izv. prof. dr. sc. Jelka Pleadin Laboratorij za analitičku kemiju Hrvatski veterinarski institut T-2 i HT-2 toksini u ţitaricama i proizvodima na bazi ţitarica proizvedenim u Hrvatskoj XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
27
Embed
T-2 i HT-2 toksini u ţitaricama i proizvodima na bazi ... · PDF fileTOKSIĈNI EFEKTI U LJUDI I ŢIVOTINJA Krvožilni sustav Smanjenje elastičnosti žila, unutarnja krvarenja Aflatoksini
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
izv. prof. dr. sc. Jelka PleadinLaboratorij za analitičku kemiju
Hrvatski veterinarski institut
T-2 i HT-2 toksini u ţitaricama i proizvodima na bazi ţitarica proizvedenim u Hrvatskoj
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
M I K O T O K S I N I
grĉ. rijeĉ „myces“ tj. gljiva + lat. rijeĉ „toxicum“ tj. otrov
sekundarni toksični metaboliti plijesni
ne postoji jedinstvena sistematizacija
Penicillium, Aspergillus, Fusarium
vrste toksikotvornih plijesni vezane uz geografsko područje:
• Aspergillus spp. - tropsko i suptropsko područje
• Penicillium i Fusarium spp. - umjereno klimatsko područje
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Pojavnost mikotoksina u svijetu
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Kontaminacija
ţitarica na polju i
tijekom skladištenja
Kontaminacija
hrane ţivotinjskog
podrijetla
IZRAVAN I
NEIZRAVAN UNOS
U ORGANIZAM
POTROŠAĈA
INTOKSIKACIJA
U LJUDI
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
TOKSIĈNI UĈINCI MIKOTOKSINA DOKAZANI KOD
BROJNIH ŢIVOTINJSKIH VRSTA
1. genetski
2. fiziološki
3. okolišni
citotoksiĉno
hepatotoksiĉno
genotoksiĉno
teratogeno
karcinogeno
mutageno
imunosupresijsko
Mikotoksini
ĈIMBENICI
UTJECAJA
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
ZAKONODAVSTVO O
T-2 i HT-2 TOKSINIMA
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Najveće dopuštene
koliĉine (NDK)
mikotoksina u hrani
Uredba Komisije
1881/2006
Orijentacijske vrijednosti
mikotoksina u hrani za
ţivotinje
Preporuka Komisije
2006/576/EZ
INDIKATIVNE RAZINE T-2 i HT-2 toksina u ţitaricama i proizvodima na bazi ţitarica namijenjenih za
uporabu kao hrana i hrana za ţivotinje pri kojima je potrebno poduzimanje mjera
Preporuka Komisije 2013/165/EU
Preporuka Komisije 2013/165/EU
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Podaci o koliĉinama T-2 i HT-2 u razliĉitim
vrstama hrane nedostatni su za definiranje
NDK
Europska komisija preporuĉila drţavama
ĉlanicama prikupljanje pouzdanih podataka
o variranju godišnjih razina s ciljem
uspostave NDK za razliĉite vrste hrane i
hrane za ţivotinje
PROVEDBA ISTRAŢIVANJA U HRVATSKOJ
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
NEPROCESIRANE
ŢITARICE
(n = 201)
PROIZVODI OD
ŢITARICA
(n = 58)
kukuruz; pšenica;
zob; jeĉam;
kukuruz. pahuljice;
tjestenina;
pšeniĉno brašno;
zobene pahuljice;
jeĉmena kaša
KRMIVA
(n = 191)
KRMNE SMJESE
(n = 91)
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
kukuruz; pšenica;
zob; jeĉam; soja;
krmne smjese za
svinje, telad i perad
ISTRAŢIVANJE POJAVNOSTI T-2/HT-2 TOKSINA (suma T-2 i HT-2)
ELISA metoda za odreĊivanje
T-2/HT-2
kemijski analizator ChemWell
Awareness Technologies 2910
mikrotitracijska ploĉa sa jaţicama
obloţenim antitijelima
standardne otopine analita u vodi
razliĉitih koncentracija
konjugat (peroxidase conjugated)
antitijelo koncentrat
substrat (urea peroksid)
kromogen (tetrametil benzidin)
stop reagens (1M sulfatna kiselina)
pufer za razrjeĊivanje
Komercijalni kitovi sadrţe materijal
za 96 odreĊivanja -
R-Biopharm, Darmstadt, Njemaĉka:
KVANTITATIVNA
METODA
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
ŽitariceIndikat.razine
(µg/kg)
Pozitivno (%)
Mean(µg/kg)
SD (µg/kg)
Min (µg/kg)
Max (µg/kg)
Kukuruz(n = 68)
200 52,3 63,1 36,7 19,1 142,0
Pšenica(n = 61)
100 31,7 34,3 11,2 20,5 56,2
Zob(n = 49)
1000 68,8 102,2 73,6 11,6 304,1
Ječam(n = 23)
200 30,4 51,7 18,6 32,2 82,5
REZULTATI - ŢITARICE
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
ProizvodiIndik. razine
(µg/kg)Pozitivno
(%)Mean
(µg/kg)SD
(µg/kg)Min
(µg/kg)Max
(µg/kg)
Kukuruznepahuljice(n = 16)
75 25,0 23,6 9,23 15,1 36,4
Tjestenina(n = 11)
25 ND ND ND ND ND
Pšeničnobrašno(n = 9)
50 ND ND ND ND ND
Zobenepahuljice(n = 14)
200 42,9 52,1 20,1 34,5 89,4
Ječmenakaša(n = 8)
50 ND ND ND ND ND
REZULTATI – PROIZVODI OD ŢITARICA
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Z A K LJ U Ĉ C I:
utvrĊene koliĉine T-2/HT-2 toksina upućuju na
visoku varijabilnost u pojavnosti ovih mikotoksina
u ovisnosti o klimatskim uvjetima
općenito najveća razina kontaminacije odreĊena
je u zobi i proizvodima na bazi zobi
potrebno je istraţiti odnos zajedniĉke pojavnosti
T-2 i njegovog najtoksiĉnijeg metabolita HT-2
kako bi se sprijeĉila kontaminacija ţitarica s T-
2/HT-2 potrebno je osim adekvatnih agrotehniĉkih
mjera provoditi i pravilno skladištenje te
suzbijanje rasta plijesni
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
s obzirom na moguće štetno djelovanje i sinergistiĉke uĉinke u ljudi i ţivotinja nuţna je provedba sustavnog nadzora odnosno kontinuirana samokontrola SPH i provedba programa drţavnih monitoringa
potrebno je praćenje znaĉajnih ĉimbenika utjecaja, primarno vremenskih uvjeta, na produkciju ovih mikotoksina odnosno na njihove godišnjih razine u ţitaricama
potrebna je provedba istraţivanja o uĉinkovitosti metoda redukcije primjenom razliĉitih postupaka prerade hrane, npr. kuhanja, peĉenja, zraĉenja...
nuţno je ĉim prije definirati NDK za hranu i hranu za ţivotinje
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Z A K LJ U Ĉ C I:
Projekt u suradnji s Hrvatskom
agencijom za hranu
T-2 i HT-2 toksini u ţitaricama
uzgojenim u Republici Hrvatskoj
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Primjena validirane LC-MS/MS tehnike
T-2 i HT-2 toksin
pojedinaĉne
koncentracije
suma
omjer
HPLC - 1260 Infinity, MS/MS - 6410 QQQ Agilent
Technologies, Santa Clara SAD
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija
Provedba projekta:
uzorkovanje 100 uzoraka – kukuruz, jeĉam, zob,
pšenica, raţ i soja; rod 2017. godine
evidencija podataka o uzorcima (hibrid, sorta)
meterološki podaci o temperaturama i padalinama
(DHMZ)
evidencija o uvjetima pohrane uzoraka na OPG-ima
(temperatura i vlaţnost) te ostalih ĉimbenika
Cilj projekta:
ispitivanje pojavnosti T-2 i HT-2 i njihovih omjera u
skladu s preporukom Europske Komisije
izrada znanstvenog mišljenja i procjena rizika za
potrošaĉe
podaci za definiranje NDK u hrani i hrani za ţivotinje
XI Konferencija o sigurnosti i kvaliteti hrane, 29. – 31.05. 2017., Opatija