REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE UNIVERSITE D’ORAN ES SENIA FACULTE DES SCIENCES DEPARTEMENT DE BIOLOGIE LABORATOIRE DE PHYSIOLOGIE VEGETALE MEMOIRE Présenté par Melle MOUFFAK Amina-Afaf Pour obtenir LE DIPLOME DE MAGISTER Spécialité : Biologie végétale Option : Ecophysiologie végétale Intitulé Étude analytique de la variabilité de la proline, des sucres solubles totaux et des protéines totales solubles, sous stress salin chez Vigna radiata .L Wilczek Devant le jury composé de : Pr. BENSOLTANE A. Président Université d'Oran Pr. SLIMANI.M Examinateur Université d'Oran Dr. BENNACEUR M. Examinateur Université d'Oran Pr. BELKHODJA M. Rapporteur Université d'Oran
106
Embed
REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET ...AMINA Résumé L'étude vise au comportement éco physiologique de la plante de Vigna radiata .L Wilkczek, via les concentrations de quelques
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Étude analytique de la variabilité de la proline, des sucres solubles totaux et des
protéines totales solubles, sous stress salin chez Vigna radiata .L Wilczek
Devant le jury composé de : Pr. BENSOLTANE A. Président Université d'Oran Pr. SLIMANI.M Examinateur Université d'Oran Dr. BENNACEUR M. Examinateur Université d'Oran Pr. BELKHODJA M. Rapporteur Université d'Oran
REMERCIEMENTS
Je remercie "Allah" qui m'a aidé à réaliser ce mémoire."allahoma laka alhamdou
kama yambaghi li djalali wadjika wa adhimi soltanek."
Ce travail a été réalisé au laboratoire d’Ecophysiologie Végétale de l’université
d’Es Senia Oran sous la direction du Professeur BELKHODJA M., que je remercie pour
avoir accepté de diriger ce travail malgré toutes ses lourdes charges, qu’il soit assuré de ma
profonde gratitude. Merci pour vos orientations, conseils et votre patience pour que ce
travail aboutisse.
J'exprime ma reconnaissance à Mr BENSOLTANE professeur à l’université d’Es
Senia Oran, qui me fait l'honneur de président le jury.
J'adresse mes remerciements à M BENNACEUR Maître de conférence à
l’université d’Es Senia Oran pour avoir si aimablement accepté d'examiner mon travail.
Je voudrais également remercier M.SLIMANI Professeur à l’université d’Es Senia
Oran pour sa participation à ce jury en examinant ce travail.
Enfin je n’oublierai pas de remercier Melle SOUALMI Nadia. Ingénieur
d’application au laboratoire d’Ecophysiologie Végétale de l’université d’ES SENIA son
aide, sa gentillesse et sa sympathie ainsi qu'à tout mes collègues et mes amies.
Dédicace
A mes parents qui m'ont entouré par leurs amours et leur tendresse, qui
m'ont aidé, soutenu, encouragé et qui vivent, mes ambitions, mes rêves, mes
joies et mon bonheur, je dédie ce mémoire.
Sans oublier à tous ceux que j'aime.
AMINA
Résumé
L'étude vise au comportement éco physiologique de la plante de Vigna radiata .L
Wilkczek, via les concentrations de quelques marqueurs biochimique : la proline, les
sucres solubles totaux et les protéines totales solubles, en condition salines par deux types
de traitements salins, au NaCl et au NaCl +CaCl2, aux concentrations salines suivantes : 50
meq.l-1, 100 meq.l-1 et 150 meq.l-1.
Nos résultats montrent une accumulation de la proline, dans différents organes;
cependant, cette accumulation est importante aux niveaux des tiges des plantes stressées au
NaCl et au NaCl+ CaCl2.Par ailleurs, elle est significative aux niveaux des tiges(145,38
µg.ml-1 par rapport à 105,43 µg.ml-1) et des racines (128,26 µg.ml-1 par rapport à 90,21
µg.ml-1) des plantes stressées au NaCl+CaCl2 par rapport aux plantes témoins, à la
concentration saline 150 meq.l-1. La teneur en proline est corrélée positivement au stress
salin au NaCl : au niveau foliaire (r=0,078), au niveau des tiges (r=0,238) ainsi qu’au
niveau racinaire (r=0,279). Cette teneur est aussi corrélée positivement avec le stress salin
au NaCl+CaCl2 au niveau foliaire (r=0,203), au niveau des tiges où elle est
significative(r=0,452, p≤0,05) et au niveau des racines (r=0,251).
Les sucres solubles totaux s'accumulent à leurs tours dans différents organes ; mais
le plus aux niveaux des tiges. Cependant, cette accumulation reste non significative, pour
les deux traitements salins. Cette teneur est corrélée positivement au stress salin au NaCl
dans deux organes, les feuilles (r=0,110) et les tiges (r=0,288), par contre au niveau des
racines cette corrélation est négative (r=- 0,370).Le stress salin au NaCl+CaCl2 montre
une corrélation négative des sucres totaux foliaires (r=-0,392), tandis qu’au niveau des
tiges et des racines, cette corrélation est positive (r=0,189) et (r=0,277) respectivement
L'accumulation des protéines totales solubles est plus importante aux niveaux des
feuilles, cependant elle est significative qu'au niveau des racines à différentes
concentrations salines de NaCl comparée aux plantes témoins (99,00 µg.ml-1, 97,50 µg.ml-
1, 111,50 µg.ml-1 des concentrations salines 50 meq.l-1 100 meq.l-1 et 150 meq.l-1
respectivement en comparaison avec la valeur 71,25 µg.ml-1 des témoins). Toutefois on
enregistre une accumulation significative à 150 meq.l-1qui est de 89,25 µg.ml-1 et une
diminution significative à 100 meq.l-1(37,50 µg.ml-1) concernant le stress salin au NaCl +
CaCl2. En outre, cette teneur est corrélée positivement avec le stress salin au NaCl, au
niveau des tiges (r=0,427) et des racines où elle est hautement significative (r=0,818,
P≤0,01) par contre elle est corrélée négativement au niveau des feuilles(r=-0,135). Cette
teneur est corrélée positivement au stress salin au NaCl + CaCl2 au niveau foliaire
(r=0,438) et négativement au niveau des tiges (r=-0,054) et au niveau des racines où cette
corrélation est hautement significative (r=-0,842, P≤0,01)
CBF/DREB C-repeat-binding factor/dehydration-responsive binding protein
CDRK Calcium-dependent protein kinase.
Cl- Chlore
CO2 Dioxides de carbone
CO3-2 Carbonate
COR Cold-responsive protein.
Cr Chrome
DS/m Décisiemens par mètre
ECe L’activité électrique de la pâte du sol
FAO Organisation des nations unies pour l’alimentation et l’agriculture
Fig Figure
GlyBet Glycine bétaine
GR Glutathione réductase
GST Glutathion –S-transférase
Ha Héctard
HSF Heat shock factor
HSP Heat shock protein.
K+ Potassium
LEA Late embryogenesis abundant.
M mho/cm Millimhos par centimètre
MAPK Mitogen-activated protein kinase
Mg Magnesium
Mn Manganese
Na Sodium
NaCl Chlorure de sodium
NCC Nitrogen –containing- compounds
NO-3 Nitarte
PH Potentiel d’hydrogène
PLD Phospholipase D.
Ppm Particule par millions
PtdOH Phosphatidic acid.
PX Peroxidase
RFOs famille des raffinose oligosaccharides
ROS Reactive oxygen species
SAR Sodium absoption ratio
SO4-2 Sulfate
SOD Superoxide dismutase
SOS Salt overly sensitive
SP1 Stable protein
Liste des figures
Fig.1- La complexité des plantes à la réponse aux différents .................................. 3 stress abiotiques (BASIA et ALTMAN., 2005)
Fig.2- Origines de la salinisation (MASHALI et al . ,2005)............................................. 10
Fig.3-Le cheminement de signalisation des SOS dans ............................................. 17 l’homéostasie ionique sous stress salin chez Arabidopsis (ZHU et al . ,2005).
Fig. 4 - La structure chimique de quelques osmolytes ............................................. 18 (HASEGAWA et al . ,2000).
Fig.5- Les deux voies métaboliques de la proline chez les....................................... 19 plantes supérieures(HU et al . ,1992).
Fig.6- Les trois voies de tolérance des plantes aux stress salin ................................ 21 (SEAMEN, 2004).
Fig. 7- Teneurs en proline (µg.ml-1) dans les feuilles .............................................. 35 , tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl.
Fig. 8- Teneurs en proline (µg.ml-1) dans les feuilles...............................................37 , tiges et racines des plantes de Vigna radiata L.Wilczek stressée au NaCl + CaCl2.
Fig. 9- Ratio proline partie aérienne/partie racinaire des plantes ............................ 38
de Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl
Fig.10- Ratio proline partie aérienne/partie racinaire des plantes ............................ 38 de Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl+ CaCl2
Fig.11- Teneurs en sucres solubles totaux (µg.ml-1) dans les feuilles ....................39 , tiges et racines des plantes de Fig.12- Teneurs en sucres solubles totaux (µg.ml-1) dans les feuilles, .....................40
, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczeck stressée au NaCl + CaCl2.
Fig.13- Ratio sucres solubles totaux parties aériennes/parties racinaires.................41 des plantes de Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl
Fig.14- Ratio sucres solubles totaux parties aériennes/parties racinaires................. 42 des plantes de Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl+CaCl2
Fig.15 - Teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) dans les feuilles................ 43
, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl.
Fig.16- Teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) dans les feuilles ................. 44 , tiges et racines des plantes Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl+CaCl2.
Fig. 17- Ratio protéines totales solubles partie aérienne/partie racinaire ................. 45 des plantes Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl.
Fig. 18- Ratio protéines totales solubles partie aérienne/partie racinaire ................. 45 des plantes de Vigna radiata L. Wilczeck stressées au NaCl + CaCl2
Liste des photos
Photos.1-Les graines de Vigna radiata L Wilczek .................................................................. 28
Photos.2-Graines de Vigna radiata L Wilczek germées après 4 jours .................................... 29 de la mise en marche du processus germinatif
Photos.3-Plantules de Vigna radiata L Wilczek après six jours.............................................. 29 de germination Photos.4-Les plantes après vingt jours de germination ........................................................... 30 Photos.5-Les plante le jour de l’application de stress salin après 33 jours ............................. 30 de germination Photos.6-Le dispositif expérimental des plantes de Vigna radiata L. Wilczek....................... 31 Photos.7-Une partie des 168 flacons fermés contenant les échantillons ................................32 de matière végétale
Liste des tableaux
Tableau.1- Classification des sols (LETEY ,2000). ................................................................ 11
Tableau.2 - Les niveaux des stress salin et sodique (GREGORY ,2005). .............................. 12
Tableau. 3 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %) ............................ 36 des teneurs en proline endogène( µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Tableau 4- Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %) ............................. 37 des teneurs en proline endogène (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl + CaCl2. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Tableau 5 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %) ............................. 39 des teneurs en sucres totaux solubles (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressés au NaCl. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Tableau 6 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %) ............................ 41 des teneurs en sucres totaux solubles (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, de Vigna radiata L. Wilczeck âgées de 33 jours stressées au NaCl + CaCl2. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Tableau 7 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %) ............................ 43 des teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Tableau 8 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %) ............................ 44 des teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1)des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl+CaCl2.Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
I. LES STRESSES ABIOTIQUES........................................................................................3 1.Le stress hydrique ..............................................................................................4
a. L’importance de l’eau dans la plante b. Définition du stress hydrique c. Adaptation des plantes au stress hydrique
b. Stress au froid et au gel •••• Adaptation morphologique •••• Adaptation physiologique...........................................................................7
3.Le stress salin.............................................................................................................8 c. La salinité
•••• Généralités sur la salinité •••• La salinité des sols ......................................................................................9 •••• Les solutions agronomiques pour la mise en valeur des sols salés •••• La salinisation des sols ...............................................................................10 •••• Les causes réelles de la salinisation des terres irriguées •••• Les solutions possibles pour lutter contre la salinisation des sols..........11
d. Salinité et végétaux •••• Une classification des sols adaptés pour les végétaux •••• Une sensibilité différente suivant les végétaux ........................................12 •••• Le stress salin via les végétaux
II. LES EFFET DE LA SALINITE SUR LES PLANTES ET LEURS M ECANISMES D’ADAPTATION ...............................................................................................................13
1.Effet de la salinité sur les plantes a. Effet sur la croissance des végétaux b. Effet sur l’anatomie foliaire des plantes .....................................................14 c. Effet sur la photosynthèse d. Effet sur le niveau d’ions et le contenu nutritionnel ..................................15 e. Effet sur l’assimilation de l’azote.................................................................16
2.Les mécanismes d’adaptation a. Accumulation sélective ou exclusion des ions b. La synthèse des solutés compatibles ............................................................17 c. Contrôle des ions absorbés par les racines et leurs transport jusqu’aux
feuilles ............................................................................................................19 d. Changement du cheminement photosynthétique e. Induction des enzymes anti-oxydatives par salinité f. Induction des hormones par salinité ...........................................................20 g. Réduction de la croissance h. Les protéines LEA (late-embryogenesis-abundant)
III. LA PLANTE Vigna radiata L.Wilczek .............................................................................21
1.Taxonomie ................................................................................................................22 2.Description 3.Distribution ................................................................................................................23 4.Exigences climatiques 5.Sol et Méthode de semi .............................................................................................24 6.L’irrigation 7.Séchage et Stockage 8.Gestion des maladies chez Vigna radiata L Wilczek ...............................................25
a. Rouille pulvérulente b. Putréfaction de charbon de bois c. Légumineuse peu de feuille d. Tache ocre e. Cosse gommeuse f. Insectes et autres Prédateurs........................................................................26
9.Les différents intérêts du Vigna radiata L Wilczek a. Nutrition b. Santé ...............................................................................................................27 c. Écologique d. La nourriture de bétail
CHAPITRE II – MATERIELS ET METHODES I.MATERIEL VEGETAL .....................................................................................................28 II.METHODES
1.Préparation du substrat de culture 2.Préparation des pots et rempotage du sable 3.Préparation de la culture
a. La germination des graines b. La culture des graines germées.....................................................................29
4.Dispositif expérimental..............................................................................................30 5.Prélèvement des échantillons pour analyse des taux de proline et sucres totaux solubles .........................................................................................................................31 6.Prélèvement des échantillons pour analyse des protéines totales solubles...........32
III.TECHNIQUES D’ANALYSE 1.La proline
a. Extraction b. Dosage
2.Sucres totaux solubles ...............................................................................................33 a. Extraction b. Dosage
3.Protéines totales solubles a. Extraction b. Dosage ............................................................................................................34
CHAPITRE III- RESULTATS I. TENEURS EN PROLINE ENDOGENE .........................................................................35
1. Variations de la proline endogène dans les organes des plantes de Vigna radiata L.Wilczek
a. Sous stress au NaCl b. Sous stress au NaCl + CaCl2 .........................................................................36
2.Etude comparative des ratios des teneurs en proline des parties aériennes et racinaires des plantes de Vigna radia L.Wilczek. ...............................................................37
a. Le ratio des plantes stressées au NaCl seul b. Le ratio des plantes stressées au NaCl + CaCl2. ........................................38
II. TENEURS EN SUCRES SOLUBLES TOTAUX
1.Variation des sucres solubles totaux dans les organes des plantes de Vigna radiata L.Wilczek
a. Sous stress au NaCl........................................................................................39 b. Sous stress au NaCl+CaCl2 ...........................................................................40
2. Etude comparative des ratios des teneurs en sucres totaux solubles des parties aériennes et racinaires des plantes de Vigna radiata L.Wilczek ............41
a. Le ratio des plantes stressées au NaCl b. Le ratio des plantes stressées au NaCl + CaCl2 ..........................................42
III. TENEURS EN PROTEINES TOTALES SOLUBLES 1.Variation des protéines solubles totaux dans les organes des plantes de Vigna
radiata L.Wilczek a. Sous stress au NaCl b. Sous stress au NaCl+CaCl2...........................................................................43
2. Etude comparative des ratios des teneurs en protéines totales solubles des parties aériennes et racinaires des plantes de Vigna radiata L. Wilczek ..........................45
a. Sous stress au NaCl b. Sous stress au NaCl+CaCl2
Fig.3- Le cheminement de signalisation des SOS dans l’homéostasie ionique sous stress
salin chez Arabidopsis (ZHU et al . ,2005).
L’excrétion de sel chez certains glycophytes, pourrait être réalisée par des ATPases
Na+/K+ dépendantes, comme il en existe chez les animaux (MAZLIAK, 2000).Toute une
série de gènes sont activés, codant pour des protéines responsable du maintient de
l’homéostasie : ce sont les gènes SOS (salt overly sensitive) (CALU, 2006).
En effet chez Arabidopsis, le stress salin stimule le signal de Ca+2 activant de ce
fait les SOS3 qui stimulent les SOS2 et qui sont des gènes codant pour des protéines
kinase. A leur tour les SOS2 soit ils stimulent la phosphorylation des SOS1 qui codent
pour des protéines enzymatiques antiport plasma membranaire Na/H, soit ils activent le
tonoplaste antiport Na/H et permet donc de conserver le Na+ à l’intérieur de la vacuole
(ZHU et al . ,2005). (fig.3)
b. La synthèse des solutés compatibles
En présence de stress salin, il y a synthèse des osmoprotecteurs qui sont de
petits composés organiques compatibles avec les fonctions métaboliques des cellules, très
solubles, neutres et non toxiques ; ils permettent ainsi l’ajustement osmotique entre le
cytosol et la vacuole d’une part et la stabilisation des protéines et des membranes contre la
dénaturation causée par le stress salin d’autre part (MELONI et al. ,2004 ; GREGORY.,
2005).
Les halophytes mais aussi occasionnellement les glycophytes, sont capables de
lutter contre le stress salin en produisant ces composés dits aussi solutés compatibles
(CALU, 2006 ; OMAMI, 2005).
Il existe trois catégories d’osmoprotecteurs. (fig.4)
� Les acides aminés : comme la proline, l’alanine la β- alanine la
taurine et ectoine (1, 4, 5,6-tetrahydro-2-methyl-4-pyrimidinecarboxylic acide)
� Les ammonium quaternaires : comme la glycine bétaine, β - alanine
bétaine, la choline-O-sulfate, la glycerophosphorylcholine et les sulphonium comme 3-
dimethylsulfoniopropionate.
� Les carbohydrates : incluent les polyols comme le glycérol,
l’inositol, le mannitol, le sorbitol le pinitol et le D-ononitol ; les sucres simples comme le
fructose, le glucose, le saccharose , le tréhalose, le raffinose et le fructan (CALU, 2006 ;
GREGORY, 2005 ; HASEGAWA et al ., 2000).
Fig. 4- La structure chimique de quelques osmolytes (HASEGAWA et al ., 2000).
L’éctoine à comme origine de biosynthèse l’acide aminé l’acide aspartique, le
pinitol est bio synthétisé à partir de myoinositol, la glycine bétaine est originaire du
métabolisme de la choline .Cependant il y a deux voies alternatives de la biosynthèse de la
proline chez les plantes supérieur : la voie d’ornithine et la voie de glutamate
(HASEGAWA et al. ,2000 ; HU et al. ,1992). (Fig.5)
Fig.5-Les deux voies métaboliques de la proline chez les plantes supérieures (HU et al.
, 1992).
b. Contrôle des ions absorbés par les racines et leurs transport jusqu’aux feuilles La plante régule la balance ionique pour maintenir un métabolisme normale ;
l’absorption et la translocation des ions toxiques comme le Na+ et le Cl- sont limités,
contrairement aux ions métaboliques indispensables , comme ceux du K+ qui sont
maintenus ou augmentés (OMAMI , 2005).
c. Changement du cheminement photosynthétique
Pour tolérer le stress salin, les plantes doivent diminuer l’usage d’eau ; à cet
effet, il y a des plantes comme les halophytes facultatives qui changent leur mode
photosynthétique de C3 au CAM. Ce changement permet aux plantes de réduire l’eau
perdue par l’ouverture nocturne des stomates, ce qui aide à diminuer l’eau perdue par
transpiration (OMAMI, 2005).
d. Induction des enzymes anti-oxydatives par salinité
Les enzymes anti-oxydatives, sont des éléments clef contre les réactions
oxydatives destructives des cellules végétales. Parmi eux on trouve la catalase (CAT), la
glutathione réductase (GR), la superoxide dismutase (SOD) et glutathion –S-transférase
(GST) (OMAMI, 2005).
Chez Vigna radiata L.Wilczek, la carbonique anhydrase (CA), la catalase
(CAT) et la ACC oxydase, sont des enzymes anti –oxydatives reliées respectivement aux
processus de photosynthèse, de détoxification des espèces actives d’oxygène et de
formation d’éthylène (SYEED, 2004).
e. Induction des hormones par salinité
Les niveaux hormonaux de l’ABA augmentent en cas de stress salin, jouant
ainsi plusieurs rôles. Il est responsable de l’activation des gènes qui jouent un rôle
important dans les mécanismes de la tolérance au sel chez le riz, comme il a un rôle
dominant dans les réactions réversibles de la phosphorylation des protéines. Il accroît le
niveau du Ca2+ cytosolique et donc son pH, permettant ainsi de réguler l’absorption et le
transport à travers les membranes ; contrairement, il réduit le niveau d’éthylène et
l’abscission des feuilles, probablement par la décroissance de l’accumulation des ions
toxiques de Cl- dans les feuilles. En outre, c’est un inhibiteur du NaCl dans les réactions de
la photosynthèse et la croissance (OMAMI, 2005).Une augmentation de l’ABA dans la
partie aérienne ou une réduction des concentrations en cytokinine, donne naissance à une
croissance et une transpiration réduites (GREGORY, 2005).
On a également enregistré un haut niveau de jasmonate, médiateur de
signalisation qui soutient les réactions de floraison et sénescence dans les conditions de
stress salin (OMAMI, 2005).
f. Réduction de la croissance
En effet, la croissance des végétaux est perturbée par de trop forte concentration
de sel ; la plante montre alors des signes de stress par la production d’anthocyane ou la
destruction de la chlorophylle. Des stress extrêmes conduisent au nanisme et à l’inhibition
de la croissance racinaire ; les feuilles deviennent sclérosées avant même d’avoir fini leur
croissance et l’organisme tout entier risque de dépérir assez vite (CALU, 2006).
g. Les protéines LEA (late-embryogenesis-abundant)
Le stress osmotique, induit la synthèse des protéines (LEA) dans les tissus
végétatifs, ce qui a pour effet la tolérance à la déshydratation des tissus végétatifs. Elles ont
un rôle dans la détoxification et l’élévation des dommages causés par le stress salin (ZHU
et al. ,2005 ; SEAMEN, 2004).
L’accumulation du niveau de ces protéines, est corrélée avec la tolérance au
stress chez plusieurs espèces de végétaux. On pense que ces protéines ont un rôle
protecteur sous stress osmotique (SEAMEN, 2004).
Voici un schéma récapitulatif qui englobe les trois aspects les plus importants
de la tolérance à la salinité chez les végétaux : l’homéostasie, la détoxification, le
contrôle de croissance et les interconnections qui relient les uns aux autres (SEAMEN,
2004). (fig.6)
Fig.6- Les trois voies de tolérance des plantes aux stress salin (SEAMEN, 2004).
V. LA PLANTE Vigna radiata L.Wilczek Vigna radiata L.Wilczek ou soja vert est une plante annuelle de la famille des
Fabacées ; originaire du sous-continent indien , elle est cultivée comme plante potagère
pour ses graines consommées comme légume .On consomme également les jeunes
pousses issues des graines après germination, souvent vendues sous le nom erroné de
« germes de soja » ; encore appelés "Haricot mungo", "haricot mung", "taugé" suivant
les pays . Il est moins riche en protéine en le comparant au soja (ANTOHONY et al .
,2007 ; BADMOOD et al. ,2007 ; JAY64, 2008).
1. Taxonomie Règne Plantae plantes, Végétal
Sous règne Tracheobionta-- plantes vasculaires
Super division Spermatophyte – plantes à graines
Division Magnoliophyta-- angiospermes, phanérogames, plantes à fleurs, plantes
à fruits
Classe Magnoliopsida-- dicots, dicotylédones,
Sous-classe Rosidae
Ordre Fabales
Famille Fabaceae
Sous-famille Faboideae
Tribu Phaseoleae
Sous tribu Phaseolinae
Genre Vigna
Espèce Vigna radiata (L).Wilczek -- Mung bean
Variété Vigna radiata (L).Wilczek var. radiata (L.) R. Wilczek -- Mung bean
(ANTOHONY et al . ,2007 ; BADMOOD et al. ,2007 ; SKINNER , 2006).
Sa richesse en protéines et en vitamines en a fait la base de l’alimentation des
asiatiques. Les graines germées ont un goût rafraîchissant, elles sont riches en vitamines :
A, B1, B2, B3, B9, C, E. minéraux : calcium, phosphore, fer, potassium, thiamine,
riboflavine (BADMOOD et al. ,2007 ; SERRE, 2007).
En effet, neuf variétés de Mung bean ont été analysées ; il s’est avéré qu’elles
différent significativement dans leurs teneurs en protéines totales, en acides aminés totaux
et en lipides, tandis que les différences dans les teneurs en cendres, les fibres brutes,
l'humidité et les calories totales étaient non significatives (SALEEM et al.,1998).
Le Mung bean est peu calorique, il est idéal pour tout menu santé ; on le
consomme souvent sous forme de « pousses de soja » ou « germes de soja » ; c’est la
forme la plus consommable utilisé pour usage frais (sans cuisson) dans les salades
(BADMOOD et al . ,2007 ; ANTHONY et al. ,2007 ; TAILLEFER et GAGNE., 2004).
Afin de profiter de tous les bienfaits des germes de Mung bean, il faut bien les choisir et
les conserver soigneusement, Il faut éviter de prendre les germes de Mung bean de couleur
brunâtre et d'allure gluante (TAILLEFER et GAGNE., 2004).
Dans le sud d’Asie, le Mung bean est utilisé pour faire le "dhal" qui est le plat
le plus commun, fait de plusieurs genres de légumineuses fendues avec les épices. Dans les
pays situés au Sud-est et Est d’Asie, il est utilisé pour préparer de la confiture, de la soupe
sucrée, du vermicelle, les pousses germées et la farine (ZATSUMAME ,1995).
En Inde, le Mung bean est très estimé pour sa valeur nutritive, au Portugal on
l'ajoute aux nouilles vertes et il est surtout utilisé comme haricot germé. Aux Philippines,
cette plante est considérée comme un légume versatile. Les graines de Mung bean sautés,
composent un des plats les plus populaires du pays. Les feuilles sont utilisées pour
parfumer les ragoûts et les tiges germées se retrouvent dans le lumpia frit (SERRE, 2007).
b. Santé
En médecine chinoise, le germe de Mung bean dans les pays orientaux, on le
mélange aux herbes médicinales pour soigner les problèmes d'hypertension. Il est
également utilisé comme antidote à certains poisons. Il facilite l'élimination des tissus
malade et participe à leur régénération, s'il contient de la chlorophylle en quantité assez
importante. Il contient de la lécithine indispensable à la régulation du cholestérol (SERRE,
2007).
c. Écologique
Mung bean est une plante écologique par excellence. Les bactéries situées dans
ses nodosités sur les racines, fixent dans le sol l'azote atmosphérique, laissant après récolte
une terre plus riche qu'elle n'était auparavant et par conséquent, ne nécessitant pas
l'épandage d'engrais de synthèse. Tout risque de pollution souterraine sera ainsi écartée
(IMRI, 1991).
d. La nourriture de bétail Puisque le coût de la graine de Vigna radiata L Wilczek est élevé par rapport à
la graine de soja, ce n’est pas évident de nourrir le bétail avec des semences de bonne
qualité, cependant la graine fêlée issue du nettoyage du Mung bean, est souvent destinée à
sa nourriture (MYERS, 2006).
CHAPITRE II
MATERIEL et METHODES
CHAPITRE II – MATERIELS ET METHODES
I.MATERIEL VEGETAL
Le matériel végétal que nous avons utilisé, correspond à des graines de Vigna
radiata L. Wilczek apportées des Etats-Unies, originaire de l'Inde et qui sont de petites
graines de couleur verte.
Photos.1-Les graines de Vigna radiata L Wilczek
II.METHODES
1.Préparation du substrat de culture
Le sable est tamisé pour éliminer toutes impuretés; on procède à un premier lavage à
l’eau courante puis lavé à l'esprit de sel, rincé abondamment à l'eau déminéralisée pour
éliminer les chlorures et les carbonates et séché à la température ambiante de la serre. Un
test confirmatif de la désalinisation du sable est réalisé par les nitrates d’argent.
2.Préparation des pots et rempotage du sable
Des pots en plastiques sont remplis d’une quantité donnée de sable mélangé à du
terreau (1 volume terreau / 2 volume sable). Cette valeur de poids est retenue pour
déterminer la capacité de rétention de ce substrat. Cette caractéristique hydrique est
nécessaire car, elle permet le calcul de la quantité de solution nutritive à apporter lors des
arrosages. La capacité de rétention est fonction de la nature du substrat, de son poids dans
le pot et de l’âge de la plante.
3.Préparation de la culture
a.La germination des graines
���� Désinfection des graines : l’opération se fait à l’eau de javel 0,2 %
pendant 5 min puis rincer 3 fois à l’eau distillée. Imbibition des graines : les graines sont
ensuite imbibées durant 24 h à la température ambiante ce qui élimine 66% des inhibiteurs
de la trypsine qui empêchent le processus germinatif chez cette légumineuse (PEARY et
PEAVY, 2003).
���� La mise en germination des semences : a été réalisée pendant 4 à 6
jours sur papier filtre humidifié et placé dans des boîtes de pétri (diamètre 90 mm), à
l’obscurité à la température optimale de la germination du Mung bean c'est-à-dire entre
21°C et 25 °C. (MICHELLE, 2002)
Photos.2-Graines de Vigna radiata L Wilczek germées après 4 jours de la mise en marche du processus germinatif
b. La culture des graines germées
Après la germination, une graine germée est semée dans chaque pot et parfois
même deux graines par pots en prévision , la culture se fait dans la serre, les graines sont
semées à une profondeur de 1 cm environ, puis arrosées avec l'eau distillée. Après
quelques jours, les graines germées donnent des plantules qui sont arrosées à la solution
nutritive de HOAGLAND (1938). La capacité de rétention est de 200 ml par pot ce qui
permet de prévoir les quantités de solutions nutritive et saline à apporter soit durant la
culture des plantes ou le jour du stress. La solution saline est appliquée après 33 jours de
germination.
Photos.3-Plantules de Vigna radiata L Wilczek après six jours de germination
Photos.4-Les plantes après vingt jours de germination
Photos.5-Les plante le jour de l’application de stress salin après 33 jours de germination
4.Dispositif expérimental
Il s’agit de 56 plantes de Vigna radiata L Wilczek, traitées par deux types de salinité,
au NaCl et au NaCl + CaCl2 et à des concentrations salines de 50 meq.ml-1, 100 meq.ml-1
et 150 meq.ml-1pour les deux types de salinité, à raison de 8 répétitions par traitement salin
et à ces plantes stressées s’ajoutent les 8 répétitions des plantes témoins (Voir Photos.6).
Les plantes témoins sont arrosées à la solution nutritive seule et les plantes stressées
sont arrosées à la solution saline.
(50 meq, 100 meq, 150 meq), SN, (50 meq, 100 meq, 150 meq) Le traitement salin par le NaCl Les témoins Le traitement par NaCl + CaCl2
Photos.6-Le dispositif expérimental des plantes de Vigna radiata L. Wilczek
7.Prélèvement des échantillons pour analyse des taux de proline et sucres totaux
solubles
Après l’application du stress salin, les plantes ne sont plus arrosées durant une
semaine. Nous avons procédé aux prélèvements des échantillons selon les étapes
suivantes :
� Les plantes entières sont soigneusement prélevées, rincées à l’eau de
robinet puis séchées rapidement à l’aide du papier Joseph.
� La partie aérienne est isolée de la partie souterraine, puis les poids
frais des racines, des tiges, des feuilles sont déterminés à l’aide d’une balance plate de
précision.
� Chaque échantillon pesé est enveloppé dans du papier aluminium
puis le tout est déposé dans une étuve réglée à 80° C durant 48 heures.
� Ensuite les échantillons sont repesés à l’état sec, mis dans des
flacons fermés à l’aide d’un bouchon plasma, et placés au congélateur jusqu'aux analyses.
Photos.7-Une partie des 168 flacons fermés contenant les échantillons de matière végétale
6 Prélèvement des échantillons pour analyse des protéines totales solubles
Pour cette analyse on veut éviter la dénaturation des protéines par le traitement
thermique par l’étuve ; à cet égard les échantillons (feuilles, tiges, racines) ne sont pas
sécher à l'étuve mais ils sont conservés et broyés dans l’azote liquide puis au congélateur
dans des flacons fermés à l’aide d’un bouchon plasma.
III.TECHNIQUES D’ANALYSE
1.La proline
La proline est analysée selon la méthode de BERGMAN et LOXLEY (1970).
a. Extraction
100 mg de matériel végétal, soit des racines, des tiges et des feuilles, sont broyés
dans 1.25 ml d’éthanol 95 %, suivi de trois rinçages et lavages avec 1.25 ml d’éthanol 70
% chaque fois. Des surnageant combinés environ 5 ml, sont prélevés 2.5 ml auxquels sont
ajoutés 1 ml de chloroforme et 1.5 ml d’eau distillée. Le matériel végétal est gardé toute la
nuit au froid à 0°C.
b. Dosage
1 ml de la phase supérieure du matériel végétal, déjà décanté, est prélevé en
évitant de toucher à la phase inférieure puis sont ajoutés 2 ml de solution de Na Cl 5M et 5
ml d’eau distillée.
Après agitation, 2 ml de solution sont placés dans tube à essai auquel sont
ajoutés 2 ml de solution tampon phosphate (H3PO4 5.32 M + Na2HPO4 3.88 M) à pH 2 ,5
et enfin 4 ml de solution de ninhydrine (0.125 g dans 2 ml de H3PO4 6 M, plus 3 ml de
CH3COOH glacial).
Les tubes sont agités et placés au bain - marie bouillant pendant 60 mn pour le
développement de la coloration. Une fois le mélange refroidi, la densité optique est lue au
moyen d’un spectrophotomètre à 505 nm.
Les résultats sont exprimés en µg.ml-1 de proline d'extrait en référence à une
courbe étalon (en annexe) à partir de concentrations croissantes de proline de 12.5 à 125
µg.ml-1 .
Les teneurs moyennes en proline obtenues à partir des échantillons (feuilles,
tiges, racines) analysées sont affectées d’une analyse de la variance à l’aide du Test de
Fisher à P = 5 %.
2.Sucres solubles totaux
Les sucres solubles totaux sont analysés par la méthode au phénol de Dubois et al (1956).
a. Extraction
100 mg de matière végétale , soit des racines, des tiges et des feuilles sont placés
dans des tubes à essai, on ajoute 3 ml d’éthanol à 80 % pour l’extraction des sucres .On
laisse à température ambiante pendant 48 h .
b. Dosage
Au moment de dosage les tubes sont placés dans une étuve à 80 % pour faire
évaporer l’alcool, dans chaque tube on ajoute 20 ml d’eau distillée c’est la solution à
analyser ; dans des tubes à essai propre, on induit 1 ml de la solution à doser auquel on
ajoute 1 ml de solution de phénol à 5 %. Les tubes sont soigneusement agités.
On ajoute alors 5 ml d’acide sulfurique concentré à l’aide d’une burette dont le
jet tombe brutalement sur la surface du liquide, la température atteint, alors environ 110°C.
Après un séjour de 30 min à l’obscurité, les mesures d’absorbance sont
effectuées à une longueur d’onde de 485 nm.
Enfin des résultats des densités optiques sont rapportés sur une courbe étalon
des sucres solubles préparée avec des concentrations croissantes de glucose allant de 10 à
100 µg.ml-1.
Les résultats obtenus sont traités statistiquement en analysant la variance à l'aide
du test de Fisher à P = 5 %.
3.Protéines totales solubles
Le dosage des protéines se fait selon la technique de Bradford (1976)
a.Extraction
Prendre 1 g de matière végétale avec 10 ml de tampon d’extraction : tampon
phosphate 0,06 M PH 7, l’extraction se fait à froid (mortier dans la glace pilée) puis
centrifugation à 8000 tours pendant 15 min.
b. Dosage
Prendre 100 µl d’échantillon à doser et ajouter 2 ml de réactif de Bradford,
après 2 min du développement de la réaction, la densité optique est lu à 595 nm.
Pour réaliser une courbe étalon des protéines solubles, préparées avec une
solution mère de SAB allant de 10 à 100 µg.ml-1 on prend 100 µl de ces dernier, puis
ajouter 2 ml du réactif de Bradford (voir Annexe), la lecture de la densité optique se fait à
la longueur d’onde 595 nm après 2 min du développement de la réactions.
Les résultats obtenus sont traités statistiquement, en analysant la variance à
l'aide du test de Fisher à P = 5 %.
CHAPITRE III
RESULTATS
CHAPITRE III- RESULTATS
I - TENEURS EN PROLINE ENDOGENE
1.Variations de la proline endogène dans les organes des plantes de Vigna
radiata L.Wilczek
a.Sous stress au NaCl
La figure 7 montre une légère augmentation de la proline non significative, au
niveau des organes des plantes traitées à la salinité, à différentes concentrations par rapport
aux plantes témoins. En effet, les teneurs en proline dans les feuilles varient de 97.27
µg.ml-1en absence de stress ; dès que les plantes reçoivent la salinité, cet acide aminé
s’accumule jusqu’à une teneur de 108.15 µg.ml-1, sous l’effet salinité à 100 meq.l-1 de
NaCl. Par contre dans les mêmes organes, la proline ralentit pour arriver à une teneur de
98.91 µg.ml-1, sous stress à 150 meq.l-1 de NaCl. Dans les tiges, la proline augmente aussi
lorsque la concentration en NaCl du milieu croît ; elle évolue de 117.39 µg.ml-1, dès que
les plantes reçoivent la solution saline à 50 meq.l-1 vers 128.15 µg.ml-1 sous le traitement à
150 meq.l-1 de NaCl.
Au niveau des racines, l’accumulation de la proline devient de plus en plus
importante avec la concentration du milieu ; la teneur passe de 89.04 µg.ml-1 (sous l'effet
de 50 meq.l-1 de NaCl) à 109.51 µg.ml-1 (sous l'effet de 150 meq.l-1 de NaCl).
Selon le traitement, l’influence de la salinité sur chaque organe montre que pour
toutes les plantes, la proline reste plus élevée dans les tiges.
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
Témoin 50meq 100meq 150meq
SN NaCl NaCl NaCl
Ten
eurs
en
pro
line
(µg.
ml-1
)
Feuilles
Tiges
Racines
Fig.7- Teneurs en proline (µg.ml-1) dans les feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl.
Tableau 3 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %), des teneurs en proline endogène (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Témoin 50 meq 100 meq 150 meq Feuilles
97,27±9,84
ns 107,06±6,95 NS
ns 108,15±4,31 NS
ns 98,91±7,97 NS
ns Tiges
105,43±32,35
117,39±34,71 NS
119,84±32,70 NS
128,15±37,28 NS
Racines
90,21±38,26
ns 89,4±9,96 NS
ns 107,06±31,80 NS
ns 109,51±34,90 NS
ns
m ± σ 97,64±14,99 104,62±15,23 111,68±16,14 112,19±16,28 s et ns: effet significatif ou non significatif de l’organe sur l’accumulation de la proline comparativement aux tiges selon chaque traitement NS et S : effet non significatif ou significativement supérieur de la salinité sur l’accumulation de la proline comparativement aux plantes témoins.
A cet effet, l’analyse statistique (tableau 3) révèle l’absence de l’influence de la
salinité, quelle que soit la concentration en NaCl sur les teneurs en proline quel que soit
l’organe. Cette analyse indique par ailleurs, que la proline dans les feuilles et dans les
racines n’exprime pas de différences significatives, comparativement aux tiges quel que
soit le traitement.
b. Sous stress au NaCl + CaCl2
La figure 8 montre qu'il y a une augmentation significative de la proline,
uniquement au niveau des tiges et des racines des plantes traitées à 150 meq.ml-1 par
rapport aux plantes témoins (145,38 µg.ml-1et 128,26 µg.ml-1contre 105,43 µg.ml-1et 90,21
µg.ml-1respectivement).Cependant, l'augmentation de la proline dans les autres organes
aux concentrations salines restantes est non significative, comparée toujours aux plantes
témoins.
En effet, au niveau foliaire, la teneur de cet acide aminé s'élève de 91,52 µg.ml-1
à 99,51 µg.ml-1sous les traitements salins à respectivement 50 meq.l-1et 150 meq.l-1Au
niveau des tiges, il y a également un accroissement dans la teneur de la proline, allant de
107,6 µg.ml-1 jusqu'à 145,38 µg.ml-1 pour les concentrations salines 50 meq.l-1et 150
meq.ml-1respectivement. Les racines montrent aussi une évolution dans la teneur de cet
acide aminé, la teneur passe de 102,69 µg.ml-1 (sous le traitement à 50 meq.l-1) à 128, 26
µg.ml-1 (sous le traitement à 150 meq.l-1).
Dans ce cas aussi, les résultats révèlent que l’influence de la salinité sur chaque
organe montre que pour toutes les plantes, la proline reste plus élevée dans les tiges.
020406080
100120140160180200
Témoin 50meq 100meq 150meq
SN NaCl+CaCl2 NaCl+CaCl2 NaCl+CaCl2Ten
eurs
en
prol
ine
( µg
.ml-1
)
Feuilles
Tiges
Racines
Fig.8- Teneurs en proline (µg.ml-1) dans les feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressée au NaCl + CaCl2. Tableau 4-Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %), des teneurs en proline endogène (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl + CaCl2. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
Témoin 50 meq 100 meq 150 meq Feuilles
97,27±9,84
ns 91,52±17,18 NS
ns 95,54±19,33 NS
s 99,51±13,30 NS
s Tiges
105,43±32,35
107,6±36,65 NS
130,43±23,36 NS
145,38±35,58 S
Racines
90,21±38,26
ns 108,96±32,30 NS
ns 103,26±23,44 NS
s 128,26±37,13 S
ns
m ± σ 97,64±14,99 102,69±10,22 109,74±2,35 124,38±13,33
En effet, l’analyse statistique (tableau 4) révèle l’influence de la salinité de la
concentration saline 150 meq.l-1en NaCl + CaCl2, sur les teneurs en proline des tiges et des
racines. Cette analyse indique également que la proline dans les feuilles, présente des
différences significatives comparativement aux tiges, sous les traitements salins à 100
meq.l-1et 150 meq.l-1; par ailleurs, au niveau des racines, cette différence reste significative
seulement sous l’effet de la concentration saline à 100 meq.l-1.
2.Etude comparative des ratios proline des parties aériennes et racinaires des plantes de Vigna radia L. Wilczek
a.Les plantes stressées au NaCl
Le ratio est défini par les teneurs en proline des feuilles et des tiges par rapport à
celles des racines. La valeur du ratio est plus élevée chez les plantes stressées à 50 meq.ml-
1 que chez les plantes témoins (2,51 contre2, 24).Par ailleurs, cette valeur décroît chez les
plantes stressées à 100 meq.l-1 et à 150 meq.l-1 (2,12 et 2,07 contre 2,24). Il faut remarque
que la valeur de ce ratio varie de manière inversement proportionnelle à la concentration en
NaCl du milieu (fig.9).
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
Témoin 50 meq NaCl 100 meq NaCl 150 meq NaCl
Rat
io p
rolin
e P
A/P
R
Fig.9- Ratio proline partie aérienne/partie racinaire des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl
b. Les plantes stressées au NaCl + CaCl2
La valeur de ratio des différentes concentrations salines est inférieure à celle
des plantes témoins, elle augmente mais aléatoirement avec l’augmentation des
concentrations salines, car on enregistre une baisse de cette valeur chez les plantes
stressées à 150 meq.l-1 comparée à celle des plantes traitées à 100 meq.l-1 (1,90 contre
2,18)
0
0,5
1
1,5
2
2,5
Témoin 50 meqNaCl+CaCl2
100 meqNaCl+CaCl2
150 meqNaCl+CaCl2
Rat
io p
rolin
e P
A/P
R
Fig.10- Ratio proline partie aérienne/partie racinaire des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl+ CaCl2
II.TENEURS EN SUCRES SOLUBLES TOTAUX
1.Variation des sucres solubles totaux dans les organes des plantes de Vigna radiata L.Wilczek
a.Sous stress au NaCl
La figure11 montre, une légère augmentation (non significative) de la teneur en
sucres solubles totaux, au niveau des organes des plantes traitées à la salinité, à différentes
concentrations par rapport aux plantes témoins. En effet, les teneurs en sucres solubles
totaux au niveau foliaire passent de125, 41 µg.ml-1en absence de salinité (témoin) à 130,53
µg.ml-1 sous le traitement salin 100 meq.ml-1 ; une sensible réduction de ces composés est
enregistrée sous 150 meq.l-1 (128,27 µg.ml-1)
Cependant, dans les tiges, les sucres solubles totaux s’accumulent lentement au
fur et mesure que la salinité augmente de concentration ; les teneurs dans ces organes
restent toutefois deux fois plus élevées, comparativement à celles des racines, quelle que
soit le milieu de culture. Il faut noter que dans les feuilles et les tiges, les sucres évoluent
pratiquement avec des teneurs sensiblement proches. Par contre, au niveau des racines,
cette teneur diminue allant de 80,54 µg.ml-1à 75,87 µg.ml-1 sous la salinité à 50 meq.l-1 et
150 meq.l-1.
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
Témoin 50meq 100meq 150meq
SN NaCl NaCl NaCl
Ten
eurs
en
sucr
es s
olub
les
tota
ux ( µ
g.m
-1)
Feuilles
Tiges
Racines
Fig.11- Teneurs en sucres solubles totaux (µg.ml-1) dans les feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl.
Tableau 5 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %), des teneurs en sucres solubles totaux (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressés au NaCl. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
m ± σ 109,24±15,20 110,79±12,72 112,90±10,08 114,29±9,89
En outre, l’analyse statistique (tableau 5) révèle l’absence de l’influence de la
salinité, quelle que soit la concentration en NaCl sur les teneurs en sucres solubles totaux,
quel que soit l’organe. Cette analyse indique que les sucres solubles totaux dans les
feuilles, n’expriment pas de différences significatives comparativement aux tiges, quel que
soit le traitement;tandis que les racines expriment des teneurs en sucres solubles totaux
significativement inférieures à celles des tiges, quelque soit le traitement salin.
b. Sous stress au NaCl+CaCl2
La figure 12 montre, une légère augmentation des sucres soluble totaux non
significative, aux niveaux des organes des plantes traitées à la salinité, à différentes
concentrations par rapport aux plantes témoins.
En effet, les teneurs en sucres solubles totaux dans les feuilles passent de
125,41µg.ml-1en absence de stress (plantes témoins) à une teneur de 134,42 µg.ml-1 , sous
l’effet de salinité à 50 meq.l-1 de NaCl + CaCl2; puis diminue à 115,16 µg.ml-1 sous stress à
150 meq.l-1.Au niveau des tiges, cette teneur évolue de 128,07 µg.ml-1 sous stress à 50
meq.l-1 vers 139,96 µg.ml-1, sous le traitement à 150 meq.l-1 de NaCl + CaCl2.
Au niveau des racines, les sucres solubles totaux chutent remarquablement sous
l’effet de la salinité, comparativement aux sucres analysés dans les feuilles et les tiges. Les
teneurs en ce composé varient de 81,41µg.ml-1 dans les racines des plantes témoins, puis
une accumulation ralentie est observée dans les mêmes organes, des plantes recevant la
salinité à 50 et 100 meq.l-1. Par contre, une sensible augmentation des sucres s’exprime
sous le traitement à 150 meq.l-1
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
Témoin 50meq 100meq 150meq
SN NaCl+CaCl2 NaCl+CaCl2 NaCl+CaCl2
Ten
eurs
en
sucr
es s
olub
les
tota
ux ( µ
g.m
l-1)
Feuilles
Tiges
Racines
Fig.12- Teneurs en sucres solubles totaux (µg.ml-1) dans les feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressée au NaCl + CaCl2.
Tableau6 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %), des teneurs en sucres solubles totaux (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl + CaCl2. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
L’analyse statistique (tableau 6), révèle également l’absence de l’influence de la
salinité, quelle que soit la concentration en NaCl sur les teneurs en sucres totaux solubles,
quel que soit l’organe. En effet, les sucres solubles totaux dans les feuilles, n’expriment
pas des différences significatives, comparativement aux tiges quel que soit le traitement,
tandis que, les racines marquent cette différence à la baisse significative, quelque soit le
traitement salin.
2.Etude comparative des ratios sucres solubles totaux des parties aériennes et
racinaires des plantes de Vigna radiata L.Wilczek
a.Les plantes stressées au NaCl
La valeur du ratio accroît avec l’accroissement des concentrations salines, elle
passe de 3,13 à 3,52 sous le traitement salin, à 50 meq.l-1et à 150 meq.l-1 respectivement.
La valeur du ratio des plantes traitées à la salinité est supérieur à la valeur du ratio des
plantes témoins, quelque soit la concentration saline.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
Témoin 50 meq NaCl 100 meq NaCl 150 meq NaCl
Rat
io s
ucre
s so
lubl
es to
taux
PA/P
R
Fig. 13- Ratio sucres solubles totaux parties aériennes/parties racinaires des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl
m ± σ 109,24±15,20 114,36±19,57 115,18±14,17 112,25±14,17
b. Les plantes stressées au NaCl + CaCl2
La valeur du ratio augmente avec l’augmentation des concentrations salines,
elle passe de 3,26 à 3,34 sous stress salin à 50 meq.l-1et à 100 meq.l-1.Par contre, cette
valeur diminue sous salinité à 150 meq.l-1 (3,13).On remarque que, la valeur du ratio des
plantes traitées à la salinité est nettement supérieur à celle des plantes témoins, quelque soit
la concentration saline.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
Témoin 50 meqNaCl+CaCl2
100 meqNaCl+CaCl2
150 meqNaCl+CaCl2
Rat
io su
cres
sol
uble
s to
taux
PA/P
R
Fig. 14- Ratio sucres solubles totaux parties aériennes/parties racinaires, des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl+CaCl2
III.TENEURS EN PROTEINES TOTALES SOLUBLES
1.Variation des protéines totales solubles dans les organes des plantes de Vigna
radiata L.Wilczek
a.Sous stress au NaCl
La figure 15 montre, une augmentation des protéines totales solubles non
significative, au niveau des feuilles et des tiges à différentes concentrations salines par
rapport aux plantes témoins. Cependant, cette augmentation est significative au niveau des
racines, à différentes concentrations salines comparées toujours aux plantes témoins.
En effet, dans les feuilles la teneur en protéines totales solubles de 245 µg.ml-1
chez les plantes témoins passe à une teneur de 263,75 µg.ml-1 sous stress à 50 meq.l-1 ; ces
composés régressent ensuite lorsque les plantes sont arrosées à 100 meq.l-1 de NaCl (soit
240 µg.ml-1 de protéines). Les teneurs sont voisines dans les feuilles des plantes traitées à
150 meq.l-1 de NaCl et celles des plantes ne recevant pas la salinité (245 µg.ml-1).
Dans les tiges, la teneur en protéines totales solubles s’accroît avec la
concentration saline ; elle passe de156, 25 µg.ml-1 (sous stress à 50 meq.l-1) à 166,25
µg.ml-1 (sous stress à 150 meq.l-1).Dans les racines, cette teneur évolue également avec la
concentration saline en exprimant une différence significative par rapport à celle des
témoins.
0
50
100
150
200
250
300
Témoin 50meq 100meq 150meq
SN NaCl NaCl NaCl
Ten
eurs
en
pro
téin
es to
tale
s so
lubl
es (
µg.m
l-1)
Feuilles
Tiges
Racines
Fig. 15- Teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) dans les feuilles, tiges et racines , des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, stressées au NaCl. Tableau 7 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %), des teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl. Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
L’analyse statistique (tableau 7), révèle l’influence de la salinité à la baisse sur les
teneurs en protéines totales dans les racines, quelque soit la concentration en NaCl
comparativement à celles des tiges ou des feuilles.
b. Sous stress au NaCl+CaCl2
La figure 16 montre une augmentation significative des protéines totales
solubles au niveau des racines à la concentration saline 150 meq.l-1enregistrant ainsi une
valeur de 89, 25 µg.ml-1; par contre une diminution significative de cette teneur (37,50
µg.ml-1) apparaît sous stress à 100 meq.l-1.
Dans les feuilles, cette teneur diminue sous l'effet de sel à 50 meq.l-1par rapport
aux plantes témoins (215 µg.ml-1contre 245 µg.ml-1) ; elle augmente sous le traitement à
100 meq.l-1 (247,50 µg.ml-1), puis diminue légèrement lorsque les plantes sont stressées à
Témoin 50 meq 100 meq 150 meq Feuilles
245 ±17,32
s 263,75±4,79NS
s 240±31,62NS
s 245±17,32NS
s Tiges
147,50±5,00
156,25±4,79NS
165±12,91NS
166,25±31,98NS
Racines
71,25 ±6,29
s 99,00 ±13,71 S
s 97,50±5,00 S
s 111,50±4,43 S
s
m ± σ 154,58±6,77 173,00 ±5,15 167,50±13,67 174,25±13,78
150 meq.l-1 (242,50 µg.ml-1). Il faut signaler que la teneur en protéines totales solubles
reste plus élevée dans les feuilles.
Au niveau des tiges, cette teneur passe de 165,75 µg.ml-1à 164,50 µg.ml-1 sous
l'effet de stress salin à respectivement 50 meq. l-1et à 150 meq.ml-1.
0
50
100
150
200
250
300
Témoin 50meq 100meq 150meq
SN NaCl+CaCl2 NaCl+CaCl2 NaCl+CaCl2
Ten
eurs
en
pro
téin
es to
tale
s so
lubl
es (
µg.m
l-1)
Feuilles
Tiges
Racines
Fig.16 – Teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) dans les feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl+CaCl2
L’analyse statistique (tableau 8) révèle l’influence de la salinité à 100 et à 150
meq. l-1 en NaCl+ CaCl2 sur les teneurs en protéines totales solubles des racines. Cette
analyse indique par ailleurs que les protéines totales solubles dans les feuilles et dans les
racines expriment des différences significatives comparativement aux tiges quel que soit le
traitement salin.
Tableau 8 - Test statistique de signification de Fisher (P = 5 %), des teneurs en protéines totales solubles (µg.ml-1) des feuilles, tiges et racines des plantes de Vigna radiata L. Wilczek, âgées de 33 jours stressées au NaCl+CaCl2.Test effectué à l’aide du logiciel SPSS.
2.Etude comparative des ratios protéines totales solubles des parties aériennes et
racinaires des plantes de Vigna radiata L. Wilczek
m ± σ 154,58±6,77 153±19,71 145,25±1,91 165,42±3,35
a.Les plantes stressées au NaCl
Une décroissance de la valeur de ce ratio avec l’augmentation de la
concentration du milieu en NaCl apparaît. Il faut remarquer que les ratios calculés pour les
plantes traitées au NaCl quelque soit la concentration saline restent inférieurs à celui
déterminé pour les plantes non stressées (fig.17).
0
1
2
3
4
5
6
Témoin 50 meq NaCl 100 meq NaCl 150 meq NaCl
Rat
io p
roté
ines
tota
les
solu
bles
PA
/PR
Fig.17- Ratio protéines totales solubles partie aérienne/partie racinaire des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl.
b. Les plantes stressées au NaCl + CaCl2
La valeur du ratio des plantes traitées à 50 meq.l-1 et à 150 meq.l-1est inférieure à
celle des plantes témoins, sauf pour les plantes traitées à 100 meq.ml-1 où cette valeur est
nettement supérieure à celle des plantes témoins(10,62 contre 5,51 ).(fig 18)
0
2
4
6
8
10
12
Témoin 50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Rat
io p
roté
ines
tota
les
solu
bles
PA/P
R
Fig. 18- Ratio protéines totales solubles partie aérienne/partie racinaire des plantes de Vigna radiata L. Wilczek stressées au NaCl + CaCl2
DISCUSSION
DISCUSSION
Nos résultats montrent une accumulation de la proline, dans différents
organes tiges, feuilles et racines des plantes traitées au NaCl. Cependant, cette
accumulation est importante au niveau des tiges et elle reste non significative, à différentes
concentrations salines de NaCl, comparée aux plantes témoins. Par ailleurs, cette teneur est
corrélée positivement au stress salin : au niveau foliaire (r=0,078), au niveau des tiges
(r=0,238) ainsi qu’au niveau racinaire (r=0,279).
Ces résultats sont compatibles avec ceux obtenus chez les cals et les plantes de
Vigna radiata L. Wilczek traitées à la salinité où il y a accumulation de la proline au
niveau des feuilles, tiges et racines. Mais cette accumulation est plus importante à la
lumière qu’à l’obscurité (ARORA et SARADHI., 1995 ; VINOD et SHARMA., 2004;
ABDEL HALEEM, 2007; PARAMASIVAM et al . ,2007). D'autres travaux ont montré,
sur Vigna radiata que cette accumulation dépend, de la variété et de l'espèce ; Pusa Bold
montre une accumulation élevée de la proline sous stress salin comparée à CO4
(SUMITHRA et al. ,2006). Deux espèces légumineuses, Phaseolus vulgaris et Sesbania
aculeata, montrent également une accumulation de proline; celle-ci s’accumule également
dans tous les tissus analysés de deux variétés de Phaseolus vulgaris L., Canario 60 et Pinto
Villa (ASHRAF et BASHIR., 2004; JIMENEZ-BREMONT et al . ,2006). Chez les
graminées, la proline s’accumule également chez 30 variétés de blé Triticum aestivum L.
sous stress salin (POUSTINI et al . ,2007).Des plantes médicinales comme Phyllanthus
amarus et Zataria multiflora présentent aussi une accumulation de la proline sous stress
salin (BERNARD et al . ,2006 ; JALEEL et al. ,2007).
En effet, les plantes supérieures accumulent des acides aminés en s’opposant au
stress salin, cependant, la proline reste l’acide aminé le plus important (ASHRAF, 2004).
Elle s’accumule chez plusieurs espèces végétales, face au stress comme la sécheresse, la
salinité et la température extrême, bien que son rôle dans l’osmotolerance de la plante reste
controversée, elle contribue à l’ajustement osmotique, la détoxification des espèces actives
d’oxygène (ROS) et la protection de l’intégrité membranaire (VERBRUGGEN et al. ,
1993; JITHESH et al. , 2006; MOLINARI et al. ,2007). Elle sert également comme un
réservoir de carbone et d’azote, protège le potentiel tampon redox cellulaire et les protéines
contre la dénaturation ; elle a également la capacité de préserver l’activité des enzymes en
solution saline (SHUJI et al ., 2002 ; ZHU et al., 2005 ; JITHESH et al., 2006).
En effet, l'accumulation de la proline invoque deux voies métaboliques chez les
jeunes plantes : la voie de la glutamate ou de l'ornithine, et une seule voie chez les plantes
adultes : la voie de la glutamate (ROOSENS et al . ,1998). Cette accumulation peut être
expliquée, par l’induction des gènes qui codent pour la biosynthèse de la proline, ainsi par
la répression des gènes qui codent pour son catabolisme. Cela peut être traduit par une
expression intense de la ∆1-pyrroline-5-carboxylate synthétase (P5CS) et par une haute
régulation de la proline déshydrogénase, s'ajoutent des stimulateurs positifs de la
biosynthèse, comme l'acide abscissique et des régulateurs négatifs comme la phospholipase
D (ABRAHAM et al., 2003; THIERY et al ., 2004 ; BASIA et ARIE., 2005 ; JITHESH
et al., 2006).
Au niveau des tiges et des racines, l'accumulation de la proline est significative
comparée aux plantes témoins, à la concentration saline 150 meq.l-1en NaCl+CaCl2. Cette
teneur est aussi corrélée positivement avec le stress salin au NaCl+CaCl2 au niveau foliaire
(r=0,203), au niveau des tiges où elle est significative (r=0,452, p≤0,05) et au niveau des
racines (r=0,251).
En effet, ces résultats sont compatibles avec les travaux qui sont faites, sur Vigna
radiata L Wilczek où la teneur en proline s’accroît sous stress salin au NaCl+CaCl2.
(PARAMASIVAN et al, 2007). Par contre, chez Vigna unguiculata L. Walp, l’addition de
CaCl2 conduit à une décroissance de la proline racinaire. Ces résultats obtenus ne
correspondent pas à l’hypothèse qui suggère que le calcium supplémentaire améliore les
effets négatifs du NaCl (SILVA et al., 2003).En ce sens, l'augmentation de la teneur en
proline peut être due au rôle attribué au Ca2+ supplémentaire qui aide à , l’ajustement
osmotique via l’augmentation de l’accumulation des solutés organiques. Dans ce cas, le
calcium peut jouer un rôle améliorateur des effets défavorables de la salinité (HOPKINS,
2003 ; SILVA et al., 2003).Toutefois, il existe des interactions particulièrement fortes entre
le Na+ et le Ca2+ qui affectent différentes réponses physiologiques. Cependant, il semble
que le Na+ déplace le Ca2+lié aux membranes des racines; effet qui peut être évité en
fournissant un excédent de Ca2+, par conséquent l’absorption de Na+ est diminuée
(HOPKINS, 2003; CRAMER, 2007).
Nos résultats montrent aussi une accumulation des sucres solubles totaux, dans les
différents organes des plantes traitées au NaCl. Cependant, cette accumulation est
importante aux niveaux des tiges mais, elle reste non significative à différentes
concentrations salines en NaCl et en NaCl+CaCl2 par rapport aux plantes témoins. En
outre, cette teneur est corrélée positivement au stress salin au NaCl dans deux organes, les
feuilles (r=0,110) et les tiges (r=0,288), par contre au niveau des racines cette corrélation
est négative (r=- 0,370). Des travaux sur Vigna ont montré que l'accumulation des sucres
totaux solubles est observée chez Vigna unguiculata L. Walp, par contre, chez Vigna
radiata L. Wilczek, le contenu cellulaire en sucres et en saccharose est réduit sous stress
salin au NaCl (SILVA et al., 2003; ABDEL HALEEM et al.,2007).Cette accumulation est
observée également chez Sorghum bicolor L. Moench, Glycine max L. Merr cv. Acme, les
cals de la betterave sucrière Saccharum sp, l’Olivier Populus euphratica, le blé Triticum
aestivum L et chez trois espèces de Salsola (S. dendroides, S. richteri et S. orientalis)
(ILDIKO et GABOR., 2000 ; DE LACERDA et al., 2002 ; TAO et STADEN., 2004 ;
ZHANG et al., 2004 ; OTTOW et al., 2005 ; GANDONOU et al., 2006; HEIDARI et
MIRZAIE., 2006). Cependant, chez Prosopis alba, l'accumulation a lieu uniquement au
niveau racinaire, toutefois elle est plus élevée au niveau des cals comparées à des feuilles
des parents et des hybrides de Lycopersicon esculentum (L.) Mill et L. pennellii (Correll)
D'Arcy (PEREZ-ALFOCEA et al. ,1994; MELONI et al. ,2004).
En effet, l’accumulation des sucres solubles totaux chez les plantes a été largement
reportée comme une réponse à la salinité et à la sécheresse, souvent accompagnée par une
décroissance significative concernant la vitesse d’assimilation de CO2 (ASHRAF, 2004).Ils
ont une importance particulière à cause de leur relation directe avec des processus
physiologiques comme la photosynthèse, la translocation et la respiration ; en plus , ils ont
un rôle potentiel dans l’adaptation des stress (ILDIKO et GABOR., 2000). Parmi les rôles
attribués aux sucres est la vitrification du cytoplasme, protection des protéines et protection
des membranes (WINGLER, 2002).
En effet, les sucres totaux solubles incluent les sucres simples comme le
saccharose, le glucose, le fructane, le fructose et le tréhalose et les sucres complexes
comme la famille des raffinose oligosaccharides (RFOs) et les polyols qui ont les
propriétés d’osmoprotecteur et d’antioxydant (WINGLER, 2002 ; LEATHERWOOD,
2005; OTTOW et al., 2005 ; BASIA et ARIE., 2005)
Le traitement salin NaCl+ CaCl2 montre une corrélation négative des sucres totaux
foliaires (r=-0,392), tandis qu’au niveau des tiges et des racines, cette corrélation est
positive (r=0,189) et (r=0,277) respectivement.
D'après ces résultats, il faut remarquer que l’accumulation des sucres solubles
totaux au niveau des tiges et des racines sous stress au NaCl+ CaCl2 est supérieure à celle
enregistrée sous stress salin au NaCl seul, ceci peut être due à l’effet améliorateur attribué
au Ca2+ supplémentaire via l’augmentation de l’accumulation des solutés organiques dont
les sucres solubles totaux font partie (SILVA et al. ,2003).
Nos résultats, montrent une accumulation des protéines totales solubles, dans les
différents organes des plantes sous strass salin au NaCl. Cependant, cette accumulation est
plus importante au niveau des feuilles pour l’effet des deux types de salinité, toutefois, elle
est significative, seulement au niveau des racines à différentes concentrations salines au
NaCl comparé aux plantes témoins. En outre, cette teneur est corrélée positivement avec le
stress salin en NaCl, au niveau des tiges (r=0,427) et des racines où elle est hautement
significative (r=0,818, P≤0,01) et enfin cette corrélation est négative au niveau des
feuilles(r=-0,135). Par contre, les résultats de ABDEL HALEEM., 2007 sur Vigna radiata
L. Wilczek montrent une décroissance significative dans la teneur en protéines totales
solubles sous stress salin, par contre l’addition de l’acide gibbérellique en phase pré-
germinative accroît cette teneur et élimine l’effet négatif du stress. En effet, chez Nicotiana
rustica et Anacardium occidentale et le Sorghum bicolor, il y a accumulation des protéines
totales solubles (CUSIDO et al. ,1986; VIEGAS et al. ,2004 ; OLIVEIRA et al. ,2006).
Cependant, chez deux cultivars de maïs une tolérante et l’autre sensible à la salinité (cv.
323 et cv. 324), il y a un accroissement des protéines totales solubles au niveau des tiges et
des racines par contre chez la seconde il y a une diminution de ce taux. HAMDIA et al .,
2004 et FARIBA et ALI AKBAR., 2005 rapportent chez deux cultivars de Lycopersicon
esculentum Mill., que l’accroissement de la salinité augmente la teneur en protéines totales
solubles dans les tiges et les feuilles de cv. Isfahani, mais elle décroît cette teneur chez cv.
Shirazy. Toutefois, chez Datura stramonium, la concentration des protéines totales
solubles décroît avec l’augmentation des concentrations salines, cependant la fraction des
protéines insolubles est significativement élevée (ALI, 1991).
Il est observé que le stress salin stimule, l’accumulation des composants contenant
de l’azote dont les protéines font partie, fréquemment corrélées avec la tolérance végétale
à la salinité ; par contre il réduit la synthèse protéique (CORDOVILLA et al .,1995;
OMAMI, 2005; NEELAM et al , 2006). Toutefois, les effets du stress sur le métabolisme
azoté ont été fréquemment étudiés chez les plantes à métabolisme azoté, montrant ainsi un
accroissement de la dégradation protéique, une inhibition de la synthèse protéique et une
accumulation et/ou une diminution des protéines et des acides aminés non protéiques chez
plusieurs plantes monocotylédones et dicotylédones (GILBERT et al. , 1997).
L'accumulation des protéines totales solubles semble être due à l'accumulation des
protéines déhydrines en réponse à un stress particulier, en jouant un rôle important dans la
stabilité des protéines membranaires et dans l’ajustement osmotique (SVENSSON, 2001;
MOHAMMADKHANI et HEIDARI., 2007). La proline semble aussi, directement ou
indirectement, jouer un rôle important dans l’accumulation des protéines sous stress salin
(ENANY, 1995).
Cependant, nos résultats enregistrent une accumulation des protéines totales
solubles significative sous le traitement à 150 meq.l-1 de NaCl + CaCl2 et une diminution
significative à 100 meq.l-1.Cette teneur est corrélée positivement au niveau foliaire
(r=0,438), par contre cette corrélation est négative au niveau des tiges (r=-0,054) et au
niveau des racines où elle est hautement significative, sous le même stress (r=-0,842,
P≤0,01). Ces résultats sont en accord avec ceux obtenus chez le haricot et le petit pois, où
il y a une décroissance dans l’incorporation de l’ammonium en acide aminé sous stress
salin ; par conséquent, la fraction non protéique contenant de l’azote s’accroît, cependant la
fraction protéique contenant de l’azote change irrégulièrement chez les plantes stressées
(CORDOVILLA et al . ,1995).
CONCLUSION
CONCLUSIONS
D’après les résultats obtenus on peut tirer les conclusions suivantes :
� La proline a joué le rôle d’osmoprotection pour les deux types de stress salin
cependant, son efficacité est plus remarquable sous le stress en NaCl+CaCl2 via une
accumulation plus importante voir une accumulation significative à 150 meq.l-1 qui
peut être considérer comme un seuil d’une réponse importante de la proline pour
cette espèce de plante.
� Les sucres solubles totaux ne s’accumulent pas d’une façon intéressante, voir une
accumulation faible de plus, il n’y a pas une remarquable différence pour cette teneur
en comparant les deux type de salinité. donc les sucres solubles totaux ne sont pas un
osmoprotecteur intéressants pour cette plante.
� Les protéines totales solubles leur accumulation est plus importante pour le stress en
NaCl seul comparée au NaCl+CaCl2. elle est significative au niveau racinaire à
différentes concentrations salines en NaCl seul, cependant elle est significativement
supérieure à 150 meq. l-1 par contre elle est significativement inférieur à 100meq. l-1.
REFERENCES
BIBLIOGRAPHIQUES
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
ABDEL HALEEM.M.A.MOHAMED., 2007-Physiological aspects of Mung bean plant in response of salt stress and gibberellic acid treatment. Research Journal Of Agriculture And Biological Science.3 (4):200-213.
ABRAHAM. E., RIGO. G., SZEKELY.G ., NAGY. R., KONCS .C., SZABADOS.L.,
2003- Light-dependent induction of proline biosynthesis by abscisic acid and salt stress inhibited by brassinosteroïd in arabidopsis .Plant.Mol.Biol. 51(3):363-372.
ALI.R.M., 1991-Changes in chemical composition of fruits of salinized Datura
stamonium. Journal Of Islamic Academy Of Sciences .V 4(4), p 289-292. AMZALLAG.G.N., GALOUBINOFF. P., 2003-An Hsp90 inhibitor,geldanamycin as a
brassinosteroïd antagonist : evidence from salt exposed roots of Vigna radiata .Plant Biol.5:143-150.
EKOPEDIA. Contenu disponible sous Licence Art Libre v1.2. ANTIPOLIS.S., 2003-Les cahiers du plan bleu 2.Les menaces sur les sols dans les pays
méditerranéens .Etude bibliographique. P 71. ARORA.S et SARADHI .P P., 1995-Light induced enhancement in proline levels in Vigna
radiata exposed to environmental stresses. Australia Journal Of Plant Physiology.22 (3): 383-386.
ASHRAF.M et BASHER. A.,2004-Salt stress induced changes in some organic
metabolites and ionic relations in nodules and plant parts of two crop legumes differing in salt tolerance .Flora-Morphology, Distribution , Functional , Ecology Of Plants. V198, issue 6, p 486-498.
ASHRAF.M et E.RASUL., 1988-Salt tolerance of Mung bean (Vigna radiata (L) Wliczek)
at two growth stages .Journal Plant And Soil. V 10, n° 01, p 63-67. ASHRAF.M., 2004-Some important physiological selection criteria for salt tolerance in
plants. Flora Review. V199, p 361-376.
BADMOOD.,DUMZIBOT.,ESKIMBOT.,GAMIP,IDIOMABOT.,KESON.,LINEL.,RHETO.,ROBOTQUISTNIX.,SALECABOT.,SPEDONA.,THIJBOT.,TOONY.,VALERIE75.,YURIKBOT.,ZYZOMUS.,2007-Haricot mungo. WIKIPEDIA. Wikimedia Foundation, Inc., association de bienfaisance régie par le paragraphe 501(c) (3) du code fiscal des États-Unis.
BASIA. V et ARIE.A., 2005-Recent advances in engineering plant tolerance to abiotic
stress: achievement and limitations. Review Of Current Opinion In Biotechnology. V16, p 123-132.
BELKHODJA.M., 1996-Action de la salinité sur le comportement physiologique, minéral
métabolique, et recherche de marqueurs moléculaires a fève (Vicia faba L.) .Thèse de Doctorat. Université d’Oran. P 255.
BELTRAN J.M., 2002-.Le sel et la terre : Un danger pour la production vivrière. Dossiers
de font sur le sel et la salinisation. Sommet mondial de l’alimentation FAO.10-13 juin 2002.
BEN KHALED. L., GOMEZ .A. M., OIHABI.A., HONRUBIA.M., 2003-Effet du stress
salin en milieu hydroponique sur le trèfle inoculé par le rhizobium.Agronomie.23 :553-560
BENNABI.F., 2005-Les métabolismes glucidiques et azotés chez les halophytes (Atriplex
halimus) stressées à la salinité. Mémoire de magister. Université d’Oran.P29. BERNARD. F., HASSONPOOR. H., SHAKER-BAZANOV.H., 2006-The effect of
carbohydrate type and illumination mode on proline caffeic acid and Rosmarinic acid accumulation in two lines of Zataria multiflora calus tissues. International Society For Horticulturale Science 273. :International Symposium on the Labiatae: Advances in Production, Biotechnology and Utilization.
BIDAI.Y., 2002-Le métabolismes de la proline chez l’Atriplex halimus L. Stressée à la
salinité. Mémoire de magister. Université d’Oran. P 35-45. BOURION. V. L. ,HÉNAUT. I., MURIER –JOLAINE. N . , SALON. C. ,2003- Cold
acclimation of winter and spring peas : Carbons partitioning as affected by light intensity. Europ. J. Agronomy. 19 : 535-548.
BRADFORD M.M., 1976-A rapid and sensitive method for the quantization of microgram
quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding .Anal Biochem.V 72 P 248-254.
BRETON .G, DANYLUK.J, OUELLET. F et SARHAN. F.,2000-Biotechnological
applications of plant freezing associated proteins. Biotechnology Annual Review 6.
CALU. G., 2006-Effet du stress salin sur les plantes : comparaison entre deux plantes
modèles Arabidopsis thaliana et Thellungiella halophila .Thèse Master 1. P 3-10. CHAKRABARTI.N., MUKHERJI.S., 2003-Effect of Phytohormone Pretreatment on
Nitrogen Metabolism in Vigna radiata Under Salt Stress. Code Plantarum B.Pabaj.Vol 46,n°01, p 63-66.
CHEVERY.C., ROBERT.M., 1993-Salure des sols maghrébins, influence sur les
propriétés physiques et physicochimiques des sols. Répercussion des
modifications de ces dernières sur la fertilité notamment azotée des sols .ENSA.P59.
in nodules in response to nitrate levels in Vicia faba under salt stress. Journal Of Experimental Botany.V 47, n° 295, p. 203-210, February 1996.
CRAMER.R.G., 2007-Sodium-calcium interaction under salinity stress. Chapter 10
Book Salinity: Environment –Plants-Molecules. P 205-227.
CUSIDO.R.M., PALAZON.J., ALTABELLA.T., MORALES.C.,1986-Effect of salinity on soluble protein , free amino acids and nicotine contents in Nicotiana rustica L.Plant And Soil .V102,n° 01, p 55-60.
DE LACERDA.C.F., CAMBRAIA.J., OLIVA.M.O., RUIZ.H.A PRISCO.J.T., 2002-
Solute accumulation and distribution during shoot and leaf development in two sorghum genotypes under salt stress. Environmental And Experimental Botany.
V 49, issue 2, p107-120. DREVON.J.J.,ABDELLY.C.,AMARGER.N.,AOUANI.E.A.,AURAC.J.,GHERBI.H.,JEB
ARA.M.,LIUCH.C.,PAYRE.H.,SCHUMP.O.,SOUSSI.M.,SIFI.B.,TRABELSI.M.,2001-An interdisciplinary research strategy to improve symbiotic nitrogen fixation and yield of comm. bean (phaseolus vulgaris) in salinised areas of the Mediterranean basin .J.Biotech.91:257-268.
DUBOIS.M, GILLES.K.A, HAMILTON .J.K, RESERS and SMITH.F.,1956-Colorimetric
method for determination of sugars and related substances .Analytical chemistry , volume 28 (3), p 350-356.
EL-ENANY.A.E., 1995-. Proline effect on shoot organogenesis and protein synthesis in
salinity stressed tomato cultures.Journal Of Islamic Academy Of Sciences .8(3), p137-142.
FARIBA.A., ALI AKBAR.E., 2005-Soluble proteins, proline, carbohydrates and Na+/K+
changes in two tomato (lycopersicon esculentum Mill) cultivars under in vitro salt stress .American Journal Of Biochemistry And Biotechnology. 1(4):212-216.
FLOWERS.T.J.,YEO.R.,1995-For salinity resistance in crop plant: where next?
.Aust.J.Plant Physiol.22:875-884. FOURNERAU.J.C., 2000-L’eau –l’environnement : cycle biologique de l’eau : eau et
végétaux. Le cahier n°3 concerne les problèmes de l'eau sous ses aspects physiques .Editeur CRDP des pays de la Loire ISBN : 2-86628-333-3
GANDONOU.C.,ERRABIC.T.,ABRINI.J.,IDAOMAR.M.,SENHAJ.N.,2006-Selection of
callus cultures of sugarcane (Saccharum sp).tolerant to NaCl and their response to salt stress. Plant Cell, Tissue And Organ Culture. V 87. n° 1,p 9-16(8).
GEST.H.,2002-History of world photosynthesis and evolution of its definition.
Photosynthesis research. 73:7610.
GILBERT. G., GADUSH. M., WILSON. C., MADORE. M., 1997- Amino acid accumulation in sink and source tissues of coleus blumei benth during salinity stress. Oxford Journal Of Experimental Botany .V 49, n° 318, p 107-114.
GRATTAN S.R., GRIEVE C.M., 1993-Mineral Nutrient acquisition and response by
plants grown in saline environnements. Handbook Of Plant And Crop Stress, p 208-218. GREGORY.B., 2005-Écophysiologie de semis de conifères éctomycorhizés en milieu salin
et sodique .Thèse de mémoire .Université Lava Canada .Chapitre 1. HAGEMEYER .J., 1996-Salt in plant ecology. P 176-181.
HAMDIA.M., SHADDAD.M.A.K., DOAA.M.M.,2004-Mechanisms of salt tolerance and
interactive effects of azospirilum brasilence inoculation on maize cultivars grown under salt stress conditions. Plant Growth Regulation. V 44, n° 02, p 165-174. (10). HAMDY.A., 1999-Saline irrigation assessment for a sustainable use saline irrigation
.Halophyte production and utilization , project n° IC 18CT 96-0055, p 152-26. HASEGAWA.PAUL.M., BRESSAN.RAY.A., ZHU.JIAN-KANG., BOHNERT.HANS.J.,
2000-Plant cellular and molecular responses to high salinity.Annu.Rev.Plant.Physiol.Plant Mol.Biol.51:463-499.
HEIDARI.S.D., MIRZAIE.N .H., 2006-Salinity-induced growth and some metabolic
changes in three Salsola species. Journal Of Arid Environments .V67, issue 4, p 715-720. HELLER.R., ESNAULT.R., LANCE.C., 2004.Physiologie Végétale.Tome 1 nutrition
.PARIS/DUMOD.P 323.ISBN:2-10-048710-8. HENK. HART ., EGGLI. URS., 1995-Evolution and systematics of the crassulaceas.
Backhrius publishers,leiden, p 192 HERVIEU.B., GUILLOU M., 2000-la brevetabilité du vivant en débat : Construire des
plantes résistantes à la sécheresse. Communiqués et dossiers de presse. Presse Info - Juin/juillet. Institut National de la Recherche Agronomique.
HOPKINS.W.G.,2003-Physiologie végétale. Traduction de la 2e édition américaine.
Édition DE BOECK université. P 451-473. HU.C.A., DELAUNEY.A.J., VERNA.D.P., 1992-A bifunctional enzyme (delta 1-
pyrroline -5-carboxylate synthetase) catalyzes the first two steps in proline biosynthesis in plants .Proc Nath Acad Sci Usa. 89(19); 9354-8 PMID : 1384052
ILDIKO. K ., GABOR.G., 2000-Osmotic and salt stress induced alteration in soluble
carbohydrate content in wheat seedlings. Crop Sciences .V40, p 482-487. IMRI.B.,1991., Mung bean. The new rural industries .P 355-360. JALEEL.C.A., MANIVANNAN. P., SANKAR. B., KISHOREKUMAR. A.,
PQNNEERSELVAN.R., 2007-Calcium chloride effects on salinity induced
oxidative stress, proline metabolism and indole alkaloid accumulation in catharanthus roseus .Pubmed , pmid17720584 Cr Biol, 330 9 674-83.
JAY64., 2008- Soja. Ekopédia. Contenu disponible sous Licence Art Libre v1.2. JIMÉNEZ-BREMONT.J.,BACCERA-FLORA.A.,HERMANDEZ-LUCERO.E.,
RODRIGUEZ-PIMENTEL.J., 2006-Proline accumulation in two bean cultivars under salt stress and the effect of polyamines and ornithine .Biologia Plantarum.
V 50, n° 4, p 763-766(4). JITHESH .M.N., PRASHANTH S.R., SIVAPRAKAS K.R., PARIDA AJAY.K., 2006-
Antioxidative response mechanisms in halophytes:their role in stress defense.Journal Of Genetics.V85, n°3, p 237-254.
KENFAOUI.A., 1997-La salinité des eaux d’irrigation .Synthèse bibliographique réalisé
par les élèves ingénieurs de l’école nationale du génie rural des eaux et des forets de Montpellier.
KRISTA .P. ,2003-How and when does water stresses impact plant growth and
development. The department of land resources and environnemental sciences. Water Quality and Irrigation Management. Montana State University-Bozeman.American society of agronomy, Crop Science Society of America, and Soil Science Society of America 2003 Annual Meetings held in Denver, Colorado.
Department of Agriculture, Sri Lanka (DOASL), All rights reserved-Developed in Sri Lanka association with information and communication technology agency of Sri Lanka (ICTA).
LE HOUÉROU.H.N., 2000- Utilization of fodder trees and shrubs in the arid and semi arid
zones of West Asia and North Africa. Arid Soil Res. Rehab. 14:101-135. LEATHERWOOD.W.R., 2005-Influence of salt stress on germination, root elongation and
carbohydrate content of five salt tolerant and sensitive taxa. A thesis submitted requirements for the degree of master of science. Faculty of North Carolina State University. p13-15.
LETEY.J., 2000-Soil salinity poses challenges for sustainable agriculture and wildlife.
CA.Agriculture. V25 (2), p 43-48. LEVIGNERON. A. ,LOPEZ .F. ,VANSNYT .G. ,BERTHOMIEU .P. ,FOURIROY. P.,
CASSE-DELBART .F. ,1995-Les plantes face au stress salin. Cahier Agriculture. V 4, n ° 4, p 263-273.
management for sustainable use of salt –affected soils .Rome: FAO Soils Bulletin, now printing.
MAZLIAK. P., 2000-Physiologie végétale.TomeI.Edition Heremann. ISBN :2705659439
.p 521 MELONI. D. A., GULUTA .M. R., MARTINEZ.C.A. , OLIVA. M.A., 2004-The effects of
salt stress on growth nitrate reduction and proline and glycinebetaine accumulation in Prosopis alba. Brazilian Journal Of Plant Physiology .16(1):39-46.
MICHELLE .C. ,2002-The effect of temperature on the percentage of germination of
Mung Bean .Science Project. MINHAS.P.S., SHARMA.D.R., KHOSLMA .B.K., 1990-Mung bean response to irrigation
with waters of different salinities.Irrig.Sci.11:57-62. MINT MOHAMED.K. M., 2007- Effet de la salinité sur la proline et les glucides chez la
fève (Vicia faba). Memoire De Magister. Université d’Oran. P 28-32. MISRA.A.N., SRIVASTAVA.A., STRASSER .R.J., 2001-Utilization on fact chlorophyll a
fluorescence technique in assessing the salt ion sensitivity of Mung bean and brassica seedlings. Journal of Plant Physiology .V158, n°09, p 1173-1181.
MOHAMMADKHANI .N. ,HEIDARI. R., 2007-Effect of drought stress on soluble
proteins in two Maize varieties .Turk Journal Of Biology. V 32, p 32-30. MOLINARI . H. B., CORREA. M., CELSO. J., DAROS. E., DE CAMPOS M. K ., DE
CARVALHO.F., JANE FIUZA .R., PORTELA.F. J., BESPALHOK.C., PEREIRA. L. F., VIEIRA. L. G. E., 2007-Evaluation of the stress-inducible production of proline in transgenic sugarcane (Saccharum spp.): osmotic adjustment, chlorophyll fluorescence and oxidative stress. Physiologia Plantarum. V 130, n° 2 , p 218-229.
MUNNS. R.,2002-Comparative physiology of salt and water stress .Plant Cell
Environ.25:239-250. MUSGRAVE.M.E .,VANHOY.M.A.,1989-A growth analysis of waterlogging in Mung
bean (phaseolus aureus).Revue Canadienne De Botanique.67 (8):2391-2395. MYERS. R .L., 2006-Mung beans: a food legume adapted to hot, dry conditions.
Alternative Crop Guide. P1-4.
NEELAM. M., AJAY. K., GUPTA D.U.N., 2006- Changes in free amino acids and stress proteins synthesis in two genotypes of green gram under salt stress. Journal Of Plant Science.1 (1):56-66.
NEUMANN. P., 1997-Salinity resistance and plant growth revisited .Plant Cell
Environ.20:1193-1198. OCTAVIO L. F., JOAQUIM E.F., PRISCO. J.T., FILHO.E.G., 1999-Effects Of CaCl2on
Growth and Osmoregulator Accumulation in NaCl Stressd Cowpea Seedlings. Revista Brazileira De Fisiologia Vegetal.11 (3):145-151.
OLIVEIRA. L.P. B., LUCIMAURO. A .A., EGIDIO B. N., MERCIA. V., DOS
SANTOS.F., DE CASSIA.J., 2006-Organic solutes in forage sorghum genotypes under saline stress. Presq.Agropec,Bras, Brasilia.V 41, n° 01, p 31-35.
OMMAMIE.N., 2005-Response of Amaranth to salinity stress. These of Ph.D.Horticulture.
University of Pretoria. Chapter 1, p 5-20, chapter 6, P1. OPLINGER.E.S., HARMAN.L.L., KAMINISKRI.A.R., S.M.COMBS., DOLL.J.D., 2000-
Mung bean .Alternative Field Crop Manual Wisconsin Corn Agronomy. OTTOW.E.A., BRINKER.M., TEICHMAN.T., FRIZ.E., KAISER.W., BROSCHÉ.M.,
KANGASJARVI.J., JIANG.X., POLLÉ.A., 2005- Populus euphratica Displays Apoplastic Sodium Accumulation, Osmotic Adjustment by Decreases in Calcium and Soluble Carbohydrates, and Develops Leaf Succulence under Salt Stress.Plant Physiology .V139, p 1762-1772.
PARAMASIVAN. M., CHERUTH A. J., BEEMARO. S., RAMAMUR. T.,
PALLIPALAYAM .V. M., RAMALINGAM .S, RAJARAM. P., 2007-Salt Stress Mitigation by Calcium Chloride in Vigna Radiata L.Wilczek .Acta Biologica Cracoviensia Series Botanica. 49/2: 105-109.
PEARY .W. , PEAVEY. W., 2003- Natural toxins in sprouted seeds:separating myth from
reality.Living and raw foods. PEREZ-ALFOCEA.F., SANTA-CRUZA.G.G., BOLARIM.M.C., 1994-NaCl stress-
induced organic solute changes on leaves and celli of Lycopersicon esculentum L.Pennelli and their interspecific hybrid. Journal Of Plant Physiology. V 143,
Multiscript Plant Name Database (M.M.P.N.D) - A Work in Progress. School of Agriculture and Food Systems. Faculty of Land & Food Resources. The University of Melbourne. Australia.
POUSTINI.K.,SIOSEMARDEH.A.,RANJBAR.M., 2007-Proline accumulation as a
response to salt stress in 30 wheat (Triticum aestivum.L) cultivars differing in salt tolerance .Genetic Resources And Crop Evolution .V 54, n° 5, p 925-934
.Biologia Plantarum .V 43, n° 03, p 423-426. RANJIT.K.B., AMAJIT.S., BASRA.C.P.M., GROVER .I.S.,1997-Est-ce que les
polyamines sont impliqués dans la protection des plantes de Mung bean sous stress thermique? Bot.Bull.Acad.Peche.38:165-139.
REHM.P. ,1989-Vigna ssp. Manuel de l’agriculture et de l’alimentation dans les pays en
voie de développement. : Production végétale spéciale dans les tropiques et les sous –tropiques.V 04, p 271-273. Ulmer maison d'édition, Stuttgart.
ROOSENS. N.H., THU. T.T., ISKANDAR. H.M., JACOB.M., 1998-Isolation of
ornithine-delta-aminotransferase cDNA and effect of salt stress on its expression in Arabidopsis thaliana .Plant Physiology. 117(1):263-271.
ROUT.G.R., SAMANTARAY.S., DAS.P., 2001-Studies on differential manganese
tolerance of Mung bean and rice genotypes in hydroponics culture.Agronomic.21:725-733.
SALEEM.B., ILYAS.F., ALI.S., QURESHI .M.J., MALIK.I.A., 1998- Etude sur l’analyse
chimique de Mung bean (Vigna radiata L. Wilczek).Journal Du Pajistan Des Sciences Biologiques .1 (2):120-123.
SAUPE S.G., 2007-Plant physiology: water, diffusion and Osmosis. Plant Physiology.
Biology Department. College of St. Benedict/St. John's University Collegeville, MN 56321 (320) 363-2782.
SCHWARTZ. C., 2007-Salinisation des sols : processus, causes, effets et gestions des sols
salés .Diapositif. SEAMAN. J., 2004-Mechanisms of salt tolerance in halophytes: can crop plants resistance
to salinity be improved .APS 402. Dissertation. P2-7. SERRE. M., 2007-Vigna aureus. Saveur du monde.net. Copyright MSCOMM 1996 – 2007
Michèle Serre. SHAKIL. A., ABDUL WAHID.E., ABDUL WAHID., 2004-Comparative morphological
and physiological responses of green gram genotypes to salinity applied at different growth stages .Bot.Bull.Acad.sin.46:135-142.
SHUJI.Y., BRESSAN. A., HASEGAWA.P.M., 2002-Salt stress tolerance of plants.Jircas
Working Report.25-33. SILVA. J.V., DE LACERDA.F.C., DE COSTA.A., FILHO.P.H., JOAQUIM.
E.G.,TARQUINO.P.J., 2003-Physiological response of NaCl stressed cowpea plants grown in nutrient solution supplemented with CaCl2.Brazilian Journal Of Plants Physiology .V15,n°02.londrina. doi:10,1590/S 1677-04202003000200005.
SKINNER .W.M., 2006-Vigna radiata var.radiata L. R.Wilczek.Taxonomic serial n° 506804. The Plants database, Database (version 4.04). ITIS REPORT
SMITH .ALBERT.C., 1985- Flora vitiensis nova : a new flora of Fiji .National botanical garden ,Lawai, Kauai,Hawaii.V3, p 738.
SOUALMI.N., 2008-Caractérisations physiologique, biochimique, anatomique et
morphologique chez Atriplex halimus L. stressée à la salinité..memoire de magister. Université d’Oran. p 73.
SPARKES .D., 2005-Plants: Mung beans .department of primary industries and fisheries .
The State of Queensland 1995 - 2007.Queensland Government. SRINIVES. P., 1990- Mung bean breeding and genetic resources in Thailand .In report at
the Mung bean meeting 90-kamphaeng saen campus in Nakhon pathom, Tailand: department of agronomy, Kasetsart university.1-10.
SUMITHRA.K., JUTUR.P., CARMEL.B., REDDY.A., 2004-Salinity induced changes in
two cultivars of Vigna radiata: responses of antioxidative and proline metabolism. Plant growth regulation. V 50, n° 1, P11-22
SUNG .D.Y., KAPLAN. F., LEEK .J ., GUY.L., 2003-Acquired tolerance to temperature
extremes. Trends in pant science.8 (4):179-187. SVENSSON.,2001-Functional studies of the role of plant dehydrins in tolerance to salinity
dessication .Epsilon dissertation and graduate theses archive dep of plant. Biology acta. Universities Agricultural Sueciae Agraria.V 259.
SYEED. K., 2004-Activities of carbonic anhydrase, catalase and acc oxidase of mung bean
(vigna radiata) are differentially affected by salinity stress. Journal : Food, Agriculture Et Environnement (JFAE).V 2, issue 2, ISSN : 1459-0263.
TAILLEFFER. M-J ., GAGNE. D., 2004-Germe de haricot. L’épicerie .Les coulisses.
Reportage du 16 juin 2004. 2004-2007 Société Radio-Canada. Tous droits réservés.
TAO. L., STADEN. V.J.,2004-Selection and characterization of sodium chloride-tolerant
callus of glycine max L. Merrcv.acme .Revue Plant Growth Regulation .V31,n°3, p 195-207.
THEBAULT.L.,2001-La nutrition végétale : La plante et l'eau, la photosynthèse,
Interactions de la plante avec son milieu : les adaptations. Du BigBang à l'Homme. Think Different : Site créé sur Apple Macintosh
THIERY.L., LEPRINCEA.S.,LEFEBRE.D.,GHARS.M.A.,DEBABARIEUX.E., SAVOURE.A., 2004-Phospholipase D is a negative regulator of proline
biosynthesis in Arabidopsis thaliana.J.Bio.Chem.279(15):14812-8. THOMASHOW.M.F., 1999-Plant cold acclimation: freezing tolerance genes and
regulatory mechanisms.Annu.Rev. Plant Physiol.Plant Mol.Biol.50:571-599. VERBUGGEN.N., VILLARROEL.R., VANMONTAGN., 1993-Osmoregulation of a
pyrrline-5-carboxylate reductase gene in Arabidopsis thaliana. Plant Physiology .103(3):771-781.
VIEGAS. R. A., SILVEIRA JOAQUIM .A.G., SILVA.M ., 2004- Assimilatory reduction
in cashew plants grown in salinized medium .Revue: Bras.Eng.Agric.Ambient. V 8,n° 2-3, p 189-195. VINOD. K ., SHAARMA. D.R. , 2004- Isolation and characterization of sodium
chloride-reristant callus culura of Vigna .Journal Of Experimental Botany. V 40, n° 1,p143-147.
WINGLER.A., 2002-The function of trehalose biosynthesis in plants; photochemistry 60:
437-440. YEO.A.R., 1998- Molecular biology of salt tolerance in the context of whole. Plant
Physiology.J.Exp.Bot.49:915-929. YOSHIDA.S., 1994-Low temperature induced cytoplasmic acidosis in cultured Mung bean
(Vigna radiata L.Wliczek).Cells. Plant Physiol.104 (4):1131-1138. ZATSUMAME Y. K. K., 1995- Yunyu mamerui Zukan (a pictorial book of importated
food legumes. ZHANG.F. Y., YANG. W. L., ZHAO.X.H., ZHANG.L.X., 2004-Effects of salinity on
growth and compatible solutes of callus induced from populus euphratica.Revue Cellular And Developmental Biology –Plant. V 40,n° 05, p 491-494.
ZHU .J-K., JAGENDORF A., CHINNUSAMY V., 2005- Understanding and improving
salt tolerance in plants. Crop Science Society Of America .V 45,p 437-448.
ZRYD J-P., 2004- L’eau et les végétaux. La biologie du stress.UNIL: Université de Lausanne. Biophore - CH-1015 Lausanne - Suisse.
ANNEXE
ANNEXE
1. Solution nutritive de HOAGLAND (1938).
Solution mère Poids g.l-1 Mole.l-1
Macro-éléments
KNO3 191.90 1.90
(NO3)Ca, 4H2O 129.80 0.55
NO3 NH4 210.00 0.26
SO4 Mg, 7H2O 61.50 0.25
PO4 H2K 54.40 0.40
PO4K2H, 3H2O 34.23 0.15
Oligo-éléments
Cl2Mn, 4H2O 1.80
CuSO4, 5H2O 0.176
ZnSO4, 7H2O 0.219
BO3 H3 2.861
MO7O24(NH4), 7H2O 0.285
EDTA ferrique
(C10H12FeNaO8) 0.05
2. Méthode de calcul de la capacité de rétention
Dans un petit pot en plastique perforé à sa base, on met 100g du sable servant à
notre expérimentation (P1), puis de l'eau distillé est versée dans ce pot jusqu'à saturation.
Ce petit pot est ensuite mis sur la paillasse pendant 24 heurs. Après cette durée de temps, le
pot est repèse (P2). Le pesage du sable est effectué par soustraction du poids du pot.
Calcul de la capacité de rétention (C1) pour 100g de sable
P1= 100g
P2= 124.4g
C1= P2-P1
C1= 124.4 – 100 = 24.4g
Il faut enlever le poids du pot qui est de 4.4 g, soit le volume final de l'eau est de 20g.
La capacité de rétention est de 20 ml pour 100g de sable.
Calcul de la capacité de rétention (C2)
Pour 1000 g de substrat
20 ml 100g de sable
C2 1000g de substrat
C2 = 20 * 1000/100
C2 = 200 ml
La capacité de rétention est de 200 ml pour 1000g de substrat
3. Les courbes d’étalonnages
a. Courbe d’étalonnage de la proline
y = 0,0023x
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0 50 100 150
La concentration en proline ( µg.ml -1)
La d
ensi
té o
ptiq
ue
b. Courbe d’étalonnage des sucres solubles totaux.
y = 0,0061x
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0 20 40 60 80 100 120
La concentration en sucres solubles totaux ( µg.ml -1)
La d
ensi
té o
ptiq
ue
c. Courbe d’étalonnages des protéines totales solubles.
y = 0,001x
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
0,12
0 20 40 60 80 100 120
La concentration en protéines totales solubles ( µg .ml-1)
La d
ensi
té o
ptiq
ue
3. Le test de signification de Fisher (p<0.05) de la proline, les sucres solubles totaux
et les protéines totales solubles entre les différents traitements selon le logiciel de
statistique SPSS.
a.La proline.
• La proline des feuilles
Comparaisons multiples
Variable dépendante: PROLINF
LSD
-9,78250 6,190 ,120 -22,22111 2,65611
-10,86875 6,190 ,085 -23,30736 1,56986
-1,63000 6,190 ,793 -14,06861 10,80861
5,76125 6,190 ,357 -6,67736 18,19986
1,74000 6,190 ,780 -10,69861 14,17861
-2,22625 6,190 ,721 -14,66486 10,21236
9,78250 6,190 ,120 -2,65611 22,22111
-1,08625 6,190 ,861 -13,52486 11,35236
8,15250 6,190 ,194 -4,28611 20,59111
15,54375* 6,190 ,015 3,10514 27,98236
11,52250 6,190 ,069 -,91611 23,96111
7,55625 6,190 ,228 -4,88236 19,99486
10,86875 6,190 ,085 -1,56986 23,30736
1,08625 6,190 ,861 -11,35236 13,52486
9,23875 6,190 ,142 -3,19986 21,67736
16,63000* 6,190 ,010 4,19139 29,06861
12,60875* 6,190 ,047 ,17014 25,04736
8,64250 6,190 ,169 -3,79611 21,08111
1,63000 6,190 ,793 -10,80861 14,06861
-8,15250 6,190 ,194 -20,59111 4,28611
-9,23875 6,190 ,142 -21,67736 3,19986
7,39125 6,190 ,238 -5,04736 19,82986
3,37000 6,190 ,589 -9,06861 15,80861
-,59625 6,190 ,924 -13,03486 11,84236
-5,76125 6,190 ,357 -18,19986 6,67736
-15,54375* 6,190 ,015 -27,98236 -3,10514
-16,63000* 6,190 ,010 -29,06861 -4,19139
-7,39125 6,190 ,238 -19,82986 5,04736
-4,02125 6,190 ,519 -16,45986 8,41736
-7,98750 6,190 ,203 -20,42611 4,45111
-1,74000 6,190 ,780 -14,17861 10,69861
-11,52250 6,190 ,069 -23,96111 ,91611
-12,60875* 6,190 ,047 -25,04736 -,17014
-3,37000 6,190 ,589 -15,80861 9,06861
4,02125 6,190 ,519 -8,41736 16,45986
-3,96625 6,190 ,525 -16,40486 8,47236
2,22625 6,190 ,721 -10,21236 14,66486
-7,55625 6,190 ,228 -19,99486 4,88236
-8,64250 6,190 ,169 -21,08111 3,79611
,59625 6,190 ,924 -11,84236 13,03486
7,98750 6,190 ,203 -4,45111 20,42611
3,96625 6,190 ,525 -8,47236 16,40486
(J) TRAITEME50 meq NaCl
100 meq NaCl
150 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Temoin
100 meq NaCl
150 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Temoin
50 meq NaCl
150 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Temoin
50 meq NaCl
100 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Temoin
50 meq NaCl
100 meq NaCl
150 meq NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Temoin
50 meq NaCl
100 meq NaCl
150 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Temoin
50 meq NaCl
100 meq NaCl
150 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
(I) TRAITEMETemoin
50 meq NaCl
100 meq NaCl
150 meq NaCl
50 meq CaCl2+NaCl
100 meq CaCl2+NaCl
150 meq CaCl2+NaCl
Différencedes
moyennes(I-J)
Erreurstandard Signification
Borneinférieure
Limitesupérieure
Intervalle de confiance à95%
Basé sur les moyennes observées.
La différence des moyennes est significative au niveau ,05.*.