1 INTRODUCCIÓN PROCEDIMIENTOS DE EXTRACCIÓN DE VITAMINAS EXTRACCIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES EXTRACCIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES EXTRACCIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO (VITAMINA C) EXTRACCIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES DE FORMA GLOBAL DETERMINACIÓN DE VITAMINAS INDICE DETERMINACIÓN DE VITAMINAS Primer problema: definir las sustancias involucradas Definición de vitamina: Sustancia necesaria para la vida y en particular para garantizar la salud y el crecimiento de los seres vivos Se necesitan menos de 100 mg al día de cada vitamina. En su conjunto representan el 0.2 % de la dieta Se encuentran de forma natural en los alimentos o se adicionan durante su elaboración Gran variedad de estructuras químicas pueden encontrarse dentro de este grupo. Clasificación muy generalista, según su solubilidad: Vitaminas liposolubles Vitaminas hidrosolubles Estructura química métodos de determinación
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Tema 9 Vitaminas - WordPress.com · DETERMINACIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES VITAMINA B6 VIT. B6 (Piridoxina) Déficit Lesiones en piel, trastornos nerviosos,… Función Coenzimas
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� INTRODUCCIÓN
� PROCEDIMIENTOS DE EXTRACCIÓN DE VITAMINAS
� EXTRACCIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
� EXTRACCIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES
� EXTRACCIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO (VITAMINA C)
� EXTRACCIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES DE FORMA
GLOBAL
� DETERMINACIÓN DE VITAMINAS
INDICE
DETERMINACIÓN DE VITAMINAS
�Primer problema: definir las sustancias involucradas
�Definición de vitamina:� Sustancia necesaria para la vida y en particular para garantizar
la salud y el crecimiento de los seres vivos� Se necesitan menos de 100 mg al día de cada vitamina. En su
conjunto representan el 0.2 % de la dieta� Se encuentran de forma natural en los alimentos o se adicionan
durante su elaboración
�Gran variedad de estructuras químicas pueden encontrarse dentrode este grupo. Clasificación muy generalista, según su solubilidad:� Vitaminas liposolubles� Vitaminas hidrosolubles
�Estructura química � métodos de determinación
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DETERMINACIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
VIT. A (retinol)
VIT. D2 VIT. D3
VIT E (tocoferol)
VIT. K
DETERMINACIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLESVITAMINA A
VITAMINA A(all-trans-retinol)
PRO-VITAMINA A
Se convierte en retinol mediante reacciones enzimáticas en la mucosa intestinal y el hígado
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DETERMINACIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLESVITAMINA A
DéficitDesecación de la piel, pérdida de pelo, ceguera nocturna,…
HipervitaminosisDolor de cabeza, labios sangrantes, huesos frágiles, cirrosis,…
� Extracción de las vitaminas, distinguiendo�Liposolubles�Hidrosolubles�Vitamina C (por su inestabilidad)
� Determinación: típicamente, cromatografía
�Alternativas:
� Bioensayo (con animales o seres humanos). Sólo B12 y D.� Ensayo microbiológico: seguir el crecimiento de
microorganismos (bacterias, hongos o protozoos) como una función de la concentración de ciertas vitaminas. Sólo para hidrosolubles.
EXTRACCIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
�Procedimiento general para la extracción global de las vitaminasliposolubles � adecuado para todo tipo de alimentos
� Tratamiento con KOH (para saponificar los posibles lípidospresentes en la muestra que contengan vitaminas)
� Neutralización con HCl� Extracción de las vitaminas con éter de petróleo� Típicamente, cambio de disolvente a n-hexano
�Modificaciones para la extracción particular de las vitaminas A, D o E:
� Adición de ácido ascórbico en medio alcohólico (vit. E) � Uso de potasa etanólica para saponificar (vit. E y D) � Utilización de éter etílico como extractante en lugar de éter de
petróleo (vit. A).
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EXTRACCIÓN DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Muestra de alimento(5 g)
+ 10 ml KOH 33%+ 40 ml EtOH/alc. amilic
(99.6/0.4)
Mantener a reflujo30 min
+ 17 ml HCl 25%
Enfriar + 50 ml eter de petroleo
Agitar durante 3 min
Dejar reposar hastaseparación de fases
fase acuosa fase orgánica
Secar sobre sulfato sódico anhidro
Evaporar a sequedada 35°C a vacío
Disolver finalmenteen n-hexanoAgitar durante 3 min
Dejar reposar hastaseparación de fases
ConcentraciónMasa inicial = 5 gVolumen final = 5 mL
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EXTRACCIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES
�Hay que distinguir entre:� Extracción del ácido ascórbico� Extracción del resto de vitaminas hidrosolubles.
�Extracción del ácido ascórbico (vitamina C)
�Se basa en utilizar como extractante una disolución acuosa de ácido metafosfórico al 0.4%. El extracto se filtra y purifica mediante EFS (Extracción en Fase Sólida) sobre C18
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EXTRACCIÓN DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES
�Extracción de vitaminas hidrosolubles de forma global
�Procedimiento recomendado para la determinación de todas las vitaminas hidrosolubles excepto el ácido ascórbico
�Fundamento:� Tratamiento con HCl 0.1 M en caliente (30 min, 100 ºC)� Ajustar el pH a 4.5 � Tratamiento con enzimas (β amilasa y taka-diastasa),
durante 12 horas a 37ºC� Filtrar y diluir con agua� Determinación analítica