% de muestras variaron más que el valor de referencia al
cambio o Delta check). En el estudio de Feng, Limin/Zhao 2014 (27), donde
40
se analizaron 72 muestras de pacientes anticoagulados, y se dosificó
factores de coagulación en diferentes condiciones de almacenamiento y
temperatura, existieron cambios porcentuales superiores al 25% en el TTPa
de las muestras que fueron almacenadas durante 12h a temperatura de
refrigeración y a temperatura ambiente a las 8 horas.
4.2 Conclusiones
a) Este estudio ha demostrado que al modificar las condiciones conocidas
de manejo de muestras para el procesamiento de la prueba de tiempos
de coagulación sí se mantiene la estabilidad de la misma, lo que genera
un aporte nuevo para el transporte de las muestras.
b) La centrifugación inmediata de la muestra no es estrictamente necesaria.
c) Las muestras pueden ser conservadas sin centrifugar a temperatura
ambiente hasta 24 horas pos toma, con seguridad en pacientes sin
antecedentes de patología, una excepción es con pacientes que se
encuentren en tratamiento con anticoagulantes orales y la cuantificación
del TTPa en pacientes con ERC en hemodiálisis.
d) La temperatura de refrigeración del plasma citrato, es un buen método
para conservación de muestra.
e) Uso de la herramienta de calidad Deltacheck o deltacrítico es un factor
de ayuda, al momento de la interpretación de resultados, tomando en
cuenta la variabilidad biológica del paciente y los datos del laboratorio.
41
4.3 Recomendaciones
a) Insistir que en la solicitud de exámenes del paciente se coloquen los
antecedentes patológicos personales y la medicación que toma
regularmente.
b) En el caso de ser un laboratorio especializado que recibe muestras de
otros laboratorios y que la distancia es un factor limitante para el
transporte de las muestras, se debe estandarizar las condiciones de
manejo de muestras, en especial la de tiempos de coagulación, prueba
de gran sensibilidad. Este estudio muestra, cómo en los pacientes
clínicamente sanos, no es estrictamente necesario la centrifugación y el
procesamiento inmediato de la muestra.
c) Tener cautela y procesar la muestra de los pacientes en tratamiento con
anticoagulantes en un tiempo inferior a las 18 horas.
d) Evitar procesar la muestra para TTPa en pacientes con enfermedad renal
crónica, si la muestra excede las 18 horas pos toma.
e) Aplicar en los laboratorios clínicos herramientas estadísticas como el
Delta crítico o Delta Check, para establecer si la variación en el resultado
de un analito es causada por alteraciones en los procesos del laboratorio;
o se debe a la variación biológica del individuo, o por su patología
concomitante.
42
4.4 MARCO ADMINISTRATIVO
4.4.1 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES:
Actividades
Sep/15
Oct/15
Nov/15
Dic/15
Junio/16
Julio/16
Ago/16
Sep/16
Oct/16
Nov/16
Dic/16
Elaboración de propuesta
Aceptación propuesta
Obtención de permisos
Presentación y aprobación protocolo
Aplicación de cuestionario
Recolección de muestras
Elaboración de base de datos
Procesamiento datos
Análisis de datos
Informe
Presentación y defensa
TUTORIA
43
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
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ANEXOS
Anexo A Formulario de recolección de datos.
TEMA: Estabilidad de TP, TTP e INR en muestras de sangre total y plasma citrato, en diversas condiciones de almacenamiento y tiempo de procesamiento, en pacientes con insuficiencia renal crónica en hemodiálisis, con tratamiento anticoagulante y pacientes clínicamente sanos.
FORMULARIO N°____________
DATOS DE FILIACIÓN
APELLIDOS
NOMBRES
GENERO
EDAD
TELÉFONO FIJO
MÓVIL
EMAIL
DIRECCIÓN DOMICILIARIA
MEDICACIÓN QUE TOMA
ACTUALMENTE
ANTECEDENTES PATOLÓGICOS
PERSONALES.
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ANEXO B. Consentimiento informado.
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS INSTITUTO SUPERIOR DE POSTGRADO
TÍTULO DEL ESTUDIO: TEMA: Estabilidad de TP, TTP e INR en muestras
de sangre total y plasma citrato, en diversas condiciones de
almacenamiento y tiempo de procesamiento, en pacientes con
insuficiencia renal crónica en hemodiálisis, con tratamiento
anticoagulante y pacientes clínicamente sanos.
INVESTIGADORES: Dra. Gabriela Asanza Morales LUGAR DONDE SE LLEVARÁ A CABO EL ESTUDIO: Laboratorios de Referencia NET-LAB. Quito, 2016. El presente estudio tiene como objetivo determinar la estabilidad de los tiempos de coagulación en distintas formas de manejo a las conocidas. PARTICIPANTES DEL ESTUDIO: Para el presente estudio se tomará en cuenta pacientes clínicamente sanos; que presenten patología renal y pacientes que estén en tratamiento con anticoagulantes. PROCEDIMIENTO: Para el estudio necesitaremos una muestra de sangre que será extraída de una vena (parte anterior del codo o dorso de la mano). El sitio de punción se limpia con un antiséptico y luego se coloca un torniquete alrededor del antebrazo para restringir el flujo sanguíneo a través de la vena y facilitar que la aguja alcance alguno de los vasos sanguíneos. Luego, se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre en un envase hermético. Una vez que se ha recogido la sangre, se retira la aguja y se cubre el sitio de punción para detener cualquier sangrado. RIESGOS O INCOMODIDADES Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación de picadura.
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PRIVACIDAD Y CONFIDENCIALIDAD Si usted elige participar en este estudio, el investigador obtendrá información sobre usted y su salud que podría identificarse mediante examen de laboratorio, sin embargo, su nombre será mantenido en confidencialidad. CONSENTIMIENTO INFORMADO: He leído la información provista en este formulario de consentimiento, o se me ha leído de manera adecuada. Todas mis preguntas sobre el estudio y mi participación en este han sido atendidas. Libremente consiento a participar en este estudio de investigación. Autorizo el uso y la divulgación de la información de salud a las entidades antes mencionadas en este consentimiento para los propósitos descritos anteriormente. Al firmar esta hoja de consentimiento, no he renunciado a ninguno de mis
derechos legales.
Nombre del Participante: _________________________________________