HematologaLa sangre es una suspensin de eritrocitos, leucocitos
y plaquetas en el plasma. Fuera delsistemavascular la sangre
coagula entre 5 y 8 minutos y si se le agrega algn anticoagulante
suestadode suspensin persiste.Para las pruebas de laboratorio una
muestra que puede ser de alguno de los tres tipos siguientes, segn
la determinacin que debamos efectuar: Sangre total con
anticoagulante. Suero. Plasma.Suero y Plasma.Centrifugando sangre
coagulada se separa unamasa celular"A" y un fluido sobrenadante
"B":el suero.BACentrifugando una sangre adicionada de un
anticoagulante se obtendrn tres capas: una masa celular, que queda
en el fondo del tubo y una sobrenadante que es el plasma. Entre
ambas capas A y B, habr una tercera capa C, ms pequea, de color
grisceo rosado, llamadacrema de leucocitos, cuyo principal
integrante, como su nombre lo dice, son los leucocitos, pero adems
contiene plaquetas y eritrocitos nucleados. La zona inmediatamente
inferior a la capa C (si los hay) contienereticulocitos y parsitos
delpaludismo.BContiene FibringenoReticulocitosCCrema de
leucocitos,Parsito del plaquetas y eritrocitos.paludismoANota:La
diferencia entre suero y plasma es que el plasma contiene
fibringeno y el suero carece de l.Obtencin de Muestra de
Sangre.Para efectuaranlisisclnicos, las muestras de sangre pueden
ser: Sangre capilar o perifrica. Sangre venosa. Sangre arterial.Un
caso especial se da en losniosrecin nacidos en los que se
solicitamuestra del cordn umbilical.Sangre capilar o perifrica.La
sangre de flujo es llamada comnmente capilar o perifrica y es la
quefluyedespus de aplicar una puncin superficial cutnea. Cuando no
es posible obtener una muestra de sangre venosa o no se desea
puncionar la vena, algunas pruebas pueden realizarse con sangre
capilar o perifrica obtenida del lbulo de la oreja o de la yema del
dedo. En los nios recin nacidos por puncin del taln.No es
aconsejable utilizar sangre capilar para la cuenta de plaquetas por
la rapidez con la que las mismas se adhieren y agregan en el lugar
de puncin y se obtienendatosfalsos decuentasbajas de plaquetas;
encambiopara preparar extendidos en laminillas esmejorhacerlo con
sangre capilar, ya que el anticoagulante puede provocar
alteraciones en los leucocitos.Sangre venosa.La muestra de este
tipo se obtiene por puncin de una de las tres venas del pliegue del
codo:la baslica, la ceflica o la mediana cubital(observardibujode
la siguiente pgina) empleando jeringas desechables, con agujas de
tipo 21x32, 20x32 o similar, previa limpieza del rea elegida con
torunda yalcohol; antes de puncionar coloque el torniquete
aproximadamente de 8 cm de distancia arriba del pliegue del codo.
Soltarlo tan pronto empiece a obtenerse la muestra.La toma de
muestra de nios pequeos es preferible en las venas yugulares
externas o de las manos.Anticoagulantes.Se consideran como
anticoagulantes: Mezcla de oxalatos. Citrato de sodio. Oxalato de
sodio. EDTA. Heparina. ACD. CPD.Mezcla de Oxalatos.Tambin llamada
anticoagulante de Wintrobe. Contiene oxalato de amonio, oxalato de
potasio, formol y agua.Para 5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la
mezcla de anticoagulante (desecado en estufa a 37C o
atemperaturaambienteantes de utilizarlo); esta solucin
anticoagulante acta como tal para fijacin de calcio y debe usarse
siempre desecado para no diluir la sangre.Mezcla de oxalatos de
sodio y potasio.Es otro anticoagulante conocido como "Mezcla de
Paul Heller".Citrato de sodio al 3.8% y oxalato de sodio al 1.4%.Se
usa en relacin de una parte de anticoagulante por cada nueve partes
de sangre, habitualmente se usan 0.25ml de la solucin para
completar a 2.5ml devolumentotal con la muestra de sangre.Actan en
la misma forma que la solucin anticoagulante de Wintrobe, es decir,
por fijacin de calcio.Son los anticoagulantes de eleccin
paratiempode protrombina (TP) y tiempo de tromboplastina parcial
(TTP).EDTA(cido etilen-diamino-tetra-actico).Las sales de sodio y
potasio en este cido se comportan como poderosos anticoagulantes y
son anticoagulantes de eleccin parael trabajode rutina y Hematologa
(se utiliza al 10%). No afecta lamorfologade lasclulashemticas. No
modifica la velocidad de sedimentacin globular. Sus sinnimos son
versenato y secuestreno.Se le llama secuestreno ya que secuestra al
calcio y lo separa de la cascada de la coagulacin, impidiendo que
la sangre coagule. Se utilizan 0.05ml por cada 3ml de muestra de
sangre. Dada la pequea cantidad de solucin, no es necesario
desecarla, ya que prcticamente no diluye la sangre a analizar; en
exceso afecta adversamente tanto a los eritrocitos como a los
leucocitos, causando su encogimiento y provocando cambios en su
forma; por ello debe cuidarse de agregar la cantidad correcta de
sangre al anticoagulante. Se prefiere lasaltripotsica a la disdica,
ya que es ms soluble (10 veces ms) y ello hace efectiva la mezcla
del anticoagulante con la sangre.Heparina(heparina sdica de 1,000
unidades).La fina capa de solucin de heparina de 1,000 unidades: Se
utiliza para las gasomeras. La heparina es un excelente
anticoagulante. No altera el tamao de los eritrocitos. Acta
inhibiendo la actividad de la trombina sobre el fibringeno y es
este mecanismo, el que la hacediferentea los dems anticoagulantes
mencionados.ACD y CPD.Son los principales anticoagulantes
utilizados en losbancosde sangre (en las bolsas para la recoleccin
de sta).ElACDcontiene cido ctrico, citratos y dextrosa. En este
anticoagulante la sangre se mantiene hasta 21 das.ElCPDcontiene
citratos, fosfatos y dextrosa. El radical es un amortiguados que
favorece elpHde la sangre normal (7.4) permanezca as durante ms
tiempo, por lo que este anticoagulante hace que las bolsas duran 21
das + 7, siempre y cuando el plasma no presente una coloracin
rojiza (hemlisis) ni tome un color verdusco debido a la
panaglutinibilidad ocontaminacinbacteriana.Manejo y Conservacin de
la Muestra.El tipo de anlisis que haya de efectuarse influye sobre
las recomendaciones que para cada uso corresponde.Algunas muestras
se deben analizar de inmediato, un ejemplo de esto es la
determinacin del pH y gases en la sangre; otras pueden ser
mantenidas enrefrigeracin(previa separacin del suero o del
plasma).Las determinaciones de: Conteo de plaquetas. Conteo de
leucocitos. Determinacin de la velocidad de sedimentacin.Deben de
hacerse lo ms pronto posible despus de obtenida la muestra.Durante
este lapso las muestras deben tenerse refrigeradas entre 4 y 8C, y
antes de ser analizada deben dejarse 15 minutos en rotador
(agitador mecnico para asegurar trabajar con una muestra homognea y
que haya adquirido la temperatura ambiente).Criterios de rechazo de
una muestra. Identificacin inadecuada. Volumen inadecuado. Uso de
tubo inadecuado. Hemlisis. Transporte inadecuado.Razones para
solicitar una prueba de laboratorio. Para
descubrirenfermedadessubclnicas. Ratificar un diagnstico sospechado
clnicamente. Obtenerinformacinpronstico de una enfermedad.
Establecer un diagnstico en una sospecha no bien definida.
Reconocer la respuesta teraputica. Precisar factores
deriesgo.Alteracin de Algunas Pruebas de Laboratorio por Estasis
Venosa ProlongadaPrueba o DeterminacinEfectoMecanismo de Efecto
1) Plaquetas>Debe recordarse el papel de las plaquetas en
lahomeostasis. Estasis venosa; liberacin de agentes procoagulantes,
agregacin, etc.
2) Electrolitos# Debido a que se encuentran
intercelularmente.
6) Hemlisis de elementos>Al romperse el eritrocito libera
todos los solutos.
7) Caso grave=En tiempos prolongados de falsos
esquistocitos.
8)Estrs, pH>Debido a una disminucin parcial en lapresinde
CO.
9) Estrs, leucocitos, catecolaminas>La elevacin de
catecolaminas provoca un aumento en loscidosgrasos no
esterificados.
Nota:
> - incremento< - decremento# - en la mayora de los
casos.
Toma de Muestra de Sangre Arterial.Tcnica Antigua para
laFuncinArterial1. 2. Material: Jeringa devidriode 10ml con pivote
de metal lubricado con grasa siliconizada estril, impregnada en su
interior con 2.5ml de heparina de 1,000 unidades. Tapn metlico que
rosque perfectamente en el pivote de metal. Agujas hipodrmicas
estriles de nmero 21 o de mayor calibre (desechables). Rin o
palangana con hielo y agua. Agujas y jeringas hipodrmicas estriles
para infiltracin. Xilocana al 1% sin hepinefrina. Agua y jabn.1.
Evaluar, seleccionar y localizar el pulso arterial. Radial.
Humeral. Femoral. Pedia. Hacer el aseo de la regin con agua y jabn.
Roscar perfectamente la aguja en el pivote de metal para impedir
durante la puncin la entrada de aire al interior de la jeringa. Si
es necesario infiltrar, con xilocana al 1% sin hepinefrina, en el
sitio seleccionado para la puncin cuidando de no picar la arteria.
Efectuar puncin perpendicular a la arteria y obtener
aproximadamente 5ml de sangre. Hacer compresin a la arteria por
arriba del sitio de la puncin un mnimo de 10 a 15 minutos para
evitar la formacin de hematoma. Quitar la aguja hipodrmica, sacar
las burbujas de aire, si penetraron y cerrar hermticamente el
pivote con el tapn de metal. Rotule la jeringa con el nombre del
paciente y nmero de cama. Anotar en la orden la condicin en que fue
tomada la muestra (respiracinde aire ambiental,oxgenopor catter,
con asistencia ventilatoria, etc.).Se utilizan jeringas
preferentemente de vidrio ya que con las deplsticoes necesario
arrastrar el mbolo, maniobra que puede permitir la entrada de
burbujas de aire. Las muestras para determinacin de gases
arteriales se transportan en hielo y agua, ya que la sangre, como
tejido vivo, sigue consumiendo oxgeno y formando anhdrido carbnico
aunque ya est en la jeringa. Al reducir la temperatura se deprime
elmetabolismocelular y no hay cambios considerables, por lo que
puede retardarse el procesamiento de la muestra hasta por una
hora.La cantidad de heparina de 1,000 unidades que queda en el
espacio muerto de la jeringa es suficiente para anticoagular de 4 a
5ml de sangre.El exceso de heparina altera las determinaciones de
pH, oxgeno y bixido decarbono.Invariablemente se debe utilizar una
aguja para picar el tapn de hule del frasco de heparina y otra para
puncionar la arteria.La sangre destinada a este tipo de estudio
essangre totaly obtenida en formaanaerbica.
Leer
ms:http://www.monografias.com/trabajos/muestrasang/muestrasang.shtml#ixzz3AxS8zC3e
ExmenesV.S.G (Velocidad de segmentacin globular)Por qu hacer el
anlisis?Para detectar la presencia de infecciones, tumores,
inflamacin y otras situaciones que conducen a disfuncin orgnica
(degeneracin), y/o para monitorizar la progresin de una enfermedad
o la eficacia de un tratamiento.
Cundo hacer el anlisis?Cuando el mdico piensa que se puede estar
padeciendo algunos de los trastornos citados anteriormente y para
monitorizar el tratamiento y la evolucin de una arteritis de la
temporal, de una polimialgia reumtica o de una artritis
reumatoide.
Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de
una muestra de sangre venosa.
Es necesario algn tipo de preparacin previa?Para esta prueba no
se necesita ninguna preparacin especial.
Contaje de plaquetasPor qu hacer el anlisis?Para determinar el
nmero de plaquetas en una muestra de sangre en el curso de un
examen rutinario.; para detectar, diagnosticar o monitorizar
situaciones que afectan al nmero de plaquetas, como trastornos por
sangrado, enfermedades de la mdula sea u otras condiciones.
Cundo hacer el anlisis?Rutinariamente, como parte de un
hemograma; cuando se presentan episodios inexplicables de sangrado
u otros sntomas que puedan obedecer a alteraciones de las
plaquetas.
Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de
una muestra de sangre venosa; a veces por puncin en un dedo
(adultos) o en el taln (bebs).
Es necesario algn tipo de preparacin previa?Para esta prueba no
se necesita ninguna preparacin especial.
Grupo sanguneo Y Factor RHPor qu hacer el anlisis?Para
determinar el grupo sanguneo ABO y el tipo Rh.
Cundo hacer el anlisis?Cuando a una persona se le ha de realizar
una transfusin de sangre o de alguno de sus componentes, o cuando
se dona sangre. En las mujeres embarazadas se realiza para
determinar el riesgo de incompatibilidad Rh entre la madre y el
feto.
Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de
una muestra de sangre venosa o, en los bebs, por puncin en el
taln.
Tiempo de protombinaLa protrombina (factor II de coagulacin) es
una protena plasmtica producida por el hgado y forma parte de la
cascada de la coagulacin. El hgado produce 11 de los factores de la
coagulacin, por lo que frecuentemente su disfuncin se asocia a
trastornos de la coagulacin. Los factores de coagulacin se miden
habitualmente en forma indirecta mediante la determinacin del
tiempo de protrombina, que mide un conjunto de factores de
coagulacin del plasma. Por lo anterior, una alteracin del tiempo de
protrombina puede deberse a diversas causas, no siempre a una
disfuncin heptica.
Tiempo parcial de tromboplastina (TPT)Es una prueba de sangre
que examina el tiempo que le toma a la sangre coagularse y puede
ayudar a establecer si uno tiene problemas de sangrado o de
coagulacin.
Forma en que se realiza el examenEl mdico utiliza una aguja para
extraer la sangre de una de las venas y la recoge en un recipiente
hermtico. A usted se le puede colocar un vendaje para detener
cualquier sangrado. Si est tomando un medicamento llamado heparina,
se lo vigilar para ver si hay signos de sangrado.El especialista
del laboratorio agregar qumicos a la muestra de sangre y observar
cuntos segundos tarda la sangre en coagularse.
Preparacin para el examenEl mdico le puede solicitar que deje de
tomar ciertos medicamentos antes del examen. Los medicamentos que
pueden afectar los resultados de un examen TPT abarcan
antihistamnicos, vitamina C (cido ascrbico), cido acetilsaliclico
(aspirin) y clorpromazina (Thorazine).No deje de tomar ningn
medicamento sin hablar primero con el mdico.
Lo que se siente durante el examenCuando se inserta la aguja
para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado,
mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura.
Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.
Razones por las que se realiza el examenEl mdico puede ordenar
este examen si usted tiene problemas de sangrado o coagulacin de la
sangre. Cuando uno sangra, el cuerpo inicia una serie de
actividades que ayudan a que la sangre se coagule, lo cual se
denomina cascada de la coagulacin. Hay tres rutas para este evento
y el examen de TPT examina protenas especiales, llamadas factores,
que se encuentran en dos de estas rutas.El examen igualmente se
puede utilizar para vigilar pacientes que estn tomando heparina, un
anticoagulante.Este examen generalmente se hace junto con otros
exmenes, como un examen de protrombina.
PlaquetasTambin conocido como:Trombocitos; Recuento de
PlaquetasNombre sistemtico:PlaquetasPruebas relacionadas:Extensin
de sangre,Factores de la coagulacin,Funcin
plaquetaria,Hemograma,Tiempo de Protrombina (TP) y Ratio
Internacional Normalizada (INR),Tiempo de Tromboplastina Parcial
(TTP)
Aspectos GeneralesPor qu hacer el anlisis?Para determinar el
nmero de plaquetas en una muestra de sangre en el curso de un
examen rutinario.; para detectar, diagnosticar o monitorizar
situaciones que afectan al nmero de plaquetas, comotrastornos por
sangrado, enfermedades de lamdula seau otras condiciones.Cundo
hacer el anlisis?Rutinariamente, como parte de unhemograma; cuando
se presentan episodios inexplicables de sangrado u otros sntomas
que puedan obedecer a alteraciones de las plaquetas.Qu muestra se
requiere?La determinacin se realiza a partir de una muestra de
sangre venosa; a veces por puncin en un dedo (adultos) o en el taln
(bebs).Es necesario algn tipo de preparacin previa?Para esta prueba
no se necesita ninguna preparacin especial.En qu consisteQu es lo
que se analiza?Las plaquetas, tambin conocidas como trombocitos,
son minsculos fragmentos de citoplasma de clulas muy grandes
llamadas megacariocitos. Las plaquetas se forman a partir de estas
clulas grandes en lamdula sea, se liberan hacia la circulacin
sangunea y son esenciales para asegurar una coagulacin normal de la
sangre. El recuento de plaquetas es una prueba que determina el
nmero de plaquetas presentes en la muestra de sangre obtenida.
Cuando se produce una lesin en un vaso sanguneo o en un tejido y
tiene lugar un sangrado, las plaquetas contribuyen a controlar el
sangrado por tres mecanismos: se adhieren en el lugar de la lesin,
se agregan entre ellas y liberan compuestos qumicos que estimulan
la agregacin de ms plaquetas. Todo ello conduce a la formacin de un
tapn de plaquetas no muy slido en el foco de la lesin por un
mecanismo conocido como hemostasia. Simultneamente, las plaquetas
activadas propician la cascada de la coagulacin, consistente en una
serie de etapas que suponen la activacin secuencial
deprotenasllamadasfactores de la coagulacin. Este proceso de
hemostasia secundario tiene como consecuencia la formacin de hebras
de fibrina que se entretejen entre el tapn de plaquetas, formando
una malla de fibrina comprimindose hasta formar un cogulo estable
que permanece en el lugar de la lesin hasta que sta cicatriza. En
el momento en que el cogulo ya no es necesario, otros factores se
encargan de destruirlo y eliminarlo.Para un proceso normal de la
coagulacin es necesario que cada componente de la hemostasia
primaria y de la secundaria est presente, se active en el momento
adecuado y adems funcione correctamente. Si el nmero de plaquetas
es insuficiente o si no funcionan adecuadamente, es posible que no
se pueda formar un cogulo estable y el individuo presentar un
elevado riesgo de sangrado.Las plaquetas sobreviven en la
circulacin sangunea entre 8 y 10 das, de manera que la mdula sea
debe estar continuamente produciendo plaquetas nuevas para
sustituir las que se degradan, se utilizan o se pierden con los
sangrados. La determinacin del nmero de plaquetas en sangre con un
contador celular es de ayuda en el diagnstico de una gran variedad
de trastornos asociados a una cantidad disminuida o aumentada de
plaquetas.Cmo se obtiene la muestra para el anlisis?Extraccin de la
muestra por puncin de una vena del antebrazo; a veces por puncin en
el dedo (adultos) o en el taln (bebs)Se requiere alguna preparacin
previa para asegurar la calidad de la muestra?Para esta prueba no
se requiere ninguna preparacin especial.NOTA: En el apartado,El
laboratorio por dentro, encontrar informacin sobre la recogida y
procesamiento de las muestras de sangre y loscultivosde
esputo.Acerca de la pruebaCmo se utiliza?Cundo se solicita?Qu
significa el resultado?Hay algo ms que debera saber?Cmo se
utiliza?El recuento de plaquetas es til para detectar disminuciones
o aumentos del nmero de plaquetas en sangre. La prueba se incluye
en elhemograma, que frecuentemente se solicita en los controles
mdicos.El recuento de plaquetas puede emplearse para detectar o
diagnosticar distintos trastornos y enfermedades con repercusin
sobre estos elementos de la sangre. Puede solicitarse en el
contexto de un estudio de los trastornos de la coagulacin cuando
existen sangrados o estados dehipercoagulabilidad, o en
enfermedades de lamdula seapor citar algunos ejemplos.Esta prueba
tambin puede ser til en la monitorizacin de enfermedades o de
tratamientos con frmacos que pueden afectar a las plaquetas. Tambin
se utiliza en la monitorizacin del tratamiento de enfermedades de
las plaquetas para verificar si el mismo est siendo efectivo.El
recuento de plaquetas puede acompaarse de otras pruebas, como por
ejemplo pruebas defuncin plaquetariay pruebas asociadas a la
coagulacin, como el tiempo de protrombina (TP) y el tiempo de
tromboplastina parcial (TTP). En caso de que estas pruebas resulten
alteradas sern necesarias otras pruebas para establecer el
diagnstico final.[Volver]Cundo se solicita?El recuento de plaquetas
suele solicitarse como parte de un hemograma, que suele realizarse
en un chequeo habitual. Casi siempre se solicita cuando una persona
presenta signos y sntomas asociados a un nmero disminuido de
plaquetas o a sangrados como: Hematomas sin causa aparente o de
fcil aparicin Sangrados prolongados an cuando la herida es pequea
Sangrados nasales frecuentes Sangrados gastrointestinales (pueden
detectarse en el anlisis de las heces) Sangrados importantes
durante la menstruacin Pequeas manchas en la piel (petequias) - a
veces recuerdan una erupcin cutnea Pequeas manchas de color prpura
en la piel (prpura) causadas por sangrados justo debajo de la
pielTambin se realiza la prueba si se sospecha que existen
demasiadas plaquetas. Un exceso de plaquetas puede suponer una
coagulacin excesiva o a veces, si las plaquetas no funcionan
correctamente, sangrados. Sin embargo, a menudo las personas con un
elevado nmero de plaquetas no presentan signos ni sntomas, y es por
este motivo que puede detectarse la alteracin fortuitamente al
realizarse un anlisis de sangre por algn otro motivo.[Volver]Qu
significa el resultado?Son varias las enfermedades y trastornos en
los que puede existir un bajo nmero de plaquetas (trombocitopenia).
Las causas normalmente se agrupan en alguna de las siguientes dos
categoras: Trastornos en los que la mdula sea no es capaz de
producir una cantidad suficiente de plaquetas Situaciones en las
que las plaquetas se consumen o se destruyen ms rpidamente de lo
normalAlgunos ejemplos de trombocitopenia incluyen: Trombocitopenia
idioptica, debida a la presencia de un anticuerpo dirigido contra
las plaquetas; es una de las formas ms frecuentes de
trombocitopenia, en ausencia de otras enfermedades Infecciones
vricas como mononucleosis,hepatitis,infeccinporVIHo sarampin
Atribuible a frmacos como acetaminofeno, quinidina,
sulfamidas,digoxina,vancomicina, diacepam o nitroglicerina (entre
otros) Trombocitopenia inducida por heparina (TIH), que se
manifiesta cuando personas a las que se les administra o se les ha
administrado heparina, desarrollan un tipo de anticuerpo (si desea
ms informacin acceda a esteenlace) Leucemia,linfomau otros cnceres
que se hayan propagado (metastatizado) a la mdula sea - las
personas con cncer suelen experimentar sangrados excesivos
atribuibles a un nmero disminuido de plaquetas. A medida que la
cantidad de clulas cancerosas en la mdula sea aumenta, las clulas
normales quedan desplazadas, y por lo tanto, quedan menos clulas
productoras de plaquetas Anemiaaplsica - la produccin de clulas
sanguneas est disminuida de manera significativa Problemas de
sangrado de larga evolucin, por ejemplo sangrados crnicos por
lceras gastroduodenales (estmago yduodeno) Sepsis, especialmente
por infecciones causadas porbacteriasgram-negativas Cirrosis
Trastornos autoinmunes comolupus, en los que el sistemainmunedel
organismo fabrica anticuerpos que atacan a rganos y tejidos propios
y en los que tambin aumenta la destruccin de plaquetas
Quimioterapia o radioterapia, que repercuten sobre la mdula sea En
ciertas enfermedades puede asistirse a un consumo aumentado de
plaquetas. Por ejemplo, en lacoagulacin intravascular
diseminada(CID), la prpura trombocitopnica y el sndrome
hemoltico-urmico (SHU) el nmero de plaquetas circulantes en sangre
puede estar disminuidoSi el nmero de plaquetas es inferior a 20.000
por microlitro, pueden aparecer sangrados espontneos con el
subsiguiente riesgo para la vida del individuo. En los casos
graves, el nmero de plaquetas se hace aumentar con transfusiones de
sangre (si desea ms informacin, acceda a esteenlace).Cuando el
nmero de plaquetas est aumentado se habla de trombocitosis y suele
ser consecuencia de algn trastorno subyacente; por este motivo
recibe el nombre de trombocitosis secundaria o reactiva: Cncer, ms
frecuentemente de tipo gastrointestinal, de ovario, de mama o un
linfoma Anemia, especialmente la anemia por dficit de hierro o la
anemia hemoltica Trastornos inflamatorios como laenfermedad
inflamatoria intestinalo laartritisreumatoide Enfermedades
infecciosas comotuberculosis En personas a las que se les ha
extirpado el bazo Toma de contraconceptivos oralesEn algunas
ocasiones, la trombocitosis puede ser transitoria, por ejemplo:
Fase de recuperacin despus de sangrados graves, como en caso de
traumatismos o ciruga mayor Despus de un ejercicio fsico extenuante
Despus de un consumo abusivo de alcohol o en dficits de folato
yvitaminaB12Ms raramente, una trombocitosis puede deberse a un
trastorno de la mdula sea, como en la trombocitemia primaria o
esencial; ste es un trastorno mieloproliferativo en el que la mdula
sea produce un nmero exagerado de plaquetas. No suelen existir
signos ni sntomas de la enfermedad de manera que la alteracin se
detecta al realizar un control mdico por alguna otra causa. Las
personas con esta enfermedad presentan mayor riesgo de formar
cogulos (trombosis) debido al exceso de plaquetas, aunque tambin
pueden tener problemas de sangrado ya que las plaquetas no
funcionan adecuadamente. Esta enfermedad se asocia a menudo a
unamutacinen elgenJAK2. En caso de sospecharse esta enfermedad, el
mdico seguramente solicitar el estudio del gen JAK2. Ms de la mitad
de individuos con trombocitemia esencial presenta la mutacin JAK2.
Las personas con otrostrastornos mieloproliferativoso
mielodisplsicos, como leucemia mieloide crnica,policitemiavera o
algunas otras formas de sndromes mielodisplsicos tambin pueden
tener un elevado nmero de plaquetas.Normalmente, el nmero de
plaquetas enadultososcila entre 150.000 y 450.000 por microlitro de
sangre.[Volver]Hay algo ms que debera saber?Vivir en grandes
altitudes puede causar un aumento en el nmero de plaquetas en la
sangre. El nmero de plaquetas tambin puede aumentar tras un
ejercicio fsico extenuante y despus del parto. Entre los frmacos
que pueden hacer aumentar el nmero de plaquetas se incluyen
losestrgenosy los contraceptivos orales.Puede observarse una
disminucin leve del nmero de plaquetas en las mujeres antes de la
menstruacin, y hasta un 5% de mujeres embarazadas presenta un nmero
de plaquetas disminuido en el momento de dar a luz.Algunas
enfermedadeshereditariascausadas por alteraciones genticas de las
plaquetas incluyen la tromboastenia de Glanzmann, la enfermedad de
Bernard-Soulier y los sndromes de Chediak-Higashi, de Wiskott-
Aldrich, de May-Hegglin y elsndrome de Down. Sin embargo la
incidencia de estas enfermedades es relativamente poco frecuente.En
algunas personas, las plaquetas quedan acantonadas o almacenadas en
su bazo de manera que el nmero de plaquetas en sangre est
disminuido, aunque normalmente los individuos no manifiestan signos
ni sntomas asociados a esta peculiaridad.[Volver]References to
Laboratory TestPreguntas comunes1. Existen signos o sntomas que
indiquen aumento o disminucin del nmero de plaquetas a los que se
deba atender?2. En el informe de resultados constan datos como VPM
(volumen plaquetar medio) y PDW (anchura de distribucin de las
plaquetas). Qu significan estos trminos?3. En el informe de
resutados consta "plaquetas gigantes". Qu significa?4. Qu otras
pruebas deben realizarse si el nmero de plaquetas es anmalo?1.
Existen signos o sntomas que indiquen aumento o disminucin del
nmero de plaquetas a los que se deba atender?La aparicin de
hematomas sin causa aparente, las hemorragias nasales, de la boca o
del recto sin una lesin evidente, perodos menstruales excesivos o
demasiado prolongados o la incapacidad de detener la hemorragia de
un pequeo corte o herida pueden indicar una deficiencia de
plaquetas.[Volver]2. En el informe de resultados constan datos como
VPM (volumen plaquetar medio) y PDW (anchura de distribucin de las
plaquetas). Qu significan estos trminos?El VPM y la PDW son clculos
realizados por analizadores automticos. El VPM refleja el tamao
promedio de las plaquetas en la muestra analizada mientras que la
PDW indica el grado de uniformidad en el tamao de las plaquetas.
Estos datos pueden proporcionar informacin adicional al mdico
acerca de la causa de un nmero aumentado o disminuido de plaquetas.
Cuanto ms jvenes son las plaquetas, ms pronto se habrn liberado
desde lamdula seay mayor suele ser su tamao. Las plaquetas pequeas
suelen ser ms viejas y ya llevan unos das en la circulacin.Si
existe un elevado nmero de plaquetas grandes (VPM elevado) en una
persona con un nmero total de plaquetas disminuido, puede ser que
la mdula sea est produciendo plaquetas y liberndolas a la
circulacin rpidamente. Un VPM bajo en personas con un nmero
disminuido de plaquetas puede reflejar un trastorno de produccin de
las mismas en la mdula sea. Si la PDW es normal las plaquetas son
homogneas en cuanto a tamao, mientras que una PDW elevada indica
que el tamao de las plaquetas es muy variable, indicio de que puede
existir un trastorno plaquetar.A menudo unos resultados alterados
se completan con otros estudios adicionales. En algunas situaciones
las plaquetas pueden agruparse de manera que parece que existan
menos y que sean de mayor tamao. Por este motivo, puede estar
indicado realizar unaextensin de sangrepara examinarlas al
microscopio.[Volver]3. En el informe de resutados consta "plaquetas
gigantes". Qu significa?Se habla de "plaquetas gigantes" para
describir plaquetas aumentadas de tamao, por ejemplo, del mismo
tamao que un hemate. Estas plaquetas pueden verse en algunos
trastornos como en la prpura trombocitopnicainmuneo en un raro
trastornohereditariocomo el sndrome de Bernard-Soulier. No
obstante, como se ha comentado en el punto anterior, la evaluacin
directa de una extensin de sangre al microscopio permite saber si
las plaquetas son realmente gigantes o si se han agrupado. Si se
observan agrupaciones de plaquetas, est indicado repetir la prueba
empleando un tipo de tubo con unanticoagulantedistinto al utilizado
previamente y que obvie o minimice los fenmenos de agrupacin
plaquetar.[Volver]4. Qu otras pruebas deben realizarse si el nmero
de plaquetas es anmalo?Si la causa no est clara y no puede
determinarse por los datos de la historia clnica y la exploracin
fsica, es posible que el mdico solicite alguna de las siguientes
pruebas (adems delhemogramay de la extensin de sangre): Pruebas
asociadas a trastornos inflamatorios comoprotena C
reactiva,velocidad de sedimentacin globular(VSG) o anticuerpos
especficos frente a plaquetas Pruebas asociadas a enfermedades
infecciosas bacterianas o vricas Pruebas asociadas a trastornos de
la coagulacin como tiempo de protrombina (TP), tiempo de
tromboplastina parcial (TTP),fibringeno Pruebas para detectar
enfermedad renal Estudios relacionados con elmetabolismodel hierro
o niveles devitaminaB12 y folato Pruebas para detectar enfermedad
heptica A veces,biopsiade mdula seaAprendiendo de los errores:
fenmeno EDTA
Learning from errors: EDTA phenomenon
C Sarasa Bosque a, C Arruga Mombiela b, S Denizon Arranz b
a Mdico Interno Residente. Unidad Docente de Medicina Familiar y
Comunitaria. Sector Zaragoza II. Zaragoza. Espaa.b Mdico de
Familia. Tutor de Residentes del Centro de Salud Actur Sur.
Zaragoza. Espaa.Artculo
Sr. Director: La pseudotrombocitopenia inducida por EDTA (cido
etilendiamino tetraactico) es un fenmeno de aglutinacin in vitro de
las plaquetas. Esta aglutinacin es mediada por autoanticuerpos que
reconocen antgenos de las plaquetas modificados por el EDTA1.
El fenmeno se ha descrito tanto en pacientes enfermos como en
poblacin sana, y su prevalencia vara, segn las series, desde el
0,1% hasta el 0,29%1.
El diagnstico se debe sospechar ante la ausencia de clnica
hemorrgica y de alteraciones en la hemostasia primaria, siendo la
confirmacin mediante el estudio de extensin de sangre perifrica. En
la extensin se observan agregados de plaquetas generalmente de
menos de 35 fl1.
La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA es un fenmeno
causado por anticuerpos IgG antiplaqueta EDTA dependientes. Estos
anticuerpos inducen la aglutinacin in vitro de los trombocitos,
dando como resultado una dramtica disminucin de los recuentos
plaquetarios.
De las distintas causas de pseudotrombocitopenia, la inducida
por EDTA es la ms frecuente. La pseudotrombocitopenia por EDTA se
ha descrito asociada a enfermedades como la mononucleosis
infecciosa, enfermedad por crioaglutininas, cirrosis heptica,
sepsis, y a la administracin de frmacos de uso extendido2,8: cido
valproico, anticoagulantes orales, antibiticos (ceftriaxona,
levofloxacino), olanzapina, abciximab, etc.
Consideramos que es interesante tener en cuenta este fenmeno en
pacientes que presentan trombocitopenia sin clnica; podremos evitar
diagnsticos errneos y la realizacin de pruebas complementarias y
tratamientos innecesarios que iran en detrimento del paciente.
Caso clnico
Paciente varn de 24 aos, visto en consulta en junio por un
cuadro febril de 4 das de evolucin, compatible con parotiditis
vrica epidmica, que fue confirmada serolgicamente durante el
seguimiento.
Entre los antecedentes personales destacaban: buen estado
vacunal, migraas con aura en tratamiento intermitente con
zolmitriptn, aftas orales frecuentes y epistaxis ocasionales. No
refera intervenciones quirrgicas, otras enfermedades mdicas, ni
alergias medicamentosas conocidas.
En un hemograma de control durante la parotiditis se observ por
vez primera trombocitopenia (38.000 plaquetas/ l), que fue
atribuida a infeccin vrica. Sin embargo el paciente aport un
hemograma realizado en febrero del mismo ao, en el cual presentaba
trombocitopenia de 52.000 plaquetas/ l. Fue remitido a Urgencias
del hospital de referencia para valoracin por Hematologa,
atribuyndose tambin all el cuadro a infeccin vrica; al estar el
paciente asintomtico, fue dado de alta para seguimiento en Atencin
Primaria. No disponemos de controles posteriores de plaquetas.
En noviembre del mismo ao nuestro paciente acudi a la consulta
por presentar un episodio de hematuria de aparicin sbita durante
toda la miccin, sin cogulos hemticos, clnica miccional, ni dolor en
fosas lumbares. No refera traumatismos previos, ni toma de frmacos.
Los episodios se repitieron durante una semana, por lo que el
paciente fue remitido a Urgencias, donde se observ en tira reactiva
de orina: proteinuria ++ y sangre 4+. La coagulacin fue normal. Las
plaquetas mostraron de nuevo valores bajos (12.600 plaquetas/
l).
Ante la observacin de trombopenia y los antecedentes del
paciente, el hematlogo consider repetir un nuevo hemograma con tubo
de citrato, siendo el resultado de 201.000 plaquetas/ l, lo que
permiti diagnosticar un fenmeno de pseudotrombocitopenia por
EDTA.
Durante la estancia del paciente en Urgencias no se repiti la
hematuria y, dado su buen estado general, fue remitido a consulta
externa de Urologa para estudio.
Un mes ms tarde el paciente fue diagnosticado por cistografa de
proceso ocupante de espacio en vejiga, sugestivo de papiloma.
En el hemograma preoperatorio con tubos de citrato las cifras de
plaquetas resultaron estrictamente normales.
La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA fue descrita en
1969 por Gowland como una falsa trombocitopenia en
autoanalizadores, debida a la formacin de agregados plaquetarios,
siendo ms frecuente en sangre anticoagulada con EDTA.
Al realizar el recuento en una extensin de sangre tras puncin o
en tubos en los que se utilizan otros anticoagulantes, el nmero de
plaquetas es normal.
Se sospecha que la causa de este fenmeno est en relacin con la
presencia de anticuerpos antiplaquetarios de tipo IgG, IgM e IgA.
La diana de estos anticuerpos seran antgenos de superficie
plaquetaria, ms especficamente la glucoprotena IIb/IIIa (receptor
plaquetario para el fibringeno). El EDTA modificara la estructura
bsica de estos antgenos, permitiendo la unin
antgeno-anticuerpo.
La aglutinacin plaquetaria est condicionada por la variable
tiempo, es decir, la falsa disminucin del recuento, una vez hecha
la mezcla sangre-EDTA, es mayor al dejar reposar el tubo. Tambin se
ve condicionada por la temperatura entre 4 y 20 C.
Es necesario para los mdicos clnicos considerar siempre la
posible presencia de este fenmeno ante casos de pacientes que
presentan cifras recurrentemente bajas de plaquetas, sin ninguna
ditesis hemorrgica objetivable, ya que no solo genera un importante
malestar en el paciente y sus familiares, sino que puede llevar a
acciones iatrognicas: existen casos en la literatura de pacientes
que presentando este fenmeno, han recibido transfusiones urgentes
de plaquetas e incluso han sido esplenectomizados.
El diagnstico diferencial se realiza mediante la repeticin del
hemograma, especificando la sustitucin del habitual tubo para
hemograma con EDTA por un tubo de citrato.Pseudotrombocitopenia
dependiente de EDTA1) La descarga del recurso depende de la pgina
de origen2) Para poder descargar el recurso, es necesario ser
usuarioregistrado en Universia
Descargar recursoDetalles del recursoPertenece a:BOLETN DE
PEDIATRADescripcin: Resumen Introduccin. La pseudotrombocitopenia
dependiente del cido etilendiamino tetraactico (EDTA) es el
hallazgo de un recuento bajo de plaquetas en muestras
anticoaguladas con EDTA y procesadas en autoanalizadores, por la
formacin de agregados plaquetarios in vitro. Poco frecuente en
poblacin peditrica. Es importante su identificacin ya que carece de
significacin patolgica y se evitarn procedimientos diagnsticos y
teraputicos innecesarios. Caso clnico. Nia de 13 aos remitida a
nuestro Hospital por trombocitopenia sin clnica hemorrgica.
Recuento inicial de plaquetas 77x109/L. En la extensin de sangre
perifrica se hallaron gran cantidad de agregados plaquetarios. El
recuento de plaquetas en sangre citratada fue normal confirmndose
el diagnstico de pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA.
Discusin. La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA se produce
por la formacin de agregados plaquetarios en presencia de
anticuerpos IgG, IgM e IgA, que actan sobre el antgeno de
superficie plaquetar GpIIb/IIIa tras sufrir este un cambio en su
conformacin en presencia de EDTA, quedando expuesto un
?neoantgeno?.
PSEUDOTROMBOCITOPENIA EDTA-DEPENDIENTE: ROL DEL LABORATORIO
CLNICO EN LA DETECCIN Y EL CORRECTO CONTAJE PLAQUETARIOM Morales1,
A Moreno2, M Meja2e Y Bustamante2.1 Servicio de Bioanlisis del
Hospital Jos G. Hernndez I.V.S.S.2 Escuela de Bioanlisis
UCVRESUMENLa pseudotrombocitopenia EDTA dependiente (PTCP-EDTA) es
definida como una falsa disminucin del contaje plaquetario producto
de un artefacto de laboratorio, que ocurre cuando en muestras
sanguneas extradas con EDTA y procesadas en un autoanalizador
hematolgico se produce una agregacin plaquetaria progresiva en el
tiempo por efecto de la accin de anticuerpos fros. La falta de
reconocimiento de ste fenmeno se traduce en diagnsticos errados,
realizacin de exmenes adicionales y terapias inadecuadas. En este
trabajo se estudian casos de PTCP-EDTA en pacientes que asistieron
al Servicio de Bioanlisis del Hospital Jos Gregorio Hernndez del
I.V.S.S., durante el periodo del 01/01/99 al 31/07/00 proponindose
diversas alternativas para correctos contajes de plaquetas en las
muestras en que se observ este fenmeno. Sangre de cinco pacientes
fue tratada con diversos anticoagulantes (EDTA, citrato y oxalato)
y se conservaron a temperatura ambiente (T.A.) y 37C, en tres de
ellos se tomaron muestras adicionales en EDTA para suplementarla
con Kanamicina a fin de observar los efectos de este antibitico
sobre los parmetros hematolgicos. De un total de 25.390 hematologas
procesadas se detectaron 9 casos de PTCP-EDTA (incidencia 0,04%).
CONCLUSIONES: el citrato no es el anticoagulante recomendado para
el correcto contaje plaquetario en estos pacientes; una buena
alternativa pudiese ser la incubacin inmediata de la muestra, a
37C, despus de ser extrada. La pre-suplementacin con Kanamicina, de
muestras extradas con EDTA se presenta como mtodo ideal para el
correcto contaje automatizado de plaquetas en casos de PTCP-EDTA
conocida, debido a que evita la agregacin plaquetaria sin afectar
otros parmetros hematolgicos, de igual modo el realizar contajes
manuales (Unopette), es una buena alternativa para llevar a cabo un
correcto contaje de plaquetas en estos pacientes.Palabras
Claves:Plaquetas, Trombocitopenia, Pseudotrombocitopenia,
EDTA.ABSTRACTPseudothrombocytopenia is defined as a low platelet
count resulting from a laboratory artifact to occur in specimens
extract with EDTA and perform in automated cell-count cause
progress platelet clumping in the time for effect of platelet cold
agglutinins. If you dont recognize the phenomenon may lead to
erroneous diagnosis, unnecessary and costly additional laboratory
examinations, and inappropriate medical o surgical therapy. This
study marks pseudothrombocytopenia EDTA-induced (PTCP-EDTA) in
patients of Bioanlisis Service of "Dr. Jos Gregorio Hernndez"
Hospital-IVSS (Venezuelan Institute of Social Security), in the
period of 01-01-99 to 31-07-00 propose variety alternative for
correct platelet count in specimens with this phenomenon. The blood
of five patients was treaty with differents anticoagulants (EDTA,
citrate, oxalate) and keep a room temperature and 37C.The
methodology studioused was extract an additional sample with EDTA
for supplementary with kanamicin in three of those five patients,
to analyze the effect of kanamicin about hematology parameters.
Through 25.390 hematology performs was detect nine cases of
PTCP-EDTA. Conclusion: The citrate isnt the anticoagulant recommend
for correct platelet count in this patients; other alternative can
be keep the specimens to 37C, right after collect. The
supplementary kanamicin in the collect blood sample in EDTA is the
ideal method for correct platelet count in automated cell-count in
cases of previous diagnostic PTCP-EDTA. Because avoid platelet
clumps and it doesnt show changes hematology parameter. Another
method is collect a finger-stick blood by using an ammonium oxalate
Unopette and to count the blood cells by phase microscopy.Key
Words:Platelet, Pseudothrombocytopenia, Thrombocytopenia,
EDTA.__________________INTRODUCCINLa pseudotrombocitopenia es
definida como una falsa disminucin en el contaje plaquetario
producto de un artefacto de laboratorio(1). Entre los factores que
pueden ocasionarla se han descrito: coagulacin parcial de la
muestra(1-5), fallas en la tcnica de extraccin(1-5), satelitismo
plaquetario(6-12), presencia de plaquetas gigantes(1-5)y la
existencia de anticuerpos antiplaquetarios en presencia de
anticoagulantes(1-5,9,13-20). Las Pseudotrombocitopenias
representan aproximadamente el 49% de las trombocitopenias que se
presentan en muestras analizadas en autoanalizadores hematolgicos.
De ellas, el 72% es debido a la agregacin por cido
Etilen-diamino-tetra-actico (EDTA)(5), que es el anticoagulante
recomendado por la International Council for Standardization in
Haematology (ICSH) para la realizacin de
hematologas(21).Inicialmente el fenmeno fue reconocido por Gowland
et al. en 1969(13)y Watkins y Shulman en 1970(14), quienes
describieron un factor en el suero que provocaba aglutinacin de las
plaquetas in vitro, en presencia de EDTA y a temperaturas menores
de 37C. La formacin de estos agregados es dependiente del tiempo
por lo que una progresiva reduccin del contaje plaquetario puede
ser observado al procesar las muestras en distintos momentos.La
presencia de pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente (PTCP-EDTA), no
se ha relacionado con alteraciones en la morfologa y funcin
plaquetaria(1,13). Se ha llegado a afirmar que este fenmeno no est
asociado a enfermedades autoinmunes ni hemorrgicas. No existiendo
correlacin alguna entre la pseudotrombocitopenia EDTA dependiente,
el estado salud-enfermedad y la edad(4,5,19,22); curiosamente la
pseudotrombocitopenia EDTA dependiente prevalece en las mujeres con
un 65%.La deteccin de este fenmeno es sumamente importante ya que
la falta de reconocimiento de este falso contaje plaquetario puede
provocar la realizacin de costosos exmenes adicionales, diagnsticos
errados y largas terapias con corticoesteroides, suspensin de
tratamientos e incluso un cambio de vida del paciente por temor al
sangrado; por todo esto es importante que exista una buena
comunicacin entre el clnico y el personal del laboratorio para que,
en casos de trombocitopenias, sean descartadas y/o detectadas las
pseudotrombocitopenias y dentro de stas las debidas a EDTA.Hasta
ahora no est totalmente dilucidado el mecanismo por el cual se
forman los agregados plaquetarios en presencia de EDTA. Diversos
estudios demuestran que los anticuerpos en pacientes
pseudotrombocitopnicos reconocen un determinante antignico en la
GPIIb de la membrana plaquetaria lo cual es una expresin
estrictamente dependiente de la presencia de anticoagulantes
quelantes de Ca2+. Otro estudio plantea la posibilidad que la unin
anticuerpo-GPIIb provoca la activacin y posterior agregacin
plaquetaria(23).Sakurai et al.(24)en 1997, propusieron dos nuevas
hiptesis para explicar la agregacin plaquetaria inducida por EDTA.
Ellos observaron que los pacientes que exhiban un contaje normal de
plaquetas en la admisin y que luego desarrollaban
pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente haban recibido tratamiento
con antibiticos de 4 a 10 das antes de la deteccin de
pseudotrombocitopenia. Por lo que su hiptesis primaria fue que los
anticuerpos antiplaquetario de los pacientes pseudotrombocitopnicos
en un principio eran originados contra los antibiticos con los
cuales ellos haban sido tratados, sin embargo, en este mismo
estudio se observ que no haba una relacin especfica entre los
antibiticos usados para el tratamiento del paciente y aquellos que
fueron demostrados como efectivos en la prevencin de la agregacin
plaquetaria, sugiriendo que esta hiptesis es improbable. Una
explicacin alternativa sera que la adicin de EDTA previene la
agregacin en pacientes normales por un incremento de la carga de la
superficie plaquetaria; los anticuerpos antiplaquetarios que
inducen PTCP-EDTA dependiente pudiesen entonces disminuir la carga
de superficie de las plaquetas y antagonizar los efectos
anticoagulantes del EDTA, explicando la agregacin.MATERIALES Y
MTODOSDel total de hematologas procesadas en el laboratorio del
Hospital "Dr. Jos Gregorio Hernndez" del Seguro Social de Caracas,
durante el perodo comprendido entre el 01 de enero de 1999 y el 31
de julio de 2000, se reestudiaron aquellos pacientes a quienes se
les haba reportado un contaje bajo de plaquetas y en cuyos
extendidos sanguneos mostraban agregados plaquetarios; as como
aquellos que en dos o ms hematologas se les haban reportado
contajes plaquetarios discordantes.En total se evaluaron cinco (05)
pacientes en los que se presuma la existencia de PTCP-EDTA
dependiente.COMPORTAMIENTO DEL CONTAJE PLAQUETARIO CON DIVERSOS
ANTICOAGULANTES Y A DIFERENTES TEMPERATURASSe recolectaron las
muestras en cuatro (4) tubos al vaco (Vacutainer Systems Becton
Dickinson), dos de los tubos contenan 0.057ml de EDTA-K3 al 15%
para un volumen total de 5ml, uno se incub a 37C durante todo el
ensayo yel otro se mantuvo a temperatura ambiente, un tercer tubo
con 0.3ml de citrato de sodio dihidratado al 3.8% para un volumen
total de 3ml se dej a temperatura ambiente y de un cuarto tubo sin
aditivo se obtuvo suero para la realizacin de pruebas bioqumicas.A
cada uno de los pacientes se les tom muestra capilar para el
contaje manual por el mtodo de Brecher-Cronkite utilizando
Unopette; este contaje se llev a cabo por triplicado(25).Cada
muestra fue mezclada veinte (20) veces por inversin completa manual
y/o en un mezclador de muestras (Coulter Electronic INC Hialeah
Florida) antes de ser procesada e inmediatamente se elabor su
respectivo frotis por duplicado, estos frotis sanguneos fueron
teidos con colorantes tipo Romanoswky(Giemsa y Wright).Cada 5
minutos, durante una hora se procesaron las muestras en un contador
electrnico automatizado Coulter T-890 (Coulter Electronic INC
Hialeah Florida), en la siguiente secuencia:1. Muestra
anticoagulada con EDTA-K3 conservada a temperatura ambiente.2.
Muestra anticoagulada con EDTA-K3 conservada a 37C.3. Muestra
anticoagulada con Citrato de Sodio 3,8% conservada a temperatura
ambiente.En los datos de la muestra citratada se realiz una
correccin por la dilucin.Para el anlisis de los datos: el contaje
de plaquetas y leucocitos se utiliz el programa Excel del Office
98.EFECTO DE LA SUPLEMENTACIN DEL EDTA CON KANAMICINA EN LOS
PARMETROS HEMATOLGICOS(suplementacin inmediatamente despus de
extrada la muestra)En tres de los cinco pacientes evaluados (3, 4 y
5) se tom una muestra adicional con EDTA-K3 al que se le agreg
inmediatamente kanamicina. Estas muestras se mantuvieron a
temperatura ambiente y se procesaron paralelamente con las muestras
anteriormente sealadas.RESULTADOSDe un total de 25.390 hematologas
procesadas se detectaron nueve casos (09) de PTCP-EDTA dependiente,
siendo la incidencia observada de 0,04%.De los nueve casos
reconocidos en ms de ao y medio todos fueron del sexo femenino,
ocho (08) pacientes ambulatorios y uno (01) se encontraba
hospitalizado. De los casos hallados en este perodo, slo cinco (05)
aprobaron participar en este protocolo con edades comprendidas
entre 14 y 63 aos (media 43 aos).El comportamiento del contaje de
plaquetas y leucocitos, con diversos anticoagulantes y a diferentes
temperaturas en uno de los pacientes se observa en laGrfica 1.El
efecto de la suplementacin del EDTA con kanamicina sobre los
parmetros hematolgicos se muestra en laTabla 1.
Grfica 1:Contaje de plaquetas con diversos anticoagulantes y a
diferentes temperaturasTabla 1: Variaciones de los parmetros
hematolgicos en 3 pacientes del Hosp. JGH, con PTCT-EDTA
dependiente en EDTA a diferentes temperaturas y suplementado con
kanamicina. Agosto 2000.ParmetroEDTA a Temperatura ambienteEDTA a
37CEDTA + Kanamicina
Media*2DS%Coeficiente de VariacinMedia*2DS%Coeficiente de
VariacinMedia*2DS%Coeficiente de Variacin
Glbulos Blancos x109/l
Paciente 310.71.04.99.80.21.29.80.21.3
Paciente 49.51.05.88.80.21.58.70.21.4
Paciente 58.41.010.36.92.12.16.00.21.9
Coulter T-890(4.0-11.5)x109/LCoeficiente de Variacin = menor o
igual al 2%
Glbulos
Rojos x109/L
Paciente 34.490.040.504.470.040.504.390.060.60
Paciente 44.800.040.504.800.060.704.700.080.80
Paciente 54.600.060.704.600.060.704.500.040.50
Coulter T-890(3.00-6.00)x109/LCoeficiente de Variacin = menor o
igual al 1.5%
Hemoglobina (Gr/Dl)
Paciente 311.40.20.711.40.20.711.10.20.6
Paciente 414.60.20.914.60.20.514.50.20.8
Paciente 514.50.20.714.40.20.714.40.20.7
Coulter T-890(12.0-18.0)Gr/DlCoeficiente de Variacin = menor o
igual al 0.8%
Hematocrito (%)
Paciente 336.60.40.736.60.60.936.00.81.1
Paciente 445.10.80.845.11.01.244.71.01.2
Paciente 544.20.40.544.00.80.943.60.60.8
Coulter T-890(24.0-70.0)%Coeficiente de Variacin = menor o igual
al 1%
Vcm (fL)
Paciente 381.71.00.681.81.20.782.01.60.9
Paciente 494.00.80.594.51.60.894.61.60.8
Paciente 595.61.20.695.51.00.596.41.40.7
Coulter T-890(80.0-100.0)fLCoeficiente de Variacin = menor o
igual al 1%
DISCUSINLa incidencia de PTCP-EDTA dependiente en este centro
asistencial para el lapso comprendido entre 01-01-99 al 31-07-00
fue de 0,04%. Estos resultados estn por debajo de los reportados en
la literatura mundial que van desde 0.07%(3)hasta 1.9%(1). Se
infiere que la causa de esta diferencia puede ser debido a
variaciones propias de la poblacin venezolana, ya que no conocemos
incidencias de este fenmeno en la comunidad latina; o que se est
presentando un subregistro de casos en este servicio.Todos los
pacientes a quienes se le detect pseudotrombocitopenia
EDTA-dependiente en el presente estudio fueron del sexo femenino,
hecho que se corresponde con lo descrito en la literatura(3, 5,19,
26). En ninguno de los casos, el motivo de consulta se relacion con
el desarrollo de este fenmeno. El total de los pacientes no
presentaron patologas que se pudiesen asociar con trombocitopenias
verdaderas (a excepcin de dos (02) casos de sndrome viral), la
mayora de stos asistieron al laboratorio para exmenes de control o
de rutina y slo uno estaba hospitalizado; encontrndose una mayor
prevalencia en pacientes aparentemente sanos. La edad de los
pacientes estuvo en un rango amplio de 14 a 63 aos, la ausencia de
infantes en el presente estudio se explica por el hecho de que en
este centro asistencial, se atienden en su mayora pacientes de edad
avanzada y con enfermedades crnicas.Las muestras analizadas
presentaron un contaje inicial de plaquetas dentro del rango de
referencia normal (232-336)x109/l(27). En estos pacientes se observ
una disminucin progresiva en el contaje de plaquetas de las
muestras tomadas con EDTA y mantenidas a temperatura ambiente,
llegando a ser sta hasta un 91% ms baja que el contaje inicial, a
los sesenta (60) minutos despus de extrada la muestra. A pesar de
que la disminucin fue homognea (77%-91%), la intensidad del
decrecimiento a travs del tiempo fue diferente en cada uno de los
pacientes. Paralelo a la disminucin del contaje plaquetario, se
observ un aumento en el nmero de glbulos blancos registrados por el
equipo, llegando a ser este incremento hasta un 130% del contaje
inicial.La observacin microscpica de los extendidos sanguneos de
estos pacientes mostraron la existencia de cmulos plaquetarios que
iban aumentando en nmero y tamao gradualmente en el tiempo,(Figura
1). La formacin de estos cmulos explicara la disminucin progresiva
del contaje plaquetario y el aumento paralelo del contaje
leucocitario, ya que los mismos al llegar a tener un volumen mayor
de 20fl no son detectados por el autoanalizador como plaquetas,
sino que son registrados como leucocitos debido a su similitud con
estos ltimos,(Figura 2). Estos resultados son compatibles con el
diagnstico de PTCP-EDTA dependiente.
Figura 1:Agragados plaquetarios observados en muestra extrada a
los 30 minutos y mantenidas a temperatura ambiente (100x).
Figura 2:Extendido sanguneo de muestra extrada con EDTA y
mantenida a temperatura ambiente donde se compara el tamao de los
agregados plaquetarios con el de un polimorfonuclear (100x).Los
resultados obtenidos en muestras anticoaguladas con citrato
exhibieron un fenmeno similar al observado en las muestras
anticoaguladas con EDTA y mantenidas a temperatura ambiente, aunque
la disminucin del contaje plaquetario se hace menos acentuada a
travs del tiempo. Llama la atencin que en diversos
reportes(1,3,15,20,28,29,30,31,32)se ha recomendado el uso del
citrato como alternativa para confirmar la existencia de PTCP-EDTA
dependiente e incluso lo sealan como el anticoagulante a utilizar
para la realizacin del contaje plaquetario automatizado en
pacientes que presentan este fenmeno.No es recomendable el uso del
citrato para confirmar el diagnstico de PTCP-EDTA dependiente, as
como tampoco el anticoagulante alternativo para el contaje de
plaquetas en estos casos, debido a que en todos los pacientes el
contaje fue disminuyendo en distintas proporciones y el coeficiente
de variacin de dichos contajes estuvo en un rango de 14% al 49%, lo
que resulta poco confiable para el uso en el laboratorio clnico de
rutina. A diferencia de los contajes plaquetarios realizados bajo
las condiciones antes descrita (EDTA y citrato mantenidas a
temperatura ambiente), en los contajes plaquetarios de las muestras
extradas con EDTA y conservadas a 37C se obtuvieron coeficientes de
variacin con un rango de 1.7% al 8.8%, aunque ste es mucho menor
que los obtenidos en EDTA y citrato mantenidas a temperatura
ambiente, la mayora de los valores no estuvieron dentro del rango
establecido por el fabricante del equipo (3%), solo dos (02)
pacientes mostraron coeficiente de variacin aceptable. Estos
resultados indican que el mecanismo por el cual se forman los
agregados debe estar relacionado con un tipo de anticuerpo que
reacciona a temperaturas menores de 37C.; debido a que en la mayora
de los laboratorios clnicos de rutina cuentan con bao de Mara
pareciera prctico y de bajo costo la implementacin de este
protocolo para el correcto contaje de plaquetas, en pacientes a los
que se les ha reconocido previamente este fenmeno. Cabe destacar,
que en nuestros casos al igual que los reportados por Watkins(14)y
Sheiner(15)la agregacin plaquetaria no se reverti al ser incubada
la muestra a 37C.En los experimentos al suplementar inmediatamente
con Kanamicina, las muestras de tres (03) pacientes extradas con
EDTA, se observaron contajes plaquetarios que se mantuvieron
constantes durante los sesenta (60) minutos de la prueba,
correspondindose ste resultado con un bajo porcentaje de disminucin
entre los contajes iniciales y finales (rango: 0-4%) y un
coeficiente de variacin que se mantuvo entre el 2.2% y el 3.4%, lo
que refleja una precisin vlida como para que este protocolo sea
usado en el laboratorio clnico de rutina.Al realizar el contaje
manual de plaquetas por el mtodo de referencia de Brecher-Cronkite
encontramos valores entre 222-305 x109/l, observando un contaje
comparable entre stos y aquellos realizados por el autoanalizador a
las muestras suplementadas con Kanamicina (240-290 x 109/l), lo que
evidencia la exactitud del protocolo propuesto. Los autores piensan
que la suplementacin con este antibitico es efectiva no slo para
evitar la agregacin sino, que adems, permite realizar contajes
plaquetarios exactos y reproducibles a travs del tiempo en los
pacientes con PTCP-EDTA dependiente. De igual forma se analizaron
los posibles cambios que esta suplementacin pudiese ocasionar en el
resto de los parmetros hematolgicos (glbulos blancos, glbulos
rojos, hemoglobina, hematocrito y VCM), y observando que estos no
se alteran, podemos concluir que la suplementacin con Kanamicina,
sera el mtodo ideal para el correcto contaje automatizado de
plaquetas, sin alterar los otros parmetros hematolgicos, en
pacientes con PTCP-EDTA dependiente previamente diagnosticada.El
mecanismo por el cual este antibitico es capaz de prevenir los
cmulos plaquetarios es an desconocido, aunque Sakurai et
al.(24)proponen dos hiptesis que explicaran la accin de la
Kanamicina sobre los agregados.Como alternativa factible econmica y
sencilla, se propone el uso de la Kanamicina para el diagnstico
diferencial de la PTCP-EDTA dependiente. Sin embargo su uso no
excluye la posibilidad de que se contine obviando en algunos
pacientes este artefacto de laboratorio; queda de parte del
personal del laboratorio el reconocer a tiempo y aplicar las
alternativas que tenga a su alcance para elaborar un correcto
contaje plaquetario.En este estudio se propone un mtodo alternativo
para detectar la PTCP-EDTA dependiente y como realizar un correcto
contaje plaquetario en estos casos.PROTOCOLO PARA DETECTAR CASOS DE
PSEUDOTROMBOCITOPENIA EDTA DEPENDIENTEEn la rutina diaria del
laboratorio clnico, al observar contajes plaquetarios por debajo
del rango de referencia se debe revisar el extendido sanguneo, y si
ste no se corresponde con el nmero de plaquetas arrojadas por el
equipo y adems se observaron agregados plaquetarios, sugerimos
citar nuevamente al paciente, para extender el estudio y descartar
una PTCP-EDTA dependiente.ProcedimientoTomar tres muestras de
sangre venosa con anticoagulante EDTA y mantener las siguientes
condiciones: El tubo N 1 dejar a temperatura ambiente. El tubo N 2
dejar a 37C. inmediatamente despus de extrada la muestra. El tubo N
3 se suplementar con Kanamicina (20 mg/ml de sangre) inmediatamente
despus de extrada la muestra.Analizar cada una de estas muestras en
el autoanalizador hematolgico, cada 10 minutos durante una
hora.Tomar muestra capilar para realizar contaje de referencia,
Unopette (Brecher-Cronkite).