Tecnia de Reaccion en cadena de la polimeraza

1.- ¿EN QUE CONSISTE LA TÉCNICA DE PCR Y CUANTOS TIPOS HAY?

PCR CONVENCIONAL – Replicación de ADN

Las cadenas de ADN son separadas en dos hebras sencillas.

Los primers se unen por complementariedad a las cadenas molde

La enzima ADN polimerasa, adiciona los nucleótidos correspondientes en las nuevas cadenas sintetizadas por complementariedad de pares de bases.

* El proceso se repite las veces(ciclos) necesarias

Amplifiacion de ARNm

* El metodo es semicuantitativo (electroferesis)

formando

[ ADNc ] – proporcional – [ARN inicial]

1era etapa

formando2da etapa

PCR a Tiempo Real

Comparación de PCR tiempo real y PCR convencional

PCR convencional

Prueba de detección de punto final.

Detección por empleo de geles de agarosa, aparte de la reacción de PCR.

Poder de resolución limitado.

Obtención de resultados en dos pasos (amplificación y detección).

Más tiempo en obtención de resultados.

PCR tiempo real

Prueba de detección de la cinética de la reacción.

Detección simultanea durante el proceso de amplificación.

Detección de cambios mínimos en la secuencias y con cantidades pequeñas del ADN blanco.

Prueba simultanea (amplificación y detección) con menor tiempo de espera.