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TEMA 3ORGANIZACIÓN DEL MATERIAL HEREDITARIO EN PROCARIOTAS
GENÓFORO DE LOS VIRUS -Características generales -Virus ADN-fago
GENÓFORO BACTERIANO -Cromosoma bacteriano -ADN extracromosómico: PLÁSMIDOS -clasificación -utilización tecnología ADN recombinante
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GENÓFOROS VIRALES
VIRIÓN(diámetro 10-400 nm)
DNA/RNA
nucleocápside
organización simple y acelular
ausencia DNA y RNA en el mismo virión
incapacidad reproducirse de forma independiente y llevar a cabo división celular
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VIRUS ARN-ADN
Tipo de Molécula
Tipo de Hélice
Tipo de virus según
huésped.Familia de virus
Lineal Sencilla Animal
Retrovirus (Ribodesoxivirus) - Sarcoma de Rous (Pollo)
- Leucemia de Rauscher (ratón) - HIV (virus de inmunodeficiencia
humana causante del SIDA)VIRUS ARN-ADN
Tipo de Molécula
Tipo de Hélice
Tipo de virus según
huésped.Familia de virus
CircularDoble (gap)
Animal Hepatitis B
VIRUS HEP. B
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FAGO
infecta E. coli
cápside icosaédrica, DNA doble hélice lineal con ~ 48.000 pb
extremos cohesivos: extremos 5’ monocatenarios (12 nucleótidos de secuencia complemenaria)
lisis bacteria ciclo lisogénico
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GENÓFORO BACTERIANO
ADN doble hélice circular tamaño variable (0,1 a 8 x109 dalton) E. coli (1.100 m longitud, 3,2 x105 pares
nucleótidos)
Material genético NUCLEOIDE
ADN (60%)
LÍ PI DOS
(1%)
PROTEÍ NA
(5-10%)
ARN (30%)
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ADN altamente organizado Plegamiento formando DOMINIOS SUPERENRROLLAMIENTO
GENÓFORO BACTERIANO
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Nº dominios en E. coli variable (12 a 80 dominios) Composición: ADN dúplex condensado + proteínas
básicas
GENÓFORO BACTERIANO
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PROTEÍNAS BÁSICAS DETECTADAS EN BACTERIAS
Proteína ComposiciónContenido por células
Semejanza con eucariontes
HUDímero
subunidades y de 9.000 d.
40.000 dímeros
Histona H2A
H
Dímero subunidades idénticas de
28.000 d.
30.000 dímero
Histona H2B
IHF
Subunidad de 10.500 d.
Subunidad de 9.500 d.
Desconocido
Desconocida
H1Subunidad de
15.000 d.10.000 copias
Desconocida
HLP1Monómero de
15.000 d.20.000 copias
Desconocida
PSububnidad de
3.000 d.Desconoci
doProtaminas
GENÓFORO BACTERIANO
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-Fis-Dan (DNA-binding protein under anaerobic conditions) = YgiP(Nucleic Acids Research, 2010, Vol. 38, No. 11 3605–3618)
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ADN EXTRACROMOSÓMICOPLÁSMIDOS
ADN doble y circular
Replicación autónoma; información no vital
Posibilidad de integración en cromosoma principal bacteriano EPISOMA
- secuencias inserción y transposones
Tamaño variable: 2.000 a 100.000 pbADN bacterianoplásmidos
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FUNCIÓN PLÁSMIDOS
TRANSFERENCIA FACTOR FERTILIDAD (F) ENTRE BACTERIAS CONJUGACIÓN
F+
F-
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FUNCIÓN PLÁSMIDOS
Hfr
factor F integrado en genóforo bacteriano
transferencia de marcadores cromosómicos a F- con elevada frecuencia
transferencia desde punto fijo y en un orden determinado (integración específica factor F)
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FUNCIÓN PLÁSMIDOS
plásmido E. coli resistente a ampicilina (ampr) y tetraciclina (tetr)
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ESTIRPE A ESTIRPE B
cys+, leu+, thr+ cys-, leu-, thr--
medio mínimo con leucina y treonina
medio mínimo con:
-treonina
-leucina
-sin suplementos
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A.- Medio mínimo con leucina y treonina:
-cys+, leu+, thr+
-cys+, leu-, thr-
B.- Medio mínimo con:
- TREONINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu+, thr-
- LEUCINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu-, thr+
- MEDIO MÍNIMO: cys+, leu+, thr+
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
-rasgos característicos gen (nº intrones, posición)
-estructura producto proteico gen FUNCIÓN
comparación secuencias ADN de genes evolución
modificación parte de secuencia ADN de un gen y reinserción
CONSTRUCCIÓN ADN RECOMBINANTE
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
DIGESTIÓN ADN
(enzimas de restricción)
corte ADN en fragmentos para su clonación
cortes escalonados ADN recombinante
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
clonación gen específico
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
diseño plásmidos
como vectores
de clonación de ADN
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”