Spektroskopie-Seminar SoSe19 2 Chromatographie 2.1 Definition am Beispiel Papierchromatographie Chromatographie (griechisch , χρῶμα chroma „Farbe“ und γράφειν graphein „schreiben“) • häufig angewendete Trennmethode • Beruht auf unterschiedlichen Wechselwirkungen der Substanzen (z. B. Pigmente im Filzstift) mit der stationären (z. B. Papier) und der mobilen Phase (Laufmittel) 1 Mobile Phase Stationäre Phase
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Spektroskopie-Seminar SS 2016 1 Sicherheit · Spektroskopie-Seminar SoSe19 2 Chromatographie 2.1 Definition am Beispiel Papierchromatographie Chromatographie (griechisch, χρῶμα
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Spektroskopie-Seminar SoSe19
2 Chromatographie2.1 Definition am Beispiel Papierchromatographie
Chromatographie (griechisch, χρῶμα chroma „Farbe“ und γράφειν graphein „schreiben“)
• häufig angewendete Trennmethode
• Beruht auf unterschiedlichen Wechselwirkungen der Substanzen (z. B. Pigmente im Filzstift) mit der stationären (z. B. Papier) und der mobilen Phase (Laufmittel)
Ultraviolettes Licht:• Fluoreszenz-Indikator auf DC-Platten bringt DC unter UV zum Leuchten• An Stellen, wo sich UV-aktive Substanzen befinden, erscheinen dunkle Flecken• UV-aktiv sind ungesättigte Verbindungen, besonders Aromaten sowie manche Bromide und Iodide• Spots werden mit Bleistift auf der DC eingezeichnet
Spektroskopie-Seminar
2 Chromatographie2.3.5 Sichtbar machen
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Spektroskopie-Seminar
2 Chromatographie2.3.5 Sichtbar machen
Färbereagenzien• Meist Tauchlösungen• Anwendung nach Entwicklung der DC und nach UV• Färben meist aufgrund chemischer Reaktionen selektiv bestimmte Stoffklassen
Reagenz Stoffklasse Prinzip
KMnO4 Oxidierbare Stoffe Entfärbung von KMnO4 durch Reduktion
Ioddampf unspezifisch Ioddampf löst sich in organischen Substanzen
Vanillin + H2SO4 Alkohole / Phenole
Ninhydrin Amine Ninhydrin reagiert zu konjugiertemSystem
Anwendungen der Dünnschichtchromatographie• Reaktionskontrolle:
• Aufarbeitung einer sehr kleinen Probe des Reaktionsgemisches
• Auftragen auf die DC aus organischer Phase• Daneben auftragen: Edukt und Referenz
• Kontrolle von Reinigungsvorgängen:• Nebeneinander Tüpfeln aller bei der Reinigung
(Destillation, Umkristallisation, Chromatographie)erhaltenen Fraktionen sowie des Rohprodukts und derReferenz
Ohne DCs sind wir blind!! 11
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2 Chromatographie2.4 Säulenchromatographie
• Übertragung des Trennprinzips der DC auf präparativen Maßstab• Stationäre und mobile Phase sind die gleichen wie bei DC• Probe wird gelöst und auf eine mit benetztem Kieselgel gepackte Glas-
Säule gegeben
• Laufmittel wird durch Schwerkraft oder Druck von oben nach unten bewegt• Unpolare Verbindungen eluieren früher• Unten werden die getrennten Verbindungen in kleinen Fraktionen
aufgefangen (Reagenzgläser)
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2 Chromatographie2.4.1 Durchführung der Säulenchromatographie
Kieselgel mit Laufmittel aufschlämmenLaufmittel sollte so gewählt werden, dass Rf-Wert der zu reinigenden Verbindung 0.2 bis 0.3 beträgt
Säule befüllen
Kieselgel verdichtenMit Druck packen, mit Schlauch klopfen um Lufteinschlüsse zu verhindern 13
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2 Chromatographie2.4.1 Durchführung der Säulenchromatographie
Laufmittel bis zur Kieselgeloberflächeablassen
Probe auftragenKonzentrierte Lösung der Probe in kreisender Bewegung am Glasrand hinunter laufen lassen
Kieselgeloberfläche darf nicht uneben werden
Vollständig einsickernlassen
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2 Chromatographie2.4.1 Durchführung der Säulenchromatographie
Wie kann man folgende Verbindungen auf einer DCselektiv anfärben?
Skizzieren Sie eine DC, in der diese drei Verbindungen aufgetüpfelt wurden.Wie viele Spots sieht man unter UV-Licht?
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2 Chromatographie2.6 Übungen
Welche dieser drei Verbindungen eluiert zuerst in einer Säulenchromatographie?
Wie müssen Sie das Laufmittel im Vergleich zur DC verändern, um Phenol über eine Säulenchromatographie zu reinigen? 21
Spektroskopie-Seminar
2 Chromatographie2.6 Übungen
Eine verunreinigte Probe wurde in vier getrennten DCs mit PE/EE = 1:1, PE/EE = 2:1, PE/EE = 4:1 und PE/EE = 10:1 als Laufmittel analysiert. Welche ist welche?
Welches Laufmittel würden Sie wählen, um die polarste der Komponenten durch eine Säulenchromatographie zu reinigen?