i UJI SITOTOKSISITAS ISOLAT DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP SEL RAJI DAN PROFIL KANDUNGAN KIMIA ISOLAT AKTIF Skripsi Untuk memenuhi sebagian persyaratan guna memperoleh gelar Sarjana Sains Oleh: Mira Hartanti NIM. M0411042 PROGRAM STUDI BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2015 perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user
17
Embed
UJI SITOTOKSISITAS ISOLAT DAUN SIRSAK ( Annona … · vi MOTTO Bukan hal yang bagus kalau kau berhenti berkembang. Jika kau terus kabur dari hal yang kau anggap sulit, kau tidak akan
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
i
UJI SITOTOKSISITAS ISOLAT DAUN SIRSAK (Annona muricata L.)
TERHADAP SEL RAJI DAN PROFIL KANDUNGAN KIMIA ISOLAT
AKTIF
Skripsi
Untuk memenuhi sebagian persyaratan
guna memperoleh gelar Sarjana Sains
Oleh:
Mira Hartanti
NIM. M0411042
PROGRAM STUDI BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2015
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
iii
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi ini adalah hasil penelitian saya
sendiri dan tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar
kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, serta tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali secara tertulis diacu
dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari
ditemukan adanya unsur penjiplakan maka gelar kesarjanaan yang telah diperoleh
dapat ditinjau dan/atau dicabut.
Surakarta, 24 Juni 2015
Mira Hartanti
NIM. M0411042
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
iv
UJI SITOTOKSISITAS ISOLAT DAUN SIRSAK (Annona muricata L.)
TERHADAP SEL RAJI DAN PROFIL KANDUNGAN KIMIA ISOLAT
AKTIF
Mira Hartanti
Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sebelas Maret, Surakarta
ABSTRAK
Pengobatan kanker secara medis dengan kemoterapi ternyata kurang
selektif, karena bersifat toksik bagi jaringan normal. Strategi yang potensial
adalah penggunaan agen ko-kemoterapi dengan bahan obat dari alam. Salah satu
tanaman yang berpotensi sebagai sumber obat baru adalah sirsak (Annona
muricata L.). Penelitian ini bertujuan mengetahui efek sitotoksik isolat daun
sirsak terhadap sel Raji berdasarkan nilai Lethal Concentration 50 (LC50) dan
profil kimia isolat aktifnya.
Penelitian dilakukan dengan ekstraksi daun sirsak metode perkolasi
menggunakan etanol 96%. Ekstrak difraksinasi menggunakan metode Vacuum
Liquid Chromatography (VLC) dengan fase gerak bertingkat dengan pelarut
kloroform dan etil asetat. Fraksi yang didapat dimonitor dengan Kromatografi
Lapis Tipis (KLT) dengan mengelompokkan fraksi berdasarkan spot yang sama.
Selanjutnya dire-fraksinasi dan dipantau dengan KLT hingga didapatkan satu spot
dan diisolasi sebagai isolat. Perlakuan uji dengan menggunakan variasi
konsentrasi isolat 10; 20; 30; 40; 60; 70; 90; dan 100 µg/ml ke microplate 96
sumuran. Setiap sumuran berisi sel Raji dengan kepadatan 2 x 104 sel/sumuran.
Isolat daun sirsak diuji sitotoksisitasnya terhadap sel Raji dengan metode [3-(4,5-
dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] atau MTT Assay.
Hasil dari penelitian menunjukkan bahwa isolat daun sirsak (Annona
muricata L.) memiliki aktivitas sitotoksik dengan nilai LC50 sebesar 71,96 µg/ml.
Profil kimia isolat aktif daun sirsak diidentifikasi mengandung senyawa terpenoid
dengan Retardation factor (Rf) 0,62 dan 0,94 dan senyawa steroid dengan Rf
0,90.
Kata kunci: Annona muricata L., sel Raji, uji sitotoksisitas, MTT Assay,
Kromatografi Lapis Tipis (KLT).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
v
CYTOTOXICITY ASSAY FOR ISOLATE COMPOUNDS OF SOURSOP
LEAVES (Annona muricata L.) TOWARDS RAJI CELLS AND ACTIVE
ISOLATE CHEMICAL PROFILE
Mira Hartanti
Department of Biology, Faculty of Mathematics and Natural Sciences
Sebelas Maret University, Surakarta
ABSTRACT
Medical cancer treatment with chemotherapy were less selective, because
toxic to normal tissues. Potential strategies is the use of co-chemotherapy agent
from nature. One of the plants that have the potential as a source of new drugs is
soursop (Annona muricata L.). The purposes of this study are to determine the
effect of cytotoxic, Lethal Concentration 50 (LC50) value and the chemical
constituents profile of active isolate of soursop leaves.
The study began with extracted of soursop leaves using 96% ethanol. The
extract was fractionated using Vacuum Liquid Chromatography (VLC) with a
mobile phase stratified with chloroform and ethyl acetate. Fractions obtained were
grouped based on the similar spot and they were refractionated to obtain isolates.
Further refractionation and monitored by TLC until found one spot and isolated as
isolates. Isolates concentration were 10; 20; 30; 40; 60; 70; 90; and 100 µg/ml
respectively. They were applied to the microplate 96 wells. Density of Raji cells
was 2 x 104 cells/well. Cytotoxcity test of soursop leaves isolates was carried out
against Raji cells by using MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2.5-diphenyl
tetrazolium bromide] method.
The results showed that isolates soursop leaves have cytotoxic activity with
LC50 value of 71.96 µg/ml. Chemical profile of the soursop leaves active isolates
were identified by Thin Layer Chromatography (TLC) and analyze qualitatively.
The result indicated there is a terpenoid compound with Retardation factor (Rf)
detected 0.62 and 0.94 and steroid compounds with Rf detected 0.90.