Apresentao do PowerPoint
TESTE BIOQUMICO
Teste de Condutividade EltricaTeste de TetrazlioMestranda:
Elizabeth Nunes GonzagaProf. Coimbra
Maio/2014UFMT UNIVERSIDADE FEDERAL DO MATO GROSSO Campus
SinopPrograma de Ps-Graduao Mestrado em AgronomiaAvaliao e
Qualidade de Sementes
INTRODUOSementeTestesConceito de Teste BioqumicoTeste de
Condutividade EltricaTeste de TetrazlioO QUE UMA SEMENTEPela
Legislao Brasileira (Lei n 10711, de 5 de agosto de 2003)
Semente como o material de reproduo vegetal de qualquer gnero,
espcie ou cultivar, proveniente de reproduo sexuada ou assexuada,
que tenha finalidade especfica de semeadura.
Fonte:
http://www.ecoarflorestal.org.br/imagens/proj_sementes_01.jpgPela
definio botnica: semente o vulo desenvolvido aps a fecundao, que
contm embrio, reservas nutritivas e tegumento.
Longevidade
VigorVigor em semente remonta as evidencias de que os indivduos
se desenvolvem em taxas diferentes, o que leva naturalmente, a
classificao em fortes, fracos, etc (MOREIRA 1994).
Vigor tem sido definido com a utilizao de termos com
integridade, adaptabilidade, resistncia, mas nenhum deles
cientificamente respeitvel ; a semente, no o ambiente, deve receber
as maiores atenes nas definies de vigor (Heydecker, 1972).
Vigor pode ser definido como o potencial para a germinao rpida e
uniforme e um crescimento rpido de plntula, em condies normais de
campo (Ching, 1973).
TIPOS DE TESTES Testes FsicosTestes FisiolgicosTestes
BioqumicosTestes de Resistncia
TESTES PADRONIZADOS PELA ISTA e AOSATESTE BIOQUMICOAvaliar
alteraes bioqumicas associadas ao vigor das sementes.Testes de
respiraoTeste ADAGTeste de tetrazlioTeste de condutividade
eltricaTeste de lixiviao de potssioTeste dos aldedos volteisTeste
dos cidos graxos livresTESTE DE CONDUTIVIDADE ELTRICA um teste para
observar a qualidade fisiolgica das sementes
A organizao do sistema de membranas em sementes pode refletir o
seu estdio de deteriorao e, consequentemente, a qualidade
fisiolgica.
Fonte:
http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/semente/semente.phpSementes
de Sibipiruna (Caesalpinea Peltophoroides ). Trs sementes normais,
mostrando o eixo embrionrio e cotildones e uma semente
deteriorada.A medio da condutividade eltrica por meio da quantidade
de eletrlitos liberados pela semente na gua de embebio;
Tem sido aplicada, de modo mais freqente, em uma amostra de
sementes representativa de uma populao (mtodo massal).
DESVANTAGEMOs resultados expressam a condutividade mdia de um grupo
de sementes, onde poucas sementes mortas podem afetar a
condutividade de um lote com muitas sementes de alta qualidade.
Para minimizar esse problema, recomenda-se escolher as sementes,
excluindo-se as sementes danificadas.
METODOLOGIAQuatro repeties de 50 sementes puras
Pesadas e, posteriormente, colocadas em copos plsticos contendo
75mL de gua deionizada (h trabalhos com 25ml e 50ml)
Manter em germinador regulado a temperatura de 25C, durante 24
horas
Aps o perodo de embebio a condutividade eltrica deve ser
medida.
O resultado obtido no condutivmetro dever ser dividido pelo peso
da amostra, para que o resultado final seja expresso em mS cm-1
g-1.
Uma poro significativa dos eletrlitos liberados pelas sementes,
durante a embebio representada por vrios ons inorgnicos, dentre
estes destacam-se o Na, K, Ca e Mg.
O potssio (K), porm, tem merecido especial ateno por se tratar
do principal on em termos de quantidade lixiviada.
Sementes envelhecidas lixiviam maiores quantidades de potssio e
essas quantidades tm sido utilizadas como um indicador da
integridade do sistema de membranas celulares.
TESTE DE TETRAZLIOO teste de tetrazlio (Tz) rpido e grande
importncia para a avaliao da qualidade das sementes, porque, alm da
viabilidade, o mesmo pode informar sobre o vigor e ainda
identificar diversos problemas que afetam o desempenho das sementes
(Marcus Filho, 2005).
A metodologia do teste vem sendo aperfeioada constantemente, de
modo que existem manuais que indicam a execuo para vrias espcies,
tais como a soja, milho, trigo, feijo, algodo e amendoim.Baseia-se
na atividade das enzimas desidrogenases, como a desidrogenase do
cido mlico que catalizam a reao de reduo do sal de tetrazlio (2,3,5
trifenil cloreto de tetrazlio), nas clulas vivas.
Por exemplo: nas sementes de soja imersa na soluo de tetrazlio,
esta difundida atravs dos tecidos, ocorrendo nas clulas vivas a
reao de reduo que resulta na formao de um composto vermelho,
no-difusvel, conhecido por formazan.
Se o sal de tetrazlio reduzido, formando o composto vermelho,
houve atividade respiratria nas mitocndrias, significando que h
viabilidade celular e do tecido.
Os tecidos no viveis no reagem e, conseqentemente, no so
coloridos.
A formao de um vermelho carmim claro indica tecido vigoroso e um
vermelho mais intenso para o tecido em deteriorao.
O Tz identifica, em soja, deteriorao por umidade, danos mecnicos
e de percevejos. A interpretao do teste exige que as sementes sejam
avaliadas individualmente, quando o exame das partes vitais, a
localizao e intensidade da colorao indicaro a condio da
semente.
METODOLOGIASal de tetrazlio a 0,075% (75 ml e soluo estoque
(1,0%) + 925 ml de gua
100 sementes ( 2 repeties com 50 sementes cada)
Sementes mantidas umedecidas em papel toalha, por um perodo de
16 horas, na temperatura de + 25 C
Aps o pr-acondicionamento, as sementes so colocadas em bquer ou
copinhos de plsticos, sendo totalmente submersas na soluo de
tetrazlio (0,075%)
As sementes devem permanecer assim a uma temperatura de 35C a
40C por aproximadamente 150 a 180 minutos.
A soluo de tetrazlio sensvel luz, por isso a operao deve ser
realizada no escuro.
Alcanada a colorao adequada as sementes devem ser lavadas em gua
e posteriormente avaliadas, sendo no mximo 12 horas o tempo de
armazenamento em refrigerador.
Muitos outros mtodos, para a determinao rpida da qualidade das
sementes, vm sendo pesquisados, porm vrios ainda no mostraram
resultados consistentes, outros apresentam dificuldades na
padronizao, alguns se mostram promissores, mas devem ser mais
avaliados antes de sua recomendao
Classes de QualidadeA identificao feita por 8 classes de
qualidade, as quais foram descritas por (FRANA NETO ET
AL.,1988).
Classes de 1 a 3 identificam sementes viveis e vigorosas,Classes
de 4 a 5 identificam sementes viveis, porm no vigorosas,Classes de
6 a 8 englobam sementes que no germinam
A somatria dos percentuais das classes 1 a 3 nos d o ndice de
vigor e a somatria dos valores das classes de 1 a 5 nos d a
viabilidade do lote de semente.
Classificao pelo VigorO nvel de vigor pode ser interpretado de
acordo com a seguinte classificao (FRANA NETO, 1989):Vigor muito
alto: superior a 80%Vigor alto: entre 70 a 79%Vigor mdio: entre 50
a 69%Vigor baixo: entre 30 a 49%Vigor muito baixo: inferior a
29%
Bhering et al. (1996)
VIABILIDADE DAS SEMENTES DE BRAQUIRIA PELO TESTE DE TETRAZLIO
Objetivando estimar a viabilidade de sementes de braquiria
(Brachiaria brizantha) pelo teste de tetrazlio, foram estudadas as
condies para a hidratao e a colorao das sementes.
Para tanto, utilizando oito lotes de sementes, foram variados os
perodos e as temperaturas (2, 4, e 6 horas a 35C e 40C; 6 e 16
horas a 30C) de hidratao e os perodos e as temperaturas (1, 2 e 4
horas a 35C, 40C e 45C; 6 horas a 30C) de colorao, em soluo 0,075%
de tetrazlio.
As sementes foram classificadas em viveis e no viveis.Revista
Brasileira de Sementes, vol. 28, n 2, p.147-151, 2006Os resultados
do teste de tetrazlio (Tabela 1) indicaram que a hidratao das
sementes, dos oito lotes de braquiria, por seis horas temperatura
de 30C (6h a 30C/2h a 40C) apresentou semelhana estatstica com os
resultados de germinao de todos os lotes. Esse perodo de hidratao
das sementes est de acordo com uma das recomendaes das Regras para
Anlise de Sementes (Brasil, 1992), embora as regras no especifiquem
a temperatura a ser utilizada.
Com relao colorao das sementes, os resultados indicaram (Tabela
2) que o perodo de uma hora a 45C (6h a 30C/1h a 45C),
independentemente do lote considerado, apresentou semelhana
estatstica com os resultados de germinao para os oito lotes.
FIGURA 1. Teste de tetrazlio: sementes viveis (A) e no viveis
(B) de braquiriaConclusoO teste de tetrazlio, eficiente para
estimar a viabilidade de sementes de Brachiaria brizantha, pode ser
conduzido com a hidratao das sementes por seis horas a 30C
(sementes com 25% de gua) e com a colorao por duas horas a
40C.OBRIGADO!!!