UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO FACULTAD DE MEDICINA HUMANA MÉTODOS DE LA GENÉTICA HUMANA MAG. MARCO ANTONIO GUZMÁN TELLO
UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYOFACULTAD DE MEDICINA HUMANA
MÉTODOS DE LA GENÉTICA HUMANA
MAG. MARCO ANTONIO GUZMÁN TELLO
. .
4 2
I
II
1 2
1 2 3
HOMBRE
MUJER
NÚMERO DE HIJOS
AFECTADOS
HETEROCIGOTAS
CHEQUEADOSCLINICAMENTE
PROBANDOS
FALLECIDO
ADOPTADO
ABORTO
MATRIMONIO
CONSANGUINIDAD
G. MONOZIGOTAS
G. DIZIGOTICOS
AUSENCIA DEPROGENIE
SECUENCIA DE HOMBRES Y MUJERES
PORTADOR DECARACTER LIGADO AL X
2
METODOLOGÍA EN GENÉTICA CLÍNICAESTUDIO E INTERPRETACIÓN DE HEREDOGRAMAS
Citogenética: Convencional y Molecular. Bandeo de Alta Resolución: HRB Hibridación in situ por Fluorescencia: FISH Reacción en Cadena de la Polimerasa: PCR Hibridación Comparada del Genoma: HCG Screening Bioquímico: Pre natal y Post natal:
Alfafetoproteína, Beta Gonadotrofina Coriónica, y otros para detectar errores innatos del metabolismo (EIM).
METODOLOGÍA EN GENÉTICA HUMANADIAGNÓSTICO CITOGENÉTICO Y MOLECULAR
2
2.3
2.2
2.1
2.332.322.31
2.232.222.21
2.132.122.11
500 1200
3200
NIVEL DE BANDAS POR LOTE HAPLOIDE
Q Q-BANDS QF Q-BANDS BY FLUORESCENCE QFQ Q-BANDS BY FLUORESCENCE USING QUINACRINE GT G-BANDS BY TRYPSIN GTG G-BANDS BY TRYPSIN USING GIEMSA GAG G-BANDS BY ACETIC SALINE USING GIEMSA CB C-BANDS BY BARIUM HYDROXIDE CBG C-BANDS BY BARIUM HYDROXIDE USING GIEMSA RF R-BANDS BY FLUORESCENCE RFA R-BANDS BY FLUORESCENCE USING ACRIDINE ORANGE RH R-BANDS BY HEATING RB R-BANDS BY BRDU
NOMENCLATURA UTILIZADA PARA LA DESIGNACION DE METODOS DE BANDEO
METODOLOGÍA EN GENÉTICA HUMANA MÉTODOS CITOLÓGICOS
Estudio de la cromatina sexual: Presencia del corpúsculo de Barr o cromatina sexual X y presencia del palillo de tambor (neutófilos polinucleolares).
Procedimientos para el estudios de cromosomas humanos: Uso de medios de cultivo sintéticos, soluciones hipotónicas, colchicina, fitohemaglutinina, métodos de bandeo.
DNA RECOMBINANTE
Implica crear a voluntad moléculas de DNA constituídas a su vez por fragmentos de DNA provenientes de diversas fuentes.
Utilización de endonucleasas de restricción (Eco RI reconoce CTTAAG y rompe la unión fosfodiestérica entre las bases A y G).
Utilización de ligasas (ligan o unen dos hebras) y polimerasas (copia con exactitud una secuencia específica de DNA).
ILUSTRACIÓN SOBRE EL USO DE LAS ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN EN EL MAPEO DEL DNA
0 100 200 300 400
Endo aEndo b
Digestión con Endo a Digestión con Endo a + b Digestión con Endo b
100 pb125 pb175 pb
25 pb2 x 50 pb100 pb175 pb
50 pb150 pb200 pb
HIBRIDACIÓN COMPARADA DEL GENOMA (CGH)
• Método que permite producir un mapa detallado de las diferencias entre cromosomas entre células diferentes, sin conocimiento previo de regiones que son amplificadas.
• El método detecta ganancia (amplificación) o pérdidas (deleción) de segmentos de DNA
PROPORCIÓNVERDE/ROJO
2.0 1.0
AMPLIFICACIÓN DELECIÓN
DETECCIÓN DE BLOQUES MAYOR A 5 MB
DNA DE TUMOR DNA NORMAL
MARCACIÓN: BIOTINADETECCIÓN: FLUORESCEÍNA
MARCACIÓN: DIGOXIGENINADETECCIÓN: RODAMINA
ESQUEMA DE LA CGH
GRACIAS