-
i
UJI AKTIVITAS ANTI HIPERURISEMIA DARI EKSTRAK ETANOL,
FRAKSI DIKLORMETAN DAN FRAKSI ETIL ASETAT DAUN
ROSELLA (Hibiscus sabdariffa L.)
SKRIPSI
Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh
gelar
Sarjana Farmasi (S.Farm)
INTAN RIZKA NUR FAUZAH
1408010158
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2018
-
ii
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
iii
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
iv
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
v
MOTTO
Lakukan sesuatu karena ALLAH SWT agar hatimu lebih
tenang & ikhlas
“Di Jalani, Di Nikmati, Di Syukuri”.
(Hamba Allah)
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
vi
PERSEMBAHAN
Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang.
Skripsi
ini akan dipersembahan untuk:
1. Bapak Slamet M dan Mamah Herowati yang telah memberikan
kasih
sayang, semangat, dukungan baik materil dan non materil serta
do‟a yang
dipanjatkan tiada henti kepada Allah AWT.
2. Kakak-kakak tercinta yaitu Khaerul Anam Al-Mahbubi, Imam
Maulida
Alfaroqi, Faizan Rizki Zumaro serta seluruh keluarga besar yang
telah
memberikan dukungan dan do‟a disetiap langkah penulis.
3. Dosen pembimbingku (Ibu Diniatik dan Pak Zainur) yang selama
ini
dengan sabar membimbing, mengarahkan dan memotivasi, terima
kasih
banyak.
4. Semua sahabat dan temen seperjuanganku yang tak dapat
disebutkan satu
persatu disini
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis haturkan kehadirat Allah SWT yang telah
melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya, sehingga dapat menyelesaikan
proposal
skripsi ini dengan judul “UJI AKTIVITAS ANTI HIPERURISEMIA
DARI
EKSTRAK ETANOL, FRAKSI DIKLORMETAN DAN FRAKSI ETIL
ASETAT DAUN ROSELLA (Hibiscus sabdariffa L.)”.
Penulis proposal skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu
syarat
untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi S1
Farmasi, Fakultas
Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Dalam penyusunan proposal skripsi ini tidak lepas dari bantuan
dan
bimbingan dari berbagai pihak, oleh karena itu penulis ingin
menyampaikan
ucapan terimakasih kepada yang terhormat :
1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H, M.H., selaku Rektor
Universitas
Muhammadiyah Purwokerto
2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. Selaku Dekan Farmasi yang
telah
memberikan berbagai informasi dan bimbingan tentang
tatalaksana
penyusunan skripsi.
3. Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt. Selaku ketua Program Studi
S1
Farmasi yang telah memberi berbagai informasi dan bimbingan
tentang
tatalaksana penyusunan skripsi.
4. Dr. Diniatik, M.Sc., Apt. Selaku pembimbing I telah
menyediakan waktu,
tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan dalam penyusunan skripsi
ini.
5. Zainur Rahman Hakim, M.Farm., Apt. Selaku pembimbing II
telah
menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan
dalam
penyusunan skripsi ini.
6. Segenap dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas
Muhhamadiyah Purwokerto yang telah membagikan ilmunya dengan
penuh dedikasi dan melayani dengan sepenuh hati.
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
viii
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
ix
RIWAYAT HIDUP
Nama : Intan Rizka Nur Fauzah
Tempat, Tanggal Lahir : Pemalang, 21 November 1996
Jenis Kelamin : Perempuan
Agama : Islam
Alamat : Kalitorong 03/01 Randudongkal Pemalang
Nama Orang Tua : Slamet M & Herowati
Pendidikan
1. TK Muslimat Kalimas 2002
2. SD Negeri 2 Kalitorong 2008
3. SMP Negeri 2 Randudongkal 2011
4. MAN Pemalang 2014
Pengalaman
2017 Asisten Praktikum Farmakokinetika
Organisasi
PIKMA-YC Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
x
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL i
LEMBAR PERSETUJUAN ii
LEMBAR PENGESAHAN iii
LEMBAR PERNYATAAN ORISINALITAS iv
MOTTO v
PERSEMBAHAN vi
KATA PENGANTAR vii
RIWAYAT HIDUP ix
LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI x
DAFTAR ISI xi
DAFTAR TABEL xiii
DAFTAR GAMBAR xiv
DAFTAR LAMPIRAN xvi
ABSTRAK xvii
ABSTRACT xviii
BAB I. PENDAHULUAN 1
A. Latar Belakang 1
B. Perumusan Masalah 4
C. Tujuan Penelitian 4
D. Manfaat Penelitian 4
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 5
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xii
A. Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) 6
B. Hiperurisemia 12
C. Xantine Oksidase (XO) 15
D. Spektroskopi UV-Vis 18
E. Kerangka Konsep 20
F. Hipotesis 20
BAB III. METODE PENELITIAN 21
A. Jenis dan Rancangan Penelitian 21
B. Variabel Penelitian 21
C. Waktu dan Tempat Penelitian 21
D. Alat dan Bahan Penelitian 21
E. Cara Penelitian 22
F. Analisis Hasil 27
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 29
A. Deteminasi Tanaman 29
B. Ekstraksi Etanol Daun Rosella 29
C. Hidrolisis 31
D. Fraksinasi 31
E. Identifikasi Flavonoid 32
F. Uji Antihiperurisemia 37
G. Analisis Data 42
H. Spektroskopi Ultraviolet 43
I. Keterbatasan Penelitian 47
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN 48
A. Kesimpulan 48
B. Saran 48
DAFTAR PUSTAKA 49
LAMPIRAN 57
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xiii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Hasil fraksisinasi ekstrak etanol daun
rosella (Hibiscus sabdariffa
L.).................................................... 32
Tabel 4.2 Hasil KLT dan identifikasi
flavonoid........................................... 36
Tabel 4.3 Nilai aktivitas xantin
oksidase.......................................................
38
Tabel 4.4 Hasil uji penghambatan aktivitas xantin
oksidase......................... 38
Tabel 4.5 Nilai % inhibisi dari ekstrak etanol, fraksi
diklormetan, fraksi etil asetat daun rosella
(Hibiscus sabdariffa L.) dan
Allopurinol..................................... 39
Tabel 4.6 Nilai IC50 Allopurinol, ekstrak etanol, fraksi
diklormetan dan fraksi etil
asetat................................................. 40
Tabel 4.7 Perubahan λ Beserta Perkiraan Gugus pada
Struktur Flavonoid dengan Pereaksi
diagnostik........................... 46
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xiv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa
L.)................................. 7
Gambar 2.3 Rumus struktur asam
urat...........................................................
10
Gambar 2.4 Metabolisme
purin......................................................................
12
Gambar 2.5 Perubahan xantin menjadi asam
urat.......................................... 15
Gambar 2.6 Kerangka konsep
........................................................................
20
Gambar 4.1 Ekstraksi daun rosella (Hibiscus sabdariffa L.)
menggunakan pelarut etanol 70% hingga didapatkan
ekstrak kental daun
rosella..........................................................
31
Gambar 4.2 Mekanisme
hidrolisis..................................................................
31
Gambar 4.3 Hasil hidrolisis ekstrak cair berwarna hijau
kehitaman................. 31
Gambar 4.4 Profil KLT dengan fase diam selulosa dan
fase gerak asam asetat glasial 30% diamati pada sinar UV
366, A:sebelum diuapi amonia, B : sesudah diuapi amonia
E (ekstrak etanol), DKM (fraksi diklormetan), EA
(fraksi etil asetat), K
(kuersetin)..................................................
33
Gambar 4.5 Reaksi antara asam sitroborat dengan gugus orto
dihidroksi
Pada
flavonoid............................................................................
34
Gambar 4.6 Profil KLT dengan fase diam selulosa dan
fase gerak asama asetat glasial 30 % diamati pada sinar UV
366 A : sebelum di semprot sitroborat, B: setelah disemprot
Sitroborat E (ekstrak etanol), DKM (fraksi diklormetan), EA
(fraksi etil asetat), K
(kuersetin)................................................. 35
Gambar 4.7 Grafik nilai IC50 allopurinol, Fraksi etil
asetat,
ekstrak etanol dan fraksi
diklormetan........................................ 40
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xv
Gambar 4.8 Struktur senyawa (a) struktur dasar flavonoid (b)
kuersetin ..... 42
Gambar 4.9 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan pelarut
MeOH............... 43
Gambar 4.10 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan penambahan
Pereaksi geser
NaOH..................................................................
44
Gambar 4.11 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan penambahan
Pereaksi geser
AlCl3...................................................................
44
Gambar 4.12 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan penambahan
Pereaksi geser AlCl3 +
HCl........................................................ 45
Gambar 4.13 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan penambahan
Pereaksi geser Na
Asetat..........................................................
45
Gambar 4.14 Spektrum UV-VIS Flavonoid dengan penambahan
Pereaksi geser Na Asetat + Asam
Borat.................................. 46
Gambar 4.15 Dugaan struktur flavonoid fraksi etil asetat
daun
rosella 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-
4H-chromen-4-one...................................................................
47
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Determinasi
Tanaman..............................................................
58
Lampiran 2. Perhitungan bahan
..................................................................
60
Lampiran 3. Perhitungan rendemen ekstrak etanol daun rosella
(Hibiscus sabdariffa L.)
...................................................... 65
Lampiran 4. Perhitungan nilai Rf
...............................................................
66
Lampiran 5. Perhitungan dalam identifikasi flavonoid dengan
Spektrofotometri UV-Vis
................................................... 67
Lampiran 6. Perhitungan nilai uji aktivitas antihiperurisemia
.................... 68
Lampiran 7. Uji statistik
.............................................................................
85
Lampiran 8. Kegiatan penelitian
................................................................
88
Uji Aktivitas Anti Hiperurisemia..., Intan Rizka Nur Fauzah,
Fakultas Farmasi UMP, 2018
-
xvii
Uji Aktivitas Antihiperurisemia Dari Ekstrak Etanol, Fraksi
Diklormetan dan
Fraksi Etil Asetat Daun Rosella (Hibiscus sabdariffa L.)
Intan Rizka Nur Fauzah1, Diniatik
2, Zainur Rahman Hakim
3
ABSTRAK
National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES)
menyatakan pada
tahun 2007-2008 di Amerika Serikat, terdapat prevalensi kejadian
hiperurisemia
sebesar 21,2 % pada wanita dan 21.6 % pada laki-laki. Prevalensi
hiperurisemia
terus meningkat secara cepat pada beberapa dekade terakhir.
Penggunaan obat
sintetik yang biasa dikonsumsi allopurinol, obat ini memberikan
banyak efek
samping sehingga diperlukan pengobatan alternatif yang lebih
aman dengan efek
samping yang lebih rendah, dengan menggunakan tanaman rosella
yang memiliki
kandungan flavonoid. Penelitian ini bertujuan mengetahui potensi
ekstrak etanol,
fraksi diklormetan dan fraksi etil asetat daun rosella (Hibiscus
sabdariffa L.)
sebagai anti hiperurisemia, mengetahui pola kromatogram dan pola
spektrum
fraksi aktif. Metode penelitian dengan pengumpulan daun rosela,
determinasi
tanaman, ekstraksi, hidrolisis, fraksinasi, identifikasi
menggunakan kromatografi
lapis tipis (KLT) dan uji antihiperurisemia untuk mengetahui
penghambatan
enzim xantin oksidase dengan spektroskopi UV-Vis. Hasil KLT
menunjukan pada
fraksi etil asetat mempunyai nilai Rf 0,1 sama dengan kuersetin.
Pola spektrum
fraksi aktif menunjukan pita 1 370 nm dan pita II 257 nm yaitu
golongan flavonol
(3-OH bebas). Hasil penelitian menunjukan potensi penghambatan
aktivitas
xantin okisdase pada ekstrak etanol dengan nilai IC50 30,01
µg/ml, fraksi
diklormetan 39,53 µg/ml dan fraksi etil asetat 15,29 µg/ml daun
rosella (Hibiscus
sabdariffa L.) sedangkan IC50 Allopurinol 5,89 µg/ml. Diduga
struktur flavonoid
fraksi etil asetat yaitu
2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-4H-chromen-4-
one. Uji One Way Anova menunjukan nilai p 0,000
-
xviii
Antihyperuricemia Activity Test of Ethanol Extract,
Diclormethane Fraction and
Ethyl Acetate Fraction of Rosella Leaf (Hibiscus sabdariffa
L.)
Intan Rizka Nur Fauzah1, Diniatik
2, Zainur Rahman Hakim
3
ABSTRACT
The National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES)
states that in
2007-2008 in the United States, there was a prevalence of
hyperuricemia at 21.2%
in women and 21.6% in men. The prevalence of hyperuricemia
continues to
increase rapidly in the last few decades. The use of synthetic
drugs commonly
consumed by allopurinol, these drugs provide many side effects
so that safer
alternative treatments are needed with lower side effects, using
rosella plants that
contain flavonoids. This study aims to determine the potential
of ethanol extract,
dichormate fraction and ethyl acetate fraction of rosella leaves
(Hibiscus
sabdariffa L.) as anti hyperuricemia, knowing the chromatogram
pattern and
active fraction spectrum pattern. The research method was
collecting roselle
leaves, plant determination, extraction, hydrolysis,
fractionation, identification
using thin layer chromatography (TLC) and antihyperuricemia test
to determine
the inhibition of xanthine oxidase enzyme by UV-Vis
spectroscopy. The results of
TLC showed that the ethyl acetate fraction had a Rf value of 0.1
which was the
same as quercetin. The spectrum pattern of the active fraction
shows the band 1
370 nm and the band II 257 nm which is the flavonol (3-OH free)
group. The
results showed the potential inhibitory activity of xanthine
okisdase in ethanol
extract with IC50 value of 30.01 μg / ml, the dichormate
fraction was 39.53 μg /
ml and the ethyl acetate fraction was 15.29 μg / ml of rosella
leaves (Hibiscus
sabdariffa L.) while IC50 Allopurinol 5.89 μg / ml. The
structure of ethyl acetate
fraction of flavonoids is 2- (3,4-dihydroxyphenyl)
-3,5,7-trihydroxy-4H-chromen-
4-one. One Way Anova test shows p value 0,000