METODO EXPERIMENTALTamizaje fitoqumico Reactivos Metanol 20ml
Para la prueba Shinoda : HCl concentrado y limaduras de magnesio
Para prueba de alcaloides reactivos : Dragendorff , Mayer , Wagner.
Agua destilada Gelatina Cloruro de sodio Solucin de NaOH 5% Solucin
de cloruro frrico 1% Solucin de acetato de magnesio 0.5% en metanol
Tolueno
Materiales 01 matraz Erlenmeyer 100ml 02 probetas 50 ml 03
goteros 10 tubos de ensayo Gradilla para tubos Pinzas para tubos
Pizeta Procedimiento Se coloca el extracto seco (percolado) en un
matraz Erlenmeyer y adicionar 20 ml de metanol.
El metanol rompe las membranas celulares, extrayendo todos los
metabolitos secundarios presentes en la droga.
Se calienta en bao mara por 7 minutos en ebullicin.
Las extracciones a temperatura de ebullicin aumentan la
extraccin de compuestos significativamente
Se filtra el extracto y se concentra a 15ml
Se divide el extracto obtenido en 5 alcuotas.
I.
Prueba de Shinoda Los flavonoides con el ncleo benzopirona (p.
ej. flavonas, flavonoles, flavanonas, etc.) producen coloraciones
rojizas cuando a sus disoluciones acuosas o alcohlicas se les
adiciona magnesio seguido de HCl concentrado.
II. Prueba Dragendorff , Mayer , Wagner Para comprobar presencia
de alcaloides , al filtrado se adiciona gotas de HCl 1% y se separa
en 3 alicuotas , por separado se adiciona 0.1ml de reactivos
Dragendorff , Mayer , Wagner . Las pruebas son positivas por la
formacin de precipitados.
Wagner
Mayer
Dragendorff
III. Prueba para Saponinas Diluir en un volumen dos veces mayor
y sacudir por 30 minutos. La espuma se mantiene despus de 10
minutos.
IV. Prueba de Taninos A 0.5ml de extracto inicial se le agrega
solucin de cloruro frrico . Los taninos hidrolizables y condensados
se diferencian segn el color o precipitado con las sales frricas ;
los hidrolizables dan coloracin azul-negruzcos y los taninos
condensados dan pardo verdoso.
Tanino hidrolizable azul negruzco
*Con el resto (2.5 ml) se prepara un extracto acuoso a partir
del extracto alcohlico, se divide el extracto en 3 porciones. 1
porcin se agrega 1ml de solucin de cloruro de sodio. 2 porcin se
adiciona solucin de gelatina al 1% 3 porcin se le agrega gelatina
en sal.
(1)
(2)
(3)
Los taninos que son sustancias amorfas solubles en agua que
forman soluciones coloidales , precipitan con gelatina que es una
protena compleja. De esta forma precipitan todos los taninos e
incluso los pseudotaninos a altas concentraciones.
V.
Prueba para Antraquinonas y naftoquinonas Se dividi la muestra
en dos tubos de ensayo , se concentro a sequedad . Al 1 tubo se
aadi 1ml de Tolueno , se agito y 1 ml de NaOH al 5% . Las
antraquinonas liberadas se extraen con tolueno y dan un color
rosa-rojo cuando la solucin se agita
La Rx de Bontragger da positivo: Las antraquinonas que estaban
en la fase superior de benceno , forman estructuras resinantes por
el agregado de NaOH y pasan a esta fase acousa dndole un color
rojizo. Al 2 Tubo se adiciono 1ml de solucin de acetato de magnesio
al 0.5% en Metanol.
9,10 - dioxoantraceno
Al tratar las soluciones que contienen antraquinonas puras con
una solucin de Acetato de magnesio en alcohol, se producen
coloraciones caractersticas dependiendo del patrn de
hidroxilacin de la sustancia. Las sustancias m-hidroxiladas
producen color amarillo naranja, las p-hidroxiladas color prpura, y
las o-hidroxiladas producen coloraciones violeta.
Cuadro Resumen : Marcha Fotoqumica
Prueba Extracto/MeOH
Shinoda Dragendorff Mayer Wagner Agua Cloruro (flavonoide)
(alc.) (alc.) (alc.) (Saponinas) frrico(Taninos) + + (+) + + +
Prueba
Sol. NaCl (+)
Extracto/MeOH
Sol. gelatina 1% +
Gelatina sal(TAN) +
Tolueno/NaOH 5% (naftoquinonas) +
Ac. Mg. (antraquinonas) (+)
POSITIVO + NEGATIVO DUDOSO (+)
ConclusionesLa marcha fitoqumica realizada sobre la muestra
proporcionada de extracto seco - Uncaria tomentosa, se detecta la
presencia de flavonoides ,alcaloides , taninos, saponinas ,
antraquinonas.
ObservacionesAlgunas pruebas no fueron muy eficientes, el
extracto coloreado no permita apreciar con claridad las reacciones
de coloracin.
Bibliografa
http://profe-farmacognosia.blogspot.com/2011/04/tp-cascara-sagradacaracterizacion.html
http://farmacia.udea.edu.co/~ff/manual2008.pdf
http://www.hierbitas.com/principiosactivos/Taninos.htm