UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA UNIDAD ACADEMICA DE SALUD Y BIENESTAR FACULTAD DE MEDICINA CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA I CATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO. INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ ANDREA ESCANDON ANDRES FLORES PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”
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UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA
UNIDAD ACADEMICA DE SALUD Y BIENESTAR
FACULTAD DE MEDICINA
CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA ICATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO.INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ
ANDREA ESCANDON
ANDRES FLORES PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”
TINCIÒN Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos tienen cargas (+)
en los grupos fosfatos que se combina con las cargas (+) de loscolorantes básicos.
Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas, se utilizanpara teñir el material de fondo para proporcionar un contraste decolor
TINCIÒN DE GRAM Tinción utilizada para separar las bacterias en Gram (+) y Gram (-).
Se fija la muestra en un portaobjetos mediante calentamiento o tratamiento conalcohol.
Se expone ala muestra a violeta de cristal.
Se añade yodo para formar el complejo con el colorante principal.
TINCIÒN DE GRAM En la decoloración con alcohol o acetona el complejo:
• Queda retenido en las bacterias Gram positivas y
• Se pierde en las Gram negativas.
Los microrganismos Gram (-) retienen el colorante safranina( color rojo).
TINCIÒN DE GRAM El grado en el que un microrganismo conserva el colorante depende de:
• Del microorganismo
• De las condiciones del cultivo.
• Habilidades tintoriales del microscopista.
TINCIÒN DE GRAM
TINCIÒN DE GRAM
TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápiday económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos,como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entreotros.Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, unbacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.
TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
Esta tinción demuestra la capacidad de ciertas bacterias de resistir a la decoloración porácidos y alcoholes, lo cual se correlaciona con su alto contenido en lípidos en la paredcelular y presencia de ácidos micólicos que aumentan el carácter hidrófobo.
Una de las bacterias que presentan esta característica es Mycobacterium tuberculosisPrincipal causante de la tuberculosis.
TINCIÒN DE ZIEHL NEELSEN
Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acido resistentes.
Se tiñen con carbolfucsina básica.
Resisten a la descoloración con soluciones de acido-alcohol.
Se realiza contra tinción del fondo con azul de metileno.
Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro.
Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:ácido periódico 58% carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Prepararmezclando en el orden dado:
0,5 g fucsina básica50 cc agua destilada5 cc etanol absoluto28,5 g cristales de fenol derretidoshematoxilinaalcohol ácido 1%:alcohol de 35ºácido clorhídrico
Técnica
PROCEDIMIENTO
Etapa 1:
PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO
Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a otro del portaobjetos para lograr una película homogénea
Etapa 2
CUBRIR El EXTENDIDO CON FUCSINA FILTRADA
Etapa 3
CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES VECES DURANTE 5 MINUTOS
Etapa 4
LAVAR CON AGUA
Etapa 5
CUBRIR CON SOLUCIÓN DECOLORANTE DURANTE 3 MINUTOS
Solución decolorante: alcohol ácido
Etapa 6
LAVAR CON AGUA
Etapa 7
CUBRIR CON AZUL DE METILENO DURANTE 1 MINUTO
Etapa 8
LAVAR CON AGUA Y SECAR AL AIRE
ETAPA 10
OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Células Color
Bacilos y microorganismos
Alcohol Acido-Resistentes.Rojo brillante
Gérmenes, otros organismos y
material de soporte.Diferentes tonalidades de azules
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