Marta Usó 1 , Elena Sanmartín 1 , Rafael Sirera 2 , Patricia Olmo 3 , Nieves Martinez 3 , Santiago Figueroa 3 , Enrique Casimiro 3 , Miguel Martorell 3 , Ricardo Guijarro 3 , Carlos Camps 3 . (1) Fundación Investigación Hospital General Universitario de Valencia; (2) Universidad Politécnica de Valencia; (3) Hospital General Universitario de Valencia.
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Sanmartín Patricia Martinez€¦ · Carlos Camps SERVICIO ONCOLOGIA MEDICA Carlos Camps Rafael Sirera Eloisa Jantus Ana Blasco Elena Sanmartín Sandra Gallach Alfonso Berrocal Ana
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Marta Usó1, Elena Sanmartín1, Rafael Sirera2, Patricia Olmo3, Nieves Martinez3, Santiago Figueroa3, Enrique Casimiro3, Miguel Martorell3, Ricardo Guijarro3, Carlos
Camps3. (1) Fundación Investigación Hospital General Universitario de Valencia; (2) Universidad Politécnica de Valencia; (3) Hospital General Universitario de Valencia.
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
Hanahan D & Weinberg RA. Cell 144: 646‐674. 2011
INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
VIAS DE ESCAPE DEL TUMORVIAS DE ESCAPE DEL TUMOR
Móleculas Inmunomoduladoras
Células reguladoras
Cambio de inmunogenicidad
• CD4+
• CD25high
• CD127low
• FOXP3+
OBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOS
El objetivo de este trabajo fue analizar la expresión de genes relacionados con la inmunología tumoral mediante
qPCR y correlacionarlos con las variables clínico‐patológicas y pronósticas en pacientes con CPNM en
estadios resecables.
MATERIALES Y MÉTODOSMATERIALES Y MÉTODOSMATERIALES Y MÉTODOSMATERIALES Y MÉTODOS
Muestra tumoral y tejido normal
adyacente preservadol ®
Muestra tumoral y tejido normal
adyacente preservadol ®
Análisis dí i
Análisis dí ien RNAlater® en RNAlater® estadísticoestadísticoGenes analizados:
CTLA‐4, CD4, CD8, CD127, CD25, IL‐10, TGF‐β y Foxp‐3
N=150
Extracción de RNA di l d
Extracción de RNA di l d
Cuantificación de la ió é i
Cuantificación de la ió é i
ratio= eficiencia ‐ΔΔCt
mediante el uso de TriReagent®
mediante el uso de TriReagent®
expresión génicarelativa
expresión génicarelativa
GEN ENDÓGENO : GUS‐B
Análisis cuantitativo y cualitativo (Agilent ®)Análisis cuantitativo y cualitativo (Agilent ®)
Transcripción Reversa
Transcripción Reversa
RTqPCRSondas de hidrólisis
RTqPCRSondas de hidrólisis
PACIENTESPACIENTESPACIENTESPACIENTES
N=150 %
Estadio
N=150 %
Sexo Estadio
I‐II 107 71.3
III 43 28.7
Sexo
Hombre 134 89.3
Mujer 16 10.7
Hábito tabáquico
Fumador 76 50.6
j
Performance Status
PS=0 113 75.4
Ex‐fumador 63 42
Nunca fumador 11 7.4
PS=1 37 24.6
Histologia
ADC 53 35 4ADC 53 35.4
SCC 72 48
Otros 25 16.6Otros 25 16.6
RESULTADOSRESULTADOSRESULTADOSRESULTADOS
SobrexpresadoSobrexpresado
Infraexpresado
ANÁLISIS DE SUPERVIVENCIAANÁLISIS DE SUPERVIVENCIAANÁLISIS DE SUPERVIVENCIAANÁLISIS DE SUPERVIVENCIA
FOXP3FOXP3CD4 y CD8ACD4 y CD8ARATIO FOXP3/CD4RATIO FOXP3/CD4