REGULACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNITARIA MARISOL POCINO GISTAU; MSc, PhSc Cátedra de Inmunología Escuela de Medicina “José María Vargas”; UCV 2019
REGULACIÓN DE LA
RESPUESTA INMUNITARIA
MARISOL POCINO GISTAU; MSc, PhSc Cátedra de Inmunología
Escuela de Medicina “José María Vargas”;
UCV
2019
¿De que trata la presente clase?
Los diferentes mecanismos que regulan la respuesta
inmunitaria, impidiendo que esta se manifieste de
una manera descontrolada/ exacerbada (Regulación)
o que ataque “lo propio” (Tolerancia).
Se describirá en que consisten y como se llevan a
cabo estos mecanismos.
Continuamente estamos expuestos a
infinidad de estímulos antigénicos
provenientes:
Del Medio Ambiente
Del interior del cuerpo
De estos estímulos:
Todos los agentes externos y
Ciertos componentes propios
Son eficientes inductores de la respuesta
inmunitaria
Que componentes propios???
Aquellos que por diversas razones son capaces de activar una respuesta inmunitaria
Estos incluyen:
Elementos Solubles: Proteínas, lípidos, ácidos nucleicos
Células: Como células seniles e incluso células normales
Ante esta diversidad de agentes, el Sistema Inmunitario se encuentra constantemente retado
y su actividad sostenida representa un riesgo potencial para el individuo.
La respuesta inmune generada puede
progresar hacia :
Hipersensibilidad
Autoinmunidad
Por ello, la respuesta debe estar finamente
regulada
Qué es lo ideal???
• Que una respuesta inmunitaria se dé con rapidez
para eliminar el microorganismo.
• Con las mínimas lesiones colaterales.
• Y que una vez eliminado el antígeno el sistema
vuelva a su estado de reposo.
En su forma más básica, una respuesta inmunitaria eficaz es el
resultado de la relación mutua entre el antígeno y una red de
células inmunitarias competentes.
La calidad y la magnitud de la respuesta
inmunitaria viene determinada por muchos
factores que incluyen:
• La forma, dosis y vía de administración del antígeno
• La célula presentadora de antígeno (CPA)
• La carga genética del sujeto
• Cualquier antecedente de exposición anterior al antígeno específico
• Cualquier infección concurrente que el sujeto pueda tener
TOLERANCIA
-
INMUNIDAD
-
REGULACIÓN/SUPRESIÓN
++
Las células del sistema inmunitario
según las señales que reciben van
a escoger diferentes opciones de
cómo responder
[Ag]
Avidez
La tolerancia inmunológica es la imposibilidad controlada para responder a los constituyentes propios, pese a la capacidad para hacerlo.
Igualmente, puede existir tolerancia contra agentes extraños a nuestro organismo.
Tolerancia
Debido a lo importante que es tener un sistema inmunitario “controlado”, o sea:
-que no ataque a lo propio -que no tenga respuestas exacerbadas.
Evolutivamente hemos desarrollado diferentes mecanismos que van a regular la respuesta
inmunitaria en las diversas etapas de la misma.
Estos mecanismos pueden actuar:
-en momentos diferentes
-o de manera alternativa
Regulación por antígeno
- Naturaleza
- Dosis
- Vía de administración
Regulación por anticuerpos
IgG suprime
IgM potencia
Regulación idiotípica
Regulación por la CPA: Regulación por células dendríticas
Regulación por linfocitos
TAREA
• Estudiar por su cuenta en los libros de texto :
- La regulación por antígeno
- La regulación por anticuerpos
- La regulación idiotípica
- La red de interacciones idiotipo/anti-idiotipo
- La regulación por la CPA
Células Dendríticas
Realizan función de captura de
Antígeno en un sitio y presentan
el antígeno en otro sitio
• Son células con morfología caracterizada por
proyecciones citoplasmáticas, largas y finas,
similares a las de las dendritas del cerebro.
Células Dendríticas: Gráfico y foto de Microscopía
Electrónica
Células Dendríticas (DC)
Células con capacidad fagocítica que realizan
funciones de reconocimiento y efectoras esenciales en la inmunidad innata. Tienen una gran plasticidad, con amplia variedad de morfologías y funciones.
Origen: Médula Ósea
Distribución: Se encuentran en bajo porcentaje en sangre, en epitelio de manera constitutiva y en la mayoría de los tejidos del cuerpo donde residen de manera transitoria.
Funciones de las DC
- Por su ubicación y morfología pueden detectar patógenos
invasores.
- Procesan y presentan antígenos a los linfocitos T CD4 y
CD8.
- Activan a los linfocitos T y dirigen su función y
diferenciación posterior.
- Establecen el nexo entre la inmunidad innata y la
adaptativa.
Subpoblaciones de DC
Diferentes subpoblaciones con orígenes comunes
Las principales Subpoblaciones de DC son:
Las células dendríticas mieloides (DCm) o clásicas y las
plasmacitoides (DCp).
DCm En piel, mucosa y parénquima orgánico, al activarse
por agentes patógenos adquieren movilidad y migran a los
órganos linfáticos donde presentan antígenos microbianos a
los linfocitos T. Actúan en las respuestas inmunitarias innatas
y adaptativas. Establecen un vínculo entre estas dos ramas de
la respuesta.
DCp reconocen ácidos nucléicos de virus. Producen IFN Tipo
I con potentes actividades antivirales
También, las DC se agrupan según su grado de
madurez en:
DC maduras (activadas) que funcionan como
células presentadoras de antígeno (CPA), para los
linfocitos T vírgenes y son importantes para el inicio
de las respuestas inmunitarias adaptativas contra
antígenos proteicos.
DC inmaduras (en reposo) son importantes en la
inducción de tolerancia frente antígenos propios.
Marcador DC Mieloide DC Plasmacitoide
Inmadura Madura Inmadura Madura
a.- Marcadores de
subpoblación
CD 1c + ++ - -
CD123 (receptor de IL-3) - - + ++
b.- Moléculas Importantes
en su función
Coestimuladora:CD80
(B7.1); CD86 (B.2)
+ +++ + +++
Presentación de Ag a T
CD8: MHC clase I
+ +++ + +++
Presentación de Ag a T
CD4: MHC clase II
+ +++ + +++
Células dendríticas tolerogénicas
PAMPS, inflamación
estrés celular
induce
diferenciación de
DC en
activadores
potentes de
células CD4+ y
CD8+.
Por el contrario, DC
en reposo
inducen y
mantienen la
TOLERANCIA
Regulación mediada por linfocitos T
Es uno de los principales mecanismos responsables de:
- Mantener la TOLERANCIA específica para antígenos
- Mantener la homeóstasis de células T
Controla:
La RI a autoantígenos previniendo enfermedades autoinmunes
Pero además controla:
* La magnitud y la duración de la respuesta inmunitaria activada por cualquier tipo de antígeno
* Las respuestas contra moléculas extrañas que son introducidas en el hospedador deliberadamente (ej: Transplantes)
Mecanismos de regulación por linfocitos
Muerte por
Activación
CTLA-4
FasL
Tolerancia
Central
Periférica
Deleción
Clonal
Supresión
Anergia
… entre
otros
Los linfocitos se activan cuando:
• el antígeno se une a sus
receptores específicos para
el antígeno.
• y se produce la
coestimulación adecuada
Una vez que el linfocito T se activa comienza a
expresar receptores de superficie que no se
encuentran en la membrana de un linfocito T
virgen o naive (no son constitutivos).
La expresión de algunos de estos receptores
conduce a la muerte de los linfocitos activados,
específicos para el antígeno.
Los receptores más conocidos por mediar este
mecanismo de regulación son:
- CTLA-4 (CD152)
- FasL (CD178)
Como su nombre lo indica,
FasL (Fas Ligando) une a
Fas (este último es su
receptor).
En esta interacción muere la
célula que expresa Fas
Fas tiene una cola intra-
citoplasmática que señala
muerte (FADD)
(Fas Associated Death Domain)
Al unirse el Fas a FasL,
FADD se activa y la célula
muere
FADD
Definición:
Estado de falta de respuesta inmune que es específico para un antígeno en particular.
Es inducida por exposición previa a ese antígeno
Solo las células con receptores específicos para el antígeno pueden ser tolerizadas (linfocitos) (TCR ó Ig)
Aspecto màs importante de la tolerancia: Tolerancia a antígenos propios
Células con receptores que reconozcan lo propio deben ser eliminados sea:
Físicamente o funcionalmente
Tolerancia
La Tolerancia puede ser:
Central
Periférica
Dependiendo de si esta actúa a nivel de
órganos linfoides primarios o si actúa en
la periferia
Mecanismos de Tolerancia
Tolerancia Central:
• Deleción Clonal: Eliminación Física
Tolerancia Periférica:
• Supresión/Regulación: Inhibición de la actividad de
una célula inmunocompetente a través de interacciones
con otras células.
• Anergia Clonal: Regulación negativa de mecanismos
implicados con la respuesta inmune
• Entre otros……
Selección Positiva y Negativa en Timo
La Deleción Clonal determina que los linfocitos maduros
que salen de timo y van a los órganos linfoides
secundarios no reconozcan “lo propio”
A pesar de la deleción clonal algunos linfocitos que salen
del timo tienen la posibilidad de ser autorreactivos
Debido a esto en la periferia se necesitan mecanismos que mantengan bajo control a esos
linfocitos autorreactivos
Regulación/Supresión mediada por linfocitos T
Anergia
Ignorancia Inmunológica
Desviación Inmunológica
Supresión
Ellas van a inhibir la activación y la expansión de linfocitos auto-reactivos.
Pueden limitar la magnitud de la respuesta inmunitaria contra antígenos extraños
Estas células se conocen como
Células Reguladoras
En la generación de una respuesta inmunitaria, además de células
efectoras y células memoria se van a activar ciertas células T con
actividad reguladora
• Beneficios:
- Homeostasis de Células T
- Previene enfermedades autoinmunes
- Previene Alergias
- Previene Hipersensibilidades
• Efectos Dañinos:
- Inhibe Inmunidad Tumoral
- Inhibe Inmunidad a Infecciones
¿Que consecuencias
tiene la existencia de
células supresoras/ reguladoras?
Linfocitos T cooperadores
estimulan la respuesta
Linfocitos T reguladores
inhiben la respuesta
LTh
LTReg
Posteriormente se caracterizaron otras células a las
que se conocen como “células T reguladoras”
Las diferentes
subpoblaciones descritas
como células reguladoras
se caracterizan por la
expresión simultánea en su
superficie celular de los
marcadores CD4 y CD25.
Se conocen como
CD4+CD25+
Algunas de estas
subpoblaciones expresan
el factor de transcripciónn
FOXP3
CTLA-4 es central en el control de las APC por las
células Treg
CTLA-4 expresado por las Treg envía
señales a las APC por CD80/CD86 y
determina modulación de la expresión
de estas moléculas.
Estas señales activan la indoleamina
2-3 dioxigenasa (IDO) que genera el
mediador inmunosupresor Kynurenina.
También pueden generar factores de
transcripción que suprimen la expresión
de genes que codifican para la
producción de IL-6
Inducción de Tolerancia de Células T por
Células Dendríticas
• Las DC son esenciales para tolerancia central como para
tolerancia periférica.
• La tolerancia central en timo ocurre por la presentación de
autoantígenos a las células T en desarrollo por las DC del timo
donde las células con fuerte autoreactividad sufren deleción
clonal.
• Adicionalmente, las células Treg naturales se seleccionan
positivamente por las DC del timo.
• El escape hacia la periferia de células potencialmente
autoreactivas determinan la necesidad de mecanismos que las
contengan en la periferia. Anergia, deleción, interacción con Treg
Tolerancia periférica mediada por DC
• Las DC inmaduras fallan en estimular eficientemente a los
linfocitos T por los bajos niveles de expresión de MHC y de
moléculas coestimuladoras, lo cual resulta en anergia.
• Por otro lado, la presentación de niveles subóptimos de antígeno
y la expresión de FAS por las DC inmaduras conduce a la
inhibición de la proliferación y la deleción de células T.
• Además las DC son capaces de inducir Treg para preservar la
tolerancia a autoantígenos y a algunos antígenos extraños.
• Las DC promueven a las células Tr1 productoras de IL-10 que
potencia la tolerancia periférica
Posibles Aplicaciones
• Considerando el papel central de las DC en la inducción y
activación de células T efectoras y de células Treg, las DC
se pudieran usar para suprimir o para redireccionar la
respuesta inmune en una manera específica para el
antígeno.
• Investigaciones recientes han mostrado resultados
prometedores sobre el papel de las DC como tratamiento
celular de enfermedades autoinmunes y en la prevención
del rechazo de trasplantes.
Al final de la clase se incluye
un material que amplía las
características de las
diferentes células reguladoras
CD4+CD25+
Anergia
Estado celular en el cual el linfocito está vivo pero falla en funcionalidad
Tolerancia periférica a “lo propio”
Timo
Periferia
Tejidos
propios
Anergia
La célula
puede
volverse no
respondedora
tras un
señalamiento
incompleto a
través de su TCR
La falta de una de
esas dos señales
deja al linfocito T
“anergico”
(no funcional)
El linfocito T para activarse necesita
dos señales
Ignorancia inmunológica
La ignorancia a autoantígenos es una forma pasiva de
tolerancia. Ocurre si:
• Células autorreactivas son incapaces de penetrar una barrera
fisiológica que sirve para secuestrar células que expresen el
autoantígeno (Privilegio Inmunológico)
• Células autorreactivas no pueden ser activadas aún
después de haber cruzado estas barreras porque:
* El autoantígeno está en concentraciones muy bajas
para ser detectado o presente en tejidos que expresan pocas
o ninguna molécula de MHC.
* Ausencia de un número suficiente de células T para
dar una respuesta inmune efectiva.
Un solo precursor del linfocito Th es capaz de
diferenciarse en diversos fenotipos efectores de los
cuales los mejor caracterizados son los Th1 y Th2
Los factores que van a influir en la diferenciación de
los linfocitos T son:
• El sitio de presentación del antígeno
• Moléculas coestimuladoras implicadas en las interacciones celulares
• Densidad del péptido antigénico y la afinidad de la unión
• Las CPA implicadas y las citoquinas que producen
• El perfil de citoquinas presente en el momento de la activación
• Los receptores expresados por el linfocito T
• La carga genética del sujeto
El equilibrio de citoquinas controla la
diferenciación del linfocito T a célula efectora
La regulación de la RI llevada a cabo por
linfocitos Th1 o por Th2 se conoce como
Desviación Inmunológica o Balance
Th1/Th2
Balance de citoquinas Th1/Th2
Regulación entre subpoblaciones de células Th
Respuesta Balanceada
Domina Th2 Domina Th1
IL-12
IL-4 IL-12
IL-4
Funciones efectoras de
células Th1 o Th2
Muerte de bacterias
intracelulares Producción de Anticuerpos
Th1: Inflamatorias Th2: Anti-Inflamatorias
Al presente se han caracterizado otras
subpoblaciones de linfocitos Th efectores
Diferentes señales
influyen en el
cambio hacia una
de estas
subpoblaciones.
Ellas interactúan
regulándose
mutuamente
mediante las
citoquinas que
producen.
Después de un reto antigénico hay
aumento en la tasa de descarga de algunas
neuronas hipotalámicas
Las Citoquinas afectan la actividad neuronal
hipotalámica con cambios en la secreción de
hormonas del hipotálamo.
IL1, IL-2, IL-6 y TNF activan el eje HPA*
La respuesta inmunitaria va a tener
consecuencias a nivel del SNC
*Eje HPA: Hipotálamo-Hipófisis-Glándulas Suprarrenales (Hypothalamus-Pituitary-Adrenal Glands)
Regulación por Glucocorticoides
La generación de una
respuesta inmunitaria
mediante un reto antigénico
eleva los niveles de
Glucocorticoides
que van a inhibir la
respuesta
inmunitaria
Glucocorticoides
Son los agentes inmunosupresores por
excelencia.
Potentes anti-inflamatorios
Suprimen:
Función de linfocitos principalmente de Células T
Actividad cooperadora y citotóxica
Acción variable sobre células B
Actividad de células NK
¿¿Por donde estudiar??
• Roitt
• Abbas
• Kuby
• Libro Fundamentos de Inmunología Básica y Clínica
Tema Regulación http://editorial.utalca.cl/docs/ebook/inmunologia.pdf
¿Qué deben saber después de estudiar el tema?
• Diferenciar los mecanismos de tolerancia central
y periférica.
• Poder diferenciar los mecanismos de muerte por
activación de los de tolerancia.
• Poder diferenciar cada mecanismo tratado en el
tema, en cuanto a células, receptores de
superficie y factores solubles implicados.
NORMATIVA DE LOS EXÁMENES DE
INMUNOLOGÍA
Las normas a seguir durante todos los exámenes relacionados con
la asignatura Inmunología, serán las siguientes:
Todos los estudiantes deberán dejar cualquier dispositivo electrónico
totalmente apagado en sus bolsos, los cuales se ubicarán en el
escenario de los auditorios. Esto incluye: teléfonos celulares, Tablets,
IPhone, IPad, mini computadoras, mp3, mp4, grabadoras, etc. Bajo
ninguna circunstancia se permite la posesión de cualquiera de estos
objetos con la persona durante la realización del examen.
Los bolsos de comida, morrales, koalas, estuches grandes, libros,
apuntes, etc. también se ubicarán en el escenario de los auditorios.
Cada estudiante debe tener todos los artículos de escritorio necesarios
para la realización del examen (sacapuntas, minas, lápices, borradores,
etc.). No se permite compartir estos artículos.
Es necesario que los estudiantes se presenten al examen quince (15)
minutos antes de la hora fijada para el comienzo del mismo, de manera
que cuando se comience a pasar la lista todos estén preparados y no se
atrase la entrada al auditorio.
Los estudiantes que no se encuentren cuando se llamen al pasar la
lista, no podrán ingresar al auditorio a presentar el examen.
Una vez que un estudiante ingresa al auditorio y es ubicado en un
asiento, no se permitirá su salida hasta que termine el examen y lo
entregue.
Cuando comience el examen, se permitirá que durante quince (15)
minutos, los estudiantes lean cuidadosamente las preguntas del mismo, sin
realizar aclaratorias. Terminado este lapso, se permitirá treinta (30) minutos
de preguntas y aclaratorias desde los respectivos asientos. Posterior a esto
se cerrará el ciclo de aclaratorias.
Los estudiantes deben permanecer sentados durante todo el examen. Si
necesitan hojas adicionales, las solicitarán desde sus asientos y organiza-
damente.
Bajo ninguna circunstancia está permitida la comunicación entre estu-
diantes a lo largo del examen.
Al momento de entregar el examen, los alumnos no deben acumularse
alrededor del escritorio ni deben establecer conversación entre ellos.
El incumplimiento de alguna de estas normas puede
poner en riesgo desde la nota del examen, hasta el
examen mismo, por ello solicitamos la atención que
puedan prestar a las mismas.
Las Células Reguladoras (Tr) son heterogéneas:
En Fenotipo, en Función y en su Generación
Se han descrito:
Tr antígeno-inespecíficas:
* CD4+CD25+, reguladoras naturales, derivadas del timo
* Células CD8+CD25+
* Células T gamma-delta
* Células T NK1.1
* Células T CD4-CD8-
Tr antígeno-específicas:
*CD4+CD25+CD45RO+, con restricción para
MHC II
* CD4+CD25+ productoras de IL-10 (Tr1)
* Células CD8+CD28- , con restricción para
MHC I
Células CD4+CD25+
- Representan el 5-10% del “pool” de células T periféricas
- Tienen potente capacidad supresora
- El efecto regulador es por contacto cel-cel.
- Existe contradicción en si actúan por IL-10 o por TGF
Expresan la molécula CTLA-4
Células Tr1:
-Producen: IL-10 ; IL-5 con o sin TGF
poca o ninguna IL-2, IL-4 o IFN
La expresión de diferentes marcadores de superficie sugiere que son un subtipo de células CD4+ diferentes a Th1 o Th2.
Estudios funcionales indican propiedades inmunosupresoras.
Previenen el desarrollo de enfermedades autoinmunes mediadas por Th1
Expresan CD4 y CD25
Células Th3
- Producen: TGF
- Actúan en la tolerancia oral (ej: MBP)
- Favorecen producción de IgA
- Inhiben células Th1
- Factores para su diferenciación:
IL-4 y TGF
Expresan CD4 y CD25
Mecanismos de acción de las células Tr:
Tr naturales:
* Actúan de manera antígeno inespecífica mediante contacto célula T-célulaT.
* Ellas son anérgicas, pero requieren estimulación de su TCR para suprimir la activación de otras células T.
Tr antígeno-específicas: * Actúan directamente sobre las CPA.
* Disminuyen expresión de coestimuladores (CD80,CD86).
Características de las células T reguladoras
mejor conocidas
Célula Citocina Predominante
Supresión sobre
Th3
TGF-β
Th1,Th2
Tr1
TGF-β; IL-10
Th1 (Th2?)
CD4+CD25+FOXP3+
IL-10
Th1
¿Qué importancia tiene que nuestra respuesta inmunitaria
esté estrictamente regulada? • La pérdida de tolerancia conduce a la autoinmunidad y origina enfermedades autoinmunes.
• Las enfermedades autoinmunes pueden afectar a células específicas (enfermedades específicas de órgano) o ser difusas (inespecíficas de órgano).
• Diversos procesos patológicos pueden provocar pérdida de la tolerancia y dar lugar a la autoinmunidad.
• Antes de que se produzca la enfermedad deben perderse algunos de los mecanismos de control o todos ellos.
• Los cuatro puntos de control en el desarrollo de enfermedades autoinmunes son:
1.- Pérdida de la tolerancia central
2.- Fracaso de la regulación
periférica
3.- Presentación de autoantígenos
(o molécula mimética)
4.- Coestimulación
Pérdida de la Tolerancia Central La eliminación incompleta de linfocitos T autorreactivos de alta afinidad en el timo
produce enfermedades autoinmunes.
Demostrado por la enfermedad autoinmunitaria poliglandular o síndrome de poliendocrinopatía autoinmunitaria, candidiasis y distrofia ectodérmica (APECED).
Enfermedad rara causada por defectos en un gen llamado Regulador Autoinmunitario (AIRE; del inglés autoimmune regulator) que codifica una proteína nuclear que regula la expresión en timo de numerosos genes para autoantígenos periféricos (Por ej. El gen de la insulina que es un autoantígeno importante en la diabetes tipo I).
En estado de salud, AIRE favorece la expresión de genes de autoantíagenos en el timo y permite la deleción de cualquier linfocito T autorreactivo. En pacientes con AIRE defectuoso esto no ocurre y resulta en una tolerancia incompleta a multitud de autoantígenos y una enfermedad autoinmune multiorgánica específica.
Los defectos en este gen son muy raros en la mayoría de las poblaciones pero ilustra el hecho que cualquier evento que altera la tolerancia central puede favorecer la aparición de una enfermedad autoinmune.
Fracaso de la regulación periférica
Células Reguladoras:
“Un menor número de policías (Cel Treg) es equivalente a más criminales
(linfocitos Th autorreactivos)”.
Una de las poblaciones de cél Treg más importante, la CD4+CD25+, requiere la expresión de FOXP3 (factor de transcripción) para sus acciones reguladoras.
Este factor suprime la activación de los genes necesarios para la función de los linfocitos T efectores (es un represor de la transcripción en estos últimos).
En humanos se ha descrito el síndrome ligado al cromosoma X (IPEX), caracterizado por disregulación inmunitaria, poliendocrinopatía y enteropatía, en la que el gen FOXP3 está defectuoso.
Control insuficiente de la coestimulación de los
linfocitos
Polimorfismo del gen que codifica CTLA-4 Durante la activación de las células T las funciones de los coestimuladores
B7 (CD80/CD86) son mantenidas bajo control por las moléculas CTLA-4,
que compite con CD28 por B7.
Ratones en que el gen CTLA-4 está inactivado desarrollan una activación y
proliferación incontrolada de linfocitos T, con esplenomegalia y masivo aumento
de los ganglios linfáticos con infiltración multi-orgánica de linfocitos fatal,
sugerente de una autoinmunidad sistémica.
En humanos formas alternativas del gen CTLA-4 se asocian con un aumento en
la susceptibilidad a la enfermedad de Graves, enfermedad de Hashimoto y
diabetes tipo I.