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Inmunologa
Qu entiende por repertorio inmunolgico? Especifique a nivel
celular y molecular. Qu es la teora de seleccin
clonal y cmo se aplica a la respuesta inmune normal? Discuta
acerca de la relevancia del antgeno en los procesos
de generacin del repertorio de linfocitos B y de memoria
inmunolgica. Se ven afectados los BCR?
1. a Repertorio inmunolgico es el conjunto de
ESPECIFICIDADES del que dispone el individuo para
enfrentar los posibles ataques externos. Esto incluye la
cantidad
de clones diferentes de linfocitos, tanto T como B, otras
clulas
especializadas como macrfagos, clulas NK, clulas
dendrticas, y molculas sintetizadas, expresadas y/o
liberadas
por estas clulas (citoquinas, anticuerpos, quimoquinas,
etc).
1b Teora de seleccin clonal establece que el sistema
inmune especfico est formado por un numeroso conjunto de
linfocitos, cada uno con un tipo determinado de receptor
para
antgenos, nico y exclusivo de ese clon (una sola
especificidad) y se selecciona en cada respuesta el ms afn
al
antgeno. Esta seleccin de clones se basa en las
caractersticas
del antgeno.
Ojo esto es distinto a la maduracin del linfocito B
donde la seleccin es negativa para evitar la autoinmunidad
El antgeno + seleccin de clones por afinidad del antgeno
al BCR y apoptosis de , destino de Cels B memoria y
efectores
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Inmunologa
2) Cules seran las funciones de los organos linfoides primarios
y secundarios? ) Describa detalladamente
el circuito de recirculacin de una clula indiferenciada hasta
ser un linfocito T maduro no activado. Localcelo
anatmicamente dentro del circuito. Qu papel juegan las molculas
de adhesin? Comente el papel de las
clulas troncales para la generacin de poblaciones celulares con
funcin inmune.
2. a Funcin de rganos linfoides
En el SI encontramos rganos linfoides primarios, correspondiente
a aquellos lugares donde se generan las
clulas progenitoras del resto de los linajes. Por ejemplo, en la
medula sea roja producen los progenitores de los L,
maduran los LB y es el lugar de residencia de las clulas
plasmticas (linfocitos B diferenciados generadores de
anticuerpos).
Por otra parte en mucosa y piel se encuentran tejidos perifricos
que constituyen importantes niveles de
organizacin inmune localizados en puntos estratgicos de posible
ingreso de agresores a travs de heridas, va area o
intestinal. En ellos los microbios son capturados por clulas
presentadoras y migran va linftica hacia los linfonodos o
va sangunea hacia el bazo (rganos linfoides secundarios).Ambos
rganos tienen funciones parecidas siendo su
principal diferencia la va de acceso de las clulas
presentadoras.
2. b Circuito de recirculacin
Ahora bien, las clulas producidas en la mdula osea y que salen
hacia la circulacin (LB y LT vrgenes)
recirculan pasando por ambas estructuras secundarias, y en caso
de no encontrar ningn antgeno siguen su camino.
Sin embargo, si topan con alguna molcula extraa ocurre su
transformacin a clulas efectoras especializadas en
secretar anticuerpos (inmunidad humoral) o en search and destroy
clulas raras (inmunidad celular).
Entonces la respuesta inmune (RI) se inicia en los rganos
linfoides secundarios, lugar donde los patgenos que
estn invadiendo son capturados y llevados para que ocurra la
primera interaccin entre las clulas presentadoras
de antgenos y los L vrgenes, gatillndose la RI efectora.
Todos los componentes celulares provienen de una clula
progenitora nica pluripotencial. Esta stem cell es capaz de
diferenciarse a todos los subtipos celulares, posee una baja
capacidad de proliferacin pero un enorme espectro de
diferenciacin. Ese proceso de diferenciacin esta dirigido por
diversos factores qumicos que corresponden a las
citoquinas.
Una vez que la clula madre ha iniciado su diferenciacin se
obtienen los distintos linajes celulares. Por ejemplo,
un linaje de LB comienza a diferenciarse en la misma medula y
una vez que la completa sale a la sangre como una
clula B madura pero virgen. En su membrana posee los receptores
B (BCR, b cell receptor) que son
inmunoglobulinas.
En el caso del linaje de los LT, posterior a su formacin en la
medula su maduracin y seleccin ocurre en el
timo. Este es un rgano que en la infancia es muy relevante, ya
que en l se produce la seleccin de los LT (se
eliminan aquellos que poseen receptores para inmungenos
propios). Sin embargo, en la adultez involuciona porque se
van acumulando clulas de memoria y la proporcin de clulas nuevas
va disminuyendo.
Luego de la maduracin pasan al torrente sanguneo o a la linfa y
circulan a travs de los linfonodos (va linfa),
bazo (va sangunea), mucosas y piel. Finalmente recirculan hacia
los rganos centrales.
Entonces estas dos poblaciones de Linfocitos tienen un origen
comn, pero su proceso madurativo ocurre en
diferentes rganos: los B en la medula osea y los T inician en la
medula pero terminan la maduracin en el timo.
2. C Molculas de adhesin celular.
El direccionamiento de las clulas est condicionado por
receptores presente en cada una de ellas. Estos receptores
tienen como ligandos a protenas que se secretan en lugares
determinados.
Si en el ganglio se empieza a liberar uno de estos ligando,
llamados quimioquinas, estos empiezan a difundir
manteniendo una mayor concentracin en el mismo ganglio. Esto
genera a la larga un gradiente de concentracin que
es captado por los receptores para esas quimioquinas. La clula
que capta este gradiente sufre una modificacin en su
citoesqueleto de tal forma que se dirige hacia el lugar desde
donde proviene esa molcula. As el SI se las arregla para
acercar los elementos celulares, desde zonas de menor
concentracin a zonas de mayor concentracin.
Una vez que llegan al lugar, estas mismas clulas poseen otros
receptores capaces de interaccionar con molculas
de superficie de clulas ubicadas en el ganglio, permitiendo
ahora su retencin. Estas clulas son especficamente los
endoteliocitos de la vnula (ver mas abajo anexo vnulas altas)
que secretan primeramente quimioquinas (para atraer
a los L vrgenes) y luego expresan en membrana el ligando de
selectina-L que es capaz de interaccionar con la
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Inmunologa
molcula selectina-L de la membrana de los linfocitos, reteniendo
y acumulando las clulas vrgenes en el rgano
linfoide. Una vez que se han activado y diferenciado, el patrn
de expresin de molculas de membrana del Linfocitos
cambia y empiezan a adquirir otros receptores de quimioquinas y
receptores de membrana. Esto permite su
desplazamiento hacia otros rganos. Estas nuevas molculas son la
selectina-P, selectina-e que interaccionan con
molculas como ICAM-1 y VCAM-1 presentes en el endotelio de los
sitios infectados.
Entonces el patrn de expresin molecular de los linfocitos vara
segn sea una clula virgen que esta migrando
hacia un linfonodo y es retenida o como un linfocito que ha sido
activado y que sale del ganglio hacia el sitio infectado
para establecerse all. El fundamento molecular de estos procesos
se divide en dos conceptos:
atraccin por quimioquinas que las orientan y desplazan a sitios
determinados,
presencia de molculas en dichos sitios que las retienen.
Cuando las clulas dendrticas estn en la periferia se encuentran
en una condicin inmadura. En este estado
presentan receptores para quimioquinas que las direccionan hacia
sitios perifricos infectados y adems receptores para
otras molculas que las concentran all. Cuando una de estas
clulas capta un patgeno, lo procesa y expone sus ag lo
que lleva a la clula a una condicin madura. En este nuevo estado
el patrn molecular de membrana cambia
absolutamente. Esto vara el direccionamiento que esta clula
tiene, y empieza a migrar hacia el ganglio. Cuando
entran al linfonodo presentan sus ag en las MHC y esperan la
entrada de los linfocitos vrgenes que vienen a travs del
torrente sanguneo, producindose el encuentro tan ansiado que va
a detonar la expansin clonal.
Con esta expansin el L se transforma en un L efector, la
composicin proteica de su membrana cambia y su
destino ahora se encuentra en la periferia, donde deber
controlar y combatir a los patgenos.
3.- Funciones de la inmunidad innata en el organismo. Describa
caractersticas y componentes de la inmunidad
innata, comparndolas con la respuesta inmune adaptativa.
Explique qu son los "modelos moleculares asociados a
los patgenos" ("pathogen asociated molecular patterns" o PAMPs)
y los "receptores de modelos moleculares
asociados a los patgenos" ("pattern recognition receptors" o
PRRs). Seale dnde se encuentran. Indique cual es el
objetivo primordial de su accin en el organismo. D 2 ejemplos de
cmo se obtiene este objetivo.
3.a Funciones de la inmunidad innata en el organismo.
Muy antiguo, estable filognicamente
1.- primeras lneas de defensa
2. Otra gran funcin de la inmunidad innata, es la participacin
en la estimulacin de las respuestas inmunes
adaptativas,
3b Describa caractersticas y componentes de la inmunidad innata,
comparndolas con la respuesta
inmune adaptativa.
Puntos de comparacin: Especificidad, naturaleza de los patgenos,
diversidad de receptores, receptores (afinidad x),
distribucin de receptores (clonal o no clonal), participacin en
barreras fsicas y/o qumicas, protenas sanguneas,
clulas participantes, mediadores solubles, tiempo de respuesta,
localizacin accin
3c Explique qu son los "modelos moleculares asociados a los
patgenos" ("pathogen asociated
molecular patterns" o PAMPs) y los "receptores de modelos
moleculares asociados a los patgenos"
("pattern recognition receptors" o PRRs). Seale dnde se
encuentran. Indique cul es el objetivo
primordial de su accin en el organismo. D 2 ejemplos de cmo se
obtiene este objetivo. (Para contestar
esta ltima pregunta, integrar las acciones de los PRRs con los
PAMPs para describir un mecanismo de
reconocimiento).
Los PAMPs, que son, filogenia, objetivo, ejemplo (flagelina del
flagelo bacteriano peptidoglicano de bacterias
gram-positivas, lipopolisacridos (LPS o endotoxinas) de
bacterias gram-negativas, ARN de doble cadena (algunos
virus de animales y plantas tienen genoma dsARN o ARN convertido
en husped a dsARN, ADN no metilado (varias
de las islas CpG presentan adosados grupos metilo).
Los PRRs Que son, Receptores del husped que se han seleccionado
a travs de la evolucin para reconocer a los
PAMPs., Algunos circulan en sangre y linfa (MBL, Mannose binding
lectin, protena sintetizada por el higado).
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Inmunologa
Tipos de receptores:
o Receptores Scavenger , molculas que se unen a protenas de baja
densidad.(LDL) que ya no puede unirse con el receptor LDL clsico.
Lectinas se encuentran anclados a las membranas plasmticas de
macrfagos y monocitos del husped. Presenta 3 dominios una lectina
simple: extracelular (reconoce
carbohidratos), dominio transmembrana y otro intracelular (con
ITAM(Immunoreceptor Tyrosine-
based Activating Motif), que permite la fosoforilacin).
Receptor de manosa: se expresa en macrfagos y endotelio. Se une
a manosa y fucosa de glucolpidos y glucoprotenas del patgeno,
capturando sustancias extraas y adems
participa del reconocimiento del trfico celular.
Receptor de B- glucano CR3
o Toll- Like Receptors (TLR) son homlogos a una protena de
Drosophila llamada Toll, que participa en la
polaridad dorso-ventral de la mosca. Presenta un dominio
extracelular distinto al humano; un dominio
transmembrana y un dominio intracelular, con 80% de
homologa, lo que indica una similitud en la va de
transduccin.
La principal funcin de este recptor, es ser una seal de
alarma frente a productos microbianos, de manera de
responder con citoquinas en mamferos.
Ejemplos: TLR-2,3,4,5,6,7,8,9.
Cules son las etapas de la reaccin inflamatoria? Seale los
mecanismos inductores de cada etapa. Indique cuales
son los resultados de la reaccin inflamatoria desde el punto de
vista de la defensa orgnica.
Presencia de patogenos, injuria (Por ejemplo necrosis),
presencia de cuerpos extraos desencadenan procesos
inflamatorios.
Lo macrfagos portan PRRs que se activan frente a antigenos los
fagocitan y secretan citoquinas responsables de la
inflamacin.
1. Vasodilatacin y aumento de la permeabilidad:
2. Expresin de molculas de adhesin: 3. Quimiotaxis: Citoquinas
(quimioquinas),
componentes del complemento, productos
bacterianos guian sobretodo PMN al sitio del
dao.
4. Opsonizacin: Hay sustancias (opsoninas) que se unen a la
bacteria, como una
inmunoglobulina, fragmentos del sistema
complemento, entre otras, que facilitan que el
neutrfilo pueda reconocerlos porque tiene
receptores para opsoninas.
5. Fagocitosis: 6. Lisis Celular 7. Migracin de Fibroblastos y
proliferacin
de fibroblastos:
8. Neoangiognesis: 9. Fibrognesis. 10. Formacin y maduracin de
la cicatriz:
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Inmunologa
5.- Mencione las vas de activacin del complemento, sealando las
convertasas que participan y mencione las
molculas sobre las que actan. Indique cules son los 3 grandes
efectos de la activacin del complemento. Explique
cmo ocurre cada uno dando un ejemplo.
a. Mencione las vas de activacin del complemento, sealando las
convertasas que participan y mencione las molculas sobre las que
actan. (Conviene hacer este esquema)
Este sistema puede actiavarse por 3 vas distintas, todas las
cuales desencadenan la sntesis de C3b: la va clsica
(activacin a travs de complejo antgeno-anticuerpo), la va
alterna (activacin por superficie microbiana escasez de cido
silico(inhibidor de complemento) y la ruta de las lectinas
(activacin a travs de reconocimiento de manosa
en superficie microbiana).
Luego de esto, el complemento genera 4 grupos de protenas
(Complejo Destructor de Membrana- Opsoninas-
Fragmentos de C3b y C4b- Anafilotoxinas) que terminan por
eliminar al patgeno.
C3b inicia los pasos finales en la activacin del complemento que
culminan en la produccin de pptidos que
estimulan la inflamacin (C5a) y C9 polimerizado, que forma el
Complejo de Ataque a la Membrana (MAC).
En trminos generales as actan las vas del Complemento:
1.- Iniciacin de la Activacin del Complemento: a travs de la va
alterna (microorganismo), va Clsica
(anticuerpo-antgeno) y va de la lectina (manosa- receptor de
manosa).
2.- Pasos iniciales de funciones efectoras: Todas las vas forman
C3b y C3a , provocando inflamacin (C3a) y una
posterior unin de C3b en los microorganismos, provocando
opsonizacin y activacin de fagocitos.
3.- Pasos finales de funciones efectoras: C3b participa en la
formacin de C5a y C5b necesarios para la
inflamacin y la formacin del Complejo de Ataque de Membrana,
respectivamente, que terminarn por lisar al
microorganismo.
b. Indique cules son los 3 grandes efectos de la activacin del
complemento. Explique cmo ocurre cada uno dando un ejemplo.
El sistema del complemento es uno de los principales mecanismos
efectores del al inmunidad humoral y de la
inmunidad innata.
1. Opsonizacin Ej.: C3b y C4b presentan afinidad por macrfagos y
otros fagotitos, unindose
covalentemente a ellos, produciendo una seal de peligro que
atrae a fagocitos para que el agresor sea
endocitado. Adems estimula la llegada de linfocitos T por la
liberacin de pptidos del patgeno. Asimismo,
estimula a los linfocitos B, simplemente por la presencia del
eptopo + C3b-C4b.
Es decir, la opsonizacin potencia y adereza a los patgenos para
que sean ms irresistibles por el sistema
inmune del husped.
2. Activacin de clulas inflamatorias mediante fragmentos
proteolticos de las anafilotoxinas.
Ej.: C3a, C4a y C5a, tiene afinida por por receptores de
mastocitos, basfilos y neutrfilos, de manera que al
ocurrir la unin, se liberan factores promotores de la
inflamacin, as como aumentar la actividad leucotxica de
neutrfilos.
3. Citlisis medida por la formacin del MAC en las superficies
celulares.
Ej.: Cada una de las 3 vas del complemento, terminan por activar
al Complejo de Ataque a Membrana
(explicado anteriormente), que lisa al agente patgeno.
6.- Molculas y clulas que actan como nexos entre la inmunidad
innata y adquirida. Diferencias cualitativas y
cuantitativas entre la respuesta inmune primaria y secundaria.
Describa la respuesta inmune que se generara en
respuesta a una infeccin viral, mencionando el rol de la
respuesta inmune innata y adaptativa.
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Inmunologa
6A.- Molculas y clulas que actan como nexos entre la inmunidad
innata y adquirida.
NEXOS ENTRE RII Y RIA (celular(CD) y molecular(Quimioquinas y
citoquinas)
Clulas dendrticas (DC):
- activa linfocitos T naive mediante el MHC con el epitopo y el
coestimulador B7 CD8 mediante MHC I y CD4 mediante MHC II
- permiten la activacin de los linfocitos B que reconocen
antigenos proteicos, mediante la activacin de linfocitos Th1.
- Homing Quimioquinas:
Son molculas proteicas, pequeas, vida media muy corta, por esta
razn tienen efectos rpidos no muy lejos del
lugar donde son producidas. Quimioquinas atraviesan el endotelio
y se distribuyen generando un gradiente de
concentracin que va a seguir el leucocito. (homing)
Rantes, MIP-1, MIP-1: atrae DC inmaduras (CCR1, 5 y 6) y clulas
NK (CCR5) SLC: atrae DC maduras (CCR7) a los vasos linfticos
aferentes. Se expresa en el endotelio de estos vasos
IP-10: atrae clulas T activadas y celulas NK (CXCR3)
IL-8: atrae neutrfilos (CXCR )
*entre parntesis los receptores de quimioquinas
DC y macrfagos tisulares activados producen Rantes, MIP-1,
MIP-1, IL-8, IP-10. Th1 vuelve a los tejidos por CCR5 y CXCR3. Th2
vuelve a los tejidos con CCR3, CCR4 y CCR8
Citoquinas: Protenas de bajo peso molecular, pueden actuar de
forma autocrina, paracrina y endocrina.
IL-12 e INF-: promueve la actividad Th1 IL-4, 5 y 13: promueve
la actividad Th2
IL-23, TGF-, IL-6: promueve actividad Th17 (presente en
enfermedades autoinmunes cronicas)
IL-10: citoquina inmunosupresora, promueve anergia clonal (DC
tolerognica)
Complemento:
El C3d unido al antgeno potencia la respuesta del linfocito B
por crosslink (tiene receptores BcR para el antigeno
y receptores CR2 para el C3d)
Macrfagos vigilan los tejidos del cuerpo y cuando detectan un
antgeno por medio de sus PRRs (como los TLRs
por ejemplo), lo fagocitan y liberan citoquinas y quimioquinas,
estas ltimas para reclutar ms clulas, entre ellas, las
clulas dendrticas. Estas ltimas al ser vrgenes son altamente
fagocticas, pero cuando capturan al antgeno maduran,
ya no fagocitan y pasan a ser APC especializadas, cambiando sus
receptores de quimioquinas para ahora poder llegar a
los Ndulos Linfticos regionales por va linftica aferente. Aqu,
presentarn un fragmento de protena del patgeno
en contexto MHC I y II activando (junto con las citoquinas que
liberan) a los linfocitos vrgenes o naive en T CD8 y T CD4
respectivamente (presentacin cruzada).
Tanto los macrfagos como las DC al reconocer a un patgeno
generan una seal intracelular que activara al
factor de transcripcin NF-kB para que se expresen genes
implicados en la respuesta inmune, incluyendo a las
citoquinas, las que inducirn la inflamacin o ayudaran en la
activacin de linfocitos T y B.
DC inmunogenica
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Inmunologa
6B.- Diferencias cualitativas y cuantitativas entre la respuesta
inmune primaria y secundaria.
Respuesta 1 Respuesta 2
Tipo de linfocito T y B predominante
Naive Memoria
Tiempo que demora en responder
5-10 das 1-3 das
Tamao de la respuesta N de anticuerpos (peack)
pequeo Grande
Clase de anticuerpos IgM > IgG IgG IgA IgE
Afinidad anticuerpo Baja Alta
Inducido por Todos los inmungenos Solo protenas antignicas
Dosis requerida Alta Baja
Pendiente de curva de anticuerpos
Achatada Pronunciada (mayor velocidad de produccin de
anticuerpos)
*Ojo que en ambas puede haber RII y RIA
Una respuesta inmune secundaria (2 exposicin al mismo antgeno)
es siempre mayor y ms rpida que una primaria y
esto se debe a que la inmunidad adaptativa presenta memoria
inmunolgica. Esto significa que cuando el organismo se
enfrenta por 2 vez al mismo antgeno, esta mejor preparado para
responder ya que tiene clulas de memoria, que ya
han sufrido cambios de isotipo y maduracin de afinidad, por lo
que se requerir una cantidad mucho menor de
antgenos para desatar una respuesta de mayor intensidad en menos
tiempo. La memoria inmunolgica, necesaria para
que haya diferencias entre la respuesta inmune 1 y 2, solo
existe para antgenos proteicos o T-dependientes. Otra
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Inmunologa
caracterstica de la respuesta inmune 2, es la concentracin de
anticuerpos en el plasma contra antgenos, la cual se
mantiene elevada por mucho ms tiempo.
6c.- Describa la respuesta inmune que se generara en respuesta a
una infeccin viral, mencionando el rol de la
respuesta inmune innata y adaptativa.
El MHC I est presente en todas las clulas
nucleadas (excepto clulas gonadales y algunas
placentarias)
El MHC II est presente en DC,
macrfagos, linfocitos B, clulas endoteliales y
epitelio tmico.
Cuando las clulas fagocitan algo (p. ej.
bacterias), lo presentan en contexto MHC II; y
cuando son antgenos endgenos (creados en la
propia clula, como los virus) los presentan en
MHC I.
Las DC pueden presentar lo que fagocitan
como MHC I y II.
Una vez que la DC adquiere el complejo en
su superficie, puede activar a un linfocito T. Y
este momento es clave para el proceso de
activacin de la RIA, ya que no va a ser la
misma RIA si se trata de un virus o de una
bacteria o de un hongo o de un parsito, etc.
En una infeccin viral, el virus necesita de la maquinaria
celular del husped para poder replicar y sintetizar sus
propios componentes, por lo tanto, este ingresar a la clula y
las protenas virales que queden en el citosol se lisarn
por proteosomas. Los pptidos generados se unirn al MHC I en el
RER para luego ser presentados en la superficie.
Las clulas dendrticas reconocern las clulas infectadas, las
fagocitaran y realizaran presentacin cruzada MHC I y II
en el ganglio. El MHC I activar la respuesta T CD8 (CTL), los
cuales destruirn las clulas infectadas. Los CTL
activados adems liberan quimioquinas (Rantes, MIP-1, MIP-1) para
reclutar monocitos/macrfagos (CCR1 y 5), granulocitos (CCR1 y 3) y
clulas NK (CCR5), amplificando la respuesta inmune local.
7. Describa estructuralmente las molculas del sistema inmune
adaptativo que pueden interactuar con el
antgeno (sea el anticuerpo y receptor de cel T) y refirase a las
clulas en que se encuentra. Analice
comparativamente la estructura y funcionalidad de las clases ms
importantes de anticuerpos. Refirase a las
propiedades efectoras de estos. Describa caractersticas de los
anticuerpos que los hacen tiles en una variedad
de ensayos serolgicos, inmunoterapia y diagnstico. Explique qu
son los anticuerpos monoclonales,
quimricos, humanizados y completamente humanos. Discuta las
ventajas comparativas entre ellos en funcin
de sus usos.
7. 1) Estructuras de molculas que interactan con antgeno del
SIAdaptativo, y en las cl. Que se encuentran:
Receptores :
a) Anticuerpos: Glucoprotenas de 4 cadenas, 2 cadenas pesadas H
(las ms largas), y 2 cadenas livianas L (las ms cortas), la regin
variable abarca a ambas cadenas H y L, en su dominio ms externo el
cual interacta con
su antgeno, estas cadenas estn unidas por ptes. Disulfuro como
lo muestra la fig:
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Inmunologa
Existen distintos tipos de Ig y con ello la estructura vara en
cuanto al nmero de dominios:
La clsica Ig es la G, por tanto sta se estudiar:
Tiene:
Dom. Variable de cdena liviana (Vl)
Dom. Cte. De cadena liviana (Cl)
Dom. Regin Variable pesada (Vh)
Dom. Cte de cadena pesada (Ch), como son 3: Ch-1,Ch-2, Ch-3
Dentro de la Ch existen 5 tipos de cadenas de Ig. Gama, alfa,
psilon, delta, mu, y esta determina el tipo de Ig que
liberar como cl plasmtica, mientras que en la cadena L hay slo 2
tipos de cadenas: kappa o lambda, estn en cualquier
Ig.
a) Anticuerpo
Esta molcula puede ser de superficie o secretada slo en las cl.
Linf. B , por lo tanto la de superficie ser BCR
(receptor de cl. B) y la secretada sern los anticuerpos o Ig
liberados, la diferencia entre estas sta en que el de
superficie
tiene 2 dom. Transmembrana y 2 colitas citoplasmtica, y la
secretada no; esta colita no permite llevar a cabo la activacin
de mecanismos transductores intracelulares, por tanto requiere
del acoplamiento de un molecula que fosforile Ig-alfa e Ig-
beta. Y esto forma el BCR (Ig de superficie + estas dos mol.
Sealizadoras).
En la secretada la mlecula que determina su funcin efectora es
Fc( fragmento cristalizado). Y la regin de
reconocimiento al antgeno se llama Fab que abarca el dom V +
Ch-1 + CL.
b) TCR (receptor de la cl T):
Es muy similar a la Ig. Esta molcula reconoce en
un contexto de compl. mayor de histocompatibilidad, al
antgeno,
Est formado por dominios del tipo de Ig, de 110
aminocidos unidos por puentes disulfuro, formado por
2 cadenas, tambin tenemos una regin variable y una
constante. El reconocimiento est dado por las dos
porciones variables. Tiene una cadena y la otra posibilidad es ,
de esta manera tenemos linfocitos T y linfocitos T . La gran mayora
de los linfocitos T circulantes son y en la periferia, mucosas e
intestinos, tenemos . tiene receptores diferentes.
Linfocitos , los receptores tienen la cadena que se comporta
como la regin variable de la cadena pesada de las Igs,. La cadena
se comporta como la regin variable de la cadena liviana . El
receptor de linfocito T es similar a la regin
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Inmunologa
Fab de la Ig, por lo tanto slo tiene un dominio constante y la
parte gentica es ms fcil. No hay cambios de clase como
en las Ig y los de la cadena incluso estn en otro cromosoma, son
genes totalmente diferentes y . Requieren al igual que las Ig de
molculas que se acoplen y sean capaz activar una respuesta
intracelular, estas son la
CD3.
7.2) Comparar la estructura y funcionalidad de las clases ms
importantes de anticuerpos y sus propiedades
efectoras:
En cuanto a la estructura lo que ms vara es en
relacin al nmero de dominios que tiene la molcula:
La Ig G tiene 3 dominios, la regin bisagra vara
mucho entre ellas.
Ig M tiene 4 dominios, adopta a veces estructura
pentamrica o hexamrica Circula unida a otras cuatro
molculas por una cadena J.
IgD fundamentalemente de mb. muy baja en
plasma
Ig E tiene 4 dominios
IgA: es dimrica , tiene 3 dom. En la regin cte y
est unida entre ella por una cadena j y adems tiene
estructura que la protege de la degradacin proteoltica,
y est estabilizada por una protena secretora, puede ser
monomrica no en secrecin.
En cuanto a sus propiedades efectoras:
Ig G: se encuentra en gran concentracin en el suero; puede
atravesar la placenta,
por lo tanto importante en la inmunidad fetal; muy abundante en
la respuesta inmune
secundaria ; participa en funciones efectoras en el sistema de
complemento, de
activacin de citotoxicidad dependiente de anticuerpo.
IgM: Importante en la respuesta inmune primaria.
IgA: Est presente en las secreciones mucosas; importante para la
inhibicin de
virus, importante como primera barrera del antgeno en una
respuesta inmune
secundaria.
Ig E: participa en los procesos alrgicos, monta respuesta segura
frente a los
parsitos que entran en el cuerpo.
7.3) describa caractersticas de Ig tiles en una variedad de
ensayos serolgicos, inmunoterapia, y diagnstico:
(no cachaba mucho acerca de estos mtodos y no lo encontr en las
clases as es q apliqu google, sorry, si alguien
cacha ms de estas tcnicas que ayude )
a)En ensayos serolgicos encontr Ig G
-la seroconversin comienza con una respuesta de la
inmunoglobulina M (IgM) contra unas protenas, con un cambio
de los anticuerpos de tipo IgM por los IgG , slo encontraba
estudios basados en estas 2 Ig y se deben usar por su funcin
en el desarrollo de la respuesta inmune primaria tanto como en
la secundaria.
b)-La Inmunoterapia (IT) se define como la administracin
gradualmente ascendente de un preparado alergnico
hasta lograr la dosis que permita al paciente una mayor
exposicin al alrgeno identificado sin que se presenten sntomas
alrgicos .uno de los mecanismos usados son:
-
Inmunologa
- Disminucin a largo plazo de niveles de Ig E especfica (por su
efecto en el desarrollo de la reaccin alrgica)
tambin junto a la Ig G4.
C- Diagnsticos:
Ig A antitransglutaminasa para el diagnstico de la enfermedad
celaca (cuando es autoinmuno sd de mala
absorcin)
IgE en procesos alrgicos, asmticos, etc
7.4) Qu son anticuerpos monoclonares, quimricos, humanizados, y
completamente humanos?. Discuta las
ventajas comparativas entre ellos en funcin de su uso.
I)Anticuerpos monoclonares: es un anticuerpo homogneo producido
por una clula hbrida producto de la fusin de
un clon de linfocitos B descendiente de una sola y nica clula
madre y una clula plasmtica tumoral. (Ojo son de clulas
de ratn)
Los anticuerpos monoclonales, son anticuerpos idnticos porque
son producidos por un solo tipo de clula del sistema
inmune, es decir, todos los clones proceden de una sola clula
madre. Es posible producir anticuerpos monoclonales que se
unan especficamente con cualquier molcula con carcter
antignico.
II) anticuerpos quimricos: segunda generacin de anticuerpos
monoclonales, basada en la humanizacin de los
anticuerpos monoclonales de ratn mediante ingeniera gentica,
evitando as el rechazo del sistema inmune al ser
introducidos en el organismo. Son los llamados anticuerpos
quimricos. Un anticuerpo quimrico es creado de tal manera
que incorpora parte animal y parte humana. La parte animal o
hipervariable (un 30%) es indispensable para que el
anticuerpo reconozca la sustancia extraa (antgeno) y la parte
humana (un 70%) es responsable de que el sistema
inmunolgico pueda contribuir a aadir efectividad a su accin.
III) Anticuerpo monoclonal humanizado: significa que contiene un
90% de material humano, lo que reduce la
inmunogenicidad de los anticuerpos, es decir, el rechazo del
sistema inmunolgico. La humanizacin es una tcnica que se
basa en la estructura terciaria del sitio de combinacin con el
antgeno, el paratopo, donde existen unas regiones
responsables de la unin al antgeno mientras que otras zonas slo
sirven de soporte estructural al paratopo. Por lo tanto
las regiones estructurales se obtienen de un anticuerpo humano
mientras que las regiones responsables de la unin al
antgeno proceden del anticuerpo del ratn.
IV)Anticuerpos monoclonares completamente humanos: recin se estn
empezando a producir por tcnicas de
ADN recombinante anticuerpos monoclonales completamente humanos,
que resuelven en buena parte no slo el problema
de la inmunogenicidad, sino tambin el de la prdida de actividad
con la administracin repetida, debida a la formacin de
anticuerpos anti-anticuerpo. Es por esto que sera la tcnica ms
eficaz.
8.- Diferencias estructurales de MHC I y MHC II
-
Inmunologa
MHC I MHC II
Lo presentan en su membrana Todas las clulas nucleadas Slo
CPA
Tipo de antgeno que presenta Antig. Intracelular, y
extracelular
slo por la cl dendrtica
(presentacin cruzada)
Antige. extracelular
Estructura de MHC 3 dominios alfa y
1 beta-2 microglobulina
2 dominios alfa y dos
dominios beta.
Dominio
transmembrana
Slo la cadena alfa
La cadena alfa y la beta.
Dominios que conforman el bolsillo Alfa1-alfa2 Alfa1- beta1
N de aa que reconoce el bolsillo
Tamao del bolsillo
8 a 10aa
Ms pequeo
12 a 16aa
Ms grande
Correceptor en su interaccin con
linf t cd
Dominio alfa 3 interactua con
correceptor de TCD8
Dominio beta2 interactua con
correceptor TCD4
Clase IA (clsicos) - involucrados en presentacin de antgeno -
HLA-A, -B, -C
Clase IB (no clsicos)- HLA-E, -F, -G
Clase II - involucrados en presentacin de antgeno - HLA-DR, -DP,
-DQ
Clase III - componentes del complemento (extra)
b) Explique la diferencia en diversidad gentica de molculas MHC
y variabilidad de los TCR:
Cuando nosotros hablamos del MHC podemos referirnos a la protena
y su estructura pero tambin podemos
hacerlo como un segmento gnico y el MHC es el segmento mas
grande que hay en el genoma humano.
En cuanto a la diversidad gentica de MHC , estn todos en el
mismo cromosoma(6 en humano), en el mismo gen,
salvo la beta-2 microglobulina. Se organizan de esta forma,
primero, los de clase II, luego clase III y despus clase I.
Debido a que heredamos un haplotipo materno y otro paterno,
tenemos 6 posibilidades de molculas de clase I, ya que
el MHC clase I codifica slo cadenas 3 maternas, 3 paternas)
Clase II codifica para y dicen que existen alrededor de 20
combinaciones distintas para estas cadenas y
menos 12 combinaciones distintas.
Las molculas clsicas (HLA A, HLA B, HLA C, HLA DP, HLA DQ, HLA
DR) son muy polimrficas, se podra
decir que nos hace nicos; mientras que las no clsicas, no lo son
tanto. Debido a este gran polimorfismo existen tantos
problemas en el transplante de rganos. Es casi imposible que
existan dos personas con el mismo HLA.
-
Inmunologa
En cuanto a la variabilidad de TCR:
-Hay loci separados que codifican la cadena del TCR, las cadenas
, del TCR y la cadena del TCR. Todos estos
loci contienen segmentos V y J, y slo los loci de cadenas y del
TCR, poseen segmentos gnicos D. Las recombinaciones somticas de los
loci de TCR implican la unin de segmentos D y J, seguido de la unin
de un segmento
V a los segmentos DJ recombinados. Este proceso est mediado por
un complejo enzimtico recombinasa que incluye los
componentes linfocito especficos RAG1 y RAG2.
La diversidad de los repertorios TCRs se genera por las
asociaciones recombinacionales de mltiples genes V, D y J de
la lnea germinal y la diversidad de unin generada por la adicin
de nucletidos al azar en los sitios de recombinacin.
Estos mecanismos generan la mayor diversidad en la unin de las
regiones V y C que forman las terceras regiones
hipervariables de las cadenas polipeptdicas TCRs.
Receptor de celula T
c) es posible que un linfocito B mantenga la especificidad por
un epitopo y cambie su funcin efectora?
- Si ES POSIBLE dado esto se logra a travs del Cambio de Clase o
Switching Isotpico
En linfocito B naive, ser IgM masivamente y en menor medida IgD.
Si el linfocito ha sido expuesto al antgeno
(ya es un linfocito efector), lo que har molecularmente es la
produccin de IgM secretora, transcribiendo hasta la
seal de trmino TT0.
La respuesta inmune no es 1:1, sino que un linfocito que ha
encontrado un antgeno genera una respuesta clonal.
Entonces los hijos de sta son los que atacan, son clulas
efectoras: producen IgM secretora. Otras clulas sin
-
Inmunologa
anticuerpos
RESPUESTA
INMUNE PRIMARIA
RESPUESTA INMUNE
SECUNDARIA
IgM I
gG
das desde contacto con ag
IgG
10
2
embargo, van a tomar el camino de las clulas de memoria. Esta
memoria est asociada, por lo general, al cambio de
la cadena constante para hacer IgG generalmente.
Cuando llega el antgeno, el BCR cambia de IgM a
cualquier otra Ig. Los exones ro abajo tienen una seal
llamada seal S (representada por un crculo negro en el
diagrama; stas llevan el nombre del segmento al que anteceden:
S3, S1, S1, S2, etc.), que viene de switching,
cambio. Esta secuencia de DNA es muy repetitiva de
aproximadamente 5 Kpb. Estas secuencias son complementarias
con la del crculo lila, denominada S. S es ms amplia, por lo que
tiene distintos sitios de afinidad para cada uno del
resto de las seales S.
En la progenie que se convertir en clulas
de memoria, S se aparear con la secuencia S1,
para formar IgG-1 por ejemplo, y dejar al exn
1 contiguo al exn para que el promotor tome todo esto y
desaparezca . Esto est dado por las citoquinas.
Hoy se sabe que el linfocito T ayuda al B. El
linfocito T empieza a secretar citoquinas y,
dependiendo de la naturaleza de stas, se
decidir cul es el apareo que genera esta seal.
Por ejemplo, en presencia de altos niveles de
IFN-, se produce la unin de S a S1, dando paso a la produccin de
1 en el citoplasma, que se unir a cadenas livianas verdaderas, que
ser
la misma de la clula original. Slo se hace un cambio del
acompaamiento de las cadenas livianas. Esta clula ya no
tendr IgM como BCR, sino slo 1. Pero algunas de estas clulas
liberan anticuerpos a pesar de estar en la lnea de las clulas de
memoria, produciendo IgG-1.
Hay otros cambios de clase dependiendo del contexto: IgA, por
ejemplo, abunda en respuestas contra virus. En una
infeccin vrica, entonces, habr tanto IgA como IgG.
Si se grafica la respuesta inmune humoral (anticuerpos v/s
tiempo), la respuesta inmune adaptativa demora
aproximadamente 8 a 10 das, tendremos que frente al primer
contacto del linfocito B con el agresor, los niveles de
IgM suben y bajan, en lo que es conocido como respuesta inmune
primaria. Pero esas clulas que secretan IgG a pesar
de que han cambiado de clase para tomar el camino de las clulas
de memoria, van a hacer que durante la respuesta
inmune primaria haya IgG de todas formas.
En la respuesta inmune secundaria, el sistema inmune se
encuentra por segunda vez con el antgeno. La respuesta
tendr otra forma: ms aumentada en nmero de anticuerpos y
disminuida en tiempo de respuesta. Aqu la molcula
predominante es IgG. Los que comandan la respuesta inmune
secundaria, entonces, son los clones que quedaron como
memoria y que no produjeron IgG durante la respuesta primaria:
estas clulas murieron al transformarse en clulas
plasmticas porque sintetizaron anticuerpos.
Los cambios de clase ocurren slo en las clulas de memoria o
cuando clulas de estas mismas lneas se desvan a
producir anticuerpos durante la respuesta inmune primaria.
9.- Qu significa que un linfocito T requiera una primera y
segunda seales para activarse?
a.- Discuta el papel del mayor nmero de molculas accesorias que
pueda.
Refirase a la composicin y funcin biolgica de la sinapsis
inmunolgica entre la clula T y la clula
presentadora de antgeno.
b.- Menciones detalladamente, al menos tres actividades de ayuda
o colaboracin que dan los linfocitos
T helper a otras clulas del sistema inmune.
-
Inmunologa
9.A Que el linfocito T requiera una primera y segunda seal para
activarse significa que no slo basta con la unin
del MHC-Pptido-TCR (1 seal). Las CD pueden activar LT CD4+ o LT
CD8+, los cuales necesitan la 2 seal para
diferenciarse y comenzar a producir citoquinas y as entrar en
expansin clonal. Adems requieren de molculas
accesorias que ayuden al linfocito T a transducir la informacin
a la membrana.
Los PAMPS en su unin con los TLRs son
esenciales ya que esto permite la maduracin de la
APC que expresar en su membrana la 2 seal B7,
entonces ahora se unir a un linfocito virgen a travs
de la interaccin MHC-TCR y B7-CD28, esto llevar
a la formacin de clulas efectoras las cuales
expresarn en su membrana CD40L.
Cuando
tenemos la
clula efectora y
sta se
encuentra con
una APC ya no
es necesaria la
2 seal. Si esta
APC no
estuviera
activada y no tuviera el B7 en la membrana, la unin CD40-CD40L
inducira la
expresin del B7 para que as esta clula est lista para poder
activar ms LT
vrgenes, e ir as cumpliendo la respuesta. Las clulas T efectoras
pueden activar
por la presencia de CD40L a ms CD, LB o macrfagos. Mientras ms
molculas coestimuladoras haya se producir
una respuesta ms fuerte, si no hay molculas coestimuladoras habr
clulas tolerognicas o anrgicas. En la
interaccin APC-LT se secretar IL-12 por parte de la APC que har
que el LT secrete autocromamente IL-2 que
generar expansin clonal. Los linfocitos T tienen
constitutivamente CD28 que en el momento de la activacin
interactuar con B7.1 y comenzar a producir CTLA4 que ser un
regulador negativo de la respuesta inmune. Mientras
ms activacin hay y mientras ms aumente la respuesta inmune se
producir ms CTLA4 que acta con el mismo
receptor que CD28 pero con accin opuesta. La no interaccin con
antgeno genera clulas dendrticas tolerognicas
que interactan con un LT que llevar a la formacin de LT
reguladores.
Consecuencias para la RIA de la interaccin PAMP-PRR.
- Esta interaccin genera molculas coestimuladoras en las APC
(B7.1 y B7.2 o CD80 Y CD86) - Produccin de seales
patgeno-especfica:
1 Seal: interaccin MHC-pptido-TCR
2 Seal: CD28-B7
-
Inmunologa
- Si la clula blanco es una clula somtica (todas excepto GR) las
CD8+ las matarn (gran parte de la sintomatologa de una enfermedad
viral es por la destruccin de clulas propias que contienen al
no
propio)
- Si la clula blanco es una APC, CD40L del LT la activar para
que exprese mayores niveles de B7. - En ausencia de la seal mediada
por CD28, el LT se hace tolerante o anrgico, quizs por elegir
involucrar a
CTLA4 en su interaccin con la APC, o sea, hay un cambio de
ligando de CD28 a CTLA4.
Molculas Accesorias. (esto no lo preguntan pero no est dems
saberlo, yo me lo saltaria)
Los linfocitos T requieren de molculas accesorias que ayuden al
linfocito T a transducir la informacin a la
membrana. Hay un TCR por cada 2 CD3 (2 , , ) y lo
poseen todos los linfocitos T, tanto los CD4+ o
CD8+.
En la intermembrana hay distribucin de cargas
diferentes, ya sea que el TCR estar cargado + y las
molculas ayudadoras -, entonces entre ambas se
atraen, e interaccionan, esta unin ocurre cuando la
APC se une al LT.
Existen ayudadoras (z) que est entre el TCR. El CD3 y z tienen
dominios ITAM (motivacin de
activacin de tirosina) y comienzan a haber
fosforilaciones. Por cada TCR hay 10 sitios ITAM.
Cuando se une el TCR al MHC II (en este caso) el CD4+ a
travs de su regin bisagra ir a ponerse en contacto con el
segmento de MHC II que est pegado a la membrana de la APC,
esto porque no hay otra forma de unir algo que est tan
lejos.
Cuando esto sucede comienza la fosforilacin de los residuos
de
tirosina y vendrn molculas adaptadoras Lck (quinasa) que
adaptar la fosforilacin y reclutar a Zap-70, la cual se unir
a
parte de las cadenas z, mediante sus dominios de alta
afinidad
con tirosina fosforilada (dominio SH2) y el otro dominio
(SH3)
tiene afinidad por prolina y esta ser un ancla que conectar
con
otro dominio ro abajo.
La presentacin necesita a las molculas coestimuladoras, si
stas no estn pueden caer en estado de anergia que implica
estar activado pero no responder.
Sinapsis Inmunolgica. (repeticin de lo de arriba no
lo saco por si le intereza a alguien)
La interaccin entre un Linfocito T y su APC es muy
estrecha y est compuesta de la interaccin entre MHC-TCR,
de la coestimulacin B7-CD28 y molculas de adhesin como
ICAM1-LFA1, que generan un complejo de unin que tiene
dos zonas definidas, la perifrica donde estn las molculas de
adhesin y se llama B-Mac y la central donde estn MHC-
TCR. Esta sinapsis inmunolgica dura casi una hora en la cual
se producen todas las seales conocidas.
Las conexinas estaran participando en la sinapsis.
Cuando hay activacin del linfocito T aumenta el Ca++
citoslico lo que es importante y se puede medir para saber
si
un linfocito T ha sido activado o no activado, ya que el
Ca++
tambin genera fosforilaciones.
-
Inmunologa
Lo importante es que todas las vas convergen a la
activacin gentica, muchas veces se necesita que todas las
vas se unan para activar un gen.
Funcionamiento del CTLA4:
Puede competir por el B7 y si se une inactiva a la clula
o si se une paralelamente con CD28, generar factores que
inhiben las seales que generan las cascadas para activar
genes.
Cuando estos receptores (TCR) y coestimuladores
(CD28) son utilizados permite que se unan a l unas ligasas
que permiten la unin de ubiquitina que es una seal
proteoltica.
9. B Colaboracin de los linfocitos T helper a otras clulas del
sistema inmune. (MENCIONE DETALLADAMENTE AL MENOS TRES ACTIVIDADES
DE AYUDA O COLABORACION QUE LOS
LINFOCITOS T HELPER A OTRAS CELUAS DEL SISTEMA INMUNE)
Cuando los patgenos estn en vesculas de macrfagos, sern
presentados por MHC II y generarn linfocitos Th1.
La respuesta inmune humoral se da cuando el lugar de ubicacin
son los fluidos extracelulares presentado por MHC II
y genera Th2 (principalmente) y Th1 que activar linfocitos
B.
Ambos linfocitos Th son ayudadores (ambos son CD4+) pero en el
contexto de diferentes patgenos:
- Linfocito Th1: patgenos en vesculas del macrfago, esta ayuda
hace que la bacteria se destruya dentro del macrfago.
- Linfocito Th2: un linfocito B es reconocido y lo activa para
que libere anticuerpos. Los linfocitos T CD8+ (citotxico) que
utilizan para activarse Th1 induce la destruccin de la clula
que contiene al patgeno.
Detalle de lo anterior (la respuesta queda contestada de lo
anterior, pero este es el detalle)
Respuesta inmune celular mediada por Th1.
Cuando el CD4+ interacta con CD o macrfago
cobra vital importancia CD40-CD40L. Con esto habr
estimulacin de estas clulas y produccin de IL-12 que
puede:
1. Estimular CD4+ naives a diferenciarse a Th1. 2. Estimular NK
para que produzcan INF que
actuar en el receptor de INF en la CD o macrfago para que se
produzca IL-12 y en el
macrfago tambin estimula la actividad
patognica.
Fase efectora de Th1:
- Interaccin con el macrfago con MHCII-TCR, CD40-CD40L y el Th1
producir IFN que activar al macrfago pero tambin sirve para
mantener el fenotipo de Th1.
-
Inmunologa
- Puede ayudar a un linfocito B con unin MHCII-TCR, CD40-CD40L,
secrecin
IFN, IL-2 y habr produccin de IgG1 que puede atraer el
complemento, opsonizar,
atraer.
- En la inflamacin produce IFN, TNF, Linfotoxinas que tendrn
interaccin con los
neutrfilos que sern activados e irn a los
tejidos, a su vez TNF tendr accin directa
en las clulas endoteliales aumentando las
molculas de adhesin para que esto se
ponga pegajoso y las clulas puedan
pegarse.
- Hipersensibilidad de tipo retardada (DTH), donde los
responsables son las Th1 de
memoria que generan respuesta inflamatoria. Esto se produce
generalmente por alergia a los metales. Esto se
sabe porque se inyecta un pptido, y si hay respuesta de memoria
se genera inflamacin (generalmente se hace
la prueba con al tuberculina). Se inyecta el antgeno que se
encontrar bajo la membrana basal con clulas de
Langerhans (CD), stas despus reaccionarn con linfocitos T CD4+ y
a las 4 horas ya hay produccin de
selectina E y macrfagos.
Respuesta inmune celular mediada por Th2.
Th2 al unirse a la clula B y en presencia de IL-4 da la
informacin para el cambio de clase IgE, tambin
podra producirse IgG4.
Th2 puede producir IL-5 que acta sobre los eosinfilos
activndolos.
Th2 produce IL-4, IL-10 que actan sobre los macrfagos de manera
opuesta a Th1, porque ac se suprime su
accin.
Son importantes los mastocitos porque producen degranulacin con
la anterior activacin de IgE.
10 Describa los tipos de clulas presentadoras de antgenos, la
importancia de cada una y cmo capturan y
procesan al antgeno. Comente, con la mayor informacin posible,
acerca de las vas de procesamiento y
presentacin antignica de clase I y II. Explique detalladamente
el proceso de presentacin cruzada. En qu tipos
celulares se puede producir? Comente su importancia
biolgica.
10.a Clulas Presentadoras de Antgenos.
-
Inmunologa
Clulas Dendrticas.
- Presentan gran cantidad de receptores. - Cuando fagocitan a un
patgeno, cambian la expresin de molculas de adhesin que las hacen
migrar hacia los
ganglios linfticos.
- Permiten la comunicacin entre RII y RIA - Sin inflamacin no
son capaces de migrar - Su funcin principal es transportar al
patgeno.
Las APC ms especializadas son las clulas dendrticas. Tienen
receptores de membrana que las transportan desde
la periferia al ganglio linftico, pueden hacer presentacin
cruzada:
- MHCI CD8+ - MCII CD4+
Cuando las clulas fagocitan algo, lo presentan en MHCII. Cuando
son endgenos (creados en la propia clula,
como los virus) lo presentan en MHCI.
Sin embargo, las CD pueden presentar algo que fagocitaron en
MHCI (presentacin cruzada).
Las CD estn en todas partes pero en bajas cantidades, siempre va
a una zona de peligro y ac puede estar
inmadura o madura.
- Inmaduras: accin fagoctica - Maduras: fenotipo distinto con
muchas prolongaciones y gran cantidad de MHC.
Son muy difciles de conseguir de la sangre porque son slo el 1%.
Existen mtodos para producirlas a partir de
dao perifrico, entonces a partir de monocitos de una fraccin de
la sangre se pueden utilizar factores de crecimiento
que permitan la diferenciacin a CD que primero sern
inmaduras.
Estas clulas presentan antgeno, pero no son atacadas por los
linfocitos, porque desde la periferia las CD migran al
ganglio, razn por la cual no se puede encontrar con los
linfocitos en la periferia.
La diferencia de las CD inmaduras y maduras es a parte de la
forma y la funcin, los marcadores de membrana que
se pueden medir por densitometra de flujo con Ac monoclonales
contra Ag especficos que emiten fluorescencia, esto
se mide para caracterizarlo.
Las CD se comunican entre s por gap junctions (conexina 43).
Para comprobar si se pasaban informacin la una a
la otra se tea una clula con cierto colorante y se le
microinyectaba colorante de otro color y se vea que este se
expresaba en su clula vecina. Se ha descrito que se puede
traspasar Ag, as una CD perifrica puede viajar al ganglio y
traspasarle el Ag a una clula que reside all.
Macrfagos (fagocitos mononucleares).
- Reconocen PAMPs a travs de PRR (gran cantidad) - Funcin es
reconocer al patgeno en el momento que ingresa al organismo -
Fagocitan al patgeno para eliminarlo - Al activarse secretan una
serie de sustancias (citoquinas) que sirven para atraer ms
refuerzos contra el
patgeno.
Los macrfagos que han ingerido microorganismos exhiben antgenos
microbianos a los linfocitos T efectores
diferenciados. A continuacin, estas clulas activan a los
macrfagos para destruir los microorganismos. Este proceso
es un mecanismo muy importante de la inmunidad celular contra
los microorganismos intracelulares. Los que han
captado microorganismos tambin son importantes en la activacin
de linfocitos T vrgenes para desencadenar las
respuestas primarias contra los antgenos microbianos. Tambin
tienen funciones efectoras en la inmunidad innata y
adaptativa. En la innata consiste en fagocitar microorganismos y
sintetizar citoquinas que reclutan y activan otras
clulas inflamatorias. En la adaptativa, los linfocitos T
estimulados activan los macrfagos para destruir los
microorganismos fagocitados. En la humoral, los anticuerpos
recubren u opsonizan los microorganismos y estimulan
su fagocitosis mediante receptores de superficie para los
anticuerpos presentes en los macrfagos.
Secretan 4 citoquinas principalmente que tienen importancia en
su accin sobre el endotelio vascular:
- TNF - IL-1 - IL-12 - Quimiioquinas
-
Inmunologa
Clulas B.
Los linfocitos B actan como APC para los linfocitos Th durante
la respuesta inmune humoral. Son las clulas
productoras de anticuerpos. En el ganglio, en el folculo
linfoide hay LB reaccionando con un Ag, paralelamente est el
LT reaccionando con el Ag mediante APC. Luego de esto el LB
endocita el Ag, viaja a la zona T, al unirse el LB al LT
podr proliferar generando clulas efectoras y clulas de memoria.
El linfocito B al unirse con el LT nunca sale del
folculo. Los MHC nunca estn solos en la superficie porque son
inestables, entonces siempre tiene que estar con algn
pptido y como no siempre hay Ag, la mayora de las veces est
presentando pptidos propios. El LB se une al Ag, lo
endocita, luego une esta vescula a fagosomas y lo degrada para
unir los pptidos a MHC-II que se pondrn en la
membrana para unirse a LT-CD4+. Cuando un Ag se une por primera
vez a una clula, las posteriores uniones ya sean
a clulas efectoras, a LT-CD4+ sern siempre con el mismo Ag. El
LB con el LT se unen mediante el TCR-pptido-
MHCII, ms la unin del CD40-CD40L y la interaccin del receptor de
citoquinas con IL-2, con esto el LB queda listo
para comenzar a proliferar. El LT al producir IL-2 da seal para
que prolifere el LB. El cambio de clase va a estar
mediado por la activacin del LT por una determinada CD.
10 b.- Comente, con la mayor informacin posible, acerca de las
vas de procesamiento y presentacin
antignica de clase I y II.
MHC-I.
- Formado por cadena con 3 dominios (1,2,3) ms la cadena
-microglobulina que da la estabilidad. - Bolsillo formado por 1 y 2
(formado por cadenas sheet) y sus aniones son por interacciones con
pptidos
del antgeno (9-11a)
- Se expresa en todas las clulas nucleadas (excepto las
gonadales y algunas placentarias) - Cadena no es polimrfica -
Presenta pptidos codificados endgenamente (propias, virales,
bacterias intracelulares). Los patgenos
endgenos estn libres en el citosol.
MHC-II.
- 2 cadenas - ambas polimrficas - Bolsillo 1-1 (ms abierto)
permite que sean pptidos ms grandes (17-30a) - Como ambas cadenas
son polimrficas podemos tener mnimo 6 tipos y mx 12. - Se expresa
en APC (dendrticas, macrfagos, LB) - Presentan pptidos exgenos
(patgenos extracelulares)que pueden encontrarse dentro de la clula
pero en
vesculas.
La presentacin necesita a las molculas coestimuladoras, si estas
no estn pueden caer en estado de anergia que
implica estar activado pero no responder.
PRIMING: es la sensibilizacin de un linfocito maduro no
activado, requiere gran cantidad de antgenos en
contexto de MHC ms coestimuladoras.
-
Inmunologa
Presentacin de Ag Tipo I.
Son protenas intracelulares ubiquinizadas, para ser reconocidas
por un proteosoma que a travs de accin
enzimtica la cortar y los segmentos sern transportados al lumen
del RE por las protenas TAP1 y TAP2 que son
ATP dependientes. Luego este mismo RE est procesando la cadena
de MHC-I que como no est completo es inestable y est siendo
estabilizado por la calnexina, hasta que se una con el segmento 2
microglobulina. Cuando esta asociacin est lista slo le faltar el
pptido y mientras interacciona con ste es estabilizado por la
calreticulina. Los
pptidos antignicos estn cerca de TAP1-2, entonces existe la
Tapasona que se une a ellos y al MHC, para as
acercarlo y permitir la unin al pptido. Ahora se produce la
unin, las chaperonas son liberadas y va Golgi el MHC-I
estable se inserta en la membrana listo para actuar con el
LT.
Presentacin de Ag Tipo II.
Los pptidos exgenos son fagocitados y en el fagosoma comienza a
disminuir el pH y por enzimas comienza a
romperlo. Paralelamente en el RE se estn formando las 2 cadenas
del MHC que es inestable entonces interacta con
una protena llamada cadena invariante, la cual, trae consigo un
segmento clip que se une al bolsillo del MHC para as evitar que los
pptidos endgenos que estn cercanos a TAP1-2 se vayan a unir donde
no deben. Luego los MHC-II
saldrn a travs de vesculas que se encontrarn con los pptidos
exgenos ya procesados, se fundirn las membranas
de ambas vesculas y la cadena invariante ser degradada, no as el
clip que se asociar a otras de las molculas que
venan en su vescula, la HLA-DM que es un MHC no polimrfico con
diferente funcin que la de los MHC comunes.
Cuando la cadena invariante es degradada el HLA-DM se une al
MHC-II y por cambios conformacionales se traspasan
el clip, quedando as el bolsillo libre para unirse al pptido.
Ser ahora transportado a la membrana para presentar al
linfocito T CD4+.
Presentacin Cruzada.
Solo lo puede hacer la celula dendritica
Mezcla de amas presentaciones. Es cuando se reconoce a un
patgeno exgeno el cual ser fagocitado y procesado
en el fagosoma, pero el Ag logra escaparse del fagosoma y queda
libre en el citoplasma y ac ser por enzimas
fragmentados y entrar al RE a travs de TAP1-2 y se presentar en
MHC-I. Esto slo lo pueden hacer las CD.
Ejemplo: Un hepatocito est infectado por un virus, entonces es
reconocido por la CD la cual lo fagocita, lo
procesa y como es exgeno lo presenta en MHC-II, esto activa LT
CD4+, los cuales irn a atacar a los otros
hepatocitos enfermos, pero resulta que estos no tienen MHC-II,
por lo tanto, los LT CD4+ no podrn hacer nada.
Ahora si la CD lo fagocita, lo procesa, se le escapa del
fagosoma, queda en el citosol y entra al RE por TAP1-2 y se
presenta con MHC-I, este activar LT CD8+, los cuales irn a donde
los otros hepatocitos, se unirn a los MHC-I que
si poseen y lo destruirn.
-
Inmunologa
En los genes que estn codificados los MHC tambin estn
codificadas todas las protenas que lo acompaan.
- Estimulan la Presentacin Antignica: IFN principalmente (, ),
TNF; stos inducen la expresin de MHCI-II, TAP1-2, LMP2-17 (est en
el fagosoma). Todas estas citoquinas son expresadas en la
infeccin.
- Inhiben la Presentacin Antignica: IL-10 inhibe la expresin de
MHCI-II
11 Explique brevemente, cmo es posible si cada individuo expresa
un nmero reducido de molculas MHC, est
capacitado para reconocer y reaccionar frente a una gran
variedad de microorganismos. Y por otro lado cmo
explica que, analizando las molculas MHC y salvo casos
excepcionales, seamos entidades nicas. En que
situaciones, desde el punto de vista de la salud, podran tener
importancia estos conocimientos.
El MHC esta constituido por genes altamente polimrficos, este
polimorfismo (son los genes ms polimrficos
sitio de unin de los pptidos. En el caso de MHC clase II, el
mayor polimorfismo est en la cadena beta. La expresin
de los alelos del MHC es codominante. Tantas son las
alternativas allicas para cada locus, que resulta prcticamente
imposible identificar dos individuos idnticos en la composicin
allica de MHC. Cada individuo es nico y
prcticamente irrepetible.
Es importante el MHC en el caso del rechazo de transplantes, de
hecho gracias a los transplantes se descubri y
caracteriz el MHC. Por eso es til tipificar las molculas de MHC
en un individuo para buscar compatibilidad entre
donante y receptor de transplante, tambin es til para la bsqueda
de genes que determinan susceptibilidad o
resistencia a algunas enfermedades.
-
Inmunologa
12 .- En qu consisten las respuestas de tipo Th1 y Th2? Quin es
el responsable del direccionamiento en una u
otra va?
12.a En qu consisten las respuestas de tipo Th1 y Th2
Los linfocitos CD4 Th producirn una respuesta Th1 o
Th2 segn la estimulacin que reciban:( Th1 y Th2 se
diferencian entre si slo por las citoquinas que producen,
pero no morfolgicamente) (Ojo: ambas respuestas generan
celulas de memoria)
La diferenciacin de los linfocitos T CD4 naive a Th1 o
Th2 sta dado por las citoquinas a las que son expuestos. Si
son expuestos a IL-12, secretada por macrfagos se
determina una respuesta tipo Th1, relacionada con la
Respuesta inmune Celular, para ello se producen las
siguientes citoquinas:
IL-2, TNF e IFN gamma, Todos proinflamatorios,
activando macrfagos y linf T CD8+(Citotxicos) , (nota:
El IFN gamma activa al macrfago.)
Una respuesta de tipo Th2, relacionada con la respuesta
inmune
Humoral, y se gatilla por la exposicin de linfocitos TC4 naive a
IL-4
Se producen las siguientes citoquinas:(principalmente)
IL-4 aumenta la presentacin antignica en contexto de MHC II del
linf B
IL-5principal accion es activar eosinofilos maduroe y estimular
el crecimiento y la diferenciacin de eosinofilos, ademas tiene un
efecto en
los linfocitos B, estimula proliferacin y cambio de isotipo a
IgA
IL-6 estimula la sntesis de proteinas de la fase aguda por parte
del higado. En los linfocitos B estimula la proliferacin de
celulas
plasmaticas(productoras de anticuerpos)
IL-10 inhibe la respuesta Th1(inhibe IL-12), inhibiendo la
expresin de MHC I y II y varias proteinas de la presentacin clase
I(TAP
1 y 2)
Activan al linf B que proliferar y producir anticuerpos
-
Inmunologa
12
b.-
Quien es el responsable del direccionamiento en una va u
otra.
Th1 o Th2 una decisin multifactorial:
La diferenciacin selectiva de un precursor CD4+ a un TH1 o Th2
se establece durante el priming(sensibilizacin de un linfocito no
maduro) inicial de esa clula y est influenciada por una variedad de
factores extracelulares uno de
los cuales es la cantidad de Ag durante el priming
La fuente de coestimulacin es otro factor crtico en el proceso
de diferenciacin de Th1/Th2. El inductor ms efectivo de la
diferenciacin es la liberacin de citoquinas durante el priming de
las clulas
precursoras.
As: IL-12 e INF- promueven la diferenciacin a Th1 IL-4 promueve
la diferenciacin a Th2
El responsable de la coestimulacin es la clula que produce la
respectiva interleuquina ( CPA y otras)
Para respuesta Tipo Th1 : Cels Dendritas y macrfagos.
Para respuesta Tipo Th2 : Cels Dendritas y mastocito .
Nota:
Las clulas dendrticas pueden tener fenotipo y funciones
distintas de acuerdo a los estmulos que recibieron en la
periferia (de los ligandos d los PRRs), por sto hay poblaciones
q inducen diferenciacin d LT a Th1 (que produce un
tipo d citoquinas), asociado a la respuesta inmune celular,
activacin de macrfagos, Th2 (que produce otro tipo d
citoquinas), asociado a la respuesta inmune humoral y a Th17
(que produce otro tipo d citoquinas), asociados a
respuesta autoinmune.
13.- Haga una discusin comparativa entre mecanismos de activacin
y citotxicos, de linfocitos T citotxicos, NK y
el sistema de complemento.
Linfocitos T citotxicos: tipo de linfocito T cuya principal
funcin efectora es reconocer y destruir las clulas
husped infectadas por virus u otros organismos intracelulares.
Expresan CD8: El CD8 es una molcula de superficie
que reconoce el dominio alfa 3 del MHC clase I que les permite
activarse para la respuesta efectora. La activacin
(por previa presentacin de clulas dendrticas) la hace reconocer
como enemigo a aquellas clulas que expresen el
F(x) efectora de celulas Th2 F(X) efectora de la celulas Th1
-
Inmunologa
MHC I ms el antgeno previamente presentado. Recordar que
necesita de CPA para activarse y son parte de la
respuesta inmune adquirida
NK: Las clulas natural killer (NK) son una tercera poblacin de
linfocitos, diferentes a los linfocitos B y
linfocitos T y pertenecen al sistema inmune innato (SII).
Provienen de la mdula sea y se encuentran en la sangre y
tejidos linfticos, especialmente el bazo; se caracterizan
morfolgicamente por ser mayoritariamente linfocitos
grandes con grnulos citoplasmticos. Su fenotipo caracterstico en
reposo es: TCR-, BCR
-, CD3
-, CD16
+, CD56
+; es
decir, no presentan los receptores de los linfocitos del sistema
inmune especfico (SIE). Son una sub-poblacin
altamente heterognea, cuyas principales funciones son la
citotoxicidad y la secrecin de citoquinas. Las clulas NK
se activan a travs del contacto con clulas sensibles o clulas
blanco o por la accin de mediadores solubles,
principalmente citoquinas. Importante en respuesta a infecciones
virales y tumores. Destruyen las clulas infectadas
por microorganismos mediante mecanismos lticos directos y a
travs de secrecin de INF- . No expresan receptores de antgeno de
distribucin clonal como BCR o TCR y su activacin esta regulada por
una combinacin
de receptores de la superficie celular que son estimuladores e
inhibidores. La seal inhibidora es cuando un receptor
del NK interacta con un MHC clase I (importante para no destruir
clulas propias. En tumores disminuyen los MHC
I de las clulas infectadas). La seal estimuladora es cuando un
receptor de la NK interacta con una molcula que se
expresan en las clulas infectadas. Si la seal activadora es
mayor que la inhibidora, va activarse el NK destruir a
su clula blanco igual como lo hace el linfocito T citotxico
liberando perforinas (rompen la membrana celular)
y gramzinas (entran a la clula gracias a lo hoyos dejados por
las perforinas y activan a caspasas induciendo
apoptosis). NK tambin tiene un receptor CD16 o FcR, que se une a
una IgG, que previamente estaba unido a una clula infectada,
produciendo la Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos
(ADCC).
Sistema de complemento: El sistema de complemento se activa
mediante:
- Ruta clsica: se activa con la unin a antigeno- anticuerpo
(seal de peligro). Una IgM pentamerica o 2 IgG activan a C1q. C1r
se autoactiva cuando la porcin globular de C1q interacta con los
fragmentos Fc de los complejos
inmunes. Las dos molculas de C1r activado activan a las dos
molculas de C1s. C1s, en el complejo activado de C1,
digiere enzimticamente y activar al prximo componente de la va
clsica, C4. Al activar a C4 se produce C4a y C4b.
C1s tambin va a digerir a C2, produciendo C2a y C2b. C4b, que
esta unido a membrana, se une a C2b, formando un
complejo el complejo C4b2b que corresponde a la C3 convertasa de
la ruta clsica. Esta convertasa acta sobre C3
(componente ms abundante en el suero y el ms importante de todos
los componentes del complemento) generando
C3a y C3b. Esta C3b se une a la C4b2b, generando la C5
convertasa (C4b2b3b) de la va clsica.
- Ruta de las lectinas: se activa por manosa u otros azucares
(MBL, es homologo a C1q) o por cido lipoteicoico (Ficolinas) Cuando
MBL se une a una superficie patgena, MASP-2 (MASP-1 y 2 homologas a
C1r y
C1s) puede digerir a C4 y C2. Como continua la cascada es igual
a la ruta clsica.
- Ruta alterna: se activa en presencia de agresores que cometen
el error de no poseer una cantidad alta cido silico en sus
membranas, a diferencia de las nuestras que expresan este
componente en gran medida. Seal
de peligro: poco o nada de cido silico en membranas celulares.
C3b, (la iniciacin de la va alterna sobre una
superficie requiere que C3b este ya presente y en una
conformacin adecuada. Esta se origina de la siguiente
manera: C3 es continuamente hidrolizado a una baja velocidad
para formar una molcula metaestable C3
(H20), C3b simil C3(H2O) une a factor B en solucin y lo hace
susceptible a la activacin por el factor D. Se genera la C3
convertasa de fase fluida (C3(H2O)Bb) puede clivar a C3, generando
C3b que se puede unir a
superficies adyacentes. Como resultado de esto, C3b es
continuamente depositado, en pequeas cantidades,
sobre todas las clulas, tanta forneas como propias. C3b unido a
estas membranas propias no-activadoras
(porque hay cido silico) es rpidamente inactivada por el factor
I (regulador negativo) e H (cofactor de I)) en
fase fluida o unida a una superficie activadora une a factor B.
Factor B es ahora susceptible de ser digerido por el
factor D (una serino proteasa). Ba se libera y queda formado un
complejo C3bBb, C3 convertasa de la va
alterna. C3bBb digiere a C3 en igual sitio que usa la C3
convertasa de la va clsica (C4b2b). El C3b depositado
sobre una superficie activadora, formar convertasas de C3
estables (C3bBb) que clivar ms C3, generando un
loop de amplificacin, que rpidamente cubre la superficie con
C3b.
La C5 convertasa de la va alterna esta compuesta de dos molculas
de C3b, una que se une a Bb, en el
complejo C3bBb, y un C3b adyacente unido que acta como receptor
para C5 C3bBbC3b C3b2Bb. El sitio
donde Bb corta a C5 es idntico al sitio que usa C2b de la va
clsica. Una vez generado C5b, el resto de la
cascada es idntico a la va clsica.
-
Inmunologa
Las C5 convertasas de la va clsica (igual a la de la va de las
lectinas) y de la va alterna, va a activar a C5
generando C5a y C5b. C5b es el primer componente del complejo
destructor de membranas (MAC). MAC est
compuesta por C5b, C6, C7,C8,C9, los cuales forman un poro para
lisar clulas.
Convertasas:
Ruta clasica y lectinas:
- C3 convertasa: C4b2b
- C5 convertasa: C4b2b3b
Ruta alterna:
- C3 convertasa: C3bBb
- C3 convertasa de fase fluida: C3b(H2O)Bb - C5 convertasa:
C3bBbC3b
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Inmunologa
14.- Explique los procesos de seleccin positiva y negativa Cmo
afectan a las clulas T y B? Explique los
mecanismos involucrados en la mantencin de la tolerancia
perifrica.
14 a.- Explique los procesos de seleccin positiva y negativa Cmo
afectan a las clulas T y B?
Seleccin positiva: es la supervivencia de aquellos clones de
linfocitos T que estn madurando, que
reconocen este complejo MHC pptido con baja afinidad o con
afinidad intermedia. Si el linfocito T es
incapaz de reconocer ese complejo, la seal falla y el linfocito
muere por apoptosis. Los que se unen viven,
porque tienen que reconocer al MHC tambin, deber reconocer lo
ajeno en contexto de lo propio.
Seleccin negativa: ocurre cuando el linfocito T reconoce este
complejo MHC pptido con muy alta
afinidad. Quiere decir que ese pptido es propio y que el MHC
tiene tan alta afinidad que igual puede ocasionar
problemas y cuando eso ocurre, esos linfocitos son eliminados
por apoptosis. Los que se unen mueren, podran
reconocer los MHC como ajenos.
Agregar que los linfocitos B solo tienen seleccin negativa, ya
que ellos no tienen que reconocer el MHC, a
ellos no le presentan los pptidos, lo reconocen solitos(por
receptor de cel B que es un anticuerpo, a lo mas
pueden presentan antgeno por MHC I).
14.b Explique los mecanismos involucrados en la mantencin de la
tolerancia perifrica. No todas las protenas de nuestro cuerpo se
expresan en timo y mdula sea. Hay protenas que son tejido-
especficas. Y para hacernos tolerantes a estas, es necesario que
acte la tolerancia perifrica.
Los mecanismos que mantienen la tolerancia perifrica son 4:
1. Falta de coestimulacin 2. Regulacin por FAS/ FasL 3.
Ignorancia Clonal 4. Presencia de clulas reguladoras.
1. Falta de coestimulacin La disminucin de la inflamacin es una
buena manera de disminuir la coestimulacin. Ya que las clulas
dendrticas siempre presentan antigeno, pero la falta de
coestimulacin permite que no exista segunda seal, y se sabe
que no basta con solo el reconocimiento.
2. Regulacin por Fas/ FasL FAS es un receptor de membrana que
tiene dominios activadores de apoptosis. Este se expresa en los
linfocitos
T activados. El FAS L se encuentra en las clulas de tejidos.
Entonces la Unin a FAS lleva a la apoptosis del
Linfocito. Hay regiones especializadas del cuerpo que expresan
constitutivamente, FasL porque no permiten que exista
respuesta en esas zonas.
3. Ignorancia Clonal Por falta de acceso al antigeno, como
ocurre en tejidos especiales en los cuales existen barreras
histolgicas,
con paso celular restringido, donde no entran linfocitos T. Como
en el Ojo.
4. Presencia de clulas reguladoras. Hay tres tipos de estas
clulas:
- Naturales: clulas que expresan CD4+ y CD25+ y Foxp3+ - TH3 -
TR1 Las naturales tienen 2 mecanismos de accin, actan por contacto
clula clula y por liberacin de citoquinas. El contacto clula clula,
se explica por que hay protenas tejido especifico, que en el timo
son expresadas en el
corpsculo de Hassal entonces, cuando en la periferia se
reconozcan estas protenas hay linfocitos que al reconocerla
no van a reaccionar y no van a producir respuesta.
La accin por medio de citoquinas se explica porque las clulas
estas, adems de unirse a las clulas de tejido
especfico, liberan citoquinas inhibitorias, como la IL-10 que
afecta a toda la vecindad. Y si algn Linfocito T se
activa, se Inhibe por esta.
Los otros dos tipos celulares son regulatorias perifricas y se
generan bajo condiciones especificas, por e gradiente
de citoquinas generado por las naturales. Entonces se
generan:
- TR1 y secretan IL10, y estos pueden ser CD4 o CD8 - TH3 que
secretan TGF- y solo pueden ser CD4.
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Inmunologa
15.- Describa las estrategias convencionales y modernas para la
generacin de vacunas.
Vacunas = Inmunidad activa: genera respuesta inmune.
Vacuna: Producto biolgico obtenido en forma natural o
artificial, capaz de inducir inmunidad activa en un
hospedero susceptible y en consecuencia lo protege de un nuevo
desafo con el microorganismo silvestre o
transformaciones malignas.
Vacunas de 1era generacin:
1. Vivas: naturales o atenuadas:
Vivas naturales: muy poco utilizadas por problema de seguridad.
La nica conocida es la vacuna contra la
viruela (Jenner).
Vivas atenuadas: se hace crecer al organismo patgeno en
condiciones no ptimas (ej: temperaturas extremas,
etc), lo que induce que se produzcan mutaciones aleatorias en el
sector del DNA que origina la virulencia. O sea se
elimina la virulencia por una mutacin al azar. Son muy buenas
porque simulan una infeccin de verdad solo que no
tienen virulencia. Los problemas de seguridad: posibilidad de
reversin a la forma virulenta (Ej polio), peligrosa en
inmunosuprimidos, hipersensibilidad a Ag virales.
2. Muertas: conservan su repertorio antignico, eficacia menos
reproducible (no todas las vacunas van a ser
iguales, pueden tener diferentes pptidos), proteccin
generalmente ms breve, no son suficientemente
inmunognicas (necesario adyuvantes), baja respuesta inmune
celular.
Vivas atenuadas Muertas
3. Toxinas inactivadas (Toxoides): Proceso de desintoxicacin no
reduce la inmunogenicidad de las molculas relevantes (es muy difcil
sacarles el efecto toxico) Para alcanzar un nivel aceptable de
proteccin, se requiere de
dosis mltiples. Lo que hay y es muy til contra toxinas, son Ig
que las neutralizan.
4. Fragmentos subcelulares: Utilizan una parte del patgeno,
menos peligro de induccin de respuestas
indeseadas.
5. Conjugadas: son como el hapteno ms la protena carrier. Se
induce una respuesta contra un antgeno que no
genera respuesta inmune gracias a una protena que si es
inmunogena. Eficaces en el caso de bacterias encapsuladas.
No pueden ser reconocidas por el sistema inmune inmaduro, pues
estos microorganismos resisten la opsonizacin
por el sistema del complemento.
IInnttrraammuussccuullaarr OOrraall,, nnaassaall
RReessppuueessttaa AAcc
-
Inmunologa
6. Antiidiotipo: se le inocula una toxina, por ejemplo a un
conejo. Este generara Ig contra esta toxina. Se le corta
el fragmento Fab a este Ig y se le inocula a un caballo. Este
caballo generara Ig contra este Fab. Luego se le corta a la
Ig de caballo su Fab. Y este Fab se le pone al humano, es como
generar una toxina (es igual en forma) pero sin su
toxicidad.
Vacunas de 2da generacin: Vacunas de segunda generacin;
generadas biotecnolgicamente, por sntesis
peptdica o por la metodologa del DNA recombinantes (ingeniera
gentica). Se puede mejorar las caractersticas
inmunognicas de una protena (solubilidad, estabilidad, vida
media, etc.)
1. Eliminacin de un gen dominante de patogenicidad: se elimina
especficamente el DNA que produce
virulencia.
2. Vacunas de protenas recombinantes: Se inserta un gen en el
material gentico (DNA dentro de un plasmidio,
como vector) de una bacteria, obligando a este a expresar una
protena extraa antignica, utilizable como antgeno. Desventajas: son
protenas puras, alto costo, poco inmunognicas, debe usarse
adyuvantes, estimula
fundamentalmente respuesta humoral y muy poco celular, no
autoinmunidad.
3. Vacuna de DNA desnudo: el vector debe tener un promotor
fuerte de expresin viral, origen de replicacin,
secuencia inicial y de trmino de la transcripcin, resistencia
antibitico, sitio de clonamiento, motivos CpG.
Ventajas: fcil de construir y producir, no tan elevado costo,
material puro (no hay necesidad de expresar o purificar
los antgenos in vitro, ni de usar coadyuvantes, seguras: no
causan la infeccin y termoestables, la persistencia in vivo, por
perodos prolongados, induciendo respuestas duraderas, respuesta
inmune eficaz. Induccin de inmunidad
humoral y celular, incluyento LTC especficos, procesamiento in
vivo del producto del gen, acercndose lo ms
posible a su conformacin nativa, una sola inmunizacin permite el
ingreso del material gentico a las clulas.
Desventajas: integrarse a cromosomas, por mutagnesis de
insercin, lo cual no ocurre con las vacunas de RNA,
aunque stas son ms inestables, inducir tolerancia y auto
inmunidad por la persistencia antignica, autoinmunidad,
por influencia del promotor viral fuerte, en la expresin de
genes del hospedador.